Эндогенное ауторозеткообразование в периферической крови и его клиническое значение при заболеваниях сердечно-сосудистой системы 14. 01. 05 кардиология icon

Эндогенное ауторозеткообразование в периферической крови и его клиническое значение при заболеваниях сердечно-сосудистой системы 14. 01. 05 кардиология





Скачать 0.55 Mb.
Название Эндогенное ауторозеткообразование в периферической крови и его клиническое значение при заболеваниях сердечно-сосудистой системы 14. 01. 05 кардиология
страница 1/3
Коричкина Любовь Никитична
Дата 23.03.2013
Размер 0.55 Mb.
Тип Автореферат
  1   2   3
На правах рукописи




Коричкина Любовь Никитична




ЭНДОГЕННОЕ АУТОРОЗЕТКООБРАЗОВАНИЕ

В ПЕРИФЕРИЧЕСКОЙ КРОВИ И ЕГО КЛИНИЧЕСКОЕ ЗНАЧЕНИЕ ПРИ ЗАБОЛЕВАНИЯХ СЕРДЕЧНО-СОСУДИСТОЙ СИСТЕМЫ


14.01.05 - кардиология


АВТОРЕФЕРАТ


диссертации на соискание ученой степени

доктора медицинских наук


Тверь – 2010



Работа выполнена в Государственном образовательном учреждении высшего профессионального образования «Тверская государственная медицинская академия» Росздрава


^ Научный консультант:

Заслуженный деятель науки РФ,

доктор медицинских наук,

профессор Виолен Степанович Волков


Официальные оппоненты:

доктор медицинских наук,

профессор ^ Виктор Васильевич Аникин

доктор медицинских наук,

профессор Борис Яковлевич Барт

доктор медицинских наук,

профессор Виктор Артемьевич Милягин


Ведущая организация:

Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования «Российский государственный медицинский университет» Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию Российской Федерации


Защита состоится “ ” 2011 г. в ____ часов на заседании диссертационного совета (Д 208.099.01) в ГОУ ВПО Тверская ГМА Росздрава (170642, Тверь, ул. Советская, 4)


С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ГОУ ВПО Тверская ГМА Росздрава.


Автореферат разослан “____” 2011 г.


Ученый секретарь

диссертационного совета,

кандидат медицинских наук,

доцент В.В. Мурга

^ ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ


Актуальность исследования

Артериальная гипертония, ишемическая болезнь сердца и хроническая сердечная недостаточность являются не только весьма распространенной патологией, но и главной причиной смерти и инвалидизации населения Российской Федерации (Чазов Е.И., 1998; Аронов Д.И., 2004; Оганов Р.Ф. и соавт., 2005; Карпов Ю.А, 2005 и др.). В частности, распространенность АГ среди взрослого населения составляет около 40% (Бритов А.Н, 1997; Оганов Р. Г. и соавт. 2002, 2007; Чазова И.Е., 2002; Шляхто Е.В., 2007 и др.). По данным проспективных наблюдений (Беленков Ю.Н. и соавт., 2002; Оганов Р.Г., 2002; Чазова И.Е. и соавт. 2007 и др.), наличие у больных АГ увеличивает риск смерти от ИБС в 3 раза, от инсульта – в 6 раз. Общая смертность больных острым инфарктом миокарда составляет в настоящее время 30-40%.

