На правах рукописи Васильев Дмитрий Борисович Теоретические и методологические основы ветеринарной герпетологии Специальность: 16. 00. 02 – патология, онкология и морфология животных автореферат диссертации на соискание ученой степени доктора ветеринарных наук москва – 2007
|
|
Скачать 0.56 Mb.
|
|
^ . Сравнительно-морфологический анализ собственного серийного материала и сопоставление с некоторыми ранее обоснованными нозологическими формами заболеваний рептилий (Frye, 1976, 1991, 2000; Ippen et al., 1985; Zwart, 1992, 2004 и др.) позволили выделить, охарактеризовать и классифицировать следующие 58 нозологических форм заболеваний (табл. 3). В комплексе заболеваний опорно-двигательного аппарата нами выделены такие новые нозологические формы, как оссифицирующий спондилит и идиопатическая фиброзная остеодисплазия игуан. Первое заболевание характеризуется пролиферацией суставного хряща и эпифизарного кортекса позвонков в поясничном и крестцовом отделах, особенно выраженной в области поперечно-реберных отростков и головок реберных костей (рис.1). Клинические и макроскопические изменения при остеодисплазии игуан напоминают состояние клинически развернутой фиброзной остеодистрофии, однако отличаются выраженностью симптомов, отсутствием реакции на кальций-заместительную терапию и экзогенное введение витамина Д3, а также рентгенологически, так как изменения затрагивают исключительно челюстные кости и не выявляются в области трубчатых костей и таза. Гистологически ткань в основном состоит из фибро-остеоидного матрикса с фибробластами, фиброцитами и различным количеством коллагеновых волокон (рис.2). Таблица 3. Основные нозологические формы незаразных болезней рептилий
 
В исследованных нами случаях выделялись две характерные гистопатологические особенности: высокая активность остеокластов с высоким митотическим индексом и заметная пролиферация фибробластов, что отличает эту картину от фиброзной дисплазии млекопитающих и человека. В некоторых участках картина может напоминать саркомоподобную опухоль, но отличается от нее неинвазивным характером роста. Для лечения нами разработана операция остеотомии с пластикой нижней челюсти. Установлено, что в комплексе заболеваний печени особое место занимает гепатоклеточный липидоз - одна из самых распространенных болезней у рептилий в неволе (Frye, 1981; Will, 1975; Zwart, 1985). Прижизненные исследования патологического процесса при гепатоклеточном липидозе включали копроскопию, цитологическое исследование асцитной жидкости, общеклиническое и биохимическое исследование крови, рентгенографию в боковой проекции, ультрасонографию, эксцизионную биопсию с нижнего края правой доли печени, которую проводили с помощью ригидного эндоскопа по методу Hernandez-Divers, Cooper (2001). Умеренные изменения, характерные для этого заболевания, мы регистрировали не менее чем у 60% павших рептилий. Исходя из данных анамнеза, основными факторами, вызывающими аккумуляцию жира у рептилий, являются следующие: 1) рацион с высоким содержанием жиров, который приводит к увеличенному накоплению жира в депо (в основном в целомических и перикардиальном жировых телах) и печени; 2) гиподинамия, обычная в неволе у рептилий; 3) отсутствие овуляции у взрослых самок, что на фоне вителлогенеза приводит к аккумуляции жиров; 4) скрытые инфекции или хронические интоксикации, вызывающие нарушение транспорта липидов из печени или синтеза транспортных белков. При копроскопии выявлялись многочисленные жировые капли, желто-зеленое окрашивание уратов, атипичная структура бактериальных комменсалов (преобладание подвижных палочек, протея, капсулообразующих бактерий), иногда многочисленные трофозоиты и цисты протозойных паразитов. При