Иудина татьяна Александровна клинико-морфологическая и иммуногистохимическая характеристика гипертрофии небных миндалин у детей icon

Иудина татьяна Александровна клинико-морфологическая и иммуногистохимическая характеристика гипертрофии небных миндалин у детей





Скачать 233.31 Kb.
НазваниеИудина татьяна Александровна клинико-морфологическая и иммуногистохимическая характеристика гипертрофии небных миндалин у детей
Дата03.03.2013
Размер233.31 Kb.
ТипАвтореферат диссертации
На правах рукописи


ИУДИНА

Татьяна Александровна


КЛИНИКО-МОРФОЛОГИЧЕСКАЯ

И ИММУНОГИСТОХИМИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА

ГИПЕРТРОФИИ НЕБНЫХ МИНДАЛИН У ДЕТЕЙ


14.03.02 – патологическая анатомия


Автореферат

диссертации на соискание ученой степени

кандидата медицинских наук


Санкт-Петербург

2012

Работа выполнена на кафедре патологической анатомии с курсом судебной медицины Государственного бюджетного образовательного учреждения высшего профессионального образования «Санкт-Петербургская государственная педиатрическая медицинская академия» Министерства здравоохранения и социального развития Российской федерации

^ Научный руководитель:

доктор медицинских наук, профессор Насыров Руслан Абдуллаевич


Официальные оппоненты:

доктор медицинских наук, профессор Хмельницкая Наталия Михайловна

доктор медицинских наук, профессор Кветной Игорь Моисеевич


^ Ведущее учреждение:

Государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования «Санкт-Петербургский государственный медицинский университет им. академика И.П. Павлова» Министерства здравоохранения и социального развития Российской Федерации.


Защита диссертации состоится 26 марта 2012 года в ________часов на заседании диссертационного Совета Д 215.002.02 ФГВОУ ВПО «Военно-медицинская академия им. С.М.Кирова» МО РФ по адресу: 194044, Санкт-Петербург, ул. Академика Лебедева, д.6.

С диссертацией можно ознакомиться в фундаментальной библиотеке ФГВОУ ВПО «Военно-медицинская академия им. С.М. Кирова» МО РФ

Автореферат разослан « » февраля 2012 г.


Ученый секретарь диссертационного совета

доктор медицинских наук, профессор

Чирский Вадим Семенович


^ ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность темы

Небные миндалины располагаются на входе в аэродигестивный тракт и являются составным элементом мукозального иммунитета, оказывая регулирующее влияние на развитие и функционирование системного иммунитета. Они отвечают за заселение носа, глотки и дыхательных путей иммунокомпетентными клетками и выступают основным продуцентом интерферона, а также регулятором интенсивности иммунного ответа и продукции необходимого количества sIgA (Быкова В.П., 1995; Хмельницкая Н.М., Власова В.В., Косенко В.А., 2000; Brandtzaeg P., 2003).

Гетерогенность структурной и функциональной организации обуславливает значительные трудности морфологической интерпретации, в частности гипертрофии небных миндалин. Гипертрофия небных миндалин обычно появляется в возрасте 2 – 5 лет и занимает одно из ведущих мест в структуре ЛОР-заболеваний детского возраста (Цветков Э.А., 2003; Джамалутдинов Ю.А., Саидов М.З., Амирова П.Ю., 2006). Ряд авторов считает, что гипертрофия небных миндалин у детей младшего возраста является проявлением защитных реакций организма ребенка в процессе формирования иммунитета в ответ на любое антигенное воздействие. Вышесказанное определяет актуальность разработки и использования новых подходов и методов оценки структурно-функционального состояния небных миндалин, прежде всего иммуногистохимического (ИГХ) исследования. Имеется большое число работ, которые значительно расширили представления о морфогенезе патологических процессов в лимфатическом глоточном кольце (Быкова В.II., 1996; Хмельницкая Н.М., Ланцов А.А., Тимофеева Г.И. , 2000; Van Kempen M.J., Rijkers G.T., Van Cauwenberge P.B., 2000; Nave H., Gebert A., Pabst R., 2001; Bourges D. и соавт.,  2004; Takahashi K. и соавт., 2006; Джамалутдинов Ю.А., Даудов Х.Ш., Саидов М.З., 2007). В то же время, работы, сочетающие данные морфологического и ИГХ исследования гипертрофии небных миндалин единичны. Несмотря на данные о причастности вирусов группы герпеса к развитию хронического тонзиллита и гипертрофии небных миндалин (Endo L.H., 2001; Sahin F. et al., 2007), представления о значимости вирусных инфекций в развитии патологии небных миндалин фрагментарны. Отсутствуют работы по исследованию локализации в ткани небных миндалин антигенов цитомегаловируса (ЦМВ), вирусов простого герпеса (ВПГ), вируса папилломы человека (ВПЧ) и вируса Эпштейн-Барр (ВЭБ). Не встретили данных по исследованию в различных отделах гипертрофированных небных миндалин экспресии Ig А и Ig Е.

Сказанное выше свидетельствует об актуальности проведения иммуноморфологического исследования небных миндалин при их гипертрофии.

