Генетико-эпидемиологическое изучение наследственной тугоухости в Кировской области 03. 02. 07 генетика
|
|
Скачать 0.5 Mb.
|
|
На правах рукописи ОСЕТРОВА АНАСТАСИЯ АНАТОЛЬЕВНА ГЕНЕТИКО-ЭпидемиологиЧЕСКОЕ ИЗУЧЕНИЕ НАСЛЕДСТВЕННОЙ тугоухости в Кировской области 03.02.07 — генетика АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук Москва – 2011 Работа выполнена в Учреждении Российской академии медицинских наук Медико-генетическом научном центре РАМН
Защита состоится «___»__________ 2011 г. _____в часов на заседании Диссертационного ученого совета Д 001.016.01 при Учреждении Российской академии медицинских наук Медико-генетическом научном центре РАМН (115478, Москва, ул. Москворечье, д. 1) С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Учреждения Российской академии медицинских наук Медико-генетического научного центра РАМН по адресу: 115478, Москва, ул. Москворечье, д. 1. Автореферат разослан «______»___________________ 2011 г. Учёный секретарь диссертационного совета Д 001.016.01 по защите докторских и кандидатских диссертаций, доктор биологических наук, профессор Курило Л.Ф. ^ Нарушение слуха, или тугоухость, – это распространенное расстройство, которое может возникнуть в любом возрасте. Частота врожденной тугоухости по данным ряда исследователей, составляет 1:650-1000 новорожденных и 1 на 25 человек после 45 лет (Smith R.J., Bale J.F.Jr., White K.R., 2005). Больных с нарушениями слуха в Российской Федерации (2006) насчитывается более 13 млн. человек, из которых более 3 млн. нуждаются в слухопротезировании. Анализ возрастной характеристики детей на момент постановки диагноза в сурдологопедических кабинетах регионов России показал, что диагностика тугоухости и глухоты проводится несвоевременно: дети до 1 года составляют лишь 5% от общего числа обследованных; от 1 года до 3 лет – 14%; около трети детей (28%) берется на диспансерный учет в возрасте от 3 до 7 лет; у 30% детей нарушение слуха выявляется в возрасте от 7 до 14 лет; от 14 до 18 лет – у 23% (http://www.audiology.ru). Среди этиологических факторов тугоухости выделяют внешнесредовые и генетические. К внешнесредовым факторам относят: тератогенный механизм, последствия вирусной инфекции, воздействие лекарственных и химических препаратов и т.д. Основные факторы риска, которые могут обуславливать ненаследственную тугоухость у детей первого года жизни, достаточно хорошо изучены и перечислены в приказе МЗ и МП РФ №108 от 29.03.1996 г. (Таварткиладзе Г.А. и др., 2006). С развитием молекулярной генетики и выяснением этиопатогенетических механизмов роль генетически обусловленной тугоухости постоянно возрастает. К настоящему моменту определено, что более 60% изолированной тугоухости имеет генетическое происхождение (Griz S. et al., 2009). Известно более 140 генных локусов для несиндромальных форм тугоухости и не менее 400 синдромов, ассоциированных с нарушением слуха (ACMG, 2002; Hegarty J.L., 2005). Систематизированного учета пациентов, особенно взрослых, страдающих тугоухостью и глухотой, в стране не осуществляется, т.е. в России нет данных о распространенности по регионам различных форм тугоухости, как изолированных, так и входящих в состав наследственных синдромов. Существование этнических и региональных различий в частотах наследственных форм тугоухости значительно осложняет ситуацию. Для проведения профилактических мероприятий, прежде всего, необходимо определить возможные колебания распространенности наследственных форм тугоухости по регионам РФ и структуру заболеваемости по данной патологии, которые лучше всего реализуются в генетико-эпидемиологических исследованиях, т.к. данные исследования позволяют объяснить причины локально высоких и низких частот. Генетико-эпидемиологические исследования наследственных форм тугоухости в России были проведены в Республике Чувашия и Ростовской области (Зинченко С.П. и др., 2007; Шокарев Р.А. и др., 2005). В Кировской области данное исследование проводится впервые. Оно направлено на этиологическую дифференциацию аномалий развития слухового аппарата и изучение конкретных генетических факторов, которые могут вызвать нарушения слуха. Полученные данные помогут разработать принципы регионального медико-генетического консультирования с расчетом риска для различных типов семей при гетерогенных формах тугоухости, и в дальнейшем предложить пренатальную диагностику с учетом распространенности наиболее частых мутаций по нейросенсорной тугоухости в популяции Кировской области, что создаст основу для профилактики наследственной тугоухости и глухоты. ^ Эпидемиологический и клинико-генетический анализ наследственных форм тугоухости среди всего населения и отдельно для детей Кировской области. ^