Нет сомнений, что в последние годы достигнут определенный прогресс в плане улучшения диагностики и повышения эффективности лечения заболеваний сердечно-сосудистой системы, что выражается как в уменьшении частоты развития серьезных осложнений, так и в увеличении длительности жизни больных. Все это явилось в основном результатом длительного, как правило, многолетнего и непрерывного применения патогенетически обоснованного медикаментозного лечения. Обычно больные АГ, ИБС и ХСН вынуждены принимать основные медикаментозные средства постоянно (Чазова И.Е., 2002, Остроумова О. Д. и соавт., 2004; Ольбинская Л.И, 2004 и др.), тогда как общее количество, назначаемых препаратов, широко варьирует и зависит от стадии заболевания, наличия осложнений и сопутствующей патологии. С одной стороны, непрерывная лекарственная терапия и приверженность больных к лечению отчетливо снижают риск развития осложнений и улучшают качество их жизни (Лазебник Л.Б. и соавт., 2003; Чазов Е.И, Беленков Ю.Н., 2005; Агеев Ф.Т. и соавт., 2007 и др.), а с другой, риск длительного применения, как правило, нескольких лекарственных препаратов, даже при отсутствии развития аллергических реакций и, тем более, токсических, остается неясным. В этом плане привлекает к себе внимание феномен АРО, в частности, вопрос о межклеточных соотношениях в периферической крови. В настоящее время феномен АРО рассматривается как один из генетически детерминированных механизмов удаления из крови измененных эритроцитов (феномен эритродиереза), который достаточно чутко реагирует на изменения гомеостаза в организме (Бельченко Д.И., 1991 и др.). В настоящее время эндогенное АРО изучено у животных, фрагментарно у здоровых лиц и при некоторых заболеваниях (Бельченко Д. И., 1990, 1992; Волкова О.В., Бельченко Д.И., 1992, 1996; Шубич и соавт. 1997; Широкова Т.Е. и соавт., 2007; Ермакова И.Н. и соавт. 2009 и др.).

Систематического изучения феномена АРО в периферической крови человека не проводилось. Кроме того, отсутствует детальное изучение АРО у здоровых людей в различных условиях их жизни и трудовой деятельности, а также с учетом возраста и пола. Феномен АРО не изучен у больных с различными заболеваниями сердечно-сосудистой системы с учетом клинических проявлений заболевания, длительности и интенсивности лекарственной терапии. При этом остается неясным его клинико-диагностическое значение. Имеется также необходимость провести сопоставление полученных результатов с показателями интенсивности и характера АРО в крови при некоторых заболеваниях внутренних органов и дать им сравнительную характеристику. Можно полагать, что изучение феномена АРО позволит глубже понять патогенез АГ, ИБС, ХСН, выявить новые аспекты влияния проводимой лекарственной терапии на состояние больных и найти новые подходы к определению тяжести заболевания и прогноза.


^ Цель исследования

Изучить феномен эндогенного ауторозеткообразования в периферической крови при различных заболеваниях сердечно-сосудистой системы и определить его клиническое значение.


^ Задачи исследования

  1. Исследовать феномен эндогенного АРО в периферической крови у практически здоровых лиц и изучить морфологию ауторозеток с помощью световой и электронной микроскопии.

  2. Выявить у практически здоровых лиц влияние условий жизни и некоторых видов трудовой деятельности на интенсивность АРО в периферической крови

  3. Изучить интенсивность эндогенного АРО в периферической крови у больных АГ и установить его взаимосвязь со стадией заболевания и с длительностью и интенсивностью лекарственной терапии.

  4. Сопоставить у больных АГ частоту эндогенного АРО в крови с качественным состоянием эритроцитов и лейкоцитов и показателями микрогемоциркуляции.

  5. Изучить интенсивность и характер эндогенного АРО в периферической крови у больных стабильной стенокардией на фоне лекарственной терапии и применения эфферентных методов лечения.

  6. Оценить особенности феномена АРО у больных нестабильной стенокардией.

  7. Исследовать характер АРО у больных острым мелкоочаговым (не-Q-инфаркт) и крупноочаговым (Q - инфаркт) инфарктом миокарда.

  8. Выявить особенности эндогенного АРО при осложнениях острого инфаркта миокарда.

  9. Установить зависимость АРО у больных ХСН от стадии заболевания и проводимой лекарственной терапии.

  10. Изучить феномен АРО в периферической крови у больных пневмонией, обострением хронического обструктивного бронхита, язвенной болезнью двенадцатиперстной кишки, хронического панкреатита, злокачественными опухолями и ВИЧ-инфекцией.


