Учебно-методическое пособие предназначено для аспирантов, научных работников, врачей различных специальностей, студентов медицинских вузов. Учебно-методическое пособие составлено доктором медицинских наук, доцентом И. Е. Третьяковой icon

Учебно-методическое пособие предназначено для аспирантов, научных работников, врачей различных специальностей, студентов медицинских вузов. Учебно-методическое пособие составлено доктором медицинских наук, доцентом И. Е. Третьяковой





НазваниеУчебно-методическое пособие предназначено для аспирантов, научных работников, врачей различных специальностей, студентов медицинских вузов. Учебно-методическое пособие составлено доктором медицинских наук, доцентом И. Е. Третьяковой
Дата06.03.2013
Размер0.5 Mb.
ТипУчебно-методическое пособие
Государственное образовательное учреждение высшего

профессионального образования

«Северо-Осетинская государственная медицинская академия

Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию»


КАФЕДРА МИКРОБИОЛОГИИ, ВИРУСОЛОГИИ И ИММУНОЛОГИИ


И.Е. ТРЕТЬЯКОВА


ИФА-ДИАГНОСТИКА В ПРАКТИКЕ ВРАЧА


УЧЕБНО-МЕТОДИЧЕСКОЕ ПОСОБИЕ


ВЛАДИКАВКАЗ 2010

В учебно-методическом пособии описаны наиболее часто используемые в практике врачей различных специальностей иммуноферментные методы оценки противоинфекционного иммунитета, иммунного статуса, гормонального состояния пациентов, их репродуктивной функции, а также маркеров беременности и опухолевых маркеров.

Учебно-методическое пособие предназначено для аспирантов, научных работников, врачей различных специальностей, студентов медицинских ВУЗов.


Учебно-методическое пособие составлено доктором медицинских наук, доцентом И.Е. Третьяковой.


РЕЦЕНЗЕНТЫ:

Зав. каф. нормальной физиологии ГОУ ВПО СОГМА Росздрава, проректор по НИР, профессор, доктор медицинских наук В.Б. Брин.

Зав. каф. общей гигиены ГОУ ВПО СОГМА Росздрава, профессор, доктор медицинских наук А.Р. Кусова.


Учебно-методическое пособие утверждено на заседании центрального координационного методического совета ГОУ ВПО СОГМА Росздрава протокол № 2 от 04.12.2009 г.


СОДЕРЖАНИЕ

ВВЕДЕНИЕ 5

^ МАРКЁРЫ ПАРАЗИТАРНЫХ И ИНФЕКЦИОННЫХ ЗАБОЛЕВАНИЙ

1. Лямблия (L. intestinalis) 7

2. Трихомонада 7

3. Токсоплазма (T. gondii) 7

4. Хламидия (Ch. trachomatis) 8

5. Вирус клещевого энцефалита (ВКЭ) 9

6. Вирус краснухи 10

7. Вирусы простого герпеса (ВПГ) 1 и 2 типов 11

8. Вирус Эпштейна-Барра (ВЭБ) (вирус герпеса человека 4 типа) 12

9. Цитомегаловирус (ЦМВ) 13

10.Вирус герпеса человека 8 типа (ВГЧ-8) 14

^ МАРКЁРЫ АУТОИММУННЫХ И АЛЛЕРГИЧЕСКИХ

ЗАБОЛЕВАНИЙ

1. Аутоантитела класса G к неденатурированной и к денатурированной

ДНК 15

2. Ревматоидный фактор класса М (РФ-М) 15

3. Суммарный ревматоидный фактор (РФ) 15

4. Антифосфолипидные антитела (АФЛ) 16

5. Антиспермальные антитела (АСА) 16

6. Суммарный IgE 17

^ ГОРМОНЫ РЕПРОДУКТИВНОЙ СИСТЕМЫ

  1. Лютеинизирующий гормон (ЛГ) 18

  2. Фолликулостимулирующий гормон (ФСГ) 19

  3. Прогестерон 20

  4. Пролактин 20

  5. Тестостерон 22

  6. Эстрадиол 23

  7. Кортизол 23

^ ТИРЕОИДНАЯ ГРУППА 24

МАРКЁРЫ БЕРЕМЕННОСТИ……………………………………………26

1. Альфа-фетопротеин (АФП) 26

  1. Плацентарный лактоген (ПЛ) 27

  2. Хорионический гонадотропин (ХГ) 28

  3. Трофобластический β1-гликопротеин (ТБГ) 29

  4. Неконъюгированный эстриол 30

^ ОПУХОЛЕВЫЕ МАРКЁРЫ 31

  1. Раковый эмбриональный антиген (РЭА) 32

  2. Альфа-фетопротеин (АФП) 32

  3. Хорионический гонадотропин (ХГ) 33

  4. Трофобластический β1-гликопротеин (ТБГ) 33

  5. Нейрон-специфическая энолаза (НСЭ) 34

  6. β2-микроглобулин (βМГ) 34

  7. Тиреоглобулин (ТГ) 35

  8. Раковый антиген 19-9 (СА 19-9) 35

  9. Раковый антиген 15-3 (СА 15-3) 36

  1. Раковый антиген 125 (СА 125) 37

  2. Раковый антиген 242 (СА 242) 38

  3. Простата-специфический антиген (ПСА) 38

  4. Лактоферрин (ЛФ) 39

ПРИМЕЧАНИЕ 40

^ СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ 41


ВВЕДЕНИЕ

Учебно-методическое пособие может быть использовано при работе на одном из самых современных аппаратов для иммуноферментного анализа - полном автомате Personal LAB.

Personal LAB представляет открытый микропланшетный формат, позволяющий использовать не только импортные, но и отечественные тест-системы, а также допускающий одновременную работу на 2 планшетах и проведение до 6 методик. Автоматическое внесение образцов, стандартов и реагентов дает возможность избежать ошибок и субъективизма при получении результатов. В программном обеспечении прибора установлена программа внутреннего контроля качества UNITY-PC, v. 143.

В основе метода ИФА лежит взаимодействие антигена (АГ) и антитела (AT); при этом АГ или AT, вступающее в иммунную реакцию, метится ферментом. По превращению субстрата ферментом можно судить о количестве вступившего во взаимодействие компонента реакции АГ-АТ. Чувствительность ИФА позволяет определить минимальные количества вещества (нанограммы).

Различают методы конкурентного и неконкурентного иммуноферментного анализа.

^ КОНКУРЕНТНЫЙ МЕТОД

Первым этапом данного метода будет присоединение AT к носителю (например, дно лунки пластикового планшета) за счёт химической реакции или физико-химического взаимодействия. Избыток AT удаляют отмыванием. Затем вносят строго определенное количество меченного ферментом стандартного АГ и определенное количество образца, содержащего немеченный анализируемый АГ. Таким образом, при одновременном внесении меченного и немеченного АГ происходит их конкурентное связывание с AT. По окончании реакции АГ-АТ иммунные комплексы оказываются присоединёнными к твёрдой фазе за счёт AT; избыток АГ удаляют отмывкой, добавляют субстрат для фермента, останавливают реакцию через определённое время и проводят измерение оптической плотности, по которой и определяют количество анализируемого АГ.

В другом варианте конкурентного ИФА с твёрдой фазой первично связывается стандартный АГ. После отмывки добавляют меченные ферментом AT и исследуемый АГ. Связывание меченных AT с фиксированным стандартным АГ конкурентно тормозится растворенным искомым АГ.


^ НЕКОНКУРЕНТНЫЙ МЕТОД

К числу неконкурентных методов относится метод двойных AT или "сэндвич-метод". Фиксированные на твёрдой фазе AT (первые AT) инкубируют со стандартным или анализируемым АГ. После отмывания добавляют избыток меченных AT (вторые AT, конъюгированные с ферментом), несвязавшиеся AT отмывают, добавляют субстрат для энзима, останавливают реакцию. Продукт ферментативной реакции образуется в количествах, пропорциональных количеству связанного АГ. Часто используют немеченные вторые AT; о реакции в этом случае судят по связыванию фермент-меченных третьих AT, которые являются "антителами к антителам", т.е. специфичными по отношению к IgG. В любом случае первые и вторые AT должны принадлежать животным разных видов.

Для иммуноферментного определения AT часто используется непрямой, неконкурентный метод. АГ фиксируют на твердой фазе, после отмывания проводят инкубацию с раствором анализируемых AT. Если произошло связывание AT, их можно количественно определить при помощи меченной ферментом антиглобулиновой сыворотки с последующим добавлением субстрата.

^ ПРЕИМУЩЕСТВА ИФА

  1. Стабильность конъюгатов (AT или АГ, меченных ферментом) позволяет хранить их в течение длительного времени;

  2. Измерение оптической плотности проводят в оптическом диапазоне;

  3. Результаты ИФА можно оценивать качественно без применения аппаратуры (визуально);

  4. ИФА очень легко поддаётся автоматизации.


^ МАРКЁРЫ ПАРАЗИТАРНЫХ И ИНФЕКЦИОННЫХ ЗАБОЛЕВАНИЙ

1. Лямблия (L. intestinalis)

Вызывает лямблиоз - паразитарную инвазию, протекающую в виде латентного носительства, а также манифестных форм, преимущественно в виде дисфункции кишечника. Механизм заражения - фекально-оральный. Вегетативные формы обитают в верхних отделах тонкого кишечника, присасываясь к эпителию. В нижних отделах кишечника образуют цисты. При лямблиозной инвазии в сыворотке крови обследуемых можно обнаружить антитела к антигенам лямблий, что в комплексе с другими методами позволит поставить диагноз лямблиоз. Наличие в сыворотке IgM к антигенам лямблий может свидетельствовать о наличии острого лямблиоза, диагностика которого возможна на 10-14 день от начала инвазии.

