Viii международная конференция биоантиоксидант
|
|
Скачать 6.8 Mb.
|
|
^ Алинкина Е.C., Теренина М.Б., Крикунова Н.И., Фаткуллина Л.Д., Воробьёва А.К., Мишарина Т.А. Институт биохимической физики имени Н.М. Эмануэля РАН; Москва, 119334, Москва, ул. Косыгина, 4; Т.(495)939 71 81; E-mail: [email protected] Известно, что многие эфирные масла, выделенные из пряно-ароматических растений, обладают антиоксидантными свойствами и способны ингибировать окисление липидов в модельных системах различной степени сложности: в растворах, эмульсиях, липосомах, липопротеиновых комплексах и т.д. Степень ингибирования окисления зависит от состава системы, ее физико-химического состояния, природы, строения и концентрации липидов и эфирных масел. Целью работы являлось изучение ингибирования специально составленной смесью эфирных масел (Композиция 1) автоокисления смеси метиловых эфиров насыщенных и ненасыщенных высших жирных кислот (МЭЖК) в гексановом растворе. Оценка биологической активности Композиции 1 проводится в опытах с мышами. Контрольный образец содержал по 2.0 мг/мл смеси МЭЖК и 0.2 мг/мл тетрадекана (внутренний стандарт) в гексане. К таким же растворам добавили по 0,002 и 0,2 мг/мл смеси эфирных масел. Автоокисление проводили на свету при комнатной температуре в течение 12 месяцев. Каждую неделю пробирки открывали и продували 10 мл воздуха с помощью пипетки. Количественное содержание веществ в образцах определяли методом капиллярной газовой хроматографии каждые две недели в течение 2-х месяцев, а затем через каждый месяц окисления. Применение ГХ метода позволило оценить количественные изменения каждого МЭЖК с увеличением времени окисления, определить степень и скорость окисления в контрольном образце и в образцах, содержащих эфирные масла в двух концентрациях. Во всех образцах не наблюдали окисления насыщенных жирных кислот. В контрольном образце через 21 день начиналось окисление тетра- и гексаеновых кислот, через 80 дней – диеновой кислоты и только через 100 дней – моноеновых кислот. Малая доза смеси эфирных масел увеличивала срок начала окисления диеновой кислоты до 100 дней и только до 30 дней - тетра- и гексаеновых кислот. В образцах с большой дозой сроки начала окисления ненасыщенных кислот увеличивались: моно- и диеновых МЭЖК - до130 дней, тетраеновых – более 100 дней и докозогексаеновой кислоты – до 84 дней. Также существенно увеличилось время практически полного (осталось менее 2%) окисления докозогексаеновой кислоты - с 98 до 370 дней. Через 370 дней окисления в контрольном образце осталось только 10% октадиеновой и 55% олеиновой кислот. В присутствии смеси эфирных масел эти кислоты сохранялись на 70% и 80%, соответственно. Следует отметить, что скорости окисления тетра- и гексаеновой кислот в контрольном образце и с малой дозой эфирных масел были практически одинаковы, с большой дозой они были в 2 раза меньше. Таким образом, установлено, что скорость окисления ненасыщенных жирных кислот в растворе зависела от степени их ненасыщенности. Предложенная композиция эфирных масел является эффективным ингибитором автоокисления полиненасыщенных жирных кислот в растворах. Работа выполнена при финансовой поддержке Программы фундаментальных исследований РАН ОХНМ-09 «Медицинская и биомолекулярная химия», проект 01-РАН-09. ^ ХРОНИЧЕСКОЙ АЛКОГОЛЬНОЙ ИНТОКСИКАЦИИ И ДЕЙСТВИИ МЕЛАТОНИНА И ТИОКТОВОЙ КИСЛОТЫ Аллекрад Х., Попова Т.Н., Матасова Л.В., Клокова А.