^ Цель исследования

Изучение и сравнительная оценка гистологических, морфометрических и иммуногистохимических особенностей ткани небных миндалин при их гипертрофии у детей различных возрастных групп.

^ Задачи исследования:

  1. Исследовать характер гистологических изменений в различных компонентах небных миндалин при их гипертрофии.

  2. Провести морфометрическое исследование эпителия и лимфоидных фолликулов небных миндалин.

  3. Провести ИГХ исследование для выявления антигенов инфекционных агентов (вирусов простого герпеса 1 и 2 типов, папилломавируса, цитомегаловируса, вируса Эпштейн-Барр) в ткани миндалин.

  4. Исследовать экспрессию Ig А и Ig Е в структурах небных миндалин при их гипертрофии.

  5. Исследовать распределение Т- и В-лимфоцитов в различных отделах небных миндалин.

  6. Изучить взаимосвязь гистологических изменений и иммуногистохимических показателей в небных миндалинах при их гипертрофии у детей различного возраста.



Научная новизна исследования

Представлена сравнительная оценка данных гистологического, иммуногистохимического исследований ткани небных миндалин при их гипертрофии у детей различного возраста. Впервые установлена преобладающая локализация антигенов вирусов (ВПГ, ЦМВ, ВЭБ, ВПЧ) в эпителиальном пласте, а также выраженность экспрессии Ig А и Ig Е в различных структурах миндалин. Обнаружено увеличение количества Т-лимфоцитов в светлых центрах в гипертрофированных (гиперплазированных) небных миндалин у детей старшего возраста. Впервые морфометрически определено увеличение толщины эпителия и изменения размеров лимфоидных фолликулов небных миндалин при их гипертрофии. Отмечена определенная взаимосвязь гистологических изменений и иммуногистохимических данных в ткани небных миндалин у детей различного возраста.

^ Теоретическая и практическая значимость работы

Полученные результаты гистологического и иммуногистохимического исследований расширяют представления о морфо-патогенезе гипертрофии небных миндалин. Выявленный характер изменений с учетом гетерогенной структуры небных миндалин может представлять ценность для анализа морфологических изменений при их гипертрофии у детей различных возрастных групп. Новые данные о состоянии эпителиального слоя могут служить основой для разработки новых подходов этиопатогенетической терапии патологии небных миндалин.

^ Основные положения, выносимые на защиту

1. В небных миндалинах при их гипертрофии наблюдаются характерные структурные изменения, имеющие видимые отличия в различных возрастных группах детей.

2. Наиболее характерной локализацией антигенов вирусов простого герпеса и папилломы человека и доминирующей мишенью патогенного воздействия является эпителиальный слой небных миндалин.

3. Показаны определенные соотношения между изменением люминарного эпителия и выраженностью экспрессии вирусных антигенов в небных миндалинах детей младшей и средней возрастных групп.

4. Особенностями изменений в старшей возрастной группе являются уменьшение размеров фолликулов, расширение межфолликулярной зоны и увеличение размеров участков, занимаемых соединительной тканью.

^ Личное участие автора в проведении исследования

Автором проведен аналитический обзор зарубежной и отечественной литературы по изучаемой проблеме, разработан дизайн исследования, осуществлен анализ медицинской документации. Анализ данных историй болезни, морфологического и морфометрического исследований и обработка данных проводились с личным участием автора. Анализ, интерпретация, изложение полученных данных, формулирование выводов и практических рекомендаций выполнены автором самостоятельно. Автор принимал участие в подготовке отчетов по плановым темам научно-исследовательских работ.

^ Реализация работы и ее апробация

Результаты исследований и основные положения работы были опубликованы в 6 печатных работах, в том числе 2 – в журналах, рекомендуемых ВАК. Доложены на III съезде Российского общества патологоанатомов в 2009г., IV съезде Российского общества детских патологов в 2010г., научно-практической конференции «Высокотехнологическая помощь в клинике педиатрической академии» в 2010г, заседании Санкт-Петербургской ассоциации патологоанатомов в 2011г.

Полученные результаты используются в работе патологоанатомического отделения клиники СПбГПМА, при преподавании на кафедрах патологической анатомии с курсом судебной медицины, отоларингологии СПбГПМА.

^ Структура и объем работы

Диссертация изложена на 117 страницах машинописного текста и состоит из введения, обзора литературы, описания материалов и методов исследования, собственных данных, обсуждения собственных данных, выводов, списка литературы. Работа содержит 6 таблиц, 34 микрофотографии. Библиографический указатель включает 108 литературных источников.


^ СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ

Материалы и методы исследования

В работе проанализированы результаты клинического, морфологического и иммуногистохимического исследования детей с гипертрофией небных миндалин. Был исследован операционный материал, полученный при тонзиллотомии/эктомии от 75 детей по поводу гипертрофии небных миндалин II-III степени. Выделены три возрастные группы: 1-я – в возрасте до 7 лет, младшая (41 наблюдение), 2-я – с 7 лет и до 12, средняя (23 случаев), 3-я - старше 12 лет, старшая группа (11 случаев).