^ Научная новизна

Впервые эндогенное АРО изучено в периферической крови у практически здоровых лиц в различных условиях их жизни и при некоторых видах трудовой деятельности.

Впервые дана оценка морфологии эритроцитов, участвующих в АРО, с помощью световой и электронной микроскопии.

Впервые при АГ с учетом стадии заболевания, длительности и интенсивности лекарственной терапии изучен процесс АРО и проведено сопоставление его с качественными изменениями эритроцитов и лейкоцитов в крови и показателями состояния микрогемоциркуляции.

Впервые дана оценка интенсивности и характера феномена АРО у больных стабильной стенокардией и изучена его динамика под влиянием лекарственной терапии и эфферентных методов лечения.

Впервые феномен АРО исследован у больных острым коронарным синдромом и выявлены его особенности у больных нестабильной стенокардией, отмечена взаимосвязь интенсивности АРО с величиной очага некроза сердечной мышцы у больных острым инфарктом миокарда. Впервые выявлены особенности АРО в крови у больных с осложненным ОИМ.

Впервые проведено изучение АРО у больных ХСН и отмечено увеличение его интенсивности с повышением стадии заболевания и интенсивностью лекарственной терапии. Впервые феномен АРО исследован у больных МА без клинических проявлений на фоне лекарственной терапии.

Впервые эндогенное АРО исследовано при острой пневмонии и обострении хронического бронхита, язвенной болезни двенадцатиперстной кишки, хронического панкреатита, а также у больных злокачественными новообразованиями и ВИЧ-инфекцией.


Практическая значимость

  1. Эндогенные ауторозетки в периферической крови у здоровых лиц встречаются в единичных случаях, и учащение их выявления требует дополнительного обследования пациента для выяснения причины указанного явления.

  2. Интенсивность АРО в периферической крови у здоровых людей увеличивается под влиянием острых и обострении хронических заболеваний, приеме лекарственных препаратов, поливитаминов. Длительная работа с органическими растворителями резко увеличивает АРО в крови и способствует развитию анемии.

  3. У больных с впервые выявленной АГ интенсивность АРО в крови не отличается от таковой у здоровых лиц при резком уменьшении лизиса эритроцитов в выявляемых ауторозетках. Частота АРО и лизис эритроцитов нарастают с повышением стадии заболевания, длительности и интенсивности лекарственной терапии.

  4. Интенсивность АРО в периферической крови увеличивается у больных острым коронарным синдромом и нарастает при развитии неблагоприятных исходов. Наименьшее число ауторозеток выявляется у больных НС, наибольшее при КИМ и промежуточное положение в этом отношении занимает МИМ.

  5. Число ауторозеток в крови у больных хронической сердечной недостаточностью нарастает с повышением стадии заболевания, количеством принимаемых лекарственных препаратов и отчетливо обратно коррелирует с количеством эритроцитов и концентрацией гемоглобина в крови.

  6. При соматических острых и воспалительных заболеваниях и обострении хронических повышение интенсивности АРО отражает тяжесть заболевания и процесс клинического улучшения.

  7. У больных злокачественными новообразованиями и ВИЧ-инфекцией наблюдается уменьшение числа нейтрофильных и моноцитарных ауторозеток при значительном увеличении количества тромбоцитарных ауторозеток.


^ Основные положения, выносимые на защиту

1. Ауторозеткообразование в периферической крови у здоровых лиц наблюдается в единичных случаях и повышается при возникновении острых и обострении хронических заболеваний, под влиянием интоксикаций, при приеме лекарственных препаратов и поливитаминов.

2. Прикрепленные к розеткообразующей клетке аутологичные эритроциты, как правило, имеют измененную форму как у здоровых лиц (до 50%), так и у больных с различными заболеваниями (до 100%).