Впервые проведено генетико-эпидемиологическое исследование наследственной тугоухости среди всего населения 10 районов Кировской области (Сунского, Богородского, Шабалинского, Свечинского, Немского, Верхошижемского, Куменского, Даровского, Советского, Унинского), а также детского населения данных районов и г. Кирова. Оценена роль наследственных факторов в структуре взрослой и детской заболеваемости у пациентов с нарушениями слуха в Кировской области. Получены значения распространенности наследственной тугоухости (АД и АР) у всего населения, и среди детского населения для 10 районов Кировской области и г. Кирова в целом и отдельно для изолированной и синдромальной тугоухости. Определена частота врожденной тугоухости на 1000 новорожденных за период с 1995 по 2001 гг. отдельно для изолированных и синдромальных форм. С учетом особенностей генетической структуры исследованных популяций проведена попытка выяснения особенностей территориального распространения наследственной тугоухости, которая показала высокие и значимые корреляции между грузом АР и всей наследственной тугоухости и значениями случайного инбридинга Fst. Описан нозологический спектр синдромальных и изолированных нарушений слуха, и проанализирована генетическая гетерогенность и клинический полиморфизм наследственной тугоухости в Кировской области. Определена частота 7 мажорных мутаций в генах GJB2 (35delG, 167delT, 235delC, М34Т), GJB6 (мутации del(GJB6-d18S1830) и del(GJB6-d13S1854)), TMC1 (мутация R34X) в группе пациентов детского возраста с изолированной нейросенсорной тугоухостью. Мутации 167delT в гене GJB2, мутация R34X в гене TMC1 и мутации del(GJB6-d18S1830) и del(GJB6-d13S1854)) в гене GJB6 не выявлены. Суммарная частота 4 частых мутаций в гене GJB2 составила 48,6%. У пациентов с клинически диагностированным синдромом Тричера Коллинза-Франческетти был проведен поиск мутаций в гене TCOF1, выявлена ранее не описанная мутация в гетерозиготном состоянии в 23 экзоне (3635C>G), приводящая к замене аланина на глицин в 1176 позиции аминокислотной последовательности (Ala1176Gly). ^ Всем семьям проведено медико-генетическое консультирование: поставлен диагноз, разъяснен тип передачи заболевания, определен генетический риск повторного возникновения заболевания в семье. В семьях с подтвержденной наследственной этиологией тугоухости проведена отдельная работа и разъяснены возможности пренатальной диагностики. Показана необходимость взаимодействия врачей-генетиков и сурдологов в диагностике наследственных форм нарушений слуха. В группе больных с несиндромальной нейросенсорной тугоухостью проведены гено-фенотипические корреляции с учетом тяжести течения, возраста начала, и установленным генотипом. Описан спектр нозологических форм, и проанализирована генетическая гетерогенность наследственной тугоухости в Кировской области. Разработана система для создания регионального регистра пациентов с наследственными нарушениями слуха, что позволит проводить мониторирование уже зарегистрированных семей с наследственной тугоухостью и проведение реабилитационных мероприятий. ^
