|
Скачать 109.06 Kb.
|
КРЕАТИНИН CR 510, 524 Назначение. Для количественного определения in vitro концентрации креатинина в сыворотке, плазме или моче. Кат. No. CR 510 1. Стандарт 1 х 5 мл 2. Пикриновая кислота 1 х 100 мл 3. Гидроксид натрия 1 х 100 мл Кат. No. CR 524 1. Стандарт 1 х 30 мл 2. Пикриновая кислота 3 х 500 мл 3. Гидроксид натрия 3 х 500 мл Принцип метода. В щелочной среде креатинин реагирует с пикратом натрия с образованием окрашенного комплекса. Сбор и подготовка проб. Сыворотка или плазма крови. Моча (при тестировании в рабочем листе анализатора Сапфир-400 задается предварительное разведение в 50 раз) Состав реактивов. 1. Стандарт 177 мкмоль/л 2. Пикриновая кислота 35 ммоль/л Сурфактант 3. Гидроксид натрия 0,32 моль/л Меры предосторожности Набор предназначен только для диагностики in vitro. Не пипетируйте ртом. Соблюдайте обычные при лабораторных процедурах меры предосторожности. ^ 1. Пикриновая кислота (использовать как реагент №2) Содержимое флакона готово к использованию. Стабильно до окончания срока при температуре хранения +15 - +25оС. ^ Содержимое флакона готово к использованию. Стабильно до окончания срока при температуре хранения +15 - +25оС. Рекомендуется не хранить реагент на борту анализатора более 1 недели. Еженедельно желательно обновлять реагент во флаконе на борту анализатора. При длительном (несколько часов) перерыве в работе с данным реактивом, находящемся во флаконе на борту анализатора, рекомендуется флакон закрывать крышкой для предотвращения его контакта с воздухом. ^ Выполнение калибровки рекомендуется проводить с использованием стандарта, входящего в состав данного набора, либо с использованием калибровочной мультисыворотки RANDOX уровень 2 (CAL 2350) или уровень 3 (CAL 2351) Для проведения ежедневного контроля качества рекомендуется использовать контрольную мультисыворотку RANDOX уровень 2 (HN 1530) и уровень 3 (HE 1532). ^ Перечисленные ниже вещества не влияют на результаты данного анализа при их содержании в пробе вплоть до указанных концентраций: билирубин 324,7 мкмоль/л, интралипид 2%, триглицериды 26,77 ммоль/л, гемоглобин 10 г/л. В принципе каждое вещество, имеющее активную метильную группу, может реагировать с пикратом. Это относится к ацетоацетату, ацетону, билирубину, глюкозе, фруктозе, пирувату, мочевой кислоте. В реакцию со щелочным пикратом могут вступать также ряд лекарственных препаратов (аспирин, ампициллин, аскорбиновая кислота, фуросемид, антибиотики цефалоспоринового ряда и др.) и антикоагулянтов (ЭДТА, гепарин, цитрат, оксалат). Глюкоза, мочевая, аскорбиновая кислоты способны превращать пикриновую кислоту в пикраминовую, обладающую максимумом поглощения при длине волны 482 нм, что приводит к ложному завышению результатов определения креатинина. К «некреатининовым» хромогенам, вступающим в реакцию Яффе, относят глюкозу, аскорбиновую кислоту, гуанидин, ацетон, цефалоспорины, кетокислоты — ацетоуксусную и пировиноградную. Перечисленные псевдокреатинины способствуют ложному завышению уровня «истинного» креатинина в сыворотке и плазме, определяемого методом Яффе по двухточечной кинетике, примерно на 18 мкмоль/л, а в низком диапазоне измерений еще более значительно. Для того, чтобы компенсировать эти интерференции величину 18 мкмоль/л следует вычитать из полученного результата (только для сыворотки и плазмы) при расчете значений креатинина. Самостоятельно вычитание не проводите, в программе для биохимического анализатора Сапфир-400 устанавливается данный компенсационный вычет (-18). Кроме того, некоторые лекарственные препараты, в частности например, триметоприм и циметидин приводят к повышению уровня креатинина в сыворотке и плазме за счет торможения тубулярной секреции креатинина в почках. При определении креатинина решающее значение приобретает величина рН, которая должна быть постоянной 12–12,5. Зависимость чувствительности реакции от значения рН настолько велика, что концентрация щелочи в среде может играть решающую роль. В связи с этим нельзя пользоваться «старыми» растворами щелочи (требуются растворы гидроксида натрия с точной концентрацией, не содержащие примесей карбонатов). Карбонаты в щелочном растворе образуются при длительном контакте раствора щелочи с углекислым газом, содержащимся в воздухе. У пациентов с низкой мышечной массой и соответственно с низким уровнем креатинина сыворотки метод Яффе систематически завышает уровень креатинина на величину от 20% до 80%. Поскольку компенсационный вычет программой анализатора будет применяться и к результату по моче, то результат по моче необходимо пересчитать самостоятельно по формуле: (18 х 50) + результат (мкмоль/л) Значения нормы. В сыворотке и плазме Мужчины 53 - 97 мкмоль/л Женщины 44 – 80 мкмоль/л В моче 8,84 – 13,3 ммоль/сутки Линейность. Метод линеен до 1200 мкмоль/л в сыворотке и плазме, до 44,2 ммоль/л в моче. Чувствительность. Минимально выявляемая концентрация креатинина в пробе, определяемая с приемлемым уровнем воспроизводимости составляет 8 мкмоль/л. ^ с русскоязычной программой Название Креат (пример) ИНФОРМАЦИЯ О ДАННЫХ Единицы мкмоль/л Точность 0 Параметры анализа Тип END Осн.ДВ 505 Всп.ДВ 570 Коррекция Наклон СДВИГ Y= 1 X+ -18 Калибровка Тип Линейный 1 Стандарт
^
^ Тип ○ 1-реаг ● 2-реаг
ОБРАБОТКА ДАННЫХ Считывание
Предел абсорбции Нижн. 0 Верхн. 2.5 ПРЕДЕЛ КОН.Т. 2.5 ЛИНЕЙНОСТЬ (%) 15 Авторазвеление образца Развести ● 99:Разв.1 ○ 100:Разв.2 ^ Авторазведение по ● вкл ○ выкл заданному пределу абсорбции Нижн. ○ вкл ● выкл Верхн ○ вкл ● выкл ^ ○ вкл ● выкл ● вкл ○ выкл
^ с англоязычной программой Item Name CREAT (пример) DATA INFORMATION Units mkmol/l Decimals 0 ANALYSIS TYPE END Main W.Length 505 Sub W.Length 570 CORR SLOPE INTER Y= 1 X+ -18 CALIBRATION TYPE Linear STANDARD
NORMAL RANGE
ASPIRATION KIND ○ Single ● Double
R1 Blank ● Water-Blank ○ R1-Blank 1 ^ READ
ABSORBANCE LIMIT LOW. 0 HIGH 2.5 ENDPOINT LIMIT 2.5 LINEAR CHECK (%) 15 Dilution Diluent ● 99:Dil1 ○ 100:Dil.2 Auto Rerun SW Auto Rerun Condition (Absorbance) ● On ○ Off Absorbance Range Lower ○ On ● Off Higher ○ On ● Off Auto Rerun Range (Result) ○ On ● Off ● On ○ Off
|