Генетическая эпидемиология моногенных болезней нервной системы у населения ростовской области 03. 02. 07 Генетика
|
|
Скачать 0.69 Mb.
|
|
На правах рукописи ВЕТРОВА НАТАЛЬЯ ВЛАДИМИРОВНА ГЕНЕТИЧЕСКАЯ ЭПИДЕМИОЛОГИЯ МОНОГЕННЫХ БОЛЕЗНЕЙ НЕРВНОЙ СИСТЕМЫ У НАСЕЛЕНИЯ РОСТОВСКОЙ ОБЛАСТИ 03.02.07 - Генетика Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук Москва – 2012 Работа выполнена в Научно-исследовательском институте биологии Федерального государственного автономного образовательного учреждения высшего профессионального образования «Южный федеральный университет» ^ доктор медицинских наук Амелина Светлана Сергеевна Научный консультант: доктор медицинских наук, профессор Дадали Елена Леонидовна ^ Куцев Сергей Иванович, доктор медицинских наук Федеральное государственное бюджетное учреждение «Медико-генетический научный центр» Российской академии медицинских наук, заведующий лабораторией мутагенеза ^ , кандидат медицинских наук Государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования «Российский национальный исследовательский медицинский университет имени Н.И.Пирогова» Министерства здравоохранения и социального развития Российской Федерации, доцент кафедры неврологии, нейрохирургии и медицинской генетики ^ Государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования «Московский государственный медико-стоматологический университет» Министерства здравоохранения и социального развития Российской Федерации Защита состоится «___» _______ 2012 г. в ___ часов на заседании Диссертационного ученого совета Д 001.016.01 при Федеральном государственном бюджетном учреждении «Медико-генетический научный центр» Российской академии медицинских наук (115478, Москва, ул. Москворечье, 1) С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Федерального государственного бюджетного учреждения «Медико-генетический научный центр» Российской академии медицинских наук по адресу: 115478, Москва, ул. Москворечье, д.1. Автореферат разослан «_____»___________________ 2012 г. Учёный секретарь диссертационного совета Д 001.016.01 по защите докторских и кандидатских диссертаций, доктор медицинских наук, профессор Зинченко Рена Абульфазовна ^ Актуальность исследования Наследственные болезни нервной системы (НБНС) составляют одну из наиболее многочисленных групп моногенной патологии человека, характеризующуюся тяжелым, прогрессирующим течением. В связи с отсутствием эффективных методов лечения НБНС особую актуальность приобретает профилактика возникновения повторных случаев заболевания в отягощенных семьях на основе проведения пренатальной, в том числе и предимплантационной диагностики. Существенное повышение эффективности профилактических мероприятий оказалось возможным благодаря успехам, достигнутым в изучении этиологии значительного числа НБНС. По данным Online Mendelian Inheritance in Man (OMIM), к настоящему времени идентифицировано более 300 генов, ответственных за возникновение НБНС (www.ncbi.nlm.nih.gov/omim). Использование методов ДНК анализа, направленных на идентификацию мутаций в этих генах позволяет не только уточнить диагноз наследственного заболевания, но и дает возможность выявлять носительство мутаций на доклинической стадии, что имеет принципиальное значение для профилактики НБНС с поздним началом. Основой профилактики наследственной патологии является медико-генетическое консультирование (МГК), которое носит регионально ориентированный характер. Эффективность такого консультирования в значительной мере зависит от уровня знаний о распространенности, спектре, особенностях фенотипических проявлений отдельных нозологических форм НБНС, а также информации о спектре патологических мутаций в генах, ответственных за возникновение распространенных заболеваний в конкретном регионе (Зинченко Р.А., Гинтер Е.К., 2006; 2008). Проведенные исследования выявили особенности спектра и различия показателей суммарной отягощенности НБНС в разных странах (www.ncbi.nlm.nih.gov/omim). Дифференциация в структуре нозологического спектра и груза НБНС выявлена и в популяциях и этнических группах России (Руденская Г.Е., 1998; Зинченко Р.А. и др., 2009). Наблюдаются различия в частоте НБНС между регионами/этносами, характеризующиеся формированием очагов как локально высоких частот, так и снижением частоты встречаемости отдельных заболеваний в популяциях. Так, выявлены очаги накопления спиноцеребеллярной атаксии I типа, миотонической дистрофии и окулофарингеальной миопатии в Якутии и миотонической дистрофии в Республике Башкортостан (Хидиятова И.М., 2008; Максимова Н.Р. и др., 2008; 2009). Указанные особенности обусловлены, главным образом, историей формирования и спецификой генетической структуры обследованных популяций и являются предметом изучения генетической эпидемиологии наследственных заболеваний, в общем, и наследственных болезней нервной системы в частности (Гинтер Е.К., Зинченко Р.А., 2006; 2008). Информация, полученная в ходе генетико-эпидемиологических исследований, служит базой для создания специализированных региональных регистров. Регистры наследственной патологии позволяют осуществлять активную диспансеризацию отягощенных семей, а также планировать объем медико-генетического консультирования в отдельных регионах (Барышникова Н.В., 2002; Амелина С.С., 2006; Козулина Е.А., 2006; Кириллов А.