Растворимые дифференцировочные антигены и молекулы гистосовместимости у вич-инфицированных, имеющих маркеры сопутствующих инфекций 14. 00. 36 аллергология и иммунология
|
|
Скачать 262.95 Kb.
|
На правах рукописиХудякова Наталья ЕвгеньевнаРАСТВОРИМЫЕ ДИФФЕРЕНЦИРОВОЧНЫЕ АНТИГЕНЫ И МОЛЕКУЛЫ ГИСТОСОВМЕСТИМОСТИ У ВИЧ-ИНФИЦИРОВАННЫХ, ИМЕЮЩИХ МАРКЕРЫ СОПУТСТВУЮЩИХ ИНФЕКЦИЙ 14.00.36 – аллергология и иммунология Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук Москва, 2004 Работа выполнена в Нижегородском НИИ эпидемиологии и микробиологии им. акад. И.Н. Блохиной МЗ РФ Научный руководитель: Доктор биологических наук, профессор В.В. Новиков ^ Доктор медицинских наук, Кравченко Алексей Викторович, Доктор биологических наук, Селиванов Николай Александрович ^ Институт вирусологии им. Д.И. Ивановского РАМН Защита состоится «12» февраля 2004 года в «___» часов на заседании Диссертационного совета К 208.046.01 при Московском НИИ эпидемиологии и микробиологии им. Г.Н. Габричевского по адресу: 125212, Москва, ул. Адмирала Макарова, д. 10. С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Московского НИИ эпидемиологии и микробиологии им. Г.Н. Габричевского. Автореферат разослан «22» декабря 2003 года ^ Диссертационного Совета кандидат медицинских наук Л.И. Новикова ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫАктуальность проблемыВ России, как и в большинстве стран мира, ВИЧ-инфекция остается одной из главных проблем здравоохранения. По экспертным оценкам ВОЗ в мире в настоящее время насчитывается более 36 млн. ВИЧ-инфицированных. По данным Российского Федерального научно-методического центра по профилактике и борьбе со СПИД на октябрь 2003 г. в России было более 250 тысяч ВИЧ-инфицированных [Онищенко, 2003]. В настоящее время основным путем заражения ВИЧ в России продолжает оставаться инфицирование при внутривенном употреблении психоактивных веществ. Вследствие этого значительная часть ВИЧ-инфицированных лиц одновременно несет маркеры вирусных гепатитов С, В, G и других инфекций. [Абдурахимова и др., 2002; Ганкина и др., 2003; Муляр и др., 2003]. Патогенез смешанной инфекции, вызываемой сочетанием этих вирусов, изучен мало, что определяет актуальность детального исследования молекулярных механизмов иммунного ответа. Важную роль в регуляции иммунного ответа играют растворимые формы мембранных антигенов клеток иммунной системы, образующиеся за счет шеддинга или альтернативного сплайсинга матричной РНК. Получены данные о том, что они могут выполнять функции ограничителей иммунных реакций или же выступать в роли активаторов иммунологических процессов. Кроме того, сывороточный уровень отдельных антигенов является мониторинговым показателем течения патологического процесса при ряде заболеваний, в том числе и при ВИЧ-инфекции [Bedini et al., 1998; Gaddi et al., 2000; Jiang et al., 1997]. Информация о наличии и функциональной роли растворимых форм получена лишь для немногих из более 240 идентифицированных в настоящее время дифференцировочных антигенов. Таким образом, исследование количественного содержания растворимых форм (s-форм) мембранных белков клеток иммунной системы имеет как практическое, так и теоретическое значение. ^ Изучить характер изменения уровня растворимых форм CD25, СD38, CD50, CD54, CD95 антигенов и растворимых антигенов HLA класса I и II в сыворотке крови ВИЧ-инфицированных лиц, имеющих маркеры сопутствующих вирусных инфекций. Задачи
