Клинико-микробиологическая оценка очагов гнойно-септических заболеваний в оториноларингологии. 14. 01. 03 Болезни уха, горла и носа 03. 00. 07 Микробиология icon

Клинико-микробиологическая оценка очагов гнойно-септических заболеваний в оториноларингологии. 14. 01. 03 Болезни уха, горла и носа 03. 00. 07 Микробиология





НазваниеКлинико-микробиологическая оценка очагов гнойно-септических заболеваний в оториноларингологии. 14. 01. 03 Болезни уха, горла и носа 03. 00. 07 Микробиология
страница1/3
Гуров Александр Владимирович
Дата25.02.2013
Размер0.66 Mb.
ТипАвтореферат
  1   2   3
На правах рукописи


Гуров Александр Владимирович


Клинико-микробиологическая оценка очагов гнойно-септических заболеваний в оториноларингологии.

14.01.03 – Болезни уха, горла и носа

03.00.07 - Микробиология


Автореферат

Диссертации на соискание ученой степени

доктора медицинских наук


Москва – 2011г.

Работа выполнена в Государственном бюджетном образовательном учреждении высшего профессионального образования «Российский Национальный исследовательский Медицинский Университет им. Н.И.Пирогова» Минздравсоцразвития РФ.

^ Научные консультанты:

Заслуженный деятель науки РФ, член-корр. РАМН,

доктор медицинских наук, профессор Пальчун Владимир Тимофеевич

доктор медицинских наук, профессор Кафарская Людмила Ивановна

^ Официальные оппоненты:

Доктор медицинских наук, профессор Свистушкин Валерий Михайлович

Доктор медицинских наук, профессор Панкова Вера Борисовна

Доктор медицинских наук, профессор Афанасьев Станислав Степанович

^ Ведущая организация:

Федеральное Государственное учреждение Научно-клинический Центр оториноларингологии ФМБА

Защита диссертации состоится 15 декабря 2011г. В 14.00 на заседании Диссертационного совета /Д 850.003.01/ при ГБУЗ «Московский научно-практический Центр оториноларингологии» ДЗМ, по адресу: 117152, Москва, Загородное шоссе, дом 18а, строение 2.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ГБУЗ «Московский научно-практический Центр оториноларингологии» ДЗМ

Автореферат разослан « » 2011 года.

Ученый секретарь Диссертационного совета

кандидат медицинских наук Ю.В.Лучшева

^ ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ.

Актуальность проблемы. Проблема очаговых поражений, вызванных бактериальными патогенами, актуальна для медицины в целом, однако особое значение она приобретает для медицинских специальностей, где основные нозологические формы составляют гнойно-воспалительные заболевания. Такой специальностью, в частности, является оториноларингология [Пальчун В.Т. и соавт., 1996]. Несмотря на современный арсенал лекарственных средств и применение новых медицинских технологий, летальность от развившихся генерализованных септических осложнений крайне велика [Скопина Э.Л. и соавт., 1994, Agnus D.C. et al., 2003].

В основе учения об очаговой инфекции лежит локальный инфекционный процесс и системная реакция на него организма [Сагалович Б.М., 1993, Dellinger R.P., 1999]. Однако, оценивая сформировавшийся очаг инфекции с точки зрения современных фундаментальных знаний, и благодаря достижениям таких наук как микробиология, иммунология и патофизиология, приходится констатировать тот факт, что формирование хронического бактериального очага - это почти всегда следствие хронизации острого воспалительного процесса [Пальчун В.Т., 2009]. Несмотря на прогресс современных фундаментальных дисциплин, до настоящего времени остаются практически неизученными характер изменения микробного пейзажа в очаге поражения, а также свойства микроорганизмов (м/о), обуславливающие развитие соответствующих специфических клинических проявлений в данном очаге. Именно поэтому на поиск и изучение факторов, обуславливающих формирование стойких очагов инфекции, характеризующихся глубокими изменениями анатомо-физиологической структуры пораженного органа, а также факторов, обуславливающих возможность дальнейшей генерализации инфекции, вплоть до развития гнойно-септических процессов, направлены усилия ученых, занимающихся проблемой гнойной патологии, во всем мире.

