28-33. Реакция Грубера.
для определения чистой культуры.
в этой реакции используются разные концентрации сыворотки
предварительно через 2 часа после инкубации 37С, и полностью через 22-24 часа.
степень положительной реакции определяется «+» (++++ - полная АГГЛ, жидкость прозрачна, очень большой осадок)
разведенную иммунную сыворотку или сыворотку по методу Кастеллани – для идентификации чистой культуры можно осадить общие Аb.
Реакция Кастеллани – из иммунной сыворотки последователь осаждают групповые антитела. В сыворотке остаются только специфические антитела адсорбированная сыворотка.
Монорецепторная сыворотка – содержат антитела только к определенному виду и типу антигенов.
34-37. Реакция Видаля.
Состав: физраствор (1мл) во все пробирки, по 1мл сыворотки (1:50) в первую и последнюю пробирки. Титрование, добавление диагностикума (1-6пр).
Диагностикум – убитые бактерии etc (для определения болезни)
Реакция флокуляции представляет собой преципитацию, при которой растворы антигенов и антител смешивают в пробирке. Учет реакции производят с помощью измерения на фотоэлектроколориметре мутности получаемой системы, что позволяет определить концентрацию исследуемого Аг.
Реакции нейтрализации – способность антител подавлять биоактивность возбудителя или его токсинов в различных тест-системах. (реакция Шика – способность нейтрализовать отдельную группу токсинов)
Реакции преципитации – явление осаждения антигена (преципитогена) раствором содержащим преципитины.
Что нужно.:
преципитирующую сыворотку
исследуемый антиген (1:1000)
физраствор
специальные пробирки
Реакция преципитации в геле – антиген диффундирует в гель и оставляет линии преципитации. Метод Оухтерлоню с дугообразными полосами.
Реакция кольцепреципитации – через 3-10 мин образуется кольцо преципитата.
Реакция пассивной ГАГ – в лунку с сывороткой добавляют сенсибилизированные эритроциты. Через 2 часа (при + реакции перевернутый зонтик).
Эритроцитарный диагностикум – носитель эритроцит
Реакция латекс-агглютинации (ЛАГ)
носителем антител являются маленькие частички латекса
осуществляется микрометодом в лунках
к 50 мкл исследуемого материала добавляют 10 мкл латекс-препарата. Три варианта контрольных тестов.
ЛАГ – для обнаружения м/о или их антигенов
используют несколько вариантов диагностикума с разным d частиц.
^
вариант реакции преципитации, но взаимодействие происходит в геле
позволяет количественно определять антигены.
раствор, содержащий антитела смешивается с гелем до его застывания и помещения на стекло. Антиген помещается в лунку и при его диффузии в гель, содержащий антитела, образуется зона помутнения, d которой пропорционален кол-ву антигена.
^
для выявления количества Т и В лимфоцитов
ТиВ лимфоциты выявляют по их способности фиксировать на своей поверхности эритроциты мыши или барана
В-л, обладающие рецепторами для IgG и комплемента могут быть выявлены по способности формировать розетки с эритроцитами, нагруженными этими белками.
содержание в крови Т-кл 40-70%, В-л – 10-30%.
некоторые лимфоциты не имеют маркеров – 0-л
Иммунологическая толерантность – состояние ареактивности к антигену (собственная)
Аллергия – ауто- или гетероиммунные реакции, вызванные аллергенами (антигены)
№
|
^
|
Основные механизмы
|
Примеры клиники
|
Тип1
|
Анафилактический
|
выработка IgE с последующей фиксацией на тучных клетках и базофилах
реакция Аг-Ат с высвобождением гистамина
|
атипическая бронхиальная астма
ринит
анафилактический шок
|
Тип2
|
Цитотоксический
|
выработка IgG & IgM против мембранных Аг
цитолиз через активацию комплемента
|
лекарственная аллергия
тромбоцитопения
аутосенсибилизация к Аг почек, кожи etc.
|
Тип3
|
Иммунокомплексный
|
выработка преципитирующих Ат
патогенетические реакции, инициированные иммунными комплексами через лейкоциты и комплемент
|
сывороточная болезнь
аутоиммунные заболевания
осложнения инфекций
|
Тип4
|
Клеточный
|
накопление сенсиб. Т-л.
реакция между Аг и сТл с их активацией, выработкой лимфокинов
цитотоксические реакции при участии м/ф
|
Аллергические явления при инфекционных заболеваниях и аутоиммунных заболеваниях, контактная аллергия
|
|