И Воронежский государственный университет, г. Воронеж, 394006, Университетская пл., 1, (4732)208278, [email protected] Известно, что хроническая алкогольная интоксикация приводит к окислительному стрессу путем усиления образования свободных радикалов и разрушения антиоксидантной системы защиты в клетках [Koch O.R., 1991]. В настоящее время внимание исследователей привлекают средства антиоксидантной защиты, в основе которых лежат естественные метаболиты клеток. Мелатонин, продуцируемый эпифизом и экстрапинеальными тканями, участвует в синхронизации биоритмов, регуляции репродуктивной и иммунной систем, антистрессовой защите [Yu H.S., 1993]. Тиоктовая кислота (ТК; α-липоевая кислота) - кофермент пируватдегидрогеназного и 2-оксоглутаратдегидрогеназного комплексов. Целью работы явилось исследование влияния мелатонина и тиоктовой кислоты на активность каталазы в тканях крыс при хронической алкогольной интоксикации. В качестве объекта исследования использовались белые лабораторные крысы-самцы массой 150-200 г. В ходе эксперимента животные были разделены на пять групп: в 1 й группе (n=19) крыс содержали на стандартном режиме вивария; 2 ю группу (n=12) составляли животные с хронической алкогольной интоксикацией, которую создавали путем добавления к стандартному рациону 15% этанола регулярно в течение месяца; в 3 й группе (n=9) животным с 14 дня развития патологии внутрибрюшинно вводили ТК в дозе 35 мг/кг каждые 48 часов в течение последующих 14 дней; крысам 4 й группы (n=8) по аналогичной схеме вводили ТК в дозе 70 мг/кг; крысам 5 й группы (n=9) по представленной выше схеме вводили мелатонин в дозе 1 мг/кг; крысам 6 й группы (n=10) по той же схеме вводили мелатонин в дозе 2 мг/кг. Материал для исследования забирали через 28 дней после начала алкоголизации. Метод определения активности каталазы основан на способности пероксида водорода образовывать с молибдатом аммония комплекс, концентрацию которого определяли при длине волны 410 нм [Королюк М.А., 1988]. Данные обрабатывали с использованием t–критерия Стьюдента, различия считали достоверными при p<0,05. При хронической алкогольной интоксикации наблюдалось повышение активности каталазы по сравнению с контрольными значениями: в печени и сердце в 2,7 и 2,2 раза соответственно, в сыворотке крови крыс - в 3 раза. Активация каталазы имеет значение не только для обезвреживания пероксидов, но и для ускорения окисления алкоголя. При введении тиоктовой кислоты в дозах 35 и 70 мг/кг было выявлено снижение активности каталазы по сравнению со значениями при патологии: в печени в 1,8 и 1,9 раза, в сердце – в 1,5 и 1,6 раза, в сыворотке крови - в 1,2 и 1,4 раза по сравнению С данными при патологии. При введении мелатонина в дозах 1 и 2 мг/кг активность каталазы также снижалась по сравнению со значениями при патологии: в печени в 1,7 и 1,8 раза, в сердце – в 1,3 и 1,8 раза, в сыворотке крови - в 1,1 и 1,7 раза. Полученные данные могут быть объяснены антиоксидантным действием ТК [Smith A.R., 2004] и мелатонина [Reiter R.J., 2000]. Кроме того, ТК, являясь коферментом, может активировать окисление продукта метаболизма алкоголя ацетил-КоА в печени, снижая его использование в процессе биосинтеза жирных кислот и предотвращая жировое перерождение печени. ОСОБЫЕ СТРУКТУРЫ ВОДЫ (ОСВ), КАК УНИВЕРСАЛЬНЫЕ БИОАНТИОКСИДАНТЫ РЕГУЛЯТОРЫ СВОБОДНО-РАДИКАЛЬНЫХ ПРОЦЕССОВ В БИОЛОГИЧЕСКИХ СИСТЕМАХ: ЧТО ОБ ЭТОМ ПОВЕДАЛИ ГИДРАТИРОВАННЫЕ ФУЛЛЕРЕНЫ. ^ Институт Физиологически Активных Соединений, 61072, Харьков, Украина, пр. Ленина, 58; Тел.: +38 057 763 0521 E-mail: [email protected] В сентябре 2005 в своем письме академику РАН Скулачеву В.П. были высказаны мысли по поводу того, какими свойствами должен был бы обладать идеальный биоантиоксидант (БАО) и который, в частности, (а) нейтрализовывал бы только избыток свободных радикалов и не затрагивал бы их уровень, минимально необходимый для нормального функционирования биологической системы; (б) регулировал бы свободнорадикальные процессы на уровне как гидрофобных, так и гидрофильных компартментов биологической системы в целом; (в) не изменял бы естественные состояния гидратных оболочек, непосредственно окружающих нормальные (нативные) биологические структуры и, более того, стабилизировал бы и то, и другое; (г) не воспринимался бы организмом, как чужеродное вещество, т.