Миазы овец icon

Миазы овец





Название Миазы овец
страница 6/14
Дата конвертации 07.03.2013
Размер 4 Mb.
Тип Монография
1   2   3   4   5   6   7   8   9   ...   14
^

Биохимические показатели крови у овец, обработанных эмульсиями циодрина и неоцидола



Направленность и интенсивность обмена веществ в организме животных регулируются физиологически активными веществами: ферментами, витаминами, гормонами, между которыми существует тесная связь и взаимообусловленность.

Основу обмена веществ составляют биологические процессы, ко­торые проявляют свой сложный и противоречивый характер на всех этапах развития организма. Биохимические исследования крови позво­ляют познать интимные процессы, происходящие в организме и его системах при воздействии на них циодрина и неоцидола.

Важным показателем токсичности пестици­дов для сельскохозяйственных животных и человека является состоя­ние активности холинэстеразы - катализатора гидролитического расщепления ацетилхолина, медиатора нервных импульсов в синапсах нервной системы (D. Grob et al., 1949; W.N. Aldridge 1953; Ю.С. Каган, Е.Н. Маковская, 1957; М.Я. Михельсон, 1957, С.Н. Го­ликов, В.И. Розенгарт, I960, 1964; О. Брайя, 1964; Д.Д. Полоз, 1968).

Снижение активности холинэстеразы крови у животных часто нахо­дится в соответствии со степенью интоксикации организма пестицидами. Эта особенность фермента имеет важное диагностическое значение, так как позволяет определить уровень воздействия пестицидов еще до проявления клинических признаков отравления животных.

Активность холинэстеразы определяли по количеству неразложившегося ацетилхолина, который синтезируется в синапсах холинэргических нервных волокон при участии фермента холинацетилазы.

Многие фосфорорганические пестициды оказывают избирательное воздействие на синтез, освобождение и скорость гидролиза ацетилхолина. Между количеством накопившегося ацетилхолина и активностью холинэстеразы существует обратная связь: чем больше первого, тем мень­ше активность фермента. Поэтому необходимость изучения состояния фермента холинэстеразы под воздействием эмульсий циодрина и неоцидола не вызывает сомнений.

В процессе исследований было установлено, что локальная oбрaботка овец в 0,3%-ной эмульсией циодрина в проходной ванне вызывает у них снижение активности холинэстеразы крови на 42%, через 6 часов после нанесения препарата. К 6 суткам наблюдения этот показатель достигал уровня исходных дан­ных (табл. 18).

Аппликация животным 0,25%-ной эмульсии неоцидола методом купания в проходной ванне способствовала снижению активности фермен­та на 28% через 6 часов после их обработки. К 6 суткам наблюдений активность холинэстеразы крови у животных была несколь­ко ниже исходных данных.

При исследовании активности холинэстеразы у овец, обработан­ных 2%-ными эмульсиями этих пестицидов методом малообъемного оп­рыскивания установлено, что 2%-ная эмульсия циодрина снижает активность фермента на 16 ,1% через 6 часов после нанесе­ния препарата.

Обработку животных 2%-ной эмульсией неоцидола осуществляли двумя способами. Одну группу овец обработали тотально (Т), другую - подвергли частичному опрыскиванию (Ч) в области живота, препуция, гениталий.

Таблица 22

Содержание ацетилхолина (мкг) в крови овец, обработанных эмульсиями

циодрина и неоцидола


Время

исследований

Методы обработки животных

Препарат, название, концентрация по д. в., %t M +.m

купание в проходной ванне

Малообъемное опрыскивание

Циодрин

0,3

неоцидол

0,25

контроль

циодрин

2,0

неоцидол

2,0 (Т)

неоцидол

2,0 (Ч)

контроль

Исходные данные

154±15,4

296±14,0

264±16,1


230±8,8


293,6±28,1

288,4±42,3

309,3±25,6

Через 3 часа

203±23,7

308±15,1

288±15,1

267±16,1

293,4±16,1

300,2±30,6

318,4±30,6

Через 6 часов

219±22,6

393±21,8

253±22,7

266,9±24,3

343,7±52,8

303,2±30,7

323,0±45,9

Через 24 часа

182±24,1

323±13,1

268±16,7

261,7±29,6

318,7±22,1

291,5±27,4

323,7±12,1

Через 3 суток

166±23,6

318±13,5

256±21,0

232,3±47,2

310,8±6,9

292,2±43,8

311,8±74,2

Через 6-7 суток

156±14,9

312±11,6

270±23,1

242,4±15,7

300,0±46,2

290,5±38,0

311,8±74,2

Примечание: подчеркнуты данные, где Р 0,05;

неоцидол (Т) - тотальная обработка; неоцидол (Ч) - частичная обработка

У животных с тотальной обработкой активность холинэстеразы крови снижалась на 17,1% через 6 часов после нанесения препа­рата.

