Перемышленко алексей сергеевич морфологическая характеристика молочной железы плодов, новорожденных и детей до одного года по секционным материалам рязанской области
|
|
Скачать 301.97 Kb.
|
|
На правах рукописи ПЕРЕМЫШЛЕНКО АЛЕКСЕЙ СЕРГЕЕВИЧ МОРФОЛОГИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА МОЛОЧНОЙ ЖЕЛЕЗЫ ПЛОДОВ, НОВОРОЖДЕННЫХ И ДЕТЕЙ ДО ОДНОГО ГОДА ПО СЕКЦИОННЫМ МАТЕРИАЛАМ РЯЗАНСКОЙ ОБЛАСТИ 14.03.02 – патологическая анатомия АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук САНКТ-ПЕТЕРБУРГ – 2011 Работа выполнена в Рязанском государственном медицинском университете имени И.П. Павлова Научный руководитель: доктор медицинских наук, профессор Чумаченко Петр Андреевич ^ доктор медицинских наук, профессор Хмельницкая Наталья Михайловна доктор медицинских наук, профессор Насыров Руслан Абдулаевич Ведущая организация: Санкт-Петербургский государственный медицинский университет имени И.П. Павлова ^ « 12 » декабря 2011г. в _____ часов на заседании совета Д 215.002.02 по защите докторских и кандидатских диссертаций при ФГВОУ ВПО «Военно-медицинская академия имени С.М. Кирова» МО РФ по адресу: 194044, г. Санкт-Петербург, ул. Академика Лебедева, д. 6 С диссертацией можно ознакомиться в фундаментальной библиотеке ФГВОУ ВПО «Военно-медицинская академия имени С.М. Кирова» МО РФ 194044, г. Санкт-Петербург, ул. Академика Лебедева, д. 6 Автореферат разослан «_____» _____________ 2011г. Ученый секретарь доктор медицинских наук, профессор ^ общая характеристика работы Актуальность проблемы. Число опухолевых заболеваний молочных желез, как доброкачественных, так и злокачественных, неуклонно растет в нашей стране и в большинстве стран мира (Гуркин Ю.А., 2000; Чумаченко П.А., 2010). Наиболее часто встречающимися заболеваниями являются дисгормональные гиперплазии, которые регистрируются у каждой второй женщины репродуктивного возраста (Макаренко Н.П., 1999; Савицкая С.Э., 2008). В последнее время все чаще в молочной железе диагностируются патологические процессы не только у женщин, но и у детей, как у девочек, так и у мальчиков (Коган И.Ю., 2006, 2007; Летягин В.П., 2010). У 80–90% новорожденных девочек и ряда мальчиков регистрируется увеличение размера молочных желез (Ахмедова Ш.А., 2005; Адамян Л.В., 2010). Доля маститов среди всех видов хирургической инфекции в детском возрасте в период новорожденности составляет 15,9%, у детей 1-3 лет - 1% и 2,1% в возрасте 3-14 лет (Адамян Л.В., 2010). Преждевременное телархе встречается у 1% девочек в возрасте до 3 лет и в 2–3 раза превышает частоту истинных форм преждевременного полового созревания (Габуния М.С., 2001; Высоцкая И.В., 2006; Адамян Л.В., 2010). Частота встречаемости гинекомастии у мальчиков по данным разных авторов составляет 40-90% (Дедов И.И., 2002; Адамян Л.В., 2010). В свою очередь дисгормональные процессы в сочетании с доброкачественными поражениями создают почву для возникновения и развития злокачественных опухолей (Летягин В.П., 2006; Левенец С.О., 2007). По данным Всемирной Организации Здравоохранения (ВОЗ) в мире каждый год регистрируется 1,1 млн. новых случаев заболевания раком молочной железы. Ежегодно от рака молочной железы погибают более 411 тысяч женщин (Попова Т.И., 2008). В последние 10 лет смертность больных раком молочной железы выросла почти в 1,8 раза (Dupont W.D., 2005; Kelly P.A., 2002; Писарева Н.Ф., 2009). В современной литературе появились данные об обнаружении рака молочной железы у девочек в возрасте до 7 лет. Несмотря на активную разработку методов профилактики, диагностики и лечения, в структуре онкологической заболеваемости в России, рак молочной железы прочно удерживает первое место среди всех злокачественных новообразований (Автандилов Г.Г., 2002; Манушарова Р.А., 2006; Попова Т.Н., 2008). В современной литературе недостаточно отражена структурная организация молочной железы на различных этапах развития с точки зрения корреляции тканевых компонентов, особенно в период новорожденности и раннего постанатального онтогенеза (Доросевич А.Е., 2007). Поэтому более детальное морфологическое изучение молочной железы на разных этапах ее развития позволит лучше понять этиологию и патогенез предраковых заболеваний, назначить правильное обследование и лечение и увеличить возможность предупреждения злокачественных новообразований или заподозрить их в самой ранней стадии. Учитывая выше сказанное, можно утверждать, что изучение изменений в молочной железе с помощью морфологических методов в антенатальном и раннем постнатальном онтогенезе является весьма актуальным. Целью настоящего исследования явилось изучение морфологического строения ткани молочной железы у мертворожденных, новорожденных и детей до 1 года и сравнительная оценка ее морфометрических, электронно-микроскопических и иммуногистологических особенностей. ^
