Алгоритмы оценки гепато- и нефропатологии при бабезиозе собак 06. 02. 01 диагностика болезней и терапия животных, патология, онкология и морфология животных
|
|
Скачать 370.85 Kb.
|
|
На правах рукописи Самойлова Евгения Сергеевна АЛГОРИТМЫ ОЦЕНКИ ГЕПАТО- И НЕФРОПАТОЛОГИИ ПРИ БАБЕЗИОЗЕ СОБАК 06.02.01 - диагностика болезней и терапия животных, патология, онкология и морфология животных АВТОРЕФЕРАТдиссертации на соискание ученой степеникандидата ветеринарных наук Троицк – 2012 Работа выполнена в ФГБОУ ВПО «Уральская государственная академия ветеринарной медицины» Научный руководитель: Дерхо Марина Аркадьевна доктор биологи- ческих наук, профессор ^ Гизатуллина Фирдаус Габдрахмановна, док- тор биологических наук, доцент, ФГБОУ ВПО «Уральская государственная академия ветеринарной медицины», кафедра терапии и диагностики животных, профессор Дроздова Людмила Ивановна, доктор ветеринарных наук, профессор, ФГБОУ ВПО «Уральская государственная сельскохозяйственная академия», кафедра анатомии и гистологии, заведующая Ведущая организация: ФГБОУ ВПО «Институт ветеринарной медицины Омского государственного аграрного университета» Защита состоится «_____» __________2012 г. в ______часов на заседании диссертационного совета Д 220.066.01 при ФГБОУ ВПО «Уральская государственная академия ветеринарной медицины» по адресу: 457100, Челябинская область, г. Троицк, ул. Гагарина, 13, тел. 8 (35163) 2-48-88; факс 8(35163)2-04-72; E-mail: tvi_t@mail. ru, официальный сайт: www. usavm.ac.ru С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ФГБОУ ВПО «Уральская государственная академия ветеринарной медицины». Автореферат разослан «____» ________________2012 г. ^ Актуальность темы. Бабезиоз - одно из самых распространенных инвазионных заболеваний собак, которое до сих пор наносит значительный экономический ущерб служебному собаководству и частным владельцам, так как оканчивается, как правило, при несвоевременном лечении, гибелью животных (Г.А. Саипов, О.Л. Куликова, Л.С. Мясникова, 2005; В.А. Сидоркин, 2006). В последние десятилетия на фоне влияния различных факторов в эпизоотической обстановке Челябинской области произошли значительные изменения, что характеризовалось созданием благоприятных условий и расширением границ ареала для обитания переносчиков; росту численности собак, их плотности в городах и населенных пунктах региона; формированием на территориях крупных городов синантропных очагов. В совокупности данные причины привели к росту заболеваемости животных. В настоящее время общепризнанно, что при всех кровепаразитарных болезнях, включая и бабезиоз собак, существуют особенности патогенеза, свойственные определённому заболеванию и виду животных, что исключает единый унифицированный подход к изучению этих вопросов, а тем более приравнивание данных, полученных при бабезиозе крупного рогатого скота, например, к бабезиозу собак. Проблема борьбы с инвазией ещё далека от разрешения, что объясняется, главным образом, недостаточностью знаний сущности патологии, возникающей в ответ на взаимоотношение паразита и хозяина. Кроме этого, мало изучены закономерности развития метаболических сдвигов в организме животных на фоне паразитирования бабезий, хотя совершенно ясно, что именно здесь лежит ключ к пониманию механизма развития патологии. В связи с этим анализ сдвигов в обменных процессах организма собак при острой форме спонтанного бабезиоза на клеточном, органном и организменном уровнях имеет теоретическую и практическую значимость. Вместе с тем, исследования, направленные на выявление патологии отдельных органов пораженного организма, возникающие в ответ на развитие в нём паразитов, дают возможность изучить патогенез заболевания и разработать научно-обоснованные методы оценки состояния здоровья животных, лечения и профилактики. ^ Проведенные ранее исследования были посвящены: изучению морфобиологических особенностей Babesia canis, клинических признаков и течения болезни, некоторых аспектов эпизоотологии бабезиоза собак; предложен ряд химиотерапевтических препаратов для лечения и профилактики (Х. Георгиу; А.Н. Пономаренко, 1998; А.В. Будовской, 2002; А. Пригодин, 2002; М.П. Прус, 2006; Х. Георгиу, В.В. Белименко, П.И. Христиановский, 2008; В.В. Анников, Л.В. Анникова, М.Е. Попова, 2009 и др.). Однако большинство аспектов патогенеза бабезиоза собак до сих пор остаются мало изученными и требуют дальнейшего исследования. ^ Цель нашей работы - установить особенности гепато- и нефропатологии при бабезиозе собак с помощью клинико-гематологических, биохимических и ультразвуковых методов исследования и на их основе разработать алгоритм оценки метаболического состояния организма собак при инвазии. Для реализации данной цели были поставлены следующие задачи: 1. Изучить эпизоотологические особенности и клинические признаки острой формы спонтанного бабезиоза собак в г. Магнитогорске. 2. Оптимизировать тест-системы лабораторных (гематоморфологических, биохимических, ультразвуковых) методов исследования, позволяющих охарактеризовать состояние организма собак при бабезиозе, и оценить их информативность в установлении эндогенной интоксикации и проявлении гепато- и нефропатологии. 3. Создать модель патогенеза острой формы спонтанного бабезиоза собак. 