Основные этапы развития микробиологии и иммунологии. Работы Пастера, Коха и их значение для развития микробиологии и иммунологии
|
|
Скачать 2.07 Mb.
|
|
Возбудитель ботулизма. Таксономия. Характеристика. Микробиологическая диагностика. Специфическая профилактика и лечение. ^ Облигатные анаэробы - микроорганизмы, живущие только в условиях крайне низкого содержания кислорода - в почве, иле водоемов, кишечниках позвоночных и человека. У теплокровных анаэробы составляют основную массу нормальной кишечной микрофлоры и определяют ряд важнейших функций организма. Разнородную группу анаэробных грамположительных бактерий дифференцируют прежде всего по способности к спорообразованию и морфологическим особенностям. В патологии человека наибольшее значение имеют анаэробные спорообразующие бактерии рода Clostridium. Среди неспорообразующих грамположительных анаэробов медицинское значение имеют семейство лактобацилл (Lactobacillaceae) и род бифидобактерий (Bifidibacterium), в патологии - неспорообразующие грамотрицательные анаэробы родов Bacteroides (бактероиды) и Fusobacterium (фузобактерии). ^ Это подвижные крупные палочки (большинство видов), образуют овальные или круглые эндоспоры, придающие клостридиям (греч. kloster - веретено) ветеренообразную форму. Спора в диаметре больше диаметра (поперечника) вегетативной клетки. Грамположительны, хемоорганотрофы. Строгие анаэробы. По экологическим и патогенным свойствам можно выделить три группы клостридий: - сапрофиты, вызывающие бродильные (сахаролитические) процессы; - сапрофиты, вызывающие процессы гниения (протеолиза); - патогенные виды - по биохимическим свойствам могут вызывать процессы гниения и брожения. Патогенные виды клостридий условно разделить на три группы - возбудителей травматических (раневых) клостридиозов - газовой гангрены, столбняка, возбудителей энтеральных клостридиозов (токсикоинфекций) - ботулизма, псевдомембранозного колита и виды, вызывающие патологические процессы только в ассоциациях между собой или с другими микроорганизмами. ^ выделяет пять групп клостридий по расположению спор, способности гидролизовать желатин и наличию особых условий для роста. Все патогенные для человека виды ферментируют желатин, отличаясь расположением спор - терминальное (в виде тенисных ракеток) у четвертой группы (C.tetani - возбудитель столбняка), субтерминальное (веретено) у второй группы (остальные возбудители: C.botulinum- возбудитель ботулизма, C.perfringens и другие возбудители газовой гангрены, C.difficile - возбудитель псевдомембранозного колита). ^ Ботулизм - тяжелая пищевая токсикоинфекция, связанная с употреблением продуктов, зараженных C.botulinum, и характеризующаяся специфическим поражением центральной нервной системы. Свое название получила от лат. botulus - колбаса. ^ Крупные полиморфные грамположительные палочки, подвижные, имеют перитрихиальные жгутики. Споры овальные, располагаются субтерминально (тенисная ракетка). Образуют восемь типов токсинов, отличающихся по антигенной специфичности, и соответственно выделяют 8 типов возбудителя. Среди важнейших характеристик - наличие или отсутствие протеолитических свойств (гидролиз казеина, продукция сероводорода). Токсин оказывает нейротоксическое действие. Токсин попадает в организм с пищей, хотя вероятно может накапливаться при размножении возбудителя в тканях организма. Токсин термолабильный, хотя для полной инактивации необходимо кипячение до 20 мин. Токсин быстро всасывается в желудочно - кишечном тракте, проникает в кровь, избирательно действует на ядра продолговатого мозга и ганглиозные клетки спинного мозга. Развиваются нервно - паралитические явления - нарушения глотания, афония, дисфагия, офтальмо - плегический синдром (косоглазие, двоение в глазах, опущение век), параличи и парезы глоточных и гортанных мышц, остановка дыхания и сердечной деятельности. ^ Принципы - общие для клостридий. Выделяют и идентифицируют возбудитель, однако наибольшее практическое значение имеет обнаружение ботулотоксина и определение его серотипа. Для выделения возбудителя пробы сеют на плотные среды и накопительную среду Китта - Тароцци (часть материала предварительно прогревают при +85о С). Для изучения токсина проводят биопробы на белых мышах (одна группа - опытная и четыре контрольные со смесью материала и соответствующей антисыворотки - типа А,В,С и Е). Погибают все партии, кроме одной (с гомологичной типу токсина антисывороткой). Можно также определять токсин в РНГА с антительным диагностикумом. ^ В основе - раннее применение антитоксических сывороток (поливалентных или при установлении типа - гомологичных). В основе профилактики - санитарно - гигиенический режим при обработке пищевых продуктов. Особенно опасны грибные консервы домашнего приготовления и другие продукты, хранящиеся в анаэробных условиях.
Род Corynebacterium. Возбудитель дифтерии - Corynebacterium diphtheriae и большая группа близких по морфологическим и биохимическим свойствам микроорганизмов рода коринебактерий называют коринеформными бактериями или дифтероидами.Они представлены грамположительными неподвижными палочками, чаще с утолщениями на концах, напоминающими булаву (coryne - булава). Дифтероиды широко распространены в почве, воздухе, пищевых продуктах (молоке). Среди них можно выделить три экологические группы: - патогены человека и животных; - патогены растений; - непатогенные коринебактерии. Многие виды дифтероидов являются нормальными обитателями кожи, слизистых зева, носоглотки, глаз, дыхательных путей, уретры и половых органов. Дифтерия. Дифтерия - острое инфекционное заболевание преимущественно детского возраста, которое характеризуется интоксикацией организма дифтерийным токсином и характерным фибринозным (дифтеритическим) воспалением в месте локализации возбудителя (phther - пленка). ^ C.diphtheriae - тонкие полиморфные палочки с булавовидными концами, часто содержащие волютиновые включения, выявляемые окраской метиленовым синим или по Нейссеру. При последнем палочки окрашены в желто - соломенный цвет, зерна волютина (полиметафосфата) - в темно - коричневый цвет. В культурах палочки находятся под углом друг к другу (особенности деления) , образуя различные фигуры - растопыренных пальцев, V, Y, L и т.д. Имеют микрокапсулу, а также фимбрии, облегчающие адгезию к эпителию слизистых оболочек. ^ На простых средах коренебактерии дифтерии не растут. Они требуют сред с кровью или сывороткой крови (среды Леффлера, Ру), на которых рост отмечается уже через 10-12 часов, за это время сопутствующая (контаминирующая пробы) микрофлора полностью развиться не успевает. Наиболее оптимальны теллуритовая среда и теллурит - шоколадный агар Маклеода. Высокие концентрации теллурита калия в этих средах подавляют рост посторонней флоры. Коринебактерии дифтерии восстанавливают теллурит до металлического теллура, что придает их колониям темно - серый или черный цвет. У этого возбудителя выделяют биотипы - gravis, mitis, intermedius, отличающиеся по морфологии, антигенным и биохимическим свойствам, тяжести заболеваний у человека. Тип gravis чаще вызывает вспышки и более тяжелое течение, для него характерны крупные с неровными краями и радиальной исчерченностью колонии в виде маргаритки (R- формы). Тип mitis вызывает преимущественно легкие спорадические заболевания, образует на плотных средах мелкие гладкие колонии с ровными краями (S- формы). Тип intermedius занимает промежуточное положение, образует на плотных средах переходные по характеристикам RS- формы, однако еще более мелкие. На жидких средах вызывают помутнение сред, образуют крошковидный осадок. ^ Коринебактерии дифтерии ферментируют глюкозу, мальтозу. Отсутствие активности в отношении сахарозы и мочевины - важный дифференциальный признак среди дифтероидов. Обладают цистеназной активностью (расщепляют цистеин) - проба Пизу. ^ Выделяют О- и К- антигены. Полисахаридные компоненты О- антигенов клеточной стенки обладают межродовыми свойствами, обусловливая неспецифические перекрестные реакции с микобактериями, актиномицетами (нокардиями). Поверхностные К- антигены - капсульные белки, обладают видовой специфичностью и иммуногенностью. Выделяют 11 серотипов. Серотипы 1-5 и 7 относятся к биовару gravis. Серотипирование культур проводят в РА с диагностическими сыворотками к соответствующим сероварам и полигрупповой агглютинирующей сывороткой. В серологической диагностике у людей чаще применяют РПГА, более чувствительную, чем РА. В настоящее время применяют также ИФА. Многие штаммы коринебактерий дифтерии (особенно нетоксигенные) обладают спонтанной агглютинабельностью и полиагглютинабельностью. ^ Токсигенные штаммы возбудителя дифтерии продуцируют сильный экзотоксин (термолабильный высокотоксичный иммуногенный белок). Нетоксигенные штаммы не вызывают заболевания. Токсин вызывает необратимое блокирование удлинения полипептидной цепи, т.е. любого белкового синтеза. Поражаются в основном определенные системы: симпатико - адреналовая, сердце и кровеносные сосуды, периферические нервы. Отмечаются структурные и функциональные нарушения миокарда, демиелинизация нервных волокон, приводящая к параличам и парезам. Способность к токсинообразованию проявляют лишь лизогенные штаммы, инфицированные бактериофагом (бета - фагом), несущим ген tox, который кодирует структуру токсина (т.е. несущие гены умеренного профага в своей хромосоме). Фаготипирование применяют для дифференциации штаммов коринебактерий дифтерии. Эпидемиология. Резервуар - человек (больной, реконвалесцент, бактерионоситель). Основной путь передачи - воздушно - капельный, сезонность - осенне - зимняя. Возбудитель хорошо сохраняется при низких температурах, высушенном состоянии (слюна, слизь, пыль). ^ Возбудитель в месте внедрения вызывает фибринозное воспаление с образованием плотно спаянной с тканями фибринозной пленки. Существенное значение в вызываемой патологии имеет действие экзотоксина (описано в разделе “факторы патогенности” ). По локализации выделяют дифтерию ротоглотки (наиболее часто), дыхательных путей, носа и редкой локализации (глаза, наружные половые органы, кожа, раневая поверхность). Дифтерия зева может быть причиной крупа и асфиксии. ^ Основной метод диагностики - бактериологический. Применяют для выявления больных, бактерионосителей, контактных. Стерильными тампонами берут материал для микроскопии и посевов - слизь из зева и носа, пленки с миндалин и других мест, подозрительных на наличие дифтеритических поражений. Возбудитель выделяют посевом на элективные теллуритовые среды и кровяной агар. На слизистой оболочке глаза часто выявляют C.xerosis (возможная причина хронических конъюнктивитов), в носоглотке - C.pseudodiphtheriticum (палочка Хофманна), выявляют и другие дифтероиды. Для дифференциации возбудителя дифтерии от дифтероидов используют такие показатели, как способность восстанавливать теллурит и образовывать темные колонии, пробу Пизу, ферментацию углеводов (глюкоза, мальтоза, сахароза) и мочевины, способность расти в анаэробных условиях (характерно для возбудителя дифтерии). Обязательным этапом является определение токсигенности культуры. Наиболее распространенные методы - биопробы на морских свинках, реакция преципитации в агаре. Используют также ИФА с антитоксином, генетические зонды и ПЦР для выявления фрагмента А гена tox. Лечение. Используют антитоксическую противодифтерийную сыворотку, антибиотики и сульфаниламидные препараты. ^ - стойкий, преимущественно антитоксический. Для количественного определения уровня антитоксического иммунитета ранее применялась проба Шика (внутрикожное введение токсина), сейчас - РПГА с эритроцитарным диагностикумом, получаемым сенсибилизацией эритроцитов дифтерийным анатоксином. Профилактика. В основе - массовая иммунизация населения. Используют различные препараты, содержащие дифтерийный анатоксин - АКДС, АДС, АДС- М, АД и АД- М.