3. Под влиянием лекарственной терапии увеличивается число ауторозеток и ауторозеток с лизисом эритроцитов, изменяется функциональное состояние эритроцитов и лейкоцитов, при длительной и интенсивной лекарственной терапии в крови снижается количество эритроцитов и концентрация гемоглобина.

4. Под влиянием лекарственной терапии у больных стабильной стенокардией наблюдается увеличение числа ауторозеток в крови, подобный эффект оказывает внутривенная лазеротерапия, противоположный - плазмаферез.

5. Установлено, что размеры ауторозеток значительно превышают диаметр капилляров, что может быть важным компонентом нарушения состояния микрогемоциркуляции при заболеваниях сердечно-сосудистой системы.

6. У больных нестабильной стенокардией имеется относительно небольшое количество ауторозеток и ауторозеток с лизисом и их количество нарастает под воздействием лекарственной терапии.

7. При ОИМ в периферической крови наблюдается резкое повышение числа ауторозеток и ауторозеток с лизисом. С увеличением величины инфаркта миокарда отчетливо нарастает интенсивность АРО. В процессе реабилитации количество ауторозеток в крови у больных ОИМ снижается.

8. У больных крупноочаговым инфарктом миокарда в крови появляются ауторозетки, образованные палочкоядерными нейтрофилами, а при развитии его осложнений регистрируются тромбоцитарные ауторозетки.

9. У больных ХСН с нарастанием стадии заболевания и увеличением количества лекарственных препаратов отмечается отчетливое повышение числа ауторозеток.

10. Различные острые соматические заболевания и обострения хронических приводят к нарастанию нарушений межклеточных соотношений в периферической крови и усилению АРО. Появление в большом количестве тромбоцитарных ауторозеток при снижении нейтрофильных и моноцитарных можно рассматривать как проявление снижения защитных, в частности, иммунных механизмов организма.

11. Длительная и интенсивная лекарственная терапия активирует процесс эритродиереза, что приводит в конечном итоге к снижению количества эритроцитов и концентрации гемоглобина в периферической крови.


Практическое внедрение полученных результатов

Результаты исследования внедрены в практику лечебно-диагностической деятельности ГУЗ «Областная клиническая больница». Положения диссертационной работы включены в программу лекционного курса для студентов V и VI курса лечебного факультета. Оформлено 5 рационализаторских предложений и 2 изобретения (№ 2180960 от 27.03. 2002 и № 2258931 от 20. 09. 2005 года).


Апробация работы

Результаты исследования докладывались на заседании Тверского областного научного общества терапевтов и кардиологов (2004, 2005, 2006, 2007, 2008, 2009), на Всероссийской научной конференции «Методы исследования регионарного кровообращения и микроциркуляции в клинике» (г. Санкт-Петербург, 2004), на 1-м Всероссийском съезде специалистов по сердечной недостаточности (г. Москва, 2004), на Всероссийских национальных конгрессах кардиологов (г. Москва, 2004, 2005, 2006, 2007, 2008, 2009), на Всероссийской научной конференции по артериальной гипертонии (г. Москва, 2006), на Всероссийской научной конференции с международным участием по социально-медицинским аспектам экологического состояния Центрального экономического района России (г. Тверь, 2007), на Международной научной конференции по проблемам диагностики и коррекции эндоэкологического статуса в современных условиях (г. Санкт-Петербург, 2007), на научной конференции по иммунологии «Иммунология в смежных дисциплинах» (г. Тверь, 2009).


Публикации

По теме диссертации опубликованы 73 научные работы, из них - 61 в центральной печати, в том числе 15 в рецензируемых журналах, рекомендованных ВАК.


^ Объем и структура работы

Диссертация изложена на 311 страницах машинописного текста и состоит из обзора литературы, характеристики материала и методов исследования, четырех глав, посвященных результатам собственных исследований, обсуждения, выводов, практических рекомендаций и списка использованной литературы. Работа иллюстрирована 22 микрофотографиями, 89 таблицами, 2 рисунками. Библиографический указатель содержит 442 источников, из них 316 отечественных и 126 иностранных авторов.