4. Разработать алгоритм оценки метаболического состояния организма собак при бабезиозе на основе оптимизированных тест-систем лабораторных методов исследования. 5. Проверить информативность алгоритма оценки метаболических нарушений в организме собак на примере прогнозирования исхода заболевания и мониторинга лечения. ^ Предметом исследования явилась разработка алгоритма оценки гепато- и нефропатологии при острой форме спонтанного бабезиоза собак. Объект исследования – собаки в возрасте от 1 года до 4-х лет, массой тела 10-15 кг, преимущественно охотничьих пород - спаниели (английский и русский), гончие и лайки, принадлежащие частным владельцам; кровь и моча. ^ Оптимизированы тест-системы лабораторных методов исследований для бабезиоза собак. Создана модель патогенеза острой формы спонтанной паразитемии, согласно которой основной патогенетической причиной развития осложнений при инвазии является гипоксический и гиперметаболический энергодефицит. Разработан алгоритм оценки метаболического состояния организма собак при бабезиозе, включающий определение в крови концентрации общего белка, креатинина, мочевины, активности АлАТ, АсАТ, ГГТ и расчёт коэффициента де Ритиса. При благоприятном исходе в организме собак сохраняется анаболическая направленность обменных процессов, для которых характерно сохранение концентрации общего белка и активности ГГТ в пределах нормы, приоритетное повышение активности АлАТ по сравнению с АсАТ (коэффициент де Ритиса менее 0,7 усл. ед.). Данный алгоритм позволяет охарактеризовать общее состояние животных, степень выраженности гепато- и нефропатологии, вести мониторинг на этапах лечения и прогнозировать исход инвазии. Определена информативность параклинических тестов в оценке уровня эндогенной интоксикации при инвазии и установлено, что для её характеристики можно использовать ЛИИ с поправочными коэффициентами, ИЛСОЭ, ИСНМ, ИСЛМ, величина которых снижается соответственно в 2,3; 3,4-5,0; 2,5 и 1,9-3,3 раза. ^ Доказано, что основной патогенетической причиной развития гепато- и нефропатологии при острой форме спонтанного бабезиоза собак является наличие гипоксического и гиперметаболического энергодефицита в организме животных, что вносит вклад в расширение представлении о патогенезе заболевания; теоретически обоснован алгоритм оценки метаболического состояния организма собак при паразитемии, который позволяет охарактеризовать функции печени и почек, прогнозировать исход заболевания и вести мониторинг лечения; Изучены особенности эпизоотологического процесса при бабезиозе собак в условиях г. Магнитогорска и подтверждены ранее установленные факты о зависимости заболеваемости и смертности животных от сезона года, возраста, пола и породы. ^ Оптимизированные тест-системы внедрены в практику работы ветеринарных клиник г. Магнитогорска и используются для оценки общего состояния собак, функций печени и почек при бабезиозе, подбора комплекса препаратов для симптоматического лечения, мониторинга химиотерапии. Материалы и результаты исследований могут использоваться в учебных целях при изучении ветеринарной паразитологии, патфизиологии, клинической биохимии на факультете ветеринарной медицины. ^ Область диссертационных исследований соответствует формуле специальности 06.02.01 - диагностика болезней и терапия животных, патология, онкология и морфология животных, а именно п. 2 «Вопросы клинической ветеринарии, принципы, методы и технологии обследования, общей, специальной и инструментальной диагностики болезней животных, частная синдроматика (кардио-, нейро-, гепато-, нефропатология, желудочно-кишечные, респираторные, репродуктивные расстройства), п. 5 «Особенности клинических и патоморфологических проявлений, патогенез и семиотика инфекционных и инвазионных болезней животных, их значение для диагностики, дифференциальной диагностики и лечения», п. 9 «Структура и функции клеток, тканей и органов животных, взаимосвязь функциональных, структурных и гистохимических изменений в норме и патологии». ^ Основные положения диссертационной работы доложены и обсуждены на международных научно-практических конференциях: «Здоровье сберегающие технологии АПК РФ» (г. Троицк, 2008); «Вклад молодых ученых в реализацию приоритетного национального проекта «Развитие АПК» (г. Троицк, 2008); «Достижения супрамолекулярной химии и биохимии в ветеринарии и зоотехнии» (г. Москва, 2008); «Инновационные подходы в ветеринарии, биологии и экологии» (г. Троицк, 2009); «Актуальные проблемы биологии и ветеринарной медицины мелких домашних животных» (г. Троицк, 2009); на XVII Московском международном ветеринарном конгрессе, г. Москва, 2009 г. Результаты диссертационной работы внедрены в практику работы ветеринарных клиник г. Магнитогорска: ООО «Ветеринарный центр», «Биовет», «Природа», ОГУ СББЖ №1 г. Магнитогорска. Публикации. По теме диссертации опубликовано 12 научных статей, в том числе три статьи в изданиях, рекомендованных ВАК России. ^ 1. Уровень заболеваемости собак бабезиозом и летальности в г. Магнитогорске определяется сезоном года, возрастом, породой и полом животных. 2. Характеристика информативности оптимизированных тест-систем лабораторных методов исследования при оценке: общего состояния организма животных, уровня эндогенной интоксикации и гепато- и нефропатологии. 