Актуальные вопросы современной медицины
|
|
Скачать 1.79 Mb.
|
^
Д.В. Яковенко, Я.О. Ермоленко401 групп фармацевтического факультетаСекция экспериментальной медицины^Одно из главных свойств кожи - регенерировать, восстанавливаться после повреждений. Процессы репарации имеют большое значение для выживания. От скорости протекания регенераторных процессов в коже зависит эпителизация повреждений, послеоперационное восстановление целостности дермы, заживление пупочной ранки. Последнее имеет особое значение в неонатальном возрасте. Замедленная репарация пупочной ранки определяет возможность септических осложнений, особенно на фоне иммунологического дефицита, сопутствующего детям с антенатальной патологией. Цель нашей работы заключалась в изучении пролиферативной активности различных клеточных популяций кожных покровов у новорожденных животных, перенесших антенатальную гипоксию. Материалы и методы: Самок белых крыс подвергали гипоксии с 14 по 19 день беременности. Крыс помещали в барокамеру натощак и "поднимали" на высоту 9000 метров над уровнем моря. Исследовали состояние регенеративных процессов к коже новорожденных белых крыс. Последствия антенатальной гипоксии пытались коррегировать антиоксидантами различной природы. Использовали полифенольный антиоксидант дегидрокверцетин (ДГК) и пептидный антиоксидант неопиатный аналог лей-энкефалина (НАЛЭ). Исследуемые вещества вводили новорожденным животным с 2 по 6 сутки жизни внутрибрюшинно (ДГК – в дозе 50 мг/кг; НАЛЭ – в дозе 100 мкг/кг). В биоптатах кожи новорожденного потомства оценивали количество ДНК-синтезирующих эпителиоцитов и фибробластов (индекс меченных ядер - ИМЯ) и среднее число треков серебра над ядром - показатель интенсивности метки (ИМ). ИМЯ подсчитывалось при просмотре 1000 ядер и выражали в процентах. Мечеными считались ядра, над которыми проецировалось не менее 5 зерен серебра. ИМ - среднее число треков над ядром, оценивалась путем подсчета зерен серебра над 50 ядрами. В исследовании было использовано 80 животных. Результаты были обработаны статистическими методами. ^ Проведенные нами эксперименты свидетельствуют, что у новорожденных животных, перенесших антенатальную гипоксию, наблюдается достоверное снижение ИМЯ эпителия кожи на 29,7%, что свидетельствует о снижении пролиферативного пула. Использование антиоксидантов нивелирует отличие экспериментальной группы от интактного контроля (ИМЯ эпителия в контроле – 10,79 + 1,38%; антенатальная гипоксия –7,59 + 0,68%*; ДГК + гипоксия – 9,72±1,73%; НАЛЭ + гипоксия –9,08±1,19%). Интересно отметить, что угнетение пролиферативной активности после антенатальной гипоксии имело место только в популяции эпителиоцитов кожи, в то время как в популяции фибробластов дермы каких-либо отклонений пролиферативной активности выявлено не было. Известно, что популяция фибробластов относительно устойчива к действию гипоксии. Дополнительные исследования по оценке пролиферативной активности фибробластов, полученных от животных, перенесших антенатальную гипоксию, были получены in vitro. В первичной культуре фибробластов дермы, полученной от новорожденных животных, перенесших антенатальную гипоксию не было зарегистрировано достоверного изменения ИМЯ (контроль: 13,97 + 1,73, опыт: 10,90 + 2,06 ). Однако, имело место достоверное увеличение показателя интенсивности метки и отчетливая тенденция к увеличению плотности клеточной культуры, что говорит об увеличении пролиферативного потенциала фибробластов животных подопытной группы. Выводы: 1. Антенатальная гипоксия вызывает достоверное снижение пролиферативной активности эпителия кожи новорожденных белых крыс. 2. Использование антиоксидантов биофлаваноидной или пептидной природы нивелирует подавление пролиферативной активности эпителия у животных, перенесших антенатальную гипоксию. 3. Действие антенатальной гипоксии не изменяет пролиферативную активность фибробластов кожи in vivo, а in vitro зарегистрировано ее увеличение. ^ ПРИ ЭТАНОЛ-ИНДУЦИРОВАННОЙ ГАСТРОПАТИИ С.С. Животов 101 группа, лечебный факультет Секция химические дисциплины Кафедра химии Научные руководители: к.м.н., доцент Н.Н. Минаева, к.м.н., доцент Е.