|
|
Скачать 1.76 Mb.
|
|
^
Б ПК ОК 11 12 13 14 15 16 17 18 19![]() Prevotella bivia^ Рис.2 (А, Б). Электрофореграммы результатов выявления анаэробных бактерий в некоторых образцах, полученных на диагностической тест-системе «АнаэрАм». ПК - положительный контроль - верхняя полоса соответствует фрагменту Prevotella bivia (размер 454 п.н.) в количестве 104 копий/мл; средняя соответствует фрагменту Mobiluncus curtisii (размер 323 п.н.) в количестве 104 копий/мл; нижняя – фрагменту Fusobacterium spp. (размер 230 п.н.) в количестве 104 копий/мл. ОК − отрицательный контроль. 1-9 – клинические образцы «контрольной» группы. 11-19 - клинические образцы групп «бактериальный вагиноз» На рисунке 2 представлены электрофореграммы результатов выявления из некоторых образцов «контрольной» группы (рис. 2А) и групп «бактериальный вагиноз» (рис.2Б) трех видов анаэробных бактерий при помощи мультиплексной диагностической тест-системы «АнаэрАм» с тремя парами праймеров, специфичных для фрагментов геномов Prevotella bivia (фрагмент размером 454 п.н.), Mobiluncus curtisii (323 п.н.) и Fusobacterium spp. (230 п.н.). Во всех 50 образцах (100%) «контрольной» группы анаэробные бактерии Fusobacterium spp., Mobiluncus curtisii, Prevotella bivia выявлены не были. На рисунке 2А представлены результаты некоторых из исследованных образцов «контрольной» группы. Во всех 96 образцах (100%) групп «бактериальный вагиноз» выявлено от одного до трех видов анаэробных бактерий в количестве более 104 копий/мл, при этом в 45 образцах (46,9%) обнаруживались все три вида бактерий. На рисунке 2Б представлены результаты некоторых из исследованных образцов групп «бактериальный вагиноз». При культуральном исследовании (таблица 12) в 47 образцах (94,0%) контрольной группы, которые в ПЦР соответствовали показателям нормофлоры, титр Lactobacillus spp. составлял от 109 до 1011 КОЕ/мл, а G.vaginalis или не определялась (в 27 образцах) или ее титр не превышал 106 КОЕ/мл (в 20 образцах). В 3 случаях, соответствовавших в ПЦР норме, Lactobacillus spp. определялись в титре 105-106 КОЕ/мл и G. vaginalis - 104-105 КОЕ/мл. Условно-патогенные микроорганизмы (Staphylococcus spp., Streptococcus spp , E. coli, Enterobacteriaceae) в контрольной группе содержались в низких титрах (менее 10 4 КОЕ/мл). (Таблица 11) ^ (Таблица 12) во всех 50 образцах (100%) Lactobacillus spp. определялись в количестве более 108 копий/мл, а G. vaginalis – менее 106 копий/мл, что соответствует показателям нормы. Во всех 50 образцах (100%) контрольной группы анаэробные бактерии - Fusobacterium spp., Mobiluncus curtisii, Prevotella bivia выявлены не были. (рис.1, 2А). (Таблица 13). При культуральном исследовании в I группе (Таблица 11) во влагалищном отделяемом женщин доминировали следующие микроорганизмы: G. vaginalis (100,0%), Bacteroides spp. (20,0%), Mobiluncus spp. (20,0%), Prevotella spp. (13,3%), Peptostreptococcus spp. (13,3%), Fusobacterium spp. (3,3%). Lactobacillus spp. (Таблица 12) не выявлялись в 11 (36,7%) образцах; выявлялись в титре 104-5 КОЕ/мл в 7 (23,3%) образцах и в титре 107-8 КОЕ/мл в 12 (40,0%) образцах. Условно-патогенные микроорганизмы (Staphylococcus spp., Streptococcus spp, E. coli) встречались в низком титре (менее 10 4 КОЕ/мл). ^ женщин Lactobacillus spp. определялись в количестве менее 108 копий/мл, из них