Исследование защитного действия диметилдипиразолилселенида в смеси с сукцинатами (биологически активные добавки к пище, предназначенные для введения в состав пищевых продуктов, «Алкос») при воздействии спиртов
|
Содержание
Список сокращенийРоссийская академия медицинский наук 1.3.1 Определение порога острого действия методом «открытого поля» 1.3.2 Субхронический эксперимент 1.3.3 Исследования функциональной кумулятивной активности 1.3.4 Изучение защитного действия «Алкос» против мутагенного действия этанола 2. Результаты и обсуждение 2.1 Определение порога острого действия методом «открытого поля» 2.2 Субхронический эксперимент 2.3 Исследования функциональной кумулятивной активности 2.4 Исследование защитного действия «Алкос» против мутагенного действия этанола |
|
Российская Академия медицинских наук НИИ медицины труда РАМН
О Т Ч Е Т по договору №32/09 от 1.04.09 по теме: Исследование защитного действия диметилдипиразолилселенида в смеси с сукцинатами (биологически активные добавки к пище, предназначенные для введения в состав пищевых продуктов, «Алкос») при воздействии спиртов МОСКВА 2009 Исполнители: д.м.н. проф . И.В.Саноцкий - руководитель д.б.н.Л.П.Кузьмина к.м н. С.В.Каютина к.б.н. Е.А.Карпухина м.н.с. Н.В.Горлова к.м н. Н.А.Думкина м.н.с. Н.В.Хорошилова техник Г.Ф.Громова техник В.И.Кокоревцева С О Д Е Р Ж А Н И Е ^ Этанол* – 40 % водный раствор этанола Этанол* + «Алкос» – 40 % водный раствор этанола в смеси с биологически активной добавкой «Алкос» (в малой дозе), предназначенной для введения в состав пищевых продуктов Этанол* + «Алкос» * – 40 % водный раствор этанола в смеси с биологически активной в смеси с биологически активной добавкой «Алкос»(в большой дозе), предназначенной для введения в состав пищевых продуктов DL50 – половинная смертельная доза – доза вещества, вызывающая смерть половины животных за 14 дней наблюдения Limaс – порог острого действия Кcum – коэффициент кумуляции – отношение дробной суммарной смертельной дозы к DL50 ЛДГ – лактатдегидрогеназа γ-ГТ – гамма- глютаминтранспетидаза Щел фосф. – щелочная фосфотаза АСТ – аспартатамино трансфераза АЛТ – аланинамино трансфераза PRO – протеины BLD – биливердин NIT – нитраты ЛПВП – липопротеиды высокой плотности ЛПНП – липопротеиды низкой плотности Кaterog. – коэффициент атерогенности Билируб. пр. – билирубин прямой neg – отрицательный nor – нормальный ^ ГУ ИНСТИТУТ МЕДИЦИНЫ ТРУДА О Т Ч Е Т по теме: Исследование защитного действия диметилдипиразолилселенида в смеси с сукцинатами (биологически активные добавки к пище, предназначенные для введения в состав пищевых продуктов, «Алкос») при воздействии спиртов АннотацияВ исследованиях на белых крысах популяции Вистар показано, что 40 % водный раствор этанола, а также раствор этанола в смеси с «Алкос» при определении Limac методом «Открытое поле» не вызвали разницы в реакциях. При 3-месячном введении в желудок (субхронических эксперимент) этанол в дозе 2 мл 40 % раствора на животное (2 г/кг по этанолу, что соответствует 1/5 DL50, а в пересчете на стандартного человека 70 кг ~140 мл по этанолу) не влиял на прирост массы тела по сравнению с контролем. «Алкос» в обеих дозах (см. ниже) не изменяла указанное действие этанола. Рефлекс жажды, измеряемый в течение субхронического опыта (потребление воды, а также 10 % раствора этанола) не имел особых различий между группами, за исключением отдельных дней (температура воздуха 25 ºС), когда потребление воды в подопытных группах было относительно снижено по сравнению с контролем за счет увеличения потребления 10 %-ого раствора этанола в контрольной группе. Как правило, подопытные и контрольные животные избегали пить спиртовой раствор. Этанол* через 1,5 и 3 месяца после начала субхронического эксперимента (при измерении на следующий день после очередного введения) не вызывал изменений ориентировочных реакций, норкового рефлекса и спонтанной подвижности. Добавление «Алкос» в рекомендованной заказчиком пропорции (0,1 г/л), а также в экспериментальной пропорции (2 г/л) при введении животным в дозах соответственно - 0,5 и 10 мг/кг массы тела не дало отличий в реакциях по сравнению