Ю. Животова Различные состояния организма, такие как «здоровье или болезнь» - «адаптация или дезадаптация» - во много определяются наличием оптимального соотношения между восстановленными и окисленными формами компонентов антиоксидантной системы. Широкое участие свободнорадикальных процессов в развитии и течении различных патологических состояний, затрагивающих все без исключения органы и системы, предполагает возможность профилактики и коррекции таких нарушений фармакологическими средствами. В связи с чем для поддержания гомеостаза обоснованным является применение лекарственных препаратов, способных предотвращать избыточный синтез активных метаболитов кислорода (АФК), повышать содержание или активность антиоксидантных систем организма и нормализовать метаболические процессы в клетках. Даларгин (Tyr – D-Ala – Gly – Phe – Leu – Arg) – вещество пептидной природы, синтетический аналог лейцин-энкефалина, который является эндогенным опиоидным пептидом. Препарат успешно применяется в клинической практике при лечении язвенной болезни желудка и двенадцатиперстной кишки у взрослых, в комплексном лечении эрозивно-язвенной патологии желудка и двенадцатиперстной кишки у детей. Пептид стимулирует репаративные процессы в слизистой оболочке желудка и двенадцатиперстной кишки, подвздошной кишки, толстого кишечника. Даларгин обладает выраженной антиоксидантной активностью, подавляя процессы образования свободных радикалов как в изолированных органах лабораторных животных, так и на уровне целого организма. Пептид способен сдвигать баланс между окисляющими и восстанавливающими компонентами свободнорадикального статуса как в условиях нормы, так и на фоне окислительного стресса. В нашей экспериментальной работе на белых лабораторных мышах выяснено, что даларгин оказывает положительное влияние на течение экспериментальных этанол-индуцированных язв. Язвы слизистой оболочки желудка, вызывали при помощи зондового введения 96 % этанола. Средняя площадь язвенно-эрозивного поражения слизистой оболочки желудка (СОЖ) у животных, получавших этанол, составила 10,32 ± 0,96 мм² (при отсутствии подобных изменений в контроле). Применение даларгина способствовало уменьшению площади язвенно-эрозивных дефектов в 1,52 раза (этанол - 10,32 ± 0,96 мм²; этанол + даларгин - 6,77 ± 1,66 мм²). При воздействии этанола на слизистую оболочку желудка имеют место несколько повреждающих механизмов. Одним из них является формирование на уровне органа и организма в целом окислительного стресса. Введение пептида, обладающего антиоксидантными и антирадикальными свойствами, на наш взгляд, является одним из возможных путей, способствующих заживлению язвенного дефекта слизистой оболочки желудка при этанол-индуцированных гастропатиях. ^ С. И. Зубенко 302 группа лечебного факультета, Е. В. Белоусов 207 группа педиатрического факультета Секция экспериментальной биологии и медицины Кафедра нормальной физиологии, ЦНИЛ Научный руководитель: д. м. н. Сазонова Е. Н. Внутриутробная гипоксия (ВУГ) является универсальным повреждающим фактором в системе «мать-плод» и сопровождает большинство патологических состояний беременности. В миокарде млекопитающих, подвергнутых ВУГ, развивается оксидативный стресс. При этом в избытке образуются активные метаболиты кислорода, которые могут изменять ход пролиферативных процессов в миокарде. Известна ведущая роль ранних периодов онтогенеза для становления структурного гомеостаза миокарда млекопитающих. Целью нашей работы было исследование отдаленных последствий ВУГ на некоторые структурные показатели миокарда половозрелых белых крыс. ВУГ в условиях эксперимента моделировали гипобарическим воздействием (9000 м над уровнем моря, с экспозицией 4 часа) на беременных самках белых крыс с 14 по 19 день гестации. Оценку последствий ВУГ проводили у потомства - новорожденных 1-суточных крысят, а также половозрелых (60 суточных) крысах-самцах. Исследовали массу сердца и количество ядрышек в ядрах кардиомиоцитов. Для изучения показателей ядрышкового аппарата (ЯОР) изготавливали гистологические препараты, окрашенные азотнокислым серебром. Подсчитывали среднее количество ЯОР путем просмотра не менее 150 ядер в субэндокардиальном слое левого и правого желудочков. Для изучения скорости и активности синтеза ДНК в кардиомиоцитах