выраженных гепатопатиях обычно аспирировался бесклеточный целомический транссудат кирпично-красного или желтовато-зеленого цвета с низкой плотностью. В ОКА крови при хронической печеночной недостаточности и дегидратации характерно повышение гематокрита, анемия (гемолитическая, со слабым регенеративным ответом), умеренный лейкоцитоз (до 10-12 тыс./мкл) с относительным моноцитозом. При остром воспалении и некрозе печени характерен высокий лейкоцитоз (12-20 тыс./мкл) с абсолютной гетеро- и азурофилией. В биохимическом профиле может повышаться уровень нескольких внутриклеточных ферментов, таких как АсАТ (до 107±57 ЕД/л), АлАТ (до 69±19 ЕД/л), ГГТ (до 1,2±0,4 ЕД/л), ЛДГ (более 2000 ЕД/л). Использованная нами впервые для рептилий ультрасонография оказалась чувствительным методом, позволяющим определить размеры, форму и эхогенность печени: при гепатоклеточном липидозе рептилий характерна генерализованная гиперэхогенная ультрасонограмма. Результаты проведенных гистопатологических исследований показывают, что печеночные дольки можно обнаружить только у нескольких видов ящериц, у большинства дольчатая структура заменяется печеночными пластинками, организованными в ветвящиеся тяжи, обычно шириной в две клетки. Между этими тяжами расположены сосудистые полости, выстланные эндотелием, с хаотично расположенными купферовскими клетками. Желчные протоки проходят в соединительнотканных септах. Общая характерная черта исследованных образцов печени рептилий – значительное количество гранул меланина, хаотично разбросанных в паренхиме и упакованных в плотные образования, не имеющие оформленной морфологической структуры. Наличие крупных жировых включений, а главное, одновременное присутствие нормальных и измененных клеток свидетельствует о жировых изменениях. При гепатоклеточном липидозе характерна диффузная мелкозернистая инфильтрация гепатоцитов, после чего поражаются купферовские клетки, и жир аккумулируется в виде макровезикул, вызывающих изменение структуры гепатоцитов (рис.3). При заболеваниях иной этиологии характерна воспалительная инфильтрация и гиперплазия купферовских клеток. В комплексе заболеваний репродуктивной системы рассматривается фолликулярный стаз, имеющий большое значение в ветеринарии рептилий и зарегистрированный нами не менее чем у 17% самок некоторых видов ящериц и черепах. В этиопатогенезе ведущую роль играет индивидуальное нарушение баланса ФСГ, ЛГ и эстрогенов у одиночно содержащихся самок. При этом не происходит ни овуляции, ни атрезии фолликулов. Заболевание лечится только хирургически, для чего требуется дифференцировать это состояние от нормальной беременности. Разработанный нами диагностический протокол базируется в основном на данных биохимического исследования крови и ультрасонографии. Ниже (табл. 4) приводятся данные о биохимическом профиле 36 самок игуан с диагностированным фолликулярным стазом. В процессе вителлогенеза происходят значительное повышение уровней некоторых биохимических параметров, которые, за исключением уровней кальция и органофосфата, снижаются после овуляции. Уровень последних должен снижаться непосредственно перед откладкой яиц. ^
Результаты ультрасонографического мониторинга половой системы самок игуан показывают, что на ранних стадиях вителлогенеза фолликулы ровной округлой формы, размером 12-20 мм, равномерно гипоэхогенны и не имеют гиперэхогенных оболочек. Овуляция происходит при размерах яиц около 30 мм. После овуляции яйца на ранних стадиях не отличимы от предовуляторных фолликулов. Затем содержимое яйца становится из равномерно гипоэхогенного более гетерогенным, с выраженной дорзальной полостью, и появляется гиперэхогенная скорлупа, на поздних стадиях двухслойная (рис.4).  