Выявлено, что уровень sHLA-DR(*) увеличивается у ВИЧ-инфицированных лиц, положительных по антителам к вирусу гепатита С, независимо от наличия маркеров других тестируемых инфекций, в то время как концентрация антигенов sHLA-I статистически достоверно возрастает у ВИЧ-инфицированных лиц, имеющих маркеры вирусного гепатита С и цитомегаловирусной инфекции, а также у лиц, несущих, кроме того, HBs антиген. Статистически достоверно повышенный уровень sCD50 у ВИЧ-инфицированных лиц ассоциирован с одновременным инфицированием организма вирусами гепатитов В и С. Более высокое содержание sCD50 антигена зарегистрировано при дополнительном наличии антител класса IgM против цитомегаловируса. Обнаружено, что сывороточный уровень sCD54 антигена у ВИЧ-инфицированных лиц статистически достоверно повышается при наличии антител против вируса гепатита С (HСV), а также при дополнительном присутствии антител класса IgM против цитомегаловируса, но не маркеров вирусных гепатитов В и G. Установлено, что преимущественное влияние на сывороточное содержание суммарного sCD38 антигена оказывает наличие инфицирования ВИЧ. Обнаружено статистически достоверное повышение концентрации димерной фракции данного антигена при моноинфекции ВИЧ. Присутствие антител к вирусу гепатита С, HBs антигена или антител к Е2 протеину вируса гепатита G приводит к дополнительному увеличению уровня димерного sCD38 антигена. Показано повышение концентрации sCD25 антигена в сыворотке крови ВИЧ-инфицированных лиц при наличии антител к вирусу гепатита С и одновременном инфицировании вирусом гепатита В или цитомегаловирусом, а также при одновременном обнаружении антител против Е2-протеина HGV. Характер изменения уровня олигомерного sCD95 антигена при ВИЧ-инфекции отличается от характера изменения сывороточного содержания суммарного sCD95 антигена. Уровень суммарного sCD95 антигена при моноинфицировании ВИЧ имеет тенденцию к повышению, тогда как сывороточное содержание олигомерной формы sCD95 антигена статистически достоверно понижается. Установлено, что при инфицировании организма вирусом гепатита G повышается сывороточный уровень растворимой формы HLA-DR антигенов. Cодержание sHLA-DR нормализуется при освобождении организма от вируса. Показано увеличение сывороточного содержания sHLA-DR антигенов при цитомегаловирусной инфекции. Полученные данные расширяют знания о роли растворимых форм мембранных антигенов в реализации иммунного ответа при вирусных инфекциях. ^ С использованием моноклональных и поликлональных антител разработан иммуноферментный метод определения суммарной фракции растворимых HLA-DR антигенов в биологических жидкостях. Метод применим для изучения их роли в молекулярных механизмах иммунных реакций, а также для определения дифференциально-диагностической значимости уровня растворимых форм данных антигенов при различных заболеваниях. Примененные в работе методические подходы к определению сывороточного уровня растворимых форм мембранных антигенов клеток иммунной системы потенциально могут быть использованы в качестве методов оценки прогноза течения ВИЧ-инфекции, осложненной вирусными гепатитами. Положения, выносимые на защиту
Апробация работыРезультаты работы представлены на II(IV) Конгрессе специалистов клинической лабораторной диагностики (Москва, 2000); VII Нижегородской сессии молодых ученых (Н.Новгород, 2002); VI Всероссийской научной конференции с международным участием «Дни иммунологии в Санкт-Петербурге» (С.-Петербург, 2002); Научной конференции и VIII съезде Итало-Российского общества по инфекционным болезням «Проблема инфекции в клинической медицине» (С.-Петербург, 2002); Научно-практической международной конференции, посвященной памяти академика РАМН и РАМТН И.