2. Трихомонада

Некоторые виды трихомонад являются комменсалами, например, T. tenax - комменсал ротовой полости, T. hominis - комменсал толстой кишки. Другие виды вызывают трихомониаз - паразитарную инвазию, в частности, T. vaginalis - возбудитель урогенитального трихомониаза. Выявление IgG к антигенам Trichomonas (T. vaginalis, T. hominis, T. tenax) в сыворотке крови поможет в постановке диагноза трихомониаза в комплексе с другими методами.

3. Токсоплазма (T. gondii)

Вызывает токсоплазмоз - паразитарную инвазию. Заражение человека происходит алиментарным путём, реже через кожу и трансплацентарно. Первичным хозяином является кошка. Большинство случаев токсоплазмоза у людей протекает бессимптомно. Однако первичное заболевание токсоплазмозом может привести к серьёзным последствиям. Трансплацентарное заражение плода происходит лишь при заболевании женщины токсоплазмозом во время беременности. У женщин, инфицированных или переболевших токсоплазмозом до беременности, передача токсоплазм плоду не происходит. Несмотря на поражение плода, в половине или даже в 2/3 случаев рождаются нормальные дети, у которых на наличие инвазии указывают только повышенный уровень IgM или наличие специфических антител против токсоплазм в пуповинной крови. Полагают, что более тяжёлые формы поражения плода обусловлены его инфицированием в первые 3 месяца беременности.

Для врождённого токсоплазмоза характерна триада Сэбина: хориоретинит, гидроцефалия, кальцификаты мозга.

При отрицательном результате на Toxo-IgM и положительном на Toxo-IgG беременные относятся к "спокойной" группе (имеющие иммунитет к токсоплазме) и в дальнейшем без клинических показаний в обследовании на токсоплазмоз не нуждаются.

При положительном результате на Toxo-IgM и положительном на Toxo-IgG через 2-3 недели повторно делают анализ. Если концентрация Toxo-IgG во 2-ом образце сыворотки возрастёт по сравнению с 1-ым в 3 раза и более, то ставят диагноз острого токсоплазмоза.

Промежуточный результат Toxo-IgG может также свидетельствовать о начале развития иммунного ответа при острой стадии заболевания. Поэтому такие женщины обследуются как потенциально положительные - в динамике на Toxo-IgM и на Toxo-IgG.

В случае отрицательных и промежуточных результатов Toxo-IgG беременные относятся к группе риска (не имеющие иммунитет к токсоплазме) и каждые 3 месяца должны обследоваться на токсоплазмоз.

При выявлении у беременной свежей токсоплазменной инвазии лечение следует проводить независимо от наличия и выраженности симптомов заболевания.

Определение Toxo-IgM играет решающую роль при постановке диагноза у новорожденных, т.к. специфические IgM, в отличие от IgG, не могут передаваться плоду от матери.

4. Хламидия (Ch. trachomatis)

Ch. trachomatis - возбудитель хламидийной инфекции, наиболее частой локализацией которой является урогенитальный тракт.

IgM обнаруживаются в ранней стадии иммунного ответа и характеризуют острую стадию заболевания. Пик их концентрации приходится на 2-ю неделю заболевания, затем титр постепенно снижается, и через 2,5-3 месяца они перестают выявляться. IgM могут быть также определены при обострении хронического хламидиоза. Т.к. IgM не способны преодолевать плацентарный барьер, их присутствие в крови новорожденного свидетельствует о врожденной инфекции.

IgG начинают обнаруживаться примерно через месяц после начала заболевания и могут выявляться в низком титре в течение многих лет.

IgA появляются в крови в конце первого месяца инфекции и выявляются до тех пор, пока хламидийный антиген остается доступным для иммунокомпетентных клеток. Учитывая короткий период полураспада IgA (около 6 дней), можно, определяя их уровень, получить адекватное отображение текущего инфекционного процесса. При успешно проведенном лечении титр IgA существенно снижается уже через 1-2 недели. При реинфекции уровень антител вновь возрастает. Если после проведенного лечения титр IgA и IgG не снижается, то это свидетельствует о хронической (персистирующей) форме инфекции.

^ 5. Вирус клещевого энцефалита (ВКЭ)

Клещевой энцефалит - вирусная инфекция, характеризующаяся поражением серого вещества головного и спинного мозга. Резервуаром и источником инфекции являются дикие животные (преимущественно грызуны), переносчики - иксодовые клещи. Заражение человека происходит через укус клеща и при употреблении молока инфицированных коз.

IgM к ВКЭ, как правило, появляются на 4-5 день после первых клинических симптомов, а не сразу после укуса клеща. В случае благоприятного исхода болезни уровень IgM против антигена ВКЭ быстро снижается. Однако у некоторых больных их концентрация остаётся достаточно высокой в течение длительного промежутка времени (до 3 месяцев).

IgG к ВКЭ появляются в крови инфицированного человека, как правило, на несколько дней позже, чем IgM. Факт повышения титра специфических IgG в 2-4 раза за две недели говорит о наличии в крови больного ВКЭ. Высокий титр IgG сохраняется у переболевших в течение 2-3 лет. Следует заметить, что плазмаферез, переливание крови и другие процедуры, используемые при лечении больных КЭ, нередко приводят к искажению серологического профиля - уровень IgG повышается медленнее, чем в 2-4 раза. Поэтому для надёжной диагностики развития КЭ необходимо параллельное исследование сыворотки крови пациента на наличие специфических IgM.

Для окончательного подтверждения диагноза КЭ и мониторинга терапии необходима также детекция РНК вируса в крови методом ПЦР.

^ 6. Вирус краснухи

Краснуха - острая респираторная вирусная инфекция; характеризуется в 70-75% случаев кратковременным лихорадочным состоянием, пятнистой сыпью и увеличением заднешейных и затылочных лимфоузлов. Нередко краснушная инфекция протекает бессимптомно. Пути передачи: воздушно-капельный, трансплацентарный.

До 20% женщин детородного возраста не имеют иммунитета к вирусу краснухи и входят в группу риска по заболеванию краснухой во время беременности и внутриутробному инфицированию плода. Заболевание краснухой в процессе беременности, особенно в течение первого триместра, может быть причиной серьёзных поражений плода. При перенесении заболевания во втором и третьем триместрах процент врожденных уродств снижается. Последствия инфицирования плода - синдром врожденной краснухи - включает: поражения глаз (полная или частичная слепота), поражения уха (полная или частичная глухота) и пороки формирования сердца.

В ответ на инфекцию в организме человека начинается продукция IgM, направленных преимущественно к поверхностному гликопротеину E1 вириона краснухи. Затем происходит переключение иммунной системы на синтез IgG, которые направлены ко всем трём антигенно-значимым вирусным белкам - С, Е1 и Е2.


Показателем текущей инфекции является наличие вируса или вирусной РНК в клиническом материале и/или четырёхкратное нарастание специфических IgG при исследовании парных сывороток, взятых у пациента с интервалом в 10-15 дней, и/или наличие специфических IgM. IgM появляются на 15-20 день с момента инфицирования и могут сохраняться в крови до 2-х месяцев. Следует отметить, что при реактивации и реинфекции вирусом краснухи IgM не продуцируется, и факт реактивации или реинфекции можно подтвердить только по увеличению концентрации специфических IgG в парных сыворотках. Определение уровня IgG позволяет также оценить напряжённость иммунитета и прогнозировать возможность развития заболевания краснухой при реинфекции.

Обнаружение специфических IgM у новорожденных указывает на перенесенное или внутриутробное инфицирование вирусом краснухи, одновременно у них могут быть выявлены IgG, поступившие от матери.

У женщин детородного возраста рекомендуется определять иммунный статус до беременности или вначале её с целью выявления групп риска - серонегативных. Наблюдение сероконверсии у таких женщин во время беременности может служить основанием для постановки вопроса о её прерывании.

^ 7. Вирусы простого герпеса (ВПГ) 1 и 2 типов

Восприимчивость к ВПГ всеобщая, число серопозитивных лиц среди взрослого населения составляет 60-100% в зависимости от региона и социально-экономических условий. ВПГ 1-го типа вызывает орофациальный герпес, ВПГ 2-го типа вызывает генитальный герпес, установлена его роль в возникновении рака шейки матки. ВПГ передается контактным, воздушно-капельным и вертикальным (от матери плоду) путями. Первичное инфицирование ВПГ, как правило, происходит в раннем детстве и в 80-90% случаев протекает бессимптомно, в 10-20% случаев наблюдаются клинические проявления. Далее ВПГ сохраняется в организме в течение всей жизни, находясь в латентном состоянии. Рецидив инфекции возникает обычно на фоне болезней и/или состояний, снижающих иммунитет. Первичное инфицирование или рецидивы во время беременности наиболее опасны для плода (инфицирование плода может происходить трансплацентарно и во время родов).

При первичной инфекции в первую неделю после инфицирования в крови пациента определяются IgM и их титр повышается достаточно быстро. IgG регистрируются, начиная с 3-4 недели после инфицирования, их концентрация повышается в течение нескольких недель (6-8 недель) до максимального уровня. К этому времени IgM регистрируются в малых титрах или не регистрируются совсем.