с введением этанола* без добавок. Через 1,5 месяца после начала субхронического эксперимента при воздействии этанола* отмечено резкое снижение диуреза (без водной нагрузки) за 6 часов наблюдения. «Алкос» в обеих дозах уменьшали уростатическое действие этанола*. Во всех подопытных группах отмечено незначительное снижение удельного веса мочи и значительное снижение BLD. «Алкос» в малой дозе частично восстанавила BLD. Биохимическое исследование крови из подъязычной вены через 1,5 месяца после начала опыта показало отсутствие изменений активности трансаминаз; значительное (в 2 раза) увеличение количества триглицеридов при воздействии этанола*, которое нейтрализовалось в случае введения «Алкос»; увеличение активности ЛДГ при воздействии «Алкос» (при отсутствии изменений ЛДГ при воздействии этанола*). Биохимия крови после окончания субхронического опыта (3 месяца) свидетельствует о двукратном уменьшении коэффициента атерогенности при воздействии «Алкос» в большой дозе. При воздействии этанола* в крови на 1/3 возросло содержание глюкозы. «Алкос» в большой дозе усугубляла ситуацию. Одновременно «Алкос» в большой дозе - в отличие от этанола* - как и в ранние сроки, увеличивала активность ЛДГ. При морфологическом исследовании животных после субхронического опыта отмечено полнокровие внутренних органов при отсутствии изменений их массовых коэффициентов. Катаральных процессов в желудке не развивалось. При изучении кумуляции этанола и этанола в присутствии «Алкос» по методу Lim et al. установлена слабая кумуляция этанола. (Kcum> 6). Добавление «Алкос» увеличивало кумуляцию (Kcum 4). При этом биохимия крови выживших животных через 1 неделю после последнего введения свидетельствовала о весьма значительном увеличении активности АСТ: при действии этанола* - в 4 раза; этанола* + «Алкос» – в 4,8 раза; этанола*+«Алкос»* – в 5 раз (показатель тяжелого поражения печени. «Алкос» не оказали защитного действия) При кумуляции этанола*, уменьшилось соотношение «билирубин/билирубин пр.» за счет роста билирубина пр. Отмечено также значительное (на 2/3) повышение активности ЛДГ при кумуляции этанола при нормализующей роли «Алкос». Снижение содержания в крови триглицеридов (в 2 раза по сравнению с контролем) при кумуляции этанола свидетельствует о далеко зашедшей интоксикации – блокада синтеза эфиров жирных кислот. «Алкос» здесь не проявили эффекта (в субхроническом опыте при умеренных дозах этанола* концентрация триглицеридов напротив - значительно повышалась). У животных, выживших после изучения кумуляции, диурез после водной нагрузки (5 мл) за 6 часов не различался между группами. Выделение креатинина с мочой оказалось сниженным при воздействии этанола*. При воздействии системы этанол*+«Алкос» отмечено повышение содержания билирубина общ. и билирубина пр. Таким образом, «Алкос» оказалась эффективным защитным средством в субхроническом эксперименте при введении умеренных доз этанола* при нормализации липидного обмена: нормализации концентрации триглицеридов в крови, липидного обмена (прироста массы тела), уменьшении коэффициента атерогенности (система этанол*+«Алкос»*). «Алкос» в остром и субхроническом эксперименте не оказывала влияния при воздействии этанола* на реактивность животных по функциональным поведенческим показателям. В ряде случаев «Алкос» вызывала биохимические изменения в большей степени, чем этанол* без добавок, что подлежит экспериментальному изучению. Весьма вероятно, явление объясняется защитными механизмами, свойственными воздействию «Алкос». «Алкос» ухудшала состояние животных при воздействии этанола* в высоких дозах (при изучении кумуляции), что может быть связано с особенностями комбинированного действия ингредиентов «Алкос»: диметилдипиразолилселенида (в следовых дозах) и янтарной кислоты (в сравнительно значительной дозе). По мнению авторов исследования, особенности комбинированного действия ингредиентов «Алкос» должны быть дополнительно изучены. ВведениеБиохимическая промышленность получила особое развитие во второй половине ХХ века, когда микробный синтез стал широко применяться при изготовлении лекарств (особенно