Алтайский центр по профилактике и борьбе со спидом;ф.«4 – Life Research L. C.», Сша icon

Алтайский центр по профилактике и борьбе со спидом;ф.«4 – Life Research L. C.», Сша





Скачать 134.92 Kb.
НазваниеАлтайский центр по профилактике и борьбе со спидом;ф.«4 – Life Research L. C.», Сша
Дата22.03.2013
Размер134.92 Kb.
ТипДокументы
УДК 616.995.122:616-07

Ключевые слова: описторхоз, иммунный ответ, лечение

Статья.Россия, 13 мая 02 г.

Н.В.Карбышева, Л.В. Султанов, С.И Белых, К. Мак Косланд, Э. Оганова

Алтайский центр по профилактике и борьбе со СПИДом;ф.«4 – Life Research L.C.», США.


Литературные данные, освещающие состояние гуморального и клеточного звеньев иммунной системы при описторхозной инвазии, чрезвычайно противоречивы (1, 3, 5, 12). Размах колебаний значений иммунологических  показателей - от достоверно значимых превышений нормативных уровней до достоверного их снижения при идентичных проявлениях процесса или проводимого лечения (10, 11). Наиболее согласуются данные о значительной уязвимости при описторхозе Т-системы лимфоцитов, что проявляется изменением количественных характеристик этой популяции и её субпопуляций (5, 12). Этот процесс трактуется с позиции Т- супрессии, подавления ответа Т – лимфоцитов на специфические антигены, обусловленной, по мнению авторов (5, 10), воздействием «фактора» гельминта, что не объясняет всех особенностей формирования иммунного ответа при описторхозе. В последние годы стали появляться работы, поднимающие вопросы патогенеза данной инвазии с позиции генетической толерантности к антигенам описторхисов (7) и феномена персистенции «функциональных» антигенов паразитов (4). Проведенные нами ранее исследования по изучению гуморального звена иммунной системы у больных описторхозом (2) позволили рассматривать выявленную активацию иммунного ответа при хроническом описторхозе как отражение взаимодействия с антигеном, характеризующимся слабовыраженной иммуногенностью. Гуморальные компоненты при данной инвазии являются скорее её специфическими маркерами, но не обладают защитными свойствами, что приводит к персистенции описторхиев и взаимной адаптации паразита и хозяина на длительный срок. Установлено, что развитие специфического защитного иммунного ответа, даже при длительной персистенции этиологического фактора, можно обеспечить путем активации первой стадии иммунного ответа с максимальной индукцией цитокинов первой фазы (8, 13). Подтверждение гипотезы об Op.felineus как  слабоиммуногенном антигене может быть получено при использовании иммуномодуляторов (9, 14), стимулирующий эффект которых выражается в активации моноцитарно-макрофагального звена иммунной системы (индуцибильная фаза иммунного ответа). В этом отношении интерес  представил  препарат Transfer Factor Plus производства фирмы «4 – Life Research L.C.», США, в своей основе представляющий сигнальные молекулы, которые «обучают» и «тренируют» незрелые иммунные клетки для полноценного распознавания многих микроорганизмов (15).

Целью исследования явилась сравнительная оценка динамики показателей иммунной системы у больных хроническим описторхозом при лечении бильтрицидом и с использованием Transfer Factor Plus.

^ Материалы и методы.

Обследовано 94 пациента в возрасте от 20 до 60 лет. У 24 (25,5%) больных инвазия протекала латентно, у 70 (74,5%) – клинически выражено. Преобладали гепатохолангитический (40,9%), астеновегетативный (33,3%) варианты течения хронической фазы описторхоза. У 30% больных на коже периодически появлялись высыпания, у 12% возникали приступы удушья по типу бронхиальной астмы, артралгический синдром развился у 25(27%) больных, явления васкулита - у 17 (18%). В 95% случаев описторхоз был выявлен впервые, у остальных пациентов в анамнезе курс дегельминтизации бильтрицидом, без эффекта. Диагноз хронического описторхоза верифицировали данными микроскопии желчи (дуоденальное зондирование) или содержимого кишечника (наличие яиц Op.felineus или взрослых паразитов).

