Рекламно-информационный листок для врачей Определения генетических полиморфизмов, ассоциированных с функциями интерлейкина 28B, методом полимеразной цепной реакции (иммуногенетика il28B)

Скачать 106.45 Kb.

Название	Рекламно-информационный листок для врачей Определения генетических полиморфизмов, ассоциированных с функциями интерлейкина 28B, методом полимеразной цепной реакции (иммуногенетика il28B)
Дата конвертации	08.04.2013
Размер	106.45 Kb.
Тип	Документы

Содержание

«ГНЦ Институт иммунологии» ФМБА России в г.Москва

ЗАО «НПФ ДНК-Технология»

Рекламно-информационный листок для врачей

Определения генетических полиморфизмов, ассоциированных с функциями интерлейкина 28B, методом полимеразной цепной реакции (иммуногенетика IL28B)

Вирусный гепатит С – широко распространенное во всем мире инфекционное заболевание, вызываемое вирусом гепатита С (HCV), которым инфицировано примерно 170 млн. человек .

После острой фазы заболевания вирус гепатита С персистирует в крови у 85-90% больных и, независимо от пути заражения, у 50-70% заболевание в дальнейшем переходит в хронический гепатит. Нередко хронический гепатит прогрессирует медленно и долгое время не имеет клинических проявлений. Однако, даже при легком хроническом гепатите С, протекающем почти бессимптомно при умеренном повышении активности аминотрансфераз и незначительном изменении печеночной ткани в первое десятилетие от инфицирования, почти у 30% больных через десятилетия развивается цирроз печени, который при хроническом гепатите С, может привести к печеночноклеточному раку

При хроническом гепатите С, прежде считавшимся неизлечимым заболеванием, современная противовирусная терапия позволяет добиться эрадикации вируса, предотвратить развитие тяжёлых осложнений хронических вирусных гепатитов (цирроза, гепатоцеллюлярной карциномы (ГЦК)) и сохранить трудоспособность 40–60% пациентов. На протяжении многих лет в основе лечения гепатита С лежала монотерапия интерфероном альфа . Современная противовирусная терапия представляет собой комбинированную терапию пегилированным интерфероном и рибавирином (PEG-IFN/RBV) согласно рекомендациям Американской ассоциации по изучению болезней печени (AASLD) 2009 г и Европейской ассоциации по изучению болезней печени (EASL) 2011г . При этом цель лечения определяется как достижение устойчивого вирусологического ответа (УВО, SVR).

Устойчивый вирусологический ответ - длительное (не менее 6 месяцев) после отмены курса противовирусной терапии отсутствие определяемого уровня вируса в крови . УВО сопровождается нормализацией биохимических показателей, улучшением гистологической картины в печени (уменьшением индекса гистологической активности и снижением индекса фиброза), повышением качества жизни больных .

Тактика противовирусной терапии ХГС определяется скоростью вирусологического ответа, так называемая «тактика определяемая ответом» (Virological response-guided therapy). В последние годы разработан метод прогнозирования ответа на терапию на основании изучения вирусной кинетики ранней стадии лечения . Длительность курса терапии также зависит от вирусологического ответа и вирусологический контроль с помощью ПЦР на 4-й, 12-й и 24-й неделе терапии позволяет определить оптимальную продолжительность лечения. Выделяют следующие варианты ответа:

Быстрый вирусологический ответ (БВО, RVR) (авиремия на 4-й неделе лечения)
Ранний вирусологический ответ (РВО, EVR) (оценивается на 12-й неделе лечения)
1. полный (пРВО, cEVR) (авиремия).
2. частичный (чРВО, pEVR) (снижение вирусной нагрузки более, чем на 2 Log)
Медленный вирусологический ответ (МВО) (авиремия на 24-й неделе лечения).

Длительность лечения, необходимая для достижения УВО, определяется темпами снижения вирусной нагрузки в крови и исходными характеристиками пациента, такими как стадия фиброза, уровень вирусной нагрузки HCV, генотип HCV. Тактику ведения пациента позволяет определить результат исследования вирусной нагрузки при помощи ПЦР «в реальном времени», на 4-ой, 12-ой и 24-ой неделе терапии.