Для оториноларингологии эта проблема крайне актуальна. Заболевания инфекционной природы занимают ведущее место в патологии ЛОР-органов [Крюков А.И. и соавт., 2003, Finegold M. и соавт., 2005]. В настоящее время, решая проблему гнойно-воспалительных инфекций ЛОР-органов, приходится думать не только о рациональном использовании существующих методов лечения и, прежде всего, антибактериальной терапии, но и поиске новых, принципиально иных методов лечения, не связанных с наличием различных механизмов резистентности к ним бактерий.

Исходя из вышеизложенного, целью настоящего исследования явилось создание алгоритмов лечения и профилактики острых и хронических, внебольничных и нозокомиальных инфекций верхних дыхательных путей и среднего уха на основе изучения патологических биоценозов ЛОР-органов, возникающих в различных условиях с учетом закономерностей их формирования, особенностей течения и биологических свойств возбудителей.

Для достижения намеченной цели нами были поставлены следующие задачи:

1. Изучить структуру микрофлоры, определяющую характер и динамику бактериального инфекционного процесса в очагах поражения при острой и хронической формах инфекций ЛОР-органов.

2. Исследовать характер изменения основных эпидемиологически значимых возбудителей острых и хронических гнойно-воспалительных заболеваний ЛОР-органов в условиях многолетнего динамического мониторинга.

3. Проанализировать взаимосвязь клинических и патоморфологических изменений, возникающих в ЛОР-органах в условиях стойкого гнойно-воспалительного процесса, с биологическими свойствами микрофлоры в очаге воспалительного процесса.

4. Исследовать нозокомиальную микрофлору ЛОР-стационара и стационаров другого профиля и ее влияние на течение очаговой инфекции ЛОР-органов у пациентов, находящихся на стационарном лечении.

5. Разработать показания и алгоритм использования антибактериальных препаратов при лечении пациентов с острой и хронической очаговой, а также нозокомиальной инфекций ЛОР-органов.

6. Разработать схемы антибиотикопрофилактики хирургических осложнений в оториноларингологической практике.

7. Разработать альтернативные методы лечения антибиотикорезистентных инфекций ЛОР-органов, действие которых не зависит от наличия у микроорганизмов различных механизмов устойчивости.

Научная новизна.

  • Впервые доказано влияние видового состава и биологических свойств возбудителей на различные формы инфекционного процесса, в ЛОР-органах.

  • Впервые описан состав биоценозов слизистых оболочек различных биотопов верхних дыхательных путей и уха в условиях сформировавшегося гнойно-воспалительного процесса.

  • Впервые показано изменение качественно-количественного состава патогенов, вызывающих гнойную патологию ЛОР-органов и бактерий, составляющих микробный фон оториноларингологического отделения, в условиях многолетнего динамического мониторинга.

  • Впервые разработаны и обоснованы схемы антибактериальной терапии для терапии инфекций ЛОР-органов у амбулаторных и стационарных больных на основании данных мониторинга антибиотикорезистентности, а также разработаны схемы периоперационной антибиотикопрофилактики в ЛОР-стационаре.

  • Впервые обоснован и предложен способ фотодинамической антибактериальной терапии, действие которой не зависит от наличия у микроорганизмов различных механизмов устойчивости в комплексной терапии гнойно-воспалительных инфекций, включая нозокомиальные поражения.

^ Практическая значимость.

Получены данные, определяющие характер и динамику бактериального инфекционного процесса в очагах поражения при острой и хронической формах инфекций ЛОР-органов.

Составлены схемы рациональной антибактериальной терапии гнойной патологии ЛОР-органов амбулаторных и стационарных больных, включая осложненные формы инфекций и случаи вторичного нозокомиального инфицирования на основании данных о чувствительности микроорганизмов-возбудителей и мониторинга антибиотикорезистентности госпитальных штаммов микроорганизмов.

Разработаны принципы и схемы антибиотикопрофилактики хирургических инфекций в ЛОР-практике.

Предложен альтернативный метод лечения и профилактики антибиотикорезистентных инфекций на основе эффекта фотодинамического воздействия.

Полученные данные являются основой для поддержания оптимального эпидемиологического состояния в ЛОР-отделении.

^ Реализация результатов исследования. Разработанные практические рекомендации на основании диссертации внедрены в работу ЛОР-отделений ГКБ №1 им. Н.И.Пирогова и ГКБ им. С.П.Боткина, оториноларингологического отделения ГБУЗ «Московский научно-практический Центр оториноларингологии» ДЗМ и могут быть использованы в работе всех практических оториноларингологов в поликлиниках и стационарах.

Результаты исследований включены в учебную программу студентов, врачей-интернов, ординаторов, слушателей ФПК кафедры оториноларингологии лечебного факультета и кафедры микробиологии и вирусологии ГБОУ ВПО РНИМУ им. Н.И.Пирогова Минздравсоцразвития РФ.

^ Положения, выносимые на защиту.

  1. Структура патологического биоценоза каждого отдела пораженного органа в условиях сформировавшегося гнойно-воспалительного процесса - строго специфична.

  2. β-гемолитический стрептококк серологической группы А (S.pyogenes) остается ведущим этиологическим фактором развития хронического тонзиллита, что подтверждается результатами молекулярно-генетического метода исследования (ПЦР в real-time режиме).

  3. Особенности клинической картины очаговой гнойно-воспалительной инфекции ЛОР-органов, а также характер патоморфологических изменений, возникающих при поражении ЛОР-органов в условиях гнойно-воспалительного процесса, непосредственно связан с биологическими свойствами возбудителя, доминирующего в очаге воспаления.

  4. Спектр микроорганизмов, вызывающих нозокомиальные инфекции ЛОР-органов, непосредственно зависит от сроков госпитального инфицирования и профиля каждого конкретного стационара.

  5. При назначении антибактериальных препаратов необходимо учитывать данные динамического мониторинга возбудителей, инициировавших патологический процесс, присущие им биологические свойства, включая локальную антибиотикорезистентность, а также длительность и характер течения процесса.

  6. Применение в клинике антимикробной фотодинамической терапии очаговых инфекций ЛОР-органов, а также их гнойно-септических осложнений, в том числе нозокомиального характера, позволяет добиться выраженного и быстрого клинического эффекта.

^ Апробация диссертации. Основные положения диссертации и полученные результаты доложены на заседаниях Московского научно-практического общества оториноларингологов (Москва, 2005, 2007, 2008, 2009, 2010гг.); секциях клинической микробиологии (Москва, 2009 и 2010гг.) и гнотобиологии (Москва, 2005г.) Московского отделения Всероссийского научно-практического общества эпидемиологов, микробиологов и паразитологов им. И.И. Мечникова; XVII и XVIII Всероссийских съездах оториноларингологов (Нижний Новгород, 2006г, Санкт-Петербург 2011г.); Всероссийской научно-практической конференции «Наука и практика в оториноларингологии» (Москва, 2005, 2006, 2007, 2008, 2009, 2010гг.), Научно-практической конференции «Фармакологические и физические методы лечения в оториноларингологии» (Москва, 2005, 2007, 2009, 2010, 2011 гг.), Научно-практической конференции «Тимаковские чтения» (Москва, 2005г.); на VII Московской ассамблее «Здоровье столицы» (Москва, 2008г.); на I Международной конференции «Инновационные методы лечения и диагностики в современной медицине» (г. Велинград, Болгария, 2011 г.); на Всероссийской научно-практической конференции «Развитие идей академика А.И. Струкова в современной патологической анатомии» (Москва, 2010 г.); на Всероссийской научной конференции «Регенеративная биология и медицина» (Москва, 2011 г.); на Дальневосточной научно-практической конференции «Актуальные вопросы патологической анатомии», посвященной 50–летию кафедры патологической анатомии Владивостокского государственного медицинского университета (Владивосток, 2010 г.); на Межрегиональной научно-практической конференции оториноларингологов «Оториноларингология XXI века: от фундаментальных исследований к новым технологиям диагностики и лечения» (Новосибирск, 2010 г.).