антибиотиков). Впрочем, микробный синтез, как известно, был развит и многие тысячи лет назад в связи с возникновением потребности использования в быту наркотических свойств этанола. Поэтому дифференцировать промышленное и бытовое воздействие последнего крайне затруднительно. Большинство публикаций касаются заведомо бытового воздействия этилового спирта. На больших статистических группах показано, что этанол при регулярном применении в целом сокращают длительность жизни на 5 лет за счет учащения в 4-5 раз сосудистых изменений (инфаркт, инсульт, гипертония), а также за счет поражения печени (гепатит, цирроз), поджелудочной железы (снижение секреции инсулина), угнетения иммунной системы. В основе указанных изменений лежит свойство этанола (как и других спиртов) этерифицировать жирные кислоты (пальмитиновую, олеиновую, линолевую), что приводит к накоплению триглицеридов в печени и в крови. Этанол обладает неспецифическим мембранотоксическим действием, нарушает синтез белков-ферментов, вызывает дистрофические процессы в мозгу и внутренних органах. Нарушения липидного обмена связаны с неспецифическим окислительным стрессом, снижением концентрации токоферола, селена и цинка, контролирующих ферменты второй фазы биохимической адаптации - глутатионпероксидазу, супероксиддисмутазу. Каскад метаболических нарушений липидного обмена приводит к гиперлактатемии, задержке мочевой кислоты (алкогольная подагра).[4] Основным звеном патогенеза алкогольной интоксикации являются продукты окисления этанола – ацетальдегид, 80% которого превращается в свободный ацетат. Последний, в свою очередь, оказывает влияние на дыхательный цикл Кребса, увеличивает отношения лактат/пируват. В период демографических кризисов особое значение имеет угнетающее действие алкоголя на генеративную функцию (снижение половых возможностей отмечено у 1/3 респондентов), а также иммунотропное действие алкоголя. Так, еще в ранних наблюдениях установлено повреждение потомства при употреблении этанола отцами (при отсутствии спиртовой зависимости у матерей). При подворовом обследовании жителей г. Львова установлена у 20-50% рожденных детей умственная отсталость, у > 50% - соматическаяие отклонения; повышенная смертность новорожденных (генетическое действие) [6]. В малых дозах этанол оказывал в ряде случаев положительный терапевтический эффект. К сожалению, в связи с выраженным психотропным действием население в подавляющем большинстве случаев не может провести грань между малыми дозами алкоголя (традиционное употребление виноградных вин) и большими дозами (регулярное употребление конъяков, водок), когда наряду с указанными выше последствиями скрытой и явной (высокая смертность при острой алкогольной интоксикации) спиртовой нагрузке, возникает наркомания, влекущая за собой разрешительные социальные последствия (семейный кризис, преступность, техногенные катастрофы) [7]. По указанной причине наряду с общественными, юридическими и гуманитарными мероприятиями по предупреждению и лечению последствий бытового (и промышленного) воздействия спиртов алкогольной болезни издавна разрабатываются медицинские способы защиты. В последнее время внимание обращено среди прочих средств на защитное действие соединений селена (или на комбинации соединений селена с веществами иных групп). ООО «Биосан-Алкос» предложено несколько добавок, которые, по идее, должны были бы снизить повреждающее действие этанола, как в производственных условиях, так и в быту (имея в виду возникновения при биосинтезе высших спиртов и других высокотоксичных примесей) на основе янтарной кислоты и сукцинатов с добавкой биологически высокоэффективного диметилдипиразолилселенида — наименее токсичного и наименее кумулятивного соединения Se (биологическоие свойства ДМДТПС (см. [5]). Защитное действие «Алкос» при воздействии этанола* было изучено Институтом токсикологии Минздравсоцразвитиея. Было установлено, что «Алкос» не изменяет токсичности этанола* (DL50 = 10 г/кг). В разных вариантах эксперимента с применением этанола* с «Алкос» в дозах, близких к смертельным или на уровне смертельных, как правило, не имеет различий на уровне поведенческих реакций по сравнению с этанолом* за исключением некоторого изменения показателя общей работоспособности и количества вставаний (ориентировочная реакция) в методике «открытое поле» (таблицу 1 ) [1]. Таблица 1- Биологическое действие этанола с добавкой и без нее
