Именно для таких видов аллергии предназначены тесты для оценки активации базофилов спе-цифическими аллергенами. Активация базофилов аллергенами
|
|
Скачать 165.89 Kb.
|
|
Содержание
Активация базофилов аллергенамиОписание технологии Области применения методов cast® Информация для заказа |
|
Метод оценки активации базофилов аллергенами in vitro КАСТ метод (CAST - Cellular Antigen Stimulation Test) Несмотря на большой прогресс в диагностике аллергических состояний, аллергологи часто сталкиваются с проблемой подтверждения неясных результатов кожных тестов и определения спе-цифических IgE-антител (сIgE) независимым методом. К тому же, некоторые виды аллергии (на лекарственные препараты, пищевые добавки и д.) очень плохо выявляются кожными тестами, для них в настоящее время достоверны только дорогостоящие и опасные провокационные тесты. Именно для таких видов аллергии предназначены тесты для оценки активации базофилов спе-цифическими аллергенами. ^ Базофилы и мастоциты играют центральную роль в аллергических реакциях немедленного типа. При контакте аллергена с молекулами IgE на специализированных эффекторных клетках базофи-лах и мастоцитах происходит каскад ферментных реакций, приводящий к дегрануляции и высво-бождению медиаторов из гранул (гепарин, гистамин). Эти реакции приводят также к синтезу и секреции лейкотриенов, цитокинов, медиаторов воспаления, вызывающих симптомы аллергии. Лейкотриены являются мощными бронхоконстрикторами, они вовлечены в повышение прони-цаемости сосудов и гиперсекрецию слизи, высвобождение нейропептидаз, влияют на активацию эозинофилов, гипертрофию гладкой мускулатуры бронхов и депозицию коллагена. Лейкотриены синтезируются также и в случае псевдоаллергической реакции, т.е. без участия сIgE. Псевдоаллергические реакции по клинической симптоматике сходны с истинными IgE-опосредо-ванными реакциями, но отличаются по механизму развития. Они не связаны с выработкой антител или участием сенсибилизированных лимфоцитов, в патогенезе этих реакций выделяют только две стадии - патохимическую и патофизиологическую. В псевдоаллергических реакциях происходит активация базофилов и неспецифическое высвобождение медиаторов (гистамина, лейкотриенов, простагландинов) посредством триггерных механизмов, не связанных с IgE-антителами: актива-ция комплемента; чувствительность, опосредованная IgG-антителами или ауто-IgE-антителами, и неиммунные реакции, приводящие к прямой активации базофилов. Некоторые клеточные аллергические тесты уже доступны много лет, подобно прямой микроско-пической оценке дегрануляции базофилов по окраске щелочными красителями или определение концентрации освобожденного гистамина из реактивных базофилов после стимуляции. Эти методы имеют ряд известных ограничений, препятствующих их широкому распространению (воспроизводимость, чувствительность, специфичность). Компанией Buhlmann laboratories (Швейцария) был разработан тест стимуляции базофилов in vitro – метод CAST. ^ Технология CAST (Cellular Antigen Stimulation Test, тест антигенной стимуляции клеток) основана на определении сульфидолейкотриенов (LTC4, LTD4, LTE4), секретируемых примированными IL-3 базофилами под действием аллергенов in vitro. Его также называют провокационным тестом in vitro. Метод патентован, авторы - проф. De Weck и д-р Sainte-Laudy. Благодаря синтезу сульфидо-лейкотриенов (sLT) de novo анализ CAST® обладает высочайшей специфичностью по сравнению с классическим тестом высвобождения гистамина. Протокол исследования включает три этапа: выделение популяции лимфоцитов из стабилизиро-ванной ЭДТА крови, стимуляция лимфоцитарной суспензии специфическими аллергенами и им-муноферментный анализ синтезированных базофилами во время стимуляции лейкотриенов. Тест высоко чувствителен и специфичен, особенно при лекарственной гиперчувствительности.  В качестве положительного контроля для каждого образца используют моноклональные антитела к высокоаффинному рецептору для IgE , обеспечивающие имитацию связывания IgE-антител с рецептором на мембране базофилов, что повышает специфичность метода. Чтобы получить надежные и воспроизводимые результаты очень важно правильно подобрать ал-лергены для реакции и их дозировку, т.к. некоторые из них способны неспецифически взаимо-действовать с базофилами in vitro (лекарства, пищевые добавки, др.). Большой спектр аллергенов, предлагаемых компанией Buhlmann Laboratories. тщательно подобран и протестирован для этих целей. ^ ►для выявления аллергических реакций на лекарства: - аспирин и другие нестероидные противовоспалительные средства (НПВС). Общеизвестен рост гиперчувствительности к аспирину и НПВС в последние десятилетия. Синдром проявляется рецидивирующими ринитами, ассоциированными с назальным полипозом и последующим развитием астмы или кожными манифестациями в виде крапивницы и сосудистого отека. Установлено, что классические клеточные аллерготесты, подобно тесту освобождения гистамина, имеют отрицательные результаты для обнаружения гиперчувствительности к аспирину. Догмой для большинства аллергологов стало часто повторяемое положение, что только провокационные тесты могут подтвердить этот вид аллергии. Теперь догма рассыпается: хорошо контролируемые и