^ СОДЕРЖАНИЕ ДИССЕРТАЦИОННОГО ИССЛЕДОВАНИЯ

Материал и методы исследования

Контингент обследованных практически здоровых лиц.

Обследовано 813 практически здоровых лиц. Все они были разделены на 4 группы: 1-я – молодые лица обследованные в процессе диспансерного наблюдении (409; мужчин - 211, женщин - 198,средний возраст 18,3 года); 2-я – учащиеся Тверского медицинского колледжа (204; женщин - 204, средний возраст 19,0 лет); 3-я – маляры, работающие с лакокрасочными средствами в вагоносборочном цехе Тверского вагоностроительного завода (100; мужчин - 55, женщин - 45, средний возраст 45,9 года); 4-я – лица, поступающие на работу (100; мужчин - 40, женщин - 60, средний возраст 47,7 года; контрольная группа; КГ).

У всех обследованных изучали анамнез, выясняли наличие острых заболеваний или обострения хронических в течение последнего месяца, особенности работы, прием лекарственных препаратов, поливитаминов.

Условием для включения в контрольную группу (КГ) было отсутствие на момент обследования острых и обострение хронических заболеваний, приема лекарственных средств и поливитаминов, контакта с токсическими средствами. Содержание в периферической крови ауторозеток у лиц КГ явилось эталоном для всех обследованных.

^ Контингент обследованных больных сердечно-сосудистыми заболеваниями. Обследовано 769 больных (мужчин - 379, женщин - 342, средний возраст 56,0 лет) больной с заболеваниями сердечно-сосудистой системы. Из них у 250 имелась эссенциальная АГ (мужчин - 137, женщин - 113, средний возраст 47,8 года), у 519 - ИБС (мужчин - 273 женщин - 246, средний возраст 65,1 года).

Больные АГ были обследованы в стационаре в период ухудшения заболевания, куда они были направлены для дополнительного обследования и коррекции лечения. У 50 больных АГ была выявлена впервые и до обследования они не получали лечения. У 100 больных диагностирована АГ II стадии, они не получали гипотензивные препараты систематически, поскольку прерывали лечение самостоятельно при улучшении самочувствия. АГ III стадии имелась у 100 больных, которые постоянно длительно принимали гипотензивную терапию. После обследования всем больным АГ была назначена показанная лекарственная терапия, преимущественно ингибиторы АПФ, антагонисты кальция, бета-адреноблокаторы, антагонисты рецепторов ангиотензина II, диуретики. Дозы лекарственных препаратов подбирались индивидуально.

Больные стабильной стенокардией напряжения II-III ФК (109) госпитализировались в стационар для коррекции лечения. Последнее включало назначение нитратов, аспирина, бета – адреноблокаторов, пролонгированных антагонистов кальция, ингибиторов АПФ, статинов. На фоне лекарственной терапии 40 больным СС был проведен курс ежедневных сеансов внутривенной лазеротерапии с помощью аппарата “ALOK-1” (длина волны 0,633 нм при выходной мощности на торце световода 1 мВт). Плазмаферез с восполнением объема циркулирующей крови плазмозамещающими средствами был назначен в количестве 3-4 сеансов через день 20 больным СС.

В стационар с диагнозом ОКС поступило 146 больных (мужчин – 80, женщин – 66, средний возраст 66,1 года). В последующем нестабильная стенокардия была диагностирована у 52 больных, у 43 выявлен мелкоочаговый инфаркт миокарда, у 51 - крупноочаговый. Последний у 5 больных осложнился отеком легких, у 4 - кардиогенным шоком, у 1 - разрывом стенки левого желудочка. Сложные нарушения ритма и проводимости наблюдались у 28 пациентов. Больным были назначены наркотические и ненаркотические анальгетики, тромболитики, антиагреганты и антикоагулянты, нитраты, ингибиторы АПФ, бета – адреноблокаторы и др. Лекарственные средства вводили перорально, внутримышечно и внутривенно струйно и/или капельно.

Обследовано 216 больных постинфарктным кардиосклерозом, осложненным ХСН. Они были распределены на 3 подгруппы (согласно классификации ХСН ОССН, Беленков Ю.Н. и соавт., 2002). В первую вошли 60 больных ХСН I стадии , во вторую – 90 больных IIА стадии, в третью – 60 пациентов IIБ стадии. Больные ХСН имеющие проявления почечной недостаточности в исследование не включались. Всем пациентам проводилась показанная лекарственная терапия: ингибиторы АПФ, антагонисты альдостерона, диуретики, бета-адреноблокаторы, антагонисты к рецепторам ангиотензина II, сердечные гликозиды и др. При этом у больных ХСН I стадии количество принимаемых лекарств в среднем составило 4,6 препарата, у больных ХСН IIА стадии - 6,4, у больных ХСН IIБ стадии - 9,6. Клиническое состояние больных и эффект проводимой терапии оценивали по шкале ШОКС (модификация Мареева В.Ю., 2000).

Обследовано 48 больных МА, у них клиническая картина заболевания соответствовала I-IIА стадии ХСН. Они получали антиаритмические препараты 1-й, 2-й, 3-й или 4-й группы, антиагреганты и другие медикаментозные средства по показаниям. Количество лекарственных препаратов составило в среднем 3,8.

^ Контингент группы сравнения. Обследовано 73 больных острой пневмонией (мужчин - 37, женщин - 36, средний возраст 45,0 лет), 50 реконвалесцентов после пневмонии (50; мужчин - 27, женщин - 24, средний возраст 46,3 года); 73 пациента с обострением гнойно-обструктивного бронхита (мужчин - 48, женщин - 25, средний возраст 46,3 года); 54 больных с обострением ЯБДПК (мужчин - 37, женщин - 17, средний возраст 34,6 года); 39 больных (мужчин - 30, женщин - 9, средний возраст 47,3 года) с обострением хронического панкреатита; 108 пациентов со злокачественными новообразованиями (мужчин - 68, женщин - 40, средний возраст 58,8 года); 108 больных (мужчин - 59, женщин - 49, средний возраст 31,0 год) с диагнозом ВИЧ-инфекции. У 44 (40,7%) больных диагностирована 3-я стадия заболевания, у 64 (59,3%) – 4-я (согласно Клинической классификации ВИЧ-инфекции, приказ МЗ СР РФ от 17 марта 2006 г. № 166).Все больные получали показанную противовирусную лекарственную терапию (согласно рекомендациям ФНМЦ СПИД, 2006).

Методы исследования. Всем обследованным выполнялся клинический анализ крови на автоматическом гематологическом анализаторе «Cobas Micros-18 OT» (Hoffmann– La Roche, ABX) и проводилось изучение феномена АРО в периферической крови. Подсчет эндогенных ауторозеток (Бельченко Д.И., 1990) в крови проводили с помощью световой микроскопии (микроскоп «БИОЛАМ», ув. 7х90). У здоровых лиц проводили забор капиллярной крови однократно, тогда как у больных, как правило, двукратно: при первом контакте и при выписке из стационара, а также при развитии осложнений. Забор капиллярной крови проводили в стандартных условиях. Мазки крови окрашивали по Романовскому-Гимзе. Проводили подсчет ауторозеток на 100 лейкоцитов. Определяли нейтрофильные ауторозетки, моноцитарные, эозинофильные, базофильные и тромбоцитарные. За ауторозетку принимали клеточную ассоциацию, состоящую из лейкоцита и плотно прилегающих к нему 3-х и более эритроцитов. Учитывали ауторозетки с экзоцитарным лизисом. Подсчет ауторозеток проводили в относительном (%) и абсолютном (109/л) количестве. Количество розеткообразующих клеток подсчитывали от общего числа лейкоцитов, розеткообразующую способность клеток от их общего числа (в процентах).

Фотографирование мазков крови проводили посредством цифрового компьютерного микрофотографирования через лабораторный микроскоп «БИОЛАМ С-11» с цифровой насадкой (ув.х100).

^ Оценка морфологии эритроцитов. Морфологическое исследование эритроцитов проводилось с помощью световой микроскопии при увеличении х90 с использованием масляной иммерсии. Подсчитывалось количество измененных эритроцитов в 10 микроскопических полях зрения в различных участках мазка крови, сумму клеток делили на 10 и получали среднее количество эритроцитов с измененной формой и размером. Оценку структурно-функциональной характеристики мембран эритроцитов проводили по классификации, предложенной В.Н.O'Conner (1984). Проводился расчет морфологического индекса обратимости (Кидалов В.Н., 1986, Назаров С.Б., 1995): ИО = ОД%/НД% (ОД – обратимо деформированные эритроциты, НД – необратимо деформированные эритроциты).

^ Электронная микроскопия. Изучение АРО проводилось с помощью электронной микроскопии (Тверская ГМА, ВНИИ СБ). Кровь забирали в стандартных условиях самотеком из вены в раствор глютарового альдегида. Ультратонкие срезы изготавливались на ультратоме УМТП-6 («SEO», г. Сумы) и наносились на палладиевые сеточки без подложки. Контрастирование ультратонких срезов проводили насыщенным раствором уранилацетатата на 70% растворе этилового спирта в течение 30 мин, затем отмывали их в 0,025% растворе NaOH и в дистиллированной воде в течение 3-х мин. Фографирование проводили с помощью электронного микроскопа ЭВМ-100 («SEO», г. Сумы, увеличение от 10 до 30 тысяч). Также ультратонкие срезы изготавливались на ультратоме LKB-5 после прокрашивания 3% уранилацетатом и затем цитратом свинца (ВНИИ СБ.) с последующим просмотром и фотографированием с помощью электронного микроскопа «Hitachi» (Н-500, Япония, увеличение от 10 до 35 тысяч).

^ Исследование функционального состояния эритроцитов и лейкоцитов. Исследование крови проводили в клинико-диагностической лаборатории ГОУ ВПО «Тверская ГМА» Росздрава.

^ Диаметр эритроцитов. Диаметр эритроцитов определяли микроскопическим методом.

Деформируемость эритроцитов. Деформируемость эритроцитов исследовали фильтрационным методом по модифицированной методике (заявка на изобретение № 2009140672 от 06.11.2009). За основу был взят метод, предложенный сотрудниками Ленинградского НИИ гематологии и переливания крови (патент 2000117531 «Способ оценки деформируемости эритроцитов», 1989 г.).

^ Осмотическая резистентность эритроцитов. Осмотическую резистентность эритроцитов изучали в изотоническом (0,9%) и в гипотоническом растворе (0,45%) NaСl фотометрическим методом (метод Идельсона Л.И., 1974, в модификации Горшковой М.А. и соавт., 2008).

^ Сорбционная способность эритроцитов. Сорбционную способность эритроцитов исследовали колориметрическим методом при длине волны 620 нм, по модифицированной методике А.А. Тогайбаева и соавт. (1987) с расчетными формулами, предложенными И.В. Гавриловым и соавт. (1998).

Фагоцитоз. Оценивали поглотительную и переваривающую способность фагоцитов с определением фагоцитарного числа и фагоцитарного индекса через 30 и 120 мин. после инкубации их с бактериальной взвесью. Использовали микроскопический метод подсчета фагоцитирующих клеток.

НСТ-тест. Метаболическую активность лейкоцитов исследовали после окраски их 0,25% раствором нитросинего тетразолия.

^ Содержание иммуноглобулинов – А, М, G определяли радиальным методом иммунодиффузии по Манчини (1964).