е. был бы нетоксичным в целом, неиммуногенным и т.п., а на уровне клетки, не влиял бы на ее нормальный гомеостаз; (д) имитировал бы работу ферментов антиоксидантной защиты, например, был бы СОД-миметиком; (е) работал бы как своеобразный катализатор самонейтрализации свободных радикалов в очень малых дозах и в течение длительного времени (напр. дни, недели) после однократного введения в организм. Как показали наши, более чем 16-и летние исследования, удовлетворить таким требованиям в настоящее время может гидратированный фуллерен С60 (ГФС60, C60HyFn) – супрамолекулярный комплекс сферической молекулы углерода С60 с прочносвязанными, высоко упорядоченными молекулами воды. (http://www1.lsbu.ac.uk/water/buckmin.html). Фуллерен С60, является одновременно и природным, и синтетическим веществом, а его гидратированная форма (ГФС60) проявляет многоплановую, позитивную биологическую активность на уровне как биомакромолекул, клеток, так и целостного организма. Также оказалось, что антиоксидантная эффективность ГФС60 превышает таковую для многих известных БАО в сотни-тысячи раз. Такое, после проведения в Украине официальных фармакологических и клинических испытаний ГФС60 в виде их водных растворов (ВРГФС60, C60FWS), позволило приступить к их госрегистрации в качестве антиоксидантного продукта для профилактики и терапии (дополнительной к основной) широкого круга заболеваний человека. В тоже время, анализ многочисленных фактов универсальной биологической активности ГФС60, в т.ч. и когда он применяется в сверхмалых дозах, однозначно свидетельствует, что причиной этому является не сама молекула фуллерена С60: все биологические эффекты ГФС60 обусловлены особыми структурами воды (ОСВ), которые он вокруг себя способен организовывать и стабилизировать на расстояниях в десятки-сотни раз превышающих размер самой молекулы С60 (~ 1нм) (см. страницу «Фуллерены и вода» на сайте http://www.ipacom.com). Более того, оказалось, что такие ОСВ являются весьма подобными тем структурам воды (мерцающим кластерам), которые она сама по себе, естественным образом формирует в своем объеме. С другой стороны не должно быть удивительным то, что при зарождении Жизни, управляемой свойствами воды, структурные и конформационные особенности важнейших биологических молекул и их содружеств, особенности их гидратации должны были быть отражением структуры и свойств наноразмерных ОСВ. Но, чтобы абиотический синтез учитывал свойств подобных ОСВ, эти структуры должны были бы быть стабильными и долгоживущими во времени. Помочь им в таком должна была некая наноразмерная матрица. И к настоящему времени накопилось достаточно фактов, чтобы полагать, что именно углеродные фуллерены, в содружестве с водой, были той самой матрицей, благодаря которой зарождалась углеродная Жизнь. Косвенным подтверждением этой гипотезы являются уникальные антиоксидантные и радиопротекторные свойства ГФС60 и его растворов, механизмы антирадикальной активности которых, с точки зрения зарождения и развития биологической материи, являются универсальными и определяются структурными свойствами самой воды. Обобщая, можно сказать, что НЕ МОЖЕТ БЫТЬ БОЛЕЕ УНИВЕРСАЛЬНОГО АНТИОКСИДАНТА, А ТОЧНЕЕ, РЕГУЛЯТОРА СВОБОДНО- РАДИКАЛЬНЫХ ПРОЦЕССОВ, ЧЕМ ВОДНЫЕ СТРУКТУРЫ, УПОРЯДОЧЕННЫЕ ВПОЛНЕ ОПРЕДЕЛЕННЫМ ОБРАЗОМ, и которые, на начальном этапе эволюции биологических молекул, служили им в качестве «защитников» от их расщепления на свободные радикалы, вызываемого действием радиоактивного излучения, жестких ультрафиолетовых лучей, Реактивных Форм Кислорода и т.п.. Действительно, ведь не могла же Природа, порождая Жизнь, ждать, когда из простейших молекул синтезируются «нужные», сложные молекулы антиоксидантов (например, каротиноидов, флавоноидов и т.