Обоснование и оценка эффективности диетотерапии при пищевой аллергии у детей в различные возрастные периоды 14. 00. 09 Педиатрия 14. 00. 36 Аллергология и иммунология
|
|
Скачать 0.72 Mb.
|
1 2
|
На правах рукописи МАКАРОВА СВЕТЛАНА ГЕННАДИЕВНА Обоснование и оценка эффективности диетотерапии при пищевой аллергии у детей в различные возрастные периоды 14.00.09 – Педиатрия 14.00.36 – Аллергология и иммунология АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени доктора медицинских наук Москва - 2008 Работа выполнена в ГУ Научный центр здоровья детей Российской Академии Медицинских Наук Научные консультанты: Доктор медицинских наук, профессор Боровик Татьяна Эдуардовна Член-корреспондент РАМН, доктор медицинских наук, профессор Балаболкин Иван Иванович ^ Доктор медицинских наук, профессор Мухина Юлия Григорьевна Доктор медицинских наук, профессор Мазанкова Людмила Николаевна Доктор медицинских наук, профессор Лусс Людмила Васильевна ^ Московская медицинская академия им. И.М.Сеченова Защита диссертации состоится «___»_______________2008 года в ____ часов на заседании диссертационного совета Д 001.023.01 при ГУ Научный центр здоровья детей РАМН по адресу: 119991, Москва, Ломоносовский проспект, 2/62. С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ГУ Научный центр здоровья детей РАМН Автореферат разослан «___»_______________2008 года Ученый секретарь Диссертационного совета, кандидат медицинских наук Тимофеева А.Г. ^ Аллергические болезни в настоящее время занимают ведущее место среди наиболее распространенной хронической патологии в детском возрасте [The International Study of Asthma and Allergies in Childhood (ISAAC) 1998]. Частота пищевой аллергии (ПА) в популяции составляет 1-2,5%, достигая среди детей первых 2-х лет жизни 6-8%, в старших возрастных группах ее распространенность уменьшается и у взрослых составляет около 2% [Sicherer SH, 2006]. ПА рассматривается сегодня как многофакторная патология, в возникновении и развитии которой играет роль целый ряд как генетических, так и средовых факторов. Это является причиной многообразия клинических форм ПА, обусловливает особенности течения заболевания в каждом конкретном случае и диктует необходимость строго индивидуального подхода к назначению лечения, в том числе - диетотерапии. Пероральный путь поступления аллергена приводит к тому, что у большинства больных с ПА выявляются те или иные нарушения со стороны органов пищеварения. Роль не IgE-опосредованных механизмов в формировании гастроинтестинальных проявлений ПА в настоящее время раскрыта не достаточно и требует изучения. В последние годы активно исследуется влияние кишечного микробиоценоза на становление иммунной системы и формирование пищевой толерантности. Различные нарушения в составе микрофлоры кишечника часто выявляются у детей, страдающих ПА [Куваева И.Б., Ладодо К.С., 1991; Балаболкин И.И., Гребенюк В.Н., 1999, Watanabe S. et al, 2003], обнаружены также различия в метаболической активности кишечной микрофлоры у детей с атопией и без атопии [Bottcher M.F. et al, 2000]. Однако патогенетическое значение нарушений в составе кишечной микробиоты у детей с ПА до конца не изучено. Также к настоящему времени не разработаны алгоритмы коррекции биоценоза кишечника у детей с ПА с учетом современных возможностей диетотерапии. Диетотерапия является важной составляющей комплексного лечения ПА, являясь, по сути, этиотропным методом лечения [Боровик Т.Э, 1994, Ревякина В.А., Боровик Т.