3. Модель патогенеза острой формы спонтанного бабезиоза собак. 4. Обоснование алгоритма оценки метаболического состояния организма собак при бабезиозе и результаты его апробации при прогнозировании исхода инвазии и мониторинге лечения. ^ Диссертация изложена на 150 страницах компьютерного текста и состоит из введения, обзора литературы, результатов собственных исследований и их обсуждения, заключения, выводов, практических предложений, библиографического списка использованной литературы. Работа проиллюстрирована 23 таблицей и 5 рисунками. Список литературы включает 250 источников, в том числе 67 зарубежных авторов. ^ 2.1 Материалы и методы исследований Диссертационная работа является самостоятельным разделом научных исследований и выполнена в рамках государственной научной программы «Разработка и внедрение здоровьесберегающих технологий в животноводстве» (№ Гос. регистрации 0120.0801292). Экспериментальная часть работы выполнена на базе ООО «Ветеринарный центр» г. Магнитогорска, лабораторные исследования - в ОГУ Магнитогорской межрайонной ветеринарной лаборатории и в лаборатории городской больницы №3 г. Магнитогорска в 2007-2010 г.г. Объектом исследования служили собаки разных пород, возраста и пола, принадлежащие частным владельцам и спонтанно зараженные Babesia canis. Заболевание протекало в острой форме. Диагноз на бабезиоз ставили на основании эпизоотологических данных, клинических признаков и результатов исследования мазков периферической крови. В ходе работы выполнено 3 серии экспериментов. В первой серии оценили эпизоотологическую ситуацию в г. Магнитогорске по бабезиозу на основании записей в амбулаторных журналах ветеринарных клиник: ООО «Ветеринарный центр», «Биовет», «Природа», ОГУ СББЖ №1 г. Магнитогорска за 2008 - 2010 гг. Во второй серии эксперимента изучали патогенез острой формы спонтанного бабезиоза (рис. 1). С этой целью из собак (в возрасте от 1 года до 4-х лет, преимущественно охотничьих пород), владельцы которых обратились в клинику на 2-3-й день проявления клинических признаков бабезиоза, было сформировано две опытные группы (n=20). Отличительной особенностью животных первой группы было наличие в клинике инвазии гемоглобинурии, а у второй – её отсутствие. Контролем служила группа клинически здоровых собак, подобранная в соответствии с возрастом, породой и полом животных опытных групп. В третьей серии изучали информативность алгоритма оценки метаболического состояния организма собак на примере прогнозирования исхода заболевания и мониторинга лечения. Информативность алгоритма в прогнозировании исхода инвазии устанавливалась путём сравнения первичных биохимических анализов крови собак с летальным (несмотря на проводимое лечение) и благоприятным исходом.                  Рисунок 1 – Схема эксперимента Для оценки алгоритма в ходе лечения животных было сформировано две группы, в которых в качестве антипаразитарного средства использовали беренил в виде 7%-го раствора в дозе 3,5 мг/кг внутримышечно. После его введения капельно вливали раствор Рингера. В качестве симптоматической терапии всем опытным животным назначали преднизолон, сульфокамфокаин, рибоксин, цианкобаламин, фуросемид, папаверин, анальгин, Феррум Лек, Эссенциале Н. Дозы препаратов подбирали для каждого животного индивидуально в зависимости от массы тела, курс составлял 5 дней. Кроме выше указанных препаратов животным первой опытной группы включали в схему лечения гамавит, второй – лигфол в виде внутримышечных инъекций. Материалом исследований служила кровь, сыворотка крови и моча. Клинический анализ крови выполнен на гематологическом анализаторе «Aba-cus Vet»; биохимический – на биохимическом анализаторе «Chiron Diagnostics LTD»; анализ мочи - с помощью диагностических мультитестовых индикаторных полосок; УЗИ - с помощью линейно – конвексного ультразвукового сканера HS -2000 (Honda Electronics, LTD) и датчика частотой 5,0 МГц. Полученные данные статистически обработаны на персональном компьютере в программе «Microsoft Excel – 2003». Оценка достоверности различий между показателями производилась с использованием параметрического критерия t – Стьюдента (Г.Ф. Лакин, 1980). ^ В рамках мониторинга распространения бабезиоза в г. Магнитогорске мы учитывали уровень заболеваемости, летальности, сезонности, зависимость частоты инвазирования от района города, породы, пола и возраста собак. Мы установили, что инвазия достаточно широко и повсеместно распространена в районах г. Магнитогорска. При этом стационарно неблагополучными являются Правобережный и Ленинский районы, в которых уровень заболеваемости за период 2008-2010 г.