У всех наблюдаемых больных изучено состояние гуморального звена иммунной системы – в сыворотке крови проведено определение уровня иммуноглобулинов трех основных классов M, G, A, содержания циркулирующих иммунных комплексов (ЦИК). У 45 больных хроническим описторхозом определена концентрация провоспалительных цитокинов (IL-1β, TNF-α, IFN-γ).

Всем больным проведена антигельминтная терапия бильтрицидом (фирма «Байер») по рекомендуемой схеме: 75 мг на кг/массы в три приема, перорально, курс лечения – 1 день. 50 больным этой группы (1-я группа, опыт) после приема антигельминтика проведен 7-ми дневный курс лечения Transfer Factor Plus. Препарат назначался по 2 капсулы 3 раза в сутки. Остальные 44 пациента, получавшие только бильтрицид, составили контрольную группу (2-я группа), сопоставимую по полу, возрасту, клиническим проявлениям обследуемых больных.

Все исследуемые показатели в 2 – х группах больных определяли до начала терапии и через 2 недели, 3 месяца после ее проведения. Диспансерное наблюдение осуществлялось на протяжении полугода.

^ Для оценки полученных данных обследовано 75 доноров в возрасте от 18 до 50 лет. 

Определение ЦИК проведено методом преципитации 4% ПЭГ-6000. Величину оптической плотности определяли против контроля при длине волны 450 нм на вертикальном спектрофотометре Multiskan МСС/340. Количество ЦИК выражали в условных единицах (у.е.).

Опредение концентрации цитокинов в сыворотке крови выполнено на тест-системах ProCon IL-1β, ProCon TNF-α, ProCon IFN-γ производства ООО "Протеиновый контур" г.С.-Петербург по инструкции производителя. Результаты иммуноферментного анализа регистрировали на вертикальном фотометре Multiskan MСС 340 в при длине волны 492 нм. Для определения концентрации интерлейкинов в анализируемых образцах строился калибровочный график по средней оптической плотности каждого стандартного раствора.

Содержание иммуноглобулинов определялось прямым сандвич вариантом иммуно-ферментного анализа. В работе применяли коммерческий коньюгат пероксидазы с антителами к иммуноглобулинам человека (Московский НИИЭМ им. Н.Ф. Гамалеи), моноспецифические антисыворотки к иммуноглобулинам человека А, М, G, стандартную сыворотку крови человека производства этого же института или Горьковского НИИЭМ. В качестве твердой фазы использовали 96-луночные планшеты для иммунологических реакций. Детекцию проводили на вертикальном фотометре Multiskan MСС 340 в двух волновом режиме 492/600 нм.. Вычисления проводили с помощью персонального компъютера и прикладной программы, разработанной на базе SK4 для сандвич-варианта ИФА.Так же исследования выполнялись на тест-системах IgM, IgA, IgG-стрип производства ЗАО "Вектор-БЕСТ" по инструкции производителя. Результаты иммуноферментного анализа регистрировали на вертикальном фотометре Multiskan MСС 340 в при длине волны 492 нм.

Статистическая обработка вариационных рядов включала подсчет средних арифметических величин (X) и стандартных ошибок средних арифметических (m), стандартного отклонения. В работе использовались методы непараметрической статистики. Значимость различий вариационных рядов в связанных попарно выборках оценивалась с помощью U - критерия Вилконсона - Манна - Уитни, критерия 2, корре-ляция показателей вычислялась по методу Спирмена. Анализ данных проводился с помощью пакета прикладных программ Statgraf.

Результаты и их обсуждение.

У пациентов 1-ой группы в процессе клинических  наблюдений после назначения антигельминтика и приема Transfer Factor Plus при сравнении с контрольной группой не зарегистрировано развития астеновегетативного синдрома, появления и/или усиления болей в правом подреберье, часто возникающих после приема бильтрицида (у  73% и 52% больных 2-ой группы соответсвенно). В 1-ой группе обследуемых через 4 месяца после лечения у всех больных с артралгическим синдромом (12 человек) и у 7 из 9 больных с васкулитами наступило полное выздоровление. Во 2-ой группе, получавших только бильтрицид, остаточные явления в виде артралгий, васкулитов продолжали беспокоить соответсвенно в 95% и 100% случаев (по2 р < 0,001)  весь регламентируемый при описторхозе период диспансерного наблюдения (в течение полугода).