Результаты диссертационной работы представлены: на VII Всероссийской ЛОР-конференции «Наука и практика в оториноларингологии», 11-12 ноября 2008 г.; на European Human Genetics Conference 2009, 23-26 мая 2009 г., Вена, Австрия; на 1 съезде медицинских генетиков Казахстана, 22-23 октября 2009 г., Алматы, Казахстан; на VI съезде «Российского общества медицинских генетиков», 15-18 мая 2010 г., г. Ростов-на-Дону; на European Human Genetics Conference 2010, 12-15 июня 2010 г., Гётеборг, Швеция. Работа апробирована и рекомендована к защите на заседании Ученого совета МГНЦ РАМН 18 мая 2011 года. ^ Автором проработана отечественная и зарубежная литература по теме диссертации, сформирована группа обследования. Автор лично проводил медико-генетическое консультирование семей. Автор провел статистический анализ полученных данных, сформулировал выводы и опубликовал результаты работы в научных журналах. Публикации Результаты диссертационной работы отражены в 13 печатных работах соискателя, в том числе 7 статей опубликованы в журналах, рекомендованных ВАК МОН РФ соискателям ученой степени кандидата медицинских наук. ^ Материалы диссертации внедрены в работу медико-генетической консультации и сурдологопедического кабинета КОГБУЗ «Кировская детская областная клиническая больница». По результатам ДНК-диагностики в трех семьях проведена пренатальная диагностика, и родились здоровые дети. Материалы диссертации также используются при проведении семинаров со слушателями ИПО и студентами ГОУ ВПО «Кировская государственная медицинская академия». ^ Диссертация изложена на 193 страницах машинописного текста и включает в себя введение, обзор литературы, описание материалов и методов исследования, результаты и обсуждение собственных исследований, заключение, выводы. Библиографический указатель содержит 226 источников: 83 отечественных и 143 зарубежных. Диссертация иллюстрирована 34 таблицами, 40 рисунками и дополнена приложением (11 стр.). ^ Материалы и методы исследования Сбор материала проводился в период 2007-2010 гг. в соответствии с протоколом генетико-эпидемиологических исследований, разработанным в лаборатории генетической эпидемиологии МГНЦ РАМН, позволяющим выявить большое количество (более 2500 нозологических форм, включая все изолированные формы тугоухости и синдромальные заболевания с нарушением слуха) моногенных наследственных заболеваний (Зинченко Р.А. и др., 2001; Гинтер Е.К., 2002). С целью выявления генетической гетерогенности и распространенности наследственной тугоухости в Кировской области тотально обследовано население 10 районов области и детское население г. Кирова. Кроме того, для достижения максимальной выявляемости пациентов обследованы дети, обучающиеся в двух специализированных коррекционных школах для глухих и слабослышащих Кировской области. Численность обследованного населения в 10 районах составила 122075 человек, в т.ч. 19878 детей. Численность детского населения в г. Кирове 66315 человек, таким образом, суммарная численность обследованного детского населения составила 86193 детей. По этническому составу обследованная выборка на 98% представлена русскими. Выборка охватывала юг, запад и юго-восток области (Рис.1).
Рис. 1. Численность населения, взаимное расположение обследованных районов. Основной план работы:
Информация о больных с тугоухостью была получена из трех основных источников регистрации: от ЛОР-врачей обследованных районов (при помощи метода анкетирования), школ-интернатов для глухих и слабослышащих Кировской области и регистра детского областного сурдолога-отоларинголога. Наиболее информативным оказался метод анкетирования (96%). Весь собранный клинический материал подвергался сегрегационному анализу, раздельно для семей с предположительно АД и АР типом наследования, цель которого заключается в проверке соответствия распределения больных и здоровых в выявленных ядерных семьях согласно определенному типу наследования – АД или АР. Значения распространенности рассчитывались на 10000 обследованного населения. Сравнение распространенности между районами проводилось при помощи тестов 2 и t-критерия Стьюдента. Величина случайной составляющей инбридинга Fst были получены методом «изонимии» из списков избирателей обследованных районов тотально (Ельчинова Г.И. и др., 2009). Оценка генетической структуры проведена в девяти районах Кировской области (Сунской, Богородский, Немский, Шабалинский, Свечинский, Даровской, Куменский Верхошижемский, Советский). Для оценки частоты врожденной тугоухости на 1000 новорожденных были использованы данные о количестве новорожденных в 10 районах Кировской области и г. Кирове за период с 1995 по 2001 гг., предоставленные Кировским ОГУЗ «Медицинский информационно-аналитический центр». Частота на 1000 новорожденных оценивалась отдельно для изолированной, синдромальной тугоухости и всех наследственных нарушений слуха по годам, а также суммарно за весь период. Молекулярно-генетический анализ проведен научным сотрудником лаборатории генетической эпидемиологии МГНЦ РАМН Шароновой Е.