Род Bordetella. Бордетеллы - мелкие коккобациллы, имеют форму овоидной палочки, грамотрицательны, неустойчивы во внешней среде. Основное значение имеют три вида. 1. B.pertussis - возбудитель коклюша - острого инфекционного заболевания, сопровождающегося воспалением гортани, трахеи и бронхов и приступообразным кашлем. 2. B.parapertussis - возбудитель паракоклюша. 3. B.bronchiseptica - возбудитель коклюшеподобного заболевания собак, кошек и кроликов, может вызывать у людей респираторные заболевания по типу ОРВИ (относительно редко). ^ Бордетеллы требовательны к средам, особенно возбудитель коклюша. Для первичной изоляции этих гемофильных микроорганизмов используют картофельно - глицериновый агар с добавлением крови (среду Борде - Жангу) или казеиново - угольный агар (КУА). На кровяных средах возбудитель коклюша вызывает образование мелких колоний металлического оттенка с потемнением сред, на КУА - буровато - коричневое окрашивание колоний. Основные формы колоний - гладкие (S) - так называемая Iфаза (вирулентные культуры) через промежуточные формы переходят в шероховатые (R) - фаза IV, что сопровождается изменением культуральных, биохимических и антигенных свойств, потерей вирулентности. ^ Имеются общие (родовые) и специфические (видовые) антигены. Видоспецифическими являются соматические О- антигены (агглютиногены), выявляемые в РА. ^ Главный фактор - термолабильный экзотоксин белковой природы, обладающий тропизмом к нервной и сосудистой системе. Имеется термостабильный эндотоксин, обладающий токсическими и сенсибилизирующими свойствами. Трахеальный цитотоксин вызывает повреждение мерцательного эпителия. Бактерии продуцируют гиалуронидазу, лецитиназу, плазмокоагулазу. Эпидемиология. Источник инфекции при коклюше и паракоклюше - больные типичными и стертыми формами инфекции. Механизм заражения - воздушно - капельный. Возбудитель, попавший на слизистую оболочку дыхательных путей, размножается, выделяет экзо- и эндотоксины, некротизирует слизистую, раздражают кашлевые рецепторы и кашлевой центр продолговатого мозга, вызывает спазматические приступы кашля. ^ Посев проводят методом “кашлевых пластинок” или материал берут заднеглоточным тампоном с посевом на агар Борде - Жангу и КУА. Идентификация выделенных культур проводится по морфологическим и культуральным свойствам, а также в РА со специфическими сыворотками. Для экспресс - диагностики и идентификации применяют метод флюоресцирующих антител. Для серологической диагностики используют различные методы - РА, РСК, РПГА с исследованием парных сывороток, взятых в динамике инфекционного процесса. Лечение. В основе лечения - антибактериальная терапия антибиотиками (гентамицин, ампициллин и др.). ^ Постинфекционный иммунитет стойкий, видоспецифический, обусловлен гуморальными и клеточными факторами. Для вакцинации используют убитые бордетеллы I фазы. В вакцине АКДС имеется коклюшный компонент (20 млрд микробных тел/ мл).
Род Mycobacterium. Микобактерии - кислотоустойчивые неподвижные грамположительные палочковидные (прямые или изогнутые) бактерии, способные образовывать нитевидные и мицелиальные структуры. Для них характерно высокое содержание липидов и восков в клеточных стенках, что обеспечивает устойчивость к спиртам, кислотам, щелочам, дезинфицирующим средствам, высушиванию и действию солнечных лучей, плохую окрашиваемость красителями, высокую гидрофобность, патогенность. Наряду с кислотоустойчивостью, важной характеристикой микобактерий является медленный рост на питательных средах, особенно микобактерий туберкулеза. Еще одна особенность микобактерий - образование пигментов, часть видов образует пигмент в темноте. Род микобактерий может насчитывать до 200 паразитических и сапрофитических видов, из них хорошо изучено и идентифицировано около 30 видов. Микобактерии широко распространены в почве и воде, их выявляют у широкого круга тепло- и холоднокровных животных. Среди патогенных микобактерий наибольшее значение имеют основной возбудитель туберкулеза человека - M.tuberculosis (палочка Коха), M.bovis - возбудитель туберкулеза крупного рогатого скота и M.leprae - возбудитель проказы (лепры). Заболевания у людей могут вызывать также M.avium - возбудитель туберкулеза птиц и около 20 других потенциально патогенных видов, способных вызывать у человека атипичные формы поражений (микобактериозы). Mycobacterium tuberculosis (палочка Коха). Морфологические свойства типичны для микобактерий. Это тонкие прямые или слегка изогнутые палочки с зернистыми образованиями в цитоплазме, могут встречаться кокковидные структуры, L - формы. Кислотоустойчивы (высокое содержание липидов и миколовой кислоты в клеточной стенке). Имеют кислотолабильные гранулы (зерна Муха) в цитоплазме. Грамположительны, плохо красятся анилиновыми красителями, по Цилю - Нильсену они окрашиваются в ярко - красный цвет. ^ Растут в аэробных и факультативно - анаэробных условиях. Растут очень медленно - в течении нескольких недель. Микобактерии нуждаются в белке и глицерине, факторах роста. Наиболее часто используют плотные яичные среды Левенштайна - Йенсена, Финна II, синтетические и полусинтетические жидкие среды. На плотных средах рост отмечается на 15-40 сутки в виде сухого морщинистого налета кремового цвета (R- формы), колонии по виду напоминают цветную капусту. На жидких средах отмечается рост в виде поверхностной пленки. Палочка Коха устойчива во внешней среде, в высохших биосубстратах сохраняется до нескольких недель. ^ Патогенные свойства туберкулезной палочки и биологические реакции, которыми отвечает макроорганизм на внедрение возбудителя, связано с особенностями его химического состава, высоким содержанием липидов и их составом (наличие жирных кислот - фтиоидной, миколовой, туберкулостеариновой и др., фосфатидов и других фракций). Главный фактор - токсичный гликолипид - “корд - фактор”, легко выявляемый при культивировании на жидких средах. Он обеспечивает сближенное расположение микобактерий в виде кос, жгута, корда. Корд - фактор оказывает токсическое действие на ткани, а также блокирует окислительное фосфорилирование в митохондриях макрофагов (защищает от фагоцитоза). С химическим составом микобактерий связаны еще две их важнейшие характеристики: - незавершенный фагоцитоз этого внутриклеточного паразита (механизмы - блокада фагосомо - лизосомального слияния, устойчивость к действию лизосомальных ферментов); - способность вызывать выраженную реакцию ГЗТ, выявляемую с помощью туберкулиновой пробы - “ГЗТ туберкулинового типа”. ^ Микобактерии туберкулеза имеют сложный и мозаичный набор антигенов. В антигенном отношении M.tuberculosis имеет наибольшее сходство с M.bovis и M.microti. Имеются перекрестно - реагирующие антигены с коринебактериями, актимомицетами. Для идентификации микобактерий антигенные свойства практически не используют. Эпидемиология. Основными путями заражения являются воздушно - капельный и воздушно - пылевой. Основным источником заражения является больной туберкулезом человек. Особую роль имеет скученность проживания, в России наибольшую значимость имеют места заключения, лагеря беженцев, лица без определенного места жительства и другиен социально ущербные группы населения. В относительно небольшом проценте случаев туберкулез обусловлен заражением от животных (чаще - через молоко) М.bovis. ^ В течение жизни человек неоднократно контактирует с микобактериями туберкулеза, однако туберкулезный патологический процесс развивается далеко не у всех инфицированнных. Это зависит от многих факторов и прежде всего - резистентности организма. Наиболее часто заражение происходит через дыхательные пути. Попавшие в организм микобактерии захватываются альвеолярными и легочными макрофагами. В месте попадания может развиться первичный аффект (бронхопневмонический фокус). Далее возбудитель транспортируется в регионарные лимфоузлы, вызывая воспалительную реакцию - лимфангоит и лимфаденит. Первичный аффект, лимфангоит и лимфаденит - первичный комплекс (первичный очаг туберкулеза), характеризующийся образованием по ходу лимфатических путей и узлов гранулем в виде бугорков (бугорчатка или туберкулез). Образование гранулем представляет собой клеточную реакцию ГЗТ на ряд химических компонентов микобактерий. В центре гранулемы в очаге некроза (казеозного распада) находятся микобактерии. Очаг окружен гигантскими многоядерными клетками Пирогова - Лангханса, их окружают эпителиоидные клетки а по периферии - лимфоциты, плазматические и мононуклеарные клетки. Исходы первичного очага: - при достаточной резистентности организма размножение возбудителя в гранулемах прекращается, очаг окружается соединительнотканной капсулой и обезизвествляется (откладываются соли кальция). Этот процесс определяется формированием нестерильного инфекционного иммунитета к возбудителю туберкулеза. Нестерильность - способность микобактерий длительно сохраняться в первичном очаге и ждать свой час (иногда через несколько десятилетий); - при недостаточной резистентности - усиленный казеозный распад очага, казеозная пневмония, тяжелая первичная легочная чахотка и генерализованный туберкулез (диссеминированный или милиарный туберкулез с гранулемами в различных органах). ^ Вторичный туберкулезный процесс - реактивация возбудителя в результате ослабления резистентности наблюдается при стрессах, нарушениях питания и у лиц пожилого возраста. Возникают очаги казеозного распада в легких с образованием полостей, поражение бронхов, мелких кровеносных сосудов. Иммунитет. В основе нестерильного инфекционного и вакцинального иммунитета при туберкулезе - клеточный иммунитет в виде гиперчувствительности замедленного типа (ГЗТ), опосредуемой Т- лимфоцитами и макрофагами. Т- лимфоциты при участии белков главной системы гистосовместимости класса I распознают клетки, инфицированные микобактериями туберкулеза, атакуют и разрушают их. Антибактериальные антитела связываются с различными антигенами возбудителя, образуют циркулирующие иммунные комплексы (ЦИК) и способствуют их удалению из организма. Аллергическая перестройка (ГЗТ) к туберкулезной палочке свидетельствует о формировании приобретенного иммунитета и может быть выявлена с помощью туберкулиновой пробы. Эта проба является достаточно специфичной. Старый туберкулин Коха представляет концентрированный фильтрат стерилизованных компонентов микобактерий. Очищенный препарат PPD (новый туберкулин Коха, содержащий туберкулопротеины) используют преимущественно для постановки внутрикожной пробы Манту. С помощью этой пробы проводят отбор лиц, подлежащих ревакцинации. Положительный результат пробы Манту нельзя рассматривать как обязательный признак активного процесса (это на самом деле показатель ГЗТ), а отрицательный - не всегда свидетельствует об его отсутствии (анергия, иммунодефициты). Иммунопрофилактика включает внутрикожное введение аттенуированного штамма B.bovis, известного как бацилла Кальметта - Жерена (БЦЖ). В России вакцинацию проводят новорожденным (на 5-7 дни жизни), ревакцинацию - в 7-12-17-22 лет и более старших возрастах при отрицательной пробе Манту (т.е. отсутствии клеточного нестерильного = вакцинального или инфекционного иммунитета - ГЗТ). ^ Применяют микроскопические, бактериологические, биологические, аллергологические, серологические и молекулярно - генетические методы. ^ включает микроскопию нативного материала, использование методов накопления, люминесцентную диагностику. Микроскопия нативного патологического материала (мокрота, отделяемое свищей, промывные воды из бронхов, моча) в мазках, окрашенных по Цилю - Нильсену, позволяет выявлять красные кислотоустойчивые палочки при концентрации микобактерий не менее нескольких сот тысяч / мл. Методы накопления (например, флотации) повышают чувствительность микроскопии до нескольких тысяч микробных тел / мл. Люминесцентная микроскопия с использованием акридинового оранжевого или аурамина - родамина - наиболее чувствительный и эффективный метод бактериоскопии, чувствительность - 500-1000 микобактерий / мл. Позволяет выявлять микобактерии с измененными культуральными и тинкториальными свойствами. ^ (посев на питательные среды) позволяет обнаружить микобактерии при концентрации 200-300 / мл. Наиболее эффективен до или в начале лечения, в конце лечения уступает по эффективности люминесцентному методу. Недостаток - длительность получения результатов - от 2 до 12 недель. Достоинство - возможность оценки вирулентности культуры, определение чувствительности к лекарственным препаратам. Разработаны ускоренные методы выделения. По методу Прайса материал помещают на предметное стекло, обрабатывают серной кислотой, отмывают физиологическим раствором и вносят в питательную среду с цитратной кровью. Стекло вынимают через 3-4 суток и окрашивают по Цилю - Нильсену. Золотой стандарт - биологическая проба на морских свинках, позволяет определять до 10 микобактерий в мл. Распространение резистентных и измененных микобактерий снизило чувствительность метода. Метод требует соблюдения режимных условий и применяется в крупных специализированных лабораториях. ^ - это широко используемые кожные пробы с туберкулином и методы аллергодиагностики in vitro (РТМЛ, ППН - показатель повреждения нейтрофилов и др.). ^ многочисленны (РСК, РА, РПГА), однако в связи с недостаточной специфичностью используют мало. Наиболее совершенны генетические методы, в практических лабораториях их используют пока недостаточно. Среди методов идентификации микобактерий наибольшую практическую ценность имеют два подхода: - методы дифференциации M.tuberculosis и M.bovis от прочих микобактерий; - методы дифференциации M.tuberculosis и M.bovis. Существует ряд методов дифференциации микобактерий двух основных видов от остальных. Из них наиболее простым и доступным является оценка роста на яичной среде, содержащей салициловый натрий в концентрациях 0,5 и 1,0 мг/мл. На этих средах, в отличии от других микобактерий, M.tuberculosis и M.bovis не растут. Для дифференциации M.tuberculosis от всех других видов микобактерий , в том числе от M.bovis, используют ниациновый тест (определение синтезируемой M.tuberculosis в больших количествах никотиновой кислоты, выявляемой с помощью цианистых или роданистых соединений по ярко- желтому окрашиванию). У микобактерий туберкулеза также отмечается положительный тест восстановления нитратов. Учитывают скорость роста и характер пигментообразования. Используют цитохимические методы, позволяющие выявлять корд - фактор (вирулентность) по прочности связи красителей - нейтрального красного или нильского голубого при обработке щелочью.