Апробация диссертации проведена на совместной научно-практической конференции сотрудников кафедры оториноларингологии лечебного факультета и кафедры микробиологии и вирусологии ГБОУ ВПО РНИМУ им. Н.И.Пирогова Минздравсоцразвития РФ, ГБУЗ МНПЦО ДЗМ, ЛОР-отделений и консультативно-диагностической ЛОР-поликлиники ГКБ №1 им. Н.И.Пирогова 23 июня 2011 года, протокол апробации №11.

Публикации. По теме диссертации опубликовано 50 научных работ, из них - 18 в журналах, рекомендованных ВАК РФ. Получен Патент РФ на изобретение № 2317121 «Способ фотодинамической терапии гаймороэтмоидита и его осложнений» от 13.07.2006г.

^ Объем и структура диссертации. Диссертация изложена на 320 страницах машинописного текста и состоит из введения, литературного обзора, 5 глав собственных исследований, заключения, выводов, практических рекомендаций, указателя литературы. Библиография включает 326 источников, в том числе 189 работ отечественных и 137 зарубежных авторов. Диссертация иллюстрирована 61 таблицей, 17 рисунками, 4 схемами.

^ СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ.

Материалы и методы исследования. В основу работы положены результаты одиннадцатилетнего динамического мониторинга основных возбудителей гнойно-воспалительных заболеваний ЛОР-органов в условиях ЛОР-поликлиники ГКБ №1 им. Н.И. Пирогова, а также оториноларингологических отделений ГКБ №1 им. Н.И. Пирогова. Помимо этого, на протяжении одиннадцати лет проводили исследование аэробного микробного фона ЛОР-отделений ГКБ №1 им. Н.И. Пирогова. Все указанные исследования проводили с января 1999 года по декабрь 2010 года.

За весь указанный период нами было проведено обследование и лечение 1073 человек (527 мужчин и 546 женщин в возрасте от 16 до 75 лет) с различными формами очаговых гнойно-воспалительных инфекций ЛОР-органов, включая осложненные состояния, сформировавшиеся как во внебольничных условиях, так и в результате нозокомиального инфицирования. Давность заболевания составила от 1 дня до 23 лет.

В зависимости от места проведения обследования и лечения, все больные были разделены на две группы:

1 группа (605 чел.) – больные, находившиеся на лечении в стационаре.

2 группа (468 чел.) – амбулаторно-поликлинические больные.

Распределение больных обеих групп по полу, возрасту и нозологическим формам представлено в таблицах №1 и №2.

^ В 1-ую группу пациентов (находившихся на лечении в стационаре), вошло 605 больных, из которых 310 (51,2%) мужчин и 295 (48,7%) женщин в возрасте от 17 до 74 лет. У большинства пациентов данной группы (503 человека, 83,1%) гнойно-септические инфекции ЛОР-органов сформировались и развились вне условий стационара.

^ Таблица № 1. Распределение больных 1 группы по полу,

возрасту, нозологическим формам
(n = 605).




15-24 лет

25-49 лет

50 и выше

%

муж

жен

муж

жен

муж

жен

Внебольничный гнойный синусит (n=214)

острый

6

11

20

29

9

19

15,5

хронический

11

8

33

25

16

27

19,8

Осложнения ринусинусогенного характера (флегмоны лица и орбиты) (n=14)

3

2

5

1

2

1

2,31

Нозокомиальный синусит (n=80)

6

2

29

15

17

11

13,2

Внебольничный гнойный средний отит (n=170)

острый

5

8

11

13

3

6

7,6

хронический

14

9

18

35

19

29

20,5

Нозокомиальный отит (n=22)

3

1

8

4

4

2

3,64

Хронический тонзиллит, включая, осложненный паратонзиллярным абсцессом (n=105)

32

20

25

12

11

5

17,4

Итого (n=567)

80

61

149

134

81

100

100

Продолжительность острых заболеваний варьировала от 1 дня до 1 месяца, длительность хронических заболеваний составила от 1 года до 23 лет. Все больные с гнойно-воспалительными инфекциями ЛОР-органов, не госпитальной этиологии находились на лечении в условиях ЛОР-отделений ГКБ №1 им. Н.И. Пирогова.