В группе с локальной аппликацией 2%-ной эмульсии неоцидола достоверных изменений снижения активности фермента отмечено не было.

Приведенные данные свидетельствуют о том, что оба препарата в указанных концентрациях и перечисленных способах их аппликации животным вызывают у последних снижение активности холинэстеразы крови. Уровень снижения актив­ности фермента был наибольшим при купании животных в проходной ванне с использованием 0,3%-ной эмульсии циодрина.

Эмульсии неоцидола способствовали меньшему угнетению актив­ности фермента, однако этот препарат оказывал более продолжитель­ное в сравнении с циодрином ингибирование холинэстеразы крови у обработанных животных.

Незначительные колебания показателя зарегистрированы у жи­вотных, обработанных методом малообъемного опрыскивания. Это обу­словлено, очевидно, тем, что нанесение препаратов в жидко-капель­ном состоянии с высоким уровнем дисперсности рабочих эмульсий способствует меньшему всасыванию пестицидов.

Понимание того, что активность холинэстеразы крови у обработанных жи­вотных снижалась менее чем на 50%, свидетельствует о том, что эмульсии циодрина и неоцидола в избранных нами кон­центрациях оказывают незначительное воздействие на животных, обработанных методом купания в проходной ванне и объемного опрыскивания.

Для процессов тканевого дыхания большое значение имеют биологические катализаторы. К ним относится и глютатион, синтези­рующийся в клетках и участвующий в качестве активатора в ткане­вом обмене протеолитических ферментов.

Изучали кинетику общего глютатиона, его восстановленной и окисленной форм при аппликации животным эмульсий циодрина и неоцидола с целью дать объективную оценку состояния окислительно-восстановительных процессов, происходящих в организме овец под воздействием изучаемых нами пестицидов.

Достоверное снижение общего глютатиона и его форм при обработке овец в проходной ванне отмечено у жи­вотных с нанесением 0,3%-ной эмульсии циодрина через 3 часа. В группе с аппликацией 0,25%-ной эмульсии неоцидола - через 24 часа. В первой группе восстановление показателя до уровня исходных дан­ных наблюдали через 3 суток. Во второй показатель был ниже исходного уровня в течение 6 суток.

Характерно, что у животных обеих групп рост общего глю­татиона осуществлялся за счет восстановительной формы глютатиона, что следует квалифицировать как фактор компенсаторной реакции организма обработанных овец в ответ на воздействие пестицидов. В клинической практике принято считать, что рост вос­становленной формы глютатиона соответствует стадии выздоровления организма.

Нанесение препаратов методом малообъемного опрыскивания способствовало достоверному снижению у животных общего глютатиона и его форм через 3-24 часа после обработки животных.

У животных с тотальным нанесением эмульсий препаратов показатель не достиг данных исходного уровня и к 7 суткам наблю­дений. Наибольшие различия отмечены у овец с тотальной аппликацией 2%-ной эмульсии неоцидола.

У животных с частичным нанесением неоцидола достоверных из­менений в содержании общего глютатиона, восстановленной и окислен­ной форм не обнаружено.

Обработка животных методом купания в проход­ной ванне с использованием 0,3 и 0,25%-ных эмульсий циодрина и не­оцидола вызывает снижение содержания общего глютатиона и его форм. Не исключено, что в этот период снижается и роль глютатиона, как активатора тканевого и газового обмена.

Восстановление процентного соотношения окисленной и восстановленной форм к третьим суткам после аппликации пестицидов свидетельствует, что отмеченные изменения носят компенсированный характер.

Аппликация пестицидов методом малообъемного опрыскивания вызывала динамичные изменения в содержании общего глютатиона и его форм. В течение всего периода наблюдений при этом способе нанесения эмульсий циодрина и неоцидола не наблюдали изменений соотношения окисленной и восстановленной форм глютатиона.