При изучении ткани небных миндалин особое внимание уделялось состоянию эпителия зевной и криптальной поверхностей, субэпителиального слоя, содержимому просвета крипт, строению лимфоидной ткани с оценкой фолликулов и межфолликулярной области, включая сосуды микроциркуляторного русла, проявлениями воспалительной реакции и склероза стромы.

Во всех наблюдениях гистологические срезы окрашивались гематоксилином и эозином, азур-эозином по Романовскому – Гимзе, на эластические волокна по Вейгерту.

Иммуногистохимическое (ИГХ) исследование материала на парафиновых срезах проводилось по схеме, рекомендуемой фирмой производителем. В ходе проведения иммуногистохимического окрашивания выполнялись отрицательные контрольные исследования. В работе использовали поликлональные антитела к вирусу простого герпеса II типа (HSV II) (Dako), к вирусу папилломы человека NCL-PVp (Novocastra) и к маркеру Т-лимфоцитов CD3 (Dako), моноклональные антитела к цитомегаловирусу (Novocastra), к вирусу Эпштейн-Барр (Novocastra), к маркеру В-лимфоцитов CD20 (Dako), к к IgA и к IgЕ (Novocastra).

Оценка результатов ИГХ исследования проводилась полуколичественным методом как слабо: «+» - 1-10 клеток, имеющих положительную окраску, умеренно: «++» - 11-20 клеток и резко положительная: «+++» - 21 и более клеток. Для вирусных антигенов это определялось для всего среза, для иммуноглобулинов – в одном поле зрения на увеличении х200. Экспрессия Т- и В-лимфоцитов считалась в абсолютных числах в 10 полях зрения при увеличении х400 в различных структурах. Учитывая структурно-функциональную гетерогенность, интенсивность ИГХ реакции в каждой миндалине (случае) оценивали в целом и отдельно: в эпителии, в субэпителиальном слое, а также в компонентах лимфоидной ткани (лимфоидных фолликулах и межфолликулярной зоне).

Морфометрию проводили с помощью программы AxioVision версия 4.6.3 фирмы CarlZeiss с измерением толщины эпителиального слоя, толщины субэпителиального склероза, площади лимфоидных фолликулов, светлых центров и полей склероза в строме. Для каждого структурного компонента проводилось минимум 10 измерений в различных полях зрения.

Статистическую обработку полученных результатов производили между двумя независимыми группами с помощью программы статистического анализа SPSS 9.0 (SPSS Inc., Chicago, IL., USA, 1999). Разницу между показателями принимали за статистически достоверную при р<0,05 (по t-критерию Стьюдента).

Анализ клинических данных проводился по историям болезни. При этом во внимание принимались анамнез данного заболевания, другие перенесенные заболевания, посещение детских учреждений, жалобы в момент поступления, аллергологический анамнез, данные объективного исследования. Все данные заносились в анкету.

^ Результаты исследования

Клиническая характеристика

Среди перенесенных заболеваний у детей в общей структуре преобладали частые (3 и более раз в год) острые респираторные инфекции (ОРИ) – 39 случаев (52%) и ветряная оспа – 33 наблюдений (44%). Далее следовали острые отиты (19 случаев (25%)) и ангины (18(24%)). Внутри групп распределение несколько отличалось от общей картины. Так в младшей возрастной группе в анамнезе жизни преобладали только частые ОРИ (24(59%)), с одинаковой частотой отмечались острые отиты и ветряная оспа (11(27%)). У детей средней возрастной группы наиболее частым перенесенным заболеванием была ветряная оспа (15(65%)), следующими по частоте были ОРИ (9(39%)), реже встречались ангины и бронхиты (по 6(26%) случаев). В третьей возрастной группе также в анамнезе чаще отмечалась перенесенная ветряная оспа (7(64%)), на втором месте были частые ОРИ и ангины (по 6(55%)), реже отмечался хронический тонзиллит (5(45%)), который ЛОР-врачами выделялся отдельно и сочетался с ангинами в 3-х наблюдениях. Кроме того в 3-й группе достаточно часто встречались острые отиты, синуситы и бронхиты (по 4 наблюдения (36%)). Следует отметить, что среди перенесенных заболеваний у детей младше 7-ми лет преобладают острые респираторные инфекции и отиты, развитие которых можно расценивать как осложнение этих инфекций, в связи с анатомическими особенностями евстахиевых труб, которые короче, шире и расположены более горизонтально, чем у взрослых.

У детей 7-11 лет (2-й группы) увеличивается доля заболеваний в прилежащих анатомических областях (бронхиты, пневмонии и отиты). Примерно такая же картина наблюдалась и у детей 12 лет и старше (3-й группы), за исключением пневмоний, которые не были отмечены клинически в исследованных случаях.

Среди предъявляемых жалоб преобладали жалобы на затрудненное носовое дыхание, храп во сне и эпизоды сонного апноэ. Такая же картина отмечалась в первых двух группах, при этом во второй группе по сравнению с первой более часто отмечались жалобы на снижение слуха (26%) и гнусавость (17%). В третьей группе жалобы предъявлялись с небольшой частотой (9-18%), за исключением рецидивирующих ангин (36%) и храпа во сне (27%). Данное различие, по всей видимости, обусловлено более длительным течением патологического процесса.