п), чтобы они в дальнейшем, выступая в качестве антирадикальных защитников, способствовали бы началу целенаправленного синтеза и наработке важнейших биологических молекул – ДНК, РНК, аминокислот и белков, липидов, углеводов и т.п. Экспериментальные факты, подтверждающие вышесказанное, будут приведены и обсуждены в настоящем докладе. ^ С ДИГИДРОКВЕРЦЕТИНОМ Андриуцэ Е.Н., Ильясов И.Р., Тюкавкина Н.А., Белобородов В.Л., Савватеев А.М. ГОУ ВПО Московская медицинская академия им. И.М. Сеченова, г. Москва, ул. 5-ая Парковая, д.21, стр.1, тел. (499)165-37-47, [email protected] В настоящее время проявляется большой интерес к такой группе биологически активных веществ, как полифенолы. К ним относятся флавоноиды, одним из которых является дигидрокверцетин (ДГК), обладающий широким спектром фармакологической активности. Другими заслуживающими внимания представителями биологически активных полифенолов являются лигнаны, в частности, диглюкозид секоизоларицирезинола (СДГ). Его доступным источником служат семена льна масличного (Linum usitatissimum Linn.). Цель работы – определить антирадикальную активность ДГК, экстракта семян льна и их композиций по отношению к генерированным в модельных условиях радикал-катионам 2,2′-азинобис(3-этилбензотиазолин-6-сульфоната) ABTS+·. ^ Объектами исследования были ДГК и сухой экстракт семян льна (содержание СДГ не менее 40%), композиции экстракта семян льна и ДГК при молярных соотношениях их основных компонентов 10:1; 5:1; 1:1; 1:5; 1:10. Оценку антирадикальной активности (АРА) ДГК, экстракта и композиций осуществляли деколоризационным спектрофотометрическим методом, основанным на способности соединений ингибировать предварительно генерируемые в модельных условиях радикал-катионы ABTS+•. В качестве инициатора образования ABTS+· использовали пероксидисульфат калия. АРА выражали как процент ингибирования ABTS+• по формуле: %ингибирования = 100•(1 – А2/А1), где А1 – оптическая плотность раствора ABTS+• в фосфатном солевом буфере на длине волны 730 нм без добавления антиоксиданта, А2 – оптическая плотность раствора ABTS+• через 4 мин после добавления антиоксиданта. Результаты. Экстракт семян льна и дигидрокверцетин ингибируют генерированные радикал-катионы ABTS+· в соответствии с их АРА, что выражается степенью уменьшения концентрации свободных радикалов ABTS+• под действием изучаемых антиоксидантов. Для каждого из исследованных объектов были получены линейные зависимости процента ингибирования ABTS+• в интервале 20-60% от концентрации образца в растворе вида y=ax+b. Линейные зависимости характеризуются коэффициентами корреляции от 0,987 (ДГК) до 0,999 (композиция ДГК:СДГ = 5:1). Для оценки АРА на основании полученных уравнений линейной регрессии рассчитывали IC50 (мг/л) (ДГК – 1,34, СДГ – 8,23, композиции ДГК:СДГ = 1:10 – 9,38, 1:5 – 8,15; 1:1 – 4,81; 5:1 – 2,63; 10:1 – 2,06) и  , выраженный как концентрация тролокса (ммоль/л), соответствующая по АРА концентрации 1 мг/л изучаемого объекта (ДГК – 7,29, СДГ – 1,19), композиции ДГК: СДГ = (1:10 – 1,04, 1:5 – 1,20; 1:1 – 2,04; 5:1 – 3,72; 10:1 – 4,75). Для композиций экстракта семян льна с ДГК обнаружен эффект антагонизма, симбатно изменяющийся в интервале от 11,7% (композиция ДГК: СДГ=10:1) до 40,9% (композиция ДГК:СДГ = 1:10).Выводы. Осуществлена оценка антирадикальной активности дигидрокверцетина, экстракта семян льна и их композиций. Установлено, что АРА дигидрокверцетина в шесть раза выше таковой для секоизоларицирезинола диглюкозида. Для композиций экстракта семян льна с дигидрокверцетином обнаружен эффект антагонизма, возрастающий с повышением содержания СДГ в смеси. ^ DUNALIELLA SALINA TEOD. Антоненко С.П., Комаристая В.П. Харьковский Национальный университет имени В.Н. Каразина, г. Харьков, Кафедра ботаники и экологии растений, ХНУ имени В.