|
Скачать 337.3 Kb.
|
Это HTML версия файла http://www.msaab.ru/public/avtoref/13.doc. G o o g l e автоматически создает HTML версии документов при сканировании Интернета. На правах рукописи КРЮКОВСКАЯ ГАЛИНА МИХАЙЛОВНА Морфофункциональные изменения при хроническом гастрите у собак и воздействии ЭМИ КВЧ миллиметрового диапазона Специальность 16.00.02 – Патология, онкология и морфология животных АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата ветеринарных наук Москва 2006 Работа выполнена на кафедре незаразных болезней ФАО ГОУ ВПО Московского государственного университета прикладной биотехнологии. Научный руководитель: ^ заслуженный деятель науки РФ, академик РАСХН, доктор ветеринарных наук, профессор Официальные оппоненты: ^ доктор ветеринарных наук, (ГНУ ВНИИМП) ^ кандидат ветеринарных наук (ФГУ ЦНПВРЛ) Ведущая организация: ГОУ ВПО Российский университет дружбы народов Защита диссертации состоится «______»_________2007 г. в ______часов на заседании диссертационного совета Д - 16.00.02 в ФАО ГОУ ВПО Московском государственном университете прикладной биотехнологии (109316, Москва, ул. Талалихина, д. 33) С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке МГУПБ. Автореферат разослан «____» _______________ 2006 г. Ученый секретарь диссертационного совета д.в.н., проф. И.Р. Смирнова ^ Актуальность темы. Данные отечественных и зарубежных авторов свидетельствуют о высокой (45-50 %) заболеваемости собак гастроэнтеритами и большой смертности (34,73 % от общего падежа) (А.Д. Белов и соавт., 1992; Жд. Симпсон, 2003; А.И. Бутенков, 2005). Большая часть заболеваний органов желудочно-кишечного тракта у собак связана с поражениями желудка, наиболее частыми из которых являются гастриты. Несмотря на достигнутые успехи, такие важные вопросы, как ранняя диагностика, патогенез, клинико-морфологические изменения и терапия, при хронических гастритах у собак еще не нашли окончательного решения. Точная постановка диагноза, основанная на сборе анамнеза, тщательном клиническом обследовании, лабораторных и инструментальных исследованиях, позволяет установить взаимосвязь функциональных и морфологических изменений при хронических гастритах (П. Янев, 1978; Б.В. Уша и соавт, 1998; О. Ю. Герасименко, 2003; И.А. Шкуратова, А.А. Ткачев-Кузьмин, Т.Б. Горовая, А.В. Тютюнников, 2006; R. Cheli, A. Giacosa, 1986; R. M. Hardy, 1989). С целью оценки и повышения эффективности тех или иных лечебно-профилактических мероприятий возникает необходимость морфологического контроля за биологическими процессами в организме животных (А.В. Жаров, Ю.П. Жарова, 2006). Часто возникающие осложнения, рецидивы при хронических гастритах настоятельно диктуют необходимость разработки и внедрения новых методов терапии. Проблемы, связанные с патогенетическими средствами терапии животных, были и остаются одними из наиболее актуальных. В последние годы все больше внимания уделяют физиотерапевтическим методам профилактики и лечения заболеваний с использованием высокоэффективных лечебных средств. Так, например, широко используется электромагнитное поле крайне-высоких частот (ЭМИ КВЧ) с длиной волны 3,8-7,1 мм на области биологически активных точек (БАТ) (Н.Д. Девятков и др., 1991; Э.В. Биняшевский и др., 1992; С.П. Ситько, 1994; А.Е. Бессонов, 1997). В ветеринарной медицине накопился определенный опыт по применению ЭМИ КВЧ, однако возможность и целесообразность применения их в качестве монотерапии при хронических формах гастрита у собак не рассматривалась в доступной нам литературе. Поэтому изучение возможности и целесообразности применения такого метода коррекции при заболеваниях, характеризующихся нарушением целостности слизистой оболочки органов пищеварения, является весьма актуальным. ^ Целью данной работы явилось изучение морфофунциональных изменений при хронических гастритах у собак и возможность применения КВЧ-излучений для их коррекции. Для достижения намеченной цели были поставлены следующие задачи: ● Выявить основные симптомокомплексы хронического течения гастрита. ● Изучить структурно-функциональные изменения слизистой оболочки желудка у собак при хроническом гастрите. ● Провести комплекс лабораторных морфометрических и биохимических исследований при хроническом гастрите. ● Изучить воздействие ЭМИ КВЧ на организм и возможность применения его для коррекции морфологических и функциональных показателей при хронических гастритах у собак. ^ Дана обобщающая характеристика форм хронического гастрита в различных отделах желудка у собак 3 − 5-летнего возраста. Впервые приведены данные морфометрического исследования эритроцитов, динамики содержания кортизола и фагоцитарной активности нейтрофилов при данной патологии. Представлены результаты комплексного копрологического исследования при хроническом гастрите. Впервые показана возможность использования КВЧ-излучений при облучении эпигастральной области и по сагиттальной линии в центре теменной кости для функциональной коррекции хронического гастрита собак различных форм морфогенеза. ^ Установлено, что при хроническом гастрите у собак в патологический процесс вовлекаются и другие органы желудочно-кишечного тракта, а также звенья неспецифической резистентности и гормонального статуса, что осложняет репаративные процессы слизистой желудка. Полученные данные углубляют и дополняют сведения о морфогенезе хронических гастритов у собак. Результаты