Toxoplasma IgG антитела icon

Toxoplasma IgG антитела





Скачать 410.74 Kb.
Название Toxoplasma IgG антитела
Дата конвертации 04.04.2013
Размер 410.74 Kb.
Тип Документы











НАЗВАНИЕ

Toxoplasma IgG антитела

НАЗНАЧЕНИЕ


AxSYM Toxo IgG представляет собой тест-систему для количественного определения IgG-антител к Toxoplasma gondii в сыворотке или плазме (с ЭДТА, гепарином или цитратом натрия) методом иммуноферментного анализа на микрочастицах (МИФА). Данная система применяется для определения иммунного статуса и рекомендуется в качестве скрининг теста во время беременности.

^

РЕЗЮМЕ И ОПИСАНИЕ ТЕСТА


Toxoplasma gondii является облигатным внутриклеточным паразитом, способным инфицировать разнообразных промежуточных хозяев, включая человека. Зараженные окончательные хозяева (кошки) выделяют с фекалиями ооцисты, которые быстро созревают в почве и становятся инфекционными. При попадании в кишечник промежуточных хозяев они превращаются в тахизоиты, быстро размножаются и образуют цисты, содержащие медленно растущие, но инфекционные брадизоиты. Таким образом, человек заражается токсоплазмозом при попадании в кишечник кошачьих фекалий или съедании непрожаренного мяса, зараженного цистами.2,3


У здорового взрослого человека заболевание обычно протекает бессимптомно. При наличии клинических проявлений, самым частым симптомом является лимфаденопатия, которая может сочетаться со множеством других симптомов, затрудняющих дифференциальную диагностику.4,5 У взрослых со сниженным иммунитетом вследствие противоопухолевой химиотерапии или иммуносупрессивного лечения, а также у пациентов со СПИДом заболевание может протекать тяжело и с летальным исходом. Считается, что у взрослых пациентов с иммунодефицитом заболевание является реактивацией латентной инфекции, при этом обычно поражается центральная нервная система, иногда другие органы.6-9


При острой инфекции у беременной может произойти трансплацентарная передача паразита, приводящая к врожденному токсоплазмозу. Риск заражения плода зависит от периода беременности, в котором протекала острая инфекция у матери. Риск заражения минимален, если женщина болела перед зачатием. Однако с увеличением срока беременности риск врожденного токсоплазмоза возрастает, при этом тяжесть его, наоборот больше, если заражение матери произошло на ранних сроках беременности. Большинство новорожденных, инфицированных внутриутроб-но, при рождении не имеют клинических проявлений заболевания, особенно при болезни матери в третьем триместре, симптомы возникают у них позже.10,11 У 20-30% новорожденных, инфицированных внутриутроб-но, врожденный токсоплазмоз приводит к тяжелым генерализованным или неврологичес-ким заболеваниям, примерно 10% имеют только поражение глаз, а остальные (около 70%) не имеют клинических симптомов при рождении.11,12 Субклиническая инфекция может привести к преждевременным родам и последующим неврологическим, интеллектуальным и слуховым нарушениям.10,13


Проспективные исследования беременных показали, что пренатальная диагностика инфекции с последующим лечением снижает риск и тяжесть врожденного токсоплазмоза.10,14 Для определения инфицирования у беременных из группы риска можно использовать серологические тесты; серонегативным на момент обследования женщинам проводится динамическое наблюдение во время беременности. Сероконверсия указывает на наличие инфекции T. gondii и на срок, в котором произошло инфицирование женщины.10,14,15


Тест-система AxSYM Toxo IgG Antibody предназначена для количественного определения IgG-антител к T. gondii в сыворотке или плазме человека (с ЭДТА, гепарином или цитратом натрия). Наличие, по крайней мере, 3 Международных Единиц антител в 1 мл образца свидетельствует об острой или перенесенной инфекции.

^

БИОЛОГИЧЕСКИЕ ПРИНЦИПЫ ПРОЦЕДУРЫ


В основе теста AxSYM Toxo IgG лежит методика иммуноферментного анализа на микрочастицах (МИФА).

Образец и все необходимые для одного теста реагенты набора AxSYM Toxo IgG вносятся с помощью зонда пробоотборника в лунки реакционной ячейки (RV) в дозировочном блоке. Затем RV немедленно переносится в аналитический блок, в котором дальнейшее пипетирование производится с помощью собственного дозатора.

Реакции протекают в следующей последовательности:

ДОЗИРОВОЧНЫЙ БЛОК

  • С помощью зонда пробоотборника образец растворяется в растворе 4 (промывочный раствор), а аликвота разведенного образца и микрочастиц, сенсибилизированных T. gondii, переносится в инкубационную ячейку RV.

  • Антитела к T. gondii связываются с микрочастицами, покрытыми T. gondii, образуя комплекс антиген-антитело.


АНАЛИТИЧЕСКИЙ БЛОК

  • В реакционную смесь добавляется разбавитель образца, и аликвота комплекса антиген-антитело переносится в матриксную ячейку, где микрочастицы необратимо связываются с матриксом из стекловолокна.

  • Матриксная ячейка промывается для удаления материала, не связавшегося с микрочастицами.

  • В матриксную ячейку добавляется конъюгат антител к человеческим IgG с щелочной фосфатазой, который связывается с комплексом антиген-антитело.

  • Матриксная ячейка промывается для удаления материала, не связавшегося с микрочастицами.

  • Субстрат 4-метилумбеллиферил фосфат добавляется в матриксную ячейку. С помощью оптической системы МИФА измеряется флуоресценция продукта.

