Viii международная конференция биоантиоксидант
|
|
Скачать 6.8 Mb.
|
|
^ Бургова Е.Н., Гаспарян С.А. 1, Чепрасова Г.П. 1, Ионова Р.М. 1, Сереженков В.А., Микоян В.Д., Ванин А.Ф., Адамян Л.В.2 УРАН ИХФ им. Семенова, 119991, Россия, Москва, ул. Косыгина, 4, 7(495)9397551; [email protected] 1Ставропольская Государственная Медицинская Академия, г. Ставрополь, 2Кафедра репродуктивной медицины и хирургии Московского государственного медико-стоматологического университета В настоящее время эндометриоз (ЭМ) является одним из наиболее частых, приводяших к бесплодию гинекологических заболеваний и встречается у 8-28% женщин репродуктивного возраста. Механизм снижения антиоксидантной защиты организма при эндометриозе проявляется в повышении в крови соотношения активных форм церулоплазмина/ трансферрина и снижении концентрации (окислении) свободных тиоловых групп белков. В качестве лечебного антиоксидантного средства для групп больных был выбран мексикор – отечественный антигипоксант с ноотропными и анксиолитическими свойствами и антиоксидантным действием. Для оценки эффективности действия мексикора обследованные нами больные с эндометриозом были разделены на 3 группы: первую (группа 1) составили 30 пациенток с ЭМ II-III степени, получавшие в послеоперационном периоде наряду с традиционным лечением мексикор по 0,1 г 3 раза в день per os в течение 2 месяцев; вторую (группа 2) - 30 пациенток пациенток с ЭМ II-III степени, которым в послеоперационном периоде в течение 2 месяцев была рекомендована диета, богатая антиоксидантами; третью (группа 3) - 20 пациенток с традиционным послеоперационным лечением. Под влиянием мексикора отмечалось снижение величины отношения церулоплазмин/трансферрин по отношению к исходным данным в среднем на 24%. Менее выраженные изменения наблюдали у женщин, входящих во вторую группу (21%). В третьей группе через 2 месяца сохранялся высокий уровень отношения определяемых металлопротеидов. Содержание свободных тиоловых групп белков крови в группе 1 при лечении мексикором стремится к показателям нормы, увеличиваясь по отношению к исходным данным более чем на 10 %. Во второй и третьей клинических группах данный показатель остался без изменений. Через два месяца после лечения более высокий уровень гемоглобина отмечался у пациентов 1 группы. Во второй и третьей группах значимых изменений не было зарегистрировано. Концентрации сывороточного железа и ферритина оставались без изменений во всех клинических группах. Применение мексикора в комплексном лечении больных с ЭМ является эффективным и патогенетически обоснованным. БИОАНТИОКСИДАНТЫ. ^ ЕГО ЗАКОНЫ, ОБЩНОСТЬ И РАЗЛИЧИЯ С МИРОМ "ГИГАНТОВ" Бурлакова Е.Б. Институт биохимической физики им. Н.М. Эмануэля Российской академии наук, Москва, ул. Косыгина,4,[email protected] Начиная с 1983 года мы изучаем механизмы действия биологически активных веществ в сверхмалых (ультра малых) дозах (10-10 – 10-17 М), в том числе антиоксидантов. Основные возражения против результатов этих исследований были связаны с отсутствием объяснения того, каким образом препараты в столь малых дозах или излучения столь низкой интенсивности могут оказывать влияние на биологические процессы. Однако со временем появились многочисленные молекулярные модели, которые связывали эффект с наличием изменений в структуре воды, в ее водных кластерах, с резонансными параметрическими процессами, с гиперактивностью рецепторов, с существованием эксимеров и эксиплексов, возникающих при взаимодействии БАВ с водной средой и т.д. Кроме того, был обнаружен ряд старых публикаций (Павлов, 1934г., «Павловские среды»), а также появившихся в последнее время работ (академиков Скулачева В.П., Воронкова М.Г., Коновалова А.И.), которые свидетельствовали о наличии хорошо подтвержденных статистически значимых эффектов для целого ряда различных веществ в сверхмалых дозах. Создавалось впечатление, что эффект сверхмалых доз уже не является парадоксальным. На сегодняшнем этапе исследования возникали уже новые вопросы, требующие объяснения, и в первую очередь, наличие практически равных или даже превосходящих контрольные значения эффектов для концентраций препаратов, различающихся на порядки величин. Так в большой серии работ по изучению биохимических и биофизических показателей для антиоксиданта фенозана, взятого в дозах 10-4 – 10-14 М эффекты оказались практически одинаковыми. Ниже мы приведем круг вопросов, которые на сегодняшний день, остались необъяснимыми.