исследования могут служить методологической основой для применения системного анализа в лабораторной практике ветеринарных клиник. Доказано, что применение КВЧ-излучений терапевтических частот является эффективным средством коррекции при хронических гастритах. При этом установлено, что при хроническом катаральном гастрите основные морфо-функциональные проявления купируются на 5 день после начала процедур. ^ ● Морфофункциональные изменения слизистой оболочки желудка при хронических гастритах у собак. ● Морфометрические и биохимические изменения в организме собак при хронических гастритах. ● Эффективность воздействия моноЭМИ КВЧ для коррекции и профилактики хронических гастритов. Связь исследований с научной программой. Диссертационная работа выполнена в соответствии с заданием 7-2-01 34.39.05 «Разработка аппаратурных комплексов миллиметрового воздействия и мониторинга их состояния на живые системы в условиях профилактики и лечения на основе эффекта биорезонанса». ^ . Материалы исследования доложены на научных конференциях: Международной научно-практической конференции «Актуальные проблемы ветеринарной патологии и морфологии животных»; «Актуальные проблемы болезней органов размножения и молочной железы у животных» (ВНИВИПФиТ, Воронеж, 2002, 2005, 2006); 4-й и 5-й Международной научно-практической конференции «Актуальные проблемы ветеринарной медицины и ветеринарно-санитарного контроля сельскохозяйственной продукции» (МГУПБ, Москва, 2002, 2004); Международной научно-практической конференции «Актуальные проблемы инвазионной, инфекционной и незаразной патологии животных» (СГУ, Ставрополь, 2003); XI, ХII Международном Московском конгрессе (2003, 2004); Международном симпозиуме, посвященном 45-летию образования института «Научные основы обеспечения защиты животных от экзотоксикантов, радионуклидов и возбудителей опасных инфекционных заболеваний» (ФГУ ФЦТРБ – ВНИВИ, Казань, 2005); Актуальные проблемы инфекционной патологии и иммунологии животных (РАСХН, отделение ветеринарной медицины, ГНУ ВНИИЭВ, 2006). Публикации. По теме диссертации опубликовано 14 научных работ. ^ Диссертация изложена на 180 страницах машинописного текста, содержит 17 таблиц и 34 рисунка. Работа включает введение, обзор литературы, собственные исследования, обсуждение результатов исследований, выводы и практические предложения, приложения. Список использованной литературы содержит 204 источника, в том числе 146 отечественных и 58 иностранных авторов. ^ 2.1. Материалы и методы Работа выполнена на кафедре «Незаразные болезни» МГУ прикладной биотехнологии. Исследования проводились на базе ветеринарной клиники при МГУПБ в период с 2000 по 2006 гг. Всего было обследовано 1309 собак различных пород и возраста. На основании клинических и эндоскопических исследований хронический гастрит был установлен в 24 % случаев. По принципу аналогов были отобраны 49 собак в возрасте от 3 до 5 лет, весовой категории «крупные» – массой от 25 до 40 кг, с натуральным типом кормления, свободные от инфекционной и инвазионной патологии. Контрольную группу составили 10 клинически здоровых собак. Исследования клинического статуса проводили по общепринятой методике. Учет клинического состояния проводили на протяжении всего цикла исследований. Морфологические и биохимические исследования крови, мочи и копрологию проводили до лечения, на 5-й, 10-й день лечения и на 30-й день наблюдения. Морфологические методы исследования Эндоскопическое исследование выполняли с использованием гастрофиброскопа CLE-4U (фирма «Olympus», Япония). Оценивали макроскопическую картину слизистой оболочки, включая рельеф поверхности, цвет, сосудистый рисунок, внутрижелудочное содержимое, состояние естественных сфинктеров, моторную деятельность; выявляли наличие ульцирозных изменений; определяли локализацию и степень выраженности обнаруженных диффузных и очаговых отклонений. После детальной ревизии органов проводили забор биопсийного материала. Для цитологического исследования печени проводили биопсию по стандартной методике (Дж. Симпсон и соавт., 2003) при помощи цитопункции биопсийной иглой «Уша». Образцы фиксировали в 10%-ном растворе формалина. Микроскопию проводили на фазово-контрастном световом микроскопе австрийской фирмы «Лейц» с последующим увеличением ×120, × 400, × 900. Клинические и биохимические методы исследования Кровь для лабораторного исследования брали натощак из подкожной вены предплечья. Клинический анализ крови включал: определение числа эритроцитов, лейкоцитов, тромбоцитов в сетке камеры Горяева; выведение лейкограммы − путем подсчета лейкоцитов в мазках, окрашенных по Романовскому-Гимза; содержание гемоглобина определяли унифицированным колориметрическим методом; определение гематокрита − с помощью микроцентрифуги при 8 тыс. об/мин – 5 мин; СОЭ – по методу Панченкова; эритроцитометрию (МСV, MCH, МСНС) – расчетным методом; исследование фагоцитарной активности нейтрофилов in vitro − по стандартной методике с расчетом индекса фагоцитарной завершенности. В сыворотке крови определяли содержание общего белка, общего и прямого билирубина, мочевины, креатинина, холестерина, кальция, глюкозы, активность аспартат- и аланинаминотрансфераз (АсАТ, АлАТ), щелочной фосфатазы (ЩФ) и α-амилазы. Общий белок, общий и прямой билирубин, мочевину, креатинин, холестерин, кальций, глюкозу и кортизол − унифицированными методами на спектрофотометре КФК-2 – УХЛ 42 N 8601217 и фотометре иммуноферментном планшетном ЭФОС 9305 ПКГШ. 941417.00 РЭ (ТУ -2-375 – 86). Копрограмма включала: макроскопическую характеристику и микроскопическую морфологическую оценку переваренных и непереваренных компонентов корма (результаты оценивали в у.