Н. Блохиной «Фундаментальные и прикладные проблемы медицинской биотехнологии» (Москва, 2002); I научно-практической конференции Приволжского федерального округа «Актуальные вопросы эпидемиологии, клиники, диагностики, лечения и профилактики ВИЧ-инфекции/СПИДа в Приволжском федеральном округе» (Ижевск, 2003); Научно-практической конференции «Актуальные проблемы ВИЧ-инфекции» (Астрахань, 2003); Межрегиональной научной конференции, посвященной 100-летию со дня рождения академика АМН СССР С.П. Карпова (Томск, 2003); III Всероссийской научной конференции с международным участием по вопросам ВИЧ/СПИД и вирусных гепатитов (Суздаль, 2003); IV Межрегиональной научно-практической конференции с международным участием «Актуальные аспекты инфекционной патологии и деятельности госсанэпидслужбы» (Омск, 2003). Апробация диссертации состоялась на расширенной межлабораторной конференции Нижегородского НИИ эпидемиологии и микробиологии им. акад. И.Н. Блохиной 16 октября 2003 года. Публикации По теме диссертации опубликовано 11 печатных работ. ^ Диссертационная работа в объеме 140 листов состоит из введения, обзора литературы, описания материалов и методов исследований, собственных результатов и их обсуждения, заключения, выводов и списка литературы. Диссертация иллюстрирована 15 рисунками и 10 таблицами. Библиографический указатель включает 234 источника литературы (48 отечественных и 186 иностранных авторов). ^ Материалы и методы исследования В качестве объектов исследования при отработке и апробации метода определения относительной концентрации растворимой формы HLA-DR антигенов применяли образцы сыворотки крови 300 здоровых доноров, предоставленные Нижегородской областной станцией переливания крови. Были исследованы также образцы сыворотки крови 20 больных псориазом, проходивших лечение в Нижегородском научно-исследовательском кожно-венерологическом институте (Ю.С. Савкина, Г.Ю. Курников). Для определения возрастных различий в уровне растворимых антигенов HLA-DR исследовали образцы сыворотки, полученные от здоровых детей 3-7 лет (n=42), взрослых 18-20 лет (n=108) и взрослых лиц 40-55 лет (n=38). Образцы сыворотки были предоставлены кафедрой эпидемиологии Военно-медицинского института пограничных войск Нижегородской государственной медицинской академии. Также для исследований были использованы 318 образцов сыворотки крови больных гепатитами В и С, любезно предоставленные нам сотрудниками кафедры инфекционных болезней НГМА (И.А. Отмахова, О.В. Корочкина), 24 образца сыворотки больных CMV-инфекцией (Городская инфекционная больница № 2 г. Нижнего Новгорода). Образцы сыворотки крови лиц, инфицированных вирусом гепатита G (75 человек), были любезно предоставлены сотрудниками Института вирусологии им. Д.И. Ивановского, г. Москва (Д.В. Новиков). Диагноз вирусного гепатита G ставился на основании определения в сыворотке крови РНК вируса гепатита G c помощью полимеразной цепной реакции. Материалом для дальнейших исследований послужили образцы сыворотки крови лиц, инфицированных вирусом иммунодефицита человека, любезно предоставленные нам Приволжским окружным центром по борьбе и профилактике СПИД МЗ РФ (Носов Н.Н., Иванова Н.И.). Было исследовано 652 образца сыворотки крови ВИЧ-инфицированных лиц, поступивших в центр в период с 1999 по 2001 год. Определение уровня растворимых форм мембранных антигенов проводили с помощью иммуноферментных методов с использованием поликлональных антител, специфичных к мембранным антигенам мононуклеарных клеток крови человека и моноклональных антител (МКА) серии ИКО [Новиков, 2001]. Данные методы были разработаны в лаборатории молекулярной иммунологии бактериальных и вирусных инфекций Нижегородского НИИЭМ им. акад. И.Н. Блохиной группой авторов (Птицына Ю.С., Вязьмина Е.С., Егорова Н.И., Худякова Н.Е., Мартынова Т.Г.) во главе с проф. Новиковым В.В. Определение сывороточного уровня растворимых CD50, CD54, CD25 и суммарной фракции CD95 и CD38 антигенов проводили с применением МКА ИКО-60, ИКО-218, ИКО-105, ИКО-160 и ИКО-20, соответственно. Для определения уровня олигомерного sCD95 антигена использовали МКА ИКО-160 в качестве первых и вторых антител. Содержание димерного sCD38 определяли аналогичным образом, применяя МКА ИКО-20. Для определения сывороточного уровня растворимых молекул главного комплекса гистосовместимости I класса использовали МКА ИКО-53 и ИКО-216. Определение уровня растворимых HLA-DR антигенов проводили с использованием поликлональных антител, специфичных к мембранным антигенам мононуклеарных клеток крови человека и моноклональных антител ИКО-1. Моноклональные антитела были получены из Онкологического научного центра РАМН, г. Москва (Барышников А.Ю.). Статистический анализ проводили с использованием критериев Крускала-Уоллиса, Манна-Уитни, Стьюдента и критерия ранговой корреляции Спирмена. Результаты и их обсуждениеС помощью разработанного иммуноферментного метода было определено содержание растворимых молекул HLA-DR у больных хроническим гепатитом С. Обнаружено повышение уровня sHLA-DR антигенов в 2,3 раза в сравнении с нормой (Рис. 1). У больных смешанным гепатитом В+С сывороточный уровень данного антигена был увеличен почти в 3 раза. Обнаружено увеличение уровня sHLA-DR более чем в три раза у больных псориазом. Полученные результаты подтверждают имеющиеся в литературе сообщения японских и немецких исследователей о повышении сывороточного уровня молекул sHLA-DR п ри данных заболеваниях [Hausmann et al., 1994; Hosoi et al., 2000]. Р  ис. 1. Сывороточный уровень sHLA-DR у больных различными заболеваниями. 1, 4 – здоровые доноры, 2 – больные вирусным гепатитом С, 3 – больные смешанным гепатитом В+С, 5 – больные псориазом. - статистически достоверные различия со здоровыми донорами (р<0,05). Известно, что гепатит С, нередко сопровождающий ВИЧ-инфекцию, в свою очередь, часто ассоциирован с вирусным гепатитом G. В связи с этим следующим этапом нашего исследования было определение содержания растворимых HLA-DR антигенов у лиц, имеющих иммунологические и молекулярно-генетические маркеры вирусного гепатита G. Сравнение проводили с контрольной группой здоровых доноров, у которых не было выявлено ни РНК HGV, ни антител к E2-гликопротеину вируса гепатита G. У РНК HGV(+), анти-Е2(-) лиц выявлено статистически достоверное повышение сывороточного уровня sHLA-DR молекул в сравнении с группой здоровых доноров. У лиц, имеющих в крови как РНК HGV, так и анти-Е2, уровень sHLA-DR молекул сохранялся в пределах нормы. При наличии только антител к Е2-протеину вируса гепатита G содержание sHLA-DR также находилось в пределах нормы. Представленные данные свидетельствуют о том, что сывороточный уровень растворимых HLA-DR антигенов повышается при инфицировании вирусом гепатита G, и предполагают их возможное участие в реализации молекулярных механизмов иммунного ответа н а HGV. Р  ис. 2. Содержание sHLA-DR в сыворотке крови лиц, имеющих маркеры вирусного гепатита G. 1 – РНК HGV(-), анти-Е2(-) HGV, 2 – РНК HGV(+) анти-Е2(-) HGV, 3 – РНК HGV(+), анти-Е2(+) HGV, 4 – РНК HGV(-), анти-Е2(+) HGV. - статистически достоверные различия с группой здоровых доноров (р<0,05). Разработанный метод был использован для исследования сывороточного содержания растворимых форм мембранных антигенов клеток иммунной системы при ВИЧ-инфекции. Наряду с растворимыми формами молекул гистосовместимости I и II