Морфология. Риккетсии- мелкие плеоморфные микроорганизмы от кокковидных до палочковидных, иногда нитевидные, однако чаще короткие палочки 0,3-0,6 х 0,8-2,0 мкм, у некоторых видов длиной до 4 мкм перед делением клеток. Жгутиков и капсул нет, но на электронных микрофотографиях клеток, подвергнутых минимальным лабораторным манипуляциям, обычно виден внешний слой аморфного материала. Грамотрицательные микроорганизмы, плохо окрашиваются обычными анилиновыми красителями. Удерживают основной фуксин. Применяется также модификация окраски по П.Ф.Здродовскому, который в связи с наличием большого количества липоидов рекомендовал использование карболового фуксина. При этом риккетсии окрашиваются в ярко-розовый или рубиново-красный цвет, цитоплазма клеток - в голубой, ядра - в синий. Риккетсии имеют сходное с классическими грамотрицательными бактериями строение клетки: снаружи расположен микрокапсулярный слой толщиной 10-15 нм, обладающий антигенными свойствами, далее выявляется трехслойная мембрана клеточной стенки шириной 8-12 нм; цитоплазма образуется рибосомоподобными гранулами, между которыми обнаруживаются нити ДНК. При электронной микроскопии различают двухслойную клеточную оболочку, напоминающую по химическому составу клеточную оболочку бактерий, а также диффузно расположенный в цитоплазме ядерный материал - нуклеоид, рибосомы, РНК, ДНК. При изучении поверхностных структур риккетсий с помощью электронной микроскопии выявлены, как у многих бактерий, особого рода образования - волосовидные придатки или фимбрии. С наличием жгутикоподобных образований у R.sibirica, возможно, связана подвижность. У ряда видов риккетсий отмечают наличие вегетативных и покоящихся форм. ^ У риккетсий отмечено высокое содержание липидов (до 50%) и низкое - углеводов. По высокому содержанию нуклеиновых кислот (до12%) и наличию в составе как ДНК, так и РНК, риккетсии представляют бактериальные организмы. Сходны по химическому составу и клеточные стенки риккетсий и классических бактерий. В них выявлены диаминопимелиновая и мурамовая кислоты, белки, липиды, полисахариды. Однако у риккетсий содержится и глюкуроновая кислота, которая в оболочках бактерий обычно отсутствует. Соотношение ДНК и РНК составляет 1:6-1:8. РНК содержится в риккетсиях преимущественно в цитоплазме, а ДНК образует скопления, которые по существу и представляют нуклеоид. О сложности химического состава риккетсий свидетельствует наличие в них витаминов (никотинамид, фолиевая кислота, биотин, рибофлавин, тиамин, пантотеновая кислота, витамины В6, В12). У риккетсий обнаружены энзимные системы, в частности трансаминазы, глютамат-оксидазная система, с помощью которых осуществляется в живой клетке хозяина автономный метаболизм этих микроорганизмов. При изучении суммарных белков риккетсий методом электрофореза в полиакриламидном геле, в зависимости от разрешающей способности метода выявляется от 19 до 175 полипептидов, в том числе 6 из них являются основными с молекулярными массами в пределах 11х10 - 155х10 . Содержание Г + Ц в ДНК исследованных видов - 30-32,5 мол.%. Физиология. Окисление осуществляется по циклу Кребса с образованием цитрата, CO2 и переаминированием глютаминовой кислоты в аспарагиновую, что свидетельствует об их энергетической активности. Вместе с тем, облигатный характер внутриклеточного паразитизма риккетсий требует для их развития веществ и энзимов, содержащихся в клетках хозяина. С учетом особенностей метаболизма риккетсии представляют собой бактерии, которые, приспособившись к внутриклеточному существованию, утратили в значительной степени способность к внеклеточному существованию. ^ Экологической микронишей представителей рода Rickettsia служит цитоплазма, для ряда из них (риккетсии группы КПЛ) - ядро эукариотической клетки, где они размножаются свободно, без окружения паразитофорной вакуолью. Не культивируются в отсутствии клеток хозяина. Размножаются в клетках позвоночных и членистоногих, в эпидермальных клетках, выстилающих желточный мешок развивающегося куриного эмбриона. Хороший рост получен in vitro в клетках куриного эмбриона и в некоторых стационарных линиях клеток млекопитающих. Образуют бляшки на фибробластах куриного эмбриона. Температурный оптимум роста от 32 до 35° С. Риккетсии являются медленно растущими микроорганизмами, размножаются поперечным бинарным делением, время их генерации составляет не менее 8-9 часов. Типовой вид - Rickettsia prowazekii da Rocha-Lima, 1916. ^ При изучении штаммов риккетсий придерживаются общей схемы, предложенной П.Ф.Здродовским и Е.М.Голиневич (1972), которая включает: а) изучение морфологии; б) характеристику размножения в желточных мешках куриных эмбрионов; в) воспроизведение экспериментальной инфекции на лабораторных животных; г) иммунологическую характеристику в опытах перекрестного иммунитета; д) серологический анализ антигенной структуры. Основные группы и виды микроорганизмов рода Rickettsia A   . R.rickettsii группа1.R.conorii 2.R.rickettsii 3 ^ .R.sibirica B. R.massiliae группа 4.R.massiliae 5.R.rhipicephali 6.R.montanensis C. R.akari группа 7.R.akari 8  .R.australisD  . R.prowazekii группа9 ^ ТИФА .R.prowazekii 10.R.typhi E. R.canadensis группа 11.R.canadensis В инфекционной патологии основное значение имеют риккетсии группы сыпного тифа (R.prowazekii - возбудитель сыпного тифа и R.typhi - возбудитель крысиного сыпного тифа) и группы клещевых пятнистых лихорадок (КПЛ) - R.rickettsii - возбудитель пятнистой лихорадки Скалистых гор (в Америке), R.conorii - возбудитель марсельской лихорадки (преимущественно в Средиземноморском регионе, а также в бассейнах Черного и Каспийского морей), R.sibirica - возбудитель клещевого риккетсиоза или клещевого сыпного тифа (Северная и Центральная Азия, включая регионы юга Сибири и Дальнего Востока), R.akari - возбудитель осповидного (везикулезного) риккетсиоза, R.australis - возбудитель австралийского риккетсиоза, R.japonica - возбудитель японской клещевой пятнистой лихорадки. Из представителей других родов в патологии человека имеют значение Coxiella burnetii - возбудитель лихорадки Ку, Orientia tsutsugamushi - возбудитель лихорадки цуцугамуши, недавно открытые возбудители гранулоцитарного эрлихиоза (агент HGE из рода Ehrlichia) и моноцитарного эрлихиоза (Anaplasma chaffeensis), различные виды бартонелл, вызывающих широкий круг клинической патологии (от окопной лихорадки до болезни кошачьих царапин). Остановимся на некоторых группах патологии, вызываемых риккетсиями и коксиеллами, подробнее. ^ Сыпной тиф - антропоноз, при котором циркуляция возбудителя -Rickettsia prowazekii происходит в паразитарной системе, включающей человека (резервуар) и платяную вошь - переносчика. В организме вши риккетсии размножаются в эпителии кишечника, вызывая его разрушение (несовершенная адаптация). Риккетсии в высоких концентрациях содержатся в фекалиях переносчиков. Платяная вошь покидает хозяина при сыпнотифозной лихорадке, что и определяет ее роль как переносчика. Путь передачи - трансмиссивный (контаминация инфицированных фекалий вшей при расчесах). Исторически эпидемический сыпной тиф - одна из наиболее важных эпидемических инфекций, получавшая наибольшее распространение в период войн, других социальных и природных потрясений (т.е. увеличения вшивости населения). Кроме этого с R.prowazekii связана болезнь Брилля - Цинссера - рецидив эпидемического сыпного тифа, возникающий у переболевших через десятки лет (эндогенная реактивация возбудителя). Патологический процесс при риккетсиозах обусловлен тем, что риккетсии размножаются, главным образом, в эндотелиальных клетках сосудов, особенно мелких, и сосудорасширяющим действием риккетсиального токсина, что вызывает значительные изменения центральной нервной системы и расстройства кровообращения. Высказывается мнение о возможности не только длительной персистенции риккетсий в организме переболевшего но и, с учетом ангиотропизма риккетсий, развития различной сердечно - сосудистой патологии через годы после перенесенного риккетсиоза. Лабораторная диагностика сыпного тифа и других риккетсиозов осуществляется преимущественно с использованием серологических методов - РСК, РНГА, РНИФ, ИФА. Разработана и применяется живая сыпнотифозная вакцина. Однако наибольшее значение имеет борьба с педикулезом, своевременное лабораторное обследование на сыпной тиф длительно лихорадящих больных, особенно из категорий риска (завшивленные, бездомные, беженцы и др.).