Г., 2008; Хидиятова И.М., 2008; Максимова Н.Р., 2009). Выявленные особенности распространенности и спектра различных форм наследственных заболеваний нервной системы в обследованных популяциях Российской Федерации позволили оптимизировать процесс регионально ориентированного медико-генетического консультирования. Однако в большинстве проведенных исследований диагностика заболеваний осуществлялась только на основании клинического обследования без подтверждения диагноза на молекулярно-генетическом уровне, что, учитывая выраженную генетическую гетерогенность НБНС, в значительной степени осложняет планирование профилактических мероприятий в отягощенных семьях. Все это обуславливает актуальность проведения генетико-эпидемиологических исследований с использованием современных методов молекулярно-генетической диагностики в ранее не обследованных популяциях России. ^ Изучить популяционно-эпидемиологические и клинико-генетические особенности моногенных болезней нервной системы у населения Ростовской области. ^
^ Впервые проведено комплексное генетико-эпидемиологическое обследование населения 11 районов Ростовской области с использованием методов ДНК анализа, позволившее определить значения отягощенности аутосомно-доминантной, аутосомно-рецессивной и Х-сцепленной патологией нервной системы. Установлены статистически значимые различия значений отягощенности городского и сельского населения заболеваниями с различными типами наследования и определены основные факторы популяционной динамики, определяющие формирование отягощенности наследственной патологией нервной системы населения Ростовской области – миграционная активность населения и генетическая подразделенность популяций. Выявлено географическое накопление отдельных нозологических форм в различных районах области. Определен внутри- и межсемейный клинический полиморфизм для распространенных нозологических форм НБНС. Впервые проведен сравнительный анализ значений распространенности основных групп НБНС, выявленных в Ростовской области с показателями ранее обследованных территорий РФ. Проведено ДНК-исследование и рассчитаны частоты встречаемости «мажорных» мутаций в генах PMP22, DMD, SMN, DMPK, HTT и ATXN1, ATXN2, ATXN3, ответственных за возникновение наследственной моторно-сенсорной нейропатии 1А типа, прогрессирующих мышечных дистрофий Дюшенна и Бекера, спинальной мышечной атрофии, миотонической дистрофии 1 типа, хорей Гентингтона и спиноцеребеллярных атаксий 1-3 типов. ^ Проведено медико-генетическое консультирование семей, отягощенных НБНС. Создана база данных больных с моногенной патологией нервной системы, включающая генеалогические данные, описание клинических симптомов, данные биохимических, электронейромиографических и молекулярно-генетических исследований, которая послужит основой для регионального регистра, позволяющего осуществлять активный мониторинг отягощенных семей. Рассчитаны показатели потребности в проспективном и ретроспективном медико-генетическом консультировании семей, отягощенных наследственными заболеваниями нервной системы, необходимые для планирования объема медико-генетического консультирования в регионе. ^
^ Материалы диссертации доложены: на третьей международной научно-практической конференции «Актуальные проблемы биологии, нанотехнологий и медицины», 1-4 октября 2009, Ростов-на-Дону; на VI съезде Российского общества медицинских генетиков, 15-18 мая 2010, Ростов-на-Дону; на конференции «European Conference of Human Genetics», May 28-31, 2011, Amsterdam, The Netherlands. ^ Автор принимала участие в планировании и проведении экспедиционных работ, проводила личный осмотр больных и забор биологического материала, составляла медицинские карты на семьи с наследственной патологией нервной системы. Для реализации цели исследования автором сформированы группы пациентов с наследственными нервно-мышечными заболеваниями, атаксиями, спастическими параплегиями и экстрапирамидными заболеваниями. Автором проанализированы современные данные отечественной и зарубежной литературы по теме диссертации, проведен математический анализ данных, сформулированы основные результаты и выводы. Результаты исследования опубликованы в научных журналах и доложены на конференциях. Публикации По результатам диссертации опубликовано 7 печатных работ соискателя, в том числе 3 статьи – в журналах, рекомендованных ВАК МОН РФ для соискателей ученой степени кандидата медицинских наук. ^ Диссертация состоит из введения, обзора литературы и глав, посвященных описанию материалов и методов исследования, изложению полученных результатов и их обсуждения, содержит заключение и выводы. Работа изложена на 167 страницах машинописного текста, содержит 38 таблиц, 22 рисунка и 4 приложения. Библиографический указатель включает 277 наименований, из них 122 отечественных и 155 иностранных источников. ^ Проведено клинико-генетическое обследование населения 11 районов Ростовской области: Цимлянский, Волгодонской, Дубовский, Зимовниковский, Миллеровский, Тарасовский, Матвеево-Курганский, Родионово-Несветайский, Красносулинский, Мясниковский, Целинский. Рассматриваемая выборка из 11 районов территориально характеризует восток, север, запад и юг Ростовской области (рис.1). Суммарная численность обследованного населения составила 459 860 человек (табл. 1).