Устойчивый вирусологический ответ (УВО) — надёжный критерий элиминации вируса из организма. Наличие УВО можно рассматривать как излечение. Вероятность УВО прямо пропорциональна времени исчезновения РНК ВГС в процессе лечения.

Главным прогностическим фактором успеха терапии является достижение БВО при использовании количественного метода ПЦР с чувствительностью ≤50 МЕ/мл. Достижение БВО является предиктором наступления УВО, независимо от генотипа вируса и используемых режимов лечения .

К сожалению, на фоне длительной противовирусной терапии (48 или 72 недели при генотипе 1 ВГС) возможно ухудшение качества жизни пациента и развитие побочных эффектов лечения: преимущественно нейропсихологические расстройства (раздражительность, бессонница, снижение настроения, общая слабость и недомогание), характерно повышение температуры, снижение уровня гемоглобина, изменения функции щитовидной железы, аллопеция, сухость кожных покровов. Иногда побочные эффекты столь выражены, что лечение приходится прекратить.

Очевидно, что выявление детерминант ответа на лечение, в том числе генетических, имеет большое значение, как для врача, которому необходимы критерии прогноза эффективности лечения, так и для пациента, который перед началом проведения стандартной терапии должен быть информирован о соотношении вероятности достижения УВО и риска развития побочных действий используемых противовирусных препаратов.

В настоящее время точно установлено, что изменения в кластере генов цитокинов (IL28A, IL28B и IL29), локализованном на 19 хромосоме (19q13) человека являются основным фактором, определяющим особенности противовирусной защиты организма. Наибольшее значение имеет полиморфизм в регионе, примыкающем к гену интерлейкина 28B (IL28B) .

L28B представляет собой интерферон-λ-3 и является лигандом цитокинового рецептора II класса. Эти лиганды запускают JAK/STAT сигнальный каскад, активируя синтез 2’,5’-олигоаденилат-синтетазы, который активирует эндонуклеазу . Эндонуклеаза, в свою очередь, участвует в процессах стимуляции образования фермента протеинкиназы, который блокирует синтез вирусных белков. Показано, что полиморфизмы IL28B определяют как вероятность самопроизвольной элиминации HCV, так и ответ на терапию интерфероном и рибавирином.

Основную роль при инфицировании гепатитом С играют две однонуклеотидные замены:

- замена цитозина на тимин (C>T), имеющая обозначение rs12979860 в базе данных dbSNP национального центра биотехнологической информации США (National Center for Biotechnological Information, NCBI).
- замена тимина на гуанин (T>G), имеющая обозначение rs8099917

У носителей генотипа rs12979860 С/С наблюдается повышение в два раза вероятности положительного ответа на лечение интерфероном и рибавирином, как среди пациентов, европейского происхождения (p = 1,06*10^(-25)), так и афро-американцев (p=2,06*10^(-3)). При этом эффективность лечения в действительности напрямую не связана с расой или национальностью – просто афро-американцы более часто являются носителями генотипа Т/Т, чем европейцы и восточные азиаты. Также генотип С/С преимущественно выявляется среди людей со спонтанным разрешением инфекции, иммунная система носителей аллелей СС более склонна самостоятельно побеждать вирус. Интересно, что при генотипе С/С вирусная нагрузка (количество вируса в крови) до лечения выше, чем у носителей аллелей Т/Т .

Генотип rs8099917 Т/Т связан со спонтанным разрешением инфекции, независимо от лечения .

Аллель G в rs8099917 является аллелем риска, и ассоциирован с низким уровнем ответа на терапию пегилированным интерфероном и рибавирином .

Исследования по изучению роли генетического полиморфизма указанных регионов человеческого генома показали, что положительное предсказательное значение полиморфизма IL28B выше, чем других базовых характеристик - предикторов успеха терапии (индекса массы тела, возраста, стадии фиброза и вирусной нагрузки) . Однако, в исследованиях на больших популяциях больных ХГС , с различным клиническим профилем (стадия фиброза печени от 0 до 4, исходный уровень виремии низкий и высокий) было показано, что предсказательное значение генотипа по IL28 для достижения УВО, может существенно модифицироваться данными клиническими характеристиками и снижаться с 74,4% до 37,3% для пациентов с генотипом СС. Поэтому, по прежнему, необходимо учитывать базовые характеристики стадии болезни конкретного пациента, но в комплексе с его генетическими маркерами.