Результаты исследования состояния гуморального звена иммунной системы у пациентов с хронической фазой описторхоза до лечения показали, что практически в 100% случаев у обследованных больных обнаруживаются те или иные изменения.

В сыворотке крови было увеличено содержание всех трех классов иммуноглобулинов (табл.1). Более чем в 2 раза при оценке «средних» значений уровень иммуноглобулина класса М превышал показатели «средней» контрольной группы            (р < 0,001). Установлено достоверное повышение уровня IgG. Наибольшей выраженности у наблюдаемых больных достигала продукция IgА (р < 0,001).

Хроническая фаза описторхоза характеризовалась и достоверно повышенным образованием ЦИК. При проведении корреляционного анализа была установлена обратная взаимосвязь между уровнем ЦИК и концентрацией IgA (-0,64, p<0,001) при меньшей зависимости образования ЦИК от содержания IgM (-0,26) и IgG (-0,32).

^ Превышение границы значений контрольной группы отмечено как у больных с манифестным течением описторхоза, так и у 60 % больных с латентным течением инвазии.

У 45 больных хроническим описторхозом до проведения антигельминтной терапии определяли уровни концентраций IL-1β, TNF-α, IFN-γ (табл. 2).       

Результаты исследования содержания основного провоспалительного интерлейкина IL-1β показали достоверное увеличение ее уровня, более чем в пять раз превышающее значения  «средней» группы доноров (р < 0,001). Анализ индивидуальных значений полученных данных показал  увеличение концентрации IL-1β у всех обследуемых.

^ Концентрация TNF-α была также повышена, но достоверных различий при сравнении со «средней» в группе доноров установить не удалось.

В то же время  исследование уровня концентрации IFN-γ у больных хроническим описторхозом не выявило достоверных различий с показателями в группе доноров           (p > 0,05).

Использование традиционной только антигельминтной терапии бильтрицидом не сопровождалось существенными изменениями изучаемых показателей состояния гуморального звена иммунной системы, отражая определенную монотонность процесса.

^ На протяжении всего периода наблюдений практически без изменений при сопоставлении с показателями до лечения оставались уровни IgG и ЦИК.

Через 2 недели после лечения бильтрицидом несколько выше стал уровень IgM, что можно рассматривать как результат дейстивия антигельминтика, «обнажающего» высокоиммунногенные структуры паразита (3, 6, 8). Отмечено некоторое повышение уровня IgA.

^ В группе больных, получавших наряду с антигельминтиком Transfer Factor Plus, выявлена иная динамика изучаемых показателей.

Уже через  2 недели после лечения отмечено нарастание уровня IgG и более активное образование ЦИК. Максимальных значений уровень ЦИК в этой группе достигал через 3 месяца после лечения, в 2,5 раза превышая показатели во 2 группе.

Концентрации провоспалительных IL-1β и TNF-α существенно не изменились (табл. 2), оставаясь повышенными при сравнении с донорами (p < 0,05), достоверно не отличаясь от значений контрольной группы. Значительно возросло при применении Transfer Factor Plus содержание IFN-γ, более чем в 2 раза с показателями до лечения и в контрольной группе.

Таким образом, выявленная в целом активация гуморального звена иммунной системы при хронической фазе описторхоза до лечения отражает особенности ответа при взаимодействии с антигеном, характеризующимся слабовыраженной иммуногенностью. Гуморальные компоненты иммунного ответа при описторхозной инвазии являются лишь её специфическими маркерами, но не обладают защитными свойствами, что и обеспечивает длительное выживание Op.felineus в организме хозяина.