г. колебалась, соответственно, в пределах 25,8-28,2 и 33,9-36,3%. В Орджоникидзевском и Левобережном районах бабезиоз собак регистрировался на уровне 19,6-24,1 и 12,1-18,8%, соответственно. Оценка сезонной динамики показала, что наивысший уровень заболеваемости собак наблюдается в мае (33,5-40,8%), наименьший - в летние месяцы, особенно в августе. Новый всплеск заболеваемости появляется в сентябре и октябре. В целом сезонная динамика имеет характер двухвершинной кривой с ярко выраженным пиком инвазии в мае и менее резко - в сентябре. Кроме этого, на уровень заболеваемости собак бабезиозом влияет: а) пол животных (самцы инвазируются чаще, чем самки); б) возраст животных (наиболее часто болеют собаки в возрасте от 1 года до 5 лет); в) порода собак (чаще заболевают лайки (26,33-27,95%), русский спаниель (23,17-25,33 %), среднеазиатская овчарка (19,65-20,99%)). Наибольший уровень смертности был характерен для щенков до 1 года, наименьший - от 1 года до 5-ти лет. Таким образом, в г. Магнитогорске имеются клещи-переносчики, зараженные Babesia canis, и восприимчивые животные. Сезон заболевания собак совпадает с периодом активной фазы клещей-переносчиков. Уровень заболеваемости зависит от района города, пола, возраста и породы собак. ^ Для оценки общего состояния животных использовали клинический анализ крови. Мы установили, что у собак I-ой опытной группы содержание гемоглобина (Hb), эритроцитов (RBC) и гематокрита (Ht), по сравнению с контролем, уменьшилось, соответственно, на 38,4; 27,1 и 32,4%, а у II – ой – на 58,4; 35,5 и 54,1% в результате внутрисосудистого гемолиза эритроцитов и появления антиэритроцитарных антител. Среднее содержание гемоглобина в эритроците (МСН) и значение цветного показателя (ЦП) у животных I-ой опытной группы составило 21,2±0,39 Пг и 0,63±0,01 усл. ед., II-ой опытной группы - 21,2±0,39 Пг и 0,49±0,006 усл. ед. соответственно, что на 15,5 и 35,6% меньше, чем в контроле. Средняя концентрация гемоглобина в эритроците (МСНС) у собак I-ой опытной группы была равна 31,56±0,40% (в контроле – 34,64±0,37%), а II-ой опытной группы – 31,2±0,66% (в контроле 34,1±0,40%). Средний объём эритроцита (МСV) у животных I-ой опытной группы был меньше, чем в контроле на 7,3%, а II-ой – на 28,9%. Количество ретикулоцитов и СОЭ в крови больных собак увеличивалось в I-ой и II-ой опытных группах, соответственно, в 4,4; 2,6 и 5,6; 4,1 раза, а тромбоцитов, наоборот, уменьшалось 1,46-1,65 раза по сравнению с контролем. Для инвазии был характерен лейкоцитоз. Количество лейкоцитов в I-ой опытной группе выросло на 31,5%, а во II-ой – на 60,8%. В лейкограмме увеличилось содержание эозинофилов (EOS), палочкоядерных нейтрофилов (ПН) и моноцитов (MONO), соответственно, в 2,76; 1,62 и 1, 65 раза в I-ой опытной группе и в 3,73; 3,67 и 1,88 раза во II-ой. Уровень сегментоядерных нейтрофилов (СН) и лимфоцитов (LYM), наоборот, снизился на 13,6-17,5 и 12,2-29,9%. Таблица 1 – Тест-система клинического и биохимического анализа крови при бабезиозе
Примечание: N – соответствует границам нормы; ↑ - увеличено незначительно; ↑↑ - умеренно увеличено; ↑↑↑ - сильно увеличено; ↓ - уменьшено незначительно; ↓↓ - умеренно снижено; ↓↓↓ - сильно снижено Таким образом, острое течение спонтанного бабезиоза собак сопровождается микроцитарной гипохромной анемией, для которой характерно снижение МСV, МСН, МСНС, тромбоцитов; умеренное увеличение количества ретикулоцитов и резкое - СОЭ. Кровепаразитоз протекает на фоне дефицита иммунного ответа за счёт уменьшения концентрации СН и LYM. При сравнении результатов клинического анализа крови с показателями нормы была получена тест-система, отражающая характер их изменений при бабезиозе (табл. 1). Наибольшие количественные сдвиги отмечены у показателей красной крови, что свидетельствует о нарушении дыхательной функции крови и развитии гипоксии, вероятно, являющейся одной из основных патогенетических причин. Менее значительные сдвиги были специфичны для состава белой крови, но они указывали на наличие в организме больных собак воспалительного процесса на фоне возрастающей антигенной нагрузки и иммунодефицита. ^ Совокупность лабораторных показателей обмена билирубина, сывороточных белков и ферментов позволяет оценить характер дисфункций в печени. Эти критерии не специфичны для бабезиоза, но вместе с тем характеризуют состояние гепатоцитов. Функциональную активность клеток печени оценивали по синдромному принципу (Б.А. Никулин, 2007). «Синдром цитолиза», оцениваемый по активности ферментов АлАТ, АсАТ и их соотношению, характеризовался преимущественным «вымыванием» из гепатоцитов АлАТ, что приводило к снижению значения коэффициента де Ритиса до 0,68 усл. ед. (р<0,001). Бабезиоз собак сопровождался нарушением функции образования и оттока желчи («синдрома холестаза»), о чём свидетельствовало увеличение, по сравнению с контролем, активности ЩФ и ГГТ, концентрации холестерина, общего и прямого билирубина у животных I и II опытных групп в 1,49; 1,89; 1,45; 2,94; 3,45 и 1,91; 2,06; 1,48; 3,55 и 4,17 раза соответственно. При инвазии у собак опытных групп уменьшалась, по сравнению с контролем, концентрация общего белка и альбуминов соответственно, на 23,0-24,8% и 29,1-33,8%. На этом фоне увеличивалась величина белково-осадочной пробы в 5-6 раз и содержание глобулинов, но снижалось значение Alb/Gl - коэффициента до 0,87-0,88 усл. ед.. В совокупности эти данные указывают на развитие в организме собак «мезенхимально-воспалительного синдрома». О наличии «гепатодепрессивного синдрома» свидетельствовало резкое увеличение в крови больных собак уровня мочевины (более чем в 3 раза по сравнению с контролем) и уменьшение концентрации альбуминов, что являлось следствием усиления продукционной азотемии и снижения биосинтетической активности гепатоцитов. Гипопротеинемия и диспротеинемия при бабезиозе являлась результатом напряженного обмена белков в печени, обусловленного взаимодействием мезенхимальной ткани с поступающими в орган с кровотоком антигенами, аллергенами и токсинами («синдром раздражения ретикуло-эндотелия»). Таким образом, печеночный профиль биохимических показателей крови свидетельствовал о том, что при бабезиозе собак развивается гепатопатология по типу острого гепатита. При сравнении величин биохимических показателей крови с границами нормы была получена тест-система, позволяющая оценить степень повреждения печеночных клеток при паразитемии (табл. 1). ^ Для оценки функциональной активности почечного фильтра использовали алгоритм почечного профиля (Б.