Показано, что наибольшее значение полиморфизм IL28B имеет при инфицировании 1 субтипом HCV. На основании этого рекомендуется следующий алгоритм обследования при подготовке к лечению.

^ Рисунок 1. Рекомендованный алгоритм обследования перед началом терапии гепатита С.

Определение генотипа пациента по IL28B может изменить алгоритм принятия решения о лечении путем изменения длительности как стандартного курса терапии ПЕГ ИФН/РИБ, так и длительности тройной терапии ХГС. Оптимизация терапии позволит избежать многих дополнительных проблем при лечении пациентов с высокой вероятностью положительного ответа при назначении терапии (избежать дополнительных побочных эффектов и дополнительных затрат на тройную терапию, с включением ингибиторов протеазы – телапревира и боцепревира)

^ Генетические полиморфизмы, ассоциированные с устойчивостью к лечению хронического гепатита С (ХГС) интерфероном и рибавирином.

полиморфизм: Ген, замена[обозначение в NCBI]	Генотип	Возможные проявления полиморфизма
IL28B C>T [rs12979860]	С/С	Возможно спонтанное разрешение инфекции Около 80% пациентов с ХГС отвечают на лечение Характерна высокая вирусная нагрузка
	С/Т	20-40% пациентов с ХГС отвечают на лечение
	Т/Т	20-25% пациентов с ХГС отвечают на лечение
IL28B T>G [rs8099917]	Т/Т	Возможно спонтанное разрешение инфекции
	G/T	Сниженный ответ на терапию интерфероном и рибавирином
	G/G	Низкий ответ на терапию интерфероном и рибавирином

Исследования по созданию новых лекарственных средств для лечения вирусного гепатита С указывают грядущую перспективу — использование селективных противовирусных препаратов (ингибиторов протеазы и полимеразы HCV), эффективность которых не связана с изменениями в гене интерлейкина 28B. До выхода этих противовирусных препаратов на российский рынок пройдет как минимум 3-4 года, и в обозримом будущем они все равно будут применяться в комбинации с существующими лекарствами (пегилированный интерферон и рибавирин) ввиду быстро развивающейся резистентности у вируса к селективным противовирусным препаратам при монотерапии .

^ Показания к генетическому тестированию:

Прогнозирование исхода заболевания и ответа на лечение,
выбор между стандартным и пегилированным интерфероном в комбинации с рибавирином для лечения хронического гепатита С,
выбор тактики «ожидание доступности тройной терапии с включением ингибиторов протеазы HCV» или лечение стандартной схемой двойной терапии интерфероном в комбинации с рибавирином для пациентов дополнительными факторами (кроме фиброза печени), уменьшающими вероятность излечения препаратами существующего стандарта противовирусной терапии.

^ Дополнительные факторы, принимаемые во внимание при выборе терапевтической тактики:

Существует множество факторов, в той или иной степени влияющих на эффективность терапии и исход заболевания:

Возраст, пол, масса тела, инсулинорезистентность
Раса (у европейцев вероятность развития УВО в среднем в 3.1 раза выше чем у афроамериканцев)
Фиброз (при уровне фиброза METAVIR F0-2 вероятность развития УВО в 3 раза выше, чем у пациентов с F3-4)
Употребление алкоголя или наркотических препаратов.
Сопутствующие заболевания и относительные и абсолютные противопоказания к лечению интерфероном или рибавирином
Вирусная нагрузка (при вирусной нагрузке <600 000 IU ml^-1 вероятность развития УВО в 4 раза выше, чем при высокой вирусной нагрузке)

Таким образом, при прогнозировании ответа на лечение альфа-интерфероном в комбинации с рибавирином необходимо учитывать негенетические факторы риска, также прогностическую ценность имеет выявление аллельных вариантов в гене IL28B.

Список литературы:

1. Szabo E., Lotz G., Paska C., Kiss A., Schaff Z. Viral hepatitis: new data on hepatitis C infection // Pathology oncology research : POR. - 2003. - Vol. 9. - №4. - P. 215-221.

2. Ferenci P., Ferenci S., Datz C., Rezman I., Oberaigner W., Strauss R. Morbidity and mortality in paid Austrian plasma donors infected with hepatitis C at plasma donation in the 1970s // Journal of hepatology. - 2007. - Vol. 47. - №1. - P. 31-36.