3. Как объяснить появление новых свойств при СМД, которых нет у высоких доз. 4. Отчего изменяются температуры структурных переходов при сверхмалых концентрациях вещества. 5. С чем связано возрастание токсичности при уменьшении дозы препарата. 6. С чем связано появление большей чувствительности биообъекта к действию БАВ после применения СМД препарата. Следует отметить, что мы попытались ответить на эти вопросы, исходя из соображения, что введение веществ в сверхмалых дозах имеет много аналогий с введением препаратов в нанодозах. Еще в 1993 году на II Международной конференции по науке и технологии нанопроцессов, НАНО- II, Москва мы представили доклад «Наноструктурные механизмы в действии антиоксидантов на живой организм» (от имени Бурлаковой Е.Б. и Победимского Д.Г.). Сопоставление закономерностей в эффектах наночастиц на организменном уровне с эффектами сверхмалых доз биологически активных веществ и физических факторов низкой интенсивности, позволяет ответить на эти вопросы. Так, например, в докладе будут приведены в сравнительном аспекте экспериментальные данные для действия сверхмалых доз БАВ и кривые доза - эффект для наноразмерных систем, которые практически идентичны. Необычные химические свойства частиц наноразмеров и сверх малых концентраций требуют серьезной модификации представлений, развитых для систем, включающих тысячи и миллионы атомов. Наночастицы, или кластеры, обладают высокой активностью, и с ними в широком интервале температур возможно осуществление реакций, которые не идут с частицами макроскопического размера. Аналогичные данные получены нами при сравнении свойств химических соединений в высоких и сверхмалых концентрациях. Для наночастиц возникает ряд термодинамических следствий, например, зависимость от размера температуры плавления наночастицы. С размером, влияющим на реакционную способность, связаны и такие физико-химические свойства наночастиц, как изменение температуры полиморфных превращений, увеличение растворимости, сдвиг химического равновесия. Аналогичные закономерности в структурных характеристиках обнаруживаются и для БАВ в сверхмалых дозах. В ряде работ показано изменение температуры структурных полиморфных переходов в мембранах под действием препаратов в сверх малых дозах. На многих объектах в физике, химии и биологии показано, что переход от макроразмеров к размерам 1-100 нм приводит к появлению качественных изменений в физико-химических свойствах отдельных соединении и получаемых на их основе систем. Особенно важно появление новых «упаковок», новых структур, которые характерны только для нанообъектов. Особенно резкие изменения происходят в дозовых зависимостях. Именно с этих позиций можно объяснить появление эффекта "мертвой зоны" после первого максимума в концентрационной зависимости. Добавление даже одной молекулы в наночастицу может привести к потере характерных свойств наночастиц. Очень важно рассмотреть, какие биологические структуры могут явиться поверхностью для образования зародышей новой структурной фазы и их последующего роста. Наши эксперименты показывают, что на эту роль претендуют биологические мембраны, позволяющие молекулам БАВ в СМД, собраться и образовать новые структуры зародышевой фазы в тех случаях, когда их размеры и число атомов в наноструктуре отвечает требованиям нанонауки. В докладе будут приведены данные, касающиеся ответов на вопросы, приведенные выше. ^ ПЕРЕКИСНОГО ОКИСЛЕНИЯ ЛИПИДОВ В МОНОЛАМЕЛЯРНЫХ ЛИПОСОМАХ Бычко А.В., Артеменко А.