Н. Каразина, пл. Свободы, 4, Харьков, Украина, 61077; +38(066)351-72-43; [email protected] В 60-х годах XX ст. было достоверно установлено, что β-каротин, накапливающийся в клетках микроводоросли Dunaliella salina, которая вызывает красное «цветение» гипергалинных водоемов, не принимает участия в процессе фотосинтеза (Миронюк, 1969). Множество работ было посвящено поиску условий индукции каротиногенеза у этого вида микроводорослей; в ряде работ изучались и другие элементы антиоксидантной системы. Выявлено, что в зависимости от условий индуцирования каротиногенеза, в клетках с повышенным содержанием β-каротина либо активизировались все звенья антиоксидантной защиты (каталаза, пероксидаза, СОД, α-токоферол, аскорбиновая кислота, глутатион) (Abd El-Baky et al., 2004) либо происходило снижение активности антиоксидантных ферментов (каталазы, пероксидаз, полифенолоксидазы) (Миронюк, 1969). Недавние работы показали, что ведущим фактором, индуцирующим накопление β-каротина в клетках D. salina является недостаток азота в питательной среде (Lamers et al., 2008). Нашими исследованиями установлено, что даже несколько больший уровень индукции каротиногенеза чем при дефиците азота может быть вызван также дефицитом фосфора (Комаристая и др., 2010). Целью настоящего исследования было определить влияние дефицита азота и фосфора на систему антиоксидантной защиты у ^ . Установлено, что помимо накопления -каротина, на дефицит азота или фосфора клетки по-разному реагировали изменением других компонентов системы антиоксидантной защиты: дефицит азота приводил к снижению активности каталазы и содержания белка в клетках; дефицит фосфора, напротив, вел к накоплению белка в клетках; активность каталазы при дефиците фосфора оставалась на уровне контроля. Возможно, при недостатке азота ингибируется синтез белка, что ведет к снижению активности антиоксидантных ферментов и активации ПОЛ. При этом, сверхсинтезированный β-каротин может выполнять функцию защиты мембран. С другой стороны, недостаток фосфора через торможение синтеза НАДФ может приводить к сверхвосстановленности электрон-транспортной цепи хлоропласта и триплетному состоянию хлорофилла. Накапливающийся при этом β-каротин, возможно, предотвращает фотодинамическое разрушение молекул хлорофилла и улавливает высвобождающийся при перевозбуждении хлорофиллов синглетный кислород. ЛИТЕРАТУРА Комаристая В.П., Антоненко С.П., Рудась А.Н. Культивирование Dunaliella salina Teod. при субоптимальных концентрациях азота и фосфора и исключении их из среды // Альгология. – 2010. – 20, №1. – С.42-55. Миронюк В.І. Деякі особливості окисно-відновних систем одноклітинної зеленої водорості Dunaliella salina Teod. // Український ботанічний журнал. – 1969. – Т.26, №1. – С.54-59. Abd El-Baky H.H., El Baz F.K., El-Baroty G.S. Production of antioxidant by the green alga Dunaliella salina // Int.J.Agri.Biol. – 2004. – Vol.6, No.1. – P. 49-57. Lamers P.P., Janssen M., De Vos R.C.H. et al. Exploring and exploiting carotenoid accumulation in Dunaliella salina for cell-factory applications // Trends in biotechnol. – 2008. – 26, №11. – P.631-638. ^ Антонова Г.Ф. Институт леса им. В.Н.Сукачева СО РАН, Красноярск, Академгородок, 660036. E-mail: [email protected] Аскорбиновую кислоту (АК) считают ключевым компонентом в регуляции морфогенеза растений, развития и структуры их клеток. Ксилема хвойных характеризуется присутствием двух типов древесины - ранней и поздней, образование которых зависит от уровня внутреннего водного потенциала, что в свою очередь определяется внешними факторами, а именно доступностью влаги. Известно, что водный стресс значительно влияет на содержание активных форм кислорода и перекиси водорода в тканях растений, и АК, являясь важнейшим компонентом окислительно-восстановительных реакций, активно используется в метаболизме растений, чтобы