^ Впервые проведена комплексная оценка паренхиматозного и стромального компонентов молочной железы у мертворожденных, новорожденных и детей до 1 года с помощью гистологического, морфометрического, электронно-микроскопического и иммуногистохимического методов исследования на секционном материале Рязанской области, что позволило более достоверно установить этапы ее морфогенеза. Выявлены особенности строения молочной железы у детей в разные возрастные периоды при наличии инфекционной патологии, характеризующейся формированием новых сосудов, пролиферацией миоэпителиальных клеток, фибробластов стромы, и асфиксии, характеризующейся десквамацией эпителия, усилением белковосинтетической активности протокового эпителия, разрастанием стромы, расстройствами кровообращения. ^ В ходе исследования разработан метод комплексной оценки морфологического строения молочных желез при различных патологических состояниях у детей в антенатальном и постнатальном периодах. Результаты работы свидетельствуют о несомненной роли патогенных факторов (инфекции и гипоксии) в развитии структурных изменений молочной железы и степени ее функциональной активности. Полученные результаты указывают на необходимость качественной и количественной оценки отдельных клеточных популяций и тканевых структур в ткани молочной железы, с целью выделения групп риска развития патологии данного органа. ^
^ Результаты исследований и основные положения работы были опубликованы в 11 печатных работах и доложены на Межвузовских научных конференциях РГМУ им. И.П. Павлова и на Всероссийской конференции с международным участием, посвященной памяти член-корр. РАМН, з.д.н. РФ, профессора Олега Константиновича Хмельницкого «100-летие Российского общества патологоанатомов» г. Санкт-Петербург. Полученные результаты используются при преподавании на кафедрах нормальной анатомии, гистологии и патологической анатомии Рязанского ГМУ им. И.П. Павлова и при диагностической работе ПАО Рязанской областной клинической больницы. ^ опубликовано 11 научных работ, из них в журналах, рецензируемых ВАК – 3. Личный вклад автора. Автор лично выполнил сбор секционного материала молочных желез, данных протоколов вскрытий, историй болезни в Областном судебно-медицинском бюро г. Рязани; осуществил макроскопическое описание молочных желез; гистологическое описание микропрепаратов; морфометрическое исследование, окрашенных препаратов; провел статистическую обработку материла, осуществил построение графиков, диаграмм и таблиц; фотографирование микропрепаратов, подбор литературы по теме диссертации, оформление текста и составление списка использованной литературы. ^ Работа оформлена в одном томе на 115 страницах машинописи в традиционном стиле и состоит из введения, четырех глав (обзор литературы, материалы и методы исследования, результаты исследования, заключение), выводов, практических рекомендаций и списка литературы, содержащего 170 отечественных и 81 иностранных источников. Работа иллюстрирована 16 таблицами и 51 рисунками, из которых 22 микрофотографии, 23 электронограммы, 6 диаграмм. содержание работы ^ Характер исследуемой патологии, цель и задачи выполненой работы обусловили выбор материала и методики оценки морфологического состояния молочной железы. Материалом для исследования послужили 153 образца молочных желез плодов, новорожденных и детей до 1 года на секционном материале Рязанской области. Информация о материале была получена из протоколов вскрытий, историй болезни. Было выделено 3 исследуемых группы: мертворожденных (плоды от 36 до 40 недели) – 40, новорожденных (дети, родившиеся живыми и умершие до 28 дня) – 59, грудных детей от 29 дней до 1 года – 54. Всего: девочек – 72, мальчиков – 81. Морфологическому исследованию предшествовал анализ имеющихся клинических данных. Оценивался возраст, длительность жизни ребенка, основное заболевание, приведшее к смерти. По основному заболеванию материал был сгруппирован следующим образом: I Мертворожденные:
II Новорожденные:
III Дети, умершие в возрасте от 29 дней до 1 года:
Вскрытия проводились, как правило, в течение первых 12-24 часов с момента гибели плода, смерти ребенка. Молочные железы извлекались целиком, фиксировались в 10% растворе забуференного нейтрального формалина, обезвоживались в батарее возрастающей концентрации этилового спирта, заливались в парафин. Гистологические срезы толщиной 3-5 мкм окрашивались гематоксилином и эозином, выборочно – гематоксилином и пикрофуксином по Ван-Гизону, суданом III на липиды, на эластику по Вейгерту. Для электронно-микроскопического исследования небольшие кусочки (0,3 х 0,3 см) паренхимы молочной железы префиксировали в 2,5 % растворе глутарового альдегида, приготовленного на фосфатном буфере рН 7,3 - 7,4 при 4о по С в течение 4 часов. Затем разделяли на произвольное число кусочков размерами не более 1,0 х 1,0 х 1,0 мм и дофиксировали свежей порцией 2,5% глютарового альгегида на фосфатном буфере с рН 7,3-7,4 четыре часа. После дофиксации материал промывали в фосфатном буфере рН 7,4 три смены по 30 минут. Постфиксацию проводили в 1% растворе ОsО4 на 0,1 М фосфатном буфере (рН 7,4) один час (D.R. Anderson, 1965). После постфиксации осмиевой кислотой проводили тщательную отмывку кусочков в фосфатном буфере. Дегидратацию материала проводили в батарее с возрастающей концентрации этанола и ацетона. Для улучшения визуализации исследуемого материала, при исследовании в электронном микроскопе, применялась модифицированная методика: во время дегиратации в 96% этанол прибавляли 1% уранилацетата (Царева О.А., Мнихович М.В., Рахманкина М.А., Панкратова Е.С., Камаева С.А., 2004). В последующем образцы заключали в заливочную среду, состоящую из смеси аралдита, аралдита М и эпона- 812 с использованием в качестве катализатора DMP - 30. Полимеризацию проводили при температуре 60о С в течение 24 часов. Полутонкие срезы, толщиной 1 мкм изготавливали с помощью ультрамикротома УМТП – 4 и окрашивали толлуидиновым синим. После просмотра срезов в микроскопе «МИКМЕД – 2 вар. 2» при увеличении в 200 раз и обнаружении протокового аппарата молочной железы, срезы были сориентированы на блоки и соответствующим образом заточены. Ультратонкие срезы изготавливали с помощью ультрамикротома УМТП – 6, контрастировали уранилацетатом и цитратом свинца по E. S. Reynolds (1963) и просматривали в электронном микроскопе ЭМ-125К. Электроннограммы анализировали при помощи стереомикроскопа МБС – 9 при конечном увеличении х 45 000. Для иммуногистохимического исследования были использованы молочные железы, взятые выборочно после обзорного исследования. Материал фиксировали в 10% забуференном формалине, заливали в парафин, готовили серийные срезы толщиной 4 мкм на предметных стеклах Menzel-Glaser® Polysine™, которые затем депарафинировали по стандартной схеме. Исследование проводили непрямым иммунопероксидазным методом. Использовали следующие первичные антитела (Abcam): для оценки пролиферативного пула - Ki-67 (кроличьи, разведение 1:100); для определения эндотелиоцитов - CD-34 (крысиные, клон SC-1506, разведение 1:50); для определения фактора роста сосудов - VEGF (кроличьи, разведение 1:100). С целью демаскирования антигенов стекла со срезами нагревали в течение 30 минут на водяной бане в 0,01 М цитратном буфере (рН 6,0). Активность эндогенной пероксидазы блокировали 3% раствором перекиси водорода, неспецифическую адсорбцию первичных антител – 30-минутной инкубацией с нормальной телячьей сывороткой. Инкубацию с первичными антителами проводили при комнатной температуре в течение 40 минут. После каждый процедуры срезы промывали в Трис-HCl буфере – 0,05 М (рН 7,6). Для визуализации реакции использовали систему детекции UltraVision TL-015-HD (LabVision), срезы докрашивали гематоксилином Карацци. Контроль иммуноокрашивания осуществляли исключением вторичных антител. Морфологическое строение паренхимы и стромы молочной железы оценивали по 22 морфометрическим параметрам:
Формула вычисления: СВ=Кс/ПГС, где Кс - количество сосудов в срезе молочной железы.