И. Произведено определение наиболее частых мутаций в генах GJB2 (35delG, 167delT, 235delC, М34Т), GJB6 (мутации del(GJB6-d18S1830) и del(GJB6-d13S1854)) TMC1 (R34X), а также методом секвенирования поиск мутаций в гене TCOF1 у пациентов, с клинически диагностированным синдромом Тричер Коллинза-Франческетти. Во всех случаях у пациентов получено письменное информированное согласие на проведении исследования. ^ Эпидемиологический анализ 10 районов Кировской области. В результате комплексного медико- и популяционно-генетического обследования населения 10 районах Кировской области всего первично было зарегистрировано: 760 больных всех возрастов с нарушениями слуха различного характера из 735 семей. Суммарная распространенность тугоухости различной этиологии составила 1:161 жителей, с вариацией по районам от 1:266 человек в Немском до 1:69 – в Богородском районах. При дифференциальной диагностике учитывались неблагоприятные факторы внешней среды, воздействие которых может приводить к нарушению слуха в эмбриональный, перинатальный, послеродовый периоды, в раннем детстве и на протяжении всей жизни пациента (согласно Проекту протокола профилактики и раннего выявления нарушения слуха новорожденных и детей первых месяцев жизни (Таварткиладзе Г.А. и др., 2006)). В результате проведенной дифференциальной диагностики 623 пациента были исключены из выборки, так как удалось установить экзогенные причины заболевания. Всем пациентам было проведено медико-генетическое консультирование. В результате анализа первичного материала в рассмотрении осталось 117 больных из 95 семей с предположительно наследственными формами тугоухости. Для всех семей проведен сегрегационный анализ в зависимости от предполагаемого типа наследования, который показал хорошее соответствие ожидаемым сегрегационным частотам при АД (0,5) и АР (0,25) типе наследования. Значение сегрегационной частоты в семьях с предположительной АР патологией составило 0,270,06, вероятность регистрации, оцененная методом Фишера – 0,92, при доле спорадических случаев 0,120,08. В семьях с предположительно АД типом наследования соответствие здоровых и больных в сибствах проверялось тестом χ-квадрат, который показал, что распределение больных и здоровых в сибствах не противоречит предположению об АД наследовании заболеваний в анализируемых семьях 2=0,00995; р<0,05, D.f.=1. ^ Кировской области. В результате медико-генетического обследования населения 10 районов Кировской области и после проведения сегрегационного анализа было выделено 117 больных из 95 семей (81 больной из 71 семьи с АР типом наследования и 36 больных из 24 семей с АД). Семьи с Х-сц. наследуемой тугоухостью не зарегистрированы, но, учитывая, что данные формы тугоухости составляют менее 2% (Fischel-Ghodsian N., Kopke R.D., 2004; McKusick V.A., 2007), данным фактом можно пренебречь (Табл. 1). Как следует из табл. 1, доля больных с АР типом наследования составила 69,2%, от общего числа выявленных пациентов с нарушением слуховой функции, с АД типом наследования – 30,8%, соответственно. Вклад синдромальной тугоухости в обследованной выборке составил 28,2%, тогда как на изолированную тугоухость приходится основная масса больных – 71,8%. Таким образом, суммарная распространенность наследственных заболеваний с нарушением слуха в 10 районах Кировской области составила 1:1043 человек, при этом изолированная тугоухость встречается у каждого 1453 жителя, а синдромальная – у каждого 3699. Среди синдромальной тугоухости доля больных с АР типом наследования тугоухости составила 33,3%, с АД заболеваниями – 66,7%, в данной ситуации имеет место явное преобладание АД синдромальной тугоухости. Доля больных с изолированной АР тугоухостью составила 83,3%, с АД – 16,7%. Таблица 1. Число семей и больных с различными типами наследования синдромальной и изолированной тугоухости, выявленных в 10 обследованных районах.
Примечание: АД-С – синдромальные нарушения слуха с аутосомно-доминантным типом наследования; ^ – суммарно изолированные и синдромальные нарушения слуха с аутосомно-доминантным типом наследования; АР-С – синдромальные нарушения слуха с аутосомно-рецессивным типом наследования; АР-И – изолированные нарушения слуха с аутосомно-рецессивным типом наследования; АР-О – суммарно изолированные и синдромальные нарушения слуха с аутосомно-рецессивным типом наследования; сем – семей; бол – больных . Значения распространенности (на 10000 человек) синдромальной АД тугоухости колеблются от 0 в Немском, Даровском, Свечинском и Куменском районах до 5,64±2,30 в Унинском (рис. 2). Изолированная АД тугоухость выявлена только в трех из обследованных районов: Немском, Даровском и Куменском (рис. 2). Максимальное значение выявлено в Немском районе – 7,75±2,93 на 10000 человек. Между отдельными районами выявлены статистические различия в распространенности АД синдромальной и изолированной тугоухости. Средневзвешенное значение распространенности АД наследственной тугоухости составило 2,95±0,49 на 10000 человек.  Рис. 2. Значения распространенности (на 10000 человек) синдромальной и изолированной тугоухости с АД типом наследования в 10 районах Кировской области. На рис. 3 представлена распространенность (на 10000 человек) АР наследственной тугоухости в 10 обследованных районах.  Рис. 3. Значения распространенности (на 10000 человек) синдромальной и изолированной тугоухости с АР типом наследования в 10 районах Кировской области. Значения распространенности (на 10000 человек) изолированной АР тугоухости колеблются от 2,50±1,44 в Шабалинском районе до 11,86±4,48 в Богородском. Средневзвешенное значение распространенности АР наследственной тугоухости составило 6,64±0,74 на 10000 человек. Значения распространенности (на 10000 человек) всей наследственной тугоухости колеблются от 6,01±1,46 в Советском районе до 16,95±5,36 – в Богородском, таким образом, наблюдается разница в отягощенности между районами в 2,82 раза (рис. 4).  ^ 9,58±0,89 Рис. 4. Значения распространенности (на 10000 человек) наследственной тугоухости по районам Кировской области. Средняя распространенность наследственной тугоухости по 10 районам составила 9,58±0,89 на 10000 человек. Эти данные также сопоставимы с данными мировой литературы и значительно выше, чем данные по российским популяциям (рис. 5).  Рис. 5. Суммарная распространенность наследственной тугоухости (на 10000 человек) в различных регионах России.^ на распространенность наследственной тугоухости в Кировской области. Различия в уровне значений отягощенности аутосомной патологией могут быть объяснены особенностями генетической структуры исследуемых популяций. В девяти из обследованных районах на основании частот фамилий, были подсчитаны значения случайного инбридинга для населения порайонно (табл. 2). Таблица 2. Значения случайного инбридинга Fst, и распространенности (на 10000 человек) АР и всей наследственной тугоухости в Кировской области.
Наибольшее значение случайного инбридинга выявлено в Богородском районе области. В этом же районе зарегистрирована максимальная распространенность наследственной АР тугоухости и суммарной наследственной тугоухости из девяти изученных районов. Коэффициент линейной корреляции между распространенностью АР наследственной тугоухости и значениями случайного инбридинга Fst составил 0,77±0,24 (по Пирсону). На рис. 6 наглядно показана зависимость распространенности (на 10000 человек) АР тугоухости от значений случайного инбридинга Fst по 9 районам Кировской области. Корреляция с распространенностью аутосомно-доминантной тугоухости не проводилась в связи с малым количеством больных. Проведен корреляционный анализ между значениями случайного инбридинга и величинами суммарной (аутосомно-доминантной и аутосомно-рецессивной) наследственной тугоухости по районам. Коэффициент корреляции составил r=0,81±0,22. Таким образом, полученный коэффициент корреляции наглядно иллюстрирует, что выявленная дифференциация в значениях распространенности наследственной тугоухости по районам объясняются различной степенью генетической подразделенности изученных субпопуляций и действием эффективного дрейфа.  Рис. 6. Корреляционный анализ между уровнем случайного инбридинга Fst и значениями отягощенности населения АР тугоухостью. ^ 10 районов области и г. Кирова. Нарушения слуха различной этиологии первично зарегистрированы у 312 детей из 307 неродственных семей. Распространенность тугоухости составила 1:276 детей. Распространенность тугоухости вследствие воспалительных заболеваний среднего уха составила 1:616 детей. Факторы риска согласно приказу (Таварткиладзе Г.А. и др., 2006), выявлены в анамнезе у 29 больных. Предположительно наследственные формы тугоухости зарегистрированы у 143 больных детей из 140 семей. Проведенный сегрегационный анализ подтвердил наследственную природу тугоухости в рассматриваемой выборке. Распространенность наследственной тугоухости составила 1:603 ребенка. Таким образом, наследственная тугоухость составила 46% в структуре всей детской тугоухости в Кировской области и г. Кирове (рис. 7).  Рис. 7. Доли наследственной и ненаследственной тугоухости у детей в 10 районах Кировской области и г. Кирове. Полученные результаты сопоставимы с данными мировых и российских ученых о примерно равнозначном вкладе генетических и экзогенных факторов в общую структуру тугоухости. Частота наследственной тугоухости среди детского населения в г. Кирове и 10 районах Кировской области рассчитана на 1000 новорожденных за семилетний период (учитывая возраст манифестации у большинства больных) с 1995 по 2001 гг. отдельно для изолированной, синдромальной и всей наследственной тугоухости. Также отдельно проведена оценка частоты врожденной наследственной тугоухости за данный период. Данные о частоте наследственной тугоухости за 2002-2009 гг. не приводятся в связи с невозможностью достоверной регистрации всех случаев нарушения слуха ввиду раннего возраста больных (0-5 лет), что может заведомо занизить показатели. Количество новорожденных в период с 1995 по 2001 гг. в г. Кирове и 10 районах Кировской области – 35939. Число новорожденных с тугоухостью по годам варьировало от 5 в 1997 г. до 14 в 2001, статистически значимых различий в значениях рождаемости не выявлено (26=6,61; P>0,05). Детей с наследственными нарушениями слуха, рожденными в данный период, выявлено 58, среди них с изолированной тугоухостью 45 детей, с синдромальной – 13 детей; случаев врожденной изолированной тугоухости выявлено 30, врожденной синдромальной – 3. Н ^ 1,61 на 1000 новорожденных (1 на 621 новорожденный) а рис. 8 представлены частоты (на 1000 новорожденных) наследственной тугоухости за период с 1995 по 2001 гг. суммарно по 10 районам Кировской области и г. Кирову. Частота синдромальной тугоухости (на 1000 новорожденных) варьирует от 0,19 в 1995 г. до 0,72 в 1996 г. Вариабельность частоты изолированной тугоухости (на 1000 новорожденных) значительно выше: от 0,54 в 1997 г., до 2,43 – в 2001 г. Значения всей наследственной тугоухости (на 1000 новорожденных) колеблются от 0,91 в 1997 г., до 2,83 – в 2001 г.  Рис. 8. Частота наследственной тугоухости (на 1000 новорожденных) у детей с 1995 по 2001 годы. Средняя частота (на 1000 новорожденных) изолированной и синдромальной наследственной тугоухости составила 1,25 и 0,36, соответственно, всей наследственной тугоухости – 1,61 (1 на 621 новорожденный). Средневзвешенные значения распространенности (на 10000 детей) наследственной тугоухости составили 16,59±1,39 (1 на 603 ребенка), синдромальной (АР, АД, Х-сц.) 3,36±0,62 (1 на 2976 детей), изолированной (АР, АД) 13,23±1,24 (1 на 755 детей). Как видно, значения частоты наследственной тугоухости не отличаются от значений распространенности, что достаточно закономерно, учитывая 100% выживаемость пациентов с данным диагнозом. Также оценены значения частоты врожденных наследственных нарушений слуха за указанный период. На рис. 9 представлены частоты (на 1000 