А. Никулин, 2007). В крови больных собак хотя и снижался уровень общего белка и альбуминов по сравнению с контролем, но не выходил за границы нормы. Однако на этом фоне резко увеличивалась концентрация мочевины и креатинина, превышая контроль более чем в 2,5-3,0 раза. Анализ мочи показал, что она изменяет цвет, прозрачность, относительную плотность, значение рН, содержит избыточные количества белка, билирубина и уробилиногена. Однако в ней отсутствует глюкоза и гемоглобин. В совокупности эти данные свидетельствуют о развитии при бабезиозе почечной недостаточности. Таблица 2 – Тест-система оценки дисфункций почек при бабезиозе
Примечание: N – соответствует границам физиологической нормы; ↑ - увеличено незначительно; ↑↑ - умеренно увеличено; ↑↑↑ - сильно увеличено При сравнении показателей крови и мочи с параметрами нормы была получена тест-система, позволяющая оценить работу почечного фильтра и указывающая на то, что поражение выделительной системы в организме собак при бабезиозе протекает по типу острой почечной недостаточности (табл. 2). ^ Для подтверждения результатов лабораторных анализов у собак опытных групп было выполнено ультразвуковое исследование, при котором: а) у печени определяли форму органа, положение, размер, четкость и ровность границ, состояние капсулы, эхогенность и однородность структуры, состояние сосудистого рисунка, а также исследовали состояние желчного пузыря и желчного протока; б) у почек - расположение органа, размер, контуры, эхогенность и однородность паренхимы, четкость дифференциации коркового и медуллярного слоев. Мы установили, что печень у больных собак имела в пределах нормы форму, контуры, визуализацию, но границы органа были сглажены, а задняя и нижняя выходили за последнее ребро и реберную дугу; капсула хорошо дифференцировалась; эхогенность паренхимы снижена, а эхоструктура неоднородна и крупнозерниста; сосудистый рисунок представлял собой вид «звездного неба», желчные протоки расширены. Желчный пузырь имел нормальную визуализацию, слоистую структуру, округлую или овальную форму, стенка утолщена и гиперэхогенна, а его содержимое анэхогенно. При УЗИ почек было выявлено, что органы имели в пределах нормы форму, контуры и визуализацию, но нечеткие границы и корково-мозговую дифференциацию; размер почек был увеличен, лоханка расширена, паренхима утолщена, а эхогенность кортекса и мозгового слоя снижена. Результаты УЗИ подтверждали наличие в печени патологии по типу острого гепатита, а в почках – острой почечной недостаточности. ^ Эндогенная интоксикация — это процесс, обусловленный накоплением в кровяном русле токсических веществ в концентрациях, превышающих функциональные возможности естественных систем обезвреживания с последующим повреждением других органов и систем организма. Для её оценки при бабезиозе мы рассчитали индексы, используя показатели клинического анализа крови (табл. 3). Мы установили, что при бабезиозе информативную значимость имели лейкоцитарный индекс интоксикации с поправочными коэффициентами (ЛИИ) (В.К. Островский, 2006); индекс соотношения лейкоцитов и СОЭ (ИЛСОЭ); индекс соотношения нейтрофилов и моноцитов (ИСНМ); индекс соотношения лимфоцитов и моноцитов (ИСЛМ), величины которых более чем в 2 раза отклонялись от значений контроля. Таблица 3 – Интегральные индексы крови собак, (Х±sx)
Примечание: * - р<0,05-0,001 по отношению к показателям в контрольной группе В то же время лейкоцитарный индекс (ЛИ); лимфоцитарно - гранулоцитарный индекс (ИЛГ); индекс сдвига лейкоцитов крови (ИСЛК); индекс Кребса (ИК) и ядерный индекс Г.Д. Даштаянца (ЯИ) незначительно снижались при инвазии и в силу этого не имели информативной значимости. Таким образом, патогенез бабезиоза собак сопровождается эндогенной интоксикацией, степень выраженности которой можно оценить с помощью морфогематологических индексов: ЛИИ, ИЛСОЭ, ИСНМ и ИСЛМ. ^ В основе патогенеза острой формы спонтанного бабезиоза собак лежит развитие гемолитической анемии в результате гемолиза эритроцитов за счёт паразитирования бабезий и действия антиэритроцитарных IgG-антител (Л.Ю. Карпенко, 1998; В.В. Долгов, С.А Луговская., В.Т. Морозова, 2001), что ведёт к гипоксии (рис. 2), характеризующейся количественным и качественным дефицитом гемоглобина, регистрируемым по снижению величин МСН, МСНС, МСV и ЦП, активацией эритропоэза, устанавливаемой по увеличению количества ретикулоцитов в периферической крови. В организме собак в условиях гипоксии возрастает активность митохондрий (регистрируется по повышению концентрации АсАТ). Однако обменные процессы протекают преимущественно в анаэробных условиях (увеличение ЩФ и креатинина), что в первую очередь сказывается на количестве образующейся энергии и клетки начинают испытывать энергетический «голод». Для покрытия энергозатрат активируется глюконеогенез, снижается биосинтетическая активность клеток печени, почек и всего организма в целом.                              