Э. 2006]. Основное внимание при составлении лечебного рациона уделяется элиминации причинно-значимых продуктов. Вместе с тем, независимо от периода болезни, диета должна обеспечивать физиологические потребности детей в основных нутриентах, витаминах, минеральных веществах. У детей первого года жизни, находящихся на искусственном или смешанном вскармливании, успех диетотерапии во многом зависит от правильного выбора продукта-заменителя грудного молока. Для оптимального решения этой задачи необходима разработка современного дифференцированного научно-обоснованного подхода. Отдельную проблему представляет собой коррекция нутриентного состава рациона у детей более старшего возраста и подростков, длительно страдающих ПА и имеющих ограниченные по составу рационы с исключением важных в нутритивном отношении продуктов. Следует отметить, что сроки соблюдения элиминационной диеты в настоящее время четко не определены. В связи с этим требуется уточнение клинико-иммунологических критериев, определяющих длительность элиминации различных продуктов и сроков их включения в рацион ребенка при расширении питания, а также разработка подходов к коррекции рационов у больных, длительно получающих элиминационную диету, с использованием современных нутрицевтиков. Таким образом, в настоящее время актуальным является оптимизация диетологических подходов к лечению ПА у детей в различные возрастные периоды в зависимости от клинико-патогенетических особенностей заболевания, возраста, нутритивного статуса, морфо-функционального состояния органов пищеварения, показателей кишечного биоценоза, а также разработка новых специализированных продуктов детского питания и оценка их эффективности. ^ Оптимизация диетотерапии при пищевой аллергии у детей в различные возрастные периоды на основании изучения клинико-иммунологических особенностей течения заболевания и состояния кишечного барьера. ^
^ На основании комплексного изучения клинико-иммунологических особенностей течения пищевой аллергии в детском возрасте описаны ее основные клинические формы у детей в различные возрастные периоды. Установлено, что изолированные проявления пищевой аллергии встречаются редко и преимущественно на первом году жизни (19,2% - изолированная кожная и 4,2% - изолированная гастроинтестинальная форма), в большинстве случаев проявления пищевой аллергии носят сочетанный полиорганный характер с вовлечением в аллергический процесс двух и более систем организма. В раннем детском возрасте преобладает кожно-гастроинтестинальная форма пищевой аллергии (74,2%у детей первого года и 88,5% у детей 1-3 лет). Установлено, что частота гастроинтестинальных проявлений пищевой аллергии составляет 84,4% по клиническим данным и 92,9% - при комплексном обследовании (УЗИ брюшной полости, экскреция углеводов с калом, ЭГДС) и не имеет значимых различий в зависимости от возраста больных, однако у детей старших групп (3-10 и 10-17 лет) чаще выявляются признаки структурных изменений органов пищеварения и возрастает доля сочетанного поражения различных отделов ЖКТ. Изучена этиологическая структура пищевой аллергии у детей в зависимости от возраста. Показано, что при комплексной оценке реакции на пищевые аллергены (IgE, IgG, IgG4) у детей первого года жизни с атопическим дерматитом наличие гиперчувствительности к БКМ выявляется в 85% случаев. Впервые установлены лабораторные маркеры тяжести кожного поражения и повреждения гастроинтестинальной системы у детей с пищевой аллергией первого года жизни - повышенный уровень IgE к БСА и β-ЛГ и высокий уровень специфических IgG (4 класс реакции) к БКМ и его фракциям соответственно. Впервые в возрастном аспекте проанализирован уровень IgG4 к пищевым аллергенам у детей с пищевой аллергией и выявлены его статистически значимые различия для 14 из 24 изученных аллергенов. Установлено, что, несмотря на снижение частоты клинических реакций на молочные продукты с возрастом, частота выявления специфических антител к БКМ у детей сохраняется довольно высокой, составляя у больных старшей возрастной группы (10-17 лет) 36%. Изучена частота и характер нарушений биоценоза кишечника у детей с пищевой аллергией и выявлены их характерные особенности в различные возрастные периоды, при этом наиболее выраженные отклонения обнаружены в группе детей первого года жизни. Установлены различия состава микрофлоры кишечника у детей в зависимости от клинических форм пищевой аллергии. Показано, что на фоне комплексного лечения (элиминационной диеты и фармакотерапии) положительная динамика состояния кишечной