При исследовании ЛОР-статуса у детей слизистые в большинстве случаев были розовые, чистые. Спаянные с миндалинами небные дужки были только у детей старшей возрастной группы (4 случая). Пробки в лакунах так же чаще отмечались у детей старше 7 лет, а у младших детей они отсутствовали. Увеличение регионарных лимфатических узлов отмечалось только в 2-х наблюдениях у детей первой группы.

В данных ЭКГ исследования в младшей и средней возрастных группах преобладало выявление синусовой аритмии (40% и 43% соответственно), а второй по выявляемости была неполная блокада правой ножки пучка Гиса (32% и 39% соответственно). В старшей возрастной группе чаще всего отмечалась неполная блокада правой ножки пучка Гиса (64%).

^ Результаты гистологического исследования

При гистологическом исследовании небных миндалин со стороны многослойного плоского эпителия определялись акантоз, гиперкератоз и формирование сосочковидных структур, в большей части расположенных в криптах. В части небных миндалин во всех слоях были видны увеличенные эпителиальные клетки, цитоплазма которых была вакуолизирована или опустошена, в вакуолях определялись мелкие базофильные включения. В отдельных клетках эпителия выявлялись увеличенные гиперхромные ядра с наличием в единичных из них светлых базофильных включений. Достаточно часто также отмечался мелкоглыбчатый распад (рексис) эпителиальных клеток, что может быть расценено как проявление апоптоза. Эпителиальный пласт небных миндалин в первой возрастной группе имел меньшее число слоев и толщину, по сравнению со второй группой, и эта разница была достоверна (р<0,5), в третьей группе отмечалось уменьшение толщины люминарного эпителия по сравнению со второй группой. Эпителий крипт во всех случаях в разной степени был инфильтрирован лимфоцитами и в небольшом количестве плазмоцитами, образуя лимфоэпителиальный слой. Во всех наблюдениях в просвете крипт определялись эозинофильные массы, состоящие из ороговевших клеток эпителия, в ряде случаев определялись колонии кокково-палочковой микрофлоры, с примесью небольшого числа нейтрофильных лейкоцитов.

Лимфоидная ткань у детей первой группы была представлена гиперплазированными вторичными фолликулами с крупными светлыми центрами, которые были окружены лимфоидным пояском, образовывавшим чаще всего полулуние и лишь в единичных случаях располагавшимся равномерно. Лимфоидные фолликулы располагались близко друг к другу. У детей второй и третьей возрастных групп размеры фолликулов были в среднем меньшими, чем у детей младшего возраста. Однако во второй и третьей группах обращало внимание неравномерность гиперплазии, проявлявшаяся большей вариабельностью размеров фолликулов, а в отдельных случаях в миндалинах обнаруживались участки без фолликулов. Светлые центры чаще всего имели средние или крупные размеры с фигурами митозов, иногда митозы отсутствовали или были единичными. Лимфоидная ткань, находившаяся между фолликулами, содержала разное количество посткапиллярных венул с высоким эндотелием, в среднем 9-12 в поле зрения на увеличении 400, просвет которых в некоторых случаях был резко суженным. Эндотелиоциты в большинстве случаев были увеличенными, в цитоплазме определялась вакуолизации, в части сосудов отмечалась гиперплазия эндотелия с расположением клеток в несколько рядов. В зависимости от длительности заболевания в миндалинах отмечались склеротические изменения: в более младшем возрасте в виде нежно волокнистых структур между лимфоидными фолликулами, а в более старшем возрасте – выраженные разрастания грубоволокнистой ткани с атрофией фолликулов. Здесь же определялись кровеносные сосуды с резко утолщенными стенками за счет склероза, суженным просветом, гиперпластическим эндотелием. В соединительной ткани отмечались тучные клетки с явлением дегрануляции.

^ Результаты иммуногистохимического исследования ткани небных миндалин

При иммуногистохимическом исследования материала экспрессия антигенов вирусов выявлялась в виде зерен и глыбок на поверхности клеточной мембраны, в цитоплазме или в ядре, с преобладанием локализации в цитоплазме клеток. Экспрессия вирусных антигенов отсутствовала в 10 случаях из 37-ми. В остальных случаях экспрессия антигенов определялась в разных соотношениях, при этом экспрессия антигенов отдельных вирусов определялись в следующем количестве: вирус простого герпеса – 24 (65%) случаев, вирус папилломы человека – 14 (38%), цитомегаловирус – 7 (19%), вирус Эпштейн-Барр – 6 (16%).