К сожалению, авторы игнорировали общепринятую схему токсикометрии. Указанное обстоятельство предопределило потребность проведения дополнительных исследований при несмертельной интенсивности воздействия в соответствии с Методическими указаниями по изучению токсичности и опасности новых веществ (DL50, Limac,,Kcum, хронический эксперимент с применением функциональных, морфологических и молекулярных тестов). В задачу настоящего исследования входила оценка защитного действия «Алкос» и определение ее антидотной роли для защиты потомства при воздействии этанола. 1 МетодикаОпыты ставились на белых крысах-самцах популяции Вистар, полученных из питомника РАМН и содержащихся на стандартном пищевом рационе согласно приказу РАМН (гранулированный корм + добавки творога, вода ad lidbitum). Начальная масса тела животных cоставляла около 300 г. Животные содержались по 10 штук в стандартной клетке. Исследуемые вещества водились per os зондом с оливой на конце. ^ При определении порога острого действия Limac общие объемы жидкости (40 % р-р этанола) колебались от 0,3 до 5 мл. Изменение реакций производилось через 30 минут после введения. «Открытое поле» представляет собой круг, диаметром 1 м., поверхность которого расчерчена прямыми линиями на квадраты. На пересечении прямых линий просверлены отверстия («норки») Животное помещается в центре круга на определенное время, в течение которого регистрируется количество вставаний на задние конечности (ориентировочный рефлекс), количество заглядываний в «норки» (норковый рефлекс) и интенсивность перемещения по полу, замеряемое количеством пересечений расчерченных линий (спонтанная подвижность). Суммируя отобранные показатели, получают общую двигательную активность. ^ Исследования проводились на крысах самцах, разделенных на 4 группы по 10 животных в группе. Исследуемые образцы вводили в течение 3 месяцев 3 раза в неделю в дозе 2 г/кг, что соответствует 1/5 DL50, а в пересчете на стандартного человека 70 кг ~140 мл по этанолу. Добавление «Алкос» производилось в рекомендованной заказчиком пропорции (0,1 г/л), а также в экспериментальной пропорции (2 г/л) при введении в дозах соответственно – 0,5 и 20 мг/кг массы тела по этанолу. Регистрируемые показатели: ориентировочная реакция (вставание), норковый рефлекс (заглядывание в отверстия, просверленные в полу), общая спонтанная подвижность, молекулярные индикаторы (в крови и в моче), интегральные показатели (смертность, прирост массы тела, рефлекс жажды - потребление воды, а также 10 %-ого раствора этилового спирта) фиксировались спустя 1,5 и 3 месяца от начала опыта. В конце эксперимента проведено морфологическое исследование, определены массовые коэффициенты органов. Кровь получали из подъязычной вены в гепаринизированные пробирки. Для исследования крови использовали анализатор KONELAB -30 i с методическими приложениями. Через 1,5 месяца исследовались следующие показатели: щелч. фосф., АСТ, АЛТ, холестерин, триглицериды, глюкоза, γ-ГТ, ЛДГ, креатинин, мочевая кислота, общий белок, мочевина. Анализ функции почек производили путем измерения диуреза без водной нагрузки или с водной нагрузкой (5 мл) за 6 часов. Животные помещались в обменные клетки с ловушками для кала. Моча подвергалась биохимическому анализу стандартными методами на анализаторе Combilyzer COMBINA. В моче изучались следующие показатели: билирубин - маркер состояния печени и др., уробилиноген - маркер состояния печени и др., аскорбиновая кислота - маркер общего состояния, глюкоза - маркер поджелудочной железы, ЛДГ - маркер углеводного обмена, глюкоза - маркер состояния поджелудочной железы и др., pH - маркер состояния почек, NIT - маркер состояния почек, лейкоциты - маркер состояния почек, уд. вес – маркер состояния почек. Через 1 неделю после трехмесячной субхронической экспозиции животные были забиты обезглавливанием. Кровь была собрана в гепаринизированные пробирки и подвергнуты биохимическому анализу по следующим показателям: холестерин, ЛПВН, глюкоза, ЛЛДГ, γ-ГТ. За несколько дней до забоя у животных было исследовано общее функциональное состояние методом «открытое поле». ^ Существует несколько методов исследования функциональной кумулятивной активности. Распространен метод Ю.