е. – количество объектов в полях зрения в препарате, выраженное в %; клеточных элементов – в поле зрения). Биохимическое исследование фекалий включало: определение рН; обнаружение билирубина качественной реакцией с реактивом Фуше; обнаружение стеркобелина пробой Нейбаура; определение скрытой крови с применением бензидиновой пробы. Исследование фекалий на яйца глист проводили унифицированным методом Фюлеборна. Определение остаточной активности трипсина в фекалиях – тестом желатиновой пробирки (W. Jams Simpson, Roderick W. Else, 2003). Исследования мочи включали оценку физико-химических характеристик с помощью урометра и тест-полосок «Гексафан» фирмы «Лахема», а также микроскопическое исследование осадка. Методы воздействия на организм Для изучения влияния ЭМИ КВЧ на эффективность терапии собак при хроническом гастрите использовали лечебный генератор «Явь-1», «Милта-КВЧ-терминал» с рабочей частотой 53530 МГц, с длинной волны 5,6 мм. Выходная мощность 25-30 мВт. Плотность мощности облучения в пересчете на сечение раструба рупора – не менее 10 МВт/ см2. Основные зоны воздействия – на эпигастральную область, по сагиттальной линии в центре теменной кости (Б.В. Уша, 1984; Г.В. Казеев, 2000). Общее количество процедур до 10. Общее время сеанса до 20 мин. Медикаментозную терапию не проводили. Полученные результаты обработаны статистически с использованием пакета программ Microsoft Exel 2000, для оценки достоверности результатов использовали критерий Стьюдента, принятый для сравнения средних значений (Н.В. Глотов и соавт., 1982). ^ 3.1. Результаты клинического обследования собак По результатам исследований клиническая картина характеризовалась в первую очередь наличием диспептических явлений (95,47 %), включающих периодическую тошноту и рвоту. Результаты клинического исследования представлены на рис 1. Рис. 1. Основные клинические признаки, выявленные при осмотре собак с хроническим гастритом Дискинетическую диспепсию (перемежающиеся диарея и запоры) выявляли в 68,64 % случаев, дизорексию – в 57,82 % случаев. Болевой синдром эпигастральной и умбиликальной зон области желудка у собак отмечали в 68,54 % случаев. Практически во всех случаях отмечали халикоз – в 74,56 %. Кожные манифестации, включающие зуд, аллопеции, поражения эпидермиса различной степени тяжести, зарегистрированы у 64,47 % исследуемых животных. Перечисленные выше признаки не являются специфическими и могут представлять симптомы широкого спектра нарушений пищеварения. Для верификации диагноза мы проводили эндоскопическое и гистологическое исследование желудка и проксимального отдела двенадцатиперстной кишки. По данным комплексного эндоскопического и патоморфологического исследования выявлены две различные по морфогенезу формы хронического патологического процесса в желудке. Первая – воспалительная, представляет катаральный гастрит и встречается у метисов. Вторая – дистрофическо-атрофическая, соответствует понятию гастропатии (Г.А. Лапий, 1998), в основном встречается у собак пород овчарка и лабрадор. Эндоскопическая картина гастрита характеризовалась широким спектром изменений, включающих экссудативно-эритематозные, деструктивные, атрофические и гиперпластические проявления, наиболее выраженные в антральном отделе желудка. Патогистологические изменения слизистой оболочки желудка, проявляющиеся деструктивно-дистрофическими повреждениями эпителия в сочетании с сосудисто-клеточной реакцией стромы, характеризуются относительно медленным прогрессированием и относительно выраженной стадийностью процесса, что в итоге приводит к атрофии и склерозу слизистой оболочки. Патологический процесс, как правило, возникает в антральном отделе желудка с последующим распространением на фундальную зону. Полученные результаты, характеризующие катаральный хронический гастрит, выявили основные поражения слизистой оболочки желудка, которые локализовались в фундальной и/или кардиальной частях. При этом в 22 (44,89 %) случаях нарушения слизистой оболочки у одних и тех же животных наблюдались как в фундальной, так и в пилорической частях желудка в виде изменений различной степени. У 8 (16,33 %) собак наблюдали гиперемию, эритему, рыхлость и отек ткани. Слизистая оболочка в этих участках была покрыта слизью, что придавало ей своеобразный блеск. У 7 (14,28 %) животных в единичных случаях экссудативно-эритематозные явления были очаговыми, проявлялись в виде ограниченных участков, пятен и полос, слизистая оболочка выглядела «пестрой», при этом чаще поражался антральный отдел желудка. В других случаях гиперемия слизистой оболочки антрального отдела пилорической части желудка была значительной, занимая иногда до 30-40 % поверхности и распространяясь на дистальную и проксимальную поверхности желудка. Желудочные складки ровные, гладкие, не активно (вяло) принимали участие в проведении перистальтических волн; в отдельных случаях они были несколько утолщенными вследствие отека ткани. В фундальной части желудка отмечали выраженную складчатость слизистой оболочки. В кардиальной части складки возле сфинктера более выражены и разглаживаются к