Рисунок 2 – Модель патогенеза острой формы спонтанного бабезиоза собак Об этом свидетельствует снижение концентрации общего белка и альбуминов; повышение скорости метаболизма аминокислот, регистрируемое по активности АлАТ, ГГТ, АсАТ и количеству мочевины. В совокупности данные причины способствуют накоплению в клетках организма кислых продуктов (ацидоз). Гипоксия инициирует расширение капилляров с замедлением местного кровотока, что обеспечивается снижением тромбоцитов; нарушаются сократительная, секреторная функции клеток на фоне повышения их проницаемость («синдром цитолиза»). Белки крови выходят в межклеточную жидкость, дополнительно влияя на уровень гипопротеинемии и гипоальбунемии. Таким образом, развитие гепато- (по типу гепатита) и нефропатологии (по типу острой почечной недостаточности) является результатом декомпенсации гипоксии, что проявляется в виде дистрофических и даже некробиотических изменений клеток в условиях ацидоза. Именно дефицит кислорода обуславливает развитие патологических изменений в почках и печени, так как ткани данных органов мало устойчивы к кислородному голоданию. ^ На следующем этапе нашей работы мы попытались проверить оптимальность набора параметров в полученных нами тест-системах. При этом мы исходили из того, что в основе развития любой патологии лежит борьба за пространство и условия обеспечения всем необходимым. Объединяющей единицей является система кровообращения, а самое главное, состав крови, выполняющий функцию информационной среды. Исходя из этого, за теоретическую точку отсчёта в лабораторном анализе мы взяли показатели красной крови (RBC, Hb, Ht), так как жизненный цикл бабезий проходит в эритроцитах и связан с их гемолизом, что сказывается на уровне гемоглобина и эритроцитарной массы в крови. Поэтому количественные и качественные характеристики RBC, Hb и Ht лежат в основе развития гипоксии, определяющей выраженность гепато- и нефропатологии. С этой целью мы определили корреляционную взаимосвязь гематологических и биохимических показателей у здоровых собак и инвазированных бабезиями. Наибольшее количество статистически значимых корреляций было установлено в группе здоровых животных. При бабезиозе их доля резко снижалась, но сохранялась скореллированность с АлАТ, АсАТ, ГГТ, общим белком, мочевиной и креатинином. Это позволило нам отнести данные биохимические показатели к приоритетным, и использовать их для оценки метаболического состояния организма собак, лежащего в основе развития гепато- и нефропатологии, так как: а) активность АсАТ, отражает интенсивность катаболических процессов и митохондрий; б) активность АлАТ характеризует напряженность анаболических реакций; в) активность ГГТ эквивалентна скорости заимствования аминокислот в клетках организма для биосинтетических процессов; г) концентрация общего белка отражает скоординированность процессов анаболизма и катаболизма; д) содержание мочевины и креатинина является индикатором интоксикации организма. Таким образом, мы установили, что при бабезиозе ферменты АсАТ, АлАТ, ГГТ изменяют свою активность, что с точки зрения единства метаболизма в живом организме - основа для сохранения физиологической концентрации общего белка, а с клинической - степени выраженности повреждений гепатоцитов. Аналогично, мочевина и креатинин - отражают общий пул аминогрупп, а с клинической точки зрения - выраженность почечной патологии. ^ При оценке характера корреляционной взаимосвязи гематологических и биохимических показателей, мы установили, что наибольшей информативностью обладают: АлАТ, АсАТ, ГГТ, общий белок, мочевина и креатинин. Поэтому мы попытались проверить правильность полученных выводов на практических примерах. Таблица 4 – Тест-система оценки биохимических показателей
Примечание: N – соответствует границам физиологической нормы; ↑ - увеличено незначительно; ↑↑ - умеренно увеличено; ↑↑↑ и ↑↑↑↑ - сильно увеличено; ↓ - понижено На первом этапе мы сравнили между собой первичные анализы крови собак с летальным и благоприятным исходом инвазии (III серия эксперимента), учитывая только данные биохимические показатели (табл. 4). При летальном исходе клеточный метаболизм в организме животных имеет катаболическую направленность в условиях энергодефицита, что характеризуется снижением концентрации общего белка ниже нормы на фоне увеличения уровня мочевины и креатинина, приоритетного возрастания активности АсАТ по сравнению с АлАТ (коэффициент де Ритиса более 1,3 усл. ед.), повышения активности ГГТ. В случае благоприятного исхода бабезиоза в организме собак хотя и наблюдается эндогенная интоксикация (повышение концентрации мочевины, креатинина), но сохраняется анаболическая направленность обменных процессов, для которых характерно сохранение концентрации общего белка и активности ГГТ в пределах нормы, приоритетное повышение активности АлАТ по сравнению с АсАТ (коэффициент де Ритиса менее 0,7 усл. ед.). Данные различия в изменении биохимических показателей определяют механизмы адаптации в организме животных, что влияет на исход болезни. На следующем этапе мы оценили информативность алгоритма оценки метаболического состояния организма собак в ходе лечения острой формы спонтанного бабезиоза (табл. 5, 6). После начала лечения через двое суток у опытных собак исчезала диарея, нормализовалась ректальная температура, появлялся интерес к воде. Однако цвет слизистых по-прежнему был желтушный. Печень при пальпации характеризовалась болезненностью и увеличением каудальных границ органа. Таблица 5– Динамика показателей алгоритма в ходе лечения, (Х±sx)
