|
Скачать 37.84 Kb.
|
КЛЕТОЧНЫЕ ТЕХНОЛОГИИ В СОВРЕМЕННОЙ МЕДИЦИНЕ В настоящее время, одним из наиболее перспективных направлений в области клеточных технологий является применение стволовых клеток. Значительные успехи клинического применения стволовых клеток достигнуты в клеточной трансплантологии, лечении онкологических заболеваний, ожогов, ран и ряде других восстановительных тканевых процессов. Трансплантация аллогенных гемопоэтических стволовых клеток (ГСК) является важным компонентом терапии при многих гематологических заболеваниях, врожденных нарушениях иммунной системы, наследственных анемиях и злокачественных новообразованиях. Однако, поиск подходящего донора костного мозга – дорогой и длительный путь и иногда пациент не доживает до трансплантации. Создание банков пуповинной крови (ПК) в значительной степени облегчает поиск материала для трансплантации, что в сочетании с удобным способом получения такого материала и легкой его доступностью является предпосылкой для увеличения количества трансплантаций ГСК ПК. Использование современных технических средств позволяет сократить потери клеток при выделении концентрата клеток, предотвратить микробную контаминацию на всех этапах работы, осуществлять замораживание и хранение клеток в полностью автоматическом режиме с ежеминутным мониторингом состояния образца. Существует несколько способов лейкоконцентрации ПК, основанных на седиментации эритроцитов с использованием различных методов фракционирования крови и выделения концентрата ядросодержащих клеток, однако в деятельности банка ПК требуется использование технологии, максимально сохраняющей количество и состав стволовых клеток ПК. Для этого идеально подходит компактная автоматизированная система для автоматической обработки пуповинной и периферической крови, а также костного мозга для выделения стволовых клеток и дальнейшей их подготовки к криоконсервации. Данная система позволяет проводить обработку крови в рамках 8 протоколов, а ее принцип действия основан на сепарации центрифугированием, позволяющем разделять компоненты крови в соответствии с их плотностью и размером. Обработка крови или ее компонентов происходит в закрытой стерильной системе. После обработки, компоненты крови собираются в стандартные мешки и готовы для дальнейшего использования. Для безопасного и удобного культивирования стволовых клеток во всем мире используются одноразовые, стерильные, закрытые системы, состоящие из мешка для клеточной культуры, бессывороточной среды для культивирования и набора магистралей. Среди особенностей таких систем можно выделить биологическую, химическую и иммунологическую инертность, хорошую проницаемость для CO2 и О2, прозрачность (мешки производятся из тефлона), возможность использования в широком диапазоне температур (от -196оС до +200оС). Закрытая система позволяет исключить возможность заражения, т.к. инкубация, микроскопия, центрифугирование, заморозка и автоклавирование проводится в одном мешке. Использование бессывороточных сред способствует улучшению воспроизводимости результатов опыта вследствие большей стабильности состава среды; снижению риска заражения культуры вирусами, грибами, микоплазмой; облегчению очистки продуктов клеточного метаболизма; снижению влияния дополнительных белков на результаты биологических исследований; отсутствию цитотоксичности сыворотки. Помимо этого для культивирования стволовых клеток активно используются цитокины, в частности для культивирования гемопоэтических стволовых клеток существует целый ряд цитокинов, стимулирующих их рост и развитие. Самая современная методика хранения стволовых клеток предполагает использование системы для хранения в жидком азоте 3626 образцов. Данная система полностью автоматизирована, имеет два встроенных программных замораживателя и характеризуется низким расходом жидкого азота на один образец во время хранения и программного замораживания. Кроме того, одна такая система заменяет 6-7 дьюаров, имеет источник бесперебойного питания, что позволяет разместить или извлечь образец стволовых клеток в случае отключения электричества, а так же имеет систему управления образцом. Основной причиной осложнений после трансплантации является реакция трансплантата против хозяина (РТПХ). Традиционная терапия связана с многочисленными побочными эффектами и часто не эффективна. В настоящее время для лечения реакции трансплантата против хозяина широко применяется метод экстракорпорального фотофереза. Этот метод основан на использовании псораленов и ультрафиолетового излучения диапазона А (ПУФА-терапия). Принцип метода заключается в заборе цельной крови у пациента, ее последующем центрифугировании на компоненты, основываясь на их различной удельной плотности: плазма, красные и белые кровяные клетки (лейкоцитарный слой). Красные клетки крови и плазма сразу возвращаются пациенту. Лейкоцитарный слой обрабатывается фотосенсибилизирующим препаратом, который затем активируется непродолжительным действием УФА излучения и сразу возвращается в кровоток пациента. Все стадии метода осуществляются в полностью автоматизированной закрытой системе, что позволяет исключить риск заражения и ошибки в работе персонала. Набор датчиков и система звукового оповещения обеспечивают исключение риска воздушной эмболии, контроль давления в системе, контроль скорости забора и реинфузии крови, контроль поступления антикоагулянта, а также достаточную световую энергии для облучения клеток. Кроме того, экстракорпоральный фотоферез успешно применяется для лечения целого ряда онкологических заболеваний, таких как рефрактерная кожная Т-клеточная лимфома, а также используется как иммунотерапия в комплексном лечении ряда кожных, аутоиммунных и пролиферативных заболеваний, таких как вульгарная пузырчатка, псориатический артрит, псориаз, дерматиты, системная склеродермия, болезнь Рейтера и др. |