Ю. Киевский национальный университет имени Тараса Шевченко, г. Киев-601, ул. Владимирская, 64, тел. 8(044)526-54-48, E-mail: [email protected] В рамках разработки целевых противораковых препаратов с низкой токсичностью научно-производственным химико-биологическим центром Киевского национального университета имени Тараса Шевченко синтезирован in silico ряд ингибиторов протеинкиназ - производных малеимида. В исследованиях in vitro на культурах раковых клеток HEK-293 показано, что наибольшей антипролиферативной активностью в данном ряду отличается 1-(4-Cl-бензил)-3-хлор-4-(CF3-фениламино)-1Н-пирол-2,5-дион (МІ-1). Одним из этапов изучения уровня токсичности потенциально лекарственного препарата на нетрансформированые клетки является исследование воздействия МІ-1 на мембранные процессы (в частности перекисное окисление липидов (ПОЛ)). Концентрационные эффекты воздействия МІ-1 (10-8-10-5 М) на перекисное окисление липидов изучали путем регистрации скорости накопления диеновых конъюгатов жирных кислот (ДКЖК) в моноламелярных липосомах, сформированных из азолектина. Липосомы получали путем 10 мин озвучивания (с интервалом 1 мин) суспензии азолектина (5 мг/мл в н-декане) в 0,1 М KCl с помощью УЗДН-1 (частота 22 кГц, мощность – 0,1 кВт) при интенсивном отводе тепла и последуюзей 35 мин термической обработке при температуре 45 оС. ПОЛ в предварительно модифицированных МІ-1 липосомах индуцировали добавлением в суспензию 10 мкМ Н2О2 в присутствии 10 мкМ FeCl3 при температуре 36,0±0,5 оС. Изменение относительной концентрации ДКЖК  (где Со – концентрация ДКЖК в немодифицированных МІ-1 липосомах в момент времени t) регистрировали с помощью спектрофлуориметра СДЛ-2 в максимуме их флуоресценции  = 456 нм (λвозб= 330 нм) в течение 80 мин.Показано, что предварительная модификация липосом МІ-1 в концентрациях 10-8-10-6 М достоверно не влияет на скорость накопления ДКЖК в липосомах (  при t = 68,4±0,3 мин) на фоне обратной зависимости величины  от концентрации препарата (→ при [МІ-1]→10-5 М). В тоже время, при обработке липосом МІ-1 в концентрации 10-5 М зарегистрировано увеличение скорости накопления ДКЖК (при t = 52,6±0,4 мин). Полученные данные свидетельствуют, что препарат МІ-1 в исследованном диапазоне концентраций угнетает процесс накопление ДКЖК на фоне ПОЛ в липосомах из азолектина. Предполагаем, что в основе зафиксированных нами обратной зависимости  ([MI-1]) и ускорения накопления ДКЖК при [MI-1] = 10-5 М лежит мембранотропная активность препарата. Так, интеркаляция полярной молекулы МІ-1 между гидрофобными остатками ЖК молекул фосфолипидов может приводить к возникновению дефектов в структуре липидного бислоя, тем самым облегчая доступ окислителя к реакционной зоне и частично снижая антиоксидантный эффект воздействия МІ-1.^ Варфоломеев В.Н., Федоров Б.С., Фадеев М.А., Безуглова Г.Н.1 Институт проблем химической физики РАН, г. Черноголовка, 1Ветеренарная академия, г. Воронеж. [email protected] На модели эмоционально-болевого стресса на крысах проведено исследование антистрессорного действия нитромексидола. Изучено изменении е массы тела и ряда внутренних органов и биохимические показатели крови, характеризующие интесивность протекания процессов перекисного окисления липидов и антиоксидантный статус крови, а также интенсивность образования NO. 18 часовая иммобилизация крыс приводит к увеличению потери массы тела, а также веса тимуса и селезенки и увеличению веса надпочечников. Предварительное введение нитромексидола оказывает нормализующее влияние на эти показатели, снижая таким образом стресс-реакцию со стороны организма. При эмоционально-болевом стрессе, вызванным иммобилизацией в желудке происходит снижение продукции NO, что и обусловливает развитие характерных для этого типа стрессора язвенных поражений слизистой. Полученные данные свидетельствуют о том, что количество крыс с язвами, среднее количество язв на крысу и размер язв в значительной степени уменьшаются в случае профилактического введения нитромексидола за 6 часов до стрессорного воздействия, причем эти изменения более выражены при большей дозе препарата. Как показали проведенные исследования состояния про- и