Дополнительную информацию можно найти в Инструкции по эксплуатации системы AxSYM, раздел 3.

РЕАГЕНТЫ


НАБОР РЕАГЕНТОВ. 100 ТЕСТОВ

^ Набор реагентов AxSYM Toxo IgG (No. 3B22-20)*

  • 1 флакон (7,8 мл), содержащий микрочастицы, сенсибилизированные T. gondii в Трис-буфере с белковыми стабилизаторами. Консерванты: противомик-робные препараты. (Флакон с реагентом 1).

  • 1 флакон (9,6 мл), содержащий конъюгат козьих антител к человеческим IgG с щелочной фосфатазой в Трис-буфере с белковыми стабилизаторами. Минимальная концентрация: 0,2 мкг/мл. Консервант: азид натрия. (Флакон с реагентом 2).

  • 1 флакон (25,8 мл), содержащий разбавитель образцов в Трис-буфере с белковыми стабилизаторами. Консерванты: противомик-робные препараты. (Флакон с реагентом 3).

* No. 3B22-66 включает набор реагентов AxSYM Toxo IgG (100 тестов), реакционные ячейки (100 шт.) и матриксные ячейки (100 шт.). No. 3B22-20 включает те же наименования и предназначен для экспорта за рубеж.


КАЛИБРАТОРЫ

^ Эталонные калибраторы AxSYM Toxo IgG (No. 3B22-30)

Калибраторы соответствуют Международному Стандарту Всемирной Организации Здравоохранения для антител к T. gondii.

2 Флакона (по 3 мл каждый) с эталонными калибраторами AxSYM Toxo IgG, изготовленными на основе человеческих IgG-антител к T. gondii в рекальцифицированной плазме крови человека, не содержащей поверхностного антигена вируса гепатита В (HBsAg), антител к вирусу гепатита С и антител к ВИЧ-1/ВИЧ-2. Выпускаются в следующих концентрациях:


Флакон

Концентрация Toxo IgG-антител (МЕ/мл)

1

0

2

50

Консервант: азид натрия.


^ Калибраторы Toxo IgG (No. 9C26-01)

Калибраторы соответствуют Международному Стандарту Всемирной Организации Здравоохранения для антител к T. gondii.

6 Флаконов (по 3 мл каждый) с калибраторами Toxo IgG, изготовленными на основе человеческих IgG-антител к T. gondii в рекальцифицированной плазме крови человека, не содержащей поверхностного антигена вируса гепатита В (HВsAg), антител к вирусу гепатита С и антител к ВИЧ-1/ВИЧ-2. Выпускаются в следующих концентрациях:


Флакон

Концентрация Toxo IgG-антител (МЕ/мл)

A

0

B

10

C

50

D

100

E

200

F

300

Консервант: азид натрия.


КОНТРОЛИ

^ Toxo IgG контроли (No. 9C26-10)

2 Флакона (по 5 мл каждый) с Toxo IgG контролем, изготовленными на основе человеческих IgG антител к T. gondii в рекальцифицированной плазме крови человека, не содержащей поверхностных антигенов вируса гепатита В (HВsAg), антител к вирусу гепатита С и антител к ВИЧ-1/ВИЧ-2. Выпускаются в следующих концентрациях с допустимыми отклонениями:


Флакон

Концентрация Toxo IgG-антител

Допустимые отклонения (МЕ/мл)

Отриц.

0

0-1,5

Положит.

20

10-30

Консервант: азид натрия.


ДРУГИЕ РЕАГЕНТЫ


^ Раствор для очистки пробоотборника AxSYM (№ 9A35-05)

2 флакона (по 220 мл в каждом) раствора для очистки пробоотборника AxSYM, содержащие 2 % тетраэтиламмонийгидроксид (ТЭАГ).


^ Раствор 1 (MUP) (№ 8A47-04)

4 флакона (по 230 мл в каждом) раствора 1 (MUP), содержащего 4-метилумбеллиферил-фосфат, 1,2 ммоль/л, в буферном растворе АМФ (аденозин-5'-монофосфат). Консервант: азид натрия.


^ Раствор 3 (для промывки ячеек с матриксом) (№ 8A81-04)

4 флакона (по 1000 мл в каждом) раствора 3 (для промывки ячеек с матриксом), содержащие 0,3 моль/л хлорида натрия в буферном растворе ТРИС. Консерванты: азид натрия и противомикробные реагенты.


^ Раствор 4 (для разведения при анализе)

(№ 8A46)

1 флакон (10 л) раствора 4 (для разведения при анализе), содержащего 0,1 моль/л фосфатного буферного раствора. Консерванты: азид натрия и противомикробные реагенты.


^ ПРЕДУПРЕЖДЕНИЯ И МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ

Только для использования при диагностике in vitro.


МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ

  • ВНИМАНИЕ: Этот продукт содержит полученные от человека и/или потенциально инфекционные компоненты. Подробности приведены в разделе РЕАГЕНТЫ в этой инструкции.. Ни один из известных методов тестирования не может гарантировать того, что продукты, полученные от человека или содержащие инактивированные микроорга-низмы, не являются переносчиками инфек-ции. Поэтому все полученные от человека материалы следует считать потенциально инфекционными. С этими реагентами и полученными от человека образцами рекомендуется обращаться в соответствии со Стандартом OSHA (Управление по гигиене и безопасности труда) для переносимых кровью патогенных микроорганизмов. При работе с материалами, которые содержат или предположительно содержат инфекционные компоненты, следует соблюдать требования правил Биологической безопасности, уровень 2 или других соответствующих правил биологической безопасности.