В случае рецидивирующей инфекции титр IgG начинает нарастать в более ранние сроки - со второй недели начала рецидива. При рецидивирующем генитальном герпесе появление IgM не всегда служит надежным маркером рецидива.

Регистрация в крови пациента IgM к ВПГ позволяет выявить и подтвердить острую стадию герпетической инфекции, поэтому обязательно обследование беременных на наличие специфических IgM.

^ 8. Вирус Эпштейна-Барра (ВЭБ) (вирус герпеса человека 4 типа)

ВЭБ поражает в основном два типа клеток: эпителий верхних дыхательных путей и пищеварительного тракта, а также В-лимфоциты. Соответственно, ВЭБ вызывает такие заболевания, как инфекционный мононуклеоз, злокачественная лимфома Беркитта, злокачественная носоглоточная карцинома. Заболевание малоконтагиозно за счет наличия большого числа иммунокомпетентных лиц (до 50% детей и 85% взрослых серопозитивны в отношении ВЭБ) и протекания болезни в стертых и атипичных формах.

У людей без дефектов иммунной системы первичное инфицирование ВЭБ может протекать бессимптомно или вызывать субклинические проявления болезни с положительными серологическими реакциями. В дальнейшем вирус может длительное время персистировать в клетках хозяина в виде латентной инфекции. При массированном поступлении вируса или недостаточности иммунной системы развивается вирусемия, приводящая к острым формам заболевания.

Наиболее специфичными и чувствительными маркерами острой стадии являются IgG к раннему антигену (ЕА) и IgM к капсидному комплексу (VCA), и паст-инфекции – IgG к ядерному антигену EBNA-1. Таким образом, определение IgG к антигенам EBNA и EA, а также IgM к VCA дает необходимую информацию для постановки диагноза и установления стадии инфекции.

^ Интерпретация серологических данных

Стадия инфекции

IgM к VCA

IgG к EA

IgG к EBNA

Инкубационный период или отсутствие инфицирования

-

-

-

Очень ранняя первичная инфекция

+

-

-

Ранняя первичная инфекция

+

+

-

Поздняя первичная инфекция

+/-

+

+/-

Атипичная первичная инфекция

+

-

+

Хроническая инфекция

-/+

+

-

Ранняя паст-инфекция

-

+

+

Поздняя паст-инфекция

-

-

+

Реактивация

+

+

+

Атипичная реактивация

+

-

+


^ 9. Цитомегаловирус (ЦМВ)

В большинстве случаев цитомегаловирусная инфекция (ЦМВИ) протекает в виде бессимптомного носительства и лишь на фоне первичного или вторичного иммунодефицитов способна проявляться как заболевание. ЦМВИ у беременных часто приводит к внутриутробному инфицированию плода. Особую опасность представляет первичное инфицирование ЦМВ во время беременности, т.к. в этом случае вероятность внутриутробного заражения плода достигает 50% с наиболее тяжелым течением ЦМВИ.

Наличие IgM к ЦМВ в сыворотке крови свидетельствует об остро текущем заболевании. Выявление специфических IgM у новорожденного показывает перенесенное внутриутробное инфицирование, т.к. IgM, в отличие от IgG, не передаются плоду от матери.

Определение IgG используется для выявления групп риска у женщин родового периода (серонегативных), для определения иммунного статуса доноров и реципиентов органов и тканей, а также в клинических исследованиях с анализом парных образцов сывороток.

Факт обнаружения в сыворотке крови IgM к ЦМВ может расцениваться как показатель текущего заболевания. Обнаружение же IgG к ЦМВ не может расцениваться как показатель текущего заболевания, для подтверждения диагноза необходимо исследовать титр сывороток, полученных в острую и реконвалесцентную стадии болезни. Диагностически значимым результатом является более чем 4-х кратное увеличение уровня антител в парных образцах сыворотки. Для более ранней диагностики именно острых стадий болезни рекомендуется выявление в сыворотке крови IgM и IgG к предраннему белку ЦМВ, титр которых быстро уменьшается при исчезновении клинических симптомов.

^ 10. Вирус герпеса человека 8 типа (ВГЧ-8)

ВГЧ-8 обнаруживается при саркоме Капоши у ВИЧ-серонегативных людей, а также при данной опухоли, ассоциированной с ВИЧ-инфекцией и СПИДом.


^ МАРКЁРЫ АУТОИММУННЫХ И АЛЛЕРГИЧЕСКИХ

ЗАБОЛЕВАНИЙ

  1. Аутоантитела класса G к неденатурированной и к денатурированной ДНК

Используются при диагностике системных заболеваний соединительной ткани (например, СКВ, склеродермии, ревматоидном артрите), хронического гепатита, инфекционного эндокардита и других заболеваний, сопровождающихся аутоиммунным процессом. При эффективной и успешной терапии концентрация антител к ДНК значимо снижается.

  1. ^ Ревматоидный фактор класса М (РФ-М)

Представляет собой ауто-антитела класса М к человеческим иммуноглобулинам класса G. Присутствие в сыворотке РФ-М является диагностическим критерием ревматоидного артрита и может наблюдаться за несколько лет до клинических проявлений болезни. Поэтому высокие титры РФ-М у лиц, не страдающих ревматоидным артритом, ассоциируются с повышенным риском развития заболевания. В дальнейшем титр РФ-М коррелирует с тяжестью процесса. РФ-М может также выявляться в сыворотке крови при вирусных поражениях различных органов, в частности, при вирусных гепатитах.

  1. ^ Суммарный ревматоидный фактор (РФ)

Представляет собой ауто-антитела классов А, М, G к человеческим иммуноглобулинам класса G. РФ обнаруживается в сыворотке 75-80% пациентов с ревматоидным артритом и является диагностическим критерием, может наблюдаться за несколько лет до клинических проявлений болезни. Поэтому высокие титры РФ-М у лиц, не страдающих ревматоидным артритом, ассоциируются с повышенным риском развития заболевания.

Уровни РФ классов IgG и IgA в первые 2 года течения ревматоидного артрита являются прогностическим признаком присоединения эрозивных процессов и системных проявлений. Они ассоциируются с внесуставным ревматоидным артритом, включая ревматоидные васкулиты и узелки, и с эрозивным поражением сосудов. Кроме того, РФ обнаруживается в сыворотке пациентов с аутоиммунными и инфекционными заболеваниями (например, при вирусных гепатитах), а также у лиц пожилого возраста.

  1. ^ Антифосфолипидные антитела (АФЛ)

Антифосфолипидные антитела представляют собой семейство антител, которые распознают антигены фосфолипидов и комплексные антигены, образовавшиеся в процессе взаимодействия фосфолипидов и фосфолипидсвязывающих белков. Аутоантитела могут вырабатываться к различным отрицательно заряженным фосфолипидам мембран тромбоцитов и эдотелия – кардиолипину (АКЛ), фосфатидилинозитолу (АФИ), фосфатидилсерину (АФСе), фосфатидиловой кислоте (АФК).

АФЛ являются маркером антифосфолипидного синдрома, под которым понимают венозные и/или артериальные тромбозы, различные формы акушерской патологии (привычные невынашивания беременности), тромбоцитопению и разнообразные неврологические, кожные, сердечно-сосудистые, гематологические нарушения.

АФЛ обнаруживаются в сыворотке крови человека при ревматических заболеваниях (системной красной волчанке, системной склеродермии, ревматоидном артрите и др.), некоторых заболеваниях центральной нервной системы, лимфопролиферативных синдромах, злокачественных опухолях, ряде острых и хронических вирусных, бактериальных и паразитарных заболеваний (например, сифилисе, туберкулезе, СПИДе, микоплазмозе, краснухе, болезни Лайма и др.). Избыточное образование АФЛ наблюдается при некоторых формах акушерской патологии (привычном невынашивании беременности, тяжелых токсикозах, задержке внутриутробного развития плода).

^ В сыворотке крови здоровых лиц АФЛ не превышает 7-10 Ед/мл.

  1. Антиспермальные антитела (АСА)

АСА - антитела, направленные против антигенов мембраны сперматозоидов, которые могут нарушать её функциональную целостность. Показано, что в присутствии IgG- и IgA-АСА ухудшается проникновение сперматозоидов через цервикальную слизь. АСА вызывают нарушения миграции сперматозоидов в половых путях женщины, капацитацию сперматозоидов и их связывание с zona pellucida, воздействуют на акросомальную реакцию.

АСА обнаруживаются как у мужчин, так и у женщин. Чаще всего (до 70%) АСА выявляются при обструктивных урогенитальных заболеваниях у мужчин, при острых и асимптоматичных урогенитальных инфекциях, хламидиозе, у пациентов с раком яичек. Также АСА находят при крипторхизме и орхиопексии. Определение АСА включено в перечень стандартных тестов диагностики мужского и женского бесплодия.

  1. ^ Суммарный IgE

Синтез IgE способны вызывать антигены гельминтов, некоторых микроорганизмов, ряд пищевых, лекарственных, бытовых, индустриальных агентов, пыльца многих растений и т.д. Стойкое повышение уровня IgE обычно происходит в условиях длительного поступления в организм относительно небольших количеств антигена, причем сенсибилизация может потом долго сохраняться даже в отсутствие антигена.