3. Perz J. F., Armstrong G. L., Farrington L. A., Hutin Y. J., Bell B. P. The contributions of hepatitis B virus and hepatitis C virus infections to cirrhosis and primary liver cancer worldwide // Journal of hepatology. - 2006. - Vol. 45. - №4. - P. 529-538.

4. Внутренние болезни по Тинсли Р.Харрисону / Практика, 2005. - 2031-2044 c.

5. Carithers R. L., Jr., Emerson S. S. Therapy of hepatitis C: meta-analysis of interferon alfa-2b trials // Hepatology. - 1997. - Vol. 26. - №3 Suppl 1. - P. 83S-88S.

6. Craxi A. EASL Clinical Practice Guidelines: management of hepatitis C virus infection // J Hepatology. - 2011.

7. Ghany M. G., Strader D. B., Thomas D. L., Seeff L. B. Diagnosis, management, and treatment of hepatitis C: an update // Hepatology. - 2009. - Vol. 49. - №4. - P. 1335-1374.

8. Fried M. W., Shiffman M. L., Reddy K. R., Smith C., Marinos G., Goncales F. L., Jr., Haussinger D., Diago M., Carosi G., Dhumeaux D., Craxi A., Lin A., Hoffman J., Yu J. Peginterferon alfa-2a plus ribavirin for chronic hepatitis C virus infection // The New England journal of medicine. - 2002. - Vol. 347. - №13. - P. 975-982.

9. Schiff E. R. Emerging strategies for pegylated interferon combination therapy // Nature clinical practice. Gastroenterology & hepatology. - 2007. - Vol. 4 Suppl 1. - P. S17-21.

10. Marcellin P., Bourliere M., Pawlotsky J. M., Ouzan D. [HCV non-responder patients: definition of non-response and treatment strategy] // Gastroenterol Clin Biol. - 2007. - Vol. 31. - №8-9 Pt 3. - P. 4S13-19.

11. Vermehren J., Yu M. L., Monto A., Yao J. D., Anderson C., Bertuzis R., Schneider G., Sarrazin C. Multi-center evaluation of the Abbott RealTime HCV Assay for monitoring patients undergoing antiviral therapy for chronic hepatitis C // J Clin Virol.

12. Ge D., Fellay J., Thompson A. J., Simon J. S., Shianna K. V., Urban T. J., Heinzen E. L., Qiu P., Bertelsen A. H., Muir A. J., Sulkowski M., McHutchison J. G., Goldstein D. B. Genetic variation in IL28B predicts hepatitis C treatment-induced viral clearance // Nature. - 2009. - Vol. 461. - №7262. - P. 399-401.

13. Kempuraj D., Donelan J., Frydas S., Iezzi T., Conti F., Boucher W., Papadopoulou N. G., Madhappan B., Letourneau L., Cao J., Sabatino G., Meneghini F., Stellin L., Verna N., Riccioni G., Theoharides T. C. Interleukin-28 and 29 (IL-28 and IL-29): new cytokines with anti-viral activities // Int J Immunopathol Pharmacol. - 2004. - Vol. 17. - №2. - P. 103-106.

14. Tanaka Y., Nishida N., Sugiyama M., Kurosaki M., Matsuura K., Sakamoto N., Nakagawa M., Korenaga M., Hino K., Hige S., Ito Y., Mita E., Tanaka E., Mochida S., Murawaki Y., Honda M., Sakai A., Hiasa Y., Nishiguchi S., Koike A., Sakaida I., Imamura M., Ito K., Yano K., Masaki N., Sugauchi F., Izumi N., Tokunaga K., Mizokami M. Genome-wide association of IL28B with response to pegylated interferon-alpha and ribavirin therapy for chronic hepatitis C // Nature genetics. - 2009. - Vol. 41. - №10. - P. 1105-1109.

15. Grebely J., Petoumenos K., Hellard M., Matthews G. V., Suppiah V., Applegate T., Yeung B., Marks P., Rawlinson W., Lloyd A. R., Booth D., Kaldor J. M., George J., Dore G. J. Potential role for interleukin-28B genotype in treatment decision-making in recent hepatitis C virus infection // Hepatology. - 2010. - Vol. 52. - №4. - P. 1216-1224.