антиоксидантных систем крови предварительное введение нитромексидола не только ограничивает проявление стресс-реакции, активацию пероксидации липидов и белков при стрессе, но и сохраняет эффективный контроль процессов свободнорадикального окисления со стороны антиоксидантной системы. Это подтверждается данными, полученными при изучении состояния некоторых показателей ферментативного звена АОС при развитии эмоционально-болевого стресса. Как установлено, предварительное введение животным нитромексидола приводит к нормализации активности ферментов антиоксидантной защиты: СОД, каталазы, глутатионпероксидазы и глутатионредуктазы. Такой стресс- протекторный эффект связан, вероятно, с двумя основными фактами. Во-первых, NO способен инактивировать супероксиданион – один из наиболее важных инициаторов свободнорадикального окисления, в частности, при стрессе. Известно, что взаимодействие этих радикалов приводит к появлению пероксинитрита, обладающего высокой токсичностью. Видимо, защитный эффект достигается при сбалансированном присутствии NO и супероксиданионрадикала в биофазе, что, как указывалось, требует определенного редокс-состояния клетки, необходимого для нейтрализации пероксинитрита. Во-вторых, стресс- протекторный эффект НМ может быть связан с тем, что увеличение продукции NO обеспечивает явление «рабочей гиперемии» путем расширения сосудов и направленного перераспределения кислорода и пластических ресурсов из неактивных органов и тканей в ту функциональную систему, которая в данный момент осуществляет адаптационную реакцию для восстановления и компенсации нарушенных функций. Поскольку нитроксимексидол является донором монооксида азота, последний способствует сохранению адекватного антиоксидантного статуса организма, как соотношения про- и антиоксидантных процессов в условиях развития стресс-реакции. Следовательно, стимуляция продукции NO повышает функциональный потенциал антиоксидантного статуса в условиях развития эмоционально-болевого стресса. При этом стимуляция синтеза оксида азота оказывает достаточно выраженный стресс-протективный эффект на уровне целого организма, а эмоционально-болевое воздействие на фоне ингибирования синтеза NO приводит к усилению проявлений триады Селье в стадию напряжения стресс-реакции. Описанные эффекты NO, на наш взгляд, могут лежать в основе ограничения свободнорадикального окисления и обеспечения более активных адаптационных перестроек метаболизма при действии на организм экстремальных факторов и развитии стрессового состояния, поэтому направленные воздействия на систему генерации NO с целью управления адаптационными реакциями организма могут найти применение и в ветеринарной медицине. ^ Варфоломеев В.Н., Федоров Б.С., Фадеев М.А., Штолько В.Н. Институт проблем химической физики РАН, Московская обл., г. Черноголовка.; [email protected] Нитроксимексидол (НМ) представляет собой нитрокси производное мексидола (М). Антигипоксические свойства М обусловлены его ярко выраженными антиоксидантными свойствами. Введение нитро группы в структуру М сообщает ему дополнительные свойства донатора оксида азота. Антигипоксическое действие изучалось на модели гипоксии замкнутого пространства (ГПЗ) и оценивалось по продолжительности жизни экспериментальных животных. В эксперименте было использовано 27 мышей-самцов линии BDF/2. Животные были разделены на 3 группы: первой группе (контрольной) вводили внутрибрюшинно физраствор, второй – М (5 мг/кг), третьей –НМ(5 мг/кг). В условия гипоксии животные помещались через 10 минут после инъекции. Второй моделью для изучения антигипоксического действия соединений являлась модель «открытого сердца» (оценивалось продолжительность сокращения рабочего миокарда желудочков и предсердий). Животные аналогичным образом были разделены на три группы. Забой животных производился через 