КС=1.09*число клеток стромы/число квадратов стромы %КС=число отдельных клеток/общее число клеток*100%
19. ПЭП в тыс. мкм2 – площадь эпителия протока в среднем. Формула вычисления: ПЭП= 2*ВЭ*√3,14*РП 20. ППП в тыс. мкм2 – площадь просвета одного протока в среднем. Формула вычисления: ППП=РП-ПЭП 21. ПЭ в тыс. мкм2 – площадь эпителия в максимальном срезе молочной железы. Формула вычисления: ПЭ=ПЭП*К 22. ППЖ в тыс. мкм2 – площадь просвета желез. Формула вычисления: ППЖ= ПЖ-ПЭ Далее, полученные данные подвергались статистической обработке. Использовались следующие показателя статистики: М-среднее арифметическое, м-ошибка средней, критерий Стьюдента, таблицы Фишера (непараметрический анализ процентных показателей для групп с числом наблюдений менее 30). Математическая обработка и анализ фактического материала производились с помощью персонального компьютера и программы «Medstat-4» (Дубров А.М., 2000) ^ Морфологическая характеристика молочной железы мертворожденных. Всего в данной серии исследованы 40 молочных желез мертворожденных плодов с 36 по 40 неделю гестации, из которых 13 контрольных (с пороками развития) и 27 молочных желез, полученных от трупов младенцев погибших при явлениях внутриутробной инфекции (ВУИ) и асфиксии. Девочек в исследование было включено: 6 случаев при ВУИ, 5 при асфиксии, 8 молочных желез - группа контроля. Мальчиков было исследовано – 9 при ВУИ, 7 - при асфиксии, 5 молочных желез – контроль. Молочная железа мертворожденных с пороками развития не имела половых различий: протоки располагались группами по 3-6, в некоторых единичных наблюдениях по 10 и более протоков, реже одиночно; эпителий в основном был уплощенным, иногда – кубическим, нередко имелось довольно выраженное уплощение эпителия; ядра эпителиоцитов яркие, базофильные, овальные, реже округлые, были смещены немного на периферию клетки; цитоплазма бледно-сиреневая, порой вакуолизированная; базальная мембрана тонкая, нежная. Вокруг протоков имелся тонкий каркас ретикулярных волокон. Строма молочной железы была представлена жировой тканью, бедной клеточными элементами. Сосуды были несколько расширены с умеренным полнокровием. Молочная железа мертворожденных при асфиксии вне зависимости от пола имела крупные размеры, которые в основном зависели от резкого расширения железистых полостей, содержащих десквамированный эпителий, иногда (в 12% случаев) белковые массы. Десквамированный эпителий содержал в цитоплазме жировые включения, в некоторых случаях вакуолизацию цитоплазмы. Сохранившийся эпителий, выстилающий просветы протоков, был уплощенным, с гомогенной розовой цитоплазмой. Строма вокруг протоков была отечна, с набухшими волокнами, полнокровными сосудами и единичными свободнолежащими клетками. Морфологическая структура молочной железы мертворожденных при ВУИ характеризовалась тем, что ткань молочной железы у них оказалась развитой довольно слабо, без секреции эпителия или со слабыми проявлениями ее. Протоки располагались преимущественно одиночно, редко группами, по 4-5, эпителий чаще был уплощенным, с нежной гомогенной эозинофильной цитоплазмой. В некоторых участках, отмечалось незначительное расширение просвета протоков. Строма претерпевала довольно разнообразные изменения: определялась ее отечность, разволокнение структур, формирование коллагенового каркаса и наличие капиллярных щелей в отдалении от протоков. В строме находились свободнолежащие клетки, преимущественно нейтрофилы и лимфоциты. Жировая ткань трансформировалась в фиброзную. Поля фиброза отчетливо определялись на периферии железы. ^ клеточного состава железистых долек ткани молочной железы мертворожденных, было выявлено три типа клеток, которые характеризовались специфическими ультраструктурными признаками, отличающими их друг от друга:
Все эти клетки в пределах дольки формировали ацинусы и внутридольковые протоки, которые располагались в рыхлой соединительной ткани. Протоки были образованы одним-двумя слоями клеток. Внутренний слой их составляли дифференцированные секреторные эпителиальные клетки. Наружный слой образовывали миоэпителиальные и камбиальные (недифференцированные) клетки. Клетки были отграничены от окружающей соединительной ткани хорошо выраженной базальной мембраной, толщина которой была почти одинакова на всем протяжении. В большинстве клеток, располагающихся в наружных слоях эпителиального пласта, граничащего с просветом протока, определялась дифференцировка цитоплазмы на апикальную и базальную части. На люминальных поверхностях клеток имелись многочисленные мелкие цитоплазматические выросты, в цитоплазме — небольшое количество специфических гранул, содержащих электроноплотный секрет. Такие участки цитоплазмы были свободны от органелл. В цитоплазме эпителиоцитов имелись небольшие группы митохондрий, средне-мелких размеров, располагающихся ближе к ядру. Развитая гранулярная эндоплазматическая сеть