новорожденных) врожденных наследственных нарушений слуха за период 1995-2001 гг. ^ 0,83 на 1000 новорожденных (1 на 1205 новорожденных)  Рис. 9. Частота врожденной наследственной тугоухости (на 1000 новорожденных) у детей с 1995 по 2001 годы. Средняя частота врожденной изолированной наследственной тугоухости составила 0,83 на 1000 новорожденных (1 на 1205 новорожденных). В данном исследовании в 10 районах Кировской области и г. Кирове средняя частота врожденной наследственной тугоухости за семилетний период (1995-2001 гг.) достаточно высока, однако, соответствует таковой по литературным данным: частота всей врожденной тугоухости составляет 1 на 600-1000 новорожденных (Маркова Т.Г., 2004; Hone S.W., Smith R.J., 2002; 2003; Fitzgerald T. et al., 2004). Наследственная тугоухость, как было указано ранее, составляет половину всех случаев нарушения слуха (Smith R.J. et al., 2005), следовательно, ее частота оценивается как 1 на 1200-2000 новорожденных. Таким образом, выявлена высокая частота наследственной тугоухости в Кировской области. ^ в 10 районах Кировской области и г. Кирове. Нозологический спектр наследственных нарушений слуха у детей в 10 районах Кировской области и г. Кирове включил 12 АД заболеваний, 9 – АР и 2 Х-сц. (табл. 3). Самыми частыми формами зарегистрированы изолированная нейросенсорная АР тугоухость (1:843), а среди синдромов с тугоухостью – синдром микротии с атрезией наружных слуховых проходов и кондуктивной тугоухостью (1:12313) и синдром Тричер Коллинза-Франческетти (1:28731). Для сравнения, средняя частота встречаемости синдрома Тричер Коллинза-Франческетти в ранее обследованных популяциях России, общей численностью 3 млн. человек составила 1:125000 (Зинченко Р.А. и др., 2009). Таблица 3. Распространенность наследственной тугоухости у детского населения в 10 районах Кировской области и г. Кирове.
Примечание:*** – не уточнен номер по базе OMIM, сем – семей, бол – больных ^ Одним из основных методов подтверждающей диагностики наследственной этиологии тугоухости является молекулярно-генетическое обследование. Определение частоты 7 мажорных мутаций в генах GJB2 (35delG, 167delT, 235delC, М34Т), GJB6 ((del(GJB6-D13S1854)), (del(GJB6-D13S1830)), ТМС1 (R34X) проведено 173 больным пациентам детского возраста и членам их семей с несиндромальной тугоухостью, в том числе 59 семьям, в которых по клинико-генеалогическим данным диагноз наследственной нейросенсорной тугоухости был снят, поскольку случаи нейросенсорной тугоухости в семьях были единичные, возможность наличия в генотипе больных частых мутаций не исключалась (Зинченко Р.А. и др., 2002). В этих семьях мутации выявлены не были. От обследования отказались 9 семей. Таким образом, молекулярно-генетическое обследование проведено 105 больным детям с наследственной изолированной тугоухостью из 100 неродственных семей. Спектр найденных мутаций и генотипы больных представлены на рис. 10 и в табл. 4.
Рис. 10. Спектр (А) найденных мутаций в гене GJB2 и генотипы больных (Б). Таблица 4. Спектр найденных мутаций в гене GJB2 и генотипы больных.
Примечание: больн – больных, хром – хромосом, + – аллель с неидентифицированной мутацией или нормальный аллель. Молекулярно-генетический анализ показал наличие мутационных изменений у 51 ребенка (48,6%), у 54 детей (51,4%) мутации не найдены. Анализ мутации 35delG в гене GJB2 у всех обследованных детей с изолированной нейросенсорной тугоухостью показал наличие мутационных изменений у 50 детей (51,0%): в гомозиготном состоянии у 32 детей (32,7%), в гетерозиготном состоянии – у 18 детей (18,4%), в том числе в компаунде с другими мутациями – у 2 детей (2,0%). Суммарная частота мутации 35delG в гене GJB2 составила 39,05%. Мутация 167delT гене GJB2, делеции в гене GJB6 и мутация R34X в гене ТМС1 не выявлены. Проанализированы особенности клинического течения заболевания у пациентов с различными генотипами (рис. 11).
Рис. 11. Характеристики тугоухости у пробандов с генотипами 35delG/35delG, 35delG/+ и с не идентифицированным генотипом +/+.