классов исследовали сывороточный уровень антигенов адгезии CD50, CD54, антигенов CD38, CD25, CD95 антигена, опосредующего апоптоз. Уровень данных антигенов был определен при моноинфицировании ВИЧ, а также у ВИЧ-инфицированных лиц, имеющих маркеры вирусных гепатитов С, В, G и цитомегаловирусной инфекции. Ц ентральная роль в антигенной презентации и формировании иммунного синапса принадлежит молекулам гистосовместимости I и II класса. Растворимые формы этих белков активно участвуют в регуляции иммунного ответа. В сыворотке крови ВИЧ-инфицированных лиц без маркеров сопутствующих инфекций, у анти-HCV(+) ВИЧ-инфицированных и лиц, несущих дополнительно HBs антиген, наблюдалась тенденция к повышению уровня sHLA-I (Рис. 3). У ВИЧ-инфицированных лиц с маркерами вирусного гепатита С и цитомегаловирусной инфекции, а также у лиц, дополнительно имеющих в крови HBs антиген, было выявлено статистически достоверное повышение сывороточного с одержания sHLA-I в 1,7 и в 1,6 раза, соответственно. Р  ис. 3. Сывороточный уровень sHLA-I у ВИЧ-инфицированных лиц. 1 – здоровые доноры; 2 – ВИЧ-инфицированные без маркеров других инфекций; 3 – ВИЧ-инфицированные, несущие антитела к HCV; 4 – ВИЧ-инфицированные, имеющие антитела к HCV и HВs антиген; 5 – ВИЧ-инфицированные, положительные по анти-HCV и анти-CMV IgM; 6 – ВИЧ-инфицированные, несущие анти-HCV, HВs антиген и анти-CMV IgM. - статистически достоверные различия со здоровыми донорами (р<0,05). В сравнении с sHLA-I изменение сывороточного содержания sHLA-DR антигенов носило более выраженный характер (Табл. 1). Концентрация sHLA-DR в образцах сыворотки ВИЧ-инфицированных лиц, не содержащих маркеров каких-либо тестируемых инфекций, была в 1,8 раза выше, чем у здоровых доноров. В группе анти-HCV(+) ВИЧ-инфицированных сывороточный уровень sHLA-DR был почти в 40 раз выше, чем у здоровых доноров и в 20 раз выше, чем у лиц с ВИЧ-моноинфекцией. В обоих случаях различия были статистически достоверны. Эти данные свидетельствуют о том, что при смешанном инфицировании ВИЧ и вирусом гепатита С увеличение уровня циркулирующих антигенов HLA-DR преимущественно связано с инфицированием вирусом гепатита С. В образцах сыворотки ВИЧ-инфицированных лиц с маркерами гепатитов В и С было обнаружено статистически достоверное повышение уровня sHLA-DR в сравнении с донорами и с моноинфицированными ВИЧ, но не в сравнении с анти-HCV-положительными ВИЧ-инфицированными лицами. При наличии маркеров CMV-инфекции у лиц, инфицированных ВИЧ и HCV, уровень sHLA-DR был повышен в 52 раза в сравнении со здоровыми донорами. Также статистически достоверные различия наблюдались между этой группой и моноинфицированными ВИЧ. Однако относительно лиц, коинфицированных ВИЧ и вирусом гепатита С, повышение не было статистически достоверным. Таким образом, значительное влияние на сывороточное содержание sHLA-DR антигенов у ВИЧ-инфицированных лиц оказывает инфицирование вирусами гепатитов В и С, а также цитомегаловирусом, что приводит к увеличению уровня sHLA-DR антигенов в десятки раз. Кроме того, сывороточный уровень данных антигенов статистически достоверно повышается при одновременном присутствии у ВИЧ-инфицированных антител к вирусам гепатита С и G. Таблица 1 Содержание растворимых молекул HLA-DR в образцах сыворотки крови ВИЧ-инфицированных лиц