и комплекс Гольджи располагались тоже несколько ближе к ядру. Ядро было средней электронной плотности, с нежным хроматином, расположенным диффузно по ядру. Ядерная оболочка нежная, тонная. Плотные межклеточные контакты и соединения типа десмосом наблюдались преимущественно между наиболее дифференцированными клетками. Стромальные элементы были малочисленны, определялись поля коллагена и свободнолежащие стромальные клетки - фибробласты и макрофаги. Фибробласты имели веретеновидную форму, в цитоплазме присутствовали тонкие фибриллы, небольшие митохондрии с выраженными криптами, ядро фибробластов с мелкодисперсным хроматином. Ядерная оболочка с наличием небольших вдавлений. При электронно-микроскопическом исследовании сосуды имели умеренно выраженную базальную мембрану, эндотелиоциты были несколько истончены, определялись синусоиды. При оценке ультраструктуры стромального компонента молочной железы мертворожденных с асфиксией, обращало на себя внимание полнокровие сосудов, преимущественно венозного строения. В сосудах отмечались признаки отека эндотелия, появление небольшого количества пиноцитозных пузырьков. У мерворожденных с ВУИ отмечалась активация фибробластов в околопротоковой строме, о чем свидетельствовали появление и расширение каналов гранулярной эндоплазматической сети. Вдоль плазмолеммы фибробластов располагались новообразованные коллагеновые фибриллы с четкой поперечной исчерченностью, формирующиеся в мелкие пучки. Также имела место выработка коллагеновых волокон с более четкой направленностью. Среди клеток, в строме молочной железы мерворожденных с ВУИ определялись нейтрофилы с признаками повышенной активности, мелкие эозинофилы. Формировались комплексы: фибробласт-нейтрофил, фибробласт-макрофаг. Иммуногистохимически у мертворожденных, определялась выраженная экспрессия CD34 и VEGF. Маркеры пролиферации и апоптоза не экспрессировались. Качественная оценка иммуногистохимичеких изменений при ВУИ и асфиксии не имела видимых различий. ^ (диаграммы 1,2) показало, что молочные железы мертворожденных при асфиксии были несколько стимулированы, так как увеличивались показатели РП, ПЭП, ППП, ППЖ. При одновременном повышении вышеперечисленных показателей умеренно уменьшались показатели КС, СВ, %Г. Достоверно снижались %КС нейтрофилов, %КС базофилов и %КС моноцитов. Диаграмма 1. Гистотопографический портрет молочной железы мертворожденных.  При ^ по сравнению с группой контроля, протоки располагались преимущественно одиночно, причем эта разница была достоверна (p<0,05). В группе достоверно увеличивался показатель РП (p<0,05); достоверно уменьшались показатели КС и СВ (p<0,05). Кроме того, при ВУИ также достоверно были уменьшены показатели ПЭП, ППП, ППЖ (p<0,05), и увеличены %КС фибробластов в содержимом околопротоковой стромы (p<0,05). Диаграмма 2. Состав клеточной инфильтрации стромы у мертворожденных.  ^ В данной серии изучено 59 молочных желез детей, родившихся на свет живыми и умерших в возрасте до 28 дней. Мальчиков исследовано 32 случая, из них 12 случаев с инфекционной патологией, 13 случаев с асфиксией и 7 контрольные образцы (новорожденные, умершие в результате травмы). Девочек исследовано 27, из них 11 молочных желез получено от трупов детей умерших от инфекции, 9 случаев с асфиксическими проявлениям и 7 контрольных молочных желез. В группе новорожденных не зависимо от половой принадлежности молочные железы имели следующее строение: протоки располагались преимущественно в виде небольших и несколько увеличенных групп по 5-8 протоков. Эпителий был кубический с ярко окрашенными, базофильными, центрально расположенными, овальной или округлой формой ядрами; цитоплазма бледно-розовая, гомогенная; базальная мембрана тонкая, нежная, без особенностей. У новорожденных девочек в 78% случаев, а у мальчиков в 64% протоки были расширены вплоть до кист небольших размеров, в просветах – белково-жировые массы, выявляющиеся при окраске суданом III, PAS – положительный секрет. В 2 случаях присутствовали сосочковые разрастания эпителия железистых структур. Вокруг протоков имелась хорошо выраженная ретикулярная строма с различными клетками (эозинофилами, лимфоцитами, тучными клетками). Строма молочной железы была представлена жировой тканью. Отмечалось некоторое полнокровие сосудов и их расширение. Гистологическая картина молочной железы новорожденных при асфиксии несколько отличалась от контрольной группы. Протоки были расширены, но кистозной трансформации протоков не наблюдалось. В просветах расширенных протоков содержались скудные белково-жировые массы, PAS – положительный, бедный кислыми мукополисахаридами секрет и клетки слущенного эпителия. Околопротоковая строма была представлена тонкими полосками фиброзной ткани с различными клетками и умеренным количеством новообразованных тонкостенных сосудов с гнездным их скоплением. Строма молочной железы представляла собой