Примечание: * - р<0,05-0,001 статистическая достоверность различий по отношению к показателям до лечения Через трое суток терапии животные были малоподвижны, у них появлялся слабый аппетит, видимые слизистые оболочки оставались желтушными. На пятые сутки нормализовался аппетит, собаки стали более активными, слизистые оболочки по-прежнему оставались желтушны. Через 10 суток после проведенной терапии у животных обеих групп нормализовался аппетит, животные были активны, слизистые оболочки были или розовато-желтые, или бледно-розового цвета. Таблица 6 – Динамика показателей алгоритма в ходе лечения, (Х±sx)
Примечание: * - р<0,05-0,001 статистическая достоверность различий по отношению к показателям до лечения Тенденция изменений биохимических показателей крови в ходе лечения собак опытных групп была однотипной и характеризовалась постепенной нормализацией их уровня. Следовательно, комплексные схемы лечения, хотя и различаются по входящим в их состав антиоксидантным препаратам (гамавит, лигфол), но оказывают выраженный положительный эффект. Соотношение биохимических показателей, а также характер их изменений свидетельствует об анаболической направленности метаболических процессов в организме собак в ходе лечения. Таким образом, полученные нами данные свидетельствуют, что предложенный нами алгоритм оценки метаболического состояния организма собак отражает характер и направленность метаболических процессов при бабезиозе собак и может быть использована в ветеринарной практике для прогнозирования исхода заболевания и мониторинга лечения. ВЫВОДЫ 1. Сезонная динамика бабезиоза собак в г. Магнитогорске имеет характер двухвершинной кривой с ярко выраженным пиком инвазии в мае и менее резко выраженной вспышкой заболеваемости в сентябре и октябре. На уровень заболеваемости также влияет: пол, возраст и порода животных. Наивысший уровень смертности от бабезиоза наблюдается у щенков до 1 года. 2. Наиболее неблагоприятными по бабезиозу собак в г. Магнитогорске за период 2008-2010 г.г. являлись Правобережный и Ленинский районы, в которых уровень заболеваемости составил, соответственно, 25,8-28,2 и 33,9-36,3%. 3. В патологический процесс при острой форме спонтанного бабезиоза собак вовлекается печень и почки, в которых развиваются поражения, соответственно, по типу острого гепатита и острой почечной недостаточности. Основой патогенетической причиной гепато- и нефропатологии является развитие гипоксического и гиперметаболического энергодефицита. 4. Функциональное состояние организма собак при бабезиозе, определяющее характер нарушений функций печени и почек можно охарактеризовать с помощью оптимизированных тест-систем. а) Тест-система клинического анализа крови характеризуется резким снижением, по сравнению с физиологической нормой, количества эритроцитов, гемоглобина, гематокрита, среднего содержания гемоглобина в эритроците, средней концентрация гемоглобина в эритроците, среднего объёма эритроцита, цветного показателя; увеличением СОЭ, ретикулоцитов, лейкоцитов, эозинофилов, палочкоядерных нейтрофилов и моноцитов при нормальном содержании тромбоцитов, сегментоядерных нейтрофилов и лимфоцитов. б) Тест-система биохимического анализа крови характеризуется сохранением физиологической концентрации общего белка, альбуминов, холестерина и активности ГГТ на фоне увеличения активности АлАТ, АсАТ, ЩФ, содержания мочевины, креатинина, общего и прямого билирубина, величины белково-осадочной пробы. в) Тест-система анализа мочи включает следующее: моча изменяет цвет, прозрачность, плотность, содержит высокую концентрацию белка, билирубина и уробилиногена при нормальном содержании глюкозы, эритроцитов и лейкоцитов в мочевом осадке. г) Тест-система ультразвукового строения печени свидетельствует, что в пределах физиологической нормы сохраняется визуализация органа, его форма и контуры, но изменяется топография, границы, визуализация капсулы и желчных протоков, эхоструктура, эхогенность паренхимы, сосудистый рисунок; желчный пузырь хотя и визуализируется, как в норме, но изменяет свою форму, толщину стенки, контурность и эхогенность содержимого. д) Тест-система ультразвукового строения почек характеризуется физиологичностью визуализации органа, формы и контуров на фоне изменения размера, границ, состояния паренхимы, эхогенности капсулы, кортекса, и мозгового слоя, корково-мозговой дифференциации и лоханки. 5. Наибольшей информативностью из биохимических показателей крови в оценке метаболического состояния организма собак, эквивалентного степени тяжести гепато - и нефропатологии при острой форме спонтанного бабезиоза являются общий белок, мочевина, креатинин, активность АлАТ, АсАТ и ГГТ, с помощью которых можно прогнозировать исход заболевания и вести мониторинг лечения. 