использовали методику авторадиографии с меченым Н3-тимидином. Подсчитывали среднее количество меченых ядер на 1000 кардиомиоцитов (ИМЯ) и среднее количество меток в одном ядре в не менее чем 50 меченых ядрах (ИМ). Полученные данные обрабатывались в программе «Statistica 6.0». ^ . Показатель ИМЯ у новорожденных крысят подопытной группы был достоверно снижен по сравнению с контрольными параметрами и составил 13,92±0,15% и 9,90±0,15% (в контрольной и гипоксической группах, соответственно). Уменьшение показателя составило 29%. Зарегистрированное снижение пролиферативной активности кардиомиоцитов в критический период развития миокарда может иметь существенные последствия для тканевого гомеостаза сердца. Масса сердца 60-суточных крыс-самцов подопытной группы была достоверно ниже контрольного параметра. Этот показатель составил 914,17 + 24,63мг в контрольной группе и 810,87 + 18,35 мг в подопытной, снижение показателя на 11%, р=0,02. При анализе параметров ЯОР нами было зарегистрировано достоверное снижение количества ядрышек в кардиомиоцитах правого желудочка животных подопытной группы: контроль – 2,01 +0,04; опыт – 1,83+0,04; отклонение на 9%, р=0,006 Показатели ядрышкового аппарата отражают активность анаболических белок-синтетических процессов в клетке. Выводы: 1) Внутриутробная гипоксия достоверно снижает ДНК-синтетическую активность кардиомиоцитов желудочков 1-суточных белых крыс. 2) Внутриутробная гипоксия приводит к снижению количества ядрышек в кардиомиоцитах правого желудочка половозрелых белых крыс. 3) У половозрелых белых крыс, перенесших ВУГ имеет место снижение абсолютной массы сердца. Результаты проведенного исследования позволяют утверждать, что антенатальная гипоксия индуцирует отсроченные морфогенетические эффекты в миокарде. Выявленные последствия внутриутробной гипоксии могут изменять реакцию миокарда на патологические воздействия, включая ишемию-реперфузию. ^ М.А. Ивасюк 211 группа, лечебный факультет, О.В. Дещеня 207 группа, педиатрический факультет Секция экспериментальной биологии и медицины Кафедра нормальной физиологии, ЦНИЛ Научный руководитель: д.м.н. Е.Н.Сазонова Печень – самая массивная железа и самый крупный непарный орган человека. Болезни печени входят в число самых распространенных причин смерти в развитых странах. Практически все патологические процессы, протекающие в печени, сопровождаются тканевой гипоксией и оксидативным стрессом. Препаратами, ограничивающими активность процессов свободнорадикального окисления, являются антиоксиданты. Однако сведения о влиянии антиоксидантов на регенеративную и анаболическую активность клеток печени являются малоизученными. Целью исследования было изучить показатели структурного гомеостаза печени новорожденных млекопитающих после введения растительного антиоксиданта дигидрокверцетина. Дигидрокверцетин — это нативный (т.е. с ненарушенной природной структурой) флавоноид антиоксидантной группы Р-витаминов. На сегодняшний день он является эталонным антиоксидантом, и работает на уровне клеточных мембран. Его антиоксидантное действие существенно превышает уровень действия широко известных витаминов А, С и Е. В ходе работы были исследованы новорожденные белые беспородные крысы неонатального возраста, которым вводился антиоксидант – дигидрокверцетин и оказываемое им влияние на пролиферативную и анаболическую активность гепатоцитов. Дигидрокверцетин вводили новорожденным крысам в дозе 50 мг/кг внутрибрюшинно со 2-х по 6-е сутки жизни. Анализ ДНК-синтетической активности и показателей ядрышкового аппарата гепатоцитов производили через 24 часа. Для обнаружения ядрышкового организатора в ядрах гепатоцитов пользовались гистологическими препаратами, окрашенными азотнокислым серебром по методике Ag NORS. Состояние ДНК-синтетической активности гепатоцитов оценивали с помощью авторадиографии. Подсчитывали индекс меченых ядер с 3H-тимидином, отражающий среднее количество ДНК-синтезирующих ядер, а также интенсивность метки, которая указывает на скорость ДНК-синтетической активности гепатоцитов. В результате исследования было выявлено, что введение ДГК достоверно увеличивает индекс меченых ядер гепатоцитов на 31,2 %. Возрастание индекса меченых ядер свидетельствует об увеличении пролиферативного пула. Имело место также достоверное повышение интенсивности метки на 36,5 %, что косвенно свидетельствует об увеличении скорости ДНК-синтетических процессов. Также наблюдалось увеличение на 8,8% числа зон ядрышковых организаторов. Последний параметр указывает на усиление анаболической активности гепатоцитов. Из результатов исследования можно сделать выводы, что растительный антиоксидант дигидрокверцетин стимулирует способен стимулировать анаболическую и пролиферативную активность гепатоцитов новорожденных млекопитающих. ^ Л.