Для токсикологического анализа существенный инте­рес представляет изучение белкового обмена у овец, обработанных эмульсиями циодрина и неоцидола. Исследованию этого показателя уделяется большое внимание в связи с тем, что белково-протеидный комплекс крови участвует в иммунобиологической защите организма, переносе метаболитов, детоксикации и выведении различных ядов, осуществляет связь жиров, фосфатов, витаминов, гормонов.

Лабильным показателем токсичности пестицидов являются бел­ковые фракции сыворотки крови обработанных животных. Наиболее подвижной из них являются альбумины, которые синтезируются в пе­чени и содержат в своем составе 19 важнейших аминокислот, угле­воды, липиды. Альбумины имеют значение в поддержании коллоидно-осмотического давления, водно-солевого обмена. Вместе с гло­булинами участвуют в транспорте гормонов, витаминов, липидов.


Таблица 23

Динамика общего глютатиона (мг%) в крови овец, обработанных эмульсиями

циодрина и неоцидола


Время

исследований


Методы обработки животных

Препарат, название, концентрация по д.в. , %, М ±m

купание в проходной ванне

малообъемное опрыскивание

циодрин

0,3

Неоцидол

0,25

контроль

циодрин 2,0

неоцидол 2,0 (Т)

неоцидол 2,0 (4)

контроль

Исходные данные Через 3 часа

" 6 часов

" 24 часа

"3 суток

"6-7 суток

43 ,8*4 ,0

30 ,5+1 ,9

34,9+0,6

34,2+3,1

44,9+3,9

43.6+1,2

46,3+4,9 40,6+1,1

40,5+1,1

27 ,6+2 ,8

31,4+2,0 39,8+7,5

39 ,7+2,0

48 ,4+1 ,5

38,2+1,2 41,4±1,5

50,8+2,4 46,7±3,4

52,6+2,5 35,3+4,1

33 ,6+2 ,4

35,1±4,3

43,7+3,3

50,4+3,5

57 ,9±1 ,4

32 ,2±1 ,8

34 ,4+2 ,4

36,3+2,6

45,94,2

47,0±6 ,2


39,3±3,6

33 ,7+1 ,3

35,0+3,8 39,7+3,1

39,1±1,9

39 ,2±5 ,4

41,5+2,9 43,1+3,6

46,3+5,8

49 ,7+2 ,7

47,1±4,5 48,4±3,7


Примечание: подчеркнуты данные, где Р 0,05; неоцидол (Т) - тотальная обработка; неоцидол (Ч) - частичная обработка



Таблица 24

Динамика окисленного глютатиона (мг%) в крови овец, обработанных эмульсиями циодрина и неоцидола


Время исследований

Методы обработки животных

Препарат, название, концентрация по д.в., %, М±m

Купание в проходной ванне

Малообъемное опрыскивание

Циодрин 0,3

Неоцидол 0,25

контроль

Циодрин

2,0

Неоцидол

2,0 (Т)

Неоцидол

2,0 (Ч)

контроль

Исходные данные

21,7±5,6

23,6±7,0

24,1±1,8

26,3±2,4

34,2±2,9

19,7±2,7

20,9±1,6

Через 3 часа

12,1±2,3

21,0±3,6

24,6±2,8

18,9±2,7

16,6±1,4

16,9±1,3

21,6±2,6

« 6 часов

13,5±2,2

17,8±4,0

18,6±2,4

16,8±2,8

17,2±2,4

17,9±2,7

22,6±4,1

« 24 часа

17,1±2,8

11,0±2,0

20,7±2,6

17,6±2,9

18,1±3,0

19,9±2,1

25±0,9

« 3 суток

19,6±3,7

16,0±6,0

22,0±2,1

21,9±2,8

23,0±4,6

19,6±0,8

23,5±2,9

« 6-7 суток

14,5±7,6

14,5±7,6

23,0±3,1

24,3±2,1

24,0±5,9

19,6±1,7

24,3±2,1



Таблица 25

Динамика восстановленного глютатиона (мг %) в крови овец, обработанных эмульсиями циодрина и неоцидола



Время исследований

Методы обработки животных

Препарат, название, концентрация по д.в., %, М±m

Купание в проходной ванне

Малообъемное опрыскивание

Циодрин 0,3

Неоцидол 0,25

контроль

Циодрин

2,0

Неоцидол

2,0 (Т)