В процессе инициации иммунного ответа важная роль отводится молекулам адгезии. Функциональное значение растворимых CD50 (ICAM-3) и CD54 ( ICAM-1) антигенов состоит в ограничении процессов адгезии. Увеличение концентрации sCD50 в биологических жидкостях может приводить к блокаде взаимодействия мембранной формы CD50 с молекулами CD209 и LFA-1 [Bleijs et al., 2001]. Результатом этого может быть уменьшение уровня активации Т-клеток. При моноинфицировании ВИЧ выявлена тенденция к повышению среднего сывороточного уровня sCD50 антигена (Рис. 4). Подобная направленность отмечена в образцах, положительных по антителам против вируса гепатита С и а нтителам класса IgM против цитомегаловируса. Р  ис. 4. Содержание растворимого CD50 антигена в сыворотке крови ВИЧ-инфицированных лиц. 1 – здоровые доноры; 2 – ВИЧ-инфицированные лица без маркеров других инфекций; 3 – ВИЧ-инфицированные лица, несущие антитела к HCV; 4 – ВИЧ-инфицированные лица, имеющие антитела к HCV и HВs антиген; 5 – ВИЧ-инфицированные лица, положительные по анти-HCV и анти-CMV IgM; 6 – ВИЧ-инфицированные лица, несущие анти-HCV, HВs антиген и анти-CMV IgM. - статистически достоверные различия со здоровыми донорами (р<0,05). У ВИЧ-инфицированных лиц, имеющих в крови HBs антиген и антитела против вируса гепатита С, сывороточное содержание sCD50 антигена статистически достоверно повышалось в сравнении с донорами и ВИЧ-моноинфицированными. У ВИЧ-инфицированных, в сыворотке крови которых одновременно обнаруживались антитела к вирусу гепатита С, HBs антиген и анти-CMV IgM, уровень растворимого CD50 антигена был повышен в 5,1 раза в сравнении с нормой и в 3,4 раза в сравнении с ВИЧ-моноинфицированными. В обоих случаях наблюдались статистически достоверные различия (р<0,05). Можно сделать вывод о том, что одновременное присутствие четырех вирусов в наибольшей степени влияет на повышение сывороточного уровня растворимого антигена ICAM-3 (CD50), что, вероятно, вызвано кумулятивным эффектом усиления иммунного ответа на инфицирование сразу несколькими вирусами. Изменения в уровне sCD54 антигена у ВИЧ-инфицированных лиц без маркеров других инфекций нами не обнаружены. Однако были обнаружены статистически достоверные различия между HСV-положительными и HСV-отрицательными ВИЧ-инфицированными лицами (Табл. 2). Это предполагает, что увеличение уровня sCD54 антигена в сыворотке крови HСV(+) ВИЧ-инфицированных лиц также происходит под влиянием вируса гепатита C. Таблица 2 Сывороточный уровень растворимого CD54 антигена у ВИЧ-инфицированных лиц
При наличии маркеров гепатитов В и С у ВИЧ-инфицированных лиц уровень sCD54 антигена был увеличен, но в меньшей степени, чем у анти-HCV(+) ВИЧ-инфицированных. Можно предположить, что повышение уровня sCD54 не связано с инфицированием вирусом гепатита B. Более того, присутствие HBs-антигена приводит к понижению сывороточного уровня sCD54 в сравнении с анти-HCV(+) ВИЧ-инфицированными. У ВИЧ-инфицированных лиц с анти-HCV и анти-Е2 HGV выявлена тенденция к увеличению содержания sCD54 антигена. Лица, инфицированные ВИЧ, HCV и CMV, также имели повышенный уровень CD54 антигена. Его содержание в крови было статистически достоверно увеличено в сравнении с нормой. Однако достоверных различий с группой ВИЧ-инфицированных лиц, несущих только антитела к вирусу гепатита С, т.е. дополнительного влияния цитомегаловируса не обнаружено. Важная роль в механизмах иммунного ответа принадлежит CD95 (Fas) антигену. Через него реализуется один из путей передачи апоптотического сигнала в клетку. Растворимая форма CD95 антигена, напротив, служит ингибитором апоптоза [Cascino et al., 1995]. У ВИЧ-инфицированных лиц наблюдалась тенденция к увеличению сывороточного содержания суммарного sCD95 антигена, не имеющая, однако, статистически достоверного характера. Известно, что гепатоциты обладают способностью к продукции растворимого CD95 антигена, увеличивающейся при патологии печени, связанной с вирусными