10 минут после инъекции. Полученные данные свидетельствуют о том, что увеличение времени жизни животных в замкнутом пространстве на фоне действия М составляет 19,75% по сравнению с контролем. Для НМ этот показатель составляет 24,22% . Увеличение времени сокращения предсердий составило 37,23% и 41,49% по сравнению с контролем на фоне действия Н и НМ соответственно. Время сокращения желудочков увеличилось на 17,35% при действии М и на 29,34% при действии НМ. Полученные эффекты могут быть обусловлены тем, что НМ является донором монооксида азота, который вызывает сходные гемодинамические эффекты с другими донорами NO. , т.е. снижают потребность миокарда в кислороде за счет снижения напряжения стенок желудочков, снижения артериального давления и объемов желудочков, а также благодаря улучшению снабжения миокарда кислородом, за счет снижения кровотока и коронарного сопротивления, спазма коронарных артерий и уменьшения коронарного кровотока. Как известно, в состав Н и НМ входит сукцинат (С), который является стимулятором синтеза восстановительных факторов в клетке. Выявлен феномен быстрого окисления сукцината в клеточной цитоплазме при участии фермента сукцинатдегидрогеназы (СДГ), который сопровождается восстановлением пула динуклеотидов. Биологическое значение этого явления заключается в быстром ресинтезе клетками АТФ и повышении их антиоксидантной активности. Таким образом, С должен положительно влиять на оксигенацию внутриклеточной среды, стабилизировать структуру и функциональную активность митохондрий, является индуктором синтеза белков, влияет на электролитный обмен на уровне клетки. Преимущество С в скорости окисления перед другими субстратами тканевого дыхания особенно выражены в условиях гипоксии, когда НАД-зависимый транспорт электронов в дыхательной клеточной цепи тормозится, а активность СДГ возрастает. Кроме того, противоишемический эффект связан не только с активацией сукцинатдегидрогеназного окисления, но и с восстановлением активности ключевого фермента окислительно-восстановительной активности митохондрий - цитохромоксидазы. ^ НИТРОКСИМЕКСИДОЛА Варфоломеев В.Н., Федоров Б.С., Фадеев М.А., Безуглова Г.Н.1 Институт проблем химической физики РАН, г. Черноголовка, 1Ветеренарная академия, г. Воронеж. [email protected] Исследования проведены на 4-х группах крыс. Первая группа (n=10) – интактные животные, которым внутрибрюшинно вводили физиологический раствор в объеме 0,5 мл. У животных 2-ой группы (n=10) вызывали токсическое повреждение печени путем двукратного введения 40 % раствора тетрахлорметана на оливковом масле раз в сутки. Крысам 3-ей группы (n=10) за 12 часов до первой инъекции тетрахлорметана внутрибрюшинно применяли исследуемый препарат в дозе 50 мг/кг массы тела в объеме 0,5 мл. Животным 4-ой группы (n=10) за 1 час до второй инъекции тетрахлорметана внутрибрюшинно применяли препарат в той же дозе и объеме. Все исследования проводили через сутки после второго введения CCl4. Установлено, что применение нитроксимексидола (НМ) оказывает достаточно выраженное гепатопротекторное действие, о чем свидетельствует снижение активности маркерных ферментов цитолиза клеток печени – аспартат- (АсАТ) и аланин-аминотрансферазы (АлАТ) в сыворотке крови. Однако наиболее эффективным было профилактическое применение препарата за 12 часов до первой инъекции тетрахлорметана (3-я группа), которое понижало активность АлАТ и АсАТ в 2,2 и 2,1 раза соответственно по сравнению с их активностью у животных с токсическим гепатитом, вызванным введением гепатотоксина. У животных 4-ой группы динамика активности ферментов переаминирования была аналогичной, но менее выраженной. Понижение активности ЩФ у животных 2-ой и 3-ей группы на 53,2 и 46,2 %, соответственно, и отсутствие статистически достоверных изменений активности -ГТ по сравнению с