защитить их от агрессивных ионов. Изменение уровня аскорбиновой кислоты (АК), ее окисленной формы – дегидроаскорбиновой кислоты (ДАК) и уроновых кислот, как исходных компонентов в синтезе АК, изучали в связи со степенью развития клеток ксилемы в ходе образования ранней и поздней древесины в стволах сосны обыкновенной (Pinus sylvestris L.). Клетки камбиальной зоны и клетки зон роста растяжением и созревания с разной степенью развития последовательно получали с отрезков стволов 2025-летних деревьев при анатомическом и гистохимическом контроле. Расчет содержания компонентов вели на сухой вес и на клетку. Обнаружили значительные различия в содержании АК и ДАК, а также их соотношения, в зависимости от стадии дифференциации клеток ксилемы и типа древесины, формирующейся в стволах сосны обыкновенной в период вегетации. Изменение в содержании АК в ходе дифференциации ксилемных клеток сопровождалось изменением уровня уроновых кислот. При развитии слоя ранней ксилемы, в период активного деления камбиальных инициалей, содержание АК в клетках значительно выше, чем в период производства камбием клеток поздней ксилемы, что соответствует разному количеству трахеид ранней и позднего типа в годичном приросте древесины сосны. С началом роста растяжением количество аскорбата в клетках увеличивается и по мере роста трахеид снижается. Изменение уровня аскорбата в зоне роста растяжением соответствует снижению скорости роста трахеид в ходе этого роста. В период радиального роста трахеид ранней древесины уровень аскорбата в три раза выше, а уровень дегидроаскорбата ниже, чем в период радиального роста клеток поздней ксилемы. Это согласуется с большими радиальными размерами ранних трахеид по сравнению с трахеидами поздней ксилемы. Стадия созревания трахеид, в ходе которой проходит лигнификация ксилемы, тоже характеризуется изменением в системе аскорбата. В расчете на клетку количество АК, ДАК и уроновых кислот было максимальным в начале лигнификации и уменьшалось по мере созревания трахеид. Однако, соотношение АК/ДАК в ходе лигнификации ранней и поздней ксилемы менялось по-разному. Оно снижалось от начала лигнификации в сторону зрелой ранней ксилемы и, напротив, увеличивалось в зрелой поздней древесине, что указывает на разный уровень окислительно-восстановительных процессов в тканях и соответствует разной динамике лигнификации этих типов ксилемы годичного слоя древесины. Данные показывают регулирующую роль системы аскорбат-дегидроаскорбат в образовании, росте и лигнификации клеток ксилемы сосны обыкновенной. ^ Асадуллина Н.Р.1, Гудков С.В.1,2, Брусков В.И.1,2 1Институт теоретической и экспериментальной биофизики РАН, г. Пущино, (142290 ул. Институтская, 3, (4967)739497, [email protected]) 2 Пущинский государственный университет, г. Пущино Активные формы кислорода (АФК) постоянно образуются в аэробных клетках в процессе нормального метаболизма, а так же при воздействии таких факторов среды как ионизирующее и ультрафиолетовое излучение, тепловое воздействие и др. Увеличение внутриклеточной концентрации АФК свыше уровня антиоксидантной защиты вызывает «окислительный стресс» сопровождается окислительными повреждениями внутриклеточных структур, опасными для жизнедеятельности клеток процессами и патогенезом. Поэтому разработка способов коррекции окислительного стресса с помощью новых природных антиоксидантов является актуальной задачей. Целью данной работы было изучение с помощью различных тест-систем антиоксидантных свойств гуанозин-5’-монофосфат (ГМФ) и инозин-5’-монофосфат (ИМФ). С помощью специфичного для гидроксильных радикалов флуоресцентного зонда – кумарин-3-карбоновой кислоты – исследовано влияние ГМФ и ИМФ на образование гидроксильных радикалов наиболее реакционноспособной разновидности АФК в водных растворах при воздействии рентгеновского