в 11 (36,7%) – не выявлялись; G. vaginalis - в количестве более 107 копий/мл, что полностью соответствует клиническому диагнозу бактериальный вагиноз. (Таблица 12). Выделилось три подгруппы образцов, различающихся количеством Lactobacillus spp. при одинаковом содержании G. vaginalis. Выделение анаэробных бактерий (104 и более копий/мл) методом ПЦР: Prevotella bivia (36,7%), Mobiluncus curtisii (60,0%), Fusobacterium spp. (33,3%) (рис.1,2Б). ^ получены следующие результаты. (Таблица 11). Характерно преобладание морфотипов: G. vaginalis (100,0%), Prevotella spp. (25,0%), Bacteroides spp. (41,7%) во влагалищном отделяемом. Lactobacillus spp. (Таблица 12) выявлялись в 4 (33,3%) случаях в титре 104-5 КОЕ/мл, в 5 (41,7%) случаях – не выявлялись, в 3 (25,0%) случаях – в титре 106-7КОЕ/мл. В последних 3 упомянутых образцах выявлено одинаковое количество Lactobacillus spp. и G. vaginalis (106-7КОЕ/мл). Эти образцы по-видимому, можно отнести к “пограничному” состоянию микрофлоры генитального тракта. Наибольший удельный вес (Таблица 11) приходился на сочетание бактериального вагиноза и кандидозного вульвовагинита. Такая микробиологическая картина влагалищного микроценоза выявлена у 9 (75,0%) из 12 женщин II группы. Среди видов дрожжеподобных грибов доминировал вид Candida albicans - 8 (88,9%), в одном случае был выделен вид Candida glabrata- (11,1%). Ассоциация возбудителей бактериального вагиноза с условно-патогенными бактериям (E. coli, Streptococcus spp, Enterobacteriaceae) в высоком титре (более 105 КОЕ/мл) в микробиотопах влагалища имела место у 5 (41,7%) из 12 женщин II группы. Также у двух женщин выявлена U. urealyticum в титре 103. ^ (Таблица 12) в 9 (75,0%) образцах II группы женщин G. vaginalis определялась в количестве более 107 копий/мл, в 3 (25,0%) - в количестве (более 106 менее 107) приблизительно 107 копий/мл. Во всех случаях Lactobacillus spp. определялись методом ПЦР в количестве менее 108 копий/мл, из них в 5 (41,7 %) - не выявлялись. Выделение анаэробных бактерий (104 и более копий/мл) методом ПЦР: Prevotella bivia (66,7%), Mobiluncus curtisii (25,0%), Fusobacterium spp. (33,3%) (рис.1,2Б). (Таблица 13). Анализируя результаты культурального исследования женщин III группы (Таблица 11), обращает на себя внимание абсолютное доминирование G. vaginalis (100,0 %), Bacteroides spp.(85,2%), Prevotella spp. (27,8%), Mobiluncus spp. (9,3%), Fusobacterium spp. (5,6%). Lactobacillus spp. (Таблица 12) выявлялись в 18 (33,3%) случаях в титре 107-8 КОЕ/мл, в 14 (25,9%) случаях в титре 104-5 КОЕ/мл, в 15 (27,8%) случаях – не выявлялись, в 7 (12,9%) случаях – в титре 106-7КОЕ/мл. Последние 7 упомянутых образцов, в которых выявлено одинаковое количество Lactobacillus spp. и G. vaginalis (106-7КОЕ/мл), отнесены к “пограничному” состоянию микрофлоры генитального тракта. Ассоциация возбудителей бактериального вагиноза с условно-патогенными бактериями (E. coli, Enterobacteriaceae, U. Urealyticum, M. hominis) в высоком титре (более 105 КОЕ/мл) и C. trachomatis в микробиотопах влагалища имела место у большинства женщин III группы. (Таблица 14). ^ у обследованных женщин на факультативно-анаэробные бактерии, грибы и лактобациллы.
* - различия достоверны, р < 0,05 ^
* - различия достоверны, р < 0,05 ^ женщин с помощью ПЦР (набор “ЛактАм”) и культурального метода.