активностью этих энзимов у животных только с токсическим CCl4 – индуцированным гепатитом, свидетельствует о нормализации циркуляции желчи, а следовательно пищеварения в целом. Наличие гепатопротекторной активности у препарата ФБ-26 подтверждается и нормализацией нарушений гистоструктуры печеночной паренхимы при токсическом повреждении тетрахлорметаном. Необходимо отметить, что применение препарата в указанной дозе, не повлияло на фильтрующую и выводящую способность почек – уровень креатинина и мочевины в сыворотке крови опытных животных (группы 2, 3 и 4) статистически достоверно не изменялись. Незначительное повышение уровня глюкозы в крови обоих групп животных, получавших исследуемый препарат, косвенно, может отражать усиление энергетического снабжения, за счет разложения гликогена печени, что обеспечивает адекватную стресс-реакцию организма на поступление токсина. Кроме того, отсутствие достоверных различий между опытными и контрольными животными по содержанию фосфора и кальция, с одной стороны, и более высокий уровень глюкозы у животных 3-ей и 4-ой групп, с другой, создают предпочтительные условия для интенсификации окислительного фосфорилирования. Таким образом, НМ снижает проявление гепатодистрофических процессов при токсическом повреждении печени, вызванном тетрахлорметаном. ^ Варфоломеев В.Н, Богатыренко Т.Н., Штолько В.Н., Богданов Г.Н. Институт проблем химической физики РАН, Черноголовка. [email protected] Изучены патогенетические эффекты действия низкочастотных акустических колебаний на разных морфо-функциональные уровнях организма, в том числе на биологические мембраны. Проанализированы типичные ответные реакции организма, связанные с общим угнетением ферментов метаболизма на фоне активации биосинтеза катехоламинов и снижения антиоксидантного статуса крови. Такая система ответных реакций характерна для разных этапов возникновения и развития триады Селье (общего адаптационного синдрома).Установлено значительное увеличение степени кровоизлияний в легких, печени и головном мозге крыс и кроликов под влиянием вихревых акустических потоков или импульсных низкочасточных акустических колебаниях. При этом значительно снижается осмотическая стойкость мембран эритроцитов. Показано, что при акустических воздействиях развитие мембранной патологии протекает по окислительному типу, то есть сопряжено с интенсификацией процесса пероксидного окисления липидов и снижением уровня активности супероксидисмутазы в митохондриях клеток головного мозга. Показано, что при акустичеких воздействиях увеличивается микровязкость липидного матрикса мембран форменных элементов крови. В некоторых случаях аналогичные изменения проявляются и в клетках печени, что может указывать на системную природу мембранной патологии при низкочастотных акустических воздействиях. Однозначные данные о значительном снижении содержания метаболически активных парамагнитных центров ферментов указывают на серьезные повреждения внутренних органов акустическими колебаниями. исследованию корригирующего влияния ингибиторов свободнорадикальных реакций на развитие мембранной патологии при оксидативном стрессе, вызванном повреждающим акустическим воздействием (режим «вихрь» большого объема выраженной интенсивности). На разных морфо-функциональных уровнях организма впервые осуществлен мониторинг семи антиоксидантов, различающихся своим строением и химическими механизмами биологического действия. Представлены данные о разнообразных изменениях в системе кровообращения животных при воздействии акустического режима выраженной интенсивности. Полученные результаты указывают на значительное увеличение при этом уровня кровенаполнения и появления кровоизлияний в легких, печени, почках и головном мозге крыс и кроликов под влиянием вихревого акустического потока. О снижении при этом устойчивости