В. Коноплёва 211 группа, лечебный факультет А.В. Шевнина 204 группа, педиатрический факультет Секция экспериментальной биологии и медицины Кафедра нормальной физиологии, ЦНИЛ Научный руководитель: д.м.н Е.Н.Сазонова Казоморфины – экзогенные опиоидные пептиды, продукты гидролиза казеина молока. Казоморфины играют важную роль в раннем постнатальном онтогенезе млекопитающих. Установлена способность β-казоморфинов влиять на поведенческие реакции и материнско-детское взаимодействие (Дубынин В.А., Ивлеева Ю.А., Малиновская И.В., 2001 ). Существует гипотеза о роли казоморфинов в развитии аутических расстройств (Соколов О.Ю., Кост Н.В.,2007). Вместе с тем, малоизученны структурные эффекты казоморфина. Целью исследования было выяснить влияние β-казоморфина-7 на анаболическую активность симпластов языка и гладких миоцитов кишечника новорожденных млекопитающих. ^ β-казоморфин-7 (Tyr-Pro-Phe-Pro-Gly-Pro-Ile) вводили новорожденным белым крысам в дозе 1мг/кг ежесуточно со вторых по шестые сутки жизни. Для исследования использовали биоптаты языка и двенадцатиперстной кишки. Окраску препаратов производилась азотнокислым серебром по методу AgNORs. Анаболическую активность симпластов языка и гладких миоцитов двенадцатиперстной кишки оценивали по количеству ядрышек, окрашенных азотнокислым серебром. Согласно результатам проведенного исследования введение β-казоморфина-7 индуцировало достоверное увеличение количества зон ядрышкового организатора в симпластах языка на 54,47%. Язык занимает важное место функциональной системе питания. В частности, он принимает участие в акте сосания, являющимся одним их основополагающих актов роста и развития организма. Повышение анаболической активности симпластов языка является позитивным изменением. В гладких миоцитах двенадцатиперстной кишки мы получили эффект иной направленности. Зарегистрировано достоверное уменьшение количества зон ядрышкового организатора в гладких миоцитах двенадцатиперстной кишки на 6,96%. Возможно, угнетающее влияние β-казоморфина-7 на анаболическую активность гладких миоцитов кишечника опосредовано взаимодействием пептида с опиоидными рецепторами. В гастроэнтерологии используются опиоидные лиганды, оказывающие антидиарейное воздействие. Вероятно, снижение анаболической активности при воздействии на гладкие миоциты β-казоморфина-7 имеет ту же природу. Механизмы и физиологическое значение выявленных эффектов β-казоморфина-7 требуют дальнейшего исследования. ^ Г.Д. Сунозова, Е.К. Иванов 205 группа, педиатрический факультет. Секция экспериментальной биологии и медицины Кафедра нормальной физиологии, ЦНИЛ Научный руководитель: д.м.н. Сазонова Е.Н. Открытое поле - это метод количественного измерения компонентов поведения животного, помещенного в новое открытое пространство, выбраться из которого ему мешает огораживающая пространство стенка. Метод открытого поля является основным способом исследования поведения животных и используется повсеместно. Между тем этот метод не достаточно стандартизован в некоторых принципиальных моментах, от которых зависит, результат исследования. Целью исследования было выявить различия в показателях оценки поведенческих реакций в открытых полях одной площади, но разной конфигурации (круглом и квадратном) Материалы и методы: Было изготовлено две модели «открытого поля»: 1) круглая арена диаметром 1 м, стенкой 20 см и 2) квадратном поле со стороной 1м и стенкой 20см, пол которых размечен вертикальными и горизонтальными линиями. В течении 3 мин регистрировали подвижность животных (30-суточных белых крыс) - по числу пересеченных периферических и центральных секторов поля (горизонтальная