^ у носителей мутации М34Т. Ниже представлены фенотипически различные проявления мутации М34Т в двух семьях в зависимости от генотипа пациентов, которые необходимо учитывать при медико-генетическом консультировании. В  первой семье у пробанда и его родителей идентифицирован генотип М34Т/+ (рис. 12). Рис. 12. Родословная семьи к-ш-с-022, в которой мутация М34Т наследуется аутосомно-доминантно. У пробанда и его брата врожденная двусторонняя нейросенсорная непрогрессирующая тугоухость 4 степени. Мать и отец имеют генотип М34Т/+ и врожденную тугоухость 3 степени. Данная семья и их предки длительное время проживает на территории Советского района. Возможно, в данной ситуации имеет место эффект основателя. Нет возможности установить, от кого из родителей пробанд унаследовал данную мутацию. В семье проведено медико-генетическое консультирование и рекомендована ДНК-диагностика сибсам пробанда, так как в литературе описана неполная пенетрантность заболевания у носителей данной мутации и внутрисемейный клинический полиморфизм. Вторая семья проживает в г. Кирове (рис. 13). У пробанда 17 лет, выявлена мутация М34Т в компаунде с мутацией 35delG. Тугоухость двусторонняя, нейросенсорная, средне-тяжелой степени, диагностирована в возрасте 8 лет. Пробанд учится в массовой школе. Мать и бабка пробанда с генотипом М34Т/+ имеют двустороннюю нейросенсорную тугоухость средней степени, медленно прогрессирующую диагностированную впервые в возрасте 12 лет. Отец пробанда с генотипом 35delG/+ имеет нормальный слух. В данной семье тип наследования заболевания определить сложно: возможно как АД состояние, обусловленное мутацией М34Т в гетерозиготном положении, так и АР, обусловленное генотипом М34Т/35delG. Риск повторного рождения в данной семье определен как в случае АД наследования. Однако более раннее начало и тяжелое течение заболевания, обусловлено нахождением мутации М34Т в компаунде с мутацией 35delG. Р  ис. 13. Родословная семьи к-к-045 (серым цветом показаны члены семьи с тугоухостью средней степени тяжести и генотипом М34Т/+). Таким образом, можно сделать вывод, что исследования только частых мутаций не достаточно, учитывая региональные и этнические особенности различных популяций России. При медико-генетическом консультировании семьи в настоящее время желательно применение секвенирования всего гена GJB2. ^ Учитывая высокую частоту синдрома Тричер Коллинза-Франческетти в области, проведена ДНК-диагностика – поиск мутаций в гене TCOF1. Из трех больших семей с клинически диагностированным данным синдромом согласие получено только от семьи из Унинского района (рис. 14).  Рис. 14. Родословная семьи ко-у-01 с синдромом Тричер Коллинза-Франческетти из Унинского района (черным цветом показаны члены семьи с тугоухостью и лицевыми дизморфиями, серым – только с лицевыми дизморфиями). В данной семье выражен внутрисемейный клинический полиморфизм – у некоторых членов семьи в фенотипе имеются лицевые дизморфии и тугоухость, у других – только лицевые дизморфии и нормальный слух. В результате секвенирования обнаружена ранее неописанная мутация в гетерозиготном состоянии в 23 экзоне (3635C>G), приводящая к замене аланина на глицин в 1176 позиции аминокислотной последовательности. ^ Медико-генетическое консультирование с расчетом риска повторного рождения больных детей с учетом выявленной частоты заболевания в регионе во всех семьях проведено впервые, хотя на учете у сурдолога многие из данных пациентов состояли и имели инвалидность. Выявление генетически обусловленных форм дает возможность проводить корректное медико-генетическое консультирование в семьях по вопросу планирования дальнейшего деторождения. В семьях с подтвержденной наследственной этиологией тугоухости проведена отдельная работа и разъяснены возможности пренатальной диагностики, в результате проведения которой в трех семьях родились здоровые дети. ^
ВЫВОДЫ
^
|
||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
А)
Б)
Ваша оценка этого документа будет первой.
Ваша оценка:
Похожие:
База данных защищена авторским правом ©MedZnate 2000-2016
allo, dekanat, ansya, kenam
обратиться к администрации | правообладателям | пользователям
allo, dekanat, ansya, kenam
обратиться к администрации | правообладателям | пользователям