Экспрессия антигенов вируса простого герпеса в первой возрастной группе выявлялось в 17 наблюдениях из 22-х (77%). Во всех случаях положительная реакция наблюдалась в клетках поверхностного слоя эпителиального пласта, при этом в 5-ти случаях определялась как резко выраженная. Следует отметить обнаружение в 4-х наблюдениях слабой экспрессии антигена ВПГ в единичных лимфоцитах и плазматических клетках находящихся в пределах эпителиального пласта (в зоне лимфоэпителиального симбиоза). В 2-х случаях экспрессия была выявлена в цитоплазме единичных клеток (макрофаги, плазмоциты) субэпителиального слоя. В цитоплазме макрофагов светлых центров фолликулов экспрессия выявлялась в 8 наблюдениях. В 14-ти наблюдениях антиген определялся в массах, которые находились в криптах и лежали на поверхности эпителия, в виде зерен коричневого цвета. Экспрессия антигенов вируса папилломы человека в 1-й возрастной группе определялась в эпителиальном слое, субэпителиально и в лимфоидной ткани. В эпителиальном пласте она выявлялась в 12 из 22-х случаях (55%). В 1-м случае экспрессия была выявлена в цитоплазме единичных мононуклеаров субэпителиального слоя. В светлых центрах прокрашивание обнаружилось в 3-х наблюдениях с локализацией в цитоплазме макрофагов. В 10 из 19 случаев определялось сочетание экспрессии антигенов ВПГ и ВПЧ. Экспрессия антигенов ЦМВ и ВЭБ выявлялась только слабо положительная в 5 (23%) и 4 (18%) наблюдениях соответственно. Экспрессия антигенов ЦМВ обнаруживалась в эпителии и субэпителиально по 2 случая, в светлом центре (рис.1,а) и в клетках эндотелия – по 1-му случаю. В положительных на ВЭБ случаях экспрессия в 2-х наблюдениях определялась в эпителиальных клетках, и по 1-му – субэпителиально, в светлом центре, в эндотелии мелких сосудов.

Во второй возрастной группе (дети от 7 до 12 лет) экспрессия антигенов вируса простого герпеса выявлялась в 5-ти случаях из 10-ти (50%). Во всех случаях она наблюдалась в клетках поверхностного слоя эпителиального пласта. В одном наблюдении обнаружена экспрессия антигена ВПГ в единичных плазмоцитах, расположенных в пределах эпителия. В 3-х случаях экспрессия обнаружена в цитоплазме единичных клеток (макрофаги, плазмоциты) субэпителиального слоя. В макрофагах светлых центров фолликулов экспрессия выявлялась в 5 наблюдениях. В 2-х случаях наблюдалась экспрессия в эндотелиальных клетках сосудов микроциркуляторного русла, расположенных в межфолликулярной зоне. Экспрессия антигенов вируса папилломы человека наблюдалась лишь в 1-м случае из 10-ти (10%), в клетках поверхностного слоя эпителиального пласта, макрофагах светлых центров фолликулов и содержимом крипт. Сочетание экспрессии антигенов ВПГ и ВПЧ встретилось у 1-го пациента. Экспрессия антигенов ВЭБ и ЦМВ, по 2 (по 20%) в каждом случае, выявлялась только слабо положительная. В положительных на ВЭБ случаях экспрессия определялась в светлом центре и эндотелии мелких сосудов. Экспрессия антигенов ЦМВ обнаруживалась в эпителии, субэпителиально и в светлом центре.

В третьей возрастной группе (дети старше 12 лет) экспрессия антигенов вируса простого герпеса выявлялась в 2-х случаях из 5-ти (40%). В одном случае она наблюдалась в клетках поверхностного слоя эпителиального пласта. В одном наблюдении обнаружена экспрессия антигена ВПГ в единичных плазмоцитах, расположенных в пределах эпителия. Экспрессия антигенов вируса папилломы человека наблюдалась лишь в 1-м случае из 5-ти (20%), в единичных плазматических клетках поверхностного слоя эпителиального пласта. Сочетание экспрессии антигенов ВПГ и ВПЧ встретилось у 1-го пациента. Экспрессия антигенов ВЭБ и ЦМВ не выявлялась.

У детей 1 группы экспрессия Ig A в эпителиальном и субэпителиальном слоях наиболее часто отмечалась умеренно выраженная экспрессия. Среднее значение экспрессии Ig A в эпителии небных миндалин 1 группы детей определялось как 1,86±0,36, в субэпителиальной зоне – 2,05±0,36, в области фолликулов – 1,3±0,36, в межфолликулярной области – 1,14±0,24. Во 2 группе отмечалось увеличение интенсивности экспрессии Ig А. Выраженная экспрессия чаще определялась в эпителиальном пласте и субэпителиально. Так, в эпителии среднее значение экспрессии было 2,5±0,24, в субэпителиальной зоне – 2,4±0,48, в фолликулах – 1,5±0,24 и в межфолликулярной зоне – 1,6±0,48. В 3 группе детей экспрессия Ig A определялась чаще как слабо и умеренно выраженная. Среднее значение экспрессии Ig А в эпителии небных миндалин третьей группы детей было 1±1,65, в субэпителиальной зоне – 1,8±1,1, в фолликулярной области – 1,4±1,1 и в межфолликулярной зоне – 1,2±0,55. Статистическая обработка выявила существенные отличия по экспрессии Ig A только в эпителии между 1 и 2 группами. При этом экспрессия Ig A в эпителии 2 группы детей была достоверно выше, чем в первой (p<0,05).