16. Suppiah V., Moldovan M., Ahlenstiel G., Berg T., Weltman M., Abate M. L., Bassendine M., Spengler U., Dore G. J., Powell E., Riordan S., Sheridan D., Smedile A., Fragomeli V., Muller T., Bahlo M., Stewart G. J., Booth D. R., George J. IL28B is associated with response to chronic hepatitis C interferon-alpha and ribavirin therapy // Nature genetics. - 2009. - Vol. 41. - №10. - P. 1100-1104.

17. Rauch A., Kutalik Z., Descombes P., Cai T., Di Iulio J., Mueller T., Bochud M., Battegay M., Bernasconi E., Borovicka J., Colombo S., Cerny A., Dufour J. F., Furrer H., Gunthard H. F., Heim M., Hirschel B., Malinverni R., Moradpour D., Mullhaupt B., Witteck A., Beckmann J. S., Berg T., Bergmann S., Negro F., Telenti A., Bochud P. Y. Genetic variation in IL28B is associated with chronic hepatitis C and treatment failure: a genome-wide association study // Gastroenterology. - 2010. - Vol. 138. - №4. - P. 1338-1345, 1345 e1331-1337.

18. Stattermayer A. F., Stauber R., Hofer H., Rutter K., Beinhardt S., Scherzer T. M., Zinober K., Datz C., Maieron A., Dulic-Lakovic E., Kessler H. H., Steindl-Munda P., Strasser M., Krall C., Ferenci P. Impact of IL28B genotype on the early and sustained virologic response in treatment-naive patients with chronic hepatitis C // Clin Gastroenterol Hepatol - Vol. 9. - №4. - P. 344-350 e342.

19. Stattermayer A. F., Stauber R., Hofer H., Rutter K., Beinhardt S., Scherzer T. M., Zinober K., Datz C., Maieron A., Dulic-Lakovic E., Kessler H. H., Steindl-Munda P., Strasser M., Krall C., Ferenci P. Impact of IL28B genotype on the early and sustained virologic response in treatment-naive patients with chronic hepatitis C // Clinical gastroenterology and hepatology : the official clinical practice journal of the American Gastroenterological Association. - 2011. - Vol. 9. - №4. - P. 344-350 e342.

20. O'Brien T. R., Everhart J. E., Morgan T. R., Lok A. S., Chung R. T., Shao Y., Shiffman M. L., Dotrang M., Sninsky J. J., Bonkovsky H. L., Pfeiffer R. M. An IL28B genotype-based clinical prediction model for treatment of chronic hepatitis C // PLoS ONE. - 2011. - Vol. 6. - №7. - P. e20904.

21. Akuta N., Suzuki F., Hirakawa M., Kawamura Y., Yatsuji H., Sezaki H., Suzuki Y., Hosaka T., Kobayashi M., Saitoh S., Arase Y., Ikeda K., Chayama K., Nakamura Y., Kumada H. Amino acid substitution in hepatitis C virus core region and genetic variation near the interleukin 28B gene predict viral response to telaprevir with peginterferon and ribavirin // Hepatology. - 2010. - Vol. 52. - №2. - P. 421-429.

</600>

плохо

не очень плохо

средне

хорошо

отлично

Ваша оценка этого документа будет первой.

Ваша оценка:

	Молекулярно-биологические технологии в медицинской практике: проблемы диагностического использования		Оптимизация и комплексное использование полимеразной цепной реакции в диагностике актуальных инфекционных
	Пцр основан на принципе естественной репликации ДНК. Метод полимеразной цепной реакции (пцр-диагностика)		Дифференциально-диагностическое и прогностическое значение показателей сывороточных цитокинов (растворимого
	Британская стоматологическая ассоциация (bda) информационный листок		28-33. Реакция Грубера для определения чистой культуры в этой реакции используются разные концентрации
	Инструкция по применению набора реагентов для количественного определения содержания кальция в сыворотке		Роль ассоциированных инфекций в воспалительных заболеваниях женской половой сферы. Особенности диагностики
	Задачи: Образовательные Познакомить обучающихся со строением кожи и выполняемыми ею функциями, производными		Характеристика товара требование к качеству, техническим характеристикам товара, требования к их Набор реактивов для определения общей активности Альфа-амилазы кинетическим методом в сыворотке крови...