Неоцидол

2,0 (Ч)

контроль

Исходные данные

22,7±2,5

22,7±1,9

15,6±0,5

26,3±2,4

23,7±2,9

19,6±2,7

20,6±1,6

Через 3 часа

18,4±2,7

19,6±1,5

23,8±2,4

16,4±2,7

16,6±1,4

16,8±1,3

21,5±2,6

« 6 часов

21,4±2,9

22,7±2,8

19,6±2,6

16,8±2,9

17,2±2,4

17,9±2,7

23,7±4,1

« 24 часа

17,1±2,8

16,6±3,7

20,7±2,6

17,5±2,9

18,2±3,0

19,8±2,1

24,7±0,9

« 3 суток

25,3±1,6

21,4±0,9

28,8±0,7

21,8±2,8

22,9±4,6

19,5±0,8

23,6±2,9

« 6-7 суток

29,1±7,7

25,3±0,7

23,7±1,6

26,1±2,1

23,0±5,6

19,6±2,1

24,1±2,1




Глобулины (β+γ) образуют комплексы с углеводами, липидами, холестерином, содержат в своем составе белковый комплекс - пропердин, являющийся активатором синтеза антител.

При изучении показателей белкового обмена отмечен ряд изменений, которые произошли в организме подопытных овец под воздействием эмульсий циодрина и неоцидола (табл. 26).

Отсутствовали статистически достоверные изменения в со­держании общего белка у животных, обработанных 0,3, 0,25 и 2,0%-ными эмульсиями циодрина и неоцидола методами купания в проход­ной ванне и малообъемного опрыскивания.

Установлено лишь незначительное снижение (через 24 часа) в содержании общего белка у овец, обрабо­танных 0,3 и 0,25%-ными эмульсиями циодрина и неоцидола методом купания в проходной ванне. Аналогичные изменения показа­теля отмечены и в контрольной группе животных. К 6 суткам эксперимента содержание общего белка у животных, обра­ботанных этим методом, было эквивалентным доопытному периоду.

Аппликация овцам 2%-ных эмульсий циодрина и неоцидола мето­дом малообъемного опрыскивания вызывала у овец (через 3 часа), обработанных циодрином незначительное снижение, а в группе животных, об­работанных неоцидолом - увеличение содержания общего белка. В те­чение последующих 6 часов этот показатель у животных обеих групп достигал уровня исходных данных.

Через 3 суток у овец, обработанных циодрином, содержание общего белка было равным исходному уровню. В эти сроки в группе животных с ап­пликацией 2%-ной эмульсии неоцидола показатель был ниже уровня исходных данных.

К 7 суткам эксперимента содержание общего белка у всех животных, за исключением частично обработан­ных неоцидолом, было несколько ниже данных исходного уровня.

Количество альбуминов у животных, обработанных методом ку­пания в проходной ванне, изменялось незначительно.

Аппликация овцам 0,3%-ной эмульсии циодрина вызвала через 24 часа снижение содержания альбуминов на 7%, а в группе, обра­ботанной 0,25%-ной эмульсией неоцидола - увеличение на 4,1%. К 6 суткам у овец, обработанных циодрином, содержа­ние альбуминов превышало уровень исходных данных на 1,4%, а в группе с аппликацией неоцидола было на 1,3% ниже исходного уровня

Обработка овец 2%-ными эмульсиями препаратов методом малообъемного опрыскивания вызывала меньшее снижение альбуминов. Наибольшее снижение альбуминов в сыворотке крови овец обеих экспериментальных групп зарегистрировано через 3 суток.


Таблица 26

Количество общего белка (г%) в крови овец, обработанных эмульсиями

циодрина и неоцидола


Время исследования

Методы обработки животных

препарат, название, концентрация по д. в. , %, М ±m

купание в проходной ванне

малообъемное опрыскивание

циодрин 0,3

неоцидол 0,25

контроль

циодрин 2,0

неоцидол 2,0 (Т)

неоцидол 2,0 (Ч)

контроль

Исходные данные

7,5+0,1

7 ,5±0 ,2

6,8±0,1

7,4±0,2

7,3+0,5

71±0,2

7,2+0,1

Через 3 часа

н/и

н/и

н/и

6,9±0,2

7,5±О,1

7,0±0,2

6,8±О,1

" 6 часов

"

"

"