  • Раствор для очистки пробоотборника AxSYM (2% ТЭАГ) может вызвать слабое раздражение глаз. Если этот раствор попадет в глаза, немедленно промыть большим количеством воды.

  • Некоторые компоненты этого продукта содержат азид натрия. Конкретный перечень приведен в разделе РЕАГЕНТЫ этой инструкции, вложенной в упаковку. В соответствии с действующими директивами Европейского экономического сообщества (ЕЭС) компоненты, содержащие азид натрия, классифицируются, как: Опасные (Xn). Ниже приводится классификация факторов риска (R) и безопасности (S):






R22

Опасно при проглатывании.

R32

При соприкосновении с кислотами выделяется высокотоксичный газ.

S2

Держать в месте, недоступном для детей.

S13

Держать вдали от пищевых продуктов, напитков и кормовых продуктов для животных.

S36

Надеть соответствующую защитную одежду.

S46

В случае проглатывания немедленно обратиться за медицинской помощью и показать врачу этот контейнер или этикетку.


МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ ПРИ РАБОТЕ

  • Не используйте раствор 1 (MUP) после даты истечения срока годности или более 14 дней после загрузки в систему AxSYM. При загрузке нового раствора 1 (MUP) для сведения к минимуму воздействия воздуха важно немедленно закрыть крышку флакона с MUP. Продолжительное воздействие воздуха на MUP может сделать его непригодным для использования.

  • Не используйте упаковку с реагентами после даты истечения срока годности или всего более 336 часов после загрузки в систему AxSYM.

  • Не смешивайте реагенты, содержащиеся в различных упаковках.


Более подробное описание техники безопасности и мер предосторожности при эксплуатации системы приведено в Руководстве по эксплуатации системы AxSYM, разделы 7 и 8.


^ ИНСТРУКЦИИ ПО ХРАНЕНИЮ

Упаковку реагентов AxSYM Toxo IgG, калибратор и контроли необходимо хранить при 2 - 8 С (не замораживать). Упаковку реагентов AxSYM Toxo IgG, калибраторы и контроли можно использовать сразу же после извлечения из холодильника. Сразу же после использования калибратор и контроли следует убирать в место, где они хранятся при 2 - 8 С.


Упаковка реагентов AxSYM Toxo IgG может находиться в системе AxSYM всего не более 336 часов; например, в течение 42 восьмичасовых рабочих смен. Для обеспечения максимальной стабильности результатов при использовании реагентов в приборе может потребоваться повторная калибровка. Для мониторинга рабочих характеристик реагентов одной и той же партии может потребоваться более частое использования контролей. Дополнительная информация по проверке времени нахождения реагентов в приборе приведена в Руководстве по эксплуатации системы AxSYM, разделы 2, 5 и Приложения.


Раствор 1 (MUP) необходимо хранить при 2 - 8 С (не замораживать). Его можно использовать сразу же после извлечения из холодильника. MUP может находиться в системе AxSYM в течение не более 14 дней. Через 14 дней его необходимо выбросить.


Раствор AxSYM для очистки пробоотборника, раствор 3 (для промывки ячеек с матриксом) и раствор 4 (для разведения при анализе) необходимо хранить при 15 - 30 С.


^ РАБОТА ПРИБОРА

ИНСТАЛЛЯЦИЯ ФАЙЛА АНАЛИЗА

До проведения анализов с помощью AxSYM Toxo IgG необходимо инсталлировать в систему AxSYM файл для анализа AxSYM Toxo IgG с диска с программным обеспечением, номер по каталогу 08В95-02 (для стабильного хранения в приборе в течение 112 часов) или 07D16-01 или более поздний (для стабильного хранения в приборе в течение 336 часов). Соответствующие методики инсталляции описаны в Руководстве по эксплуатации системы AxSYM, раздел 2.


ПАРАМЕТРЫ АНАЛИЗА AxSYM Toxo IgG

В приведенной ниже таблице представлены используемые по умолчанию значения параметров анализа AxSYM Toxo IgG. Параметры анализа, который можно редактировать, содержат символ (>). Эти параметры можно выводить на дисплей и редактировать с помощью методики, описанной в Руководстве по эксплуатации системы AxSYM, раздел 2. Для получения значений параметров, отмеченных звездочкой (*), обратитесь к конкретному экрану параметров анализа. Для печати значений параметров анализа нажмите PRINT (печать).




Параметры анализа



ПРИМЕЧАНИЕ: Параметры 45 и 80 редактировать нельзя.

Подробное описание методик работы на приборе приведено в Руководстве по эксплуатации системы AxSYM.


^ СБОР И ПОДГОТОВКА ОБРАЗЦОВ ДЛЯ АНАЛИЗА

  • Для анализа AxSYM Toxo IgG можно использовать сыворотку человека или плазму (собранную в пробирках с ЭДТА, цитратом натрия или гепарином). Выполняйте инструкции изготовителя по обработке пробирок для сбора сыворотки и плазмы.

  • Система AxSYM не позволяет проверить тип образца. Проверка типа (типов) образца (образцов), используемого (использующихся) при анализе AxSYM Toxo IgG, остается на ответственности оператора.

  • Образцы, содержание дисперсное вещество, эритроциты или являющиеся мутными, перед проведением анализа необходимо очистить путем центрифугирования при  10000 х g в течение 10 минут. До проведения центрифугирования убедитесь в том, что сгусток образовался полностью.

  • Для получения оптимальных результатов образцы не должны содержать фибрина, эритроцитов и другого дисперсного вещества.