излучения. Установлено, что количество образовавшихся гидроксильных радикалов линейно зависит от поглощенной дозы, а ГМФ и ИМФ в концентрациях 1 мМ, 0,1 мМ, 0,05 мМ и 0,02 мМ уменьшают количество гидроксильных радикалов, генерируемые рентгеновским излучением в водных растворах в несколько раз. С уменьшением концентрации исследуемых пуриновых соединений уменьшается их антиоксидантный эффект. Одним из основных биомаркеров окислительного повреждения ДНК ионизирующим излучением, является 8-оксогуанин. Методом твердофазного иммуноферментного анализа с использованием моноклональных антител к 8-оксогуанину показано, что ГМФ и ИМФ в исследованных выше концентрациях снижает образование этого повреждения при действии рентгеновского излучения на раствор ДНК in vitro. Радиационный выход 8-оксогуанина линейно зависит от поглощенной дозы. С увеличением концентрации исследуемых соединений увеличиваются их антиоксидантные свойства. Кроме того, методом собственной люминесценции белковых растворов показано, что ГМФ и ИМФ эффективно элиминируют in vitro долгоживущие белковые радикалы бычьего сывороточного альбумина индуцированные рентгеновским излучением. При внутрибрюшинном введении ГМФ и ИМФ (45 мкг/г) самцам мышей Kv:SHK за 15 минут перед облучением наблюдается некоторое увеличение выживаемости, а при введении за 15 минут после облучения наблюдается значительное увеличение выживаемости опытных животных. Таким образом, в данной работе показано, что ГМФ и ИМФ проявляют существенные антиоксидантные свойства. Работа поддержана грантами Российского фонда фундаментальных исследований (10-04-00949-а; 10-04-00800-а) и Президента Российской Федерации для поддержки молодых российских ученых (МК-108.2010.4). ^ Ахатова Г.Р., Еникеев А.А., Сафарова И.В., Герчиков А.Я. ГОУ ВПО «Башкирский государственный университет», г. Уфа, ул. З.Валиди 32, тел. 8(347)2736727, [email protected] Известно, что урацил и его производные являются биологически активными веществами, отдельные представители которых известны как лекарственные препараты. Одним из важнейших свойств лекарственных препаратов является их способность затормаживать радикально-цепной процесс. К настоящему времени достаточно подробно изучена реакционная способность ряда урацилов в реакциях обрыва цепи на пероксильных радикалах. Однако к числу активных центров в цепной реакции окисления относятся также пероксидные соединения, обеспечивающие вырожденное разветвление цепи. В этой связи изучение кинетики и механизма реакций этих лабильных промежуточных соединений с производными урацила имеет важное значение. В настоящей работе изучена кинетика взаимодействия гидропероксида водорода со следующими производными урацила: 5-гидрокси-6-метилурацил (I), 5-амино-6-метилурацил (II), 5-нитро-6-метилурацила (III). Кинетику реакции взаимодействия урацилов с пероксидом водорода изучали методом кинетической спектрофотометрии при длинах волн, соответствующих максимуму поглощения изучаемых соединений при 348 К. В качестве растворителя использовали бидистиллированную воду. Было установлено, что порядок реакции по урацилу и пероксиду водорода первый. Исходя из этого, были рассчитаны бимолекулярные константы скорости взаимодействия производных урацила с пероксидом водорода, значения которых приведены в таблице. Также была исследована температурная зависимость для изученных соединений в интервале температур 333- 358 К. Значения активационных параметров взаимодействия урацилов с пероксидом водорода приведены в таблице. На основании полученных экспериментальных результатов сделано предположение, что в результате бимолекулярной реакции производных урацила с пероксидом водорода не образуется радикальных продуктов. Таблица Бимолекулярные константы скорости и активационные параметры взаимодействия производных урацила с пероксидом водорода; [H2O2]=0,01 M.