Таблица 13 ^ Prevotella bivia, Ureaplasma urealyticum, Mycoplasma hominis (наборы «АнаэрАм», «УреАм», «МикгАм»).
^ (Таблица 12) в 47 (87,1%) образцах III группы женщин G. vaginalis определялась в количестве более 107 копий/мл, в 7 (12,9%) - в количестве (более 106 менее 107) - приблизительно 107 копий/мл. Во всех случаях Lactobacillus spp. определялись методом ПЦР в количестве менее 108 копий/мл, из них в 15 (27,8 %) - не выявлялись. Выделение анаэробных бактерий (104 и более копий/мл) методом ПЦР: Prevotella bivia (40,7%), Mobiluncus curtisii (44,4%), Fusobacterium spp. (35,2%) (рис.1, 2Б). (Таблица 13). Таким образом, при анализе результатов культурального исследования вагинального отделяемого у обследованных женщин на факультативно-анаэробные бактерии, грибы и лактобациллы были получены следующие достоверно значимые показатели. Lactobacillus spp. (Таблица 11) в титре до 106 КОЕ/мл – наиболее характерны для II и III групп (75,0±14,9% и 87,1±15,3% соответственно) по сравнению с I и контрольной группами (60,0±7,1% и 6,0±0,3%, соответственно), (р < 0,05). В контрольной группе в отличие от всех трех других групп с бактериальным вагинозом Lactobacillus spp. в титре 10 7 и более КОЕ/мл были зарегистрированы в 94,0±8,7%. Противоположная ситуация выявлена при анализе титров G. vaginalis: в титре 10 7 и более КОЕ/мл G. vaginalis чаще выявлялись в трех группах с бактериальным вагинозом (98,3±9,3%, 95,8±15,7%, 99,1±15,7%, соответственно, р < 0,05) по сравнению с контрольной группой (1,0±0,2%). В титре до 106 КОЕ/мл G. vaginalis – чаще выявлялись в контрольной группе (99±8,9%) в отличие от всех трех других групп с бактериальным вагинозом. Также были выявлены достоверно значимые особенности титров Peptostreptococcus spp., Staphylococcus spp., Streptococcus spp. Enterobacteriaceae (до 104 КОЕ/мл) - наиболее характерны для контрольной группы (24,0±4,7%, 22,0±4,3%, 14,0±1,2%, 14,0±1,2%, соответственно, р < 0,05); Prevotella spp., Bacteroides spp., E.coli, Enterobacteriaceae (10 5 и более КОЕ/мл), M. hominis и U. urealyticum (10 4 и более КОЕ/мл) – наиболее характерны для группы бактериального вагиноза в ассоциации с патогенными и/или условно-патогенными возбудителями инфекций урогенитального тракта (27,8±6,0%, 85,2±15,0%, 12,9±2,7%, 16,7±3,07%, 40,7±6,5%, 57,4±6,7%, соответственно, р < 0,05). Дрожжеподобные грибы рода Candida (в титре 104 и более КОЕ/мл) – характерны для группы с бактериального вагиноза в ассоциации с кандидозным вульвовагинитом (75,0±14,9%). (р < 0,05). ![]() ПЦР Бак. посев Диаграмма к таблицам 11, 12. * - различия достоверны, р < 0,05 Диаграмма к таблицам 11,13.* - различия достоверны, р < 0,05 3.1.4. Ассоциации бактериального вагиноза с патогенными и/или условно-патогенными возбудителями урогенитальных инфекций. Таблица 14. Результаты сочетания бактериального вагиноза с патогенными и/или условно-патогенными микроорганизмами у пациенток III группы.
