|
Скачать 212.79 Kb.
|
![]() С ![]() В.В.Воробьев, доцент кафедры анестезиологии и реаниматологии с курсом клинической биохимии Учреждения образования «Гродненский государственный медицинский университет», кандидат биологических наук, доцент; С.В. Лелевич, ассистент кафедры анестезиологии и реаниматологии с курсом клинической биохимии Учреждения образования «Гродненский государственный медицинский университет», кандидат медицинских наук Рецензенты: Кафедра клинической лабораторной диагностики Государственного учреждения образования «Белорусская медицинская академия последипломного образования»; Н.Л.Сергейчик, заведующая клинико-диагностической лабораторией Государственного учреждения «Республиканский научно-практический центр «Мать и дитя», главный внештатный специалист по клинической лабораторной диагностике Министерства здравоохранения Республики Беларусь, кандидат медицинских наук ^ Кафедрой анестезиологии и реаниматологии с курсом клинической биохимии Учреждения образования «Гродненский государственный медицинский университет» (протокол № 9 от 29.04.2010г.); Центральным научно-методическим советом Учреждения образования «Гродненский государственный медицинский университет» (протокол № 9 от 10.06.2010г.); Секцией по специальности 1-79 01 06 «Сестринское дело» Учебно-методического объединения вузов Республики Беларусь по медицинскому образованию (протокол № 3 от 17.06.2010г.) Пояснительная записка «Лабораторная диагностика» – дисциплина, характеризующая методы объективного исследования клеточного и химического состава биологических жидкостей и применяющая полученные сведения для выявления отклонений от нормы, установления диагноза болезни и контроля за лечением. За последние годы в лабораторной медицине произошли существенные изменения, связанные с резким расширением номенклатуры диагностических показателей и высокой производительностью и точностью выполняемых исследований за счет применения современных методов и приборов. В ряде случаев лабораторные показатели, обладающие большей объективностью по сравнению с субъективной оценкой врачом клинического состояния больного, становятся ведущими при постановке диагноза и определении тактики лечения. В типовой учебной программе дисциплины «Лабораторная диагностика» отражены актуальные тенденции развития лабораторной диагностики, представлены современные аналитические возможности лабораторной медицины и раскрыта их роль в переходе клинической дисциплины на доказательные принципы. Преподавание дисциплины «Лабораторная диагностика» базируется на знаниях, полученных студентами на предшествующих курсах в процессе изучения следующих дисциплин: «Гистология, цитология и эмбриология», «Нормальная физиология», «Патология (патологическая анатомия и патологическая физиология)». Типовая учебная программа по лабораторной диагностике предусматривает чтение лекций и проведение практических занятий. Основную нагрузку по выполнению типовой учебной программы несут практические занятия. Предполагается последовательное освоение всех этапов лабораторного анализа, таких как, лабораторная аналитика, планирование исследования, подготовка пациента, взятие и подготовка биоматериала, выполнение аналитической процедуры, интерпретация результатов и оформление соответствующего заключения. Одновременно с этим предусматривается необходимость формирования у студентов клинического мышления, умения самостоятельно решать диагностические задачи и осуществлять клиническую интерпретацию результатов диагностических манипуляций в контексте предполагаемых диагнозов или проводимого лечения. Типовая учебная программа «Лабораторная диагностика» разработана в соответствии с: образовательным стандартом по специальности 1 – 79 01 06 «Сестринское дело» (регистрационный № ОС РБ 1-79 01 06-2007), утвержденным постановлением Министерства образования Республики Беларусь от 02.05.2008г. №40;типовым учебным планом по специальности 1 – 79 01 06 «Сестринское дело», утвержденным Министерством образования Республики Беларусь 12.02.2008г. (регистрационный номер № L 79 - 003/тип). Цель и задачи учебной дисциплины Цель: сформировать у студентов достаточный уровень компетентности, необходимый для самостоятельного выполнения общеклинических, гематологических и биохимических лабораторных исследований и решения клинико- диагностических задач. Задачи: выработать