пищеводному участку. Слизистая серо-красного цвета, эластичность заметно снижена. При гастропатии эндоскопически доминируют атрофические изменения слизистой оболочки желудка, имеющие мультифокальный характер распространения с поражением его фундальной и пилорической частей. Макроскопически патологические очаги проявлялись слегка западающими округлыми участками истончения с измененной бледной окраской, что придавало поверхности желудка своеобразный мелкопятнистый вид. Слизистая оболочка заметно истончена. На фоне тусклой белесоватой поверхности местами проступал нежный рисунок сосудов подслизистого слоя. В таких случаях отмечали значительную гипотонию гастральной моторики. Смешанные формы поражения желудочной стенки были отмечены в 27 (55,1 %) случаях. При этом атрофические изменения слизистой оболочки развивались на фоне резко выраженных экссудативно-эритематозных повреждений ткани. В 4 (8,16 %) наблюдениях атрофические изменения слизистой оболочки сочетались с явлениями ее очаговой гиперплазии, выражающейся в появлении ограниченных участков утолщения или мелкоузелковых разрастаний. У 12 (24,5 %) собак эндоскопическое исследование показало наличие гипертрофических изменений в желудке. Макроскопическая картина характеризовалась наличием грубых, деформированных складок, придающих поверхности органа своеобразный бугристый вид. Такие изменения имели место в различных участках желудка, но чаще их обнаруживали в антральном отделе. Ульцирозные явления (21 случай, или 42,8 %) проявлялись плоскими или приподнятыми эрозивными дефектами размером 0,3-0,17 см. Края эрозий были отечными, гиперемированными и возвышались в виде валика. Изредка образование эрозий происходило на фоне атрофического процесса в желудке. Плоские эрозии представляли собой множественные поверхностные повреждения слизистой оболочки размером 0,3-0,5 см, иногда покрытые налетом фибрина, с узким ободком краевой гиперемии. Приподнятые эрозии желудка выявляли в виде одиночных или множественных, расположенных цепочками набуханий размером 0,5-1,0 см, в центре которых определялся кратерообразный участок некроза. Пространственная реорганизация слизистой оболочки желудка свидетельствует о формировании микроциркуляторной недостаточности, паренхиматозно-стромальные взаимоотношения в этих условиях реализуются в индукции склерогенеза. Типичная эндоскопическая картина в начальном отделе двенадцатиперстной кишки в области луковицы характеризовалась, прежде всего, экссудативно-эритематозными явлениями различной интенсивности. Слизистая оболочка луковицы привратника ярко гиперемирована, иногда кровоточила при контакте с гастроскопом, имела своеобразный блеск и «лаковый» вид. На основании данных анамнеза, физикального обследования, клинического и эндоскопического исследований нами диагностирован хронический гастрит. Мы считаем, что сформулировать диагноз позволяет использование комплекса диагностических исследований. Результаты наших исследований позволили выявить следующие гематологические характеристики для животных с поражением слизистой желудка: умеренный лейкоцитоз с нейтрофильным сдвигом гранулоцитов и достоверным снижением лимфоцитов, незначительную эритропению, вторичную макроцитарную, гипохромную анемию. Независимо от форм хронического гастрита существенных различий при гематологических и копрологических исследованиях не выявляли, поэтому материал дается обобщенным. Как показали результаты клинического исследования крови, содержание эритроцитов в крови экспериментальных собак с хроническим поражением слизистой желудка составило в среднем 4,75±0,08×1012 /л, тогда как у здоровых животных содержание эритроцитов колебалось в пределах 6,60±0,33×1012 /л. При микроскопировании нативных препаратов крови выявляли анизоцитоз, акантоцитоз, фрагменты разрушенных эритроцитов (шизоциты, шлемовидные эритроциты) и регистрировали агрегацию эритроцитов значительно чаще, чем у здоровых животных. Рис. 2. Клинические параметры крови собак Количество гемоглобина у экспериментальных собак по сравнению со здоровыми снижено в 1,5 раза и составило в среднем 11,6±0,31 г/дл. Средняя концентрация гемоглобина в эритроците (МСНС) у экспериментальных собак составила 18,77±0,87 %, средний объем эритроцитов (МСV) – 130,84±5,24 мкм3, среднее содержание гемоглобина в эритроците (МСН) – 24,44±0,70 Пг. Индекс цветного показателя находится на нижних границах физиологической нормы и в среднем составляет 0,73±0,02. Скорость оседания эритроцитов у экспериментальных собак выше, чем у клинически здоровых в 2,2 раза (р<0,001) и составляет в среднем 6,83±0,94 мм/ч. Количество тромбоцитов колеблется в пределах физиологических величин и составляет 427,51±12,0 ×109/л. Гематокритная величина составляет у больных животных 62,10±2,02 %, у здоровых собак – 52,0±2,6 %. Повышение гематокрита в связи с гемоконцентрацией вероятнее всего связано с развитием панкреатита (Д.