Общее количество пациентов с внебольничным синуситом составило 214 (35,3%) человек: 94 (15,5%) - с острым гнойным синуситом (гаймороэтмоидитом, одонтогенным гайморитом, фронтитом, гемисинуситом, пансинуситом, сфеноидитом) и 120 - (19,8%) с хроническим синуситом (гаймороэтмоидитом, одонтогенный гайморитом и сфеноидитом).

Помимо пациентов с неосложненным течением острого и хронического внебольничного синусита, в данную группу вошло 14 (2,31%) пациентов с гнойными риносинусогенными осложнениями: 10 - с флегмоной орбиты и 4 - с флегмоной области лица. Среди больных с флегмоной орбиты у 6 человек возникновение данного осложнения было связано с обострением хронического рецидивирующего гаймороэтмоидита, в 4-х случаях осложнение возникло в результате обострения хронического одонтогенного гайморита.

Общее количество обследованных и пролеченных нами пациентов с внебольничным средним отитом составило 170 (28,1%) человек: 46 (7,6%) с острым гнойным средним отитом и 124 (20,5%) - с хроническим гнойным средним отитом.

Пациенты с хроническим тонзиллитом (ХТ), включая осложненный паратонзиллярным абсцессом, составили 105 (17,4%) человек: с ХТ, токсико-аллергической формой (ТАФ) I - 38 человек, ТАФ II – 45 человек и ТАФ II, осложненной паратонзиллярным абсцессом – 22 человека.

У остальных 102 пациентов (16,9%) гнойно-воспалительная патология ЛОР-органов имела нозокомиальную этиологию. 80 пациентов (13,2%) - с нозокомиальным синуситом и 22 пациента (3,64%) - с нозокомиальным средним отитом.

Пациенты с внутрибольничными инфекциями находились на стационарном лечении в различных отделениях ГКБ №1 им. Н.И.Пирогова (ЛОР-отделения, отделение реанимации и интенсивной терапии (ОРИТ), отделение неврологии, травматологии, нейрохирургии и челюстно-лицевой хирургии). Большинство пациентов с нозокомиальными инфекциями (41 человек), находились в ОРИТ: 22 пациента с - закрытой черепно-мозговой травмой, в том числе 9 - с сочетанной травмой; 6 – с открытой черепно-мозговой травмой; 9 с черепно-мозговой травмой и переломом костных стенок околоносовых пазух (ОНП); 13 – с сепсисом, развившемся на фоне перитонита (4 человека), панкреатита (6 человек) и как осложнение полостных операций (2 человека); 1 больной - с минно-взрывной травмой.

Среди пациентов, находившихся в отделениях другого профиля, 5 находились в отделении неврологии с основным диагнозом - ОНМК. 13 - в отделении травматологии и нейрохирургии по поводу черепно-мозговой травмы в сочетании с переломом костей лицевого скелета. 3 - в отделении челюстно-лицевой хирургии с перелом костей лицевого скелета.

Помимо больных, находившихся на лечении в стационарах другого профиля, нами было обследовано и пролечено 38 пациентов с нозокомиальными инфекциями, возникшими в условиях нахождения в ЛОР-стационаре. Среди них у 17 пациентов нозокомиальный синусит и средний отит развились на фоне передней тампонады полости носа и у 4 - на фоне задней тампонады. Помимо этого, в 21 случае нами было выявлено присоединение госпитальных патогенов у пациентов, поступивших в ЛОР-стационар с острым или обострением хронического синусита, что было доказано проведением сравнительного микробиологического исследования.

^ Во 2-ую исследуемую группу пациентов, (находившихся на амбулаторно-поликлиническом лечении), вошло 468 пациентов, из них 217 (46,3%) мужчин и 251 (53,7%) женщина в возрасте от 16 до 75 лет: 212 (43,1%) - с острым и хроническим гнойным гаймороэтмоидитом, 152 (32,5) - с острым и хроническим гнойным средним отитом и 114 (24,4%) - с ХТ.