мембран эритроцитов свидетельствуют данные об осмотическом гемолизе. Показано, что при акустических воздействиях увеличиваются микровязкость липидного матрикса мембран форменных элементов крови, следствием чего становится снижение механической прочности мембран эритроцитов. По совокупности количественных критериев оценки повреждающего действия акустических воздействий на разных морфофункциональные уровнях организма можно сделать вывод об особенностях корригирующего влияния отдельных антиоксидантов. В целом полученные результаты открывают перспективы направленной оптимизации создания лекарственных композиций полифункционального назначения на основе антиоксидантов. Фармакокоррекция патогенетических эффектов акустических колебаний указывает на свободнорадикальные механизмы их биологического действия. ^ АНТИОКСИДАНТОВ – ГИДРОКСИХАЛКОНОВ Васильев Р.Ф., Кънчева В.Д.,1 Трофимов А.В., Бътовска Д.И.,1 Фёдорова Г.Ф., Наумов В.В. Институт биохимической физики им. Н.М. Эмануэля РАН, 119334 Москва, ул. Косыгина, 4, [email protected]; 1Институт органической химии с Центром по фитохимии БАН, 1113 София, ул. Акад. Г. Бончева, бл.9, [email protected] Гидроксихалконы являются природными предшественниками флавоноидов и обладают антиокислительной активностью. Нетоксичность этих фенолов позволяет надеяться на стабилизацию ими пищевых продуктов, фармацевтических препаратов и косметики. Активность шести халконов (рис.) и четырёх родственных фенолов (СА, хроман С1, феруловая и п-кумаровая кислоты) оценена по перехвату радикалов rOO• + ArOH → rOOH + OAr• (константа скорости k7) в разных средах: 1) по хемилюминесцении при окислении дифенилметана [1], 2) спектрофотометрически по акцептированию радикала ДФПГ, 3) йодометрически по торможению накопления пероксидов при окислении липидов. Квантовохимически (PM3, PM6) рассчитаны энергии и строение реагентов.   Кофейная кислота (СА)
Изученные антиоксиданты проявляют также определённый прооксидантный эффект, и ввиду сложности механизма параметр k7 является приближённым. Соединения разделяются на две группы. Активность высока, k7 ~ 9106 и 5106 л/(моль с), у Ch6 и СА, имеющих «катехольную структуру», т.е. две соседние группы ОН. Для них главный путь превращения отрыв Н радикалом rOO•. Это согласуется с наименьшей прочностью связи ArO-H: 80±1 и 79±2 ккал/моль. Константа k7 высока (8106 л/моль с) также и для аналога токоферола хромана C1 (у которого D(ArO-H) = 80±2 ккал/моль). активность остальных исследованных монофенолов ниже (k7 ≈ 104 105 л/(моль с), связь ArO-H прочнее (84 - 88 ккал/моль), а не коррелирующая с D(ArO-H) вариация k7 и низкий стехиометрический коэффициент показывают, что кроме «классического» существенны и другие пути превращения и, следовательно, они – в отличие от Ch – вряд ли могут служить эффективными антиокислителями. 1. Васильев Р.Ф., Кънчева В.Д., Фёдорова Г.Ф., Бътовска Д.И., Трофимов А.В. Кинетика и катализ, 2010, 51, № 4, 533–541. ^ ТРАНСФОРМИРОВАННЫХ И ЭМБРИОНАЛЬНЫХ КЛЕТКАХ ПРИ ДЕЙСТВИИ N-АЦЕТИЛЦИСТЕИНА И АЛЬФА-ЛИПОЕВОЙ КИСЛОТЫ Вахромова Е. А., Кирпичникова К. М., И. А. Гамалей Институт цитологии РАН, г. Санкт-Петербург ,Тихорецкий пр., д. 4, тел. (812)-2973802; [email protected] Исследовали влияние двух антиоксидантов (NAC и ALA) на структуру актинового и тубулинового цитоскелета мышиных эмбриональных фибробластов и разных трансформированных клеток: мышиных фибробластов 3T3-SV40, мышиной гепатомы МГ22а, карциномы человека HeLa. Выясняли, каким образом реорганизация цитоскелета в присутствии антиоксидантов влияет на поверхностные свойства клеток, а именно, на их чувствительность к литической активности естественных киллерных клеток (ЕКК). Известно, что ЕКК могут без предварительной сенсибилизации узнавать и лизировать многие трансформированные (опухолевые или зараженные вирусами) и некоторые