Род Chlamydia и род Chlamydophila. Представители семейства Chlamydiaceae (хламидии) являются патогенными облигатными внутриклеточными бактериями, паразитирующими в чувствительных клетках теплокровных (млекопитающих, птиц, человека и др.). Они близки по структуре и химическому составу к классическим бактериям. Для них характерно сохранение морфологической сущности на протяжении всего жизненного цикла, деление вегетативных форм, наличие клеточной стенки, содержание ДНК и РНК, энзиматическая активность, чувствительность к антибиотикам широкого спектра, наличие общего родоспецифического антигена. В то же время хламидии по размерам меньше классических бактерий, имеют небольшой геном, являются облигатными внутриклеточными паразитами с уникальным циклом развития. Они не способны синтезировать высокоэнергетические соединения и обеспечивать собственные энергетические потребности ( энергозависимые паразиты), что и определяет их облигатный паразитизм. С учетом своих особенностей хламидии занимают самостоятельное (особое) положение среди других микроорганизмов - прокариот. Для человека имеют значение преимущественно представители двух родов - Chlamydia и Chlamydophila. Наибольшее значение имеют три вида. Chlamydia trachomatis , различные серотипы которого вызывают трахому, венерическую лимфогранулему и наиболее распространенные урогенитальные хламидиозы. Chlamydophila psittaci вызывает орнитоз и зоонозные хламидиозы. Chlamydophila pneumoniae вызывает антропонозные пневмонии, ОРЗ, с этим возбудителем связывают развитие некоторых форм бронхиальной астмы, атеросклероза. ^ . Клеточный цикл развития хламидий имеет две основных формы - элементарные тельца (ЭТ) - инфекционная форма и ретикулярные тельца (РТ) - вегетативная форма. Сферические ЭТ значительно меньше размерами (менее 300 нм в диаметре), имеют более жестную электронно- плотную структуру, метаболически мало активны, адаптированы к кратковременному внеклеточному существованию. Цикл развития хламидий осущесвляется в цитоплазматическом включении - фагосоме (вакуоле), куда ЭТ попадают путем стимулирования эндоцитоза. В процессе адсорбции и эндоцитоза участвуют термолабильные эффекторные белковые поверхностные антигены хламидий. ЭТ подавляют фагосомо - лизосомальное слияние и преобразуются при участии главного поверхностного протеина в РТ, которые обладают активным метаболизмом, более крупными размерами и активным бинарным делением. Цикл размножения заканчивается обратным переходом РТ в ЭТ, разрывом мембран включения и ограничивающих мембран клетки хозяина, выходом ЭТ из клеток, далее ЭТ инфицируют новые клетки. Тельца включений выявляются в клетках при помощи световой и иммунолюминесцентной микроскопии. Кроме того, хламидии способны образовывать L - формы, персистентные формы. ^ . Хламидии не растут на питательных средах самого сложного состава (это сближает их по свойствам с риккетсиями и особенно - с вирусами), для их культивирования могут быть использованы лабораторные животные и куриные эмбрионы (биопроба) и особенно чувствительные линии клеток животных - чаще клетки McCoy (чаще с обработкой цитостатиками для повышения чувствительности), которые считались “золотым стандартом” диагностики. ^ . Способны самостоятельно синтезировать нуклеиновые кислоты, некоторые белки и липиды. Являются энергетически зависимыми от хозяина эндопаразитами. Chlamydia trachomatis обладает гликоген - синтетазной системой (гликоген содержится и выявляется при определенных методах окраски во включениях), синтезирует предшественники фолиевой кислоты и соответственно биохимической активности чувствителен к сульфаниламидам. ^ . 1. Выделяют поверхностный родоспецифический антиген (ЛПС), локализующийся на наружной мембране клеточной стенки. ЛПС имееи две антигенные детерминанты, одна из них специфична для всего рода, другая перекрестно реагирует с некоторыми другими грамотрицательными бактериями (сальмонеллы серовара minnesota), термостабилен. 2. МОМР - главный белок наружной мембраны несет функцию структурного белка и порина. Включает термолабильные белковые детерминанты , обладающие видо - , типо - и сероварной специфичностью. Детерминанты патогенности. 1. Эндотоксин (липополисахарид), подобный эндотоксинам грамотрицательных бактерий. 2. Экзотоксины - термолабильные субстанции. 3. Антигены клеточной поверхности, подавляющие защитные реакции. Факторы патогенности хламидий препятствуют фагосомо - лизосомальному слиянию в фагоцитах. ^ . Урогенитальные хламидиозы - наиболее распространенные формы хламидиозов. В крупных странах (США, Россия) ежегодно регистрируют несколько миллионов случаев, в мире - от 50 до 90 млн. случаев. Скудность начальных проявлений и тяжелые последствия урогенитальных хламидиозов, особенно у женщих (нарушения репродуктиной сферы, инфекционные осложнения), предъявляют особые требования к своевременной лабораторной диагностике. Хламидии сероваров D - K Chlamidia trachomatis, вызывающие урогенитальные хламидиозы, передаются от человека к человеку половым путем. Бессимптомное носительство наблюдается не менее чем у 5 % мужчин и 10% женщин. Отдельные серотипы этого возбудителя вызывают такие распространенные в прошлом заболевания как трахома (сопровождается поражениями конъюнктивы и прилегающих тканей глаза, часто приводит к катарактам и слепоте) и венерическая лимфогранулема (регистрируют преимущественно в слаборазвитых странах Азии, Африки и Латинской Америки с теплым климатом). Орнитоз - хламидийная инфекция, вызываемая C.psittaci. Человек заражается от птиц - основных хозяев этого возбудителя воздушно - пылевым и воздушно - капельным путем. В условиях города основную опасность представляют голуби (от 20% до 100% инфицировано этим возбудителем, чаще с ними контактируют дети. В домашних условиях источником могут быть канарейки и особенно попугаи (вызывают наиболее тяжелую форму - пситтакоз). Орнитоз часто протекает как тяжелая интерстициальная пневмония. Кроме этого, серотипы этого возбудителя вызывают зоонозные хламидиозы (например, так называемый вирусный аборт овец, хламидиозы крупного рогатого скота и др.), при контакте с больными животными могут развиваться различные формы хламидиозов у людей. Клинико - эпидемиологические особенности зоонозных хламидиозов у людей изучены недостаточно. Бронхопневмонии , вызываемые C.pneumoniae. Это антропонозные инфекции, передаваемые от человека к человеку, большая часть случаев протекает субклинически. Возникают поражения верхних дыхательных путнй с последующим развитием бронхопневмонии. Это распространенные инфекции (антитела к C.pneumoniae выявляют почти у половины взрослого населения), однако диагностируются до настоящего времени плохо. С этим возбудителем связывают развитие отдельных форм бронхиальной астмы и атеросклероза. С учетом многообразия клинических проявлений и необходимостью дифференциации различных клинических форм хламидиозов (прежде всего генитальных и экстрагенитальных) особое значение приобретает лабораторная диагностика. ^ . Золотой стандарт - метод культивирования в культурах клеток применяется очень редко в связи с трудоемкостью и длительностью культивирования, необходимостью работы с инфекционным материалом, этот метод по чувствительности уступает ПЦР, требует быстрой доставки материала для исследования. Применяемые лабораторные методы можно разделить на две основные группы - методы выявления антител и методы выявления антигенов. ^ наиболее эффективны при генерализованных формах хламидиозов, сопровождающихся выработкой антител в высоких титрах (орнитоз), и мало эффективны при локальных (особенно хронических) формах (урогенитальные хламидиозы). Большинство методов выявляет антитела к группоспецифическому липополисахариду хламидий, что не позволяет определить вид хламидий. Среди используемых методов: - ^ - более эффективный метод для диагностики текущего инфекционного заболевания; - ИФА - наиболее чувствительный метод серологической диагностики. Некоторые варианты тест - систем ИФА позволяют дифференцировать C.pneumoniae от хламидий других видов; - РНИФ - обладает наибольшей степенью видоспецифичности. ^ . 1. Цитологические методы с окраской мазков по Романовскому - Гимзе и другими методами мало чувствительны и специфичны, имеют преимущественно историческое значение. 2. ^ с моноклональными антителами (МКА) к группоспецифическому липополисахариду хламидий - наиболее распространенный, чувствительный и специфичный метод, позволяет выявлять локализацию возбудителя (урогенитальные мазки), морфологию (характер гранул, преобладание РТ или ЭТ). Метод требует высокой квалификации микроскописта и качества мазка - отпечатка ( достаточное количество клеток с учетом внутриклеточного расположения возбудителя). 3. ^ применяется относительно реже, требует большого количества материала (соскоб), связана с получением суспензии и опасностью инфицирования персонала. 4. ^ - наиболее чувствительный метод. Однако и при нем возможны ложноположительные (при недостаточной чистоте работы - при контаминации) и ложноотрицательные (наличие в пробах материала ингибиторов Tag - полимеразы) результаты. Недостатки чувствительных методов выявления антигенов возбудителя - возможность получения положительных результатов даже через 1 - 1,5 месяца после излечения. Нужна полная замена эпителия слизистой, содержащего поверхностные антигены разрушенных хламидий, для получения отрицательных результатов. Особенно это относится к ИФА, ПЦР, для МФА - в меньшей степени (этот метод позволяет оценить морфологию включений хламидий). ^ Хламидии - внутриклеточные паразиты. Применяют антибактериальные препараты, проникающие в клетки, чаще доксициклин или сумамед (азитромицин). Эффективному лечению часто препятствует одновременное наличие у больных гонококков и трихомонад (в трихомонадах хламидии могут находиться внутриклеточно). Эффективность современных методов лечения урогенитальных хламидиозов не превышает в идеале 98 - 99%, т.е. часть пациентов эффективно освободить от хламидий не удается, даже после нескольких циклов лечения. У этих больных часто развиваются дисбактериозы, присоединяется кандидоз, снижается резистентность к различным инфекционным агентам. Эффективных методов специфической профилактики нет.
Легионеллы. Имеется большая группа облигатных внутриклеточных паразитов (коксиеллы, хламидии, легионеллы) и паразитов мембран эукариотических клеток (микоплазмы), которые вызывают так называемые “атипичные пневмонии”, этиологически редко расшифровываемые в настоящее время. Легионеллы занимают самостоятельную ветвь на филогенетическом древе прокариотов, относятся к семейству Legionellaceae, роду Legionella, включающему более 30 видов, многие из которых вызывает атипичные пневмонии. Наиболее частым возбудителем является L.pneumophila. Морфология. Легионеллы - грамотрицательные палочки средней величины с заостренными концами. Спор и капсул не образуют, подвижны, обитают в водной среде. ^ Легионеллы - факультативные внутриклеточные паразиты. Размножаются в развивающихся куриных эмбрионах, в организме экспериментальных животных, в клеточных культурах, на специальных средах сложного состава. Рост медленный - крупные, выпуклые, блестящие колонии, часто с коричневой пигментацией появляются на 3-5-е сутки. ^ Легионеллы имеют соматический и жгутиковый антигены, обладающие групповой и типовой специфичностью. По антигенным свойствам выделяют 14 сероваров. К важнейшим факторам патогенности относят эндотоксин и внутрифагоцитарный паразитизм. ^ . Легинеллез (болезнь легионеров) - сапронозная инфекция. Экологически легионеллы относят к водным микроорганизмам - сапрофитам, для человека являющихся случайными паразитами, реализующими свою патогенность. Современные особенности бытового использования воды обусловили появление этой “новой” инфекции.Основной путь заражения - воздушно - капельный. Для распространения легионелл необходимо наличие мелкодисперсного источника распыления (кондиционеры - “болезнь кондиционеров”, душевые установки и др.). Вспышки болезни легионеров связаны преимущественно с гостиницами и больницами, различными типами их водных систем. Наибольшее значение имеют системы горячего водоснабжения (температурный диапозон от 25 до 46˚С оптимален для размножения легионелл и возникновения вспышек), системы охлаждения, водного массажа, инголяционное оборудование, природные источники теплой минеральной воды, фонтаны, мойки, зубные дрели. Основное значение имеет колонизация легионеллами соединительных узлов, резиновых прокладок. С целью снижения концентрации легионелл необходима чистка внутренних поверхностей (особенно резиновых) от биопленок, содержащих большие концентрации возбудителя. В природных водоемах для сохранения и размножения легионелл существенное значение имеет их ассоциация с сине - зелеными водорослями, почвенными и водными амебами. Легионеллы длительно сохраняются в цистах амеб, проникновение и размножение легионелл в амебах сходно с их поведением в макрофагах. В организме человека легионеллы - внутрифагоцитарные паразиты размножаются в альвеолярных и других макрофагах, нейтрофилах, моноцитах. Болезнь легионеров - острая, тяжело протекающая инфекция, поражающая легкие и другие системы. ^ . Материалом для микробиологического исследования чаще служит мокрота. Обычно используют угольно - дрожжевой агар с добавлением L - цистеина, пирофосфата железа, полимиксина и ванкомицина. Возбудитель можно выявить также с помощью иммунолюминесцентного метода, ИФА, ПЦР. Серологическая диагностика осуществляется в РНИФ и ИФА с исследованием парных сывороток в динамике инфекционного процесса, максимальный уровень антител наблюдается в период реконвалесценции. ^ Этиотропная терапия проводится антибиотиками (чаще эритромицином и рифампицином). Специфическая профилактика не разработана.