В ходе комплексного генетико-эпидемиологического обследования населения 11 районов Ростовской области была получена информация о 7205 больных с предположительно наследственной патологией, из которых зарегистрировано 1534 больных с диагностированной моногенной наследственной патологией. Из общего регистра больных, выявленных в результате медико-генетического обследования населения Ростовской области, были отобраны 183 больных из 134 семей с предположительно наследственными заболеваниями нервной системы, из них по результатам анкетирования была получена информация о 143 больных, по документам бюро медико-социальной экспертизы (МСЭ) – о 85 больных. В качестве объектов исследования были выбраны 4 основные группы моногенных НБНС: нервно-мышечные заболевания, спастические параплегии, экстрапирамидные заболевания, наследственные атаксии. В исследование не включалась следующая патология: врожденные пороки развития нервной системы, факоматозы, наследственные болезни обмена веществ с ведущей неврологической симптоматикой, а также болезни нервной системы, имеющие мультифакториальную природу. ^ Сбор материала проводился в рамках комплексного медико- и популяционно-генетического исследования населения Ростовской области в соответствии с протоколом, разработанным в лаборатории генетической эпидемиологии ФГБУ «МГНЦ» РАМН (Гинтер Е.К. и др., 1999; 2002; 2006). Медико-генетическое исследование населения проводилось в три этапа. На первом этапе была создана единая база данных о больных с предположительной наследственной патологией нервной системы с использованием различных источников информации (анкетирование врачей и среднего медперсонала, документов бюро МСЭ). Второй этап состоял в осмотре всех зарегистрированных больных и их родственников по месту жительства врачами-генетиками, для установления генетического характера заболевания в выявленных семьях. Последний этап заключался в верификации диагноза наследственного заболевания при участии врачей-специалистов из г.Ростова-на-Дону и специализированных клиник г.Москва. Клиническая диагностика НБНС осуществлялась в соответствии с критериями, изложенными в специальных руководствах, материалах диссертаций и оригинальных статьях с использованием данных электронейромиографического, биохимического и молекулярно-генетического обследования. Во всех случаях у пациентов получено письменное информированное согласие на проведение исследований. Электронейромиография (ЭНМГ) – проводилась на электромиографе «Нейромиан» в отделении функциональной диагностики ГБУ РО «РОКБ» по стандартной методике с использованием накожных и игольчатых электродов. ^ применялись для определения активности фермента креатинфосфокиназы с целью диагностики нервно-мышечной патологии и концентрации церулоплазмина для диагностики болезни Вильсона-Коновалова. ^ исследования проводились в лаборатории ДНК-диагностики ФГБУ «МГНЦ» РАМН (зав. лабораторией к.б.н. А.В. Поляков), лаборатории медицинской генетики ФГУ РНИИАП (зав. лабораторией к.м.н. Р.А. Шокарев), МГК ГБУ РО «РОКБ» (зав. МГК д.м.н. С.С. Амелина). Проводилось исследование следующих «мажорных» мутаций наиболее частых НБНС: наследственная моторно-сенсорная нейропатия 1А типа – дупликаций гена PMP 22; ПМД Дюшенна/Беккера – делеций в промоторной области и 19 экзонах (3, 4, 6, 8, 13, 17, 19, 32, 42, 43, 44, 45, 47, 48, 50, 51, 52, 53, 60) гена дистрофина (DMD); СМА – делеций 7 и 8 экзонов гена SMN; миотоническая дистрофия 1 типа – экспансии CTG-повторов в гене DMPK; хорея Гентингтона – экспансии CAG-повторов в гене гентингтина (HTT); спиноцеребеллярных атаксий 1-3 типов экспансии CAG-повторов в генах ATXN1, ATXN2, ATXN3. Для подтверждения наследственного характера и уточнения типа наследования заболевания в отягощенных семьях проводился сегрегационный анализ. При анализе рассматривались только ядерные семьи с размером сибства 2 и более. Сегрегационный анализ проведен по методу Фишера (Fischer P.A., 1934), сегрегационная частота рассчитана пробандовым методом Вайнберга (Morton N.E., 1959). Значения отягощенности