Экспрессия Ig Е во всех группах преимущественно определялась как слабо выраженная. Среднее значение экспрессия Ig Е в эпителии небных миндалин 1 группы детей определялось как 1,14±0,36, в субэпителиальной зоне – 1,0±0,24, в области фолликулов – 1,0±0,24, в межфолликулярной области – 0,73±0,24. Во 2 группе среднее значение экспрессии Ig Е в эпителии было 0,9±0,48, в субэпителиальной – 0,8±0,48, в фолликулах – 0,7±0,24 и в межфолликулярной зоне – 0,6±0,48. Среднее значение экспрессии Ig Е в эпителии в третьей группе было 0,6±1,1, в субэпителиальной зоне – 1,2±0,55, в фолликулярной области – 1,4±1,1 и в межфолликулярной зоне – 1,0±0,55. Обратило внимание наличие экспрессии Ig E в цитоплазме поверхностных клеток эпителия небных миндалин. Следует отметить, что при изучении выраженности экспрессии Ig Е достоверных различий между зонами небных миндалин и в разных группах детей не выявлено.

В первой группе CD20 позитивные клетки (В-лимфоциты) в эпителии зевной поверхности и субэпителиально выявлялись в среднем до 20 в поле зрения. В межфолликулярной области В-лимфоциты были отмечены уже в среднем до 120 в поле зрения. В светлых центрах фолликулов и зоне лимфоэпителиального симбиоза почти все поле зрения было представлено В-клетками (не поддаваясь подсчету). CD3 позитивные клетки (Т-лимфоциты) в большом числе обнаруживались только в межфолликулярной области, при этом в эпителии зевной поверхности и субэпителиально выявлялось в среднем 10 клеток в поле зрения, в области короны фолликула – 25. В области светлых центров фолликулов обнаруживалась экспрессия до 18 CD3 позитивных клеток.

Во второй группе распределение CD20 позитивных клеток было аналогично первой группе. Выраженных отличий по числу клеток экспрессирующих CD20 в различных зонах небных миндалин выявлено не было. Однако число CD3 позитивных клеток в области короны и светлых центров фолликулов было более чем в два раза большим, по сравнению с первой группой.

В третьей группе по распределению и числу клеток экспрессирующих CD20 существенные отличия в различных зонах небных миндалин не были отмечены. При этом обращало внимание на значительное увеличение Т-лимфоцитов в области короны и светлых центров фолликулов. По сравнению с первой группой в указанных зонах число CD3 позтивных клеток было больше, чем в 3-4 раза, а по сравнению со второй группой – более чем в 2 раза. Тем не менее, статистическая обработка не выявила достоверных различий между группами (p>0,05), возможно из-за большой вариабельности исследуемых величин.

Таким образом, нами выявлено уменьшение частоты экспрессии антигенов вирусов у детей более старших групп по сравнению с пациентами младшего возраста. Наибольший уровень экспрессии иммуноглобулинов отмечается для Ig A в области эпителия в средней возрастной группе. А при исследовании распределения Т- и В-лимфоцитов определяется тенденция к увеличению количества Т-лимфоцитов находящихся в области светлых центров фолликулов. При этом обращало на себя внимание значительное увеличение Т-лимфоцитов в области короны и светлых центров фолликулов у детей старшей возрастной группы. По сравнению с первой группой в указанных зонах число CD3 позтивных клеток было больше, чем в 3-4 раза, а по сравнению со второй группой – более чем в 2 раза. Тем не менее, статистическая обработка не выявила достоверных различий между группами (p>0,05), возможно из-за большой вариабельности исследуемых величин.

^ Морфометрическое исследование небных миндалин

В первой группе среднее значение толщины эпителия 0,112±0,012 мм. Среднее количество слоев эпителиальных клеток в этой группе 19. Общий размер фолликула в среднем составлял 360,4×10ˉ³±39,6×10ˉ³мм². Единичные фолликулы занимали площадь, выходящую за пределы поля зрения. Средние размеры светлых центров – 217,3×10ˉ³±30,3×10ˉ³ мм² (табл. 1).

Во второй группе среднее значение толщины эпителия 0,149±0,021 мм. Среднее количество слоев эпителиальных клеток в этой группе 24. Общий размер фолликула в среднем составлял 314,0×10ˉ³±32,4×10ˉ³ мм². Единичные фолликулы занимали площадь, выходящую за пределы поля зрения. Средние размеры светлых центров – 192,5×10ˉ³±16,5×10ˉ³ мм² (табл. 1).

В третьей группе среднее значение толщины эпителия 0,12±0,015 мм. Среднее количество слоев эпителиальных клеток в этой группе 14. Общий размер фолликула в среднем составлял 377,5×10ˉ³±57,4×10ˉ³мм². Единичные фолликулы занимали площадь, выходящую за пределы поля зрения. Средние размеры светлых центров – 215,5×10ˉ³±40,9×10ˉ³ мм² (табл. 1).

Таблица 1.