двигательная активность) и количеству стоек (вертикальная двигательная активность), а также количество дефекаций, как результат вегетативных нарушений и время груминга, как проявление антистрессового поведения. В эксперименте использовались 104 белые крысы. Полученные данные обрабатывались в программе «Statistica 5.0». Согласно результатам проведенного исследования животные проявляют большую двигательную активность (как горизонтальную, так и вертикальную) в круглом поле. По сравнению с аналогичными параметрами, зарегистрированными в квадратном поле, на круглой арене было примерно втрое увеличено количество стоек и посещенных периферических квадратов. При этом, показатели груминга и дефекаций не зависели от типа открытого поля. Механизмы наблюдаемых поведенческих отличий требуют дальнейшего исследования. ^ самок белых крыс О.А.Рябухина 601 группа, педиатрический факультет. Секция экспериментальной биологии и медицины Кафедра нормальной физиологии, ЦНИЛ Научный руководитель: д.м.н. Сазонова Е.Н. Гипоксия является широко распространенным явлением и возникает как в условиях дефицита кислорода во внешней среде, так и при различных болезнях и патологических процессах, связанных с нарушением функций дыхательной, сердечно-сосудистой систем, а также транспортной функции крови и работы ферментов. Во всех случаях в конечном итоге происходит снижение доставки и потребления кислорода до уровня, недостаточного для сохранения структуры, поддержания на должном уровне метаболизма и функциональных возможностей органов и тканей (Агаджанян Н.А., Башкиров А.А., 1978). Недостаточное снабжение кислородом организма плода - антенатальная гипоксия – выявляется при патологии беременности любого типа и может иметь значительные отдаленные последствия для организма в последующие периоды онтогенеза. Целью данной работы было изучить влияние антенатальной гипоксии на развитие репродуктивной системы самок белых крыс. Беременных крыс подвергали гипоксическому воздействию с 14 по 19 сутки гестации. Гипоксию моделировали путем «подъема» животных в барокамере «на высоту 9000 м». что соответствовует давлению 224 мм рт ст и насыщению кислородом 42 мм рт ст. Разрежение воздуха в камере осуществляли с помощью вакуума, контролируя величину разрежения по манометру. Исследовали потомство подопытных самок. Группу контроля составляло потомство интактных животных. Всего в эксперименте было использовано 46 белых крыс. Оценивали сроки полового созревания крыс-самок, перенесших антенатальную гипоксию, по тесту открытия вагины. Выявлено, что половое созревание самок подопытной группы наступает достоверно позже, по сравнению с контрольными животными. В группе контроля исследуемый показатель составил 54,76 + 0,76 суток , в то время как в подопытной группе 58,07 + 0,95 суток * (р=0,01). Полученные нами данные согласуются с результатами van Weissenbruch M.M. et al (2005), описывавшими замедление полового созревания у девочек с задержкой внутриутробного развития. В нашем исследовании мы провели скрещивание половозрелых крыс-самок, перенесших антенатальную гипоксию, и крыс-самок контрольной группы с интактными самцами. Течение беременности также было интактным – никаких воздействий во время беременности не проводилось. Анализировали параметры 20-суточных плодов. Было выявлено, что у крыс-самок подопытной группы имело место достоверное уменьшение количества 20-суточных плодов: в контроле - 12,40 + 0,81; в опыте - 8,33 + 1,48* (р=0,048). Масса плодов у животных, перенесших антенатальную гипоксию, также была достоверно ниже: контроль - 1,492 + 0,025 г; опыт - 1,373 + 0,03* (р=0,004). Результаты проведенного экспериментального исследования позволяют утверждать, что антенатальная гипоксия индуцирует существенные нарушения функционирования женской репродуктивной системы. Влияние антенатальной гипоксии на некоторые структурно-функциональные показатели головного мозга белых крыс |
Ваша оценка этого документа будет первой.
Ваша оценка:
Похожие:
База данных защищена авторским правом ©MedZnate 2000-2016
allo, dekanat, ansya, kenam
обратиться к администрации | правообладателям | пользователям
allo, dekanat, ansya, kenam
обратиться к администрации | правообладателям | пользователям