Род Treponema. Род представлен туго закрученными спиралевидными бактериями длиной 5 - 20 мкм. Наиболее известный патогенный для человека вид - T. pallidum (бледная трепонема), подвид T. pallidum pallidum - возбудитель сифилиса. Патогенные трепонемы дифференцируют по патогенности для различных видов лабораторных животных, способности ферментировать маннит, утилизовать лактат и образовывать специфические метаболиты. “Lues Venerae” - “любовная чума” - одно из названий сифилиса (люес). Морфология. Возбудитель сифилиса имеет спиралевидную форму с одинаковыми по высоте завитками (более 10). Характер подвижности - плавные винтообразные и сгибательные движения (Treponema -с лат. - сгибающаяся нить). По Романовскому - Гимзе окрашиваются в бледно - розовый цвет (pallidum - с лат.- бледная). Легко выявить при помощи темнопольной микроскопии и после инпрегнации серебром. ^ Бледная трепонема чрезвычайно прихотлива к условиям культивирования и не способна длительно расти на питательных средах. Отличается очень медленным темпом размножения. В лабораторных условиях можно культивировать на кроликах, заражая их интратестикулярно (орхит с накоплением трепонем). Биохимические свойства изучены слабо в связи с проблемами культивирования и для характеристики T.pallidum практически не используются. ^ Трепонемы имеют перекрестно - реагирующие антигены с другими спирохетами (боррелиями, лептоспирами). В связи с наличием в составе клеточных стенок бледных трепонем фосфолипидов (кардиолипин и др.), аналогичных клеткам млекопитающих, в ответ на эти антигены в организме вырабатываются специфичные не только для возбудителя сифилиса, но и перекрестно- реагирующие на кардиолипин и другие фосфолипиды тканей человека и животных так называемые вассермановские антитела. Они выявляются в РСК с кардиолипиновым антигеном (из сердец животных). Специфические антитела к возбудителю сифилиса выявляют в РНИФ и иммуноблоте. Антиген Вассермана - фосфолипид, входящий в состав митохондриальных мембран (кардиолипин). Его получают из бычьего миокарда - ткани, богатой митохондриями. Благодаря антигенной общности с тканевыми фосфолипидами, антитела к кардиолипину трепонем реагируют с тканевым (митохондриальным) кардиолипином. Истинные аутоантитела против тканевого кардиолипина образуются при “антимитохондриальном (антифосфолипидном) синдроме”, обусловливая положительные реакции Вассермана (ложноположительные - применительно к возбудителю сифилиса) при коллагенозах (системная красная волчанка, ревматоидный артрит), проказе и других тяжелых инфекциях, связанных с повреждением тканей, при гемолитической анемии, при наркоманиях. ^ Развитие сифилиса определяется двумя основными механизмами - склонностью к генерализации (высокая инвазивность) и периодической активизацией длительно персистирующего в организме возбудителя (“выход из засады”). Из-за неустойчивости возбудителя во внешней среде заражение происходит при прямых контактах ( в подавляющем большинстве случаев половым путем). Проникая через слизистые оболочки и незначительные повреждения кожи, возбудитель быстро проникает в ткани, распространяется лимфогенно и далее - гематогенно (генерализация). Первые признаки болезни (первичный сифилис) возникает после инкубационного периода (в среднем 3 - 4 недели). В месте внедрения (первичной инвазии) происходит размножение возбудителя и возникает твердый шанкр - плотный безболезненный красноватый узелок, превращающияся в язву. Одновременно в результате проникновения трепонем в лимфатические узлы развивается регионарный лимфаденит и в дальнейшем - полиаденит. Генерализация инфекции происходит еще до появления шанкра и лимфаденита, т.е. сифилис с самого начала - системное заболевание. После затихания клиники первичного сифилиса через некоторое время ( от нескольких недель до нескольких месяцев) происходит рецидив инфекции, связанный с полиорганной репликацией трепонем (вторичный сифилис). Наблюдаются поражения кожи и слизистых (вторичные сифилиды, в которых находится большое количество трепонем), поражения внутренних органов, лимфоузлов, костей, суставов и мн.др. С учетом многообразия поражений вторичный сифилис называют “великим мистификатором”. После вторичного сифилиса у части больных вновь формируется латентный сифилис (возбудитель уходит в подполье на годы), который у половины носителей может переходить в третичный сифилис. Он характеризуется формированием очагов гранулематозного воспаления - гумм, содержащих мало трепонем (практически не заразных). Распад гумм приводит к разрушению костных и мягких тканей и поражению жизненно важных органов. В отличие от первичного и вторичного сифилиса, третичный сифилис - хронический процесс, который никогда не завершается самоизлечением. Мало известно о факторах патогенности T.pallidum и механизмах, позволяющих ему длительно ускользать от иммунологического надзора. Обнадеживает,что этот возбудитель сохраняет высокую чувствительность к антибиотикам. Современный сифилис по- прежнему хорошо поддается лечению, если процесс не достигает необратимых органических поражений. ^ При первичном и вторичном сифилисе возбудитель можно обнаружить в очагах поражений микроскопией. Более оптимальны для выявления бледных трепонем темнопольная и иммунолюминесцентная микроскопия. При первом методе необходимо исключить возможные артефакты (нити фибрина, например), наличие сапрофитических трепонем. T.refringens колонизирует наружные половые органы, отличается высокой подвижностью и отсутствием сгибательных движений. T.denticola колонизирует ротовую полость, ее завитки короче и направлены под более острым углом. В ротовой полости человека встречается также T.vincentii, которая в ассоциации с другими микроорганизмами может вызывать язвенно - некротическую ангину. Кроме возбудителя сифилиса имеются очень близкие в генетическом и антигенном отношении трепонемы других подвидов T.pallidum, вызывающие поражения человека в странах с жарким климатом (фрамбезию, бержель, пинту). При окраске по Романовскому - Гимзе T.pallidum окрашивается в розовй цвет, непатогенные трепонемы - в синий или фиолетовый, T.refringens прокрашивается фуксином в красный цвет. Люминесцентная диагностика широко применяется для выявления трепонем в различных клинических материалах. Среди методов выявления возбудителя наибольшей чувствительностью и достаточной специфичностью обладает ПЦР. Основные методы диагностики - серологические, т.е. выявление сывороточных антител. Применяют РСК с кардиолипиновым и трепонемным антигеном, флоккуляционные пробы (микроагглютинационный тест на кардиолипиновые антитела), РНГА. Более специфичными и чувствительными тестами являются тесты, основанные на непрямой иммунофлюоресценции (РИФ), реакция иммобилизации бледной трепонемы, ИФА на основе рекомбинантных белков трепонем. В серодигностике сифилиса необходимо учитывать серонегативность первичного сифилиса в первые недели заболевания. Необходимо сочетание методов , основанных на выявлении антител как против кардиолипиновых, так и трепонемных антигенов. Кардиолипиновые тесты быстро становятся серонегативными после элиминации возбудителя (спустя несколько месяцев), антитрепонемные антитела сохраняются намного дольше. Существенное значение для определения активности процесса имеет определение антитрепонемных IgM - антител (при выявлении врожденного сифилиса -особо, поскольку IgM - антитела не переходят через плаценту от матери к плоду; при исследовании спинномозговой жидкости - для диагностики нейросифилиса и др.). Лечение. Чаще применяют депонированные пенициллины с пролонгированным действием, при непереносимости - макролиды, тетрациклины, цефалоспорины. Специфической профилактики не существует. 21.Возб-ли лептоспирозов:Лептоспироз-инф-ая болезнь,выз-ая Leptospira interrogatis,хар-ся пораж-м кровеносных кап-в,печени,почек,мышц,ЦНС,нередко сопров-ся желтухой.Таксономия.отн-ся к отделу Gracilicutes, сем-ву Leptospiraceae, роду Leptospira.Морфология.Лептоспиры–бактерии, им-ие извитую форму,дл-й 7-14 мкм,толщиной 0,1 мкм;хар-ся нал-м многочисл-ых мелких завит-в,концы лептоспир загнуты в виде крючков.Не обр-ют спор и капсул;подвижны – совершают поступ-ое,вращ-ое,сгиб-ое движ-я.Лептоспиры анилиновыми крас-ми красятся плохо,по Ром-му-Гимзе окраш-ся в роз-й цвет,Гр-.Мтрогие аэробы,оптимю.темп.28-30*С,рН-7,2-7,4.Растут в жид-х и полужид.ср-х.культ-ют в аэробных усл-х на спец-ых пит-х ср-х с нативной кроличьей сыв-й при 25-35ºС и рН 7,2-7,4. Растут медленно. Ферм-я акт-ть.Б\х акт-ть лептоспир невысокая.АГ стр-ра.Среди предст-ей рода Leptospira выд-т около 200 сероваров, объед-х в 19 серолог-их групп. Им-т О-АГ.Факторы патог-ти. В орг-м чел-ка Л.проник-т через слиз.обол.носа,рта,пищ-да,глаз, а также через микротравмы кожн.покр-в.Возб-ль прон-т в кр.и цирк-т в ней.Генерал-я лептоспиремия прод-ся 4-5сут. И сопров-ся избир-й конц-й в почках и печени.(б.Василия-Вейеля)-пораж-е печени обусловлены мех-м повреж-м гепат-в,а также токс-м дейс-м эндотоксина,выд-го при гибели б.,м.прив-ть к разв-ию желтухи. Л.прод-т фибринолизин и плазмокоагулазу.На 2-й нед.возб-ть депон-ся в изв-х канн-х почек и исчезает из кр. И тк.После вызд-я Л.долго сохр-ся в почках и выд-ся с мочой.Рез-ть.Л. очень быстро погибают при дейс-и высоких темп-р,дезинф-их ср-в,но дост-но уст-ы к низким темп-ам.В воде естес-ых водоемов сохр-т жизнеспос-ть в теч-е 5-10 дн., в сырой почве–до 270 дн.Эпидем-я.Лептоспироз– широко распрост-ый зооноз,встре-ся во всех частях света. Сущ-т прир-е очаги л.–в лесах,забол-х местн-х,реках.Ист-м инф-и в них явл-ся дикие жив-е–грызуны,лисы,песцы.Моча жив-х попадает в воду,загр-т почву,раст-ь.Забол-ть хар-ся строгой сезонностью (июнь – сентябрь) и связана с с\х работами.В сельской мест-ти ист-м инф-и м.б.домашние жив-е.Зараж-е может происх-ть пищ-м путем,напр-р при употр-ии молока.Возм-н также контактно-бытовой путь передачи–при уходе за больными жив-и. основной путь передачи инф-ии–водный.«купальные» вспышки.Клин-я картина.Инк-й пер-д 7-10 дн.,забол-ие–5-6 нед.Болезнь, начин-я остро, темп-а тела повыш-ся до 39-40ºС,появл-ся голов-я боль,резкие боли в мышцах,особенно в икрон-х.почечная нед-ть,желтуха и др. Хаар-на волнообразная лихорадка.Клин-е формы лептоспироза разл-ны – от легких до тяжел-х, приводящих к смерти.Иммун-т. Длит-й, напр-ый, но хар-ся строгой серовароспецифичностью.Микробиол.диаг-ка:бактериоскп.,бактериолог.,серолог-я,биолг.,Матер-л:кр.,спиномозг.жид.на более поздних сроках-центрифугат мочи.Выд-е возб-ля: прв-ть в 1-е 2-4 сут.,посевом 8мл венозной кр.в проб.на среду фервольта.Проб.встрях-т залив-т парафином и и нк-т.Б.идентиф-т с пом.типовых аглют.антисыв-к.Серолог.исслед-е:исслед-т парные сыв.на 2-3нед.болезни.Сыв-е АТ опред.с пом.р-ии микроагг-ии и лизиса с сыв.пациента и стан.набором ми\о.При +рез-те-набл-ся образ-е клубков из лептоспир..Биохим.пробы на хомяках внутрибрюш.зараж-т кр.б.Леч-е:прим-е а\б(пенициллин),противолептосип-я гамма-глоб-н.Экст.проф-ка-вакцина коли-убитая в.Прф-ка-неспец-я-нельзя употр-ть сырую вду,купать ся пит в водоемах нельзя. Спец-я-по эпид.показ-м убитая в. 22.Возб-ль бореллиозов:Род Борелия отн-ся к отделу Грациликутес,порядка Спирохетес, сем-ва-пирохитосе.Подвиж-е спирал-е б.разм-м 3-20*0,2мкм,спирали им-т 3-10неправ-х круп.завитков.По Грамму окр-ся отриц.,,хорошо воспр-т анилиновые красители.Строгие анаэробы,растут при 20-37*С.растут на ср.обогащ-х жив-ми б. и на куриных эмбр-х.Возб-ль эпидем-го возв-го тифа-инф-е б.вызв-я Борелия Рекурентис,хар-ся прист-ми лихорадки с мыш.и гол.болями,смен-ся безлих-ми интер-ми.Антропонозное забол-е.Эпидем-я:повсеместно.Резер-р воз-ля-больной чел-к,перен-ки-вши,реже-постельные клопы.макс-е зараж-е поис-т через 5-6сут.после кровосос-я.забол-е им-т выраж-ю сезонность (кон.зимы,нч.весны)Зараж-е проис-т в рез-те раздав-ия вши, втир-ия возбу-ей, сод-ся в гемолимфе, в расчесы. –Внедр-ся в орг-м боррелии захв-ся Ма и лимфоидными Кл.и по мере разм-я пост-т в кр.Разруш-сь,освоб-т эндотоксины, явл-ся пр-й клин-х проявл-й – озноба, повыш-я темп-ы тела, гол-х и мыш-х болей . Инк-й пер-д 7-8 дн. Постинф-й иммун-т нестойкий и непродолж-ый.Леч-е проводят а\б(пенициллин,тетрац-нового ряда).Спец-я проф-а не разработана.Осн-е меры борьбы свод-ся к уничт-ю вшей, выяв-ю больных, санит-й обработке лиц, нах-ся в очаге.Микроб-ая диагн-ка:бактериоскоп.,серолог.методы.М.толстой или висячей капли в темном поле,высцш-е мазки не фиксир-т а окр-т по Ром-му-Гимзе,фуксином или метил.синим.Сыв-е АТ обнар-т в –рии иммобилизации борелий сыв-й больного либо в р-ии нарузки бореий тром-ми.Для диф-ии с эндем-м сыпным тифом прим-т зараж-е морских свинок кровью больного. 23.Микоплазмы: Микоплазмы - самые мелкие прокар-е ми\о, не им-е Кл-й ст. (это придает им сходство с L - формами бактерий) и спос-е к паразит-ю на мембранах эукар-их Кл. сем-во Mycoplasmatacea к классу Mollicutes.Осн-е хар-и молликут – отс-е ист-й Кл-й ст-и,мелкая кокковидная форма, паразитизм на мембр-ах эукар-х клеток, рост на плотных средах в виде мелких врастающих в агар колоний с приподнятым центром (“яичница - глазунья”), абсолютная рез-сть к пенициллинам и другим дейст-м на с-з Кл-ой ст-и а\б. Хар-я малым размером генома, низким сод-ем Г+Ц в ДНК. Им-т от 104 до 113 нуклеот-в в 5S рРНК. Предст-ли - паразиты и возбу-ли заболе-ий (микоплазмозов) широкого круга млекоп-их, птиц, чел-ка. Известно около 100 видов микоплазм, 12 видов встреч-ся у человека, из них наиб-ее знач-е им-т M.pneumoniae (вызывает в основном пневмонии и ОРЗ), M.hominis, M.genitalum, M.fermentans (при вызываемых ими инфекциях преобладают урогенитальные поражения). Морф-я:Наиб-е типичны мелкие кокковидные формы, выражен полиморфизм.Культур-ые и б\х св-ва:прихотливы к усл-м культив-ия В сос-ве сред необходимы холестерин и стерины, нативные сыворотки, витамины, соли. Основным источником энергии являются углеводы (особенно глюкоза) или аминокислоты (аргинин). Для усиления восстановительных свойств сред добавляют L- цистеин. Исп-ют разл-е вар-ты жид-х, полуж-х и плот-х пит-х сред, включ-х гидролизаты мяса, казеина, фермент-ый пептон, аутолизат пекарских дрожжей, сыворотку крови лошадей (больше всего холестерина), основной субстрат - глюкозу (для глюкозоферментирующих микоплазм), аргинин (для аргинин- утилизирующих микоплазм), мочевину (для уреаплазм), селективные антибиотики (пенициллин и его синтетические аналоги, амфотеррицин, нистатин или низорал, для уреаплазм - линкомицин), индикатор рН (бромтимоловый синий или феноловый красный). Оптимум температуры для культивирования от + 35 до +37С. Оптимум рН для уреаплазм и аргинин- утилизирующих микоплазм - 6,0 - 6,5. При росте уреаплазм, обладающих ферментом уреазой, происходит расщепление мочевины до аммиака с повышением рН (сдвиг в щелочную сторону) и с изменением цвета среды с бромтимоловым синим из желто - лимонного до зеленого без образования значительного осадка и без помутнения среды. Аналогично происходит изменение цвета сред при росте аргинин- утилизующих микоплазм на средах с добавлением аргинина.Оптимум рН для глюкозоверментирующих микоплазм (M.genitalium, M.fermentans, M.pneumoniae) - около 8,0. Эти микоплазмы ферментируют глюкозу до углекислого газа со сдвигом рН в кислую сторону и изменением цвета среды с зеленого на желто - лимонный.АГ стр-ра:Микоплазмы хар-ся выраженной гетерогенностью и изменчивостью антигенной структуры (антигенный полиморфизм). Известно 16 серотипов U.urealyticum, разделенных на серогруппы А и В. Выд-т биовары уреаплазм, отл-ся по вирул-ти и строению гена осн-го фер-та - уреазы. Факторы патоген-ти:1. Адгезины (обеспечивают взаимодействие с клетками хозяина).2. Эндотоксины (не тождественны ЛПС грамотрицательных бактерий).3. Гемолизины (особенно - у M.pneumoniae).4. Экзотоксины (плохо изучены и известны у немногих видов).5. Ферменты - фосфолипаза А, аминопептидазы, протеазы, нейраминидаза.Патогенез.Микоплазмы – мембр-е паразиты и СП-ны адсорб-ся на разл-х эукариот-х Кл-х.Этому спос-т подвиж-ть патог-х микоплазм, связанная с хемотаксисом и наличием микроворсинок. Микоплазмы способны тесно связываться с мембранами эукариотической клетки, вступать в межмембранное взаимодействие, обмениваться мембранными компонентами (в том числе использовать холестерин и стенолы для построения собственных клеток), оказывать разнообразное влияние на клетки. Коротко остановимся на основных эффектах действия микоплазм на различные клетки.1. Взаимодействие с фагоцитирующими клетками вызывает цитопатический или цитотоксический эффект и гибель фагоцитов или приводит к длительной персистенции микоплазм в фагосомах фагоцитов.2. Воздействие микоплазм на макрофаги приводит к нарушению их функций.3. Персистенция микоплазм на мембранах лимфоидных клеток оказывает существенное влияние на их функции, в том числе непосредственное деструктивное воздействие на иммунокомпетентные клетки (M.fermentans оказывает СПИДо - подобное действие на иммунную систему). 4. Микоплазмы действуют на эритропоэз, т.е. на гомеостаз организма.5. Обмен антигенными компонентами мембран с клетками хозяина обеспечивает антигенную мимикрию и развитие аутоиммунных реакций.6. Отсутствие клеточной стенки и частоя локализация микоплазм в инвагинатах мембран клеток объясняет их слабую иммуногенность и защиту от действия антител. Этому способствует и высокая антигенная изменчивость молликут.7. Микоплазмы способны воздействовать на хромосомный аппарат клеток хозяина (на соматические и половые клетки), вызывая хромосомные абберации.8. Ряд продуктов метаболизма оказывает токсическое воздействие на инфицированные клетки. Так, глюкозоферментирующие микоплазмы резко снижают рН и оказывают этим деструктивное действие на эпителиальные клетки.микоплазм не имеет медицинского значения.Лабор-я диаг-каНаиб-ее оптим-на культуральная (бактериологическая) диагностика с использ-ием жид-х и плотных питательных сред, опред-ем титра микоплазм (уреаплазм) в нативных образцах. Преимущества этого подхода: быстрота (для уреаплазм 1-2 суток, для микоплазм - до 3 суток), простота (цветной пробирочный тест), достоверность (селективность сред, учет биохимизма возбудителей), возможность определения конценрации (титр 10000 цветообразующих единиц - ЦОЭ имеет диагностическое значение) и чувствительности к различным препаратам на основе антибиотикограммы (повышает эффективность лечения), возможность достоверного контроля эффективности лечения (растут только жизнеспособные микоплазмы).Наиболее чувствительна ПЦР - диагностика. Однако: возможны ложно - положительные и ложно - отрицательные результаты, длительность выявления положительных результатов контроля излеченности, невозможность определения титра микоплазм (не разработаны количественные методики ) и чувствительности к препаратам.Люминесцентная диагностика дает неудовлетворительные результаты чаще, чем при выявлении хламидий. Это связано с малыми линейными размерами возбудителей, серологической гетерогенностью и антигенной изменчивостью, возможностью перекрестных реакций между различными видами, наличием диагностических препаратов только для выявления уреаплазм и M.hominis.