Существующий дисбаланс содержания исследованных цитокинов можно рассматривать как еще одно свидетельство неполноценности иммунного ответа при хронической фазе описторхоза с отсутствием главной компоненты - защитного эффекта. Мы видим повышение концентрации IL-1β, способного индуцировать большую часть местных и общих проявлений воспалительной реакции, запускающего начальные события иммунного ответа, в частности к  вовлечению в него Т-хелперов (9). Способность Op.felineus к “экранированию” как поверхностных структур паразита, так и высокоиммуногенных антигенов (3), по-видимому, объясняет тот факт, что лишь у небольшой части обследованных повышен уровень TNF-α, продукция которого включается в том числе и при условии распознавания липопротеидов экзогенов. Как отражение индукции слабо специфического иммунного ответа и отсутствие сдвигов уровня IFN-γ, роль которого в активации антигенпредставляющих клеток – макрофагов и последующей стимуляции экспрессии молекул АГ ГКГ 2 класса, необходимых для развития специфического иммунного ответа чрезвычайно важна (16, 17). Положительная динамика иммунного ответа была получена  при использовании  в терапии больных хроническим описторхозом Transfer Factor Plus. Результаты проведенного исследования свидетельствуют о несомненной клинико-иммунологической эффективности данного продукта.

Применение Transfer Factor Plus способствует активации моноцитарно-макрофагального звена, что определяется увеличением концентрации IL-1β и TNF-α и особенно IFN-γ, приводящей к индукции второй фазы иммунного ответа, с последующим формированием специфического защитного иммунитета.

Назначение Transfer Factor Plus считаем целесообразным в комплексном лечении  больных данной инвазией. Иммунореабилитация с использованием Transfer Factor Plus, проводимая вслед за дегельминтизацией бильтрицидом способствует скорейшей элиминации антигенов описторхиев (динамичное образование ЦИК), предупреждая тем самым развитие иммунопатологических процессов и обеспечивает более полное и раннее выздоровление.

ЛИТЕРАТУРА

1.                  Белозеров Е.С. Описторхоз / Шувалова Е.П. – Л.: Медицина, 1981. – 128 с.

2.                  Карбышева Н.В. Иммунный ответ у больных хроническим описторхозом /Трунов А.Н., Киушкина И.Н., Обухова О.О./ Консилиум. -2001. -№ 6. С. 15-18.

3.                  Котелкин А.Т. Поиски изучения иммунологических маркеров Opisthorchis felineus и исследование возможности их использования для иммунодиагностики описторхоза: Автореф. дис. ... канд. биологических наук. -–Кольцово, 2000. – 20 с.

4.                  Кузнецова В.Г. О патогенезе хронических и резидуальных форм описторхоза // Мед. паразитология и паразитарные болезни. – 2001 -№ 2. – С. 21-23.

5.                  Лепехин А.В. Эпидемиология, клиника и профилактика описторхоза  / Мефодьев В.В., Филатов В.Г., Бужак Н.С. – Томск, 1992. – 230 с.

6.                  Налобин В.А. Закономерности восстановительного процесса после химиотерапии описторхоза // Описторхоз. Современное состояние проблемы, перспективы развития: Сб. тез. Юбилейной конф. – Тюмень, 1991. – С. 163-165.

7.                  Озерецковская Н.Н. Толерантность к антигенам описторхисов: иммунитет или генетика ? /Шуйкина Э.Е., Парфенов С.Б. // Описторхоз. Современное состояние проблемы, перспективы развития: Сб. тез. Юбилейной конф. – Тюмень, 1991. – С. 171 – 174.

8.                   Петров Р.В., Хаитов Р.М., Пинегин Б.В. Оценка иммунного статуса человека в норме и при патологии // Иммунология.- 1994.- N6.- C.6-9.

9.                  Пинегин Б.В., Андронова Т.М., Юдина Т.И. Иммунодиагностика и иммунотерапия хирургических инфекций // International J. on Immunorehabilitation. - 1998. - N10. - P.86-100.

10.              Савин В.А. Сравнительный анализ влияния бильтрицида и хлоксила на иммунный статус больных описторхозом /Моисеенко А.В., Далматов Д.М., Черемных Л.Г. // Описторхоз. Современное состояние проблемы, перспективы развития: Сб. тез. Юбилейной конф. – Тюмень, 1991. – С. 222 – 224.

11.              Сергиев В.П. Паразитарные болезни человека, их профилактика и лечение / Лебедева М.Н., Фролова А.А., Романенко Н.А.// Эпидемиология и инф.  болезни. –1997. - № 2. – С. 8 - 10.