навыки использования основных методов, применяемых в клинико-диагностических лабораториях; сформировать представление о патофизиологических процессах, лежащих в основе изменения лабораторных параметров при соматических заболеваниях; обучить умению составлять индивидуальный план обследования больного в зависимости от исходных клинико-лабораторных данных; выработать навыки аналитической оценки результатов лабораторного исследования и интерпретации результатов исследований с целью установления диагноза и назначения лечения. ^ Студент должен знать: правила организации преаналитического этапа и контроля качества лабораторных исследований; методы лабораторной оценки и интерпретации функции основных органов и систем организма; уметь: организовать преаналитический этап лабораторных исследований; составлять план лабораторного обследования при патологии отдельных органов и систем; интерпретировать лабораторные показатели при различных патологических состояниях организма. ^ 1. Аналитические технологии, оборудование и методы современной клинико-диагностической лаборатории. 2. Биохимические методы клинической лабораторной диагностики. 3. Основы лабораторной гематологии. 4. Клинический анализ ликвора, мочи и методы исследования функций почек. 5. Лабораторная диагностика заболеваний органов желудочно-кишечного тракта, поджелудочной железы и печени. 6. Лабораторные методы в клинической токсикологии, неотложный анализ. ^ Основными методами обучения, адекватно отвечающими целям изучения данной дисциплины, являются: лекции; практические занятия; учебно-исследовательская работа студентов; научно-исследовательская работа студентов; дистанционные методы (компакт-диски лекций, интернет); ^ Самостоятельная работа включает: составление планов клинико-лабораторных обследований пациентов; изучение и решение ситуационных клинических задач; подготовку рефератов, сообщений, докладов по наиболее важным разделам дисциплины; выполнение обучающих тестовых заданий; участие в научно-исследовательской работе, студенческой Олимпиаде по дисциплине; выступление с докладами на студенческих научных конференциях. На изучение дисциплины «Лабораторная диагностика» по специальности 1 – 79 01 06 «Сестринское дело» определено 194 часа, из них 108 аудиторных часов, в том числе лекций – 26 часов, практических – 82 часа. Форма текущей аттестации: экзамен – 7 семестр. ^
^ 1. Аналитические технологии, оборудование и методы современной клинико-диагностической лаборатории 1.1. Аналитические основы клинической лабораторной диагностики Предмет и задачи клинической лабораторной диагностики. Связь клинической лабораторной диагностики с другими клиническими и теоретическими дисциплинами. Роль лаборатории в диагностическом процессе. Организационная структура клинико-диагностической лаборатории (КДЛ) в Республике Беларусь. Основные документы, регламентирующие деятельность лаборатории. Виды биологического материала, запрос на анализ, взятие материала, требования к доставке в лабораторию и хранению. Факторы, влияющие на результаты биохимических исследований. Биологическая и аналитическая вариация. Основные критерии оценки аналитической надежности методов лабораторных исследований: воспроизводимость, правильность, специфичность, чувствительность. Принципы определения допустимых погрешностей результатов лабораторных исследований. Факторы и вариации, влияющие на результаты лабораторных исследований: биологические, ятрогенные, преаналитические, аналитические, постаналитические. Методы коррекции факторов вариации лабораторных исследований. Понятие «норма». Критерии выбора аналитического метода исследования в лаборатории. Диагностическая специфичность и чувствительность теста. Контроль качества лабораторных исследований. ^ Фотометрические методы анализа. Методы адсорбционной фотометрии. Спектрофотометрия, фотоколориметрия, нефелометрия. Правила проведения фотометрии, способы оценки результатов фотометрии (по конечной точке, по фиксированному времени, кинетически), расчет результатов исследований (по калибровочной кривой, стандартным растворам, в условных единицах). Эмиссионная фотометрия (флюориметрия, пламенная фотометрия), Применение методов эмиссионной фотометрии в клинико-диагностической лаборатории. Методы разделения: центрифугирование; хроматография, ее виды; электрофорез. Представление об атомно-эмиссионном спектральном анализе. Рефрактометрия, поляриметрия: принципы анализа, приборы, возможности применения в КДЛ. Методы радиоиммунологического и иммуноферментного, иммунофлуоресцентного анализа. Понятие об электрохимических методах: потенциометрия; кондуктометрия; полярография; осмометрия. Автоматизация лабораторных исследований. ^ Распределение электролитов во вне- и внутриклеточном пространстве. Осмотическое давление. Общая осмоляльность плазмы, осмотическое равновесие. Осмоляльность мочи. Лабораторные методы оценки осмоляльности биологических жидкостей. Водный баланс. Поддержание водного гомеостаза. Распределение электролитов во внеклеточном и внутриклеточном пространстве. Анионный промежуток. Показания к определению концентрации электролитов, виды биологического материала. Условия взятия, хранения и транспортировки биологического материала. Особенности преаналитического этапа. Методы определения концентрации калия, натрия и хлорид-ионов в биологических жидкостях (пламенная фотометрия, ионометрия), принципы, аналитическая процедура, чувствительность, интерпретация, ошибки. Методы определения ионов с использованием ферментов. Клинико-диагностическое значение исследования показателей водно-электролитного обмена. Нарушения водного – электролитного обмена, классификация, клинические признаки, лабораторные показатели. ^ Понятие кислотно-основного равновесия организма. Гомеостаз ионов водорода в организме. Механизмы поддержания постоянства концентрации ионов. Этапы газообмена в организме. Альвеолярный газообмен, транспорт газов кровью, тканевой газообмен. Лабораторные параметры оценки кислотно-основного состояния организма. Лабораторные параметры оценки состояния оксигенации организма. Нарушения кислотно-основного равновесия организма. Лабораторно-диагностические алгоритмы выявления причин нарушений кислотно-основного равновесия организма. Клинико-лабораторная оценка адекватности оксигенации тканей. Характеристика основных типов гипоксий. Общие принципы лабораторной диагностики гипоксий. Критические уровни параметров, характеризующих состояние оксигенации организма. Лабораторный контроль коррекции гипоксических состояний. ^ Основные функции белков сыворотки крови. Метаболизм белков сыворотки. Понятие «общий белок сыворотки крови». Гипопротеинемии, гиперпротеинемии, диспротеинемии. Дифференциальная диагностика причин изменения концентрации общего белка в сыворотке. Альбумин сыворотки, методы определения. Характеристика основных электрофоретических фракций белков сыворотки крови. Классификация диспротеинемий. Типичные патологические электрофореграммы сывороточных белков. Характеристика гаммапатий. Определение поликлональных гаммапатий, критерии диагностики. Моноклональные гаммапатии. Понятие белков острой фазы. Лабораторная характеристика острофазового ответа. Методы определения белка в моче. Полосочный и преципитационные тесты. Определение белка в ликворе. Мочевина крови, источники и место образования. Факторы, влияющие на концентрацию в крови. Референтные значения. Химический, калориметрический метод определения мочевины в сыворотке крови. Ферментативный, уреазный метод. Принцип метода, аналитическая характеристика. Креатинин крови, источники и место образования. Факторы, влияющие на концентрацию в крови. Референтные значения. Методы определения концентрации креатинина в сыворотке крови и моче. Мочевая кислота, источники образования, клиническое значение определения. Методы определения. Билирубин сыворотки крови, источники и место образования. Референтные значения для различных возрастных групп. Методы определения уровня билирубина в сыворотке крови. Аналитические характеристики диазометода определения общего и прямого билирубина в сыворотке крови. Полосочный экспресс метод определения билирубина в моче. Понятие об уробилиногене, место и источники образования. Метод определения уровня уробилиногена в моче методом Эрлиха. Принципы полосочных тестов определения уробилиногена в моче. Клинико-диагностическое значение исследования небелковых азотсодержащих соединений крови. Происхождение ферментов сыворотки крови, их топографическая классификация. Плазмоспецифические, секреторные и органоспецифические ферменты. Понятие о изоферментных органных профилях. Аналитические основы энзимологических исследований. Правила забора и хранения биологического материала. Методы определения и выражения энзиматической активности. Специфика применения энзимологических методов. Методы и клинико-диагностическое значение исследования отдельных ферментов в сыворотке крови (аланинаминотрансфераза, аспартатаминотрансфераза, альфа-амилаза, гамма-глутамилтранспептидаза, щелочная и кислая фосфатаза, креатинкиназа, лактатдегидрогеназа). ^ Гомеостаз глюкозы в организме. Глюкоза крови. Правила подготовки пациента, условия взятия крови, хранения, подготовка биологического материала для исследования. Специфика применения методов оценки углеводного обмена. Методы определения содержания глюкозы в крови, сыворотке (плазме), ликворе и моче (орто-толуидиновый и ферментативные): принципы, аналитическая процедура, интерпретация, чувствительность, ошибки. Полуколичественное определение глюкозы с помощью тест-полосок. Клинико-диагностическое значение. Тест толерантности к глюкозе: показания, технология выполнения, клинико-диагностическое значение. Сахарный диабет, классификация, нарушения метаболизма, лабораторные критерии диагностики, мониторинга терапии и оценки осложнений. Скрининговые параметры липидного профиля. Референтные значения. Правила подготовки пациента, условия взятия крови, подготовка биологического материала для исследования. Специфика применения методов оценки липидного обмена. Методы определения концентрации общего холестерина и триглицеридов сыворотки крови. Сравнительные характеристики методов. Система транспорта липидов. Липопротеины сыворотки крови и их обмен. Классификация липопротеинов по плотности. Аполипопротеины: структурная и метаболическая функция. Метаболические превращения липопротеинов, ферменты обмена липопротеинов. Рецепторы липопротеинов. Лабораторная оценка липид-транспортной системы. Электрофоретический метод разделения липопротеинов сыворотки крови. Принцип метода, интерпретация. Дислипопротеинемии. Гиперлипопротеинемии и их классификация по Фридриксону. Нарушение обмена липопротеинов. ^ Понятие об общем анализе крови. Объем исследований. Лабораторные методы оценки клеточного состава периферической крови. Правила приготовления мазка периферической крови. Методы окраски и подсчет клеток. Микроскопические исследования мазков крови. Лейкоцитарная формула. Приготовление мазка для подсчета ретикулоцитов, окраска, процедура подсчета. Определение уровня гемоглобина в крови. Гемиглобинцианидный метод. Скорость оседания эритроцитов, понятие, референтные значения, методы определения. Определение гематокрита, аналитические методы. Современные технологии гематологического анализа. Проточные гематологические анализаторы. Автоматический подсчет лейкоцитарной формулы. Основные показатели, получаемые с помощью гематологических анализаторов и факторы, влияющие на их значение. Эритроцитарные, лейкоцитарные и тромбоцитарные индексы. Физиологические изменения показателей общего анализа крови в различных возрастных группах. Патофизиологические механизмы изменения показателей общего анализа крови. ^ Методы определения уровня сывороточного железа. Референтные значения. Метод определения уровня общей железосвязывающей способности сыворотки, степень насыщения трансферина. Ферритин, методы определения, референтные значения. Уровень растворастворимых рецепторов трансферина. Лабораторная оценка дефицита витамина В12. Понятие о тесте Шиллинга. Определение свободного гемоглобина в сыворотке. Процедура определения теста осмотической резистентности эритроцитов. Электрофоретические методы разделения фракций гемоглобина. ^ Система гемостаза, ее роль в организме. Первичный гемостаз, его компоненты, участие тромбоцитов в свертывании крови. Вторичный гемостаз, плазменные факторы свертывания, основные этапы коагуляционного гемостаза. Антикоагулянтная система: антитромбин III, протеины C и S, ингибитор внешнего пути. Фибринолитическая система, физиологическая роль в организме, компоненты, активаторы и ингибиторы фибринолиза. Лабораторные методы оценки состояния гемостаза. Понятие о «глобальных» тестах. Методы оценки активности отдельных факторов гемостаза. Методы оценки первичного гемостаза. Клотинговые методы оценки коагуляционного гемостаза. Принцип метода. Подготовка биологического материала к исследованию. Принцип работы автоматических коагулометров. Определение протромбинового времени. Принцип метода. Способы выражения протромбинового времени. Активированное частичное тромбопластиновое время, принцип метода, клиническое применение. Лабораторная оценка этапа фибринообразования. Тромбиновое и рептилазное время, принцип методов. Факторы, влияющие на результаты тестов. Фибриноген плазмы крови. Референтные значение. Методы определения концентрации фибриногена в крови. Аналитическая характеристика гравиметрического и кинетического (по Клаусу) методов. Тесты паракоагуляции. Этаноловый тест. Протаминсульфатный тест. Принцип методов. Интерпретация результатов. Методы оценки фибринолиза. Тест определения времени лизиса эуглобулина и общей фибринолитической активности крови. Лабораторные методы оценки продуктов деградации фибрина. Метод определения растворимых комплексов фибрина. Понятие о Д-димерах, методы определения. Принципы назначения тестов оценки гемостаза, интерпретация полученных результатов при различных нарушениях гемостаза. Лабораторная диагностика нарушений функции тромбоцитов, лабораторный контроль назначения антиагрегантов. Лабораторный контроль назначения гепарина и других прямых антикоагулянтов. Лабораторный контроль назначения непрямых (пероральных) антикоагулянтов. Лабораторный контроль тромболитической терапии. Лабораторная диагностика дефицита или недостаточности факторов свертывания. Лабораторная диагностика гиперкоагуляционных состояний. Тромбофилии: причины, принципы диагностики. Лабораторная диагностика синдрома диссеминированного внутрисосудистого свертывания. ^ Анемии – классификация, диагностика, использование показателей, получаемых на автоматических анализаторах; эритроцитозы. Патологические формы эритроцитов и их диагностическое значение. Лабораторная оценка обеспеченности организма железом. Лабораторная оценка дефицита В12. Лабораторные методы диагностики причин гемолиза. Виды дефицита железа. Лабораторная оценка обеспеченности организма железом. Железодефицитная анемия (ЖДА). Механизмы развития ЖДА. Характерные изменения общего анализа крови, картины костного мозга на различных стадиях заболевания. Алгоритм диагностики анемического синдрома по уровню ферритина. Макроцитарные анемии, классификация, механизмы развития, алгоритм диагностики. В12-дефицитные анемии. Фолиево-дефицитные анемии. Лабораторная диагностика. Классификация гемолитических анемий. Виды гемолиза. Лабораторная диагностика. Наследственный микросфероцитоз. Клинические проявления, лабораторные показатели. Наследственные гемолитические анемии, связанные с патологией ферментов эритроцитов, клинические проявления, лабораторные показатели. Наследственные гемоглобинопатии. ^ Понятие о групповых антигенах и системах групп крови человека. Групповые антигены эритроцитов. Группы крови системы AB0. Генетика и механизмы образования антигенов системы АВ0, субстанция Н, трансферазы А и В. Варианты антигена А. Антитела системы АВ0. Групповая система Rh. Генетика антигенов системы Rh. Классификация антигенов системы резус. Антигены D, C, E. Антитела системы Rh. Другие групповые системы крови. Основные иммуногематологические техники, применяемые в клинической практике. Тест агглютинации, принцип применения. Принципы определения групп крови системы АВ0. Дифференцировка антигена А. Применение поликлональных и моноклональных антител для определения групповой принадлежности системы АВ0. Определение аллоантител с помощью стандартных эритроцитов. Принцип определения резус-принадлежности по антигену D, определение полного фенотипа по резус-антигенам. Применение поликлональных и моноклональных антител для определения резус-принадлежности. Антиглобулиновый тест, принцип применения. Прямая и непрямая реакция Кумбса. Пробы для определения серологического соответствия между донором и реципиентом при переливании крови. Антиглобулиновый тест в модификации LISS с использованием эритроцитов донора, а также контрольных эритроцитов с известными антигенами. Антиглобулиновый тест в модификации LEN c использованием эритроцитов донора, а также контрольных эритроцитов с известными антигенами. Основные принципы переливания крови. Приготовление и хранение препаратов крови для трансфузии. Осложнения, связанные с гемотрансфузией, лабораторная диагностика. Серологический конфликт мать-плод (гемолитическая болезнь новорожденных). Диагностика гемолитической болезни новорожденных. ^ Физиология ликвора. Аналитические