М. Хендерсон, 2001). Количество лейкоцитов в крови больных собак с хроническим поражением слизистой желудка составляло в среднем 15,27±0,59 ×109/л, тогда как у здоровых животных оно не превышало 8,10±0,04 ×109/л. Количество палочкоядерных нейтрофильных гранулоцитов в среднем колебалось в пределах 9,50±0,67 % при норме 1-6 %, сегментоядерных – до 76,21±3,81 % от общего числа лейкоцитов при норме 50-72 %. У здоровых собак количество сегментоядерных составило в среднем 70,21±3,5 %, палочкоядерных 3,0±1,3 % от общего числа лейкоцитов. Важнейшим критерием, определяющим тяжесть патологического процесса, служит степень нейтрофильного сдвига влево (А. Ройт, 1992). При хроническом гастрите развивается устойчивая нейтрофилия с достоверным снижением лимфоцитов (рис. 3). Рис. 3. Лейкограмма собак с хроническим гастритом Количество эозинофилов в крови экспериментальных собак составило в среднем 9,33±0,58 %, что превышало содержание этих клеток в крови здоровых собак в 1,8 раза. По данным E.F. Schiffman (2000), при хроническом гастрите, энтерите и колите наблюдается хорошо выраженная эозинофилия. Как видно из представленных в табл. 1 данных, хронический гастрит сопровождается нарушением фагоцитарной активности нейтрофилов. Фагоцитарный индекс Гамбургера ниже в 1,8 раз и составил в среднем 40,57±2,03 % у больных животных, что находится на нижней границе нормы (40-80 %). Фагоцитарное число Райта у экспериментальных животных составило в среднем 1,97±0,01 у.е., тогда как в контроле 7,0±0,35 у.е. Индекс фагоцитарной завершенности в экспериментальных группах соответствовал 0,99±0,05 у.е., тогда как в группе клинически здоровых животных – 1,42±0,07 у.е. Таблица 1 ^
Примечание: р < 0,001; * р < 0,05 – достоверность различий с соответствующим показателем группы клинически здоровых животных. По результатам биохимических исследований сыворотки крови среднее значение аланинамминотрасферазы (АлАТ) у больных собак составляет 19,47±0,72 ед/л, у здоровых – 13,50±0,68 ед/л. Изменение концентрации АлАТ в сыворотке крови считают чувствительным индикатором при частичном повреждении мембран большого количества гепатоцитов или некрозе небольшого числа клеток, в результате чего фермент выходит из гепатоцитов, однако это не всегда означает первичное или необратимое заболевание печени (Б.В. Уша, 2000; N.O. Brown, 1981; M.A. Crawford, W.D. Schall, 1985; A.Blaxter, 1987; М. Уиллард и соавт., 2004). Мы наблюдали увеличение активности α-амилазы в 1,47 раз (р<0,001), по сравнению с контрольной группой. Так как у собак основная доля α-амилазы вырабатывается поджелудочной железой, то повышение уровня амилазы в сыворотке крови может свидетельствовать о нарушении деятельности железы, что коррелирует с результатами копрологического исследования. Хронический панкреатит, широко распространенный среди собак, достаточно часто принимают за острый гастрит (Brobst, 1980). Другие исследуемые нами показатели биохимии крови оставались в пределах физиологических норм. Следует отметить, что по данным литературы, при первичном поражении желудочно-кишечного тракта биохимический профиль, как правило, остается в пределах нормы (М. Уиллард и соавт., 2004; Дж. Хендерсон, 2005). Концентрация в сыворотке крови общего белка, глюкозы у больных животных находилась на пороговых значениях физиологической нормы для данного вида животных, хотя и была ниже, чем у здоровых животных. Концентрация билирубина в сыворотке крови больных собак была умеренно повышена и соответствовала 4,07±0,36 мкмоль/л. Повышение уровня билирубина в сыворотке крови собак чаще всего связывают с воспалительной реакцией в области желчного пузыря, которая проявляется не только возрастанием уровня билирубина, но и повышением лейкоцитов, активности ферментов поджелудочной железы и абдоминальными болями. При хроническом течении гастрита в патологический процесс вовлекаются гепатоциты, в результате чего в сыворотке повышается уровень энзимов АсАТ и АлАТ. Оценка активности ЩФ дает возможность дифференцировать гепотоцеллюлярную патологию от обструктивных билиарных заболеваний печени. Выявленное нами умеренное увеличение АлАТ, билирубина и ЩФ при невысокой активности АсАТ и значительное увеличение активности α-амилазы характерно для панкреатита, холестаза и хронической печеночной недостаточности (Дж. Хендерсон, 2001; Дж. Симпсон, 2003). Рис. 4. Биохимический профиль сыворотки крови собак с хроническим гастритом Изучая морфогенез хронического гастрита, мы определили структурные изменения в печени, для чего использовали метод пункционной биопсии. В полученных биоптатах отмечали явления жировой и токсической дистрофии. В отдельных печеночных дольках в гепатоцитах выявляли вакуоли, соответствующие местам отложения жира. Печеночные клетки увеличены в объеме, округлой формы. В некоторых участках гистологических препаратов наблюдали декомпенсацию печеночных балок. Местами междольковая соединительная ткань инфильтрирована лимфоидными клетками. Результаты исследований подтверждают тот факт, что при хроническом гастрите в патологический процесс вовлекаются печень и другие системы организма, и речь может идти о развитии гепатогастроэнтерального синдрома. (В.И. Головахо, В.И. Левченко, 1995). Полученные результаты не противоречат данным других авторов, описывающих клинические изменения при заболеваниях желудка различного генеза (D.R. Strombeck & D.G. Gribble,1978; J.W. Simpson & R.W. Else, 1987; P.Sippoen, Chronic, 1990; Y. Benno, H. Nakao, K. Uchida, 1992; Б.В. Уша, И.