достоверные исследования показали, что аспирин/НПВС могут индуцировать освобождение sLT и дегрануляцию базофилов. Чувствительность метода для аспирина составила 63%, специфичность 93%. - бета-лактамные антибиотики: пенициллин G и V, амоксициллины и ампициллин вместе с группой цефалоспоринов относят к бета-лактамным антибиотикам. Попав однажды в организм человека, они формируют различные конъюгаты типа гаптен-транспортный белок, которые могут стимулировать иммунную систему. Только использование комбинации тестов in vivo и in vitro позволяет эффективно и объективно диагностировать клинические реакции, вызываемые гиперчувствительностью немедленного типа к бета-лактамным антибиотикам. Бензилпенициллин и его метаболиты идентифицированы как главные антигены. Известно, что определение сIgE име-ет ограниченное значение для этих аллергенов, т.к. сIgE снижаются или исчезают в течение нескольких недель или месяцев после последней экспозиции. Для оценки контролируемой стимуляции клеток иммунной системы аллергенами данной группы был создан комплекс синтетического полилизина - бензилпенициллин-полилизин (PPL) и для оценки аллергенности метаболитов бензилпенициллина была создана смесь минорных детерминант (MDM). В клинических испытаниях PPL и MDM показали значительную кросс-реактивность с рядом дериватов пенициллина, что позволяет успешно применять их с целью аллергодиагностики in vitro. Чувствительность для пенициллина составила 70%, специфичность 100%. - миорелаксанты: увеличивается количество сообщений об анафилактических реакциях во время проведения анестезии, и в 3 из 4 случаев ответственны за эти аллергические или псевдоаллерги-ческие реакции миорелаксанты. Чувствительность 54%, специфичность 100% (Ebo et al., 2004). В комбинации с кожными тестами чувствительность достигает 80%, что снижает риск для пациента и необходимость в провокационных тестах in vivo (Monneret et al., 2002) - метамизол (анальгин), чувствительность 76% CAST®, комбинация с кожными тестами растет до 77%. ► для выявления аллергических реакций на латекс – этот вид аллергии становится большой проблемой, например, из-за возможной опасности во время анестезии. Около 40000 промышлен-ных продуктов содержат латекс. Очень часто результаты кожных тестов и определение сIgE дают противоречивые результаты или отрицательны, несмотря на соответствующий анамнез. Результаты CAST® обладают очень высокой специфичностью для латекса. ► для выявления аллергических реакций на яды насекомых – до 5% всего населения потенци-ально могут иметь аллергическую реакцию на яды насекомых при укусе. Существует специфичес-кая иммунотерапия, для которой важно принципиально точно установить причинно-значимый ал-лерген. Находки при анализе сIgE часто не превышают 20-30% спустя 1 год после укуса, результа-ты кожных тестов и сIgE могут не совпадать или тоже могут быть отрицательными, в этой ситуа-ции поможет дополнительный подтверждающий тест CAST®. ► для выявления аллергических реакций на ингаляционные аллергены. СAST специфичен для определения IgE-опосредованной аллергии к ингаляционным аллергенам, особенно в ситуациях, когда кожные тесты нельзя проводить по разным причинам: например, у маленьких детей выпол-нение кожных тестов не только сложно осуществить технически, но и определение сIgE у них менее надежно и хуже коррелирует с клиническими симптомами, или когда есть несоответствие результатов кожных тестов и истории болезни. Результаты СAST хорошо коррелируют с результа-тами кожных проб для ингаляционных аллергенов: чувствительность 93.3%, специфичность 98.4% (Sanz et al., 2001). ► для выявления пищевой непереносимости, которая часто встречается у детей и взрослых, и механизмы этого состояния не ограничиваются IgE-опосредованной аллергической реакцией. Расхождение между широким распространением пищевых аллергических реакций и подтвержде-нием пищевой аллергии представляет серьезную проблему для аллерголога. Точная диагностика обязательно подразумевает подтверждение диагноза у пациента с симптомами пищевой неперено-симости. ► для выявления аллергических реакций на пищевые добавки, пищевые добавки способны инду-цировать псевдоаллергические реакции подобно аспирину и НПВС. ► у пациентов, у которых проведение кожных тестов связано с определенными трудностями: например, если пациент страдает аллергодерматозом или получает антигистаминные, кортикосте-роидные препараты. К этой категории относятся и дети с низким порогом кожной чувствительнос-ти, и беременные с неспецифической кожной чувствительностью. Метод CAST прекрасно дополняют рутинные кожные тесты и определение сIgE в крови (Erdmann et al., 2003) и рекомендованы
Препараты аллергенов на 4 стимуляции (Аллергены насекомых, лекарственных соединений, пищевых добавок, а также пищевые, профессиональные, пыльцевые аллергены и миксты аллергенов) - 13 Евро
|
||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
Ваша оценка этого документа будет первой.
Ваша оценка:
Похожие:
База данных защищена авторским правом ©MedZnate 2000-2016
allo, dekanat, ansya, kenam
обратиться к администрации | правообладателям | пользователям
allo, dekanat, ansya, kenam
обратиться к администрации | правообладателям | пользователям