* - различия достоверны, р < 0,05. Как видно из представленных данных в таблице 14, в III группе женщин методом ПЦР и/или культуральным методом с количественной оценкой обнаружены C. trachomatis у 32 (59,37,1%) пациенток, U. Urealyticum у 39 (72,211,4%) и M. hominis в высоком титре – у 26 (48,16,7%). Выявлено, что чаще бактериальный вагиноз ассоциировался с U. urealyticum по сравнению с M. hominis (р < 0,05). Только U. Urealyticum в высоком титре обнаружена у 8 (14,8%) женщин, только M. hominis в высоком титре – у 5 (9,3%), только C. trachomatis – у 8 (14,8%). Таким образом, ассоциация бактериального вагиноза с одним инфекционным агентом в III группе женщин наблюдалась в 21 (38,96,3%) случае. Ассоциация с двумя инфекционными агентами - у 23 (42,66,5%) пациенток, из них у 9 (39,1%) бактериальный вагиноз сочетался с U. Urealyticum и M. hominis в высоком титре, у 12 (52,2%) с C. trachomatis и U. Urealyticum, у 2 (8,7%) C. trachomatis и M. hominis. У 10 (18,53,5%) пациенток наблюдалась ассоциация бактериального вагиноза с тремя инфекционными агентами: C. trachomatis, U. Urealyticum и M. hominis. Выявлено, что реже встречались ассоциации бактериального вагиноза с тремя инфекционными агентами по сравнению с одним и двумя (18,53,5%, 38,96,3%, 42,66,5%, соответственно, р < 0,05). К важным особенностям урогенитального хламидиоза, помимо его малосимптомности и высокой частоты осложнений, относится часто встречающаяся ассоциация с другими возбудителями ИППП, а также многоочаговость с вовлечением в патологический процесс не только мочеполовых органов, но и нередко прямой кишки, глотки, глаз, суставов, сердца, кожи /35,40,51,61/. Все 32 пациентки с выявленным урогенитальным хламидиозом были обследованы для исключения многоочаговости инфекционного процесса. При этом (таблица 15): методом ПЦР C. trachomatis были обнаружены в ректум – у 15 (46,94,3%), в ротоглотке – у 21 (65,67,5%) женщин. Таким образом, C. trachomatis чаще выявлялись в урогенитальном очаге (уретра и цервикальный канал) по сравнению с хламидийным поражением ректум и ротоглотки (98,49,3%, 46,94,3%, 65,67,5%, соответственно), (р < 0,05). C. trachomatis из 2 очагов обнаружены у 18 (56,36,3%) пациенток, из них: у 12 (66,7%) - в урогенитальном очаге и ротоглотке, у 6 (33,3%) в урогенитальном очаге и ректум. C. trachomatis из 3 очагов обнаружены у 9 (28,13,0%) пациенток – в урогенитальном очаге, ротоглотке и ректум. Следует отметить, что значительно чаще C. trachomatis выявлялись из двух очагов, чем из трех и одного (56,36,3%, 28,13,0%, 15,61,9%, соответственно), (р < 0,05). Таким образом, многоочаговость с вовлечением экстрагенитальных очагов хламидийной инфекции наблюдалась в 27 (84,4%) из 32 случаев. ^ Результаты клинического обследования с учетом многоочаговости хламидийной инфекции у пациенток III группы.
* - различия достоверны, р < 0,05 Среди 21 (65,67,5%) пациентки с наличием C. trachomatis в ротоглотке, 17 (80,9%) страдали хроническим фарингитом и/или хроническим тонзиллитом. При этом все они практиковали орогенитальные контакты. Среди 15 (46,94,3%) пациенток с наличием C. trachomatis в ректум, 8 (53,3%) женщин практиковали аногенитальные контакты, при этом явления проктита были обнаружены в 4 (26,7%) случаях. Таким образом, бактериальный вагиноз в настоящее время следует рассматривать не только как частую самостоятельную нозологическую единицу, но и как фон для дополнительного развития ИППП. В этой связи важное значение имеет тщательное лабораторное обследование каждой больной бактериальным вагинозом на ИППП, в том числе проведение скрининга на наличие экстрагенитальных очагов хламидийной инфекции. Обращает на себя внимание, что даже при отсутствии ИППП, у больных бактериальным вагинозом, помимо поражения влагалища, имеют место признаки цервицита и/или уретрита. Это может быть обусловлено реализацией патогенных свойств условно-патогенных микроорганизмов. ^ . |
||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||