7,4+0,2

7,4+0,4

6,9+ОД

7,5+0,3

" 24 часа

7Д+О,1

7,1+О,1

6,4+0,2

7,4+0,2

6,5+О,1

6,9+0,2

7 ,3+0 ,2

" 3 суток

7,7+О,1

7,7+О,1

7,3+0,2

7,3+0 ,2

7,2+0,4

6,8+0,2

7 ,2+0 ,2

" 6-7 суток

7,5±О,1

7 ,8±0 ,2

7 ,4±0 ,2

7,0+0,4

7Д±0,2

7,1±0,2

7,2±О,1

Примечание:

неоцидол (Т) - тотальная обработка;

неоцидол (Ч) - частичная обработка; н/и - не исследовали

Таблица 27

Содержание альбуминов (%) в сыворотке крови овец, обработанных

эмульсиями циодрина и неоцидола

Время исследования

Методы обработки животных

препарат, название, концентрация по д. в. , %, М ±m

купание в проходной ванне

малообъемное опрыскивание

циодрин

0,3

неоцидол 0,25

контроль

Циодрин

2,0

неоцидол 2,0 (Т)

неоцидол 2,0 (Ч)

контроль

Исходные данные

57,0±1,3

51,7±2,1

50,0±5,8

48,7±0,9

47,7±0,4

49,0±0,5

48,9±0,8

Через 3 часа

н/и

н/и

н/и

48,4±0,8

47,9±0,6

48,7±0,5

48,9±0,8

" 6 часов

«

«

«

48,3±0,9

47,1±0,3

48,5±0,7

48,9±0,9

" 24 часа

50,0±16,9

55,8±8,5

50,0±4,3

47,5±1,1

47,1±0,3

48,5±0,9

48,9±1,5

" 3 суток

54,2±3,7

53,0±2,9

50,1±3,8

46,2±0,9

46,0±0,6

48,3±0,9

48,9±1,4

" 6-7 суток

58,4±2,6

50,4±2,6

50,0±4,4

48,9±1,1

46,9±0,6

48,1±1,0

49,3±0,8



Таблица 28

Содержание α- глобулинов (%) в сыворотке крови овец, обработанных

эмульсиями циодрина и неоцидола


Время исследования

Методы обработки животных

препарат, название, концентрация по д. в. , %, М ±m

купание в проходной ванне

малообъемное опрыскивание

циодрин 0,3

неоцидол 0,25

контроль

циодрин 2,0

неоцидол 2,0 (Т)

неоцидол 2,0 (Ч)

контроль

Исходные данные

23,3±0,8

27,3±2,1

23,0±0,4

13,1±1,9

12,9±1,0

13,2±1,5

14,1±2,0

Через 3 часа

Н/и

Н/и

Н/и

13,1±1,8

12,9±0,5

13,2±1,1

14,1±1,3

" 6 часов

«

«

«

13,1±1,8

12,9±1,0

13,2±1,4

14,1±1,2

" 24 часа

16,3±0,2

15,7±0,3

28,0±0,3

12,7±1,8

12,9±0,6

13,3±0,8

14,1±1,1

" 3 суток

23,6±0,1

25,0±0,2

20,0±0,2

12,6±1,4

11,5±0,6

12,6±0,8

14,1±0,6

" 6-7 суток

23,9±0,5

26,4±0,3

22,0±0,2

13,1±2,4

11,8±0,6

13,2±0,9

14,3±0,6



Таблица 29

Содержание β+γ глобулинов (%) в сыворотке крови овец, обработанных

эмульсиями циодрина и неоцидола


Время исследования

Методы обработки животных

препарат, название, концентрация по д. в. , %, М ±m

купание в проходной ванне

малообъемное опрыскивание

циодрин 0,3

неоцидол 0,25

контроль

циодрин 2,0

неоцидол 2,0 (Т)

неоцидол 2,0 (Ч)