Серологические методы многочисленны, однако коммерческие препараты отсутствуют, существуют проблемы в интерпретации результатов.Лечение должно быть основано на подборе чувствительных антибиотиков (чаще применяют макролиды, тетрациклины - доксициклин) и бактериологическом контроле эффективности лечения. Имеются устойчивые к тетрациклинам, макролидам и другим антибиотикам штаммы (связано с наличием плазмид устойчивости). У микоплазм имеются специфические вирусы, в т.ч. бактериофаги. В лечебных и диагностических целях они до настоящего времени не используются.Специфическая профилактика не разработана. Иммунитет нестойкий, серотипоспецифический. 24.Роль усл-но-патог-х ми\о в возн-ии ВБИ.Клин-я ми\б и ее задачи:ВБИ-это любые экзоген-е инф-ии приоюр-е больными в мед.уср-хи с влиян-м опред-х фактр-в:сниж-я рез-ти б.в рез-те леч-я,широкое нос-во возб-ля персон-м,макс-м Конт-в и зараж-я в плате в рез-те скучноти людей и т.д.К усл-но патог-м возб.ВБИ отн-ся:микроскоп-е грибы:кандида,плесневые,хламидии и микоплазмы,персит-е вирусы (герпес-в.,аденовир-сы) Осн-е задачи клин.ми\б61)выд-е и идентиф-я возб-ля,выяв-е имун-х сдвигов у б. 2)выяв-е эф-х химиотер-х ср-в на основе рез-в лаб.исслед-й. 25.Синегнойная палочка: Синегнойная палочка – осн-й возб-ль инф-ых пораж-ий чел-а, выз-ых псевдомонадами.Возб-ль распр-ен повс-но(вода, почва, растения, животные), встр-я в норме у чел-ка (наиб-е часто - в к-ке,на коже и слиз-х).Возб-ь сп-ен активно контаминировать мед-е обор-е, цирк-ть среди перс-ла и пациентов. Инфиц-ие синегн-й пал-й -причина 15-20% ВБИ,Морф-я –Гр- прямая или слегка изогнутая палочка, подвижна, в мазках расп-ся одиночно,парами или короткими цеп-ми.Синт-ет слизь (капсульное в-о), особ-о более вирулентные мукоидные штаммы.Культ-ые св-ва. Явл-ся аэробом и обл-ет соотв-им типу дых-я набором фер-ов(цитохромы, цитохромоксидаза, дегидразы).Растет с широком диапозоне рН и темп-р.Огран-я потреб-ть в пит-ых в-х спос-ет росту этого возб-я на простых (универсальных) пит-х ср-х-МПБ, МПА, Эндо, Левина и др. На жид-х ср-х обр-т серовато - серебристую пленку. На плотных средах часто набл-ся фен-н радужного лизиса.Уже к концу суток вследствие с-за пигмента пиоцианина появ-ся сине - зеленое окраш-е куль-ры .Др-е виды псевдомонад могут продуц-ть пигменты желтого цвета с зеленой флюоресценцией (P.fluorescens, P.putida), красный (пиорубин), коричнево - черный (пиомеланин).Б\х св-ва. низкая сахаролит-ая акт-ть (окисляет только глюкозу), высокая протеолит-я акт-ть и образ-е на кровяном агаре зоны бета- гемолиза. Синт-т триметиламин, прид-й культурам прият-й запах жасмина. Продуц-т выр-тку бактериоцинов - пиоцинов. Пигмент пиоцианин обл-ет св-и пиоцина, дейст-го на Гр+ и Гр- бак-и.АГ и патоген-е св-ва:. Осн-еАГ -группоспецифический соматический О- антиген и типоспецифический жгутиковый Н- антиген. О- антигенный комплекс - агрегат ЛПС с белками и липидами Кл-ой стенки, обл-т св-ми эндотоксина, явл-ся одним из главных факторов патогенности. В его состав входит белковый родовой О- антиген. ЛПС эндотоксина обр-ет типо- или группоспецифический термостабильный О- антиген. Часть штаммов (мукоидные), имеющих капсулоподобную обол-ку, обл-т капсульным К-АГ. Обл-т большим набором факторов патогенности - эндотоксином (ЛПС, аналогичный др.Гр- бактериям), рядом экзотоксинов - цитотоксином, экзоэнзимом S, гемолизинами, экзотоксином А (наиболее важный, напоминает дифтерийный экзотоксин), ферментами (коллагеназой, нейраминидазой, протеазами).Патог-ез пораж-й. –внекл-ый паразит, размн-ие кот- связано со способн-ю против-ть дейс-ю защи-х факторов орг-а. Возб-ль выз-т тяж-е гнойно – септиче-е пр-ы - Это связано с нал-м разно-ых факторов патоген-и и R- плазмид, Лабора-ая диагн-а. наз-ие P.aeruginisa пол-ла за голубовато - зеленое окраш-е отдел-го ран и перевяз-го мат-ла. Осн-м методом диагн-и явл-ся бактериол-ий. Важным явл-ся обнруж-ие пигмента пиоцианина. В жидкой среде его выяв-ют добав-ем небольшого объема хлороформа – набл-ся сине - зеленое окраш-е. При микроскопии обнар-ют Гр- палочки, пробы на цитохромоксидазу и каталазу положительны, культуры типируют в РА с О- и Н- антисыворотками. Видовая идентификация в пределах рода ведется с учетом биохимических, культуральных и антигенных свойств. ^ Специф-й профил-и нет. При пищевых токсикоинф-х и дисбактериозах к-ка, вызв-х синегнойной палочкой, эффек-н компл-й интести - бактериофаг, в сос-в кот-го вх-т псевдомонадный фаг. Из антибак.преп-ов чаще прим-т аминогликозиды, цефалоспорины и хинолоны. 26.Протей.Клебсиелы.Серации:Род Proteus.-отн-ся к сем-ву энтероб-ий.. Предст-ели рода спос-ы менять внеш-ие прояв-я роста на плотных пит-х средах, а также отл-ся наибольшим плеоморфизмом (изменчивостью морфологии) по сравнению с другими энтеробактериями. Наиб-е часто роль в патологии имеют P.vulgaris и P.mirabilis.Культ-ые св-ва. Протеи растут на простых ср-х в широком диапозоне темп-р. Оптим-ая рН - 7,2-7,4, темп-а - от +35 до 37. Колонии протеев в О- форме окр-е, полупрозр-е и выпук-е, Н- формы дают сплошной рост. Рост протеев сопров-ся гнилостным запахом. Хаар-н феномер роения, Н- формы дают на МПА хар-й полз-й рост в виде голуб-то – дымч-й нежной вуали.При посеве по методу Шушкевича в конденсационную влагу свежескошенного МПА культура постепенно поднимается в виде вуали вверх по поверхности агара. На МПБ отмечают диф-ое помут-е среды с густым белым осадком на дне. На среде Плоскирева форм-ют блестящие прозр-е жел-то- розовые колонии .В кач-е сред обогащения исп-ют среды Мюллера, Кауфмана, 5% желчный бульон.АГ св-ва. им-ся О- , Н- и К- АГ. Соматические О-антигены термостабильны, жгутиковые Н- антигены термолабильны. Для серологической идентификации опред-т стр-у О- и Н- АГ. Факторы патоген-сти. Отн-т ЛПС Кл-ой ст-и, спос-ть к “роению”, фимбрии, протеазы и уреазу, гемолизины и гемагглютинины.Лаб-ая диаг-ка. Осн-й метод – бактериол-й. Исп-т диф-но – диагн-е среды (Плоскирева), среды обогащения и МПА по методу Шушкевича. Чистую культуру идентиф-ют по б\х св-м, серолог-ая дифферен-ия пров-ся в РА живой и гретой культ-ы с поливалентными и моновалентными О- и Н- сыв-ми. Самый простой метод опред-ия - по фен-ну роения. Важный диффер-ый признак протея- СП-ть дезаминировать фенилаланин до фенилпировиноградной к-ы, в присутствии FeCl2 это приводит к окр-ю среды в зеленый цвет. Дифферен-й пр-к, отл-ий протеи от Providencia и Morganella – покрас-е лизино – желез-го агара, обус-е дезаминированием лизина и образ-м кетокислот.Леч-ие. При дисбактериозах к-а, связанных с протеями (колиты), можно исп-ть протее-й фаг и препараты, в сос-в кот-х он входит (интести- фаг, коли- протейный бактериофаг). Протеи облад-т природной уст-ю ко многим а\б. При гнойно - септических заболе-х, связанных с Proteus, прим-т а\б выбора - ампициллин, цефалоспорины третьего поколения, фторхинолоны. ^ .отн-ся к сем-ву энтеробактерий.Особ-ть представ-й рода – СП-ть образ-ть кап-лу. Осн-й вид - K.pneumoniae . Опред-ю роль в патологии имеют также K.oxytoca, K.planticola, K.terrigena. Выз-ют оппортунистические пораж-я – госпит-е пневмонии, инф-и мочевыводящих путей, диареи у новорожденных.Прямые неподв-е палочки различных размеров. Факульт-е анаэробы. Оксидаза –отриц., каталаза- положительны.Культ-ые св-ва. Хорошо растут на простых пит-х средах. Опт-м рН - 7,2-7,4, темп-ры - от +35 до 37.. На плот-х средах чаще обр-т мутные слиз-е колонии, на жид-их средах – равном-е помут-ие, иногда со слизистой пленкой на повер-ти.АГ стр-ра. Выд-т капсульные (К) и соматические (О)АГ. Для серотипирования в РА исп-т К- АГ(безкап-ые варианты в РА не выявляют) с антиК- сыворотками. Некоторые К- антигены родственны К- антигенам стрептококков, эшерихий и сальмонелл.Факторы патогенности. Отн-т полисахаридную капсулу (К- антиген), эндотоксин, фимбрии, сидерофорную систему (связывает ионы двухвалентного железа и снижает их содержание в тканях), термолабильные и термостабильные экзотоксины.Клин-е прояв-я. Для K.pneumoniae (subsp. pneumoniae) хар-ны госпит-е бронхиты и бронхопневмонии, долевые пневмонии, инфекции мочевыводящих путей, поражения мозговых оболочек, суставов, позвоночника, глаз, а также бактеремии и септикопиемии. Лаб-ная диагностика. Осн-й метод – бактериол-ий. Чаще исп-т диффер-но – диагност-ю среду К-2 (с мочевиной, рафинозой, бромтимоловым синим), на которой через сутки вырастают крупные блестящие слизистые колонии. Колонии окраш-ые (желтые или зеленые). Идентиф-я культур - по биохимическим св-ам и в РА с К- сыв-ми (определение серогруппы).Леч-ие. Особ-ть клебсиелл - их множественная лекар-я уст-ть и разв-е поражений на фоне снижения резист-и орг-а. А\бприм-т при генерализованных и вялотекущих хрон-их формах клебсиеллезов как правило в сочетании с препаратами, стимулирующими иммунитет. Препараты выбора - аминогликозиды и бета- лактамовые антибиотики широкого спектра действия. Серации—серация марсерденс,прямые подвиж-е пал-ки,разм-м 0,9*2мкм,отдел-е штаммы им-т кап-лу,особ-ть бактерии образ-т розово-крас.водонепрн-й пигмент-продигиозин.Эпид-я:повсеместноУ взр-х людей б.часто колон-т мочевыв.и воздух.пути,у детей-ЖКТ.Часто прон-т через постоян-е катетеры,интубац-е уст-ва,у нарк-м-в-прив-т к септич-м артритам,эндокард-м. Культ-е св-ва:хорошо раст-т при темп.15-30*,образ-т серовато-белые прозр-е колонии,S-кол-ии,глад-е мелкозер-е.При комп-й темп.кол-ии стан-я крас.На скошенном агаре образ-т бел.налетне фер-т лактозу,но на ср.Плоскирева образ-т б\ц кол-ии.Факторы патог-ти-фимбрии,гемолизины,сидерофорная с-ма(поглощ-е железа из кр.и тк.),протеазы,термолаб.цитотаксин.