В отличие от других иммуноглобулинов относительное содержание IgE в крови незначительно. В течение детства его содержание постепенно увеличивается, достигая максимума в возрасте 13-15 лет, и снижается у взрослых и, далее, у пожилых людей в связи с общей десенсибилизацией организма. Повышенные уровни IgE обычно наблюдаются у больных атопическими или аллергическими заболеваниями (бронхиальная астма, бронхоспазм, поллинозы, экзема, крапивница, отек Квинке, экзантема и т.д.). По меньшей мере, в 15% случаев высокий уровень IgE в крови не коррелирует с наличием выраженных симптомов аллергии. Последнее может иметь место при инфекциях, кандидомикозах, воспалительных заболеваниях кожи, болезнях иммунной системы. Особенно же часто это бывает связано с гельминтозами или, у практически здоровых людей, с полиаллергенной сенсибилизацией, когда включаются адаптивные механизмы, блокирующие развитие реакций ГНТ. (Потенциально у этих людей сохраняется вероятность возникновения аллергических приступов в ответ на контакт с более или менее полным набором аллергенов, к которым был сенсибилизирован организм - контакта с одним из этих аллергенов в таких случаях бывает недостаточно).

Снижение концентрации IgE в крови отмечено при некоторых прогрессирующих опухолях и при определенных разновидностях агаммаглобулинемии.

В целом определение концентрации IgE в сыворотке крови следует рассматривать в качестве важного вспомогательного средства, позволяющего дифференцировать атопические заболевания и заболевания с аллергическими компонентами среди множества патологий, клинически проявляющихся как астма, частые заболевания дыхательных путей, хронические риниты и дерматиты, хроническая диарея и т.д.


^ ГОРМОНЫ РЕПРОДУКТИВНОЙ СИСТЕМЫ

1. Лютеинизирующий гормон (ЛГ)

ЛГ - является гликопротеином с молекулярной массой 30000 Да. Биологическая специфичность определяется его β-цепью. ЛГ продуцируется базофильными клетками передней доли гипофиза в ответ на секрецию гонадотропин-рилизинг гормона гипоталамуса.

У женщин ЛГ контролирует циклические изменения яичников во время нормального менструального цикла. В свою очередь стероиды яичников модулируют секрецию ЛГ. Выброс ЛГ в середине цикла вызывает разрыв фолликула и выход зрелой яйцеклетки. В течение I (фолликулиновой) и II (лютеиновой) фазы цикла концентрация ЛГ значительно ниже, чем в середине цикла. В менопаузе снижение функции яичников приводит к заметному повышению уровня ЛГ по механизму отрицательной обратной связи.

У мужчин основной функцией ЛГ является стимулирование продукции тестостерона клетками Лейдига. Высокий уровень тестостерона стимулирует сперматогенез в клетках Сертоли семенных канальцев яичек. Ингибирование высвобождения ЛГ осуществляется по механизму отрицательной обратной связи повышенной концентрацией тестостерона.

^ Нормальные концентрации ЛГ:

у женщин в I фазе — 4,6 (1,1 - 8,7) мМЕ/мл, во II фазе — 5,3 (< 0,9 - 14,4) мМЕ/мл, в овуляцию — 32,0 (13,2 - 72,0) мМЕ/мл, в постменопаузе — 19,3 (18,6 - 72) мМЕ/мл,

у мужчин — 5,3 (0,8 - 8,4) мМЕ/мл,

у детей до 10 лет — 0,20 - 0,67 мМЕ/мл.

У женщин повышенный уровень ЛГ может быть показателем первичной аменореи, преждевременного угасания функции яичников, менопаузы, синдрома поликистозных яичников, агенезии яичников. Снижение уровня ЛГ происходит при вторичной аменореи, при нарушении функции гипофиза, при синдроме Шихана, при приеме контрацептивов.

У мужчин повышенный уровень ЛГ может встречаться при первичной недостаточности функции яичек и клеток Сертоли, дисгенезии семенных канальцев, анорхии. Снижение концентрации ЛГ может быть при вторичной недостаточности функции яичек вследствие гипоталамо-гипофизарных нарушений.

^ 2. Фолликулостимулирующий гормон (ФСГ)

ФСГ - гликопротеиновый гормон с молекулярным весом около 30000 Да, состоящий из двух субъединиц, альфа и бета. ФСГ секретируется базофильными клетками передней доли гипофиза.

У мужчин ФСГ, наряду с лютеинизирующим гормоном и тестостероном, необходим для поддержания сперматогенеза в семенных канальцах яичек. У женщин, достигших половой зрелости, ФСГ стимулирует рост и созревание фолликулов в яичниках.

Повышенные уровни ФСГ наблюдаются у пациентов с различными формами гипогонадизма (первичная недостаточность яичников и семенников, поликистоз яичников, менопауза и пр.), а также в результате кастрации, при почечной недостаточности и циррозе.

При злокачественных опухолях семенников обычно наблюдаются пониженные уровни ФСГ.

Кроме того, количественное определение уровня ФСГ в сыворотке крови имеет диагностическое значение при определении нарушений менструального цикла, менопаузы, точного времени овуляции и мониторинге эндокринной терапии.

^ Нормальные концентрации ФСГ:

у женщин в I фазе —4,6 (1,8 - 11,3) мМЕ/мл, во II фазе — 3,3 (1,1 - 9,5) мМЕ/мл, в овуляцию — 7,9 (4,9 - 20,4) мМЕ/мл, в постменопаузе — 68,4 (31,0 - 130) мМЕ/мл,

у мужчин — 3,9 (1,0 - 11,8) мМЕ/мл,

у детей до 10 лет— 1,1 - 1,9 мМЕ/мл.

3. Прогестерон

Прогестерон - стероидный гормон с молекулярной массой 314 Да. Количественное определение уровня прогестерона в крови имеет диагностическое значение при оценке функционального состояния желтого тела и при наблюдении за протеканием беременности. Прогестерон активно синтезируется желтым телом, образующимся после овуляции на месте лопнувшего фолликула. Прогестерон способствует переходу пролиферативной фазы эндометрия в секреторную, тем самым, облегчая имплантацию оплодотворенной яйцеклетки, обеспечивает торможение нервно-мышечного аппарата матки. Прогестерон также синтезируется плацентой, особенно активно во II и III триместрах беременности. Он необходим для метаболизма фетальной печени и для поддержания локальной иммуносупрессии в плаценте.

^ Нормальные концентрации прогестерона:

у женщин в I фазе — до 6 нмоль/л, во II фазе — 10-89 нмоль/л,

у мужчин – 0 - 5,2 нмоль/л.


При нормально протекающей беременности:

Срок беременности в неделях

Концентрация прогестерона, нмоль/л ннмоль нмоль/л

5-6

79,3

7-8

101,9

9-10

110,6

11-12

132,5

13-14

140,2

15-16

162,0

17-18

184,5

19-20

204,5

21-22

247,3

23-24

260,4

25-26

306,0

27-28

379,0

29-30

356,3

31-32

551,0

33-34

616,0

35-36

652,0

37-38

702,0

39-40

826,0


4. Пролактин

Человеческий пролактин является гормоном, состоящим из одной полипептидной цепи, с молекулярной массой около 23000 дальтон.

Пролактин продуцируется передней долей гипофиза как мужчин, так и женщин, и его выделение регулируется преимущественно гипоталамусом при ингибирующем влиянии допамина или родственных допамину веществ. Известно, что тиротропин рилизинг-гормон оказывает стимулирующее влияние на секрецию пролактина. Основным физиологическим действием пролактина является стимулирование и поддержание лактации у женщин.

Физиологическое повышение уровня пролактина наблюдается во время беременности, лактации, сна и в периоды соматического и эмоционального стресса. Повышают уровень пролактина следующие препараты: фенотиазин, резепин, эстрогены, оральные контрацептивы, альфа-метилдопа. Снижают уровень пролактина: бромокриптин, L-допа.

Гиперпролактинемия является общей причиной расстройства функции гонад и бесплодия у мужчин и женщин. У женщин пролактин подавляет секрецию стероидов яичниками, тормозит созревание фолликула, выработку ЛГ и ФСГ. Гиперпролактинемия может быть причиной галактореи, аменореи и других нарушений менструального цикла. Причиной гиперпролактинемии могут быть аденомы гипофиза, гипотиреоидизм, почечная недостаточность.

Выявление гиперпролактинемии может быть первым показателем функциональных нарушений в системе гипоталамус-гипофиз и является важным первичным тестом на бесплодие. Мониторинг уровня пролактина у пациентов в процессе и после лечения является показателем терапевтической эффективности.

^ Нормальные концентрации пролактина:

у женщин — 67 - 726 мМЕ/л,

у мужчин – 105 - 540 мМЕ/л.

5. Тестостерон

Тестостерон является наиболее активным андрогеном. Основным местом образования тестостерона в семенниках являются клетки Лейдига (интерстициальная ткань). Подобно биосинтезу других стероидных гормонов исходными соединениями при биосинтезе андрогенов являются ацетил-КоА и холестерин. Хотя основная масса тестостерона плазмы является секретом семенников, все же небольшая его часть образуется в периферических тканях из андростендиона, который синтезируется не только в семенниках, но и в корковом слое надпочечников. Интенсивность синтеза тестостерона в семенниках регулируется лютеинизирующим гормоном. Кроме того, установлено, что в отсутствии ФСГ стимулирующее действие ЛГ на биосинтез тестостерона резко снижается. Вместе с тем по принципу обратной связи тестостерон контролирует синтез и высвобождение ФСГ и ЛГ в гипофизе.