населения Ростовской области наследственной патологией нервной системы рассчитано отдельно для всех типов наследственной патологии – аутосомно-доминантной, аутосомно-рецессивной и Х-сцепленной рецессивной. Расчет проведен исходя из реального соотношения количества выявленных больных к численности обследованного населения по формуле: f = n / N, где: n - число больных; N - численность популяции. Значения отягощенности АД и АР заболеваний рассчитаны на 10 000 обследованного населения, Х-сц. – 10 000 мужского населения. Сравнительный анализ полученных результатов проводился с применением t-критерия Стьюдента. Различия считались статистически значимыми при уровне р ≤0,05. Выявление случаев накопления отдельных заболеваний по районам области, проводилось с использованием F-распределения (уровень значимости 0,01) (Животовский Л.А., 1991). ^ В ходе комплексного генетико-эпидемиологического обследования населения 11 районов Ростовской области зарегистрировано 1534 пациента с наследственной патологией. Из общего регистра больных, выявленных в результате медико-генетического обследования населения Ростовской области, были отобраны 183 больных из 134 семей с предположительно наследственными заболеваниями нервной системы. Осмотр врача-генетика и дальнейшее обследование позволили исключить диагноз наследственного заболевания у 20 пациентов с хроническими полинейропатиями (инфекционного и токсического генеза), с дисциркуляторной энцефалопатией и перинатальным поражением ЦНС. Анализ первичных источников регистрации показал, что наибольшее количество пробандов было выявлено по результатам анкетирования – 78,14%, из них неврологи и педиатры предоставили сведения о 63,5% больных, средний медицинский персонал ФАПов – о 56,43%, по документам бюро медико-социальной экспертизы – 46,44%, некоторые больные были зарегистрированы по двум или трем источникам. ^ Во всех семьях проведен сегрегационный анализ в зависимости от предполагаемого типа наследования, который показал соответствие ожидаемому аутосомно-доминантному и аутосомно-рецессивному типу наследования. Значение сегрегационной частоты в семьях с предположительной аутосомно-рецессивной патологией cоставило 0,250,05, вероятность регистрации, оцененная методом Фишера – 0,71. В семьях с предположительной аутосомно-доминантной патологией (регистрация через пораженного ребенка) вероятность регистрации составила – 0,83, значение сегрегационной частоты – 0,450,05. В группе, когда регистрация семьи осуществлялась через пораженного родителя (полная регистрация), гипотеза доминантного наследования тестировалась методом χ2. Общее количество сибсов в анализируемых ядерных семьях – 44, из них 23 больных, 21 здоровых. Это соотношение соответствует ожидаемому 50% на 50% (χ2=0,06 р<0,05, d.f.=1). ^ Проведенный сегрегационный анализ подтвердил моногенный характер заболевания нервной системы у 145 больных из 95 семей, что составило 9,5% от общего количества больных с наследственной патологией, выявленных на территории Ростовской области (Амелина С.С., 2006). На долю аутосомно-доминантных наследственных болезней нервной системы приходится максимальное число, как больных, так и нозологических форм 72,4% и 52,4% соответственно (рис.2).
Значения отягощенности населения Ростовской области наследственной патологией нервной системы рассчитаны отдельно для всех типов наследственной патологии – аутосомно-доминантной, аутосомно-рецессивной и Х-сцепленной рецессивной для каждого района, а также для городского и сельского населения. Суммарная отягощенность 11 обследованных районов представлена в таблице 2. Таблица 2. Суммарные значения отягощенности НБНС у населения 11 районов РО (на 10 000).
|
|||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
Ваша оценка этого документа будет первой.
Ваша оценка:
Похожие:
База данных защищена авторским правом ©MedZnate 2000-2016
allo, dekanat, ansya, kenam
обратиться к администрации | правообладателям | пользователям
allo, dekanat, ansya, kenam
обратиться к администрации | правообладателям | пользователям