  • С момента сбора образцы можно хранить до 7 дней при 2 - 8 С. Если тестирование откладывается больше, чем на 7 дней, образцы следует хранить при -20 С или более низкой температуре. После оттаивания для получения согласованных результатов перед проведением анализа образцы следует перемешать и отцентрифугировать при  10000 х g в течение 10 минут. После любого цикла замораживание/оттаивание образцы, взятые у пациентов, необходимо перемешивать и центрифугировать. Для образцов, подвергнутых более шести циклам замораживание/оттаивание, рабочие характеристики не установлены.

  • Для сведения к минимуму эффектов испарения все образцы (взятые у пациентов, контроли и калибраторы) следует тестировать не позднее, чем через 3 часа после помещения в систему AxSYM. Более подробное описание ограничений по хранению образцов в системе приведено в Руководстве по эксплуатации системы AxSYM, раздел 5.

  • С помощью этой процедуры нельзя тестировать термически инактивированные образцы, липемические образцы, сильно гемолизованные образцы и образцы, для которых известно, что они загрязнены микроорганизмами.

  • Рабочие характеристики системы не установлены для случаев применения образцов, взятых у трупов, и жидкостей организма кроме сыворотки и плазмы.

  • Проверить наличие пузырьков во всех образцах. Удалить пузырьки до проведения анализа.

  • Образцы должны транспортироваться в замороженном состоянии. Перед транспортировкой из образцов необходимо удалить сгустки и эритроциты.

  • При транспортировке образцы должны быть упакованы и промаркированы в соответствии с действующими областными, федеральными и международными нормативами по транспортировке клинических образцов и инфекционных веществ.


ОБЪЕМ ОБРАЗЦА

Объем образца, необходимый для проведения в системе AxSYM Toxo IgG одного теста без разведения, зависит от типа используемого контейнера для образца. При использовании чашечек для образцов для проведения теста ROUTINE необходимо 150 мкл, а проведения теста STAT необходимо 83 мкл. Для проведения каждого дополнительного теста на Toxo IgG (ROUTINE или STAT) с тем же контейнером для образца необходимо дополнительно 33 мкл образца. Минимальные объемы чашечки для образца при проведении тестов STAT и ROUTINE рассчитываются системой AxSYM. Они выводятся на экран Orderlist (список заданий) в момент посылки задания на проведение теста (тестов) и печатаются в Orderlist Report (протокол списка заданий). При использовании Host Order Query (запрос на выполнение заданий с главного компьютера) информация на экране Orderlist и Orderlist Report недоступна. Описание режима Host Order Query приведено в Руководстве по эксплуатации системы AxSYM, раздел 5.


Если при анализе система настроена на автоматическое повторное тестирование, то в момент посылки задания на проведение теста (тестов) дополнительный объем образца, необходимый для тестирования, на экран Orderlist не выводится. Поэтому полный объем образца должен включать дополнительно 33 мкл образца. Конфигурация автоматического повторного тестирования описана в Руководстве по эксплуатации системы AxSYM, раздел 2.


Для получения рекомендованного объема калибраторов и контролей для AxSYM Toxo IgG влейте в каждую соответствующую чашечку образцов по 4 капли каждого калибратора, позитивного или негативного контроля, держа флаконы вертикально.


Требования к объему образца для первичных пробирок и аликвотных пробирок и к объемам калибраторов и контролей для нескольких партий реагентов приведены в Руководстве по эксплуатации системы AxSYM, раздел 5.


^ ПРОЦЕДУРА AxSYM Toxo IgG

ПРЕДОСТАВЛЯЕМЫЕ МАТЕРИАЛЫ


  • № 3В22-20

Содержит:

Упаковку реагентов AxSYM Toxo IgG

100 реакционных ячеек

100 ячеек с матриксом


НЕОБХОДИМЫЕ, НО НЕ ПРЕДОСТАВЛЯЕМЫЕ МАТЕРИАЛЫ


  • Система AxSYM

  • № 9С26-10

Контроли Toxo IgG

  • № 9С26-01

Toxo IgG калибраторы или

  • № 3В22-30

Мастер-калибраторы Toxo IgG

  • № 8А47-04

Раствор 1 (MUP)

  • № 8А81-04

Раствор 3 (для промывки ячейки с матриксом)

  • № 9А35-05

Раствор для очистки пробоотборника AxSYM

  • № 8А76-01

Чашечки для образцов

  • Пипетки или наконечники для пипеток (по заказу) для дозирования объемов, заданных на экране Order.


ВНИМАНИЕ:

  • При ручном дозировании образца в чашечки для образца убедитесь в том, что дозирующее оборудование не приводит к перекрестному загрязнению и дозирует заданный объем образца. Для каждого образца используйте отдельный наконечник пипетки. Используйте точно откалиброванное оборудование.

  • Для обеспечения оптимальных рабочих характеристик важно выполнять стандартные методики технического обслуживания, описанные в Руководстве по эксплуатации системы AxSYM, раздел 9. Если в Вашей лаборатории необходимо более частое проведение технического обслуживания, используйте эти методики.


ПРОЦЕДУРА ПРОВЕДЕНИЯ АНАЛИЗА

Разделы 5 и 6 Руководства по эксплуатации системы AxSYM можно без труда отделить от Руководства и держать у прибора. В них приведено подробное описание стадий проведения калибровки и анализа образца.


Перед выполнением теста убедитесь в том, что в системе находится достаточное количество реакционных ячеек, ячеек с матриксом и растворов, а уровень отходов является приемлемым.