Продолжительность острых заболеваний у пациентов данной группы варьировала от 1 дня до 1 месяца, длительность хронических заболеваний составила от 1 года до 14 лет. Все больные данной группы находились на амбулаторно-поликлиническом лечении в ЛОР-поликлинике клинико-диагностического центра ГКБ №1 им. Н.И. Пирогова.

^ Таблица № 2. Распределение больных 2 группы по полу, возрасту, нозологическим формам (n = 468).




15-24 лет

25-49 лет

50 и >

%

муж

жен

муж

муж

жен

жен

Гнойный гаймороэтмоидит (n=212)

Острый

16

13

28

33

8

14

23,9

хронический

10

6

13

10

29

22

19,2

Гнойный средний отит

(n= 152)

Острый

6

8

17

29

7

12

16,9

хронический

4

5

10

12

26

16

15,6

Хронический тонзиллит (n=114)

21

31

11

28

11

12

24,4

^ ИТОГО (n=468)

57

63

79

112

81

76

100


^ Методы исследования.

1. Общее клинико-лабораторное обследование. Пациентам обеих исследованных групп проводили стандартное клинико-лабораторное обследование, включающее: выяснение жалоб, сбор анамнеза заболевания и жизни, исследование общего соматического статуса больного, осмотр ЛОР-органов, аудиологическое и вестибулологическое исследования, клинический анализ крови и общий анализ мочи, биохимический анализ крови, исследование крови на ВИЧ, RW, HBS- и HCV-антиген, определение группы крови и резус-фактора, R-графия грудной клетки, ЭКГ. При наличии сопутствующих заболеваний больным проводили соответствующие дополнительные клинико-лабораторные исследования и консультации профильных специалистов.

^ 2. Эндоскопическое исследование. Всем больным с заболеваниями носа и ОНП выполняли эндоскопическое исследование полости носа и носоглотки с помощью жестких эндоскопов фирмы Richard Wolf (Германия) диаметром 4,0 мм с торцевой и боковой оптикой, углами зрения 0°, 25°, 30° и 45°. Кроме того, по показаниям, пациентам выполняли компьютерную томографию (КТ) височных костей, ОНП в аксиальной и коронарной проекции, которую проводили на компьютерном томографе Sytec S фирмы General Electric.

^ 3. Микробиологические исследования. Все микробиологические исследования проводились лично автором на базе лабораторий кафедры фундаментальной и клинической микробиологии РГМУ. У больных острым и хроническим гнойным гаймороэтмоидитом забор патологического материала из верхнечелюстной пазухи осуществляли при пункции стерильной иглой Куликовского. После пункции пазухи производили аспирацию содержимого. При отсутствии патологического материала производили введение стерильного физиологического раствора с последующей аспирацией в стерильный шприц. Помимо этого, стерильным ватным тампоном брали мазок со слизистой оболочки полости носа, а также верхнечелюстной и клиновидной пазух, клеток решетчатого лабиринта непосредственно в ходе оперативного вмешательства на соответствующей пазухе.

У пациентов с острым перфоративным гнойным средним отитом и обострением хронического гнойного среднего отита отделяемое из барабанной полости забирали сухим стерильным ватным тампоном. Для исключения контаминации тампона сапрофитной микрофлорой кожу наружного слухового прохода обрабатывали раствором антисептика. Помимо этого, стерильным ватным тампоном брали посевы со слизистой оболочки различных полостей среднего уха непосредственно в ходе оперативного вмешательства на височной кости.

У больных ХТ материал из ротоглотки забирали стерильным ватным тампоном, увлажненным стерильным физиологическим раствором, а также при аспирации стерильного физиологического раствора, вводимого при помощи стерильной канюли тонзиллярного шприца для промывания лакун небных миндалин, непосредственно в полость лакуны. Патологический материал у пациентов с паратонзиллярным абсцессом забирали при помощи стерильного ватного тампона, увлажненного стерильным физиологическим раствором непосредственно со стенок полости абсцесса, немедленно после его вскрытия.

Забор патологического материала у пациентов с риносинусогенными осложнениями осуществляли интраоперационно, сразу после хирургического вскрытия флегмоны с использованием стерильного ватного тампона.

Большинство микробиологических исследований проводили в динамике: при поступлении пациента, на 3-5 сутки терапии, а также после окончания курса лечения.

Материал с поверхности предметов окружающей среды стационаров забирали стерильным шпателем с ватным тампоном на конце, смоченным стерильным физиологическим раствором с участка площадью 10 х 10 см.

Сразу после забора, непосредственно взятый из очага, патологический материал или ватный тампон погружали в 5 мл стерильного сердечно-мозгового бульона (BHI, BBL USA), в котором происходила транспортировка в лабораторию. Время от забора материала до доставки в лабораторию составляло не более 40 мин, далее производили предварительную инкубацию в термостате при температуре 37˚С в течение 3 ч и затем рассев на плотные питательные среды: BHI-агар (BBL USA) с 5% крови, среду Endo (BBL USA), Staphylococcus agar (BBL USA), Columbia agar base (OXOID England) с 5% крови, налидиксовой кислотой (15 мг/л), колистином (10 мг/л), Cetrimid agar (BBL USA), Enterococcus agar (bio Merieux France), Sabouraud Dextrose agar (bio Merieux France) с добавлением хлорамфеникола.

Пробы воздуха брали при помощи седиментационного метода на сердечно-мозговой агар BHI (BBL USA) с 5% крови.

Посевы инкубировали в термостате при 37˚С в течение 24-48 часов. Чашки со средой Sabouraud Dextrose agar инкубировали до 3 суток. Выросшие колонии м/о изучали макро- и микроскопически, подсчитывали количество колоний каждого типа. Следующим этапом производили выделение собственно чистой культуры м/о на скошенном агаре в случае облигатно-анаэробных и факультативно-анаэробных бактерий, а также на плотной питательной среде на чашке с тестом на анаэробиоз в случае облигатно-анаэробных м/о. Облигатно-анаэробные условия создавали при помощи стандартной газовой смеси, закачиваемой в микроанаэростаты фирмы bio Merieux France.

Идентификация м/о производили с использованием универсальных систем API (bio Merieux Франция), системы ENTERO-test (LA CHEMA Чехия), сред Гиса (НПО «Питательные среды» Махачкала, Россия), на основании ферментации сахаров, протеолитической активности, ферментативной активности, определения подвижности бактерий.

Дрожжевые и филаментозные грибы идентифицировали по характеру роста на средах Sabouraud Dextrose agar с хлорамфениколом, BHI-агар с кровью, на основании морфологических свойств в нативном препарате, а также при помощи системы API-Cand (bio Merieux Франция).

Чистые культуры м/о изучали на антибиотикочувствительность к различным антимикробным препаратам диско-диффузионным методом со стандартными концентрациями на среде на среде Mueller Hinton 2 (Becton Dickinson USA).

Выявление β-гемолитического стрептококка (БГСА) в патологическом материале из небных миндалин, а также эпидемиологические методы исследования, включавшие в себя типирование и сравнение бактериальных геномов проводили методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) в амплификаторе Mastercycler pro 384 (Eppendorf, Германия) в режиме real-time с использованием типовых праймеров.

^ 4. Патоморфологические исследования. Основные патоморфологические исследования проводили на базе НИИ морфологии человека РАМН, а также патологоанатомического отделения ГКБ №31.

Для проведения патоморфологического исследования операционный материал фиксировали в 10 % нейтральном растворе формалина. После гистологической проводки материал заливали в парафин. Срезы толщиной 4-5 мкм окрашивали гематоксилином и эозином, а также комбинированной окраской по ван Гизону.

Для более детального исследования характера инфекционно-воспалительного процесса в небных миндалинах мы проводили изучение функциональной (пролиферативной и белково-синтетической) активности клеток небных миндалин у больных различными формами ХТ с помощью метода радиоавтографии с использованием в качестве радиоактивных предшественников 3Н-тимидина и 3Н-уридина. При этом на основании включения клетками 3Н-тимидина оценивали пролиферативную активность клеток, а включение клетками 3Н-уридина позволяло выявить их белково-синтетическую активность, т.е. судить об их жизнеспособности. Данное исследование выполняли на базе лаборатории патоморфологии НИИ хирургии им А.В. Вишневского.