контроль

Исходные данные

17,7±1,8

21,0±3,5

27,0±0,4

38,3±1,9

39,3±1,4

39,7±2,7

38,9±2,4

Через 3 часа

Н/и

Н/и

Н/и

36,9±1,3

39,2±0,5

38,3±1,1

36,9±1,3

" 6 часов

«

«

«

38,6±1,8

39,9±1,2

38,2±1,6

37,4±1,3

" 24 часа

33,7±17,2

38,5±8,1

22,0±0,3

39,6±1,5

40,2±0,3

38,1±1,2

36,7±1,5

" 3 суток

22,2±2,0

22,0±1,1

29,9±3,8

39,2±1,5

42,4±0,9

39,8±0,9

37,0±1,4

/" 6-7 суток

17,7±1,3

23,2±4,1

28,0±0,2

38,1±2,7

41,2±0,9

38,7±1,5

35,2±1,4



Примечание: подчеркнуты данные, где Р >0,05

К 7 суткам наблюдений разницы (в сравнении с исходными дан­ными) в содержании альбуминов в группе, обработанной циодрином, не установлено, в группе с тотальным и локальным нанесением не­оцидола количество альбуминов было сниженным на 0,8%.

Содержание γ глобулинов в сыворотке крови овец, обработанных эмульсиями циодрина и неоцидола, изменялось аналогично количеству альбуминов.

Достоверное увеличение содержания β+γ гло­булинов отмечено у животных, обработанных в проходной ванне 0,3% и 0,25%-ными эмульсиями циодрина и неоцидола. Максимальный рост показа­теля зарегистрирован в обеих подопытных группах через 24 часа после обработки овец пестицидами. Наибольшие изменения регистрировались у животных, обработанных 0,3%-ной эмульсией циодрина. К 6 суткам наблюдений в этой группе показатель достиг уровня исход­ных данных, а у овец с аппликацией 0,25%-ного неоцидола он был выше на 2,2%.

Аппликация овцам 2%-ных эмульсии препаратов методом малообъемного опрыскивания существенных изменений в содержании глобу­линов не вызвала. Отмечено незначительное увеличение количества β+γ глобулинов (на 1,9%) только в группе с тотальным нанесе­нием неоцидола.

Приведенные данные свидетельствуют о том, что обработка овец эмульсиями циодрина и неоцидола не оказывает существенного воздействия на белковый обмен животных. Отмеченные изменения в содержании альбуминов обусловлены, очевид­но, воздействием пестицидов на белковообразовательную функцию пе­чени в связи с ее участием в процессах детоксикации организма и выведения токсических агентов из организма.

Достоверное увеличение β+γ глобулинов не исключает возможного активизирующего воздействия эмульсий циодрина и неоцидола на ретикулолимфоплазмоцитарную систему организма, ответственную за синтез этой фракции белка.

Следует понимать, что степень токсического воздействия пестицидов на орга­низм овец менее выражена у тех животных, которые были обработаны методом малообъемного опрыскивания.

На примере использования 0,3%-ной эмульсии циодрина подсчитали, что при обработке овец мето­дом купания в проходной ванне на одно животное наносится действу­ющего вещества (д.в.):

х= А+Б/ 50 = 0,3х1750 г/ 50 = 10,5

где: А - концентрация рабочего раствора;

Б - количество раствора, необходимое для обработки одного

животного;

50 - действующеге вещество препарата;

х - необходимое количество действующего вещества.

При использовании 2%-ной эмульсии циодрина на обработку од­ного животного методом малообъемного опрыскивания требуется д.в.:

х = 2х140/50 = 5,6 г

Следовательно, при проведении лечебно-профилактических обра­боток овец методом малообъемного опрыскивания действующего вещест­ва расходуется на 46,7% меньше, чем при купании животных в про­ходной ванне, что и обусловливает менее значительные изменения морфологического состава и биохимических показателей крови у овец, обработанных этим методом.

В последние годы все большее внимание уделяется вопросу оп­ределения остатков пестицидов в продуктах питания животного про­исхождения.

1   2   3   4   5   6   7   8   9   ...   14

Ваша оценка этого документа будет первой.
Ваша оценка:

Похожие:

Миазы овец icon Дифференциальная патоморфологическая диагностика и клинико-эпизоотологические особенности медленных

Миазы овец icon Полиморфизм фрагментов днк, фланкированных инвертированными повторами микросателлитов, в исследованиях

Миазы овец icon Отгадайте загадку: "Полон хлевец белых овец" (зубы)
К 6-7 годам их становится 20. Некоторые из них уже выпали, на их месте прорезались новые, постоянные....
Разместите кнопку на своём сайте:
Медицина


База данных защищена авторским правом ©MedZnate 2000-2016
allo, dekanat, ansya, kenam
обратиться к администрации | правообладателям | пользователям
Медицина