|
Скачать 282.06 Kb.
|
На правах рукописи Михайлова Галина Николаевна Диагностика и коррекция нарушений минерального обмена у коров при субклинической остеодистрофии 06.02.01 – диагностика болезней и терапия животных, патология, онкология и морфология животных Автореферат диссертации на соискание учёной степени кандидата ветеринарных наук Санкт-Петербург - 2010 Работа выполнена на кафедре клинической диагностики ФГОУ ВПО «Санкт-Петербургская государственная академия ветеринарной медицины» ^ доктор ветеринарных наук, профессор Ковалёв Сергей Павлович. Официальные оппоненты: доктор ветеринарных наук, профессор Яшин Анатолий Викторович; кандидат ветеринарных наук, профессор Копылов Сергей Николаевич. ^ ФГОУ ВПО «Московская государственная академия ветеринарной медицины и биотехнологии имени К.И. Скрябина». Защита состоится «21» декабря 2010 года в 11.00 часов на заседании диссертационного совета Д 220.059.01 при ФГОУ ВПО «Санкт-Петербургская государственная академия ветеринарной медицины» по адресу: 196084, Санкт-Петербург, ул. Черниговская, д.5. С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ФГОУ ВПО «Санкт-Петербургская государственная академия ветеринарной медицины» Автореферат разослан « »__________2010 года. Учёный секретарь диссертационного совета Крячко О.В. ^ Актуальность темы. В развитии сельского хозяйства России приоритетным направлением животноводческой отрасли является увеличение производства биологически полноценной и экологически чистой продукции. Молоко и продукты из него остаются наиболее доступными для населения страны, вследствие чего улучшение их качества – важнейшая проблема аграрного сектора. Среднегодовой надой на одну корову в 2003 году в Ленинградской области составлял 5785 кг молока, при средней продуктивности коров в этот же период по России - 2997 кг. В 2009 году средний надой молока на одну корову по России увеличился до 4484 кг. При этом в некоторых регионах эффективность молочного скотоводства была существенно выше среднероссийской. Так, в Ленинградской области среднегодовой надой на корову составил 6876 кг, в Московской области – 5919 кг, во Владимирской области – 5586 кг (Татарчук В.В., 2005; Некрасова О.В. и др., 2006; Голосов М.Н., 2008; Племяшов К.В., 2008; Скрынник Е.Б. 2010). У коров с высокой молочной продуктивностью обменные процессы в организме протекают более интенсивно, что при определённых условиях приводит к появлению различных болезней. Ведущее место во внутренней патологии сельскохозяйственных животных занимают заболевания, протекающие с нарушением обмена веществ, в том числе минерального. Нарушение минерального обмена веществ у высокопродуктивных молочных коров часто проявляется остеодистрофией. Изучением остеодистрофии занимались многие исследователи - А.А. Кабыш (1967; 1990; 2007), В.Г. Гавриш (1973), С.В. Абдулхамидова (1980), В.У. Давыдов (1983), О.Ф. Петренко (1988), И.П. Кондрахин (1980; 1989; 1999; 2005), А.А. Алиев (1986; 1997), Г.Г. Щербаков, А.А. Ефимов (1996; 2001; 2003; 2005), Б.В. Борисевич (1996), В.Б. Борисевич (2000), В.Н. Иванов (2003; 2004), М.М. Алексин (2004; 2008), В.В. Концевенко и соавторами (2004), А.Ф. Сапожников (2005) и другие. Проблема остеодистрофии остаётся острой в хозяйствах России, Белоруссии, Украины, Болгарии и других стран (В.Н. Иванов, 2004; В.В. Концевенко, 2004; В.Б. Борисевич, 2005; И.П. Кондрахин, 2005; А.А. Кабыш, 2007). Остеодистрофия крупного рогатого скота приводит к снижению молочной и мясной продуктивности, к низким показателями санитарного состояния и доброкачественности молока, нарушению репродуктивной функции, рождению неполноценного молодняка, возникновению яловости, чем наносит значительный экономический ущерб животноводству (П.И. Пахомов, 2002; В.Н. Иванов, 2004; И.П. Кондрахин, 2005; А.А. Кабыш, 2007; Т.С. Пасынкова, 2008; М.