основы исследования цереброспинальной жидкости (показания к люмбальной пункции, забор материала, правила транспортировки и хранения, сроки выполнения анализа). Общий анализ цереброспинальной жидкости: физические свойства (давление, цвет, прозрачность), их диагностическое значение; цитоз, его характер, диагностическое значение; химия цереброспинальной жидкости (глюкоза, белок и его фракции, ферменты). Диагностические алгоритмы исследования ликвора. Анализ мочи. Подготовка пациента и сбор материала. Оценка физических свойств. Методы определения цвета, прозрачности, плотности и рН мочи. Понятие о полосочных тестах экспресс анализа мочи. Аналитика выполнения анализа при помощи полосочных тестов. Биохимические методы анализа мочи: определение белка, гемоглобина, кетокислот, билирубина, уробилина в моче. Микроскопическое исследование осадка мочи. Организованный и неорганизованный осадок. Идентификация мочевых кристаллов, мочевых цилиндров. Анализ мочи по Нечипоренко, Аддис-Каковскому. Исследование мочи при патологии почек и мочевыводящих путей. Диагностическое значение исследования в сыворотке веществ, которые выводятся через почки. Понятие почечного профиля. Лабораторные методы оценки функции почек. Лабораторная оценка функции гломерулярного и канальцевого аппарата почки. Лабораторная оценка протеинурии. Место общего анализа мочи в оценки функции почек. Лабораторно-диагностические констелляции тестов, оценивающих функцию почек при различной патологии. Диагностические алгоритмы. ^ Клиническая физиология желудочно-кишечного тракта. Гормоны и ферменты желудочно-кишечного тракта. Методы получения желудочного содержимого. Стимуляторы желудочной секреции. Исследование желудочного содержимого. Лабораторная оценка желудочной секреции. Интерпретация анализа желудочного сока. Биохимическая оценка функции тонкого кишечника. Функциональные пробы. Копрограмма. Клиническое значение исследования кала. Подготовка больного и сбор материала. Физические и химические свойства. Обнаружение крови в кале (бензидиновая проба, экспресс-тесты). Определение стеркобилина. Микроскопия. Элементы пищевого происхождения, клеточные элементы, кристаллические образования. Копрограмма при различных патологических состояниях. Правила подготовки пациента, сбора, хранения и транспортировки биологического материала, при выполнении паразитологических исследований. Основные лабораторные методы диагностики паразитозов (макроскопия, микроскопия, методы обогащения, специальные методы диагностики отдельных паразитозов, иммунодиагностика). Клиническая физиология поджелудочной железы. Биохимические тесты исследования функции поджелудочной железы в норме и патологии. Печеночный профиль. Методы оценки детоксикационной, секреторной и выделительной функции печени. Функционально-нагрузочные пробы. Изменения параметров печеночного профиля при различных заболеваниях печени. ^ Классификация ядов и отравлений. Характеристика действия наиболее распространенных ядов. Общие принципы диагностики отравлений. Требования к лабораторной токсикологии, объекты, номенклатура токсических веществ. Понятие «токсикологический анализ», правила подготовки пациента, условия взятия материала. Подходы к проведению токсикологического анализа, тактика применения, ограничения. Основные цели и методы при проведении лабораторных исследований при острых отравлениях. Лабораторная диагностика острого отравления алкоголем, техническими жидкостями, растворителями. Лабораторная диагностика отравлений наркотическими веществами. Отравления, сопровождающиеся ацидозом, отравления грибами, отравления угарным газом; отравления метгемоглобинобразователями. Понятие о неотложном анализе, неотложном режиме лабораторных исследований. Тесты, выполняемые в режиме cito. Лабораторные исследования, выполняемые для диагностики синдрома острого живота, коматозных состояний, острых метаболических нарушений при сахарном диабете. ^ Литература Основная:
Дополнительная: 4. Долгов, В.В. Лабораторная диагностика нарушений обмена минералов и заболеваний костей / В. В. Долгов, И.П. Ермакова. – М.: РМАПО, 1998. – 60 с. 5. Долгов, В.В. Обеспечение качества в лабораторной медицине / В.В.Долгов, А.В.Мошкин – М.:РМАПО, 1997. – 90 с. 6. Кишкун, А.А. Руководство по лабораторным методам диагностики / А.А. Кишкун. – М.: ГЭОТАР-МЕД., 2007. – 780 с.
![]() |