М. Беляков, 1998; С. Э. Жавнис и соавт., 2000; Д. Хендерсон, 2001; W. Simpson, Roderick W. Else, 2003). Уровень кортизола в сыворотке крови больных животных превышает показатели у здоровых животных в 2,4 раза (р<0,001) (рис. 5). Рис. 5. Уровень кортизола в сыворотке крови собак с хроническим гастритом Известно, что повышенное содержание в крови кортизола усиливает катаболические процессы в слизистой, оказывает расслабляющее действие на сфинктерный аппарат гастродуоденальной области и усиливает кислотную продукцию слизистой оболочки желудка, что приводит к нарушению динамического равновесия агрессивно-протективных факторов слизистой гастродуоденальной области. Они вызывают снижение числа циркулирующих лимфоцитов, моноцитов, в то же время повышая выход полиморфноядерных лейкоцитов из костного мозга и тем самым, увеличивая число этих клеток в крови. Также многие авторы отмечают, что глюкокортикоиды в высокой концентрации тормозят иммунологический ответ организма–хозяина, вызывая, в том числе гибель лимфоцитов (Р. Мари и др., 1993). Это находит подтверждение в наших исследованиях фагоцитарной активности. Кроме того, в участках воспаления эти гормоны ингибируют пролиферацию фибробластов, а также некоторые функции этих клеток, например продукцию коллагена и фибронектина, что ведет к плохому заживлению. Исходя из вышеизложенного, мы считаем, что исследование уровня кортизола является важным фактором в диагностическом комплексе при хронических гастритах с ульцерозными проявлениями. Полученные нами результаты исследований еще раз свидетельствуют, что при хроническом гастрите в патологический процесс вовлекаются другие системы организма, участвующие в процессе пищеварения. При исследовании копрограммы от больных собак наблюдали характерные изменения, связанные с недостаточностью пищеварения, сопровождаемые амилореей, креатореей, стеатореей, и значительное содержание элементов слизистой оболочки в фекалиях. Остаточная трипсиновая активность фекалий была значительно низкой, не превышая титра 1/10. Отмечали положительную пробу на билирубин и крайне низкие значения стеркобилина. Описанные явления, характеризующие энзимопатию, являются следствием хронических процессов в желудке. При деструкции обкладочных клеток и замене их менее дифференцированными эпителиальными клетками (продуцирующими щелочной секрет), снижается концентрация хлороводородной кислоты, что ведет к нарушению трансформации пепсина из пепсиногена. Подобная перемежающая ахилия при воспалительных процессах, вероятно, связана с деструкцией эпителия, отеком поверхностного слоя слизистой с накоплением слизи, выраженной клеточной инфильтрацией, вызывающих возникновение механического препятствия на пути секреции. Снижение выделения внутреннего секрета Кастла (гастромукопротеинов) способствует развитию вторичной анемии, что косвенно подтверждается результатами гемограммы крови. ^ у собак с хроническим гастритом Результаты наших исследований показали, что после проведения пяти сеансов внешним КВЧ-излучением при контрольной эндоскопии у собак с катаральными явлениями поражения слизистой желудка отмечено выраженное уменьшение отека, отсутствие гиперемии, эритемы, рыхлости слизистой желудка. Во всех случаях наблюдалась активация гастральной моторики. Желудочные складки ровные, гладкие и эластичные, активно участвовали в перистальтических движениях. У собак с атрофическим поражением слизистой желудка регистрировали только незначительные локальные участки атрофии, эритемы, локализующиеся преимущественно в пилоантральной зоне. Выявляли области со слегка западающими округлыми участками истончения с бледной окраской, с сохранением своеобразного мелкопятнистого вида поверхности желудка. Во всех случаях мы отмечали активацию гастральной моторики. При эндоскопическом исследовании патологических изменений со стороны двенадцатиперстной кишки на 5 день КВЧ-терапии не выявляли. Признаки дуодено-гастрального рефлюкса не были отмечены ни у одного животного. Таким образом, результаты наших исследований подтвердили репаративное влияние КВЧ-излучений на клетки слизистой оболочки желудка, в результате которого при катаральном воспалении на 5 день отмечается восстановление структурной организации оболочки. При атрофическом гастрите восстановление отмечали после 10 сеансов КВЧ терапии. При микроскопировании нативных мазков крови на 5 день применения КВЧ-терапии отмечали уменьшение количества агрегированных эритроцитов до 1-2 монетных столбиков на мазок. В мазках не выявляли измененных по форме и размерам эритроцитов. Достоверные изменения параметров крови больных гастроэнтеритом собак под воздействием КВЧ-терапии отмечали на 5 сутки после начала процедур. Показатели гематокрита соответствовали видовым нормам уже с 5-го дня исследования у собак с явлениями хронического поверхностного гастрита. У собак с явлениями атрофического гастрита гематокрит соответствовал видовым нормам на 10-й день КВЧ-коррекции. Индексы эритроцитометрии в рамки физиологической нормы приходили только на 1-й день исследования. Скорость оседания эритроцитов в процессе воздействия ЭМИ КВЧ снизилась на 5-й день у собак с катаральным и с атрофическим гастритом в 2,3 раза (р<0,001). важно также отметить существенные изменения в лейкограмме и общем количестве лейкоцитов. На 5-й день после применения КВЧ излучений общее количество лейкоцитов у собак с поверхностным хроническим гастритом снизилось до области значений, характерных физиологическим нормам для данного вида и возраста собак. Однако у собак с атрофическими явлениями на 5-й день лечения количество лейкоцитов находилось на верхних границах видовых норм. На 10-й день после начала процедур количество лейкоцитов было в 2,2 раза ниже (р<0,001), чем до коррекции. На 30 день наблюдений количество лейкоцитов составило 7,81±2,2 ×109/л и 7,72±0,62 ×109/л соответственно. После проведения КВЧ-коррекции на 5-й день количество палочкоядерных нейтрофилов в крови собак с катаральным и атрофическим гастритом достоверно снизилось, и на 10-й день составило 1,51±0,80 и 1,81±0,031 %, соответственно. Отмечали увеличение лимфоцитов в 3 раза (р<0,001) на 5-й день после применения ЭМИ КВЧ. Компенсацию эозинофилии отмечали с 5-го дня лечения у собак с поверхностным гастритом. Однако у собак с явлениями атрофии количество эозинофилов приближалось к значениям нормы на 10-й день лечения. При исследовании оценки фагоцитарной активности нейтрофилов in vitro в процессе КВЧ-коррекции нами были выявлены существенные изменения. У собак с хроническим катаральным и хроническим атрофическим гастроэнтеритом при лечении КВЧ достоверных отклонений внутри подгрупп не отмечали. Результаты наших исследований совпадают с исследованиями И.В. Родштата, Н.Д. Девяткова и др., которые считают, что эффект усиления бактериального киллинга можно объяснить “кислородным взрывом” – образованием продуктов частичного восстановления кислорода (короткоживущего – синглетного), свободных радикалов, перекисей и других продуктов, обладающих высокой антимикробной активностью. Это подтверждает снижение уровня кортизола в сыворотке крови, который на 5-й день лечения существенно снизился в 3 раза и в дальнейшем не изменялся. На 10-й и 30-й дни показатель оставался в пределах нормы. Рис. 6. Динамика фагоцитарной активности нейтрофилов собак с хроническим гастритом при воздействии ЭМИ КВЧ Таким образом, мы отмечали, что КВЧ-коррекция способствует нормализации нарушенных функций неспецифической защиты организма, инициируя восстановление внутриклеточных энергетических процессов, тем самым способствует снижению сроков течения заболевания. При этом следует отметить, что у собак с хроническим гастроэнтеритом уровень АлАТ, АсАТ и ЩФ в сыворотке крови нормализовался на 10-й день воздействия КВЧ излучений и оставался на этом уровне в течение всего периода наблюдений (табл. 2). На 5-й день КВЧ-коррекции у собак с хроническим гастроэнтеритом содержание α-амилазы существенно снижалось и на 10-й день достигало диапазона нормальных показателей для данного вида и возраста собак. Дальнейшее наблюдение существенных отклонений не выявляло, и на 30-й день содержание α-амилазы составляло в среднем 32,89 ± 0,79 мг/(с∙л). Показатели билирубина в сыворотке крови собак с хроническим гастроэнтеритом имели тенденцию к снижению на 5-й и на 10-й дни применения КВЧ-излучений, а параметры глюкозы, общего белка – тенденцию к увеличению. Под действием КВЧ-излучений происходит нормализация процессов обмена в организме больных животных, что подтверждается нашими данными. Таблица 2 ^ гастроэнтеритом при воздействии ЭМИ КВЧ
Примечание: р<0,001; *- р<0,05 – достоверность различий с соответствующим показателем до коррекции. На 5-й день сеансов ЭМИ КВЧ уровень кортизола существенно снизился (в 3 раза), что составило 126,0±40,34 нмоль/л (р<0,001), и в дальнейшем тенденция не изменялась. Так, на 10-й день уровень кортизола оставался в пределах нормы (107,9±40,64 нмоль/л), на 30-й день наблюдения – 115,5±40,01 нмоль/л, что соответствует нормальным величинам для данного вида и возраста животных. Результаты исследований показали, что применение внешнего когерентного КВЧ-излучения снижает концентрацию непереваренных и полупереваренных компонентов корма в фекалиях. Уже на 5-й день лечения концентрация непереваренного и полупереваренного крахмала в фекалиях снизилась. В группе собак с хроническим поверхностным воспалением слизистой оболочки желудка на 5-й день КВЧ-коррекции мышечные волокна встречались в единичных случаях, а у собак с атрофическими поражениями количество полупереваренных мышечных волокон было значительно выше. На 10 и 30-й дни наблюдения мышечные волокна в фекалиях практически не встречались в пробах у всех собак. Соединительнотканные волокна не выявляли как на 5-й, 10-й день лечения, так и на 30-й день наблюдения. На 5 и 10-й дни применения КВЧ-коррекции нейтральный жир в пробах не обнаруживали. Концентрация его производных – мыл значительно снижалась по отношению к исходным данным, жирные кислоты в пробах не выявлялись. Нами отмечено снижение количества клеточных элементов в фекалиях, таких как эпителиальные клетки, лейкоциты и эритроциты. В группе собак с поверхностным гастритом на 5-й день КВЧ-терапии встречали единичные клетки в препарате, эритроциты не выявляли. Однако у животных с атрофическими поражениями слизистой количество клеток в поле зрения было выше в 9 раз (р<0,001), чем у животных с хроническим поверхностным гастритом. Достоверное снижение клеток в фекалиях собак с атрофическим гастритом отмечено лишь на 10-й день. В процессе КВЧ-коррекции в группе с поверхностным поражением слизистой желудка на 5-й день наблюдали умеренное повышение стеркобилина (в среднем до 44,9±2,96 мг/100г), тенденция к повышению этого показателя сохранялась до 30-го дня наблюдений. В группе с атрофическими явлениями достоверное повышение уровня стеркобилина отмечали на 10-й день лечения, и показатель сохранялся на этом уровне до 30-го дня наблюдения. Тест на протеолитическую активность фекалий с 5-го дня у всех собак был положительным в разведении 1/40. Таким образом, результаты исследований свидетельствуют, что применение