нормальные клетки (например, эмбриональные). Обнаружили, что действие NAC и ALA, в целом, сходно: оба вызывают дозо-зависимую разборку актинового цитоскелета, не нарушая при этом целостности системы микротрубочек. Это характерно для всех клеток, хотя морфологическая картина клеточного монослоя и самих клеток при действии антиоксидантов различается. Существенное отличие действия NAC от ALA заключается в том, что после удаления NAC из среды культивирования в клетках происходит постепенная реполимеризация актинового цитоскелета, при этом формируются утолщенные, хорошо выраженные стресс-фибриллы, отсутствовавшие в контрольных клетках. Такая жесткая организация актинового цитоскелета характерна для нормальных клеток, а появление ее у трансформированных клеток свидетельствует о реверсии (нормализации) трансформированного фенотипа. Аналогичной картины после удаления ALA не наблюдали. Вместе с тем обнаружили, что действие антиоксиданта меняет не только морфологические, но и функциональные свойства и трансформированных, и эмбриональных клеток: их чувствительность к литической активности ЕКК снижается или исчезает совсем, т.е. клетки перестают узнаваться и лизироваться ЕКК. В случае ALA потеря чувствительности всех клеток к литической активности ЕКК происходит непосредственно после действия агента и коррелирует с разборкой микрофиламентов. В случае NAC исчезновение чувствительности к ЕКК возникает только после удаления агента и коррелирует с появлением в клетках выраженных стресс-фибрилл. Возникает вопрос: связаны ли между собой организация актинового цитоскелета клетки и ее чувствительность к литической активности ЕКК. Для ответа на него моделировали действие антиоксидантов с помощью латрункулина В – деполимеризатора актина. Разборка актинового цитоскелета латрункулином, равно как и его деполимеризация в присутствии ALA, сопровождается уменьшением чувствительности клеток к ЕКК. При этом необходимо отметить определенные различия морфологической картины клеток и клеточного монослоя в целом в результате разборки микрофиламентов разными агентами. Таким образом, изменение чувствительности клеток к литическому лействию ЕКК связано не с конкретной организацией актинового цитоскелета, а с его реорганизацией, возможно, любой: деполимеризацией, реполимеризацией или появлением жестких стресс-фибрилл. Можно предположить, что изменение структуры микрофиламентов вызывает ряд молекулярных перестроек, ведущих к принципиальному изменению поверхностных свойств клеток. Работа поддержана РФФИ (проект 09-04-00467) |
|||||||||||||||||||||||||||||||||||
Ваша оценка этого документа будет первой.
Ваша оценка:
Похожие:
 |
Xviii международная конференция челюстно-лицевых хирургов Конференция проводится Северо-Западным государственным медицинским Университетом им. И. И. Мечникова... |
|
Ii международная научно-практическая конференция |
|
V. D. Chaklin Международная конференция International conference |
|
Xv международная конференция челюстно-лицевых хирургов |
|
X всероссийская Конференция по электростимуляции и клинической электрофизиологии сердца VIII всероссийский |
|
Xvii международная конференция челюстно-лицевых хирургов |
|
Iii международная научно-практическая конференция Программа |
|
Xiv международная конференция челюстно-лицевых хирургов |
|
Lxvi международная научно-практическая конференция студентов и молодых ученых актуальные проблемы Международная научно-практическая конференция студентов и молодых ученых актуальные проблемы современной... |
|
Международная научно-практическая конференция «Медицина XXI века» |
База данных защищена авторским правом ©MedZnate 2000-2016
allo, dekanat, ansya, kenam
обратиться к администрации | правообладателям | пользователям
allo, dekanat, ansya, kenam
обратиться к администрации | правообладателям | пользователям