полоски фибробластов, чаще была отечна, с полнокровными сосудами и явлениями метахромазии. В жировой ткани, расположенной в основном по периферии железы, имелись сосуды - мелкокалиберные, расширенные, полнокровные. ^ у новорожденных гистологическая картина молочной железы по сравнению с контролем практически не менялась. Протоки располагались преимущественно одиночно или в виде небольших групп по 3-6 протоков. Просветы протоков в основном были хорошо различимы, местами немного расширены, в просветах содержалось немного бледно-розового секрета. Некоторые протоки имели просветы неправильной формы. Околопротоковая строма была представлена небольшой полоской фиброзной ткани с наличием единичных нейтрофилов, базофилов и моноцитов. Определялись единичные тучные клетки. Ретикулярные волокна окружали протоки в виде тонкого ободка. Строма была представлена жировой тканью. Некоторые сосуды были умеренно расширены, полнокровны. При изучении ультраструктуры эпителия протоков новорожденных в некоторых клетках удалось обнаружить картины формирования и выделения в просветы протоков единичных липидных капель. Эпителиальные клетки кубоидальной или неправильной формы контактировали между собой с помощью плотных контактов в апикальной части, пальцевых зацеплений на их боковых поверхностях и редких десмосом. Под железистым эпителием лежал прерывистый слой веретенообразных миоэпителиальных клеток. Редко встречающиеся «бледные» клетки, которые рассматривали в качестве предшественников железистых, располагались между кубоидальными клетками и базальной мембраной. Цитоплазма эпителиальных клеток содержала единичные профили шероховатого эндоплазматического ретикулума, свободные рибосомы, полисомы, митохондрии, мультивезикулярные тельца, лизосомы, липидные капли, большие и малые «покрытые» пузырьки. Митохондрии округлой или вытянутой формы, были диффузно распределены по цитоплазме. Отмечалось значительное увеличение количества митохондрий и их гетерогенность. Встречались микротрубочки и пучки микрофиламентов. Чаще всего такие пучки присутствовали в клетках с более светлым матриксом цитоплазмы. Аппарат Гольджи, располагался супра- или парануклеарно и был представлен пакетом уплотненных цистерн и мешочков. Структура ядра чаще была однородна, но нередко в нем имелись два компонента; центрально расположенная нуклеолемма и периферическая аморфная часть. Хроматин располагался диффузно по ядру, либо образовывал более грубые скопления преимущественно вдоль внутренней ядерной мембраны. Нуклеолемма была тонкая, двухконтурная, перинуклеарное пространство узкое. Местами в ядерной оболочке различались ядерные поры. В апикальной части клеток отмечалось значительное количество тонких цитоплазматических выростов - микроворсинок, глубоко вдающихся в просвет протока. Околопротоковая строма с явлениями метахромазии, состояла, в основном, из мелких фибробластов, значительного количества фиброцитов, местами свободно лежащих эритроцитов в толще эластических волокон, единичных лимфоцитов, тучных клеток и очень редко встречающихся плазмоцитов и макрофагов. Микрососуды были представлены редкими артериолами, капиллярами и венулами. Капилляры обычно располагались около протоков и концевых отделов железистых структур в нескольких микрометрах от базальной мембраны или непосредственно под ней. У фибробластов околопротоковой стромы ядерно-цитоплазматическое соотношение было смещено в пользу ядра. В цитоплазме фибробластов определялись многочисленные свободные рибосомы, изредка встречались светлые митохондрии, слабовыраженный аппарат Гольджи, единичные короткие каналы гранулярной эндоплазматической сети. В строме имелось некоторое количество фиброцитов и небольшое количество коллагеновых волокон. Сосуды были полнокровные, в некоторых гемокапиллярах четко прослеживались сладжированные эритроциты. Имеющая место ультраструктурная организация эндотелиоцитов, характерная для вновь сформированных сосудов и сосудов, находящихся в стадии роста и развития, свидетельствовала о функциональной напряженности органа. Наличие большого количества митохондрий и рибосом, в эпителиоцитах протоков новорожденных, позволяло судить об усилении энергетической и пластической функции лактоцитов. Хорошо развитая эндоплазматическая сеть и пластинчатый комплекс Гольджи указывали на активацию процессов синтеза в клетках. Отмечалось усиление неоангиогенеза, свидетельством этому являлось увеличение количества мелких тонкостенных сосудов вокруг протоков и ультраструктурные признаки активации эндотелия – набухание, образование цитоплазматических выростов и появление пиноцитозных пузырьков в цитоплазме. ^ молочной железы новорожденных была представлена гиперэкспрессией CD 34 и VEGF, маркеры пролиферации и апоптоза не экспрессировались. Качественная оценка иммуногистохимичеких изменений при ВУИ и асфиксии не имела видимых различий. На основании морфометрического (диаграммы 3,4) и статистического анализа в группе новорожденных с асфиксией по сравнению с контролем были достоверно снижены показатели ПЭП, ППП, ППЖ, К, КО, КПГ, %КС эозинофилов (p<0,05). Показатель ВЭ в группе с инфекционной патологией по сравнению с контролем достоверно увеличивался. Диаграмма 3. Гистотопографический портрет молочной железы новорожденных.  В группе новорожденных с ВУИ по сравнению с контрольной группой достоверно снижались показатели Р, ПГ, СВ, КС (p<0,01), достоверно увеличивались показатели К, КО, КПГ, КГ (p<0,05). Увеличивалось по сравнению с контролем %КС эозтнофилов и %КС фибробластов, хотя данные были недостоверны. Диаграмма 4. Состав клеточной инфильтрации стромы у новорожденных.  ^ В данной серии исследовано 54 молочные железы, полученные от умерших детей в возрасте от 29 дней до 12 месяцев. Девочек в данной серии исследовано 26 , из них 8 при инфекции, 11 при асфиксии и 7 контрольных (грудные дети, погибшие в результате травм). Мальчиков в серию включено 28, из них 10 с инфекцией, 12 с асфиксией и 6 контрольных. У грудных детей в данной возрастной группе гистологическая картина была представлена следующим: в одних случаях, железистые трубочки были малочисленными, но они находились в крупных компактных группировках; в других - группировки железистых структур малочисленные, но перигландулярная строма была хорошо выражена; в третьих - железистые элементы многочисленные и находились в крупных компактных группировках, окруженных узким слоем окутывающей стромы. Просветы железистых трубочек в 87% случаев спавшиеся, пустые, отдельные протоки (в 13% случаев) содержали немного белковых масс. Эпителий железистых образований в большинстве наблюдений был высокий, многорядный или многослойный. Ядра эпителиальных клеток в протоках, выстланных многослойным или многорядный эпителием, располагались на различных уровнях, беспорядочно; они интенсивно окрашивались гематоксилином. Цитоплазма эпителиальных клеток окружала ядра в виде узкой розовой каемки. Среди клеток эпителия изредка отмечались элементы с бледно окрашенными ядрами. Они чаще располагались ближе к собственной оболочке протоков. В одном случае в некоторых железистых трубочках обнаруживалась зубчатость вследствие того, что миоэпителий вдавался в окружающую строму в виде зубчиков, состоящих из 4-5 клеток. Строма молочной железы была представлена жировой тканью и дифференцирующимися клеточными элементами. В 1 случае (у 8-месячной девочки) были обнаружены чрезвычайно своеобразные изменения, несколько напоминающие патологические процессы в молочной железе взрослых женщин. Центральная часть железистого узелка бала занята разросшейся и разбухшей волокнистой соединительной тканью, пронизанной скоплениями светлых вытянутых клеток, и резко отличающейся как по строению, так и по тинкториальным свойствам от волокнистой соединительной ткани дермы и соединительнотканных прослоек в окружающей жировой клетчатке. Железистые элементы были немногочисленны, располагались по периферии узелка, будучи как бы раздвинутыми разросшейся соединительной тканью, просветы их узкие, эпителий многослойный, темный. В группе грудных детей с инфекционной патологией, молочные железы строились из плотной коллагеновой ткани, бедной сосудами и клетками. Железистые элементы были малочисленны, располагались одиночно, или в виде тесных компактных группировок. Молочные железы грудных детей при асфиксии были представлены следующей патоморфологической картиной: молочные железы были небольших размеров 0,3 х 0,4 см, имели немного протоков, располагавшихся в виде малочисленных групп или одиночно. Они были окружены узким слоем нежноволокнистой стромы, более богатой клетками, чем опорная строма. Железистые трубочки в большинстве случаев были спавшимися и содержали немного белковых масс, в некоторых наблюдениях просветы части железистых структур были несколько расширены и наполнены белковой массой с примесью клеток десквамированного эпителия. Эпителий большинства железистых элементов был высоким, двухслойным. В одном случае наблюдалось незначительное увеличение цитоплазмы миоэпителия с вакуолизацией и просветлением ее. В двух случаях отмечалась зубчатость эпителиального покрова. Ультраструктура стромы молочной железы грудных детей характеризовалась наличием большого количества фибробластов и единичных фиброцитов. Цитоплазма фибробластов содержала развитую гранулярную эндоплазматическую сеть с умеренным расширением ее каналов. Наличие в цитоплазме гомогенной субстанции белковой природы, подчеркивало специализированную направленность этих клеток, тесно связанную с продукцией коллагена. В данной возрастной группе нами на электронных микрофотограммах было изучено детальное строение клеточных элементов миоэпителиальной природы разной степени дифференцировки и разного функционального состояния. В незрелых миоэпителиальных