12.              Степанова Т.Ф. Клиническая реабилитация в комплексе мер борьбы с описторхозом / Скареднов Н.И. // Описторхоз. Современное состояние проблемы, перспективы развития: Сб. тез. Юбилейной конф. – Тюмень, 1991. – С. 232 – 234

^ 13.               Хаитов Р.М., Пинегин Б.В. Современные представления о защи­те организма от инфекций // Иммунология. - 2000. - N1. - C.61-64.

14.               Хаитов Р.М., Пинегин Б.В. Основные принципы иммуномодулиру­ющей терапии // Аллергия, астма и клиническая иммунология. - 2000. - N1. - C.9-16.

^ 15.               Хэннен Д. Трансфер Фактор – Плюс /Под ред. Ю.П.Гичева и Э.Огановой. – Новосибирск, 2001. – 73 с.

16.               Paul W.E., Seder R.A. Lymphocyte responses and cytokines // Cell. - 1998. - V.76. - P.241.

^ 17.               Roirr I., Brostoff J., Male D. Immunology. - Fourth Editi­on. - 1998. - 281 p.

Таблица 1

Динамика иммунных показателей  у больных хроническим описторхозом в зависимости от вида лечения (X  m)

Показатель


Доноры

(n = 75)

Больные описторхозом

 

1-я группа (n =50)

2 –я группа (n = 44)
^

До лечения


После лечения

До

 лечения

После лечения

 

После лечения

ч/з 2 недели

ч/з 3 месяца

ч/з 2 недели

ч/з 3 месяца

ч/з 2 недели

ч/з 3 месяца

Ig M, г/л

1,04 ± 0,02

1,78 ± 0,09

p < 0,001

2,09±0,11

p < 0,001

p¹ > 0,05

1,3±0,14

p < 0,05

p¹< 0,001

1,80±0,08

p < 0,001

2,01±0,11

p < 0,001

p¹ > 0,05

p² > 0,05

2,01±0,24

p < 0,001

p¹ > 0,05

р²< 0,001

2,01±0,11 p < 0,001 p¹ > 0,05 p² > 0,05

2,01±0,24 p < 0,001 p¹ > 0,05 p²< 0,001

Ig A, г/л

1,08±0,02

2,60 ± 0,20

p < 0,001

2,60±0,30

p < 0,001

p¹ > 0,05

1,08±0,09

p > 0,05

p¹< 0,001

2,90±0,20

p < 0,001

3,10±0,31

p < 0,001

p¹ > 0,05

p² > 0,05

2,60±0,40

p < 0,001

p¹ > 0,05

p²< 0,001

3,10±0,31

p < 0,001 p¹ > 0,05 p² > 0,05

2,60±0,40

p < 0,001 p¹ > 0,05 p²< 0,001

Ig G, г/л

10,00±0,27

12,90±0,50

p < 0,001

13,90±0,60

p < 0,001

p¹ > 0,05

14,40±0,90

p < 0,001

p¹ > 0,05

12,60±0,30

p < 0,001

12,80±0,80

p < 0,001

p¹ > 0,05

p² > 0,05

9,80±0,60

p < 0,001

p¹< 0,001

p²< 0,001

12,80±0,80

p < 0,001 p¹ > 0,05 p² > 0,05

9,80±0,60

p < 0,001 p¹< 0,001 p²< 0,001

ЦИК (у.е.оп.)

61,0 ± 2,6

106,1±5,9

p <0,05

138,7±8,8

p <0,001

p¹< 0,001

250,3±9,1

p < 0,001

p¹< 0,001

105,7±6,1 p <0,05

104,5±6,3

p <0,05 p¹>0,05

p²< 0,001

105,6±8,6

р <0,05 p¹>0,05

p²< 0,001

104,5±6,3 p <0,05 p¹>0,05 p²< 0,001

105,6±8,6 p <0,05 p¹>0,05 p²< 0,001

  ^ Примечание: 1-я группа, лечение с применением Transfer Factor Plus; 2 –я группа, лечение бильтрицидом;                       

  p  – достоверные различия с донорами; р¹ - достоверные различия до и после лечения;

  р² -  достоверные различия после лечения между группами.