6. Уровень эндогенной интоксикации в организме собак при бабезиозе отражают: лейкоцитарный индекс интоксикации с поправочными коэффициентами (0,30-0,32 усл. ед. против, 0,70-0,82); индекс соотношения лейкоцитов и СОЭ (1,32-1,95 усл. ед. против 0,29-0,39); индекс соотношения нейтрофилов и моноцитов (6,25-8,71 усл. ед. против 12,60-15,75); индекс соотношения лимфоцитов и моноцитов (2,19-3,68 усл. ед. против 5,80-7,20). ^ 1. Для прогнозирования исхода бабезиоза собак использовать алгоритм оценки метаболического состояния организма собак, включающего определение концентрации общего белка, мочевины, креатинина, активности АлАТ, АсАТ и ГГТ. Если на фоне высокого содержания в крови мочевины, креатинина уровень общего белка ниже границ физиологической нормы и резко возрастает активность ГГТ, АсАТ и АлАТ (коэффициент де Ритиса более 1,3 усл. ед.) – исход неблагоприятный. Если, несмотря на высокий уровень мочевины, креатинина, активности АлАТ и АсАТ (коэффициент де Ритиса менее 0,7 усл. ед.), в крови сохраняется концентрация общего белка и активность ГГТ в пределах нормы – исход благоприятный. 2. Для оценки уровня эндогенной интоксикации в организме собак при бабезиозе предлагаем использовать лейкоцитарный индекс интоксикации, величина которого составляет 0,30-0,32 усл. ед. (норма 0,70-0,82 усл. ед); индекс соотношения лейкоцитов и СОЭ равный 1,32-1,95 усл. ед. (норма 0,29-0,39 усл. ед); индекс соотношения нейтрофилов и моноцитов - 6,25-8,71 усл. ед. (норма 12,60-15,75 усл. ед.); индекс соотношения лимфоцитов и моноцитов - 2,19-3,68 усл. ед. (норма 5,80-7,20 усл. ед.). 3. Теоретические и практические аспекты диссертационной работы могут быть использованы в учебном процессе профильных государственных образовательных учреждений высшего профессионального образования, написании монографий, справочников и учебных пособий. ^ 1. Самойлова, Е.С. Из опыта применения антиоксидантов в комплексной схеме лечения бабезиоза собак [Текст] / Е.С. Самойлова, М.А. Дерхо // Ветеринарный врач. – 2009. - № 1. – С. 13-16. 2. Самойлова, Е.С. Интегральные индексы интоксикации как критерий оценки уровня эндогенной интоксикации при бабезиозе [Текст] / М.А. Дерхо, Е.С. Самойлова // Ученые записки КГАВМ им. Н.Э. Баумана. – 2011. – Т. 207. –С. 170-177.3. Самойлова, Е.С. Оценка сопряженности воспалительного процесса в почках с гематологическими показателями при бабезиозе собак [Текст] / М.А. Дерхо, Е.С. Самойлова // Ученые записки КГАВМ им. Н.Э. Баумана. – 2011. – Т. 207. – С. 177-182.4. Самойлова, Е.С. Биохимическая оценка функций печени при бабезиозе собак [Текст] / Е.С. Самойлова, М.А. Дерхо // Ветеринарная клиника. – 2007. - № 10. – С. 26-28. 5. Самойлова, Е.С. Клиническая диагностика бабезиоза собак [Текст] / Е.С. Самойлова, М.А. Дерхо // Ветеринарная клиника. – 2008. - № 7. – С. 16-18. 6. Самойлова, Е.С. Биохимические особенности патогенеза бабезиоза собак [Текст] / Е.С. Самойлова // Мат-лы межд. науч.-практ. конф.: сб. науч. тр.- Троицк: УГАВМ, 2008. – С. 142-145. 7. Самойлова, Е.С. Морфологические особенности крови при бабезиозе собак [Текст] / Е.С. Самойлова // Мат-лы межд. науч.-практ. конф.: Сб. тезисов.- М.: ФГОУ ВПО МГАВМиБ им. К.И. Скрябина, 2008. – С. 118. 8. Самойлова, Е.С. Некоторые физические и химические свойства мочи при бабезиозе собак [Текст] / Е.С. Самойлова // Мат-лы научно-практ конф. молодых учёных и специалистов, Троицк: УГАВМ, 2008. – С. 53-56. 9. Самойлова, Е.С. Особенности работы почечного фильтра при бабезиозе собак [Текст] / Е.С. Самойлова // Вестник Тюменской государственной сельскохозяйственной академии. – 2009. - № 4 (11). – С. 61-63. 10. Самойлова, Е.С. Опыт применения лигфола при лечении бабезиоза собак [Текст] / Е.С. Самойлова // Мат-лы межд. науч.-практ. конф., посв. 80-летию каф. анатомии и гистологии с.-х. животных. Троицк: УГАВМ, 2009. – С. 161-163. 11. Самойлова, Е.С. Роль биохимических показателей крови в клиническом обследовании собак при бабезиозе [Текст] / Е.С. Самойлова // Мат-лы межд. научно-практ конф., посвященной 80-летию УГАВМ, Троицк: УГАВМ, 2009. – С. 144-146. 12. Самойлова, Е.С. Некоторые биохимические аспекты патогенеза бабезиоза собак [Текст] / Е.С. Самойлова // Мат-лы ХХVII Московского межд. вет. конгресса. – Москва, 2009. – С. 52-55.На правах рукописи Самойлова Евгения Сергеевна ^ ПРИ БАБЕЗИОЗЕ СОБАК 06.02.01 - диагностика болезней и терапия животных, патология, онкология и морфология животных АВТОРЕФЕРАТдиссертации на соискание ученой степеникандидата ветеринарных наук Сдано в набор 09.07.2012 г. Подписано к печати 28.031.2012 г. Формат 60х84/16. Объём 1 п.л. Тираж 100 экз. Заказ № 25 Гарнитура Times New Roman Отпечатано в типографии И.П. Кузнецовой ИНН 74180743020320 Адрес: 457100, г. Троицк, Челябинская область, ул. Гагарина, 13 |
||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
)
)
)
)
)
)
)
)
)
Ваша оценка этого документа будет первой.
Ваша оценка:
Похожие:
База данных защищена авторским правом ©MedZnate 2000-2016
allo, dekanat, ansya, kenam
обратиться к администрации | правообладателям | пользователям
allo, dekanat, ansya, kenam
обратиться к администрации | правообладателям | пользователям