Результаты морфометрического исследования эпителия и фолликулов небных миндалин

Средние значения

1-я группа

2-я группа

3-я группа

р

Высота эпителия, мм

0,091±0,011

0,149±0,021

0,12±0,015

р<0,05*

Площадь фолликула, мм 2

360,4×10ˉ³

±39,6×10ˉ³

314,0×10ˉ³

±32,4×10ˉ³

377,5×10ˉ³

±57,4×10ˉ³

р>0,05

Площадь светлого центра фолликула, мм 2

217,3×10ˉ³

±30,3×10ˉ³

192,5×10ˉ³

± 16,5×10ˉ³

215,5×10ˉ³

±40,9×10ˉ³

р>0,05

*- при сравнении 1 и 2 групп

При проведении статистической обработки полученных результатов достоверная разница выявлена при сравнении толщины эпителия 1-й и 2-й групп (р<0,05). Сравнение остальных показателей не выявило статистически достоверной разницы между различными группами. Корреляционный анализ не показал связи частоты выявления вирусов и толщины эпителия.

Проведенное морфологическое и иммуногистохимическое исследования могут свидетельствовать об определенной динамике изменений небных миндалин при их гипертрофии у детей различных возрастных групп. Так у детей старшего возраста (2 и 3 группы) в отличие от младшего (1 группа), отмечалось увеличение количества слоев эпителия и соответственно его толщины. Обратило внимание уменьшение экспрессии антигенов исследованных вирусов в старших возрастных группах, при этом в 3-й группе они выявлялись только в пределах эпителия и отсутствовали в лимфоидной ткани. Отмечена определенная зависимость: утолщение люминарного эпителия миндалин в старших возрастных группах сопровождалось уменьшением у них экспрессии антигенов вирусов. Учитывая современные представления о модулирующем влиянии эпителия на развитие процессов в небной миндалине (Torre V. и соавт., 2000), обнаруженное нами увеличение толщины эпителия миндалин можно рассматривать как проявление одной из защитных функций. По данным литературы в небных миндалинах клеточный иммунный ответ преобладает над гуморальным (Komorowska A. и соавт., 2005), и мы полагаем, что обнаруженное увеличение с возрастом количества CD3 положительных клеток является отражением становления местного иммунитета и иммунной системы в целом. На большую эффективность местного иммунитета может указывать и более высокая экспрессия IgA в эпителии и субэпителиальном слое небных миндалин у детей второй группы по сравнению с первой. Эти данные также могут быть рассмотрены в качестве причин, объясняющих значительно меньшую выраженность экспрессии антигенов вирусов в миндалинах детей старших возрастных групп. Известно, что признаками аллергической реакции являются наличие в ткани IgE и дегрануляция тучных клеток. На нашем материале были выявлены оба этих признака, указывающих на проявление аллергизации у детей.

Полученные нами результаты иммуноморфологического исследования согласуются с данными клинических наблюдений (Зарубин С.С., 2007), свидетельствующих о наибольшей частоте хронических заболеваний ЛОР органов у детей 4-х лет и уменьшении распространенности гипертрофии глоточной и небных миндалин с увеличением возраста детей. При воспалении небных миндалин происходит активация фибробластов, что может со временем приводить к замене иммунологически активной ткани фиброзной тканью (Passali D. и соавт., 2004). С этим, по-видимому, связано выявленное нами увеличение количества соединительной ткани в небных миндалинах у детей старшего возраста.

Как видно из представленных материалов, при исследовании ткани небных миндалин необходима оценка всех структурных компонентов небных миндалин с использованием иммуногистохимического метода, позволяющего провести патогенетическую оценку выявленных изменений.

ВЫВОДЫ

1. При гипертрофии небных миндалин у детей отмечается утолщение люминарного эпителия. Наибольшее утолщение наблюдается у детей 7-11 лет (р< 0,5), меньшее у детей старше 12 лет (p>0,05) и минимальное – у детей младше 6 лет.

2. У детей старших возрастных групп при гипертрофии небных миндалин размеры лимфоидных фолликулов имели тенденцию к уменьшению, при этом отмечалось расширение межфолликулярной зоны и появление участков без фолликулов, соответственно увеличивались размеры участков, занимаемых соединительной тканью с утолщением коллагеновых волокон.

3. В небных миндалинах экспрессия антигенов ряда вирусов (ВПГ, ЦМВ, ВЭБ, ВПЧ), уменьшается с возрастом. Антиген вируса простого герпеса достоверно чаще определяется у детей до 6 лет по сравнению с более старшими. Во всех группах экспрессия антигенов ВПГ и ВПЧ достоверно чаще выявлялась в эпителиальном пласте, чем в других структурах небных миндалин.

4. При гипертрофии небных миндалин отмечаются явление дегрануляции тучных клеток и наличие IgE во всех структурах, которые могут являться косвенными признаками аллергизации у детей.

5. В средней возрастной группе (7-11 лет) наблюдалось наибольшее увеличение толщины люминарного эпителия небных миндалин, при этом экспрессия антигенов вирусов выявлялась значительно меньше, а экспрессия IgA в эпителии и субэпителиальном слое была более выраженная по сравнению с первой группой.

6. С возрастом количество Т-лимфоцитов в светлых центрах небных миндалин при их гипертрофии нарастает, что может свидетельствовать об увеличении межклеточного взаимодействия и клеточноопосредованного иммунного ответа.