^ Таблица 2


Изменение концентрации цитокинов у больных хроническим описторхозом в зависимости от вида лечения (X  m)

Показатель (пкг/мл)

Доноры

(n = 15)

Больные описторхозом

1-я группа (n = 25)

2 –я группа (n = 20)

До лечения

ч/з 2 недели после лечения

До лечения

ч/з 2 недели после лечения

IL-1

39,4 ± 4,9

212,3 ± 9,8

p < 0,001

231,3 ± 11,8 p < 0,001

p¹ > 0,05

213,8 ±12,8 p < 0,001

220,6 ± 13,0

p < 0,001

 p¹ > 0,05

 p² > 0,05

TNF-

19,6 ± 2,4

68,2 ±4,1

p < 0,001

74,2 ±3,1

p < 0,001

 p¹ > 0,05

68,2 ±6,6

 p < 0,001

72,3 ±3,6

p < 0,001

 p¹ > 0,05

 p² > 0,05

IFN-

46,2 ± 6,2

43,4 ±3,1

 p > 0,05

106,4 ±6,1

 p < 0,05

 p¹ < 0,05

42,9 ±6,6

p > 0,05

51,4 ±6,3

 p > 0,05

 p¹ > 0,05

 p² < 0,05

Примечание: 1-я группа, лечение с применением Transfer Factor Plus;

                        2 –я группа, лечение без применения Transfer Factor Plus;

p  – достоверные различия с донорами;

р¹ - достоверные различия до и после лечения;

р² -  достоверные различия после лечения между группами

Ваша оценка этого документа будет первой.
Ваша оценка:

Похожие:

Алтайский центр по профилактике и борьбе со спидом;ф.«4 – Life Research L. C.», Сша iconЗаседания краевой межведомствснной комиссии по профилактике и борьбе со спидом

Алтайский центр по профилактике и борьбе со спидом;ф.«4 – Life Research L. C.», Сша iconЦентрально-азиатская программа по борьбе со спидом среди уязвимых групп населения Национальное лидерство
Данный документ разработан при поддержке Агентства США по международному развитию в рамках Договора...
Алтайский центр по профилактике и борьбе со спидом;ф.«4 – Life Research L. C.», Сша iconМетодические рекомендации по профилактике вич/спид (для медицинских работников лпу)
Государственное учреждение здравоохранения Областной Центр по профилактике и борьбе со спид и инфекционными...
Алтайский центр по профилактике и борьбе со спидом;ф.«4 – Life Research L. C.», Сша iconКомпания 4Life Research, lc.(Сша) предлагает новое революционное решение в области иммунологии

Алтайский центр по профилактике и борьбе со спидом;ф.«4 – Life Research L. C.», Сша iconМетодические рекомендации разработаны специалистами гбуз со “Свердловский областной центр по профилактике

Алтайский центр по профилактике и борьбе со спидом;ф.«4 – Life Research L. C.», Сша iconПрофилактика вич инфекции
Чтобы привлечь внимание к этой проблеме людей всего мира, резолюцией ООН официально объявлен 1 декабря...
Алтайский центр по профилактике и борьбе со спидом;ф.«4 – Life Research L. C.», Сша iconПервые случаи "таинственного" заболевания появились в сша, Швеции, Танзании, Гаити ещё в конце 70-х
Главную страницу эпилога в драматической истории спида открыли в 1981 г. Центры по контролю заболеваний...
Алтайский центр по профилактике и борьбе со спидом;ф.«4 – Life Research L. C.», Сша iconГлавному врачу «Тверского областного Центра по профилактике и борьбе со спид и инфекционными заболеваниями»

Алтайский центр по профилактике и борьбе со спидом;ф.«4 – Life Research L. C.», Сша iconАсептика это комплекс мероприятий а по борьбе с инфекцией в ране б по профилактике попадания инфекции

Алтайский центр по профилактике и борьбе со спидом;ф.«4 – Life Research L. C.», Сша iconЦентрально-азиатская программа по борьбе со спидом среди уязвимого населения Заключительный отчёт
Функциональный анализ существующей институциональной структуры, ролей и взаимодействий служб и организаций,...
Разместите кнопку на своём сайте:
Медицина


База данных защищена авторским правом ©MedZnate 2000-2019
обратиться к администрации | правообладателям | пользователям
Документы