гепатитами, что можно рассматривать как защитную реакцию организма на апоптотическое уничтожение гепатоцитов [Krams et al., 1998]. Показанное в наших исследованиях отсутствие достоверного повышения уровня sCD95 антигена в сыворотке крови ВИЧ-инфицированных, имеющих маркеры гепатитов В или С, предполагает нарушение продукции растворимой формы данного антигена гепатоцитами, ведущее к большему поражению печени. По-видимому, это связано с взаимовлиянием вирусов гепатитов В и С и вируса иммунодефицита человека, а также возможной модуляцией механизмов образования растворимой формы Fas-антигена. Известно, что растворимый CD95 антиген также может существовать в олигомерной форме [Walczak et al., 2000]. У ВИЧ-инфицированных лиц, имеющих маркеры сопутствующих инфекций, выявлена тенденция к увеличению сывороточного уровня олигомерной формы sCD95 антигена (Табл. 3). В группе лиц, моноинфицированных ВИЧ, сывороточный уровень олигомерного sCD95 был статистически достоверно снижен в 1,5 раза в сравнении с группой доноров. Таким образом, при ВИЧ-инфекции изменяется показатель соотношения сывороточного уровня суммарной и олигомерной фракции растворимого CD95 антигена. Можно предположить, что при ВИЧ-инфекции значительный дисбаланс, способствующий повышению чувствительности лимфоцитов к апоптозу, наблюдается не только в системе «CD95 и его лиганд», но и в соотношении мономерных и агрегированных растворимых форм CD95 антигена. Таблица 3Уровень олигомерной формы sCD95 антигена у ВИЧ-инфицированных
П  * * ри исследовании сывороточного уровня суммарного CD38 антигена установлено, что у ВИЧ-инфицированных лиц без маркеров других тестированных инфекций уровень данного антигена был статистически достоверно увеличен в сравнении с нормой в 1,7 раза (Рис. 5). Рис. 5. Сывороточный уровень суммарной фракции sCD38 антигена в крови ВИЧ-инфицированных лиц. 1 - здоровые доноры; 2 - ВИЧ-инфицированные лица без маркеров других инфекций; 3 - ВИЧ-инфицированные лица, несущие антитела к HCV, 4 - ВИЧ-инфицированные лица, имеющие HBs антиген. - статистически достоверные различия со здоровыми донорами (р<0,05). Повышенный уровень sCD38 антигена у ВИЧ-инфицированных лиц может быть следствием активации иммунной системы, ведущей к анергии, и свидетельствовать о вероятном участии растворимого CD38 антигена в патогенетических механизмах развития ВИЧ-инфекции. Подъем содержания sCD38 антигена может ограничивать иммунный ответ на ВИЧ-инфекцию. При наличии в крови анти-HCV сывороточное содержание sCD38 антигена было повышено, так же, как у моноинфицированных ВИЧ. Известно, что растворимый CD38 антиген присутствует в сыворотке также в виде димера [Mallone et al., 1998]. Исследование сывороточного уровня димерного sCD38 в сыворотке крови ВИЧ-моноинфицированных лиц показало, что содержание данного антигена было повышено в 4 раза в сравнении с нормой (Табл. 4). Таблица 4 Уровень растворимой формы димерного CD38 антигена в сыворотке крови ВИЧ-инфицированных лиц
Дополнительное присутствие анти-HCV в сыворотке приводило к еще большему повышению уровня sCD38 димера. Средняя концентрация sCD38 димера у ВИЧ-инфицированных лиц с маркерами гепатитов В и С была увеличена более чем в 100 раз (p<0,05). У анти-HCV(+) ВИЧ-инфицированных лиц, имеющих антитела против Е2 протеина HGV, сывороточное содержание sCD38 антигена было в 21,9 раза выше чем в норме (p<0,05). Однако уровень sCD38 димера в этой группе ВИЧ-инфицированных лиц был в 3,1 раза ниже, чем сывороточное содержание CD38 димера у ВИЧ-инфицированных только с анти-HCV. Статистически достоверных различий между этими группами не обнаружено. У анти-HCV(+) и