7. Установлен различный характер морфологических изменений в гипертрофированных небных миндалинах у детей различных возрастных групп. У детей 7-11 лет преобладают реакции эпителия, сопровождающиеся его гиперплазией, у детей 6 лет и младше – преимущественной гиперплазией лимфоидных фолликулов, что отражает неоднородный характер адаптивных изменений ткани небных миндалин при данной патологии.


^ ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

1. При гистологическом исследовании необходима оценка всех структурных компонентов небных миндалин, обращая внимание на толщину эпителия, наличие изменений в эпителиоцитах, а так же на состояние лимфоидного компонента.

2. Для более объективной оценки патологии небных миндалин необходимо

использование иммуногистохимического метода.

3. При анализе состояния небных миндалин следует учитывать возможность их вирусного поражения.


^ СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

  1. Иудина Т.А., Зайцев В.С., Насыров Р.А. Иммуногистохимическое исследование небных миндалин у детей с хроническим тонзиллитом // Материалы III съезда Российского общества патологоанатомов 26-30 мая 2009 года. – Самара, 2009. – С. 199-200.

  2. Насыров Р.А., Иудина Т.А., Цветков Э.А., Зайцев В.С., Кукушкина О.Е. Характер морфологических изменений в гипертрофированных небных миндалинах при экспрессии антигенов вирусов группы герпеса и папилломы человека // Российская оториноларингология. Приложение, 2010. – № 1. – С. 170-175.

  3. Иудина Т.А., Насыров Р.А. Иммуногистохимическое исследование гипертрофии небных миндалин у детей // Труды IV съезда Российского общества детских патологов 17-19 мая 2010 года. – СПб, 2010. – С. 255-256.

  4. Иудина Т.А., Насыров Р.А. Иммуногистохимическое исследование экспрессии иммуноглобулинов и локализации Т- и В-лимфоцитов в небных миндалинах при их гипертрофии у детей // Высокотехнологическая медицинская помощь в клинике педиатрической академии. Особенности ведения новорожденных. Материалы научно-практической конференции 8-9 ноября 2010 года. – СПб, 2010.- С.37-39

  5. Иудина Т.А., Насыров Р.А. Морфологическое и иммуногистохимическое исследование гипертрофии небных миндалин у детей // Архив патологии, 2010. – №6. – С. 21-25.

  6. Насыров Р.А., Иудина Т.А. Иммуноморфологическое исследование небных миндалин при их гипертрофии у детей различного возраста // Архив патологии, 2011. – № 5. – С. 32-36.



Ваша оценка этого документа будет первой.
Ваша оценка:

Похожие:

Иудина татьяна Александровна клинико-морфологическая и иммуногистохимическая характеристика гипертрофии небных миндалин у детей iconМорфологическая и иммуногистохимическая характеристика селезенки при хроническом стрессе в раннем

Иудина татьяна Александровна клинико-морфологическая и иммуногистохимическая характеристика гипертрофии небных миндалин у детей iconДиагностическое и прогностическое значение дегидратированного отделяемого лакун небных миндалин при
Диагностическое и прогностическое значение дегидратированного отделяемого лакун небных миндалин при...
Иудина татьяна Александровна клинико-морфологическая и иммуногистохимическая характеристика гипертрофии небных миндалин у детей iconСамсонова Татьяна Вячеславовна клинико-функциональная характеристика, прогнозирование и коррекция

Иудина татьяна Александровна клинико-морфологическая и иммуногистохимическая характеристика гипертрофии небных миндалин у детей iconДиагностика и клинико-морфологическая характеристика вторичного гиперпаратиреоза у собак

Иудина татьяна Александровна клинико-морфологическая и иммуногистохимическая характеристика гипертрофии небных миндалин у детей iconАнгина (острый тонзиллит) острое общее инфекционное заболевание с преимущественным поражением небных

Иудина татьяна Александровна клинико-морфологическая и иммуногистохимическая характеристика гипертрофии небных миндалин у детей iconКлинико- морфологическая и молекулярно-генетическая характеристика больных первичными лимфомами кожи

Иудина татьяна Александровна клинико-морфологическая и иммуногистохимическая характеристика гипертрофии небных миндалин у детей iconЛи Иван Иванович Клинико-морфологическая характеристика канальцевого аппарата почек при различных

Иудина татьяна Александровна клинико-морфологическая и иммуногистохимическая характеристика гипертрофии небных миндалин у детей iconСравнительная клинико-томографическая и морфологическая характеристика ишемического инсульта у лиц

Иудина татьяна Александровна клинико-морфологическая и иммуногистохимическая характеристика гипертрофии небных миндалин у детей iconЧеботарева татьяна александровна профилактика гриппа и других острых респираторных инфекций у детей

Иудина татьяна Александровна клинико-морфологическая и иммуногистохимическая характеристика гипертрофии небных миндалин у детей iconКлинико-морфологическая характеристика helicobacter pylori -ассоциированного хронического гастрита

Разместите кнопку на своём сайте:
Медицина


База данных защищена авторским правом ©MedZnate 2000-2019
обратиться к администрации | правообладателям | пользователям
Документы