КВЧ-излучения купирует нарушения, происходящие в организме при хроническом гастроэнтерите. При этом на сроки ликвидации этих проявлений существенное влияние оказывает форма гастрита. ВЫВОДЫ 1. Установлено, что у собак 3−5-летнего возраста хронический гастрит протекает по двум различным по морфогенезу формам: – воспалительная, (катаральный гастрит, 16,33 %) и дистрофическо-атрофическая (гастропатия, 83,67 %). Морфологические изменения при катаральной форме макроскопически (при эндоскопии) характеризуются гиперемией, эритемой, рыхлостью, отеком ткани с утолщением складок слизистой оболочки и нарушением гастральной моторики. При гастропатии − атрофическими изменениями слизистой оболочки желудка, имеющими мультифокальный характер. Слизистая оболочка макроскопически заметно истончена с выраженными сосудами подслизистого слоя, иногда с явлениями ее очаговой гиперплазии, гипертрофии, при этом эрозивные поражения локализуются главным образом в пилоантральной зоне желудка (42,85 %). Отмечена значительная гипотония гастральной моторики. 2. Микроскопическими исследованиями гастробиоптататов установлено, что в слизистой оболочке развивается сложный комплекс морфологических изменений, проявляющийся своеобразным сочетанием деструктивных и компенсаторных процессов. В биоптатах из ульцирозных дефектов выявлены зоны реорганизации слизистой оболочки, распространяющейся в пределах нескольких желудочных валиков различной глубины, иногда с деструкцией верхней части, тогда как глубокие отделы и зона желез оставались интактными. 3. Морфометрическими исследованиями крови отмечено, что независимо от форм хронического гастрита уровень эритроцитов снижается до 4,75±0,08×1012/л, гемоглобина до 11,6±0,31 г/дл. Средняя концентрация гемоглобина в эритроците (МСНС) составила 18,77±0,78 %, средний объем эритроцитов (МСV) – 130,84±5,24 мкм3, среднее содержание гемоглобина в эритроците (МСН) – 24,44±0,70 пг, что характеризует развитие вторичной макроцитарной гипохромной анемии и патологические изменениях в печени. Полученные данные показывают, что эритроцитометрия может служить скрининговым методом в диагностике осложненных хронических гастритов. Хроническое течение гастрита сопровождается изменениями лейкограммы крови с лейкоцитозом до 15,27±0,59×109/л, нейтрофильным сдвигом, достоверным снижением лимфоцитов до 4,97±0,25 % и повышением эозинофилов до 9,33±0,58 %. При этом характерно снижение фагоцитарной функции нейтрофилов. 4. Биохимические исследования показали увеличение АлАТ до 19,47±0,72 ед/л, при АсАт в среднем 12,06±0,33 ед/л; ЩФ до 75,32 ±1,24 ед/л, α-амилазы до 48,43 ± 2,31 мг/(с·л), общего билирубина до 4,07±0,36 мкмоль/л и кортизола до 578,9±160,99 нмоль/л, что может служить индикаторами морфо-функциональных изменений в организме и развитии гепатогастроэнтерального синдрома. 5. Морфологическими исследованиями копрограммы выявлено, что хронический гастрит сопровождается нарушениями процессов переваривания корма, характеризуемыми наличием креатореи до 68,01±4,75 у.е., амилореи до 60,00±4,23 и стеатореи до 60,08±5,57 у.е., снижением копрологической протеолитической активности трипсина до разведения не более 1:10. 6. Применение КВЧ-коррекции при хроническом катаральном гастрите, локализующемся во всех отделах желудка, нормализует воспаление слизистой оболочки желудка на 5-й день процедур, при очаговом и диффузном атрофическом гастрите, локализующемся в пилоантральном отделе желудка, нормализует воспаление слизистой оболочки желудка на 10-й день. 7. На фоне применения ЭМИ КВЧ нормализуются функционально-морфологические показатели крови (в среднем увеличением эритроцитов до 6,9±0,82×1012/л, гемоглобина до 17,9±1,05 г/дл, снижением лейкоцитов до 7,90±0,78× 109/л, АлАТ до 11,58± 0,70 ед/л, α-амилазы до 33,10± 0,79 мг/(с·л), кортизола до 107,90±40,64 нмоль/л). При этом у собак нормализуются процессы переваривания корма. 8. При воздействии ЭМИ КВЧ повышается неспецифическая резистентность организма. Фагоцитарный индекс на 5-й день процедур увеличивается с 40,57±0,86 до 45,31±1,81 %, фагоцитарное число с 1,97±0,1 до 4,93±0,26 у.е., индекс фагоцитарной завершенности на 10-й день с 0,99±0,02 до 1,49±0,05 у.е. ^ 1. Рекомендуется способ коррекции хронического поверхностного и хронического атрофического гастрита ЭМИ КВЧ миллиметрового диапазона путем использования генераторов КВЧ-излучения с рабочей частотой 53530 МГц, с длинной волны 5,6 мм. Облучатель устанавливают на основные зоны воздействия – эпигастральную область и по сагиттальной линии в центре теменной кости. Общее количество процедур в среднем до 10. Общее время сеанса 20–30 мин. Схема воздействий на области подбирается индивидуально в каждом конкретном случае. Данный способ позволяет купировать основные клинические, морфологические и функциональные изменения при хроническом поверхностном гастрите на 5-й день использования КВЧ-излучений. 2. Результаты исследования вошли в учебно-методическое пособие «Электромагнитное излучение крайне-высоких частот миллиметрового диапазона и применение в ветеринарии» и используются при чтении лекций и проведения лабораторных занятий по курсу незаразных болезней животных. 3. КВЧ-коррекция рекомендуется в качестве достаточной по эффективности физиотерапевтической процедуры при хронических гастритах, может применяться как монотерапия и в дополнение к медикаментозному лечению и диете. ^
|