клетках содержалась редкая сеть тонких филаментов, которые сами по себе не имели каких-либо признаков, позволяющих отнести их к филаментам, характерным для миоэпителиальных клеток. Такие филаментозные структуры могли быть сходны с фибриллярными структурами секреторного эпителия — тонофиламентами и оценивались как неспецифические. При причислении таких клеток к миоэпителиальным мы учитывали совокупность других ультраструктурных признаков, характерных для миоэпителия: форму, наличие цитоплазматических отростков, пиноцитозную активность, топографическое соотношение с базальной мембраной и секреторным эпителием. Наличие в миоэпителиальных клетках фибриллярных структур с характерными фокальными уплотнениями указывало на более высокую степень клеточной дифференцировки, хотя отмечались некоторые структурные изменения в упорядоченном расположении фибрилл, которые были расположены более рыхло, нередко занимали обширные области цитоплазмы, вытесняя другие органоиды. При оценке ультраструктуры эпителиоцитов отмечалось наличие секреторных вакуолей в апикальных отделах цитоплазмы, во многих лактоцитах имелась некоторая гиперплазия комплекса Гольджи, с остатками около него мелких лизосом. Гранулярный эндоплазматический ретикулум был выражен слабо. Обнаруживалась гиперплазия митохондрий и их полиморфизм, в большинстве случаев они имели небольшой размер. В цитоплазме встречались единичные вакуоли. Сосуды капиллярного типа, лежали свободно в толще эластических волокон или вблизи протоков. По данным мофрометрического анализа (диаграммы 5,6) можно было сказать, что в зависимости от контрольных показателей молочных желез грудных детей в группе с асфиксией достоверно увеличивались такие показатели как КО, К %Г. На одном уровне оставались показатели ВГ, СВ, ПЭП. Остальные показатели достоверно были снижены; в изучении %КС можно сказать, что %КС существенно не отличались друг от друга в исследуемых группах. Диаграмма 5. Гистотопографический портрет молочной железы грудных детей.  При анализе морфометрических данных у грудных детей с инфекционной патологией практически все показатели оставались на том же уровне, что и в группе контроля. Обращало на себя внимание лишь увеличение %КС фибробластов и уменьшение количество моноцитов. Нейтрофилы, эозинофилы и лимфоциты практически не изменялись по сравнению с группой контроля. Диаграмма 6. Состав клеточной инфильтрации стромы у грудных детей.  При проведении иммуногистохимического исследования у грудных детей было отмечено, что экспрессия CD34 и VEGF оставалась на достаточно высоком уровне. Маркеры пролиферации давали низкую экспрессию, а маркеры апоптоза были негативны. Проанализировав полученные данные мы пришли к следующему мнению: В развитии молочной железы, как мальчиков, так и девочек в возрасте от 36 недель гестации до 1 года жизни при сопутствующей патологии, в частности инфекции и асфиксии, можно было выделить два процесса: деструктивный и пролиферативный. Деструктивные явления были наиболее выражены в железистой паренхиме, в которой происходила дифференцировка железистых клеток, они становились более высокими, цилиндрическими. Уменьшались размеры ядер. В дальнейшем у большинства железистых клеток происходил распад и лизис ядер. В других клетках изменения не заходили столь глубоко и ядра приобретали исходный вид. В результате большая часть альвеол и некоторых мелких протоков подвергалась деструкции, десквамации эпителия и последующей его резорбции. Особенно ярко процесс деструкции железистого эпителия мы наблюдали при явлениях асфиксии у плодов, новорожденных и грудных детей. Одновременно перестраивались производные соединительной ткани, строма и кровеносные сосуды. Процесс перестройки выражался, с одной стороны, в резорбции кровеносных сосудов, а с другой — в пролиферации элементов стромы. В строме постепенно увеличивалось количество коллагеновых волокон. Количество эластических волокон нарастало медленнее. Пролиферативный процесс в строме наблюдался чаще при инфекционной патологии плодов, новорожденных и грудных детей. ВЫВОДЫ
Практические рекомендации 1. В практической деятельности врачей-патологоанатомов при проведении аутопсий плодов и детей следует учитывать гистологический типа строения молочной железы. 2. В учебном процессе кафедр нормальной анатомии, гистологии и патологической анатомии медицинских ВУЗов на лекционных и практических занятиях по теме «Молочная железа» необходимо изучать особенности гистологического строения молочной железы в периоды внутриутробного развития плода, новорожденности и грудного возраста. ^
|
Ваша оценка этого документа будет первой.
Ваша оценка:
Похожие:
База данных защищена авторским правом ©MedZnate 2000-2016
allo, dekanat, ansya, kenam
обратиться к администрации | правообладателям | пользователям
allo, dekanat, ansya, kenam
обратиться к администрации | правообладателям | пользователям