микрофлоры отмечается у 96% детей с пищевой аллергией, при этом установлено, что на фоне нормализации аэробного компонента микробиоценоза дефицит бифидофлоры сохраняется у 69,2% детей с частичной и у 50% детей – с полной клинической ремиссией. Впервые в возрастном аспекте изучены особенности проницаемости кишечного барьера для макромолекул у детей с пищевой аллергией начиная с периода новорожденности и на протяжении первого года жизни. Показано, что у детей с аллергией в 60% случаев на протяжении неонатального периода обнаруживается парадоксальный рост проницаемости кишечного барьера для макромолекул (α-лактальбумина женского молока), что указывает на задержку формирования кишечного барьера. Установлено, что на протяжении первого года жизни у детей с кожно-гастроинтестинальной формой пищевой аллергии происходит дальнейшее повышение проницаемости кишечного барьера. Впервые выявлена корреляция между всасыванием α-лактальбумина женского молока и протеолитической активностью фекалий. Обнаружена корреляция между всасыванием α-лактальбумина женского молока и уровнем общего IgE, а также уровнем IgG4-антител к белкам коровьего молока, сои, овальбумину куриного яйца. Изучены показатели нутритивного статуса детей с пищевой аллергией в различные возрастные периоды, при этом наиболее значительные дефициты в потреблении основных нутриентов (белков, жиров и углеводов) и кальция, а также отклонения в показателях физического развития обнаружены в старшей группе (10-17лет). Впервые изучена обеспеченность селеном детей с пищевой аллергией. Установлено, что дефицит данного микроэлемента различной степени отмечается у 61,2% детей с данной патологией, повышенный уровень селена в крови - в 17,9% случаев, при этом обеспеченность селеном детей с пищевой аллергией в целом не отличалась от группы детей без атопии того же возраста. Показано, что на фоне строгого соблюдения гипоаллергенной диеты отмечается тенденция к снижению обеспеченности селеном. Впервые для оценки индивидуальной гиперчувствительности к продуктам – заменителям грудного молока применен новый лабораторный метод «ИФА-Лакттест», позволяющий выявлять антитела 3 классов – IgE, IgG, IgG4 - к суммарным белково-пептидным аллергенам детских смесей лечебного и профилактического назначения. На основе данного метода разработан алгоритм подбора специализированных продуктов для детей первого года жизни с аллергией к БКМ. ^ На основании полученных данных об особенностях проявлений пищевой аллергии в различные возрастные периоды разработаны алгоритмы поэтапной диетотерапии при пищевой аллергии у детей, с клинико-лабораторной оценкой эффективности лечения на каждом этапе. Для детей первого года жизни создан алгоритм подбора специализированной смеси-заменителя с учетом клинико-имунологических особенностей заболевания и результатов нового метода определения уровня антител к белково-пептидным фракциям смесей-заменителей грудного молока - «ИФА-Лакттест». На основании полученных данных о состоянии проницаемости кишечного барьера для макромолекул у детей с пищевой аллергией сделан вывод о нецелесообразности использования смесей-заменителей грудного молока на основе цельного белка (соевых смесей, кисломолочных продуктов, смесей на основе козьего молока) на первом и втором этапе диетотерапии даже у детей с легкими формами пищевой аллергии. В зависимости от выраженности клинических проявлений аллергии и характера сенсибилизации к БКМ рекомендуется назначение смесей на основе высоко- или умеренно гидролизованного молочного белка. Доказана эффективность использования «ИФА-Лакттест» для максимальной индивидуализации подбора специализированной смеси. Получено решение РОСПАТЕНТа о выдаче патента на изобретение («Способ составления рациона питания детей с пищевой аллергией», регистрационный номер 2007115824). На основании полученных данных о состоянии кишечного микробиоценоза у детей с пищевой аллергией, как в остром периоде заболевания, так и на фоне комплексной противоаллергической