Содержимое фолликулов может становиться гетерогенным и при конденсации желтка в случае фолликулярного стаза, но при этом они уменьшаются в размерах и обычно уплотняются, что можно определить при пальпации. При атрезии вначале в центре фолликулов появляются гиперэхогенные зоны, затем границы фолликулов становятся нечеткими, и появляются эхонегативные полости диаметром менее 20 мм. ^ занимают важное место в структуре заболеваемости рептилий. Остеоренальный синдром регистрируется не менее, чем у 27% обследованных черепах, особенно в послезимовочный период (Васильев Д.Б., 1999) и не менее, чем у 22% игуан в возрасте 3,5-6,0 лет. Патогенез при заболеваниях почек рептилий сложный и многозвеньевой. Здесь одновременно происходят такие патологические процессы, как десквамация тубулярного эпителия, минерализация базальных мембран аретриол и почечных канальцев, стаз уратов в собирательных трубках, их аккумуляция на базальных мембранах тубулярного эпителия, вздутие и разрыв гломерул, фиброзные и склеротические изменения в интерстициальной ткани и т.п. На основании преимущественных изменений на конечной стадии процесса можно выделить такие нозологии, как нефрокальциноз, тубулонекроз, первичную подагру почек и другие формы нефропатий. Эти процессы отражены на схеме (рис. 5).  Наши данные указывают на то, что для разных видов рептилий характерны свои формы нефропатий. У среднеазиатских черепах в патогенезе доминируют подагрические процессы (гиперурикемическая нефропатия), связанные с дегидратацией в зимние месяцы, когда секреция мочевой кислоты продолжается при сильно сниженной перфузии почек и почти полной остановке клубочковой фильтрации воротной системой почек. Это приводит к закупорке канальцев и разрыву гломерул. Патоморфологическая картина характеризуется наличием уратов в расширенных канальцах, формированием подагрических тофов звездчатой формы в интерстиции, вздутием и разрывом гломерул, очаговым или диффузным склерозом. В моче у таких черепах, которую получали катетером из мочевого пузыря, практически отсутствовал кристаллический преципитат. В дальнейшем с развитием остеоренального синдрома нарастали процессы деминерализации кости и метастатическая минерализация мягких тканей. Поэтому в патогенезе заболевания начинали вторично преобладать процессы минерализации базальных мембран тубулоцитов и эндотелиоцитов, вплоть до зрелой картины нефрокальциноза. Как показали наши исследования, у игуан, в отличие от других позвоночных и даже от большинства рептилий, метастатическая минерализация встречается при гиповитаминозе Д, а не при гипервитаминозе. Эти данные хорошо согласуются с понятием о кальцифилаксии по Selye (1963). В развитии кальцифилаксии участвуют два фактора – сенсибилизирующий и разрешающий. Одним из самых сильных сенсибилизирующих факторов является паратгормон (ПТГ). У игуан метаболизм ПТГ легко нарушается, поскольку гормон не инактивируется лизосомальными ферментами, и при избыточном синтезе этот фактор долго циркулирует в крови. Разрешающими агентами могут быть соли металлов, органические соединения, травмы и т.д. Такая теория объясняет феномен кальцификации при гиповитаминозе Д, распространенность этой патологии среди животных, у которых отсутствуют для этого местные (дистрофия, некроз, склероз) или общие (гиперкальциемия) предпосылки. Игуаны не страдают от дегидратации в такой степени, как черепахи, и не столь чувствительны к избытку мочевой кислоты, как крокодилы (в норме аммониотелики, выделяющие аммиак). Поэтому для них менее характерны подагрические изменения, и тубулопатии в основном связаны с кальцификацией мембран. В целом, у игуан гистопатологическое исследование чаще всего выявляет (в порядке частоты встречаемости) тубулоинтерстициальный нефроз, интерстициальный нефрит с активным воспалением, гломерулонефрит, тубулярный некроз, метастатическую минерализацию, подагрические тофы и фиброз. Таким образом, можно выделить несколько основных типов развития нефропатий у рептилий:
Среди метаболических болезней рептилий безусловно доминируют нарушения минерального обмена, особенно характерные для молодняка (в легкой форме встречаются у 70% водных черепах, 90% сухопутных и 32% игуан). В комплексе болезней, связанных с нарушением минерального обмена, нами выделен ряд нозологий, объединенных основным этиопатогенетическим механизмом вторичного гиперпаратиреоидизма, пищевого (ВПГ) или почечного (остеоренальный синдром, ОС). К ним относятся рахит, остеомаляция и ОС sensu stricto. Остеопенические формы ВПГ, встречающиеся у черепах и безосновательно называемые в зарубежной литературе остеопорозом, не имеют отношения к этому заболеванию. В связи со сходством клинических и макроскопических изменений при этих заболеваниях у рептилий, возникла необходимость разработки дифференциально-диагностического протокола, т.к. терапия при этих заболеваниях кардинально отличается. Ниже на основании анализа данных анамнеза, клинических, биохимических и патоморфологических исследований приводится дифференциальный диагноз при этих заболеваниях (табл. 5). Таблица 5. Дифференциальный диагноз при ВПГ игуан (N=37, p<0,05)
Таким образом, прижизненно заболевания дифференцируются по патогномоничным симптомам и биохимическому профилю, посмертно – по патоморфологической картине. На основании анализа литературных данных, зоопарковских рационов, состава 8 видов импортных подкормок для рептилий и клинических комиссионных опытов, нами разработана совместно с ООО «Агроветзащита» и внедрена витаминно-минеральная подкормка «Рептилайф-порошок» и «Рептилайф мультивитаминный комплекс для инъекций» для профилактики ВПГ рептилий. Опухоли у рептилий регистрируют достаточно редко, в среднем, не более чем у 2% вскрытых животных (Effron et al, 1977; Machotka, 1984; Oros et al, 2001). В связи с этим в обзорных зарубежных публикациях сообщается суммарно не более чем о 300 случаях опухолей (Harshbarger, 1975, 1976, 1980, 1984; Jacobson, 1981; Frye, 1991; Done, 1996). Опухоли рептилий, по данным наших исследований, обладают выраженной биохимической и иммунной специфичностью, и поэтому плохо дифференцируются на гистологическом уровне. Для выявления гистогенеза требуется иммуногистохимическое и электронномикроскопическое исследование. Полученные нами данные о 47 верифицированных случаях опухолей у рептилий, что составляет на 1800 вскрытий 2,6 %, существенно дополняют этот раздел ветеринарной герпетологии и сравнительной онкологии. Ниже (табл. 6) перечислены установленные нами 29 самостоятельных нозологических форм опухолей рептилий, среди которых имеется несколько новых нозологий, ранее не описанных у этих животных. ^
Нами впервые описана ганглионейробластома, локализованная в подкожной клетчатке у йеменского хамелеона. Опухоль состояла из крупных клеток разной формы со светлыми пузыревидными ядрами и четкими ядрышками. Цитоплазма клеток была зернисто-пенистая. Изредка встречались атипичные фигуры митоза. В части клеток выявлялись цитоплазматические отростки, хорошо дифференцируемые при электронной микроскопии (рис.6).  Рис.6. Йеменский хамелеон, ганглионейробластома: электронная ультрамикрофотография опухолевых клеток, окруженных большим количеством тесно расположенных отростков, имеются интердигитарные клеточные контакты (×10 000) При проведении иммуногистохимической обработки, обнаружена позитивная окраска на хромогранин, на белок S-100, на нейронспецифическую энолазу; негативная окраска на виментин, общий лейкоцитарный белок, CD99 и цитокератин. По данным иммуногистохимии и электронной микроскопии опухоль была классифицирована как ганглионейробластома. За исключением описанного у змей одного случая нейрофибромы и 4 случаев MPNST (злокачественная опухоль периневрия), это первое описание опухоли периферических нервов у ящериц и первое описание опухоли нейроэктодермального генеза у рептилий вообще. ^ . При разработке принципов общей хирургии рептилий проводили анализ литературных данных (Bennett, 1991; Frye, 1991; Mader, 1996 и др.) и ретроспективную оценку клинических результатов. Выяснено, что на анестезиологический протокол и технику проведения хирургических вмешательств влияют такие анатомо-физиологические особенности рептилий, как гетеротермность, низкий уровень метаболизма, способность к анаэробному дыханию и пролонгированному апноэ, торпидному состоянию, интервентрикулярному шунту вследствие неразвитой