С. Кагана и В.В.Станкевича, заключающийся в дробном введении вещества в избранной дробности на протяжении нескольких месяцев. Регистрируется смертность животных в определенные сроки. В свое время Н.С.Правдиным была предложена простая схема изучения кумуляции: ежедневно в течение 10 дней вводится 1/10 от DL50. Затем применяется разрешающая доза (DL50), если смертность животных больше половины, значит наступила кумуляция, если смертность от разрешающей дозы уменьшена – наступило «привыкание». Недостаток метода – отсутствие количественной оценки. Наибольшее распространение в последнее время получил метод изучения функциональной кумуляции по Lim et al. Метод заключается в постепенном увеличении вводимой дозы, начиная с 1/10 DL50 (далее увеличивая ее через каждые 4 дня в 1,5 раза). Отмечается смертность. Кумуляции измеряется коэффициентом, представляющим собой отношение кумуляцией DL50 к одноразовой DL50 (на пробитной сетке). Таблица 2 - Схема изучения кумуляции по Lim et al.
За 24 дня введения Е = 8,6 DL50 DL50 кумулятивная (%) Kcum =–––––––––––––––––––––– DL50 одноразовая (%) В настоящем эксперименте отмечалась смертность животных (как это требует классический подход), а также изучение состояния выживших за месяц эксперимента животных путем прироста массы тела, а также биохимического анализа крови и мочи по избранным показателям. После окончания эксперимента по изучению кумуляции в крови выживших были изучены следующие ингредиенты: АСТ - маркер состояния печени и др., АЛТ - маркер состояния сердца и др., билирубин общ. - маркер состояния желчевыделения и др., билирубин пр. - маркер состояния желчеотделения и др., ЛДГ - маркер углеводного обмена, глюкоза - маркер состояния поджелудочной железы и др., триглицериды - состояние жирового обмена, мочевина - маркер состояния почек, креатинин - маркер состояния почек. При оценке состояния почек у животных, выживших после изучения кумуляции был применен суженный набор показателей: диурез после нагрузки жидкостью (5 мл) в течение 6 часов; билирубин общ.; билирубин пр.; коэффициент – соотношение общего билирубина и его производного; креатинин как показатель диуреза. ^ Одной группе (7 голов) мышей-самцов вводили в желудок 40% водный раствор этанола, другой группе мышей-самцов вводили тот же раствор в смеси с «Алкос» в пропорции 0,1 г/л. Вводимые дозы – 0,5 мг/кг массы тела. Введение осуществлялось зондом с оливой на конце в течение 10 дней. Затем к каждому самцу были подсажены по 3 интактные самки, которые были забиты через 15 дней. В матках животных подсчитывались места имплантации, количество живых плодов ( с целью выявления постимплантационной гибели зародышей). Одновременно по размерам живых плодов определялся их возраст с целью определения сроков зачатия после подсадки к самцам (оценка полового инстинкта самцов). ^ Смертельные дозы этанола и этанола с добавками было решено не изучать, поскольку указанные величины многократно устанавливались. Следует напомнить, что DL50 препаратов практически не отличались друг от друга и были равны около 10 г/кг - по этанолу (вещество 4 кл. опасности – по ГОСТ - малоопасное.) При определении порога острого действия (Limac) методом поведенческих реакций («открытое поле») разницы между образцами не было обнаружено. ^ В таблице 3 представлены данные о приросте массы тела животных, подвергнутых субхроническому воздействию препаратов, как интегральном показателе их состояния. Для удобства сравнения прирост массы тела выражен в % к исходному состоянию. Особой разницы между группами не обнаружено. Таблица 3 - Прирост массы тела в субхроническом опыте
Что касается общего функционального состояния животных, то оно мало различалось в течение всего эксперимента в подопытных группах, а также по сравнению с контролем (табл 4, 5 ). Ориентировочная реакция, норковый рефлекс, спонтанная подвижность, общая двигательная активность находились в пределах ошибки опыта. Намеки на снижение функциональной активности просматриваются в группе № 4 (этанол*+«Алкос*»), однако обнаруженная тенденция требует подтверждения. Таблица 4 – Влияние исследованных образцов на поведение животных в «открытом поле» (спустя 1,5 месяца)
Таблица 5 – Влияние исследованных образцов на поведение животных в «открытом поле» (спустя 3 месяца)
Другой интегральный показатель – безусловный рефлекс жажды также не продемонстрировал особых изменений. Количество выпитой жидкости мало различалось между группами. Животные не пили поставленный наряду с водой 10% раствор этанола. Исключением явились жаркие дни (Твоздуха – 25 °С), когда контрольные животные, а также животные из группы с субхроническим воздействием этанола* без добавки в виде исключения выпили большее количество спиртового раствора, чем воды. Отсутствие возбуждения или угнетения нервной системы при субхроническом воздействии этанола* без и с добавкой еще не означает адаптации животных к изучаемым раздражителям. В таблице 6 представлены биохимические характеристики крови, взятой в середине субхронического эксперимента (1,5 мес.). Таблица 6 – Влияние введения исследуемых образцов на биохимические показатели крови через 1,5 месяца после начала эксперимента
Прежде всего обращает на себя внимание двукратный рост триглицеридов и заметный рост содержания глюкозы в крови (при неизменности активности АСТ и АЛТ) при воздействии этанола*. Однако в случае роста триглицеридов «Алкос» оказали нейтрализующее действие, тогда как на рост концентрации глюкозы «Алкос» влияния не оказали. Среди показателей механизма действия этанола большое значение следует придать γ -ГТ и ЛДГ. Первый показатель при воздействии этанола* снизился хотя и незначительно, но стабильно, тогда как содержание ЛДГ возросло почти на 2/3. «Алкос» и здесь не оказали влияния. Через 1,5 месяца после начала субхронического эксперимента биохимические характеристики мочи претерпели изменения (Таблица 7). Таблица 7 – Влияние введения исследуемых образцов на показатели анализа мочи через 1,5 месяца после начала эксперимента
Биохимическая картина крови через 3 мес. субхронического эксперимента (табл.8) обращает на себя внимание уменьшением индекса атерогенности в 2 раза в случае воздействия этанола*+«Алкос»* по сравнению с воздействием этанола* без добавки. Таблица 8 – Влияние введения исследуемых образцов на биохимические показатели крови через 3 месяца после начала эксперимента
Отмечено снижение концентрации высоко патогенных липидов низкой плотности. Также как и в середине эксперимента, отмечено повышение концентрации триглицеридов и глюкозы при воздействии этанола*. «Алкос» в данном случае нейтрализующей роли не играли, как и при измерении ЛДГ (причем этанол не изменял концентрацию ЛДГ, тогда как добавки увеличивали ее содержание почти в 2 раза, Возможно, компенсаторно в соответствии с механизмом детоксикации. Содержание γ -ГТ несколько снижалось при воздействии раствора этанола* без добавки, при воздействии этанола*+«Алкос» или этанола*+«Алкос» наоборот несколько повышалось. При патоморфологическом исследовании у животных, забитых декапитацией после субхронического эксперимента, отмечено полнокровие внутренних органов. Признаков раздражения слизистой желудка не обнаружено. Массовые коэффициенты внутренних органов не различались (массовые коэффициенты наиболее «заинтересованного» органа –печени представлены в Таблице 9 ). Таблица 9 - Массовые коэффициенты печени после 3-х месячного субхронического эксперимента
Стандартизованной оценки интенсивности кумуляции до сих пор нет. В таблице 10 показано предложение различных авторов Таблица 10 - Классификация опасности веществ по коэффициенту кумуляции (Кcum)
Исходя из приведенной классификации этанол относился к слабокумулятивным веществам ( K cum >6), тогда как добавки придавали ему свойства средней кумуляции (Kcum = 4) Прибавка массы тела животных, выживших после изучения кумуляции, по существу, оказалась нулевой (павшие животные перед гибелью значительно теряли в массе тела, см. таблицу 11), что согласуется со значительным (в 2 раза) уменьшением содержания триглицеридов в крови (таблица 12). Таблица11 - Прирост массы тела в процессе исследования кумуляции
Из Таблицы 12 следует, что в процессе изучения кумуляции (введение кумулятивно смертельных доз этанола и этанола с добавками) у животных наблюдалось катастрофическое поражение печени: содержание АСТ в крови выросло при воздействии этанола* в 4 раза, а в случае добавления «Алкос» – еще больше. При этом, как указано выше, в подопытных группах наблюдалось четырехкратное уменьшение содержания триглицеридов.- эфиров жирных кислот и глицерина (что может быть связано с отсутствием прироста массы тела). Таблица 12 – Биохимические показатели крови животных, выживших после исследования кумуляции
При действии этанола* наблюдалось снижение содержание билирубина общ. в крови, «Алкос» стимулировали дальнейшее снижение содержания билирубина, причем этанол* уменьшала коэффициент соотношения билирубина общ. и билирубина пр. Содержания последнего оказалось даже большим чем первого, что подлежит проверке. (№.2). «АЛКОС» ослабляли указанный процесс. Судя по биохимической картине крови, поражение поджелудочной железы оказались в процессе кумуляции не выраженным (концентрация глюкозы не изменилась). Снижение содержания билирубина в крови при воздействии этанола*+«Алкос» возможно объяснить увеличением его выделения с мочой. При воздействии этанола*+«Алкос»* наоборот наблюдалось уменьшение выделения билирубина (табл. 13), что не согласуется с биохимической картиной крови и требует дополнительного изучения. В этой же группе содержание билирубина общ. оказалось меньшим, чем содержание билирубина пр. (К = 0,72), одновременно отмечено резкое снижение содержания креатинина – (почти в 3 раза) – возможно, поражение почек, что также требует дополнительного изучения (Таблица 13). Таблица 13 - Биохимия мочи (ср. показатели) у выживших животных после исследования кумуляции
При воздействии этанола в смертельных дозах (кумуляция) активность ЛДГ несколько снизилась, в случае добавления «АЛКОС» - возросла очень незначительно (не так, как в субхроническом опыте), что может свидетельствовать об истощении механизма детоксикации. ^ Полученные данные приведены в таблицах 14 и 15. Бросается в глаза грубое нарушение половой функции: у половины самцов как в группе с водкой без добавки, так и в группе этанол* с добавкой не появилось потомства. Поскольку в большинстве случаев это касалось всех трех подсаженных самок, можно утверждать угнетение полового инстинкта у самцов. В отдельных случаях у одной из трех подсаженных самок регистрировалось бесплодие. Возможно, оно было связано не только с состоянием самца, но также и самок. Таблица 14 - Постимплантационная гибель плодов у интактных самок, оплодотворенных самцами, подвергнутыми воздействию этанола* (с указанием срока оплодотворения после подсадки)
Таблица 15 - Постимплантационная гибель плодов у интактных самок, оплодотворенных самцами, подвергнутыми воздействию этанола*+«Алкос» ( с указанием срока оплодотворения после подсадки)
Cравнение результатов опыта в обеих группах (этанол*, а также этанол*+»АЛКОС») приведено в таблице 16. Таблица 16 - Сравнительная характеристика действия на репродукцию этанола* и этанола*+»АЛКОС»
Как следует из таблицы 16, помимо изменений в процессе оплодотворения (у половины оплодотворенных самок отмечена значительная задержка средних сроков оплодотворения – гр. .№ 1 - 3,7 дня, гр.№ 2 - 2,7 дня (противодействие угнетению полового инстинкта со стороны добавки). Самое существенное: обнаружены определенные сдвиги в проявлении постимплантационной гибели плодов в гр.№ 1 в среднем 0,8 на самку (около 10% от зачатых) в гр.№ 2 %- в 2 раза меньше, что можно расценить как определенное защитное действие «Алкос». В связи с важностью вывода желательно повторить эксперимент на большом материале. ЗаключениеТаким образом, наиболее яркими проявлениями этанольной интоксикацмии в субхроническом эксперименте явились нарушения липидного обмена, что соответствует известным представлениям о метаболическом ее патогенезе: увеличение содержания триглицеридов в крови, увеличение индекса атерогенности. «Алкос» оказывали нейтрализующее действие, что соответствует ранее опубликованным данным [2, 3]. Как свидетельствуют данные литературы, между отдельными компонентами липопротеидов (холестерин, триглицериды и др.) существует органическая связь которая и определяет опасность их атерогенного действия (отдаленные последствия интоксикации). Метаболические механизмы защиты в настоящем исследовании специально не изучались, однако данные литературы об оксидативном стрессе, уменьшении содержания в организме природных антиоксидантов (Se, токоферол) при воздействии этанола прямо подводят к мысли о компенсаторной роли применявшихся «Алкос» (диметилдипиразолил селенид + сукцинат). Эффект варьировался в зависимости от дозы профилактического препарата (дозы различались в 20 раз) и сроков воздействия, в течение которых могло наступить истощение механизмов защиты или появиться новое ее звено. Кроме того, как известно, биохимические процессы в организме протекают волнообразно, и естественная смена фаз может привести к изменениям трактовки результатов эксперимента. При воздействии «Алкос» в условиях смертельных доз этанола (кумуляция) их защитного эффекта обнаружено не было. Возможно, это объясняется недостаточностью (или, наоборот, избыточностью) дозировок примененных антиоксидантов, возможно, тяжестью процессов повреждения. Полученные результаты ставят исследователя перед вновь возникшими проблемами, которые ждут своего изучения и могут явиться основой коррекции рецептуры «Алкос», или способа ее применения. Литература1. Исследование способности пищевой добавки модифицировать токсическое действие этилового спирта (заключительный отчет ФГУН «Институт токсикологии ФМБА Россия», С.-Петербург, 2008 г., 36 с. 2. А.В, Погожева, А.В.Васильев «Изучение клинической эффективности «АЛКОС» «Селекор» у больных с сердечно-сосудистыми заболеваниями». В кн.: «Соединения селена и здоровье», М., 2004 г., стр.100. 3. Л.В. Солупаева «О результатах клинических испытаний биологически активной добавки «Селекор» (диметилдипирозолилселенид) при диспансеризации летчиков» В кн:»Соединения селена и здоровье», М., 2004 г., стр.111 4.«Механизмы и клинические проявления токсического действия алкоголя» (обзор). Национальный центр здоровья, 2009 г. 5 .И.В. Саноцкий «Новая селен-органическая биологически активная пищевая добавка («АЛКОС») как паллиативная мера защиты при химических воздействиях. ж.»Медицина труда и промышленная экология» 2009, № 7, стр.36, библ. 6. И.В. Саноцкий «Социальные гарантии развития детей с ограниченными возможностями. В кн: «Педагогическая и психологическая абилитация детей с ограниченными возможностями» 7 «Алкоголизм» (Руководство для врачей). М., «Медицина», 1983 г.</1> |
|||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
Ваша оценка этого документа будет первой.
Ваша оценка:
Похожие:
 |
Биологически активные и пищевые добавки в стоматологии |
|
Биологически активные добавки обман или польза? |
|
Биологически активные добавки к питанию роскошь или необходимость? |
|
Инструкция по применению биологически активной добавки к пище «Черника с витаминами Сантэфарм» |
|
Отчет о результатах клинического исследования биологически активной добавки к пище токоферит |
|
Заключение о результатах проведения клинической апробации биологически активной добавки к пище детокс |
|
Биологически активные добавки Корпорации “Тяньши”, Мирового лидера в разработке и производстве данной |
|
Многолетний труд военных медиков и гражданских специалистов увенчался созданием уникального препарата |
|
Это органические и неорганические соединения, входящие в состав пищевых продуктов и необходимые для |
|
Экстракт растительный конденсированный) патентованный фитопрепарат полифункционального действия (биологически |
База данных защищена авторским правом ©MedZnate 2000-2016
allo, dekanat, ansya, kenam
обратиться к администрации | правообладателям | пользователям
allo, dekanat, ansya, kenam
обратиться к администрации | правообладателям | пользователям