^ 5. Статистическая обработка. Статистическую обработку полученных результатов проводили общепринятыми статистическими методами. Для каждого ряда значений определяли среднюю арифметическую, среднеквадратичное отклонение и стандартную ошибку средней арифметической. Применяли метод регрессионного анализа. Достоверность различий между выборками определяли с использованием t – критерия Стьюдента и парного критерия Стьюдента. Непосредственные вычисления проводились при помощи компьютерной программы BIOSTAT.

  1   2   3

Ваша оценка этого документа будет первой.
Ваша оценка:

Похожие:

Клинико-микробиологическая оценка очагов гнойно-септических заболеваний в оториноларингологии. 14. 01. 03 Болезни уха, горла и носа 03. 00. 07 Микробиология iconОглы алгоритм диагностики заболеваний глотки и гортани, исходя из нарушения слуха и болевых ощущений
Работа выполнена на кафедре «Болезней уха, горла и носа» Российского университета дружбы народов
Клинико-микробиологическая оценка очагов гнойно-септических заболеваний в оториноларингологии. 14. 01. 03 Болезни уха, горла и носа 03. 00. 07 Микробиология iconЗначение симбиотических взаимодействий пиогенного стрептококка при хроническом тонзиллите 14. 00.
Работа выполнена в гуз «Московский научно-практический Центр оториноларингологии» Департамента здравоохранения...
Клинико-микробиологическая оценка очагов гнойно-септических заболеваний в оториноларингологии. 14. 01. 03 Болезни уха, горла и носа 03. 00. 07 Микробиология iconРадиоволновая хирургия доброкачественных новообразований в оториноларингологии 14. 01. 03- болезни

Клинико-микробиологическая оценка очагов гнойно-септических заболеваний в оториноларингологии. 14. 01. 03 Болезни уха, горла и носа 03. 00. 07 Микробиология iconИнтраоперационная пластика хирургических дефектов перегородки носа (клинико-экспериментальное исследование)

Клинико-микробиологическая оценка очагов гнойно-септических заболеваний в оториноларингологии. 14. 01. 03 Болезни уха, горла и носа 03. 00. 07 Микробиология iconСовременная эндоскопическая диагностика заболеваний среднего уха у детей (14. 01. 03 Болезни уха,

Клинико-микробиологическая оценка очагов гнойно-септических заболеваний в оториноларингологии. 14. 01. 03 Болезни уха, горла и носа 03. 00. 07 Микробиология iconОбъем хирургического вмешательства при обострении хронического гнойно-кариозного среднего отита 14.

Клинико-микробиологическая оценка очагов гнойно-септических заболеваний в оториноларингологии. 14. 01. 03 Болезни уха, горла и носа 03. 00. 07 Микробиология iconКлинико-морфологические особенности инвертированной папилломы и рака полости носа и околоносовых

Клинико-микробиологическая оценка очагов гнойно-септических заболеваний в оториноларингологии. 14. 01. 03 Болезни уха, горла и носа 03. 00. 07 Микробиология iconРазвитие фундаментальных основ оториноларингологии школой академика амн СССР б. С. Преображенского

Клинико-микробиологическая оценка очагов гнойно-септических заболеваний в оториноларингологии. 14. 01. 03 Болезни уха, горла и носа 03. 00. 07 Микробиология iconКлинико аудиологическая характеристика тимпаносклероза 14. 00. 04 Болезни уха, горла и носа

Клинико-микробиологическая оценка очагов гнойно-септических заболеваний в оториноларингологии. 14. 01. 03 Болезни уха, горла и носа 03. 00. 07 Микробиология iconГерпетические поражения черепно-мозговых нервов в оториноларингологии: современные методы диагностики

Разместите кнопку на своём сайте:
Медицина


База данных защищена авторским правом ©MedZnate 2000-2019
обратиться к администрации | правообладателям | пользователям
Документы