терапии, включающей элиминационную диету, создан алгоритм коррекции дисбиотических отклонений у детей с пищевой аллергией. Обоснована целесообразность и эффективность использования диетотерапии с применением новых специализированных продуктов, обогащенных пре- и пробиотиками, лечебного напитка «Пектовит», как основного метода коррекции состава кишечной микробиоты. Подана заявка на патент РФ («Способ лечения дисбактериоза кишечника у детей с аллергией к белку коровьего молока», регистрационный номер 2008105426). На основании клинико-иммунологических показателей разработаны критерии длительности элиминации причинно-значимого аллергена – при не IgE-опосредованной форме пищевой аллергии не менее 4 месяцев и при IgE-опосредованной пищевой аллергии не менее 6 месяцев и создан алгоритм диетотерапии на этапе расширения рациона. Установлена высокая эффективность применения в диетотерапии детей с пищевой аллергией первого года жизни ряда новых продуктов – специализированных смесей – заменителей грудного молока отечественного производства «Нутрилак пептиди СЦТ», «Нутрилак ГА» - на первом и втором этапах диетотерапии, «Нутрилак соя», «Нутрилак кисломолочный» - на третьем этапе диетотерапии (этапе расширения рациона). Показана хорошая переносимость и эффективность применения у детей с пищевой аллергией новых продуктов прикорма, в основном отечественного производства - консервов на мясной основе «Агуша», фруктовых соков и пюре «Сады Придонья», овощных консервов «Семпер» и установлены их гипоаллергенные свойства, а также - каш, обогащенных про- и пребиотиками «Нутрилак» (гречневая и рисово-кукурузная), «Фрутолино кукуруза с инулином» на первом и втором этапе диетотерапии и «Помогайка» (овес, пшеница с черносливом) – на этапе расширения рациона. Разработаны рационы для детей первого года жизни с использованием гипоаллергенных продуктов прикорма промышленного производства. На основании выявленных нарушений фактического питания у детей с пищевой аллергией старшей возрастной группы доказана необходимость применения специальных нутрицевтиков для коррекции их рационов. Показана эффективность применения препаратов, содержащих органический селен «Витасил-селен», «Луновит плюс» с целью коррекции селенового статуса, а также антиоксидантный эффект препарата «Луновит плюс», содержащего селен и витамин Е. Установлена хорошая переносимость и эффективность профилактического продукта-нутрицевтика «Сироп шиповника «Золотой шар» с витаминами и микроэлементами» в комплексной терапии детей с пищевой аллергией. Установлена эффективность использования препарата нутрицевтика «Энерголам-плюс», его положительное влияние в отношении клинического и психо-эмоционального состояния детей, а также цитохимических показателей. ^ Результаты диссертационной работы внедрены в клиническую практику аллергологического отделения НИИ педиатрии ГУ НЦЗД РАМН, отделения питания здорового и больного ребенка и Консультативно-диагностического центра ГУ НЦЗД РАМН, а также ООО «Детский медицинский центр» Института аллергологии и клинической иммунологии и могут быть рекомендованы для широкого применения в работе педиатрических отделениий, поликлиник и специализированных аллергологических отделений и центров. Разработанные алгоритмы диетотерапии при ПА у детей, алгоритм подбора смеси-заменителя и алгоритм коррекции биоценоза кишечника у детей с ПА включены в программу обучения курсантов цикла «Питание здорового и больного ребенка» Отдела постдипломного профессионального образования ГУ НЦЗД РАМН. Материалы диссертации использованы для разработки пособий для врачей «Лечебное питание детей с атопическим дерматитом» (Москва, 2002), «Атопический дерматит и инфекции кожи у детей: диагностика, лечение и профилактика» (Москва, 2004), «Лечебное питание детей с пищевой аллергией» (Москва, 2005), «Диетотерапия при пищевой аллергии у детей раннего возраста» (Российский аллергологический журнал, 2005, №1, Приложение); информационного письма «Эффективность применения набора реагентов «ИФА-Лакттест» ООО «МНИЦ «Медиан» для диагностики сенсибилизации к продуктам детского питания и оптимизации диетотерапии пищевой аллергии у детей первого года жизни» (Москва, 2007), Национальной программы по оптимизации вскармливания детей первого года жизни (Москва, 2008). ^ Основные положения диссертации доложены на Научно-практической конференции педиатров России «Фармакотерапия аллергических болезней у детей» (Москва, 2002), Всероссийском конгрессе «Государственная концепция «Политика здорового питания в России» (Москва, 2003), III Российском конгрессе «Современные технологии в педиатрии и детской хирургии» (Москва, 2004), Научно-практической конференции «Фармакотерапия в педиатрии. Форум «Дети и лекарства» (Москва, 2005), 8-ом Славяно-Балтийском форуме «Санкт-Петербург-Гастро-2006» (Санкт-Петербург, 2006), I Всероссийском съезде диетологов и нутрициологов «Диетотерапия: проблемы и горизонты» (Москва, 2006), Международном Форуме по детскому, школьному и оптимальному питанию FOCN (Москва, 2007), заседаниях Московскго городского отделения Союза педиатров, Секции детского питания (Москва, 2004 и 2007), и алергологической секции Московского общества детских врачей (Москва, 2004 и 2008), XII Конгрессе педиатров России «Актуальные проблемы педиатрии» (Москва, 2008), Научно-практической конференции педиатров России «Фармакотерапия и диетология в педиатрии» (Иваново, 2088), X Всероссийском конгрессе диетологов и нутрициологов «Питание и здоровье» (Москва, 2008). ^ Диссертация изложена на _______ страницах машинописного текста. Работа включает разделы: введение, литературный обзор, методы и объем исследования, 7 глав собственных наблюдений, обсуждение полученных результатов, выводы, практически рекомендации, указатель литературы, состоящий из ____ отечественных и _____ зарубежных источников. Работа иллюстрирована ____ таблицами и _____ рисунками. ^ Материалы и методы исследования Работа проводилась в период с 1996 по 2008 гг. в отделении питания здорового и больного ребенка (руководитель – д.м.н., профессор Т.Э. Боровик), аллергологическом отделении (руководитель - член корреспондент РАМН, д.м.н., профессор И.И. Балаболкин), отделении для недоношенных детей (руководитель – д.м.н., профессор Г.В. Яцык) и Консультативно-диагностическом центре (руководитель - д.м.н., профессор Л.С. Намазова) ГУ НЦЗД РАМН, а также в детском аллергологическом санатории «Кратово» (главный врач - Н.В. Шарапов). Комплекс специальных лабораторных и инструментальных исследований проводился в отделениях ультразвуковой диагностики (руководитель – д.м.н., профессор И.В. Дворяковский), эндоскопии (руководитель – д.м.н., профессор П.Л. Щербаков), лабораториях ГУ НЦЗД РАМН: клинической биохимии (зав. – д.б.н., профессор М.И. Баканов), клинической вирусологии и серологической диагностики (руководитель – д.м.н., профессор Т.Б. Сенцова), микробиологии (руководитель – д.м.н., профессор Л.К. Катосова), цитохимии (руководитель - д.б.н., профессор С.В. Петричук), лабораториях ГУ НИИ питания РАМН: биохимии и физиологии пищеварения (руководитель – д.б.н., профессор В.К. Мазо), витаминов и минеральных веществ (руководитель – д.м.н., профессор В.Б. Спиричев), микробиологии (руководитель – д.м.н., профессор И.Б.Куваева), иммунологической лаборатории Медицинского научно-исследовательского центра «Медиан» (директор – Л.В.Осипенко). В работе представлены результаты клинического наблюдения, обследования и лечения 462 детей в возрасте от 1 месяца до 17 лет с различными формами ПА. Отдельную группу составил 51 ребенок, обследованный в периоде новорожденности с целью оценки проницаемости кишечника для макромолекул. Учитывая особенности клинических проявлений и назначения питания у детей с ПА различного возраста, все больные были разделены на 4 возрастные группы: I группа – дети до 1 года, II группа – от 1 до 3 лет, III группа – от 3 до 10 лет, IV группа – дети старшего возраста и подростки – 10-17 лет. Таблица 1. Характер ведущей патологии и возрастной состав детей с ПА.
