Рис. Алгоритм обследования пациента на нсv-инфекцию

Скачать 43.24 Kb.

Название	Рис. Алгоритм обследования пациента на нсv-инфекцию
Дата	08.04.2013
Размер	43.24 Kb.
Тип	Документы

Содержание

Цели обнаружения вируса гепатита С.
Методы обнаружения РНК ВГС.
Количественное определение РНК

ВИРУСНЫЙ ГЕПАТИТ C (HC - от англ. Hepatitis C Virus)

Вирус гепатита С относится к семейству Flaviviridae и. был идентифицирован в 1989 году, как главный этиологический факторпосттрансфузионных гепатитов у людей. С открытием НСV начался процесс кардинального пересмотра этиопатогенеза и лечения хронических аутоиммунных гепатитов и криптогенных циррозов печени. По данным ВОЗ около 3% мирового населения инфицированы НСV. При этом ежегодно в мире регистрируется более одного миллиона новых случаев НСV-инфекции, что соответствует уровню пандемии. Особенностями НСV- инфекции является высокая частота хронизации (от 30% до 95% в зависимости от генотипа вируса), длительное бессимптомное или мимикрирующее под другие болезни течение, возможность трансплацентарной и сексуальной передачи инфекции (рис.1).

Рис.1. Фазы течения НСV-инфекции

Рис. 2. Алгоритм обследования пациента на НСV-инфекцию

На рисунке 6 представлен алгоритм обследования пациента на НСV-инфекцию. Необходимо помнить, что у пациентов, инфицированных вирусом гепатита, С возможны несовпадения между результатами определения антител и РНК вируса.

Ложноотрицательные результаты в ИФА при положительной ПЦР имеет место в трёх ситуациях:
1. исследование произведено в ранние сроки после заражения, или в так называемую фазу «серологического окна», которое длится от 2 недель до 6 месяцев. Это является основной причиной того, что методами ИФА в сыворотке крови не всегда удается обнаруживать антитела против вируса гепатита С;
2. у иммуносупрессивных пациентов, в частности, у ВИЧ-инфицированных, онкологических и туберкулёзных больных;
3. при инфицировании редкими генотипами НСV-инфекции, например, 4 и 5 субтипами вируса С.

Негативная ПЦР при положительном ответе в ИФА чаще всего бывает вследствие низкой концентрации вируса в крови (порог аналитической чувствительности) или при действительной элиминации патогена из организма, но при этом антитела к вирусу гепатита С ещё могут циркулировать в крови до двух лет. В целом необходимо помнить, что серологическая диагностика НСV-инфекции, т.е. выявление специфических антител класса M и G, решает задачу этиологического диагноза ВГ, но не определяет характер и прогноз инфекционного процесса. Более того, тест-систем ИФА для практического здравоохранения с целью определения антигенов вируса гепатита С вообще не существует.

Таким образом, применение ПЦР позволяет выявлять вирус гепатита С на самом раннем этапе инфекционного процесса, поскольку РНК вируса гепатита С может обнаруживаться в сыворотке крови уже через неделю после инфицирования.
Ещё одной уникальной возможностью, которой обладает метод ПЦР, является определение генетической полиморфности вируса гепатита С. В настоящее время выделяют 6 основных генотипов вируса гепатита С, которые в свою очередь делятся на множество субтипов. В странах СНГ преобладающими являются 1, 2 и 3 генотипы ВГС, причем наличие субтипа 1b является наименее благоприятным признаком течения и успешной терапии НСV-инфекции. Метод ПЦР позволяет также определить перинатальное заражение ребёнка от НСV-инфицированной матери.

Таким образом, в диагностике, оценке прогноза и успеха противовирусной терапии НСV-инфекции метод ПЦР не имеет себе равных.

Молекулярно-биологические аспекты диагностики вирусного гепатита С

^ Цели обнаружения вируса гепатита С.

Целями выявления наличия ВГС являются: диагностика заболевания (острый и хронический гепатиты С), определение концентрации вируса в крови, выбор метода лечения, его коррекция в процессе противовирусной терапии, а также контроль эффективности лечения.