действие биологически активных препаратов на Активность системы антиоксидантной защиты Беременных крыс Wistar при гипоксическом стрессе Баева Ю.И., Орлова Е.В. Экологический факультет, Российский университет дружбы народов, Москва (89167888129, [email protected]) Изучено антиоксидантное действие биологически активных препаратов намивит и суперпротамин на активность супероксиддисмутазы и уровни SH-групп (общие, свободные (глутатиона) и белковые) в различных органах и тканях беременных крыс Wistar. Исследования выполнены на беременных крысах линии Wistar на модели острой сублетальной гипобарической гипоксии, создаваемой на 15 день беременности. В качестве исследуемых препаратов применяли биологически активные иммуномодуляторы широкого спектра действия намивит (Регистрационное удостоверение Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека № 77.99.23.3.У.9412.8.05 от 16.08.2005) и суперпротамин (Регистрационное удостоверение МЗ РФ № 001374.Р. 643.01.2000 от 17 января 2000г.), которые вводили с первого по 14 день гистации внутрижелудочно 1 раз в день в дозе 100 мг/кг массы. Супероксидперехватывающую активность и уровни SH-групп (общие, свободные (глутатиона) и белковые) определяли в мышцах, печени, мозге и плазме крови беременных животных по восстановлению нитросинего тетразолиевого в системе генерации супероксидного радикала феназинметасульфат-НАДН и по методу Hayes J.D. et al. (1999). Статистическую обработку экспериментальных данных проводили с помощью пакета статистических программ “SPSS”. Достоверность результатов оценивалась с использованием непараметрических критериев Манна-Уитни, Краскала-Уоллиса, Дана. Полученные в результате исследования данные показали, что недостаток кислорода вызывает выраженный окислительный стресс в крови и тканях беременных крыс: наблюдается нарушение систем перехвата и генерации супероксидных радикалов в сторону увеличения генерации радикалов, а также достоверное увеличение уровней общих и белковых SH-групп и резкое снижение, вплоть до полного исчезновения, свободных SH-групп глутатиона. При этом наиболее выраженные нарушения отмечены в плазме крови и в ткани головного мозга, наименее выражены в печени и мышце бедра животных. Использование биологически активных препаратов намивита и суперпротамина усиливало антиоксидантную защиту и, тем самым, уменьшало воздействие оксидативного стресса на организм беременных самок линии Wistar: в группах, прошедших курс препаратов повышалась супероксидперехватывающая активность, и увеличивался уровень свободных SH-групп глутатиона, при этом содержания общих и белковых SH-групп уменьшалось. Намивит и суперпротамин с разной силой воздействуют на показатели гипоксического стресса в органах и тканях беременных крыс. При этом антиоксидантный эффект намивита выражен в большей мере, чем суперпротамина. Результаты проведенных исследований позволяют утверждать, что намивит и суперпротамин оказывают благоприятное влияние на организм матери во время беременности и, тем самым, существенно снижают риск развития негативных последствий гипоксии для плода. Это расширяет возможности использования данных биологически активных препаратов во время беременности с целью повышения неспецифической резистентности организма к вредному влиянию загрязнения окружающей среды. |
Ваша оценка этого документа будет первой.
Ваша оценка:
Похожие:
 |
Xviii международная конференция челюстно-лицевых хирургов Конференция проводится Северо-Западным государственным медицинским Университетом им. И. И. Мечникова... |
|
Ii международная научно-практическая конференция |
|
V. D. Chaklin Международная конференция International conference |
|
Xv международная конференция челюстно-лицевых хирургов |
|
X всероссийская Конференция по электростимуляции и клинической электрофизиологии сердца VIII всероссийский |
|
Iii международная научно-практическая конференция Программа |
|
Xvii международная конференция челюстно-лицевых хирургов |
|
Xiv международная конференция челюстно-лицевых хирургов |
|
Lxvi международная научно-практическая конференция студентов и молодых ученых актуальные проблемы Международная научно-практическая конференция студентов и молодых ученых актуальные проблемы современной... |
|
Первая сибирская международная конференция «Наследственные ошибки метаболизма» |
База данных защищена авторским правом ©MedZnate 2000-2019
обратиться к администрации | правообладателям | пользователям
обратиться к администрации | правообладателям | пользователям