Характер ведущей патологии и возрастной состав обследованных детей с ПА представлен в таблице 1. Для выполнения поставленных задач были использованы: клинические, иммунологические и аллергологические методы исследования, специальные диетологические методы, включая оценку нутритивного статуса, методы оценки состояния кишечного барьера. Клиническое обследование больных проводилось по общепринятому плану и включало анализ анамнестических данных, в том числе семейного анамнеза, особенностей питания матери во время беременности и лактации, характера вскармливания, сроков введения отдельных продуктов и блюд прикорма, наличия побочных реакции на них, случаев отказа от приема определенных продуктов; оценку физического и психо-эмоционального развития ребенка, а также состояние внутренних органов и систем. У детей с атопическим дерматитом выраженность кожных проявлений аллергии оценивали по шкале SCОRAD. Общий план обследования несколько видоизменялся в зависимости от характера патологии и возраста ребенка и включал клинический анализ крови и мочи, ультразвуковое исследование органов брюшной полости, биохимическое исследование крови с определением общего белка, протеинограммы, билирубина и его фракций, активности трансаминаз и ряда других показателей, детям первого года жизни – копрологическое исследование и, по показаниям – исследование экскреции углеводов с калом. Иммунологические и аллергологические методы обследования включали определение иммуноглобулинов A, M, G, E в сыворотке крови, специфических IgE-антител к пищевым антигенам, специфических IgG4-антител к пищевым антигенам, специфических IgG4, IgG и IgE-антител к пищевым антигенам и комплексным антигенам смесей лечебного и профилактического назначения («ИФА- Лакттест»), IgG4 к бактериальным антигенам и тест дегрануляции базофилов под действием бактериальных антигенов, кожные пробы. Определение уровня общего IgE в сыворотке крови проводилось с помощью ИФА с использованием стандартных наборов «ДИА-плюс» (Россия). Уровни IgA, IgM, IgG в сыворотке крови определяли методом радиальной иммунодиффузии в агаре Difco по методу Mancini Y. et al [1965] с использованием отечественных антисывороток и стандартов. Определение уровня специфических IgE антител в сыворотке крови проводилось хемилюминесцентным методом MAST на аппарате CLA-1 MAST-Immunosystem (США). Определение уровня специфических IgG4 антител к 24 пищевым белкам проводилось методом ИФА в соответствии с ранее описанной методикой [Гмошинский И.В. с соавт., 1998]. «ИФА-Лакттест» - представлял собой новый, основанный на ИФА метод определения уровня IgG4, IgG и IgE-антител, специфических к комплексным белково-пептидным антигенам смесей лечебного и профилактического назначения и основным аллергенам первых месяцев жизни. Определение уровня IgG4 к бактериальным антигенам в сыворотке крови проводили методом ИФА. В качестве бактериальных антигенов использовали взвесь убитых бактерий музейных штаммов НИИ им.Л.А.Тарасевича S.aureus Wood 56 и E.coli О55. Для оценки дегрануляции базофилов под действием бактериальных антигенов применяли тест дегрануляции базофилов по методике J.Benveniste в описанной ранее модификации [Макарова С. Г., 1992.]. Кожные скарификационные тесты выполнялись со стандартными пищевыми аллергенами при отсутствии противопоказаний. Специальные диетологические методы включали: изучение фактического питания детей с ПА, их физического развития и нутритивного статуса с оценкой обеспеченности селеном, витамином С, железом; а также оценку показателей ПОЛ, цитохимический анализ, использование психологического теста-опросника САН. Оценка физического развития детей проводилась согласно нормативным непараметрическим (центильным) таблицам, приведенным в инструкции № 5 «Оценка нутритивного статуса тяжело больных детей» [Боровик Т.Э. с соавт., 2002]. Анализ фактического питания проводился опросно-анкетным методом. Качественный состав и энергетическую ценность рациона оценивали по таблицам справочника «Химический состав Российских пищевых продуктов» [Скурихин И.