Выработка андрогенов в мужских половых железах существенно зависит от возраста, физиологического состояния, времени суток. Максимальная концентрация тестостерона регистрируется в 6 часов утра.

^ Нормальная концентрация тестостерона:

у мужчин — 19,2 (12,1 - 38,3) нмоль/л,

у женщин — 1,8 (< 0,5 - 4,3) нмоль/л.

6. Эстрадиол

Основной эстрогенный стероидный гормон, обладающий наивысшей биологической активностью среди эстрогенов. У женщин эстрадиол синтезируется в оболочке и гранулезных клетках фолликулов. Он стимулирует развитие первой фазы овариального цикла. Во время первой фазы цикла увеличение концентрации эстрадиола приводит к активной секреции ЛГ, который стимулирует овуляцию. В лютеиновую фазу эстрадиол синтезируется исключительно клетками оболочки фолликула, в то время как гранулезные клетки лютеинизируются и переключаются на синтез прогестерона. В отличие от гонадотропинов эстрадиол и другие стероидные гормоны проявляют свой биологический эффект, проникая внутрь клетки по градиенту концентрации и связываясь с растворимыми рецепторами в цитозоле, а не с мембранными рецепторами. На гипофизарном уровне он действует на секрецию ЛГ и ФСГ. Во время беременности концентрация эстрадиола увеличивается. Анализ эстрадиола является основным параметром при контроле индукции овуляции и гиперстимуляции яичников. Скорость синтеза эстрадиола отражает число и качество созревающих фолликулов. Для женщин уровень гормона имеет важное диагностическое значение при оценке функции яичников, нарушениях менструального цикла, аменорее, опухолях, контроле за лечением бесплодия, остеопорозе.

^ Нормальные концентрации эстрадиола:

у женщин в I фазе - 69,6 пг/мл, во II фазе - 96,75 пг/мл, при использовании оральных контрацептивов - 36,08 пг/мл, в постменопаузе - 54,5 пг/мл, в постменопаузе с использованием заместительной гормональной терапии - 162,18 пг/мл,

у мужчин - 55,23 пг/мл.

7. Кортизол

Кортизол - стероидный гормон с молекулярным весом 362 Да. Количественное определение уровня кортизола в крови имеет диагностическое значение при оценке функционирования системы гипоталамус-гипофиз-кора надпочечников. Особую важность определение количества кортизола имеет при таких заболеваниях, как болезнь Аддисона, болезнь Иценко-Кушинга, адреногенитальный синдром.

Повышенное содержание кортизола в сыворотке крови определяется при аденоме надпочечников, при синдроме Кушинга. Пониженный уровень кортизола выявляется при недостаточности коры надпочечников, при энзим-дефектах в корковом веществе.

Нормальная концентрация кортизола — 378 нмоль/л (150 - 660 нмоль/л).

^ ТИРЕОИДНАЯ ГРУППА

Для оценки функции щитовидной железы используется определение в сыворотке крови тиреоидных гормонов - трийодтиронина (ТЗ) и тироксина (Т4) (общих и свободных), тиреотропного гормона гипофиза (ТТГ), а также аутоиммунных антител к тиреоглобулину (АТГ).

Большая часть циркулирующего тироксина, главного гормона щитовидной железы, находится в связанном с транспортными белками, преимущественно, с тироксинсвязывающим глобулином (ТСГ) состоянии (общий Т4). Это, с одной стороны, предотвращает разрушение Т4, с другой - препятствует его активному действию на клетки. Лишь свободный Т4 оказывает действие на реагирующие клетки и ткани. ТЗ связывается с белками крови слабее, чем Т4. На фоне нормального уровня белков, связывающих тиреоидные гормоны, гипертиреоз характеризуется повышенным, а гипотиреоз - пониженным уровнем циркулирующего Т4. Однако у пациентов с ненормальными уровнями белков, связывающих тиреоидные гормоны, такой параллелизм между концентрацией общего Т4 и тиреоидным статусом исключен. Уровень ТСГ, как известно, может изменяться под влиянием различных физиологических, фармакологических и генетических факторов. Таким образом, повышенные значения Т4 могут быть получены тогда, когда высок уровень ТСГ, например, при беременности, острой интермиттирующей порфирии, гиперпротеинемии, наследственном повышении ТСГ, а также у пациентов, получающих эстроген-терапию или принимающих оральные контрацептивы. Значения общего Т4 могут быть понижены, когда уровень ТСГ низок, например, при заболеваниях почек, печени, желудочно-кишечного тракта, при акромегалии, гипопротеинемии или врожденном дефиците ТСГ, а также у пациентов, получающих андрогены, тестостерон, анаболические стероиды. Дифенилгидантоин (дифенин), большие дозы салицилатов и лиотиронина также могут быть причиной низких значений Т4, не отражающих тиреоидный статус, вследствие их способности к конкурентному связыванию с ТСГ.

Рецепция Т4 происходит внутри клеток. Проникнув внутрь клетки, Т4 сразу же теряет один атом йода, переходя в ТЗ. Точкой приложения ТЗ (как поступившего из крови, так и образованного из Т4) является ДНК, где ТЗ стимулирует транскрипцию и образование РНК.

В нормальных физиологических условиях ТЗ составляет приблизительно 5% тиреоидных гормонов в сыворотке. Хотя концентрация ТЗ ниже, чем циркулирующего Т4, он обладает более высокой метаболической активностью, более быстрым оборотом и большим объёмом распространения. Сообщения о том, что в некоторых случаях тиреотоксикоза ненормально высокие концентрации ТЗ играют большую роль, нежели концентрации Т4, повышают значимость измерения ТЗ. К тому же, определение ТЗ является важным звеном в мониторном наблюдении пациентов с гипотиреозом, получающих натрий-лиотиронин терапию. Во многих сообщениях отмечается, что имеется явное различие в уровнях ТЗ у людей с эутиреозом и гипертиреозом, но различия между гипо- и эутиреозом менее четко выражены. Многие факторы, не связанные с заболеваниями щитовидной железы, могут быть причиной ненормальных значений общего ТЗ. Поэтому они не должны использоваться сами по себе в установлении тиреоидного статуса конкретного человека.

Для более полного и достоверного определения тиреоидного статуса необходимо определять уровень свободного Т4 и ТЗ.

Синтез и обмен ТЗ и Т4 контролируется тиреотропным гормоном гипофиза - ТТГ.

При эутиреозе:

Уровень общего ТЗ — 0,8 - 2,0 нг/мл, общего Т4 — 40 - 120 нг/мл, ТТГ — 0,3 – 4,0 мМЕ/л.

^ При гипертиреозе:

Уровень общего ТЗ > 2,0 нг/мл, общего Т4 > 120 нг/мл, ТТГ < 0,3 мМЕ/л.

При гипотиреозе:

Уровень общего ТЗ < 0,8 нг/мл, общего Т4 < 40 нг/мл, ТТГ > 4,0 мМЕ/л.

Определение уровней тиреоидных гормонов необходимо при наличии клинических признаков тиреоидной патологии и для контроля за ее лечением, а также при диагностике других эндокринных заболеваний.

Для диагностики аутоиммунных заболеваний щитовидной железы (диффузный токсический зоб, тиреоидит), дифференцированных форм тиреоидной карциномы, а также для контроля за ходом лечения и нормализацией функций щитовидной железы необходимо определение антител к тиреоглобулину в сыворотке крови (АТГ). Тиреоглобулин - это гликопротеин с молекулярной массой около 660000 Да, который является основным компонентом коллоида фолликулов щитовидной железы, где выполняет функцию накопления тиреоидных гормонов. АТГ относятся преимущественно к классу IgG и являются гетерогенными, направленными против различных эпитопов молекулы тиреоглобулина. Следует учитывать, что даже здоровые люди могут иметь сывороточные АТГ, содержание которых не превышает 100 МЕ/мл.


^ МАРКЁРЫ БЕРЕМЕННОСТИ

1. Альфа-фетопротеин (АФП)

Не относится к гормонам, но обладает гормоноподобным и иммуномодулирующим действием. АФП является гликопротеином с молекулярной массой 70000 Да, который начинает синтезироваться на начальных стадиях беременности в желточном мешке, а затем в печени и ЖКТ плода. Функции АФП достаточно хорошо изучены, этот белок подавляет пролиферативный ответ лимфоцитов на ЛПС, первичный и вторичный иммунный ответ на ЭБ, под воздействием АФП моноциты продуцируют супрессорный фактор, АФП снижает фагоцитарную активность нейтрофилов и моноцитов мышей и подавляет способность этих клеток синтезировать простагландины.

Определение концентрации АФП в крови и амниотической жидкости беременных дает важную информацию о состоянии плода, течении беременности и прогнозе ее исхода. Пониженный уровень АФП наблюдается при пузырном заносе, неразвивающейся беременности, а также может свидетельствовать о наличии у плода синдрома Дауна. Повышение концентрации АФП коррелирует с наличием у плода дефекта развития нервной трубки, брюшной стенки, с врожденными заболеваниями почек. Повышение уровня АФП наблюдается при плацентарной недостаточности и других осложнениях беременности, резкое повышение - при угрозе внутриутробной гибели плода.

