Комплексный подход к серологической диагностике сифилиса
|
|
Скачать 54.93 Kb.
|
|
Содержание
Т. pallidum |
| М.В. КУВШИНОВ, Н.В. ЧЕПУРЧЕНКО, А.П. ОБРЯДИНА ООО «НПО «Диагностические системы», Россия, Нижний Новгород КОМПЛЕКСНЫЙ ПОДХОД К СЕРОЛОГИЧЕСКОЙ ДИАГНОСТИКЕ СИФИЛИСА Несмотря на то, что со времени открытия первого метода серологической диагностики сифилиса прошло уже 100 лет, данная проблема продолжает оставаться актуальной и в настоящее время. В Российской Федерации серологическая диагностика осуществляется в соответствии с Приказами МЗ России. В 2001 г. вступил в силу Приказ от 26.03.01 № 87 «О совершенствовании серологической диагностики сифилиса», согласно которому методы серодиагностики делятся на 3 группы: отборочные, подтверждающие и для контроля эффективности лечения. К отборочным тестам относятся нетрепонемные тесты: микрореакция и ее аналоги (RPR, TRUST, VDRL), РСКкард. В группу подтверждающих включены тесты, отличающиеся более высокой чувствительностью и специфичностью и выявляющие специфические противотрепонемные антитела: РПГА, ИФА, РСКтреп, РИФ, РИТ. Для контроля эффективности лечения применяются также нетрепонемные тесты, поскольку именно на основании элиминации антител к кардиолипиновому антигену проводится снятие больных с учета после проведенного лечения. Однако в этом же приказе есть следующая фраза: «Поскольку ИФА и РПГА являются более высокочувствительными, специфическими и воспроизводимыми тест-системами, которые можно использовать в качестве отборочных и подтверждающих тестов, осуществить до 2006 г. замену комплекса серореакций (КСР) вышеуказанными реакциями при диагностике сифилиса». Таким образом, основная роль в серодиагностике сифилиса отводится двум методам - ИФА и РПГА. Из нетрепонемных тестов основное применение находят реакция микропреципитации и ее аналоги, которые используются для скрининга и контроля эффективности лечения. В научно-производственном объединении «Диагностические системы» (Нижний Новгород, Россия) создан комплекс диагностикумов, позволяющий осуществлять серологическую диагностику сифилиса в полном объеме в соответствии с Приказом № 87. Линейка наборов включает следующие позиции: • «ИФА-анти-ЛЮИС-G, М» - тест-система для массового скрининга образцов сывороток (плазмы) крови человека на присутствие специфических к T. pallidum антител классов М и G; • «ИФА-анти-ЛЮИС-G» - тест-система для массового скрининга образцов сывороток (плазмы) крови человека на присутствие специфических к Т. pallidum антител класса G; • «ИФА-анти-ЛЮИС-М» - тест-система для массового скрининга образцов сывороток (плазмы) крови человека на присутствие специфических к Т. pallidum антител класса М; • «ЛЮИС-тест» - набор для массового скрининга образцов сывороток (плазмы) крови человека на присутствие специфических к ^ реагиновых антител в реакции микропреципитации; • «ДС-РПГА-анти-ЛЮИС» - гемагглютинационный тест для массового скрининга образцов сывороток крови человека на присутствие специфических антител к Т. pallidum. Разработанные тест-системы "ИФА-анти-ЛЮИС» представляют собой непрямой двухэтапный вариант иммуноферментного анализа, при котором на полистироловый планшет сорбируются рекомбинантные аналоги белков Т. pallidum. Сотрудниками ООО «НПО «Диагностические системы» было проведено исследование по оценке показателей чувствительности и специфичности созданных тест-систем. С этой целью из кожно-венерологических диспансеров Нижнего Новгорода были получены образцы сывороток крови от больных с подтвержденным диагнозом сифилиса на разных стадиях. Для оценки специфичности тестировались образцы сывороток доноров. Всего в исследование включено: • 103 образца сывороток крови от больных первичным сифилисом; • 412 образцов сывороток крови от больных вторичных сифилисом; • 227 образцов сывороток крови от больных латентным сифилисом; • 46 образцов сывороток крови от больных, получивших лечение по поводу сифилиса; • 670 образцов сывороток крови от здоровых доноров. Полученные образцы сывороток анализировались с помощью тест-систем ИФА производства ООО «НПО «Диагностические системы» на наличие или отсутствие специфических противотрепонемных антител. Были получены следующие результаты: антитела класса IgM обнаружены в 100 из 103 образцов от больных первичным сифилисом, в 202 из 412 образцов от больных вторичным сифилисом и в 46 из 227 образцов от больных латентным сифилисом. Следовательно, чувствительность тест-системы «ИФА-анти-ЛЮИС-М» составила 97%, 49 и 20% при первичном, вторичном и латентном сифилисе соответственно. Ни в одном образце сыворотки крови от больных, получивших лечение, не выявлено IgM антител, следовательно, антитела данного класса могут служить надежным маркером для контроля успешности терапии при сифилисе. Специфичность тест-системы составила 99,4%. Аналогично оценивалась чувствительность тест-систем «ИФА-анти-ЛЮИС-G» и «ИФА-анти-ЛЮИС-G,М». Чувствительность их на первичной стадии инфекции составила 94 и 97%, соответственно, а при вторичном и латентном сифилисе - 100%. При тестировании образцов сывороток крови от пациентов после завершения терапии получены позитивные результаты в 37% на обеих тест-системах, что свидетельствует о неполной элиминации IgG антител, т. е. наблюдался так называемый «серологический рубец». Специфичность этих диагностикумов составила 99,6%. На следующем этапе исследования оценивались показатели чувствительности и специфичности тест-системы «ДС-РПГА-анти-Люис», которая является первым в мире гемагглютинационным тестом для диагностики сифилиса, основанным на рекомбинантном трепонемном антигене, в то время как все существующие на данный момент аналоги построены на ультрасоникатах культуральных и патогенных трепонем. Определение чувствительности и специфичности проводилось на основании исследования образцов сывороток крови от больных с установленным диагнозом сифилиса. В исследование включено: • 74 образца сывороток крови от больных первичным сифилисом; • 115 образцов сывороток крови от больных вторичных сифилисом; • 161 образец сывороток крови от больных латентным сифилисом; • 18 образцов спинномозговой жидкости от больных поздним сифилисом, в том числе нейросифилисом; • 760 образцов сывороток крови от здоровых доноров. Получены следующие результаты: при первичном сифилисе чувствительность тест-системы «ДС-РПГА-анти-Люис» составила 94,6%, что является более высоким показателем по сравнению с аналогами, существующими на российском рынке, и приближается к значениям чувствительности тест-систем ИФА. При вторичном и латентном сифилисе чувствительность оценена как 99,1 и 99,4% соответственно. Специфичность тест-системы составила 99%. Вызывают также интерес результаты, полученные при тестировании ликвора: всего было получено 7 образцов от больных с подтвержденным нейросифилисом, и во всех были выявлены антитела. Другие 11 образцов от больных поздним сифилисом, но без признаков нейроинфекции, дали отрицательный результат. На последнем этапе проведена оценка показателей чувствительности и специфичности тест-системы «ЛЮИС-тест», в основе которой лежит реакция микропреципитации. Данный диагностикум позволяет выявлять антитела к кардиолипину, т. е. является нетрепонемным, и используется либо в качестве отборочного, либо для контроля эффективности лечения. Тест характеризуется быстротой постановки, возможностью использования прогретых и непрогретых сывороток крови, легкостью визуальной оценки результатов реакции. Для оценки чувствительности и специфичности тест-системы «ЛЮИС-тест» было проанализировано 25 образцов сывороток крови от больных с первичным, 89 образцов - со вторичным и 18 образцов - со скрытым сифилисом. Специфичность оценивалась при тестировании 60 образцов сывороток, полученных от доноров. Результаты анализа: чувствительность тест-системы на первичной стадии заболевания составила 80%, на вторичной - 100 и при скрытом сифилисе - 89%. Специфичность была оценена как 100%. Таким образом, проведенное исследование продемонстрировало высокую чувствительность и специфичность тест-систем, созданных в ООО «НПО «Диагностические системы» (Нижний Новгород), что позволяет использовать их для комплексной серологической диагностики сифилиса в соответствии с Приказом МЗ России от 26.03.01 № 87 «О совершенствовании серологической диагностики сифилиса». Материалы V съезда дерматовенерологов Респ. Беларусь «Актуальные вопросы дерматологии, венерологии и дерматокосметологии», Минск, 20-21 сентября, 2006,- С.68-71 |
Ваша оценка этого документа будет первой.
Ваша оценка:
Похожие:
База данных защищена авторским правом ©MedZnate 2000-2016
allo, dekanat, ansya, kenam
обратиться к администрации | правообладателям | пользователям
allo, dekanat, ansya, kenam
обратиться к администрации | правообладателям | пользователям