М. и Тутельяна В.А., 2002]. Детям первого года жизни проводили расчет рациона на 1 кг массы тела ребенка в сутки. Полученные данные сравнивали с общепринятыми нормами потребления основных нутриентов [Баранов А.А., Ладодо К.С., 2001]. Детям первого года жизни проводилось составление индивидуального рациона, дети старше года получали специально разработанную для детей с аллергией диету №5 ГА [Баранов А.А., Ладодо К.С., 2001]. Оценка уровня селена в сыворотке крови проводилась с помощью микрофлуориметрического метода [Alfthan G.V., 1984]. Уровни сывороточного железа и общей железосвязывающей способности сыворотки определяли спектрофотометрическим, а содержание трансферрина – иммунотурбидиметрическим методом на биохимическом автоматическом анализаторе «Синхрон СХ-5 дельта» фирмы «Бэкман-Культер» (США). Насыщение трансферрина железом рассчитывали по формуле: сывороточное железо ×100 / ОЖСС крови. Содержание аскорбиновой кислоты в сыворотке крови определялось методом визуального титрования. Оценка состояния перекисного окисления липидов в эритроцитах проводилась с помощью комплексного микрометода [Банкова В.В., 1990], включающего определение уровня общего малонового диальдегида (МДА1) как одного из основных продуктов ПОЛ, его связанной формы (МДА2) и количества свободного МДА (МДА3), а также механического гемолиза (МГ) и перекисного гемолиза (ПГ). Изучение цитохимических показателей лимфоцитов крови проводили количественным методом исследования активности ферментов лимфоцитов периферической крови, предложенным Р.П.Нарциссовым [1998]. С целью оценки интенсивности метаболических процессов определяли функциональную активность митохондрий и лизосом в лимфоцитах периферической крови. Психологический тест-опросник САН применялся в стандартной модификации [Доскин В.А. с соавт., 1973] для оценки общего психо-эмоционального состояния детей старшего возраста и подростков. Специальные методы оценки морфо-функционального состояния органов пищеварения включали: диагностическую эзофагогастродуоденоскопию (ЭГДС) и морфологическое исследование биоптата, бактериологическое исследование смывов тощей кишки и фекалий, определение протеолитической активности фекалий, определение α-лактальбумина женского молока в сыворотке крови. ЭГДС и пункционная биопсия слизистой оболочки тощей кишки, фундального и антрального отделов желудка проводилась с использованием гибких эзофагогастродуоденоскопов фирмы "Олимпус" (Япония). Гистологическое исследование с морфометрией фиксированных срезов слизистой оболочки тощей кишки выполнялось методом световой микроскопии. Бактериологическое исследование кала проводили классическим методом [Эпштейн-Литвак Р. В. с соавт., 1970]. Для оценки степени дисбактериоза использовали классификацию И.Б.Куваевой и К.С.Ладодо [1991] в нашей модификации. Метод определения протеолитической активности фекалий применялся согласно описанной методике [Горская Е.М. с соавт., 1995]. Определение α-лактальбумина женского молока в сыворотке крови проводилось с помощью валентного твердофазного иммуноферментного анализа («Sandwich -IA»), который официально рекомендуется ВОЗ для выявления ультрамалых количеств антигенов в биологических жидкостях, согласно ранее описанной методике [Гмошинский И.В., 1997]. Всасывание белка выражали в единицах, учитывающих различие в массе тела детей и принятой дозе молока по формуле: Всасывание = (уровень а-лактальбумина, нг/мл) ∙ (масса тела, кг) : (доза молока, мл). Полученные результаты обработаны методами вариационной статистики пакета Excel Microsoft и программ Statistica 6.0, WINSTAT 4.3 и SPSS v15.0. |
|||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
1 2
Ваша оценка этого документа будет первой.
Ваша оценка:
Похожие:
База данных защищена авторским правом ©MedZnate 2000-2016
allo, dekanat, ansya, kenam
обратиться к администрации | правообладателям | пользователям
allo, dekanat, ansya, kenam
обратиться к администрации | правообладателям | пользователям