^ Методы обнаружения РНК ВГС.

Современный этап лабораторной диагностики гепатита С (HCV) можно охарактеризовать как этап начала широкого применения молекулярно-биологических методов выявления РНК HCV.

Метод полимеразнной цепной реакции - в настоящее время наиболее широко применяемый методический прием, лежащий в основе практически всех молекулярно-биологических методов детекции РНК HCV. Причем определение РНК HCV возможно как в качественном, так и количественном варианте, что особенно важно для назначения, мониторинга и оценки эффективности применяемой терапии.

Массовое внедрение ПЦР диагностики по определению РНК HCV поставило перед органами практического здравоохранения задачи перехода на новый уровень проведения лабораторных исследований.

^ Количественное определение РНК HCV

Для оценки концентрации РНК ВГС применяют количественный вариант ПЦР. Первоначально концентрацию РНК HCV пытались охарактеризовать порядковыми величинами, например "+", "++" и т.д., визуально отражающими интенсивность полос, полученных при электрофорезе продуктов амплификации, или же методом конечных разведений, т.е по наличию позитивного результата в конечной точке титрования. Трудности стандартизации всех этапов ПЦР не позволяют объективно оценить концентрацию РНК HCV, что приводит к существенным ошибкам трактовки полученных результатов.

В настоящее время результаты исследования выражают в количественных единицах: количество копий РНК HCV, содержащихся в 1 мл., в абсолютном или логарифметическом выражении (log₁₀). Исходя из того, что концентрация обнаруженной РНК HCV отражает количество вирусных частиц, данный показатель обозначают как "вирусный эквивалент (eq)", с добавлением приставки k (килограмм, тысяча) или М (миллион). Еще одним способом выражения количества вирусных частиц являются их весовые эквиваленты. Например, в граммах или пикограммах (1 pg соответствует приблизительно 1 миллиону eq). Разнообразие применяемых величин создает трудности трактовки результатов, полученных в различных лабораториях. Поэтому комитет экспертов ВОЗ по биологической стандартизации изготовил "международный стандартный образец", содержащий РНК HCV (лиофильно высушенная сыворотка крови, содержащая РНК HCV 1-го генотипа), концентрация которой выражена в международных единицах (IU/mL). Специальные коэффициенты позволяют пересчитывать полученные показатели концентрации в международные единицы. В настоящее время допустимый разброс ответа анализа составляет 0,5 log₁₀.

Методы генотипирования РНК HCV

Определение принадлежности HCV к определенному генотипу и субтипу нашло свое применение для решения не только чисто научных, но и практических вопросов. Например: поиск источника инфекции во время вспышек гепатита С или прогнозирование эффективности применяемой терапии.

"Золотой стандарт" генотипирования HCV - непосредственное определение первичной структуры РНК HCV с его последующим филогенетическим анализом, что позволяет четко охарактеризовать данный изолят вируса..

плохо

не очень плохо

средне

хорошо

отлично

Ваша оценка этого документа будет первой.

Ваша оценка:

	Правила проведения обследования на вич-инфекцию		Алгоритм обследования и ортопедического лечения больных с заболеваниями пародонта Этиология пародонтита
	Алгоритм диагностики: направлен на установление диагноза, соответствующего модели пациента, исключение		Задачи урока: раскрыть три причины заболевания почек нарушение диеты и водного режима, нисходящую
	Методика проведения гигиенических индексов Методика проведения пародонтальных индексов. Сбор данных Порядок обследования пациента: внешний и внутренний осмотр, пальпация, перкуссия		Алгоритм диагностической программы при подозрении на заболевания органов грудной полости. Физикальные
	1. Данные обследования пациента заносятся в		Рис. 3 Распределение патологии жкт в г. Норильске в зависимости от северного стажа Рис. Частота встречаемости
	Методика обследования больного в клинике ортопедической стоматологии. История болезни. Особенности		Положение пациента в постели. Способы транспортировки пациента. Биомеханика тела медицинского работника

Рис. Алгоритм обследования пациента на нсv-инфекцию

Похожие: