Viii международная конференция биоантиоксидант
|
|
Скачать 6.8 Mb.
|
|
^ ЖИРОРАСТВОРИМЫХ ОБЪЕКТОВ ПОТЕНЦИОМЕТРИЧЕСКИМ МЕТОДОМ С МЕДИАТОРНОЙ СИСТЕМОЙ Герасимова Е.Л., Рогозникова А.В., Брайнина Х.З. Уральский государственный экономический университет, г. Екатеринбург, ул. 8 Марта, 62, +7 343 2572415, [email protected] В системе антиоксидантной защиты организма от свободных радикалов особое место занимают жирорастворимые антиоксиданты, основными представителями которых являются α-токоферол, каротиноиды, стерины, убихинон и т.д. Жирорастворимые антиоксиданты локализуются преимущественно в биологических мембранах, липопротеинах крови, структурах наиболее подверженных воздействию активных форм кислорода за счет содержания ненасыщенных жирных кислот. Поэтому определение интегрального содержания жирорастворимых антиоксидантов в пищевых, косметических продуктах, а также в биологических объектах, является чрезвычайно актуальной задачей. Предложен потенциометрический метод определения интегральной антиоксидантной/оксидантной активности (АОА/ОА) водорастворимых антиоксидантов в биологических объектах, пищевых продуктах, продовольственном сырье [1,2]. Источником информации является сдвиг потенциала электрода, наблюдающийся при введении исследуемой пробы в среду, содержащую медиаторную систему K3[Fe(CN)6]/K4[Fe(CN)6]. В настоящей работе предложен метод определения интегральной антиоксидантной активности жирорастворимых антиоксидантов в пищевых и косметических продуктах с применением двухфазных систем. При создании прямой микроэмульсии масло/вода в качестве дисперсной фазы использовали раствор жирорастворимых модельных антиоксидантов (α-токоферол) в этиловом спирте или гексане. Использование указанных растворителей вызывает сдвиг потенциала медиаторной системы. Наблюдающийся сдвиг учитывался при расчете АОА. В качестве дисперсионной среды использовали фосфатный буферный раствор (рН=7,2). Эмульсии, содержащие гексан, стабилизировали добавлением поверхностно-активных соединений (ПАВ): гексадецилтриметиламмоний бромид (СТАВ), додецилсульфат натрия (SDS), додецилбензолсульфоната натрия (SDBS) в соотношении с дисперсной фазой 1:9. Добавление ПАВ в указанных концентрациях практически не влияет на потенциал медиаторной системы. Эмульсию создавали с помощью ультразвуковой обработки. Устойчивой считали эмульсию, если размер дисперсной фазы остается неизменным в течение 10 минут. Исследована интегральная антиоксидантная активность жирорастворимых антиоксидантов в растительных и сливочных маслах, косметических кремах. При анализе косметических кремов, в состав которых входят различные ПАВ, эмульсию получали прямым диспергированием материала в фосфатном буферном растворе. 1. Kh.Z. Brainina, A.V. Ivanova, E.N. Sharafutdinova, E.L. Lozovskaya, E.I. Shkarina. Talanta, 2007, V.71. – P.13-18. 2. Kh.Z.Brainina, L.V.Alyoshina, E.L.Gerasimova, Ya.E.Kazakov, A.V.Ivanova, Ya.B.Beykin, S.V.Belyaeva, T.I.Usatova, M.Ya.Khodos. Electroanalysis, 2009, V.21, № 3-5. – P. 618-624. ^ Павловская Н.Е., Солохина И.Ю., Гнеушева И.А., Яковлева И.В. ФГОУ ВПО «Орловский государственный аграрный университет», г. Орел, ул.Генерала Родина, 69. Е-mail: [email protected] Гречиха посевная является ценным биотехнологическим сырьем, в вегетативных и генеративных органах которой синтезируются и накапливаются растительные полифенолы, которые проявляют биологически активные свойства. В процессе комплексной переработки этой культуры остается огромное количество органического отхода - соломы, которая, несмотря на богатый комплекс БАВ (полисахариды и фенольные соединения), не используется как корм для животных, а чаще просто сжигается. В результате проведенных исследований на основании цветных реакций, тонкослойной хроматографии установлено, что в соломе гречихи содержатся следующие растительные полифенолы - флавоноиды (апигенин, ликвиритин) и дубильные вещества. Доминирующими полифенольными соединениями являются дубильные вещества – высокомолекулярные природные фенольные соединения, которые являются запасными веществами растения и обладают бактерицидными и фунгицидными свойствами, выполняют защитную функцию в отношении возбудителей патогенных заболеваний. Флавоноиды принимают участие в окислительно-восстановительных процессах растений, в выработке иммунитета, в защите растений от стрессовых факторов и обладают антиоксидантными свойствами. Широкое распространение флавоноидов и их низкий уровень токсичности, по сравнению с другими активными составляющими растений, дает возможность животным и человеку без риска для здоровья потреблять их в значительных количествах. По нашим данным, использование флавоноидов из семян гречихи индуцирует антиоксидантную систему гороха против окислительных повреждений, усиливает ростовые процессы (Павловская, Горькова, Бородин 2005, 2008). Целью данных исследований являлось изучение влияния полифенольного комплекса водного экстракта соломы гречихи на биологическую активность гороха. После водной экстракции соломы гречихи (1:5) сухой порошок получили путем удаления адсорбированной воды в лиофильной сушке LYOLAB-3000 (-600С). Семена гороха замачивались в исследуемом препарате на 2 часа. Установлено, что лиофильный экстракт (содержание флавоноидов - 11,2 мг/100 г) усиливает антиоксидантную систему гороха. Активность ферментов пероксидазы и супероксиддисмутазы повышается по мере развития проростков, при этом снижается активность каталазы, что указывает на формирование индуцированного иммунитета у растения. Показано, что концентрация 1*10-6% является наиболее оптимальной, так как после обработки семян активирует антиоксидантную систему и не обладает фитотоксической активностью. Таким образом, может быть перспективным использование лиофильного экстракта из соломы гречихи в предпосевной обработке семян гороха в концентрации 1*10-6% (0,006 на т) при создании новых средств защиты бобовых культур от грибных болезней и для активации иммунной системы. Применение биологически активных веществ в минимальных концентрациях экологически безопасно и экономически эффективно. ^ Рябоконь Н.И., Никитченко Н.В., Савина Н.В., Кужир Т.Д., Гончарова Р.И. Институт генетики и цитологии НАН Беларуси, Минск 22072, ул. Академическая, 27, Республика Беларусь e-mail: [email protected]; [email protected] Генетическая безопасность и здоровье населения зависят от состояния окружающей среды. Известно, что повреждения ДНК, реализующиеся в виде мутаций, приводят к злокачественной трансформации клеток и другим патологическим процессам. Защита генома от экзогенных и эндогенных мутагенов, поддержание его целостности и стабильности способствует повышению качества жизни. Одним из способов защиты генома является применение антимутагенов. Среди синтетических производных 1,4-дигидропиридина нами выявлены эффективные антимутагены, подавляющие спонтанный и химический мутагенез в половых и соматических клетках in vivo. Эффективность действия против спонтанных мутаций зависела от антиоксидантной и электронодонорной способности препаратов, а химиопротекторные свойства реализовались через запуск защитных систем организма, включая репарацию ДНК. Использование различных клеточных моделей in vitro позволило оценить эффективность и изучить некоторые механизмы генопротекторного действия одного из препаратов этой серии. Исследование препарата в широком диапазоне концентраций (10-12–10-1М) на клетках человека показало его низкую цитотоксичность: так, в лимфоцитах периферической крови IC50 составляет 290.6mM, что намного выше известных значений для аскорбиновой кислоты. На линиях клеток лимфомы мыши и китайского хомячка установлено, что препарат обладает антицитотоксическим эффектом, но не стимулирует рост и пролиферацию клеток. Используя щелочной и нейтральный метод ДНК комет, показано генопротекторное действие препарата в клетках человека и млекопитающих. Однако препарат оказался более эффективным против однонитевых, чем двунитевых разрывов ДНК, редуцируя уровень повреждений на 70% и 25–30% соответственно. Установлено также, что окислительные повреждения ДНК наиболее чувствительны к его действию, что, по-видимому, вызвано стимуляцией эксцизионной репарации оснований (BER). Защитный эффект препарата против радиационных, окислительных и алкилированных повреждений ДНК согласуется с антикластогенным действием, установленным в микроядерном тесте. Предполагалось, что генопротекторный потенциал препаратов этой серии может быть обусловлен их влиянием на энергетический обмен или поли-ADP-рибозилирование в клетке, которые являются NAD-зависимыми процессами. На клеточных линиях лимфомы, различающихся по радиочувствительности и метаболизму поли-ADP-рибозы, генопротекторные эффекты препарата проявлялись в зависимости от генотипа линий; результаты указывали, что мишенью воздействия может быть этот полимер. Влияние препарата на синтез поли-ADP-рибозы в клетках человека доказано молекулярными и иммуноцитохимическими методами, что подтверждает его участие в регуляции BER. Таким образом, продемонстрированы низкая цитотоксичность, отсутствие генотоксичности и стимулирующего влияния препарата на пролиферацию опухолевых клеток, радио- и хемопротекторная активность, способность препарата модулировать репарацию ДНК и влиять на сигнальные пути, задействованные в клеточном ответе на генотоксический стресс. Работа выполнена в рамках международного сотрудничества с c Латвийским институтом органического синтеза (Рига, Латвия), Центром Онкологии (Гливице, Польша), Институтом ядерной химии и технологии (Варшава, Польша). ^ АНТИОКСИДАНТНОЙ СИСТЕМЫ У ОНКОЛОГИЧЕСКИХ БОЛЬНЫХ С МЕТАСТАТИЧЕСКИМ ПОРАЖЕНИЕМ ПЕЧЕНИ Горожанская Э.Г., Свиридова С.П., Добровольская М.М., Филатова Н.А. РАМН Российский онкологический научный центр им.Н.Н.Блохина РАМН, г.Москва, 115478, Каширское шоссе 24, тел. 3249015, [email protected] Одно из ведущих мест в патогенезе печёночной недостаточности принадлежит реактивным кислородным радикалам и связанным с ними нарушениями в системах антиоксидантной защиты. Исследования, посвящённые этой проблеме, особо актуальны у больных злокачественными новообразованиями с обширным метастатическим поражением печени, поскольку метаболические и функциональные нарушения этого органа являются одной из причин развития тяжёлых послеоперационных осложнений, в том числе и септических. Поиск и применение лекарственных препаратов, основанных на регуляции метаболических нарушений, позволит не только повысить эффективность лечения, но и предотвратить развитие осложнений у тяжелой категории онкологических больных. В последние годы появились сведения, что раннее включение в комплексную терапию препарата «Селеназа» позволяет снизить летальность больных с полиорганной недостаточностью. В данной работе исследованы возможности «Селеназы» в восстановлении функции печени у больных с метастатическим поражением печени, ранее оперированных по поводу колоректального рака. Обследовано 2 группы больных (по 20 больных в каждой группе). Больным 1 группы после операции дополнительно к стандартной терапии внутривенно вводили «Селеназу» : в 1-е сутки 2мг и в последующие 4 дня по 1 мг. Больные контрольной 2-ой группы получали только стандартную терапию. Изучали активность SOD и содержание метаболитов оксида азота (NОx) иммуноферментным методом, а также содержание МДА и селена. До операции у всех больных уровень селена в плазме крови был в 1,5 раза ниже нормы, а уровни NОх и МДА в 1,7 раза выше, чем у здоровых лиц. Активность SOD была незначительно выше верхней границы нормы. Следует отметить, что высокий уровень NOx наблюдался только у больных метастатическим раком печени, в то время как у большинства онкологических больных с различной локализацией первичного очага, но без метастазов в печень уровень NОx был ниже нормы, а активность SOD достоверно выше. После операции уровень селена у больных обеих групп оставался ниже нормы, хотя у больных 1 группы к 5 суткам обнаружена тенденция к повышению его содержания. Одновременно отмечено снижение содержания NОx и активности SOD. У больных, не получавших «Селеназу», значения NОx и активность SOD оставались на прежнем уровне, а содержание МДА оказалось в 2 раза выше, чем до операции. Полученные данные свидетельствуют о расстройствах регуляции свободнорадикальных процессов при злокачественном поражении печени, что приводит к повреждению гепатоцитов, нарушению их функции и гибели. По-видимому, антиоксидантные свойства препарата «Селеназа» способствуют его гепатопротективному эффекту, что позволяет рекомендовать его при проведении корригирующей терапии, направленной на нормализацию антиоксидантного механизма защиты и улучшение функциональных свойств гепатоцитов. Результаты проведенных исследований подтверждают необходимость включения антиоксидантов в схему комплексного лечения больных злокачественными новообразованиями. ^ 3-ЗАМЕЩЕННЫХ ХРОМЕН-2-ОНОВ Григорьева О.А.1, Федотова О.В.1, Плотников О.П. 2 1Институт химии Саратовского государственного университета им. Н.Г. Чернышевского, г. Саратов , 410012, ул. Астраханская, 83, [email protected] 2 Федеральное учреждение здравоохранения, Российский противочумный институт «Микроб», 410005, ул. Университетская, 146, [email protected] В медицинской практике нашла применение целая серия препаратов хромен-2-онового ряда, обладающих широким спектром биологического действия. Известно их использование в качестве антиоксидантов [1], антимикробных, антивирусных и противоопухолевых препаратов [2]. Функциализация 3-замещенных хромен-2-онов, в частности 3-ацетоацетил-2H-хромен-2-она 1 с использованием азануклеофильных реагентов, придает им новые свойства и позволяет переходить к практически важным соединениям.  Нами показано, что взаимодействие субстрата 1 с ацетатом аммония в условиях реакции Чичибабина приводит к нуклеофильной атаке по атому углерода карбонильной группы в положении С1 заместителя и образованию с выходом 57% 3-(3-гидрокси-1-имино-2-бутенил)-2H-хромен-2-она (2). Реакция с гидроксиламином и гидразином сопровождается формированием новых гетероциклических систем 3-(5-метил-4H- изоксазол-3-ил)- и 3-(5-метил-4H-пиразол-3-ил)-2H-хромен-2-она (3, 4) с выходом 63 % и 47 % соответственно. При использовании этаноламина реализуется рециклизация лактонного фрагмента с обзазованием гидро -1,4- оксазепиновой системы (5) (75%). Определение антиоксидантной активности в рядах синтезированных соединений проведено метод хемилюминесценции (ХЛ) в системе свободнорадикального окисления, инициированного перекисью водорода. В качестве стандарта использован ДМСО. Анализируя полученные результаты, сделан вывод, что 3-замещенные хромен-2-оны 2 и 3 обладают высокой антиоксидантной активностью (аАО =2.5 (2), 2.3 (3), 1.8 (ДМСО)) и могут быть рекомендованы для дальнейшего изучения. Литература: 1. Ягодинец П.И., Скрипская О.В., Проданчук Н.Г., Чернюк И.Н., Синченко В.Г. Хим. - фарм. журн., 26, №5, 59 (1992) 2. Лакин К., Смирнова Т., Вишнякова Г. Хим. - фарм. журн., 23, № 10, 1212 (1989) ^ ОКИСЛЕНИЯ ВИНИЛПИРИДИНОВ Гробов А.М., Казнина М.А., Копылова А.С., Плисс Е.М. Ярославский государственный университет им. П.Г. Демидова, г. Ярославль, 150000, ул. Советская, 14, тел. 4852 (79-77-13), [email protected] Впервые исследована кинетика инициированного окисления винилпиридинов
в температурном диапазоне 313 343 K в среде инертного растворителя хлорбензола скорость окисления прямо пропорциональна концентрации мономера и корню квадратному из скорости инициирования и не зависит от парциального давления кислорода в диапазоне (0,2-1,0)105 Па. Анализ продуктов показал, что при окислении 2 ВП И 4 ВП гидропероксид практически не образуется, а при окислении МВП [ROOH] достигает порядка 10%:
Эти данные совместно с результатами кинетических исследований позволяют предполагать, что окисление 2-ВП И 4-ВП протекает по механизму, характерному для соединений с активированными π-связями: Инициатор(O2, M) M (i); M + O2 MO2 (1); MO2 + M MOOM (≡M) (2); MO2 + MO2 молекулярные продукты (6), где M – молекула мономера. В случае МВП возможна некоторая доля реакции: MO2 + RH MOOH + R Методом Говарда – Ингольда при 323 K измерены константы скорости присоединения кумилпероксирадикала к винилпиридинам (  ), которые соответственно равны, л/(мольc): 18,0 (МВП), 6,8 (2 ВП) и 6,2 (4 ВП).Полученные данные свидетельствуют, что по своей окисляемости (  ) и реакционной способности () π-связи винилпиридинов близки к стиролу. Этот результат в первом приближении можно считать аргументом в пользу существующего в органической химии представления о том, что пиридиновая система является аналогом бензольного кольца.При ингибированном окислении винил пиридинов обнаружен многократный обрыв цепей окисления стабильными нитроксильными радикалами пиперидинового ряда. Обсуждается вероятный механизм этого процесса. Работа выполнена при финансовой поддержке ФЦП «Научные и научно-педагогические кадры инновационной России», г/к № П2272 и г/к № 02.740.11.0636. Антиоксидантная активность плазмы крови, оксид азота и агрегация тромбоцитов у больных с сочетанием сахарного диабета типа 2 и артериальной гипертензии Груздева О. В.1, Кремено С. В. 1, Суслова Т.Е. 2, Левашкина Е.А. 2 1 - Научно-исследовательский институт комплексных проблем сердечно-сосудистых заболеваний СО РАМН ,г. Кемерово, Сосновый бульвар, д.6., [email protected] 2 – Научно-исследовательский институт кардиологии СО РАМН, г. Томск Сахарный диабет 2 типа ассоциируется с повышенным риском тромботических осложнений, природа возникновения которых в настоящее время интенсивно исследуется. Результаты экспериментальных работ свидетельствуют о повышенной чувствительности тромбоцитов больных с сахарным диабетом к различным индукторам агрегации, включая АДФ, тромбин и коллаген, однако патофизиологические факторы, ведущие к нарушению функции тромбоцитов при СД 2 типа до конца не изучены. Известно, что активные формы кислорода и NO принимают участие в регуляции функциональной активности тромбоцитов. Показано, что супероксидный анион (О2-) и перекись водорода усиливают агрегацию тромбоцитов, вызванную коллагеном, арахидоновой кислотой и АДФ. NO in vitro ингибирует адгезию и агрегацию тромбоцитов. В физиологических условиях существует равновесие между продукцией АФК и активностью антиоксидантной системы. Согласно экспериментальным данным NO и его метаболиты (нитриты) могут проявлять антиоксидантные свойства. Сахарный диабет и артериальная гипертензия сопровождается усилением продукции АФК, активацией ПОЛ и снижением антиоксидантного потенциала. Целью исследования явилось изучение коллаген-индуцированной агрегационной активности (коллаген-АА) тромбоцитов, стабильных метаболитов оксида азота и антиоксидантной активности плазмы крови (АОА) у больных с сочетанием сахарного диабета типа 2 и артериальной гипертензии. Было обследовано 24 больных с сочетанием сахарного диабета типа 2 и артериальной гипертензии и 16 здоровых лиц. Агрегационную активность обогащенной тромбоцитами плазмы (ОТП) и изолированных тромбоцитов исследовали турбодиметрическим методом. Для индукции агрегации использовали коллаген (2 мг/мл). Содержание стабильных метаболитов оксида азота (нитритов и нитратов) и Общую антиоксидантную активность плазмы в плазме крови оценивали с помощью специализированных тест-систем. Достоверность различий оценивали с помощью непараметрических методов. У больных обнаружено увеличение общей АОА на фоне снижения суммарного содержания стабильных метаболитов оксида азота в плазме крови по сравнению со здоровыми донорами. У больных обнаружено увеличение степени и скорости коллаген-АА в ОТП и изолированных тромбоцитов по кривой светопропускания. Выявлена отрицательная корреляционная связь между АОА и степенью и скоростью коллаген-АА изолированных тромбоцитов по кривой светопропускания (-0,62 p=0,025 и -0,54 р=0,05 у больных и -0,58 p=0,05 и -0,6 р=0,05 у здоровых, соответственно). В группе больных найдена отрицательная зависимость между степенью и скоростью коллаген-АА изолированных тромбоцитов и ОТП по кривой светопропускания и содержанием стабильных метаболитов NO плазмы крови (-0,67 p=0,024 и -0,73 р=0,01), у здоровых доноров подобные взаимосвязи отсутствовали. Таким образом, увеличение агрегационной активности тромбоцитов при сахарном диабете 2 типа имеет тесные взаимосвязи с нарушением метаболизма оксида азота и усилением антиоксидантной активности плазмы крови. По-видимому, при сахарном диабете 2 типа в условиях измененного метаболического фона оксид азота и его стабильные метаболиты участвуют не только в регуляции агрегационной активности тромбоцитов, но и вовлекаются в обеспечение эффективных механизмов ликвидации активных форм кислорода, обладающих высоким проторомбогенным потенциалом. ^ Груздева О.В., Паличева Е.И., Барбараш О.Л., Дылева Ю.А., Салахова А.С., Шурыгина Е.А., Барбараш Л.С. Научно-исследовательский институт комплексных проблем сердечно-сосудистых заболеваний СО РАМН ,г. Кемерово, Сосновый бульвар, д.6., [email protected] К настоящему времени накоплены многочисленные данные, позволяющие рассматривать окислительный стресс в качестве одного из ключевых патогенетических компонентов, инициирующих возникновение и развитие атеросклероза. Активные формы кислорода наряду с чрезмерной активации перекисного окисления липидов (ПОЛ) вызывают также и окислительную модификацию белков, приводящую к патологическим изменениям их конформации, свойств и функций. Имеются публикации, позволяющие рассматривать окислительно-модифицированные белки и в первую очередь липопротеины низкой плотности (ом ЛПНП) в качестве маркерных показателей развития сердечно-сосудистых заболеваний атеросклеротического генеза (Faviou E. et al., 2005; Рагино Ю.И.,2006; Гирина Л.В., 2007;). Установлено, что ом ЛПНП усиливают секрецию эндотелина-1, тормозят активность NO-синтазы и, тем самым, способствуют спазмированию артерий (Перова Н.В., 2009). Окислительно-модифицированные ЛПНП снижают активность фибринолиза, ингибируя секрецию эндотелиальными клетками тканевого активатора плазминогена (ТАП) и стимулируя продукцию этими же клетками ингибитора ТАП, усиливая тромбообразование. Вместе с тем в литературе отсутствуют сведения об динамических изменениях уровня ом ЛПНЛ у больных в острый период инфаркта миокарда (ОИМ) и на начальном этапе восстановительного периода, что послужило основанием для выполнения настоящего исследования. Цель исследования: Оценить содержание о-м ЛПНП и антител к ним в крови у пациентов с острым инфарктом миокарда с подъемом сегмента ST на ЭКГ в динамике (1-ый и12-ый день ОИМ). Материал и методы: Обследованы 69 пациентов (47 мужчин и 22 женщины) с ОИМ Диагноз ОИМ устанавливался согласно рекомендациям ВНОК 2007 на основании клинических, электрокардиографических, эхокардиографических и биохимических характеристик. Содержание окислительно-модифицированных ЛПНП (омЛПНП) и антител к ним с помощью иммуноферментного метода с использование наборов фирмы Вiomerica и BCM Diagnostics соответственно. Контрольную группу составили здоровые доноры, сопоставимые с пациентами основной группы по возрасту и полу (n=33). Для статистической обработки использовали средние величины, оценку достоверности проводили с использованием непараметрических критериев. Результаты: У больных с ОИМ обнаружено повышение содержания омЛПНП в среднем на 25-30% по сравнению со здоровыми лицами. При этом у мужчин статистически значимое повышение омЛПНП выявлено уже в 1-ые сутки проявления ОИМ, а у женщин только в 12-ые сутки наблюдения в сравнении с уровнем омЛПНП в 1-ые сутки. Уровень антител к омЛПНП возрастает у мужчин в 1-ые сутки наблюдения, у женщин в более поздние сроки восстановительного периода, при этом статистически значимые различия сохраняются к 12 суткам наблюдения, как у мужчин, так и у женщин. Таким образом, для изменения содержания в плазме больных ОИМ омЛПНП характерны временные и гендерные особенности, это позволяет расширить представления о их роли в патогенезе атеросклероза и возможность их использования качестве дополнительных критериев для оценки риска острого инфаркта миокарда. ^ АКТИВНОСТЬ В СУСПЕНЗИОННЫХ И КАЛЛУСНЫХ КУЛЬТУРАХ ГРЕЧИХИ ТАТАРСКОЙ Гумерова Е.А., Утина Д.Б., Румянцева Н.И. Казанский институт биохимии и биофизики КазНЦ РАН, г. Казань, 420111 ул. Лобачевского, д. 2/31, а/я 30, тел.(843) 231-90-42, [email protected] Гречиха татарская Fagopyrum tataricum Gaertn. является источником рутина и других фенольных соединений, обладающих высокой антиоксидантной активностью. Каллусные и суспензионные культуры клеток широко используются в биотехнологии в качестве продуцентов вторичных метаболитов. Известно, что вторичный метаболизм зависит от гетерогенности культуры и ее способности к различным видам дифференцировок, а также условий культивирования. Кроме того, по содержанию фенольных соединений и их антиоксидантной активности можно судить о степени развития в культуре in vitro окислительного стресса, который в свою очередь оказывает влияние на морфогенный потенциал культуры. Поэтому целью данной работы было изучение содержания фенольных соединений и их антиоксидантной активности в суспензионных и каллусных культурах гречихи татарской с разным морфогенным потенциалом. Для опытов мы использовали морфогенные и неморфогенные каллусные культуры гречихи татарской и полученные из них морфогенные и неморфогенные суспензионные культуры. Каллусные и суспензионные культуры выращивали на средах с минеральными солями В5, содержащих гормоны 2,4-Д – 2 мг/л, ИУК – 0,5 мг/л, НУК – 0,5 мг/л, кинетин – 0,2 мг/л. Содержание фенольных соединений определяли с помощью реактива Фолина-Чокальтеу, антиоксидантную активность – с использованием радикала DPPH и стандарта Trolox. Нами было установлено, что морфогенные каллусные и суспензионные культуры гречихи татарской не различались по содержанию внеклеточных спирторастворимых и водорастворимых фенольных соединений, тогда как неморфогенные культуры накапливали в среде культивирования в 1,5-2,5 раза больше водорастворимых фенолов, чем спирторастворимых фенолов. Показано, что в суспензионных морфогенных культурах содержание внутриклеточных фенолов было в 2-4 раза выше, чем в неморфогенных, тогда как содержание внеклеточных фенолов в морфогенных и неморфогенных практически не отличалось. В каллусной морфогенной культуре содержание внутриклеточных фенолов было в 3 раза выше, чем в неморфогенной, при этом содержание внеклеточных фенолов в морфогенных каллусах было на 19% ниже, чем в неморфогенных. Несмотря на бóльшее содержание фенольных соединений в среде культивирования по сравнению с тканями (разница в 10 раз в суспензиях и в 100 раз в каллусах), внеклеточная антиоксидантная активность, наоборот, в обоих случаях была в 10 раз ниже внутриклеточной. Антиоксидантная активность внутриклеточных фенольных соединений морфогенных суспензионных и каллусных культур гречихи татарской была в 4-5 раз выше по сравнению с неморфогенными культурами. Интересно, что антиоксидантная активность внеклеточных фенолов морфогенных суспензионных культур была в 2 раза выше по сравнению с неморфогенными, в то время как в каллусных культурах она была приблизительно одинаковой. Работа выполнена при финансовой поддержке гранта 09-04-97039-р_Поволжье_а. |
Ваша оценка этого документа будет первой.
Ваша оценка:
Похожие:
 |
Xviii международная конференция челюстно-лицевых хирургов Конференция проводится Северо-Западным государственным медицинским Университетом им. И. И. Мечникова... |
|
Ii международная научно-практическая конференция |
|
V. D. Chaklin Международная конференция International conference |
|
Xv международная конференция челюстно-лицевых хирургов |
|
X всероссийская Конференция по электростимуляции и клинической электрофизиологии сердца VIII всероссийский |
|
Xvii международная конференция челюстно-лицевых хирургов |
|
Iii международная научно-практическая конференция Программа |
|
Xiv международная конференция челюстно-лицевых хирургов |
|
Lxvi международная научно-практическая конференция студентов и молодых ученых актуальные проблемы Международная научно-практическая конференция студентов и молодых ученых актуальные проблемы современной... |
|
Международная научно-практическая конференция «Медицина XXI века» |
База данных защищена авторским правом ©MedZnate 2000-2016
allo, dekanat, ansya, kenam
обратиться к администрации | правообладателям | пользователям
allo, dekanat, ansya, kenam
обратиться к администрации | правообладателям | пользователям