М. Алексин, 2008). Актуальным для науки и практики в первую очередь являются вопросы разработки и апробации новых эффективных методов профилактики и терапии остеодистрофии у коров с высокой молочной продуктивностью (Кондрахин И.П., 1999; Иванов В.Н., 2004; Сапожников А.Ф., 2005 и др.). В связи с этим, мы посвятили свои исследования изучению этиологии, патогенеза, диагностике, разработке лечения коров, больных алиментарной остеодистрофией с субклиническим течением. ^ Целью исследований явились диагностика, изучение этиологии и патогенеза алиментарной остеодистрофии с субклиническим течением болезни у высокопродуктивных коров в стойловый период и их лечение с использованием минерально-витаминной добавки, а также влияние добавки на показатели морфологического и биохимического состава крови коров-матерей и их потомства. Для достижения намеченной цели были поставлены задачи:
^
^
^ Основные положения и материалы диссертационной работы изложены и обсуждены на научно-практическом конгрессе «Актуальные проблемы ветеринарной медицины» (СПб., 2007), международной научной конференции профессорско-преподавательского состава, научных сотрудников и аспирантов (СПбГАВМ 2007), четвёртом международном симпозиуме «Современные проблемы ветеринарной диетологии и нутрициологии», посвящённому 200-летию ветеринарного образования в России и 70-летию кафедры кормления животных СПбГАВМ» (СПб., 2008), Координационном Совете по животноводству и ветеринарии Северо-Западного научно-методического центра Россельхозакадемии (СПб., 2009). ^ 1. Этиология алиментарной остеодистрофии у высокопродуктивных коров. 2. Гематологический статус животных, больных алиментарной остеодистрофией с субклиническим течением болезни. 3. Терапевтическая и экономическая эффективность применения минерально-витаминной добавки в рационах коров, больных алиментарной остеодистрофией. Публикации. По материалам диссертационной работы опубликовано 5 научных работ, в том числе одна из них в журнале, рекомендованном ВАК РФ. ^ Диссертация изложена на 174 страницах компьютерного текста и состоит из введения, обзора литературы, собственных исследований, обсуждения, выводов и предложений, списка литературы, включающего в себя 134 источника, из них 8 на иностранном языке, приложения. Работа иллюстрирована 29 таблицами и 39 рисунками. ^ Работу проводили в 2005-2009 годы на кафедре клинической диагностики и в клинико-биохимической лаборатории ФГУ ВПО «Санкт-Петербургская государственная академия ветеринарной медицины», в ФГУ «Ленинградская межобластная ветеринарная лаборатория», в ООО медицинской лаборатории «ЛабТест» при поликлинике № 16 г. Санкт-Петербурга; на ферме «Калитино» ФГУ «Северо-Западная машиноиспытательная станция» и в других хозяйствах Ленинградской области. Клинико-экспериментальные исследования выполнены на стельных сухостойных коровах чёрно-пёстрой породы 3-7-летнего возраста, с молочной продуктивностью от 7000 до 8000 кг молока за лактацию. Всего под наблюдением находилось 385 коров и 21 телёнок, полученные от коров-матерей, больных остеодистрофией с субклиническим течением болезни. Лабораторные исследования крови у 53 коров и 14 телят проводили дважды, у 24 коров и 7 телят - один раз. Лечебную минерально-витаминную добавку (таблица 1) животные получали в течение 90 дней, ежедневно, однократно в дозе 0,45 г/кг массы тела животного в сутки (таблица 1). Изучение терапевтической эффективности минерально-витаминной добавки при алиментарной остеодистрофии с субклиническим течением болезни проводили на трёх группах высокопродуктивных коров-аналогов (по 10 коров в каждой) путём индивидуального скармливания с концентратами. В первую и вторую группы вошли коровы, больные алиментарной остеодистрофией с субклиническим проявлением. Третья группа коров состояла из клинически здоровых животных, она же являлась контролем. Минерально-витаминную добавку на ракушечной муке давали только коровам второй группы. Животные первой и третьей групп получали корма по обычному рациону. Таблица 1. Рецептура лечебной минерально-витаминной добавки
При исследовании крови подсчитывали количество эритроцитов и лейкоцитов в счётной камере Горяева, гемоглобин – гемиглобинцианидным методом по М.Л. Пименовой и Г.В. Дервизу. В мазках крови окрашенных по Паппенгейму выводили лейкограмму. При биохимическом исследовании сыворотки крови, определяли: общий билирубин – по диазореакции методом Ендрассика-Клеггорна-Грофа, щелочную фосфатазу – оптимизированным кинетическим фотометрическим методом с субстратом - n - нитрофенилфосфат, амилазу – оптимизированным энзиматическим кинетическим методом с использованием синтетического субстрата EPS [4,6-этилиден(G7)-2-нитрофенил-(G1)- ![]() С помощью стандартизированных наборов фирмы «Biocon» в сыворотке крови определяли концентрацию общего кальция – колориметрический метод с О-крезолфталеин комплексоном, неорганического фосфора – колориметрическим ультрафиолетовым тестом с молибдатом аммония, магния - метод с раствором ксилидила синего. Уровень железа в сыворотке крови определяли – колориметрическим методом без депротеинизации c 2-(5-нитро-2-пиридазо)-5-(N-пропил-N-сульфопропиламино) фенолом (Nitro-PAPS) с помощью набора реактивов Nitro-PAPS фирмы «АБРИС+». Все эти методы выполнены на биохимическом полуавтоматическом анализаторе «Clima – 15 М» (Испания). Концентрацию цинка и меди определяли на атомном абсорбционном спектрофотометре марки «Спектр-5». Метод основан на способности свободных атомов металлов, поглощать световую энергию пламени. Содержание витамина Е в сыворотке крови определяли по Биери в модификации ВНИИНБЖ, резервную щелочность плазмы крови - диффузионным методом по И.П. Кондрахину, витамин А и каротин в плазме крови – спектрофотометрическим методом. Уровень паратгормона в крови коров (n=10) определяли с помощью анализатора Elecsys, электрохемилюминисцентным методом, кальцитонина (n=8) – на анализаторе Immlit One, усиленным иммунохемилюминисцентным методом, кальцитриола (n=8) - активной формы витамина D (1,25 (ОН)2 витамина D) - определяли иммуноферментным методом. Была поставлена тимоловая проба в сыворотке крови коров с использованием промышленного набора «Диахим-Тимоловая проба» НФП «Абрис +». Материалом гистологического исследования была костная ткань хвостовых позвонков. Кость фиксировали в формалине и декальцинировали в 10 % растворе трихлоруксусной кислоты. По общепринятым методикам материал заливали в парафин. Изготовляли срезы толщиной 5,0 мкм, которые окрашивали по Шморлю (1954). Весь цифровой материал статистически обработан с использованием анализа различия средних двух выборок и ПЭВМ (М.К. Иголинская, 2006). Определяли среднее значение (М), ошибку средней арифметической величины (±m). Все полученные цифровые данные оценивали с применением критериев Стьюдента и приведены в соответствующих таблицах с указанием степени достоверности различий показателей (р). ^ На ферме «Калитино» ФГУ «Северо-Западная машиноиспытательная cтанция» Волосовского района Ленинградской области в 2006 году в зимне-стойловый период уровень заболеваемости остеодистрофией коров с удоем более 7000 кг составил 80,8 %, что говорит о широком распространении болезни. Клиническим обследованием поголовья (366 коров) было установлено, что признаки остеодистрофии были явно выражены у 42,3 % животных, при этом наблюдали следующие клинические признаки: потеря блеска шерстного покрова и глазури копытного рога - у 62,2 % больных животных, извращённый аппетит - у 61,1 %, общее вялое состояние - у 45,0 %, шаткость резцовых зубов - у 42,0 %, рассасывание последних хвостовых позвонков у -26,0 %, частичное рассасывание последних ребер – у 23,4 %, провисание в области поясничных позвонков – у 10,0 %, неправильная постановка конечностей – у 3,3 % больных животных. Остеодистрофию с субклиническим проявлением болезни диагностировали по данным биохимического исследования крови у 38,5 % животных. Выраженных клинических признаков болезни при этом у животных не было выявлено. В рационах коров за два последних месяца лактации и в период сухостоя прослеживался недостаток сахара, кобальта, йода, марганца, серы, цинка, кальция, фосфора, меди, магния на фоне избытка железа, витамина Е, крахмала, калия, поваренной соли, сухого вещества, сырой клетчатки. Кроме этого, у коров за два месяца до запуска в рационе был отмечен избыток переваримого протеина, каротина, энергетических кормовых единиц, обменной энергии, сырого протеина, жира и клетчатки, сухого вещества, витамина D, а в сухостойный период наблюдался недостаток витамина D, каротина, переваримого протеина и сырого жира. В структуре потребления кормов в стойловый период для дойных коров за последние два месяца перед запуском концентрированные корма составляли 63,0 %, грубые корма – 8,8 %, сочные – 38,6 %, а для стельных сухостойных коров, соответственно, 38,7 %; 15,8 %; 45,5 %. Из анализа кормления животных следует, что в хозяйстве в стойловый период у дойных коров сложился концентратно-силосный тип кормления, у сухостойных коров - силосно-концентратный, в обоих случаях с недостаточным потреблением сена, низким сахаро-протеиновым отношением и высоким отношением крахмала к сахарам, недостатком кобальта, сахара, йода, марганца, серы, цинка, кальция, фосфора, меди, магния на фоне избытка железа, витамина Е, крахмала, калия, поваренной соли, сухого вещества, сырой клетчатки. Причиной заболевания коров алиментарной остеодистрофией в период сухостоя явились несбалансированность рациона по минеральным элементам, витаминам и другим питательным веществам, а также ультрафиолетовая недостаточность и отсутствие моциона у животных. Для изучения патогенеза алиментарной остеодистрофии было проведено гистологическое исследование костной ткани хвостовых позвонков вынужденно убитых больных животных. Картина гистологического исследования пятого хвостового позвонка коровы по кличке «Зайка» № 1677, больной остеодистрофией с субклиническим течением, представлена на рисунке 1. ![]() 3 ![]() ![]() 1 ![]() ![]() 2 ![]() ![]() ![]() ![]() 4 ![]() ![]() 5 ![]() ![]() 6 Рисунок 1 - Гистологическая картина кости пятого хвостового позвонка коровы по кличке «Зайка» № 1677, больной остеодистрофией в субклиническом проявлении (Увеличение 1×600) (1-Остеоны; 2-Гаверсовы каналы; 3-Вставочные пластины; 4-Остеоциты; 5-Остеобласты; 6-Остекласты) При микроскопии гистосреза биоптата кости пятого хвостового позвонка коровы, больной алиментарной остеодистрофией с субклиническим течением болезни, выявлено незначительное нарушение петлистого рисунка; оставшиеся трабекулы беспорядочно разбросаны, часть из них имеет неровный, зазубренный контур. Уменьшено число линий склеивания, остеоидная ткань вокруг некоторых трабекул прослеживается в виде тонких напластований, что, свидетельствует о нарушении процесса костеобразования. Число остеокластов при этом не превышает 6-8 в поле зрения (при норме 15-16), что обусловлено депрессией клеток остеокластического ряда. Количество остеобластов несколько снижено. ^ У 30 коров без выраженного клинического проявления остеодистрофии были проведены биохимические исследования крови. По результатам крови были сформированы две группы животных. В первую группу вошли коровы, больные остеодистрофией с субклиническим течением болезни (20 коров). Во вторую – клинически здоровые животные (10 коров), она же являлась контролем. Результаты приведены в таблице 2. Таблица 2 Биохимические показатели крови коров до опыта (M±m).
Примечание: *- разница достоверна (р<0,01) по отношению к показателям крови коров второй группы (контроль) до начала проведения опыта. Установлено, что показатели крови у больных коров, по сравнению с клинически здоровыми животными, были достоверно ниже: концентрация в крови общего и ионизированного кальция на 16 % (р<0,01) и 14,6 % (р<0,01), соответственно; неорганического фосфора – на 22,2 % (р<0,01); меди – на 33,6 % (р<0,01), цинка – на 21,6 % (р<0,01) и уровень резервной щелочности – на 31,1 % (р<0,01). У коров первой группы активность щелочной фосфатазы и амилазы в крови составляла 81,0±5,7 МЕ/л и 323,2±36,2 МЕ/л, что было достоверно выше, соответственно, в 1,8 (р<0,01) и 1,6 раз (р<0,01), чем у здоровых животных. У животных первой группы концентрация глюкозы в крови была достоверно ниже - на 17,2 % (р<0,01), а содержание общего билирубина оказалось достоверно выше - на 39,5 % (р<0,01), холестерина – на 38,2 % (р<0,01), чем у коров контрольной группы. Результаты исследований (таблица 3) показали, что у животных первой группы, содержание в крови токоферола в 3,3 раза (р<0,01), ретинола в 2,2 раза (р<0,01), каротина в 2,07 раз (р<0,01) было достоверно ниже, чем у здоровых коров контрольной группы. Необходимо заметить, что у животных контрольной группы показатели витамина Е и каротина в крови были ниже физиологических нормативов. При определении гормонального статуса выявили, что у больных коров уровень паратгормона в крови был достоверно выше в 2 раза (р<0,01), чем аналогичный показатель здоровых животных. У коров первой группы уровень кальцитонина и кальцитриола в крови оказался достоверно ниже на 26,2 % (р<0,01) и на 17,3 % (р<0,05), соответственно, чем у животных второй группы (таблица 3). При исследовании крови у больных коров по сравнению с показателями здоровых животных установили, что содержание лейкоцитов в крови было достоверно выше на 21 % (р<0,01) и составляло 9,11±1,25 Г/л. Концентрация гемоглобина в крови больных коров достигала 107,0±9,0 г/л, что было достоверно ниже (р<0,05), чем аналогичный показатель клинически здоровых животных. Следует отметить, что количество лейкоцитов и концентрация гемоглобина в крови коров обеих групп были в пределах физиологических колебаний. Анализ лейкограммы крови больных коров показал, что абсолютное количество эозинофилов в 1 мкл крови было достоверно выше на 33,7 %, по сравнению с аналогичным показателем крови коров контрольной группы (р<0,01). Таблица 3 Уровень витаминов и гормонов в крови коров до опыта (М±m).
Примечание: * - разница достоверна (р<0,01) по отношению к показателям крови животных второй группы. ** - разница достоверна (р<0,05) по отношению к показателям крови животных второй группы. Диагноз на остеодистрофию ставился на основании клинического обследования коров, лабораторных исследований мочи, молока, крови и гистологических исследований костной ткани, анализа рационов кормления и условий содержания животных. При биохимическом исследовании крови, у коров больных алиментарной остеодистрофией с субклиническим течением, по сравнению с клинически здоровыми животными установлено: гипокальциемия, гипофосфатемия, А, Е – гиповитаминозы, более низкий уровень меди, цинка, резервной щелочности, каротина, глюкозы, кальцитонина, кальцитриола и одновременно отмечалась гипербилирубинемия, гиперхолестеринемия и высокая активность щелочной фосфатазы, амилазы и повышенный уровень паратгормона. При исследовании крови у больных коров первой группы, по сравнению с клинически здоровыми животными было отмечено пониженное содержание гемоглобина и повышенное количество лейкоцитов в крови, однако эти показатели находились в нормативных пределах. При гистологическом исследовании костной ткани пятых хвостовых позвонков вынужденно убитых коров установлено, что особенностью морфологической картины первичного остеопороза является то, что в лакунах, как правило, отсутствуют остеокласты, при снижении числа остеобластов, что свидетельствует о замедление процесса костеобразования и снижении интенсивности резорбции. Такая гистологическая картина характерна для начальной стадии алиментарной остеодистрофии у коров. Для дифференциации алиментарной остеодистрофии от вторичной у 15 коров-аналогов без клинических признаков остеодистрофии была взята кровь для постановки белково-осадочной тимоловой пробы. В результате было установлено, что у 10 животных функция печени не нарушена, у четырёх коров отмечены незначительные нарушения, а у одной коровы значительно нарушена функция печени. При алиментарной остеодистрофии у крупного рогатого скота обычно отмечается отрицательная тимоловая проба. Для исключения кетоза, проводили определение кетовых тел в крови и в моче. У коров, больных субклинической остеодистрофией до начала проведения опыта кетоновые тела не были выявлены. В молоке кетоновые тела также отсутствовали. Анализируя показатели крови коров из других хозяйств Ленинградской области, в крови отмечали: низкий уровень ионизированного кальция, резервной щёлочности, каротина, глюкозы и высокое содержание общего белка. В дальнейшем происходят более глубокие нарушения минерального, белкового и углеводного обмена в организме животных, что может привести к развитию остеодистрофии у коров. ^ В опыте по выяснению терапевтической эффективности минерально-витаминной добавки для коров, больных алиментарной остеодистрофией субклинического проявления болезни, были использованы животные, из которых сформировали три группы по 10 коров. К концу опыта у животных второй группы, которые получали минерально-витаминную добавку к рациону, по сравнению с исходными данными, достоверно повысился в крови уровень содержания общего и ионизированного кальция, неорганического фосфора, меди, цинка и резервной щёлочности, соответственно, на 33,3 %, 33,0 %, 42,9 %, 29,9 %, 38,9 %, 42,2 %; также отмечали достоверное снижение уровня общего билирубина в 1,7 раз, холестерина – в 1,4 раза, амилазы – в 1,4 раза, щелочной фосфатазы – в 1,6 раз и железа на 24,9 %. А по отношению к показателям здоровых животных к концу опыта у коров второй группы были выше: концентрация общего и ионизированного кальция, неорганического фосфора, соответственно, на 7,7 % (р<0,01); 15,8 % (р<0,01); 17,6 % (р<0,01) и ниже: концентрация железа и общего билирубина на 26,2 % (р<0,01) и на 22,5 % (р<0,01). В тоже время у коров первой группы, которых содержали на обычном рационе, по сравнению с аналогичными показателями крови, полученных до опыта, было отмечено достоверное снижение уровня общего и ионизированного кальция на 14,3 % (р<0,05) и 13,6 % (р<0,05), цинка - на 8,1 % (р<0,05) и глюкозы – на 16,7 % (р<0,01) и увеличение содержания общего белка на 17,3 % (р<0,01) и холестерина – на 8,5 % (р<0,05). А по сравнению с аналогичными показателями здоровых животных третьей группы, у животных, первой группы после опыта, достоверно выше был уровень в крови общего билирубина, холестерина, активности амилазы и щелочной фосфатазы, соответственно, в 1,6; 1,5; 1,6 и 1,9 раз, однако процент ионизированного кальция от общего был выше на 5,9 % (р<0,05), а содержание общего и ионизированного кальция, неорганического фосфора, меди, цинка, резервной щёлочности - достоверно ниже, соответственно, на 30,8 %; 24,8 %; 23,5 %; 31,6 %; 25,1 %; 33,0 %. Анализ показателей витаминного обмена показал, что у коров первой группы до и после опыта эти показатели оставались на одном уровне, и достоверной разницы между ними не отмечалось. По сравнению с показателями крови животных контрольной группы у коров первой группы после лечения было достоверно ниже содержание в крови витамина Е – в 3,5 раз, витамина А – в 2,1 раз, каротина – 1,6 раз. У коров второй группы к концу опыта достоверно увеличилась в крови концентрация витамина Е – в 5,4 раза, витамина А – в 3,4 раза и его предшественника каротина – в 2,8 раз, по сравнению с показателями витаминного обмена у этих же животных до начала опыта. После лечения у животных второй группы, по сравнению с показателями крови здоровых животных контрольной группы, был достоверно выше уровень токоферола в крови – в 1,8 раз, ретинола – в 1,6 раз, каротина – в 1,3 раза. Изначально в контрольную группу здоровых животных вошли коровы, у которых содержание в крови витамина Е и каротина было ниже физиологических нормативов, у них же в конце опыта эти показатели остались на том же уровне и достоверно не отличались от первоначальных. Были отмечены изменения в составе крови у больных коров. Так, к концу опыта в крови у животных первой группы, не получавших добавку, по сравнению с аналогичными показателями этих же коров до начала проведения опыта, достоверно уменьшилось содержание эритроцитов – на 24,0 % (р<0,01), а скорость оседания эритроцитов увеличилась на 60,0 % (р<0,01). А по отношению к аналогичным показателям крови клинически здоровых животных после опыта были ниже концентрация гемоглобина – на 21,3 % (р<0,01), содержание эритроцитов – на 8,5 % (р<0,05) и выше скорость оседания эритроцитов – на 60,0 % (р<0,01), содержание лейкоцитов – на 32,6 % (р<0,01). Количество содержания лейкоцитов и концентрация гемоглобина в крови коров первой группы до и после проведения опыта достоверной разницы не имели (р>0,05). Анализ данных лейкограммы показал, что содержание лейкоцитов в крови больных остеодистрофией коров первой группы после проведения опыта, по сравнению с исходными показателями и данными здоровых животных к концу опыта достоверно не отличались (р>0,05). К концу опыта у коров второй группы, которым во время опыта давали вместе с рационом минерально-витаминную добавку, содержание эритроцитов в крови снизилось – на 17,3 % (р<0,01), лейкоцитов – на 27,7 % (р<0,01), а концентрация гемоглобина повысилась на 30,8 % (р<0,01), по сравнению с показателями, полученными до опыта. Между аналогичными показателями крови этих же животных и коров контрольной группы в конце опыта разница была не достоверная (р>0,05). У коров второй группы к окончанию опыта, по сравнению с показателями до опыта, снизилось процентное содержание эозинофилов в крови на 39,6 % (р<0,01), а по отношению к показателям здоровых животных достоверной разницы не отмечали (р>0,05). Следует отметить, что у больных коров до опыта отмечалась эозинофилия. У больных животных, которые не получали с рационом минерально-витаминную добавку с ракушечной мукой, после опыта также наблюдали эозинофилию. А у животных, получавших эту добавку, после опыта содержание эозинофилов было в нормативных пределах. Таким образом, при биохимическом исследовании крови животных после лечения, у коров первой группы продолжал снижаться уровень общего и ионизированного кальция и цинка, увеличился уровень общего белка и билирубина, холестерина и глюкозы, по сравнению с показателями крови, полученными до опыта. После проведения опыта у коров первой группы имели тенденцию к увеличению и были выше уровень общего билирубина, холестерина, активности амилазы и щелочной фосфатазы, а также содержание ионизированного кальция, а уровень общего кальция, неорганического фосфора, меди, цинка, резервной щёлочности был ниже, чем аналогичные показатели крови здоровых животных. У больных остеодистрофией коров, которые получали с кормом добавку, к концу опыта пришли к нормативным значениям показатели общего и ионизированного кальция, неорганического фосфора, меди, цинка, резервной щёлочности, общего билирубина, холестерина, витамина А, активности амилазы и щелочной фосфатазы; отмечалась тенденция к увеличению содержания витаминов Е и каротина, и к снижению уровня железа, по отношению к аналогичным показателям крови этих коров на начало опыта. По сравнению с показателями крови животных контрольной группы, у коров второй группы в крови после лечения был достоверно выше уровень общего и ионизированного кальция, неорганического фосфора, токоферола, ретинола и каротина, а содержание общего билирубина и железа – достоверно ниже. При клиническом исследовании крови у больных остеодистрофией коров, получавших обычный рацион во время опыта, по сравнению с показателями крови здоровых животных, были ниже количество лейкоцитов и концентрация гемоглобина в крови. У животных, получавших минерально-витаминную добавку к рациону, содержание эритроцитов, лейкоцитов в крови и концентрация гемоглобина не имели достоверной разницы по сравнению с аналогичными показателями крови здоровых коров в конце опыта. У коров второй группы к окончанию опыта достоверно снизилось процентное содержание эозинофилов в крови, по сравнению с показателями крови этих же коров до опыта, а по отношению к аналогичному показателю коров контрольной группы после опыта достоверно не отличалось (р>0,05). После лечения коров, больных остеодистрофией с субклиническим течением, с использованием минерально-витаминной добавки на ракушечной муке были проанализированы показатели продуктивности и воспроизводства. С учётом проведенного анализа результатов исследований экономическая эффективность при использовании витаминно-минеральной добавки на ракушечной муке, в рационах сухостойных стельных коров в весенне-стойловый период, составила: 4,06 рубля на 1 рубль затрат. 3Выводы:1. Заболеваемость субклинической алиментарной остеодистрофией сухостойных коров с удоем от 7000 до 8000 кг за лактацию на ферме «Калитино» ФГУ «Северо-Западная машиноиспытательная станция» Волосовского района Ленинградской области в 2006 году составила 38,5 % от всего поголовья. 2. За последние два месяца перед запуском и в период сухостоя в рационах коров отмечали недостаток сахара и минеральных элементов (кобальта, йода, марганца, серы, цинка, кальция, фосфора, меди, магния) на фоне избытка железа и витамина Е. Кроме этого, в рационах коров перед запуском был избыток белка, каротина и витамина D, а в период сухостоя наблюдали их недостаток. 3. У сухостойных коров, больных алиментарной остеодистрофией с субклиническим течением уровень паратгормона в крови составлял 9,9±2,0 пмоль/л, что достоверно выше, чем у здоровых животных (4,7±1,4 пмоль/л) (р<0,01); содержание кальцитонина было 101,3±6,2 нг/мл, кальцитриола – 20,6±0,9 нмоль/л, соответственно, что достоверно ниже, чем у здоровых животных (137,3±5,8 нг/мл (р<0,05) и 24,9±2,4 нмоль/л (р<0,05)). 4. У больных коров показатели минерального обмена и кислотно-щелочного равновесия составляли: содержание общего кальция 2,1±0,1 ммоль/л, ионизированного кальция 0,88±0,07 ммоль/л, неорганического фосфора 1,4±0,1 ммоль/л, меди 9,7±1,0 мкмоль/л, цинка 14,9±1,4 мкмоль/л, уровень резервной щелочности 36,7±8,0 Об.% СО2, что достоверно ниже, по сравнению с показателями здоровых животных, которые достигали 2,5±0,1 ммоль/л, 1,03±0,08 ммоль/л, 1,8±0,1 ммоль/л, 14,6±0,8 мкмоль/л 19,0±2,2 мкмоль/л, 53,3±2,8 Об.% СО2, соответственно. 5. Показатели ферментативной активности, жирового, пигментного и углеводного обмена у больных коров составляли: уровень активности щелочной фосфатазы - 81,0±5,7 МЕ/л, амилазы - 323,2±36,2 МЕ/л, холестерина - 4,7±0,6 ммоль/л, общего билирубина - 12,0±1,6 мкмоль/л, что было достоверно выше, а содержание глюкозы составляло 2,4±0,3 ммоль/л и было достоверно ниже, по сравнению с аналогичными показателями здоровых коров, которые достигали 44,1±4,5 МЕ/л, 203,6±45,0 МЕ/л, 3,4±0,6 ммоль/л, 8,6±1,1 мкмоль/л, 2,9±0,3 ммоль/л, соответственно. 6. Уровень содержания витаминов Е, А и каротина в сыворотке крови больных субклинической алиментарной остеодистрофией достигал 1,4±0,6 мкмоль/л, 0,59±0,18 мкмоль/л, 1,7±0,5 мкмоль/л, соответственно, что было достоверно ниже, чем у клинически здоровых животных, показатели которых составляли 4,6±0,9 мкмоль/л, 1,27±0,13 мкмоль/л, 3,6±0,3 мкмоль/л. 7. При гистологическом исследовании костной ткани пятого хвостового позвонка коров, больных алиментарной остеодистрофией с субклиническим течением, установлено, что особенностью морфологической картины первичного остеопороза является то, что в лакунах, отсутствуют остеокласты и число остеобластов снижено, что свидетельствует о замедление процесса костеобразования и снижение интенсивности резорбции минеральных элементов. 8. Использование минерально-витаминной добавки на ракушечной муке, для лечения коров, больных алиментарной остеодистрофией с субклиническим течением ежедневно, однократно, в течение 90 дней по 0,45 г/кг массы тела способствовало повышению интенсивности обменных процессов в организме и нормализации биохимических показателей крови. 9. У коров, больных алиментарной остеодистрофией с субклиническим течением, которые, получали минерально-витаминную добавку к рациону с лечебной целью, среднесуточный удой достигал 25,99±2,52 кг (р<0,05), по сравнению с удоем не леченых коров (23,00±1,53 кг), что было выше на 11,5 %, а сервис-период у леченых коров составлял 118,7±38,1 дней (р<0,05), что было на 68 дней меньше, чем у коров не получавших минерально-витаминную добавку, который был 186,7±56,0 дней. 10. Экономическая эффективность при использовании минерально-витаминной добавки на ракушечной муке коровам составила 4,06 рубля на 1 рубль затрат. ^ 1. Критерием диагностики субклинической алиментарной остеодистрофии у сухостойных коров является определение в сыворотке крови уровня паратгормона, кальцитонина и кальцитриола, наряду с оценкой фосфорно-кальциевого обмена. 2. Для лечения коров, больных алиментарной остеодистрофией с субклиническим течением болезни целесообразно применять минерально-витаминную добавку на ракушечной муке в период за 1-1,5 месяца до предполагаемого отёла и в течение последующих 1,5-2 месяцев (90 дней), ежедневно в дозе 0,45 г/кг массы тела один раз в сутки. 3. Материалы диссертации используются в учебном процессе – при чтении лекций, ведении лабораторно-практических занятий, написании учебных пособий, монографий, учебников по диагностике болезней и терапии животных. ^
|