АГ:О-АГ(более 15сероваров и Н-АГ(20сероваров)Микробиол-я диаг-ка:матер-л для иссслед-я:кр.,гнойное отдел-е,мокрота,моча.Посев на ср.Эндо,Плоскирев,Левина.Для выд-я сераций,прим.спец.среды(толуидиновый синий)После выд-я чистой к.пров-т б\х идентиф-ю до вида. 27.Акинетобактерии,моракселлы,кампилобактер-возб.ВБИ: Акинетобактерии-мелие непод-е пал-ки.В мазках расп-ся парами,небол-ми скоп-ми.Жгутиков не им-т,благодяря нал.полярных фимбрий хар-ны дяргающейся подвижн-тью.Хорошо растут на обчных ср.,образ-я кол-и,напом-е ко-ии энтеробак-й.Широко расп-ны в природе,выд-т из почвы,воды.пастер-го молока,из врзд-хаАкинетобак-ии часто выд-т при пораж-х кожн.покр-в,мочевыв.тракта.А.-второй по частоте выд-я из клин-х образцов нефермен-е Гр- палочки.Патогенез пораж-я-прямо связан с наруш-ми им-та,т.к.ми\о лишен к-л факторв патоген-ти,искл-я ЛПС Кл.ст.Кап-ла ингиб-т эффек-ть фагоцит-х р-й и облег-т адгезию к эпит-ю.Микробиол.диаг-ка-в мазках из нативных матер-ла-домин-т коковид-е и кокобацил-е ,а в мазках из к.-палочковид.формы.Ми\о растут на прос.ср.образ-я блест-е голубов-е колонии. Моракселлы-бакт-ии рда Моракселла-обитатели слиз.обол.чел-ка и жив.,короткие пал-ки,окруж-е кап-й,прихот=-вы к усл-м культив-я.Оптим.темп.37*,рН-7,0-?5.На плот.ср.образ-т 2 типа кол-ииПри микробиолдиаг-ке учит-т приз-ки:отсут-е подвиж-ти,отсут-е спос-ти окислять глю,отсут-е пигментобр-я,оксидаза и каталаза+,высокая чувст-ть к пенициллину. ^ -род вкл-т 13 видов спиральных бактерий, им-х один и более завитков.- подвижные, облад-ие полярными жгутиками (или жгутиком) и винтообразным движ-м, ми\о. Они не ферм-т и не ок-т У, капрофилы и микроаэрофилы , т.е. требуют повышенной конц-и СО2 и пониж-ой - О2. Забол-я, ими выз-е - кампилобактериозы - острые киш-е забол-я, протек-ие с пораж-емЖКТ. Выд-т группу C.jejuni или термофильных кампилобактерий. Они отличаются высоким темп-ым оптимумом роста (+420С). C.fetus (вызывает артриты, менингиты, васкулиты, аборты)^ нужны спец-е газовые смеси для созд-я микроаэрофильных усл-й, рН - 7,0-7,2, мезофильные условия (+420С - для термофилов, +370С - для остальных). Используют спец-ые пит-е среды (мясные, печеночные, кровяные) с доб-м селект-х а\б.. На плотных средах обра-т два типа колоний - “расползающиеся” с неровными краями или блестящие выпуклые с ровными краями, колонии мелкие.Б\х св-ва. Инертны к углеводам, редуцируют нитраты, оксидаза - положительны, энергию получают за счет аминокислот и трикарбоновых кислот. Дифференциация видов по биохимическим свойствам основана на гидролизе гиппурата (C.jejuni и C.coli), чувствительности к налидиксовой кислоте (C.jejuni и C.lari), образовании сероводорода и др. АГ стр-ра. Кампилобактеры имеют О- , Н- и К- антигены. Основное значение для серотипирования имеют термостабильные О- антигены.Эпидем-е особ-ти. распространены у различных видов млекопитающих и птиц. Основной путь передачи - пищевой. Хаар-на преим-но летняя сезонность.Осн-е патоген-ие факторы. Хар-ся высокой адгезивной и инвазивной акт-ью, быстрой колонизацией верхних отделов тонкого к-ка. Важнейшими факторами адгезии являются жгутики и специфические поверхностные адгезины. У этих бактерий имеется эндотоксин, термолабильный энтеротоксин.Клинические проявления - энтероколит.Лаб-я диагн-ка. Микроскоп-ий метод - окраска 1% водным р-м основного фуксина 10- 20 секунд - выявляют S- образные короткие цепочки, “крылья чайки”. Основной метод - бактериологический - посев испражнений. Культуры идентифицируют по совокупности признаков. 28.Клас-я грибов.Хар-ка.Роль в патологии чел-ка.Лаб-я диаг-ка.Леч-е: Грибы(фунди,мицетес)-эукариоты,им-е четко огран-е ядро,отдел-е от цит.яд.мемб.Они гетеротрофы,растут в аэробных усл-хИз многих тыс.гр.лишь 100 патогены для чел-ка.л.ст.сод-т полисах.,преим-го хитин а также глюканы и мананы.Грибы сост-т из тонких длин-х нитей-грифы,сплет-ся в грибницу или мицелий.В высш.грибов грифы им-т перегородки.Гр.разм-ся спорами пол-м и беспол-м СП-м а также вегет-м путем.Клас-я гр.на 6 классов:хитридиомицелы(водные гр.вед-й сапрофит-й образ жихни),оомицелы(паразиты высш.раст-й),зигомицеты(расп-ны в почве и возд.,спос-ны выз-ть забол-я), аскомицеты(соверш-е гр.)базидиомицеты(соверш-е гр.),дейтеромицеты(несовер-е г.-отн-ся род кандида-порааж-е кожу,слиз-е,внутр-е орг-ныКультив-е гр.:произ-ся в аэроб-х усл-х при темп.22-37* на пит.ср.сод-х азотистые и углеросод-е в-в )на ср.Сабуро,Эндо,ЖСА.Нажид.ср.многие гр.растут в виде войлокообр-го осадка на дне и пристен-н.Гр.выр-т разл-е цвет-е пигменты:бел.Жел.кор..ЗЕЛ.,КРАС.И Т.Д.Нек.виды гр.спос-ны выр-ть экзоток-ны:афлатоксины(аспергиллы)липотоксины (споротрихиела).Забол-е выз-е грибами-наз.микозы,болш-во возб-зй микозов расп-ны в природе.Патогенные гр.в виде спор и мицелия внедр-ся в тк.и разм-ся.Инкуб.пер-д-о неск.дн.до неск.мес.Наиб-е часто подвер-ся повр-ю кожа волосы ногти,легки(кандидоз,риноспортиоз),лимоидно-макрофаг-я с-ма(гистоплазмом)Им-т-прояв-ся в виде неспец.защиты,реализ-й Кл-ми и гумор-ми факторамиК факторам патог-ти отн-ся:протео- и липолит-е фер-ты,разр-е ткан-е и Кл-е эл-ты,экзо- и э Ндоток-ны и СП-ть прям возд-ть на Кл.пораж-го орг-ма.Лабюдиаг-ка:для микроскоп-г исслед-я пораж-й волог,чешуя помещ-т на пред-е ст. и кап-т 10%р-р едкого калия,пок-т стеклом и изуч-тВыд-е чистой к.приз-т путем посева на ср.Сабуро,или ср.ЖСА,серодиаг-ка. Леч-е:наз-т а\б(эубиотики)сульфаниламин-е реп-ты.Прф-канеспец—мед-е набл-е хза сан.гигиен.сост-ем парик-х,бань,бассейнов. 29.Знач-е открытия Ивановского.Этапы разв-я виус-и.Роль отеч.уч-х в разв-ии в-ии:Первооткр-ль вирусов и основ-к вирусологии счит-ся Д.И.Ивановский(1892.)- откр-л возб.табачной мазаикиСв-ва обьекта:заразность,фильтрумость,СП-ть к разм-ю.Бейрник в 1898г.пост-л осн-е эксп-ты И.и ввел тер-м вирус(что означ-т яд)Вначале был открыт вирус, вызывающий заболевание табака, известное под названием «табачная мозаика», затем вирус ящура [Леффлер Ф., Фрош П., 1897], желтой лихорадки [Рид У., 1901] и многие другие вирусы. Однако увидеть вирусные частицы стало возможным только после изобретения электронного микроскопа, так как в световые микроскопы вирусы не видны. К настоящему времени царство вирусов (vira) насчитывает до 1000 болезнетворных видов вирусов. Только за последнее время открыт ряд новых вирусов, в том числе вирус, вызывающий СПИД. Во 2 пол.20в.отеч.уч-е добились крупных успехов в изуч-е природы патоген-х в.Морозов Туревич разр-ли методы окр-ки телец вкл-й разл-х вирусов.Исслед-е Павловского Зильбера Чумакова формир-е уч-е о пиродно-очаг-х и вир-х инф-ях. 30.Возб-ли ОРВИ:Ост-е респ-е вир-е инф-и самые расп-е инф-е б.чел-каШирокому расп-ю спос-т:возд-кап.путь заражения,большое разн-е возб.ОРВИ, отсут-е стойкой невоспр-ти к повтор-м заражениям.ОРВИ м.вкл-ть более 200видов:в.гриппа,парагриппа,риновирусы, коронавирусф, реовирусы,аденовирусы. 31.Возб-ль гриппа:Грипп-нейпр-я инф-я совр-ти с неизен-й симптом-й,вызв-я Непрер-но измен-ся в.РНК-сод.в. отн-ся к сем-ву Ортомиксвир-в:выд-т 3 типа:1)А:А0,А1 и т.д.-выз-т эпидемии и пандемии 2)В-вспышки через 3-4ч. 3)С-выз-т спорадические и круп-е забол-я (чаще у детей)Морф-я:сфер.ф.,диам-м 80-120нм,сост-т из чердцевины и наруж.ЛП обол.Сердцевина сод-т однотит-ю линйнуют минус-нитев-ю РНКНа пов-ти суперкап-й обол.им-ся шипы гликопротеин-й природы,один явл-ся-гемаглютинином,др.-нейроменидазой. Культ-е-исп-ся Курин-е эмб-ны. ,в алантоизной пол-ти кур.эмб-на,в кр.хоря. АГ стр-ра:S-АГ-,Vi-АГ:Н-гемолизин-липоглюкопротеид токс-н,высокоспец.,иммунолог-н:Н0,Н1,Н2,Н3. N-нейроменидаза-б.,высокоспец.,,выр-ся внутри нейтр.АТ,очень высоко измен-в Р и N у в.типаА.Антигенный дрейф-точечные мутации ,измен-е мол-лы поверх.б.В ходе АГ дрейфа проис-т незнач-е измен-е АГ.АГ шифт-обусл-т новое появл-е АГ вируса. Вирул-ть:1)РНК-репрод-е в. 2)N-фер-т инвазии 3)гемагглютинин 4)депрессия иммуногенеза.К в.типа А чувс-ны6чел-к,звери,лошади,птицы,возм-но перекр-е зараж-е.Эпидем-я: 1)ист-к в.-чел-к,кот.перед-т их при разг-ре(до 2 нед.) 2 звено-возд-кап.тип(до 4 м)-заразная зона 3 зв.-чувс-ть высок-я но не абсол-я. Завис-т от:1)неал-я рец-в к Н и NАГ,нал-е спец-х IgА и G. Патогенез: ворота инф-ии-кл.реснич-го эпит-я-вызывает гибель клеток. Вирусы и продукты распада клеток попадают в кровь, вызывают интоксикацию и повышение температуры тела. Вирусемия сопровождается множественными поражениями эндотелия капилляров и кровоизлияниями в бронхах, трахее, легких, миокарде, различных паренхиматозных органах. Вирус обладает выраженным действием на иммунную систему - вызывает транзиторный иммунодефицит с элементами аутоиммунопатологии. Частое следствие этого - присоединение вторичных вирусных и бактериальных осложнений. Им-т: после перен-го забол-я форм-ся типоспец.им-т,кот.облег-ся как спец-ми так и неспец.кл-ми и гумор-ми факторами.Пас-й ест-й им-т сохр-сяу детей до 8-11мес.жизни.Лаб.диаг-ка:1)Вирусоскопия телец вкл.-й:имунофлюорес-я телец вкл-й цилиарного эпит-я 2)вирусолог-я диаг-ка:Р-я гемагл-и,р-яторм-я гемагл-и,р-я Кл-й гемадсорбции 3)сердиаг-ка: нараст-е титра АТинтер-л 8-14сут)еси идет нараст-е-есть грипп. Птичий грипп-АГ стр-ра:Н5N1.Неспец.проф-ка:красное видо,виногр-д.чеснок,лук,хрен,спорт.Проф-ка спец-я: 3-х слойные повязки,изол-я б.,ремантодин,арбидол,дибазол,интерферон лейкоцит-й. №^ |
Ваша оценка этого документа будет первой.
Ваша оценка:
Похожие:
База данных защищена авторским правом ©MedZnate 2000-2016
allo, dekanat, ansya, kenam
обратиться к администрации | правообладателям | пользователям
allo, dekanat, ansya, kenam
обратиться к администрации | правообладателям | пользователям