Orderlist Report содержит информацию о расположении образцов и требования к объему чашечек для образцов для всех посланных заданий. При внесении образцов в сегменты для образцов рекомендуется сверяться с этим описанием режима. При использовании Host Order Query список заказанных тестов (Orderlist Report) не доступен. Описание режима Host Order Query приведено в Руководстве по эксплуатации системы AxSYM, раздел 5.


ВНИМАНИЕ: При работе системы AxSYM всегда выполняйте следующие требования:

  • Перед добавлением или удалением сегментов с образцами, упаковок с реагентами или реакционных ячеек система должна находиться в состоянии WARMING (нагрев), PAUSED (временная остановка), READY (готово) или STOPPED (остановка).

  • Во время выполнения теста не открывайте внутреннюю дверцу отделения для отходов и крышку блока обработки AxSYM. В противном случае выполнение теста будет прекращено и его будет необходимо повторить.

  • После завершения теста для наиболее эффективного использования упаковки реагентов, находящейся в системе, рекомендуется удалить из блока обработки образцы и упаковку реагентов AxSYM Toxo IgG. Хранить при 2 - 8 С.


^ ПРОЦЕДУРЫ РАЗВЕДЕНИЯ ОБРАЗЦА


Для определения Toxo IgG антител в образцах пациентов, в которых концентрация антител превышает 300 МЕ/мл, можно проводить автоматическое разведение образцов. Требуемый объем образца составляет 150 мкл. Система AxSym автоматически рассчитывает концентрацию разведенного образца и сообщает результат. Дополнительная информация по разведению образцов содержится в инструкции по эксплуатации системы AxSym, раздел 5.


^ ПРОЦЕДУРЫ КОНТРОЛЯ КАЧЕСТВА


КАЛИБРОВКА

Тест AxSYM Toxo IgG следует калибровать с помощью либо эталонного (Мастер) калибратора (по 2 точкам) или стандартного калибратора (по 6 точкам). Использование конкретной калибровки зависит от индивидуальных правил лаборатории.

^

Эталонная калибровка


Каждая упаковка с реагентом AxSYM Toxo IgG поставляется со вкладышем, снабженным штрих-кодовой меткой, содержащей информацию по эталонной калибровочной кривой для данной конкретной партии реагента. При использовании данной партии реагентов в первый раз необходимо ввести информацию об эталонной калибровочной кривой в систему AxSYM. Для более подробной информации о введении штрих кодов с эталонной калибровочной кривой обращайтесь к инструкции по эксплуатации системы AxSYM, раздел 6. После введения данной штрих кодовой информации система автоматически производит эталонную калибровку теста.

Для проведения эталонной калибровки аналитической системы AxSYM Toxo IgG необходимо дважды протестировать эталонные калибраторы 1 и 2. Для оценки калибровки анализа необходимо протестировать по одному образцу негативного и позитивного контролей Toxo IgG.

^

Стандартная калибровка


Для проведения стандартной калибровки аналитической системы AxSYM Toxo IgG не нужен предварительный ввод штрих кодовой информации об эталонных калибраторах. Для этого необходимо дважды протестировать стандартные калибраторы A,B,C,D,E и F теста AxSYM Toxo IgG. Для оценки калибровки анализа необходимо протестировать по одному образцу негативного и позитивного контролей Toxo IgG.

После принятия результатов калибровки AxSYM Toxo IgG и их запоминания все последующие образцы можно тестировать без проведения калибровки за исключением случаев, когда:

  • Используется упаковка реагентов с новым номером партии.

  • Данные для контролей выходят за границы установленного диапазона.


В Руководстве по эксплуатации системы AxSYM, раздел 6, приведена информация о:

  • Настройке при калибровке системы анализа.

  • Случаях, когда может потребоваться повторная калибровка.

  • Проверке калибровки.


Система AxSYM проверяет, соответствуют ли результаты калибровки системы анализа спецификациям, заданным для выбранных параметров достоверности. Если результат калибровки не соответствует спецификациям, выводится сообщение об ошибке. Корректировочные действия, которые необходимо предпринять при сообщениях об ошибках, описаны в Руководстве по эксплуатации системы AxSYM, раздел 10. Описание параметров достоверности, которые может использовать система AxSYM, приведено в Руководстве по эксплуатации системы AxSYM, Приложение Е.


КОНТРОЛЬ КАЧЕСТВА

Рекомендованный режим контроля для анализа AxSYM Toxo IgG заключается в тестировании одного образца позитивного и негативного контролей каждые 8 часов для каждого дня использования. Контроли можно установить в любом положении карусели для образцов.


Если принятые в Вашей лаборатории методы контроля требуют более частого использования контролей, соблюдайте требования этих методов.


Убедитесь в том, что значения для контролей, используемых при анализе AxSYM Toxo IgG, соответствуют диапазонам концентраций, заданных в разделе РЕАГЕНТЫ, КОНТРОЛИ данной инструкции, вложенной в упаковку.


^ УКАЗАНИЯ НА НЕСТАБИЛЬНОСТЬ ИЛИ ПОРЧУ РЕАГЕНТОВ

Если значение для негативного или позитивного контролей Toxo IgG выходят за установленный диапазон, это может указывать на порчу реагентов или неисправность аппаратуры. Соответствующие результаты анализов могут оказаться неправильными, и потребуется повторное тестирование. Может потребоваться повторная калибровка системы анализа. Дополнительная информация по обнаружению и устранению неисправностей приведена в Руководстве по эксплуатации системы AxSYM, раздел 10.


Система AxSYM обладает возможностью строить зависимость Levey-Jennings при каждом проведении контроля качества анализа. Обратитесь к Руководству по эксплуатации системы AxSYM, раздел 5. По усмотрению лаборатории результаты контроля качества можно оценивать с помощью отобранных правил контроля качества.


КРИТЕРИИ ПРИЕМЛЕМОСТИ ФОНОВОЙ ФЛУОРЕСЦЕНЦИИ

Контроль качества холостой пробы субстрата MUP прибор выполняет автоматически и проверка происходит в соответствии с Параметром анализа 64, Max Intercept-Max MUP Intercept [(Максимальный отрезок, отсекаемый на оси ординат)-(Максимальный отрезок для MUP, отсекаемый на оси ординат)], при каждом расчете результатов теста. Если значение MUP Intercept превышает максимальное допустимое значение, то результат считается неправильным. Запрос на тестирование перемещается в Exceptions List (список исключений), в котором он выводится с сообщением “1064 Invalid test result, intercept too high” и рассчитанным значением отрезка, отсекаемого на оси ординат. Если выводится это сообщение об ошибке, обратитесь к Руководству по эксплуатации системы AxSYM, раздел 10.Дополнительная информация об этом параметре приведена в Руководстве по эксплуатации системы AxSYM, раздел 2.

РЕЗУЛЬТАТЫ


РАСЧЕТЫ

Система AxSYM Toxo IgG использует поточечную обработку данных для создания стандартной калибровочной кривой, а также позволяет получить соотношение А для создания эталонной калибровочной кривой, специфичной для данного инструмента.

^

Индикация с помощью флажков


Для некоторых результатов информация может появляться в поле флажков. Описание результатов, помеченных флажком, содержится в Инструкции по эксплуатации системы AxSYM, разделы 1 и 2.


ИНТЕРПРЕТАЦИЯ РЕЗУЛЬТАТОВ

Образцы, в которых концентрация IgG-антител (AxSYM Toxo IgG) к T. gondii < 2 МЕ/мл расцениваются как отрицательные.

Образцы, в которых концентрация IgG-антител (AxSYM Toxo IgG) к T. gondii  3 МЕ/мл расцениваются как положительные, что свидетельствует об острой или перенесенной инфекции.


Образцы, в которых концентрация IgG-антител (AxSYM Toxo IgG) к T. gondii  2 МЕ/мл и  3 МЕ/мл считаются сомнительными (серая зона). Образцы, интерпретируемые как сомнительные (серая зона), могут содержать низкий уровень IgG. Необходимо повторное обследование пациента.

^

ОГРАНИЧЕНИЯ ПРОЦЕДУРЫ


  • Методика не предназначена для исследования образцов пуповинной крови, новорожденных, образцов биологических жидкостей (мочи, слюны, спермы, амниотической или спинномозговой жидкости).

  • Система анализа AxSYM Toxo IgG не предназначена для диагностики недавно перенесенной инфекции с помощью методики парных сывороток.

  • Концентрация IgG в сыворотке или плазме (с ЭДТА, гепарином, цитратом натрия) в самые первые дни острой инфекции может быть ниже 3 МЕ/мл.

  • При наличии в образцах взвешенных частиц, эритроцитов или при помутнении, перед проведением анализа их необходимо отцентрифугировать при >10000хg в течение 10 мин.

  • Образцы, прошедшие термическую обработку, с высокой концентрацией липидов, с выраженным гемолизом, а также заметной бактериальной контаминацией, исследовать с помощью этой методики нельзя.


^ ОЖИДАЕМЫЕ РЕЗУЛЬТАТЫ

Частота обнаружения IgG-антител к T. gondii варьирует в зависимости от возраста исследуемой популяции и географической области. В данном исследовании обследовали 900 беременных и 500 случайно выбранных индивидов. В 601 (42,9%) случае результат анализа AxSYM Toxo IgG был положительным, в 22 (1,6%) — сомнительным и в 777 (55,5%) — отрицательным. Результаты отображены на рисунке 1.


^ Рис.1 Анализ различных популяций с помощью теста AxSym Toxo IgG

Число образцов



^ AxSym IU/мл

скринированные образцы

случайные индивиды

беременные


СПЕЦИФИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ АНАЛИЗА

ВОСПРОИЗВОДИМОСТЬ

Воспроизводимость анализа исследовали в соответствии с протоколом EP5-T2.20 Национального комитета по клиническим лабораторным стандартам (NCCLS). В трех лабораториях (I, II, III) двукратно, дважды в сутки (с промежутком между сериями не менее двух часов) в течение двадцати дней (итого 80 раз для каждой панели и контрольных образцов) тестировали тринадцать панелей сыворотки и плазмы, а также отрицательный контроль и положительный контроль. Использовали одинаковые наборы реагентов и единую систему калибровки.

Общую и серийную воспроизводимость оценивали по показателям стандартного отклонения (SD) для каждой панели и контроля и коэффициенту вариации (%CV) для каждой положительной панели и положительного контроля. Результаты исследования воспроизводимости отражены в таблице 1 этого раздела, из них видно, что воспроизводимость результатов (для тестируемых панелей, отрицательного и положительного контроля) оказалась допустимой.


Таблица 1

ВОЗПРОИЗВОДИМОСТЬ АНАЛИЗА AxSYM Toxo IgG

^ Отрицательный контроль

Ла-бор.

Средняя

конц. (МЕ/мл)

Кол-во

исследо-ваний

Внутри серии

Общая

SD

%CV

SD

%CV

I

0,0

80

0,047

Н/Р

0,065

Н/Р

II

0,1

80

0,080

Н/Р

0,851

Н/Р

III

0,0

80

0,032

Н/Р

0,034

Н/Р

^ Положительный контроль

Ла-бор.

Средняя

конц. (МЕ/мл)

Кол-во

исследо-ваний

Внутри серии

Общая

SD

%CV

SD

%CV

I

18,9

80

1,347

7,1

1,803

9,6

II

19,8

80

1,819

9,2

2,041

10,3

III

19,3

80

1,434

7,4

2,007

10,4

^ Панель 1 (сыворотка)

Ла-бор.

Средняя

конц. (МЕ/мл)

Кол-во

Исследо-ваний

Внутри серии

Общая

SD

%CV

SD

%CV

I

0,1

80

0,090

Н/Р

0,117

Н/Р

II

0,3

80

0,116

Н/Р

0,128

Н/Р

III

0,1

80

0,082

Н/Р

0,108

Н/Р

^ Панель 2 (сыворотка)

Ла-бор.

Средняя

конц. (МЕ/мл)

Кол-во

Исследо-ваний

Внутри серии

Общая

SD

%CV

SD

%CV

I

5,0

80

0,354

7,1

0,526

10,6

II

5,2

80

0,284

5,5

0,396

7,7

III

5,0

80

0,366

7,4

0,518

10,5

^ Панель 3 (сыворотка)

Ла-бор.

Средняя

конц. (МЕ/мл)

Кол-во

исследо-ваний

Внутри серии

Общая

SD

%CV

SD

%CV

I

71,7

80

5,270

7,4

7,710

10,8

II

74,6

80

4,473

6,0

5,679

7,6

III

72,1

80

4,523

6,3

8,282

11,5

^ Панель 4 (ЭДТА)

Ла-бор.

Средняя

конц. (МЕ/мл)

Кол-во

исследо-ваний

Внутри серии

Общая

SD

%CV

SD

%CV

I

0,4

80

0,140

Н/Р

0,329

Н/Р

II

0,4

80

0,091

Н/Р

0,136

Н/Р

III

0,2

80

0,083

Н/Р

0,112

Н/Р

^ Панель 5 (ЭДТА)

Ла-бор.

Средняя

конц. (МЕ/мл)

Кол-во

исследо-ваний

Внутри серии

Общая

SD

%CV

SD

%CV

I

5,2

80

0,458

8,8

0,583

11,2

II

5,5

80

0,501

9,1

0,542

9.9

III

5,3

80

0,387

7,3

0,533

10,0

^ Панель 6 (ЭДТА)

Ла-бор.

Средняя

конц. (МЕ/мл)

Кол-во

исследо-ваний

Внутри серии

Общая

SD

%CV

SD

%CV

I

75,3

80

5,310

7,1

8,593

11,4

II

78,0

80

5,266

6,8

8,863

11,4

III

74,3

80

5,646

7,6

8,425

11,4

^ Панель 7 (цитрат натрия)

Ла-бор.

Средняя

конц. (МЕ/мл)

Кол-во

Исследо-ваний

Внутри серии

Общая

SD

%CV

SD

%CV

I

0,2

80

0,077

Н/Р

0,122

Н/Р

II

0,3

80

0,110

Н/Р

0,131

Н/Р

III

0,2

80

0,085

Н/Р

0,114

Н/Р

^ Панель 8 (цитрат натрия)

Ла-бор.

Средняя

конц. (МЕ/мл)

Кол-во

Исследо-ваний

Внутри серии

Общая

SD

%CV

SD

%CV

I

5,3

80

0,366

7,0

0,516

9,8

II

5,4

80

0,452

8,4

0,530

9,9

III

5,2

80

0,309

6,0

0,543

10,5

^ Панель 9 (цитрат натрия)

Ла-бор.

Средняя

конц. (МЕ/мл)

Кол-во

Исследо-ваний

Внутри серии

Общая

SD

%CV

SD

%CV

I

73,2

80

4,615

6,3

7,593

10,4

II

76,1

80

7,705

10,1

8,400

11,0

III

74,8

80

7,811

10,4

9,504

12,7

^ Панель 10 (гепарин)

Ла-бор.

Средняя

конц. (МЕ/мл)

Кол-во

Исследо-ваний

Внутри серии

Общая

SD

%CV

SD

%CV

I

0,1

80

0,050

Н/Р

0,098

Н/Р

II

0,2

80

0,094

Н/Р

0,123

Н/Р

III

0,1

80

0,055

Н/Р

0,089

Н/Р

^ Панель 11 (гепарин)

Ла-бор.

Средняя

конц. (МЕ/мл)

Кол-во

исследо-ваний

Внутри серии

Общая

SD

%CV

SD

%CV

I

5,1

80

0,383

7,6

0,624

12,3

II

5,2

80

0,391

7,6

0,467

9,1

III

5,0

80

0,347

6,9

0,500

10,0

^ Панель 12 (гепарин)

Ла-бор.

Средняя

конц. (МЕ/мл)

Кол-во

исследо-ваний

Внутри серии

Общая

SD

%CV

SD

%CV

I

76,0

80

5,266

6,9

8,256

10,9

II

78,6

80

5,312

6,8

7,392

9,4

III

76,2

80

5,148

6,8

8,139

10,7

^ Панель 13 (сыворотка в разведении 1:10)

Ла-бор.

Средняя

конц. (МЕ\мл)

Кол-во

исследо-ваний

Внутри серии

Общая

SD

%CV

SD

%CV

I

772,8

80

56,089

7,3

81,106

10,5

II

815,4

80

58,034

7,1

62,560

7,7

III

762,5

80

61,596

8,1

84,468

11,1

Н/Р — расчет не проводился


ОТНОСИТЕЛЬНАЯ СОГЛАСОВАННОСТЬ

Анализ на наличие IgG-антител к Toxoplasma gondii с помощью методики AxSYM Toxo IgG на материале 1400 образцов проводился в двух (лаборатории I и II) американских и одной (лаборатория IV) европейской лабораториях. Дополнительно каждый образец исследовался с помощью официально зарегистрированной ИФА тест-системы. Из 1400 исследованных образцов в 21 случае результат оказался сомнительным при использовании AxSYM, в 13 — при использовании ИФА, в 1 — при использовании обеих аналитических систем. Относительная согласованность составила 99,3% (1356/1365) (95%-ный доверительный интервал: 98,8%-99,7%) (таблица 2).


ОТНОСИТЕЛЬНАЯ ЧУВСТВИТЕЛЬНОСТЬ

Из 1400 исследованных образцов 590 оказались положительными при использовании ИФА. При использовании AxSYM Toxo IgG 581 образец оказался положительным, и 2 — отрицатель-ными. Относительная чувствительность составила 99,7% (581/583) (95%-ный довери-тельный интервал: 98,8%-100%) (таблица 2).


ОТНОСИТЕЛЬНАЯ СПЕЦИФИЧНОСТЬ

796 из 1400 исследованных образцов оказались отрицательными при использовании ИФА. При использовании AxSYM Toxo IgG 14 результатов оказались сомнительными, 775 отрицательными и 7 — положительными. Относительная специ-фичность составила 99,1% (775/782) (95%-ный доверительный интервал 98,2%-99,6%) (таблица 2).


ПРИМЕЧАНИЕ: Образцы с сомнительным результатом при использовании ИФА и/или AxSYM Toxo IgG не учитывались при расчете относительной корреляции, относительной чувствительности или относительной специфич-ности.


ПРИМЕЧАНИЕ: 9 образцов с неопределенными результатами анализировали дополнительно с использованием 2-х других официально зарегистрированных методик. Из 2-х образцов, положительных в ИФА, но отрицательных в AxSYM Toxo IgG, после подтверждающего анализа 1 образец был расценен как положительный. Из 7 образцов, отрицательных в ИФА, но положительных в AxSYM Toxo IgG, после подтверждающего анализа 6 были расценены как отрицательные.


^ Таблица 2

Сравнение данных анализов AxSYM Toxo IgG и ИФА






Лаб.I


Лаб.II


Лаб.IV

Суммарный показатель

Относит. согласо-ванность

100%

(343/343)

99,7%

(340/341)

98,8%

(673/681)

99,3%

(1356/1365)

Относит. чувствите-льность

100%

(74/74)

100%

(98/98)

99,5%

(409/411)

99,7%

(581/583)

Относит. специфич-ность

100%

(269/269)

99,6%

(242/243)

97,8%

(264/270)

99,1%

(775/782)


ПРИМЕЧАНИЕ: В лаборатории IV исследовали образцы 30 пациентов с сероконверсией. В 26 из 30 случаев образцы, положительные при использовании теста Sabin-Feldman Dye, оказывались положительными и при использовании AxSYM Toxo IgG Antibody. При сравнении с тестом Dye, методика ИФА дала положительный результат только в 15 из 30 случаев.

Специфичность анализа AxSYM Toxo IgG Antibody исследовали дополнительно на материале 201 образца, в которых были выявлены антиядерные антитела, LE-клетки, ревматоидный фактор, вирус простого герпеса, вирус Эпштейна-Барра, вирус кори, парвовирус, вирус герпеса зостер, иммуноглобулинемия G или М, а также после применения противогрип-позной вакцины. В этих образцах согласованность ИФА и AxSYM Toxo IgG Antibody составила 99,5% (200/201).

Дополнительно исследовали влияние на результаты разных эндогенных параметров, которые могут встречаться в обычной практике. Следующие показатели не оказывали влияния на результат исследования с помощью AxSYM Toxo IgG: гемоглобин 1000 мг/дл, билирубин 20 мг/дл, триглицериды 2000 мг/дл, общий белок 10 г/дл и эритроциты 0,4%.

Ваша оценка этого документа будет первой.
Ваша оценка:

Похожие:

Toxoplasma IgG антитела icon Toxoplasma IgM антитела

Toxoplasma IgG антитела icon Drg® Антитела класса IgG/IgM к бета 2 гликопротеину I (eia-3584)

Toxoplasma IgG антитела icon Антиовариальные антитела (антитела к тканям/антигенам яичника)

Toxoplasma IgG антитела icon Носящим название антитела. С химической точки зрения антитела представляют собой иммуноглобулины,

Toxoplasma IgG антитела icon Антитела к циклическому цитрулиновому пептиду (код 060730)
При воспалении в синовиальной жидкости фермент пептидил-аргинин дезиминаза катализирует превращение...
Toxoplasma IgG антитела icon С. trachomatis, peritoneal fluid, IgA, IgG

Toxoplasma IgG антитела icon Что нам даёт определение специфических IgG-антител к пищевым аллергенам

Toxoplasma IgG антитела icon Тесты на вич-антитела

Toxoplasma IgG антитела icon Инструкция пользователя Лейшмания Igg drg eia-3492 96 Wells в Русский English ведение

Toxoplasma IgG антитела icon Антитела к циклическому цитрулиновому пептиду (код 060730)

Разместите кнопку на своём сайте:
Медицина


База данных защищена авторским правом ©MedZnate 2000-2016
allo, dekanat, ansya, kenam
обратиться к администрации | правообладателям | пользователям
Медицина