анти-CMV IgM(+) ВИЧ-инфицированных лиц уровень sCD38 димера был в 40 раз выше нормы, но на 38% ниже, чем содержание sCD38 димера у ВИЧ-инфицированных лиц, имеющих в крови только анти-HCV. Существенное изменение уровня димерного sCD38 антигена по сравнению с уровнем общей фракции sCD38 антигена предполагает особую роль CD38 димера в молекулярных механизмах иммунного ответа при вирусных инфекциях. C  D25 антиген представляет собой -цепь рецептора интерлейкина-2. Сывороточный уровень растворимого CD25 антигена является маркером активации клеточного иммунитета [Sipsas et al., 2003]. В результате исследования сывороточного содержания sCD25 антигена у ВИЧ-инфицированных лиц, в сыворотке которых отсутствуют маркеры других инфекций, показано, что уровень данного антигена был повышен более чем в 7 раз в сравнении со здоровыми донорами (Рис. 6). Р ис. 6. Содержание sCD25 антигена в сыворотке крови ВИЧ-инфицированных лиц. 1 – здоровые доноры; 2 – ВИЧ-инфицированные без маркеров других инфекций; 3 – ВИЧ-инфицированные, несущие антитела к HCV; 4 – ВИЧ-инфицированные, имеющие антитела к HCV и HВs антиген; 5 – ВИЧ-инфицированные, положительные по анти-HCV и анти-CMV IgM; 6 – ВИЧ-инфицированные, несущие анти-HCV и анти-Е2 HGV. – статистически достоверные различия со здоровыми донорами (р<0,05). Увеличение среднего уровня sCD25 было зарегистрировано также у ВИЧ-инфицированных, в сыворотке которых были обнаружены антитела к белкам вируса гепатита С. Однако статистически достоверных различий не обнаружено вследствие широкого разброса данных, поскольку содержание sCD25 антигена является высоколабильным показателем, зависящим от многих факторов и отражающим состояние активации иммунной системы [Monsalve-De Castillo et al., 2002]. У ВИЧ-инфицированных, в сыворотке крови которых кроме антител к белкам вируса гепатита С были найдены или HBs антиген, или антитела к белку Е2 вируса гепатита G, или антитела класса IgM против цитомегаловируса, обнаружено статистически достоверное повышение среднего сывороточного уровня растворимого CD25 антигена. Это говорит о выраженном увеличении продукции растворимой формы данного антигена при наличии у ВИЧ-инфицированных дополнительно еще двух вирусных инфекций. Суммируя вышеизложенное, можно заключить, что при моноинфицировании ВИЧ наблюдается статистически достоверное повышение уровня суммарного и димерного sCD38 антигенов, причем изменение sCD38 димера носит более выраженный характер. Содержание растворимых молекул HLA I и II класса, sCD50, sCD25, суммарного sCD95 антигенов имеет выраженную тенденцию к увеличению. Присутствие антител к вирусу гепатита С у ВИЧ-инфицированных лиц приводит к более существенному росту сывороточного уровня исследованных антигенов. Инфицирование организма наряду с ВИЧ и HCV, вирусом гепатита В и цитомегаловирусом, либо присутствие антител против вируса гепатита G в различных сочетаниях сопровождается еще более выраженным подъемом сывороточного уровня растворимых форм исследованных антигенов, однако основным фактором, влияющим на содержание исследованных растворимых молекул, является инфицирование вирусом гепатита С. ВЫВОДЫ
^
(*) sHLA-DR, sHLA-I, sCD25, sCD38, sCD50, sCD54, sCD95 - растворимые формы молекул главного комплекса гистосовместимости I и II классов, CD25, CD38, CD50, CD54, CD95 антигенов |
Ваша оценка этого документа будет первой.
Ваша оценка:
Похожие:
База данных защищена авторским правом ©MedZnate 2000-2016
allo, dekanat, ansya, kenam
обратиться к администрации | правообладателям | пользователям
allo, dekanat, ansya, kenam
обратиться к администрации | правообладателям | пользователям