межжелудочковой перегородки, особое строение чешуйчатой кожи и генерализованный механизм линьки, отсутствие диафрагмы и хирургического барьера между грудной и брюшной полостью, особый механизм заживления ран и воспалительного ответа, особый тип рассасывания шовных материалов, доминирование грамотрицательной микрофлоры в случае хирургической инфекции, мелкий размер большинства видов (масса тела 37% оперированных рептилий составляла 50-200 г) и др. Нами обнаружено, что на скорость заживления ран позитивно влияет линька, повышение температуры тела и ориентация разреза по аксиальной оси тела или конечности. При оптимальной для вида рептилии температуре гетерофильная инфильтрация сохраняется в зоне раны до 4-6 недель. Соответственно, снятие кожных швов должно проводиться не ранее этого срока. В связи с низкой лизосомальной активностью гетерофилов, кетгуты и другие шовные материалы, рассасывающиеся по механизму фагоцитоза, не подвергаются биодеградации в тканях рептилий в установленные сроки. Для погружных швов мы рекомендуем использовать атравматические нити на основе полигликоля, полилактата или полидиоксанона. Абсорбируемая синтетика рассасывается в тканях рептилий по механизму гидролиза в течение 60-90 дней. На основании выявленных нами морфо-функциональных особенностей костной ткани ящериц, а именно, в норме бессосудистого характера кортикальной кости, не развитой системы вторичных остеонов, ограниченного формирования трабекул в диафизарной зоне трубчатых костей, пролонгированного периода формирования провизорного каллуса (до 6-8 недель) и оссификации (до 16-24 недель), видоспецифических различий в строении и диаметре медуллярного канала и др., были разработаны принципы хирургического остеосинтеза и техника таких операций, как остеотомия с пластикой нижней челюсти, грудо-поясничная ламинэктомия и корподез, рекомендованы методы консервативного лечения переломов. Нами исследована проекционная топография внутренних органов у ящериц 3-х основных типов строения: типичного, вытянутого (с каудальным положением сердца и развитой псевдодиафрагмой), с латерально уплощенной формой тела. С учетом анатомических особенностей брюшной стенки нами рекомендованы следующие виды хирургического доступа при целиотомии:
Нами исследованы анатомо-физиологические особенности модифицированного толстого кишечника растительноядных ящериц. Илеоцекальный сфинктер выступает в просвет преддверия – первой изолированной камеры ободочной кишки, от которой вбок отходит крупная полость – слепокишечный вырост, не имеющий цекоколического сфинктра или перегородки, отделяющей его от преддверия. В 2-3 сантиметрах дистальнее располагается циркулярная перегородка, также имеющая сфинктер, и отделяющая преддверие от остальной части ободочной кишки. В проксимальном отделе собственно ободочной кишки, который у голодных игуан занимает почти горизонтальное положение, последовательно расположено 4-6 полулунных перегородок, следующих на расстоянии 1-2 см друг за другом. Их размер уменьшается в дистальном направлении. В процессе заполнения ободочной кишки происходит каудальная ротация илеоцекальной заслонки, отчего проксимальная кишка занимает вертикальное положение и соответствует восходящему колену. Поперечноободочный отдел имеет наибольший диаметр и гладкую стенку с редкими продольными складками, которые при вздутии кишки не определяются. Нисходящее колено ободочной кишки имеет наименьший диаметр и является наиболее мобильным. Спавшаяся кишка характеризуется «сложенным» нисходящим сегментом, который до перехода в прямую кишку имеет форму буквы V. При расправлении кишки этот сегмент также расправляется и занимает характерную позицию с правой стороны брюшной полости. Эти особенности влияют на интерпретацию данных обзорной и контрастной рентгенографии, ультрасонографии, фиброколоноскопии и специфическую технику хирургических вмешательств. |
Ваша оценка этого документа будет первой.
Ваша оценка:
Похожие:
База данных защищена авторским правом ©MedZnate 2000-2016
allo, dekanat, ansya, kenam
обратиться к администрации | правообладателям | пользователям
allo, dekanat, ansya, kenam
обратиться к администрации | правообладателям | пользователям