^ При нормально протекающей беременности:

Срок беременности в неделях

Концентрация АФП, МЕ/мл

15

29 (14-58)

16

33 (16-66)

17

38 (19-76)

18

43 (21-86)

19

48 (24-96)

20

53 (27-106)


^ 2. Плацентарный лактоген (ПЛ)

ПЛ секретируется синцитиотрофобластом, начиная с 5 недели беременности. ПЛ является белковым гормоном, его аминокислотная последовательность на 96% идентична таковой человеческому соматотропному гормону (СТГ), при этом ПЛ обладает лишь 3% активности СТГ. Уровень ПЛ в материнском кровотоке строго коррелирует с массой плода и плаценты, и далее на заключительной неделе беременности достигает максимальной концентрации, образуя плато. Концентрация ПЛ весьма вариабельна и индивидуальна. После родов ПЛ исчезает из кровотока женщины.

^ При нормально протекающей беременности:

Срок беременности в неделях

Концентрация ПЛ, мкг/мл

24

3,0 (2-4)

26

3,1 (2,5-4,9)

28

4,6 (2,9-5,9)

30

4,7(3,1-6,9)

32

5,4 (3,5-7,8)

34

6,2 (3,7-8,8)

36

6,3 (3,8-9,2)

38

6,8 (3,9-9,5)

40

6,5 (4,0-9,7)


^ 3. Хорионический гонадотропин (ХГ)

Является гликопротеиновым гормоном, состоящим из 2-х субъединиц - α и β. α-субъединица идентична α-субъединице ЛГ, ФСГ и ТТГ гипофиза, а β-субъединица специфична для ХГ.

Синтезируется в синцитиотрофобласте, начиная с 8-11 дня после оплодотворения яйцеклетки. ХГ называют гормоном беременности. Установлено, что биологическая активность этого гормона зависит от срока беременности. Секреция ХГ в течение всего периода беременности имеет существенную особенность: начиная с момента имплантации яйцеклетки уровень гормона резко возрастает, достигая максимума к 7-10 неделям беременности, то есть к моменту экспрессии антигенов главного комплекса гистосовместимости на клеточной поверхности у плода, в последующем происходит почти пятикратное снижение уровня ХГ в сыворотке матери, во II триместре беременности вновь отмечается подъем уровня гормона, на протяжении III триместра беременности содержание ХГ остается относительно стабильным, вплоть до родов.

Понижение уровня ХГ наблюдается при внематочной беременности, при регрессирующей беременности.

Повышение концентрации ХГ может быть при угрозе прерывания беременности, при плацентарной недостаточности.

Изменение содержания ХГ также наблюдается при врожденных пороках развития плода.

^ При нормально протекающей беременности:

Срок беременности в неделях

Концентрация ХГЧ, МЕ/мл

0-1

0-100

1-2

50-300

2-3

100-1000

3-4

500-6000

4-5

5000-30000

5-6

20000-100000

6-7

50000-200000

7-8

20000-200000

9-12 (2-3 мес.)

10000-100000

13-24 (3-6 мес.)

3000-50000

25-40 (6-9 мес.)

1000-50000


^ 4. Трофобластический β1-гликопротеин (ТБГ)

Это гликопротеин с молекулярной массой 42000 Да. Его синтез происходит в клетках синцитиотрофобласта. ТБГ локализуется в незрелой плаценте в цитоплазме цитотрофобластов и синцитиотрофобластов хориона. В зрелой плаценте ТБГ обнаруживается в остаточном трофобласте, в составе фибриновых островков, а также на внешней поверхности плазматических мембран микроворсинок.

Основной функцией ТБГ является регулирующее воздействие на иммунокомпетентные клетки материнского организма, и наряду с ХГ и АФП он входит в группу белков-иммуносупрессоров. Другая важнейшая функция ТБГ - это транспорт ионов железа, эстрадиола, эстриола и кортизола.

В кровотоке матери ТБГ начинает обнаруживаться с 4 недели беременности. Концентрация ТБГ возрастает в связи с ростом массы плаценты до 29 недель беременности. При созревании плаценты уровень ТБГ стабилизируется. «Старение» плаценты в конце беременности сопровождается снижением концентрации ТБГ.

ТБГ считается надежным маркером плацентарной недостаточности, и его концентрация отражает функциональное состояние клеток паренхимы плаценты. Повышение уровня ТБГ происходит при острой плацентарной недостаточности, воспалении и деструкции трофобласта, частичной отслойки плодного яйца. Понижение концентрации ТБГ коррелирует с хронической плацентарной недостаточностью.

^ При нормально протекающей беременности:

Срок беременности в неделях

Концентрация ТБГ, нг/мл

3-5

500-4500

6-8

5000-12000

8-10

8000-16000

10-12

16000-26000

12-14

22000-38000

14-16

38000-48000

16-18

48000-50000

18-20

50000-56000


^ 5. Неконъюгированный эстриол

Функциональная активность иммунного комплекса репродуктивного тракта у беременных женщин может зависеть от состояния фетоплацентарной системы. Одним из показателей функционирования фетоплацентарного комплекса является уровень эстриола в сыворотке крови беременных. Известно, что эстрогены усиливают метаболическую активность и бактерицидные функции фагоцитирующих клеток in vitro. Имеются данные о протективном действии эстрогенов при экспериментальных инфекциях. Эстриол продуцируется почти исключительно во время беременности и является основным эстрогеном, продуцируемым нормальным человеческим плодом. Уровень материнского эстриола может обеспечить динамическую оценку скорости образования эстриола у плода.

^ При нормально протекающей беременности:

Срок беременности в триместрах

Концентрация эстриола, нг/мл

1-ый (4-13 нед.)

0,17(0-0,48)

2-ой (14-28 нед.)

1,61 (0,20-4,43)

3-ий (29-40 нед.)

4,83(1,47-13,92)



^ ОПУХОЛЕВЫЕ МАРКЁРЫ

Онкомаркёры - большая группа факторов, обнаруживаемых в злокачественных и ассоциированных со злокачественным ростом клетках. Она включает эмбриональные антигены, такие как альфа-фетопротеин, раковый эмбриональный антиген, онкофетальные трансплантантные антигены, продукты онкогенов, ростовые и трансформирующие факторы, ферменты и изоферменты и многие другие. Опухолевые маркёры - макромолекулы (в основном белки с углеводным или липидным компонентом), которые формируются внутри или на поверхности опухолевых клеток, или же в результате индукции образуются в других клетках.

Основное применение онкомаркеров в клинической диагностике - мониторинг течения заболевания и эффективности проводимого лечения. Задачи, решаемые при использовании онкомаркеров это: возможность достаточно ранней дифференциальной диагностики опухолей и в комбинации с другими диагностическими методами определение эффективности терапии и получение прогностической информации. Задача ранней диагностики рака остается актуальной, поскольку симптомы и течение онкологических заболеваний очень разнообразны. Кроме того, даже после самых ранних и радикальных операций нередко наблюдаются рецидивы и метастазы. Скорость возрастания уровня опухолевого маркера обычно позволяет делать заключение о наличии и природе развития заболевания, в частности, о метастазировании. При регулярном наблюдении за уровнем маркеров, информативных для опухоли конкретной локализации, можно обнаружить метастазы за 4-6 месяцев до их клинического выявления. В процессе лечения или после операции отсутствие снижения концентрации опухолевых маркеров означает неэффективность выбранного способа лечения. Согласно ВОЗ рекомендуемые интервалы взятия проб для анализа: один раз в месяц в течение первого года после лечения, один раз в два месяца в течение второго года после лечения и один раз в три месяца в течение третьего года наблюдения. Необходимо отметить, что наиболее важным показателем является динамика изменения уровня опухолевого маркера, а не абсолютные показатели концентрации.


^ 1. Раковый эмбриональный антиген (РЭА)

У здоровых некурящих людей концентрация РЭА в крови не превышает 5 нг/мл, у курящих верхняя граница нормы - 7-10 нг/мл.

Это гликопротеин с молекулярной массой около 180000 Да, который вырабатывается в тканях пищеварительного тракта эмбриона и плода. РЭА синтезируется преимущественно в слизистой оболочке толстой кишки и в меньших количествах в тканях кишечника, печени и поджелудочной железы. После рождения ребенка синтез его подавляется, поэтому в сыворотке крови здоровых взрослых людей он практически не обнаруживается.

Основное применение этого маркера в лабораторной диагностике опухолевых заболеваний - это мониторинг развития онкопроцесса и оценка эффективности терапии пациентов с колоректальной карциномой. Кроме этого, повышенные величины РЭА наблюдаются при раке лёгкого, молочной железы, печени, поджелудочной железы, предстательной железы, желудка и яичников. Особенно высокий уровень этого маркера обнаруживается у пациентов с метастазированием в костную ткань, печень и легкие.

Повышение концентрации РЭА может быть связано с доброкачественными заболеваниями кишечника и желудка (полипоз, язвенный колит, болезнь Крона), поджелудочной железы, печени (цирроз, гепатит), легких (пневмония, бронхит, эмфизема легких, муковисцедоз, туберкулез), с аутоиммунными заболеваниями, но, как правило, его уровень не превышает 10 нг/мл.

^ 2. Альфа-фетопротеин (АФП)

Является физиологическим продуктом желточного мешка, печени и ЖКТ плода. Сразу после рождения уровень АФП снижается на несколько порядков. Его синтез возобновляется при возникновении опухоли печени (гепатоцеллюлярной карциномы) и герминогенных тератобластом, и в меньшей степени - при химическом и механическом повреждении печени.


^ У здоровых мужчин и небеременных женщин уровень АФП в сыворотке крови находится в пределах 0-10 МЕ/мл.

Определение АФП при диагностике рака желудка или толстого кишечника с метастазами в печень показало, что повышение уровня этого маркера в первом случае отмечалось у 60% больных, а во втором - у 70% .

^ 3. Хорионический гонадотропин (ХГ)

Относится к группе плацентарных антигенов. Концентрация ХГ у здоровых мужчин и небеременных женщин, как правило, не превышает 15 мМЕ/мл, а повышение уровня этого маркера является одним из признаков наличия злокачественной опухоли.

Клиническое применение маркера в онкологии - диагностика трофобластических опухолей, хорионкарцином яичка, хорионкарцином плаценты, хорионаденом, семином, пузырного заноса, мониторинг эффективности терапии. Повышенные уровни этого маркера могут регистрироваться у больных с тератогенными карциномами, трофобластической болезнью, при раке толстой кишки, желудка, мочеполовой системы, легких, молочной железы, а также при некоторых лимфомах. Наиболее высокие значения ХГ отмечаются при хорионкарциноме - 10 000 мМЕ/мл и более. Чувствительность данного маркера при карциноме яичка и плаценты - 100%, при хорионаденоме - 97%, поэтому ХГ является маркером выбора для диагностики этих опухолей, причем, для того, чтобы повысить диагностическую точность рекомендуется использовать его в сочетании с АФП.

Повышение концентрации ХГ (обычно не более 75 мМЕ/мл) отмечается и при некоторых нетрофобластических опухолях. Так, при эпителиальных опухолях яичников повышение уровня этого маркера отмечается в 30% случаев, молочной железы - в 25%, поджелудочной железы - в 20%, при опухолях ЖКТ - в 18% и при раке легкого - в 16% случаев.

4. Трофобластический β1-гликопротеин (ТБГ)

Вне беременности ТБГ появляется в значительных количествах при хорионэпителиоме (пузырном заносе), хорионкарциноме, а также у больных с солидными злокачественными опухолями: при раке яичника, легкого, молочной железы, ЖКТ. Определение ТБГ имеет важное значение для диагностики рака матки и яичников. При этих заболеваниях обнаружение ТБГ в сыворотке или ткани опухоли считается признаком повышенной злокачественности. Измерение концентрации ТБГ у таких пациентов в динамике используют для мониторинга течения заболевания, для оценки эффективности проводимой терапии.

В сыворотке крови здоровых мужчин и небеременных женщин его содержание ниже 5 мкг/мл.

^ 5. Нейрон-специфическая энолаза (НСЭ)

Это фермент с молекулярной массой 78000 Да, локализованный в нейронах и нейроэндокринных клетках как центральной, так и периферической нервной системы, а также в эритроцитах, тромбоцитах и плазматических клетках.

НСЭ продуцируется клетками злокачественных опухолей нейроэктодермального происхождения (мелкоклеточный рак легкого, нейробластомы, карциноид кишечника). НСЭ не секретируется опухолевыми клетками, а высвобождается из них при разрушении, что особенно характерно для злокачественных новообразований. НСЭ избирательно экс-прессируется опухолями, биохимически характеризующимися как опухоли из клеток APUD системы. Эти опухоли способны продуцировать различные биологически активные вещества (гормоны, пептиды). К этой группе относятся мелкоклеточный рак легкого, нейробластома, рак из клеток островков поджелудочной железы, карциноидные опухоли и медуллярный рак щитовидной железы.

Клиническое применение маркера - диагностика и эффективность терапии мелкоклеточной карциномы легких. Маркер также может быть использован при обследовании пациентов с нейробластомой.

^ В сыворотке крови здоровых людей НСЭ определяется в концентрации до 15 нг/мл. При доброкачественных заболеваниях легких концентрация НСЭ в сыворотке крови может повышаться до 20 нг/мл.


^ 6. β2-микроглобулин (βМГ)

Это протеин с молекулярной массой 11800 Да, синтезируемый лимфоидными, а также нормальными и злокачественными мезенхимальными и эпителиальными клетками. Он выявляется на поверхности почти всех клеток в организме человека, в том числе на лимфоцитах, макрофагах и некоторых эпителиальных клетках. Низкие концентрации этого маркера могут быть обнаружены в таких биологических жидкостях, как моча, сыворотка крови, слюнная, спинномозговая и амниотическая жидкости.

Клиническое применение маркера - диагностика множественной миеломы, гломерулярных и тубулярных нефропатий, мониторинг пациентов с иммунодефицитными и аутоиммунными состояниями.

^ Среднее значение концентрации βМГ в сыворотке крови здоровых людей соответствует 1,6 мг/л (0,8 - 2,74 мг/л).

Концентрация этого белка в сыворотке крови определяется уровнем клубочковой фильтрации и скоростью синтеза в лимфатической системе. Поэтому снижение клубочковой фильтрации (гемодиализ, пересадка почки) приводит к повышению концентрации βМГ в крови, в то время как тубулопатии или канальцевые дисфункции приводят к повышению экскреции этого вещества с мочой. Повышенные значения βМГ наблюдаются при многих состояниях, связанных с более высоким, чем в норме оборотом клеток. Эти состояния включают воспаления всех типов, аутоиммунные расстройства, вирусные инфекции.

^ 7. Тиреоглобулин (ТГ)

Это гликопротеин с молекулярной массой около 660000 Да, который является основным компонентом коллоида фолликулов щитовидной железы, где выполняет функцию накопления тиреоидных гормонов. В сыворотке крови здоровых лиц концентрация ТГ колеблется от 0 до 50 нг/мл, составляя в среднем 18,57±1,6 нг/мл.

При дифференцированном раке щитовидной железы наблюдается усиленная секреция тиреоглобулина клетками неопластической ткани. Есть данные о наличии прямой связи между концентрацией ТГ в сыворотке и степенью метастазирования при раке щитовидной железы. У больных недифференцированным раком щитовидной железы концентрация ТГ в крови не увеличивается.

^ 8. Раковый антиген 19-9 (СА 19-9)

Является гликопротеином с молекулярной массой 10000 Да. Клиническое применение маркера - диагностика карциномы поджелудочной железы, дифференциальная диагностика карциномы поджелудочной железы и панкреатита. Норма СА 19-9 не превышает 37 Ед/мл. Уровень СА 19-9 менее 100 Ед/мл является пограничным в диагностическом плане и чаще встречается при хроническом панкреатите. Для ранней диагностики карциномы поджелудочной железы не пригоден.

После РЭА СА19-9 является вторым маркером по важности для диагностики карциномы желудка. Маркер выявляется у онкологических больных с различными типами гастроинтестинальных карцином как в сыворотке крови, так и в других биологических жидкостях (семенной, желудочном соке, секретах поджелудочной железы, толстого и тонкого кишечника, грудном молоке).

При доброкачественных опухолях уровень СА 19-9 повышается незначительно. Этот онкомаркер присутствует и на мембранах неопухолевых эпителиальных клеток поджелудочной железы, желудка, печени, желчного пузыря, легких. Увеличение концентрации маркера может наблюдаться также при различных доброкачественных и воспалительных заболеваниях желудочно-кишечного тракта, печени, при муковисцедозе с уровнем до 100 Ед/мл, реже до 500 Ед/мл. Однако постоянное повышение концентрации этого маркера при отсутствии признаков воспаления или холестаза позволяет предположить наличие злокачественного заболевания поджелудочной железы.

Подтверждена высокая информативность одновременного определения концентраций РЭА и СА 19-9 в прогнозировании рецидивов карциномы кишечника.


^ 9. Раковый антиген 15-3 (СА 15-3)

Это муциноподобный гликопротеин с молекулярной массой 300000 Да. Считается высокоспецифическим маркером рака молочной железы или скрытых метастазов. Клиническое его применение - мониторинг течения заболевания и эффективности терапии при карциноме молочной железы. Кроме того, повышение уровня СА 15-3 обнаружено при распространенных стадиях других типов опухолей, особенно при раке яичников, эндометрия и шейки матки.

^ Верхняя граница нормы у здоровых небеременных женщин составляет 28 Ед/мл. В третьем триместре беременности наблюдается умеренное повышение уровня СА 15-3 до 50 Ед/мл.

Повышенные концентрации СА 15-3 могут наблюдаться при злокачественных опухолях желудочно-кишечного тракта, легких, яичников, шейки матки и эндометрия только на поздних стадиях развития.

СА 15-3 может использоваться преимущественно для диагностики метастазирования, а не для первичной диагностики рака молочной железы. Низкие уровни этого маркера не исключают наличие опухоли, ни первичной, ни метастатической. С другой стороны, высокие уровни маркера почти всегда отражают наличие метастатического заболевания, т.е. наличие отдаленных метастазов.

Также возможно повышение уровня этого онкомаркера при циррозе печени, гепатитах и некоторых доброкачественных процессах яичников, легкого и груди.

^ 10. Раковый антиген 125 (СА 125)

Это гликопротеин с молекулярной массой 200000 Да, представляющий собой дифференцировочный антиген, который образуется из целомического эпителия тканей плода. Клиническое применение маркера - мониторинг течения и эффективности терапии серозной карциномы яичника.

^ Верхняя граница нормы СА 125 составляет 35 МЕ/мл.

СА 125 обнаруживается в высоких концентрациях в сыворотке крови больных карциномой яичников (145±19 МЕ/мл). Однако повышение уровня СА 125 может наблюдаться и при злокачественных процессах другой локализации (при опухолях ЖКТ, бронхов, карциноме молочной железы). Иногда уровень СА 125 повышается при таких нарушениях женской половой сферы, как серозная цистаденома, муцинозная аденома, доброкачественная цистотератома, фиброма яичников, острый аднексит, миома матки, острый сальпингит, хронический аднексит, эндометриоз матки, инфекция органов малого таза и пиелонефрит.

Незначительное повышение уровня СА 125 может отмечаться у женщин перед началом и во время менструации, в первом триместре беременности.

Степень повышения концентрации маркера СА 125, как правило, не коррелирует с объемом первичной опухоли и может регистрироваться при опухолях небольшого размера с множеством мелких метастазов.

Одновременное определение трех маркеров (СА 125, РЭА, СА 19-9) в сыворотке крови гинекологических больных позволяет получить наиболее полную информацию и проводить дифференциальную диагностику эндометриоза и злокачественных новообразований.

^ 11. Раковый антиген 242 (СА 242)

Это третий основной маркер рака прямой кишки и поджелудочной железы. В доброкачественных опухолях экспрессия СА 242 низкая, в то время как в случае злокачественных опухолей его экспрессия значительно выше, чем СА 19-9.

^ Верхней границей нормы считается значение 15 нг/мл.

Клиническое применение - дифференцирование онкологических заболеваний поджелудочной железы и доброкачественных гепатобилиарных заболеваний.

^ 12. Простата-специфический антиген (ПСА)

Это гликопротеин с молекулярной массой 36000 Да, синтезируемый эпителиальными клетками, выстилающими ацинусы и канальцы предстательной железы. Является протеазой, уменьшающей вязкость спермы. В сыворотке крови простата-специфический антиген может находиться как в свободной, так и в связанной форме.

Этот антиген присутствует в эпителиальных клетках нормальной ткани простаты, в высоких концентрациях - в гипертрофированной ткани и отсутствует в органах и тканях при других доброкачественных и злокачественных опухолях. Поскольку ПСА образуется в парауретральных железах, он может иногда определяться в низких концентрациях в сыворотке крови женщин. Значительное повышение уровня ПСА при неоднократных исследованиях наблюдается при карциноме и гипертрофии простаты, а также при воспалительных ее заболеваниях.

Клиническое применение маркера - мониторинг течения и эффективности терапии карциномы простаты, состояния пациентов с гипертрофией простаты для обнаружения ее злокачественного перерождения, скрининговое обнаружение клинически не проявляющихся опухолей.

^ В качестве порогового значения для общего ПСА принята концентрация 4 нг/мл, а для соотношения свободного и общего ПСА - значение 0,15. С возрастом мужчин эти нормативы несколько повышаются.

Диагностическая значимость маркера при первичном раке простаты повышается при значениях более 10 нг/мл. Однако увеличение концентрации ПСА до 12 нг/мл и выше может также свидетельствовать о наличии доброкачественной опухоли простаты и имеющих место незлокачественных урологических заболеваниях. Причинами повышения ПСА сыворотки крови могут быть новообразования простаты, воспалительный процесс, её ишемия или эякуляция накануне определения.

При проведении исследований на ПСА необходимо учитывать, что повышение его концентрации может быть связано с такими манипуляциями, как пальцевое ректальное исследование, цистоскопия, колоноскопия, трансуретральная биопсия и лазерная терапия. Поэтому все исследования на ПСА необходимо проводить до или спустя 7-14 дней после указанных выше процедур.

^ 13. Лактоферрин (ЛФ)

ЛФ - железосвязывающий гликопротеин. Является важным маркером воспалительного процесса, одним из факторов неспецифической защиты организма, показателем острой фазы. Отклонение концентрации ЛФ в крови человека от нормальных значений отражает изменения в функционировании иммунной системы и может иметь диагностическое и прогностическое значение при различных заболеваниях. Повышение уровня ЛФ в 2-5 раз наблюдается при острых воспалительных заболеваниях бактериальной природы, при ревматоидном артрите (особенно в период обострения). Гиполактоферринемия может наблюдаться при обострении аутоиммунного тиреоидита и СКВ, при вирусных инфекциях, при патологии органов гепатобилиарной системы. Определение концентрации ЛФ может использоваться для оценки тяжести и прогнозирования развития послеродовых гнойно-септических осложнений (ПГСО). ЛФ является одним из неспецифических универсальных маркеров рака. ЛФ повышается при лимфогранулематозе, лимфосаркоме, лейкозах, раке молочной железы, яичников, пищевода, желудка, кишечника. При раке простаты содержание ЛФ в крови снижается, поэтому определение ЛФ в сыворотке крови может являться одним из наиболее информативных тестов для дифференциальной диагностики аденомы и рака простаты.

^ Концентрация лактоферрина в сыворотке крови здоровых небеременных женщин и здоровых мужчин составляет около 1000 нг/мл.


ПРИМЕЧАНИЕ

В связи с использованием тест-систем различных фирм-производителей нормальные величины показателей несколько различаются.


СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

  1. Иммунодефицитные состояния / Под ред. В.С. Смирнова и И.С. Фрейдлин. – СПб.: «Фолиант», 2000. – 568 с.

  2. Кетлинский С.А. Иммунология для врача / С.А. Кетлинский, К.М. Калинина. – СПб.: Гиппократ, 1998. – 156 с.

  3. Ройт А. Иммунология: Пер. с англ. / А.Ройт, Дж. Бростофф, Д. Мейл. – М.: Мир, 2000. – 581 с.

  4. Хаитов Р.М. Иммунология / Р.М. Хаитов, Г.А. Игнатьева, И.Г. Сидорович. – М.: Медицина, 2000. – 430 с.



Ваша оценка этого документа будет первой.
Ваша оценка:

Похожие:

Учебно-методическое пособие предназначено для аспирантов, научных работников, врачей различных специальностей, студентов медицинских вузов. Учебно-методическое пособие составлено доктором медицинских наук, доцентом И. Е. Третьяковой iconУчебно-методическое пособие для студентов медицинских вузов, клинических ординаторов, аспирантов,

Учебно-методическое пособие предназначено для аспирантов, научных работников, врачей различных специальностей, студентов медицинских вузов. Учебно-методическое пособие составлено доктором медицинских наук, доцентом И. Е. Третьяковой iconУчебно-методическое пособие для студентов медицинских вузов, клинических ординаторов, аспирантов,

Учебно-методическое пособие предназначено для аспирантов, научных работников, врачей различных специальностей, студентов медицинских вузов. Учебно-методическое пособие составлено доктором медицинских наук, доцентом И. Е. Третьяковой iconУчебно-методическое пособие минск Белмапо 2006
Методическое пособие предназначено для врачей-стоматологов государственных и частных лечебных учреждений....
Учебно-методическое пособие предназначено для аспирантов, научных работников, врачей различных специальностей, студентов медицинских вузов. Учебно-методическое пособие составлено доктором медицинских наук, доцентом И. Е. Третьяковой iconУчебно-методическое пособие минск Белмапо 2006
Методическое пособие предназначено для врачей-стоматологов государственных и частных лечебных учреждений....
Учебно-методическое пособие предназначено для аспирантов, научных работников, врачей различных специальностей, студентов медицинских вузов. Учебно-методическое пособие составлено доктором медицинских наук, доцентом И. Е. Третьяковой iconУчебно-методическое пособие предназначено для врачей общей практики, врачей-терапевтов, отоларингологов,

Учебно-методическое пособие предназначено для аспирантов, научных работников, врачей различных специальностей, студентов медицинских вузов. Учебно-методическое пособие составлено доктором медицинских наук, доцентом И. Е. Третьяковой iconУчебно-методическое пособие для студентов медицинских вузов, врачей-интернов, врачей-педиатров, детских

Учебно-методическое пособие предназначено для аспирантов, научных работников, врачей различных специальностей, студентов медицинских вузов. Учебно-методическое пособие составлено доктором медицинских наук, доцентом И. Е. Третьяковой iconУчебно-методическое пособие для студентов 6 курса медицинских вузов, врачей-интернов, клинических

Учебно-методическое пособие предназначено для аспирантов, научных работников, врачей различных специальностей, студентов медицинских вузов. Учебно-методическое пособие составлено доктором медицинских наук, доцентом И. Е. Третьяковой iconУчебно-методическое пособие для студентов лечебного, медико-диагностического факультетов медицинских

Учебно-методическое пособие предназначено для аспирантов, научных работников, врачей различных специальностей, студентов медицинских вузов. Учебно-методическое пособие составлено доктором медицинских наук, доцентом И. Е. Третьяковой iconУчебно-методическое пособие для студентов медицинских вузов, инструкторов лечебной физкультуры учреждений

Учебно-методическое пособие предназначено для аспирантов, научных работников, врачей различных специальностей, студентов медицинских вузов. Учебно-методическое пособие составлено доктором медицинских наук, доцентом И. Е. Третьяковой iconУчебно-методическое пособие составлено коллективом кафедры: доцентом, к м. н. Равелиным Э. Э., доцентом,

Разместите кнопку на своём сайте:
Медицина


База данных защищена авторским правом ©MedZnate 2000-2019
обратиться к администрации | правообладателям | пользователям
Документы