Полимеразная цепная реакция. У больных ВИЧ-инфекцией для подсчета концентрации вируса в крови (число копий вирусной РНК в 1 мл плазмы) использовали метод количественной полимеразной цепной реакции.

^ Содержание СД4 - лимфоцитов (количество клеток в 1 мкл у здоровых лиц равно 800-1200) подсчитывали с помощью моноклональных антител к СД-антигенам в реакции иммунной флюоресценции с учетом результатов на проточном цитофотометре (норма 70-85%).

^ Подсчет количества «нулевых клеток» проводился методом спонтанного розеткообразования.

Оценка микроциркуляции. У больных АГ (75) проведена ультразвуковая непрерывно–волновая допплерография микроциркуляторного русла в области ногтевого валика пальца кисти на аппарате «Минимакс-Допплер К». Использовался датчик с частотой излучения 25 МГц, лоцирующий скорость кровотока в ткани до глубины 3,5 мм. Проводилась качественная оценка формы сигнала, характерного для артериол. Измеряли показатели линейной скорости крови в артериолах: систолическую максимальную скорость кровотока (Vs см/с), среднюю скорость за средний цикл кровотока (Vm см/с), диастолическую максимальную скорость (Vd см/с). Полученные результаты были сравнены с показателями КГ (52 чел.).

^ Методы статистического анализа. Статистическую обработку результатов проводили с помощью пакета программы Miсrosoft Exel 06, Biostat, Statistica 5 for Windows XP Professional (Реброва О.Ю., 2002, Гринхальх Т., 2004). Данные представляли как среднее (М) ± стандартное отклонение (SD), рассчитывали 95% доверительный интервал (ДИ) для среднего значения. Проверка нормальности распределения данных проводилась с помощью критерия Шапиро-Уилка. При нормальном распределении для сопоставления данных в группах применяли параметрические методы (парный и непарный критерий Стъюдента для связанных и несвязанных выборок, при множественных сравнениях – дисперсионный анализ с поправкой Бонферрони; коэффициент линейной корреляции Пирсона, непараметрический критерий χ2 с поправкой Йетса на непрерывность). При ненормальном распределении применяли непараметрические методы (χ2 – критерий, критерий Крускела-Уоллиса, корреляционный анализ по Спирмену). Достоверность различий между группами определялась при уровне безошибочного прогноза более 95% (р<0,05).

Исследование проводилось в соответствии с действующим в настоящее время руководством ICH по Доброкачественной клинической практике, согласно принципам биоэтики. Терапия проводилась на основе информированного согласия больного согласно п. 4.6.1. Приказа № 163 (ОСТ 91500.14.0001-2002) МЗ РФ.


Результаты исследования и их обсуждение

^ 1. Эндогенное ауторозеткообразование в периферической крови у практически здоровых лиц

Результаты исследования показали, что у обследованных в процессе диспансерного наблюдения (1-я группа) в периферической крови регистрировалось в среднем 7,54 ауторозетки (на 100 лейкоцитов). Экзоцитарный лизис наблюдался в 28,8% ауторозетках. Преобладали нейтрофильные (84%) ауторозетки, реже отмечались моноцитарные (13%), как исключение отмечались эозинофильные (0,9%), базофильные (0,2%) и тромбоцитарные (1,9%) ауторозетки. Отмечено, что у юношей (8,34) регистрировалось число ауторозеток больше, чем у девушек (6,74; р=0,001). В этой группе обследованных число ауторозеток статистически значимо ассоциировалось с наличием у них хронических заболеваний (рχ2 =0,001), аллергических реакций (рχ2 =0,008) и выявлением у родственников сердечно-сосудистых заболеваний (рχ2 =0,034).

У учащихся медицинского колледжа (2-я группа) в периферической крови отмечалось в среднем 9,38 ауторозеток (на 100 лейкоцитов). Экзоцитарный лизис наблюдался в 6,6% ауторозетках. Преобладали нейтрофильные ауторозетки (88%), реже отмечались моноцитарные (8,2%), значительно реже эозинофильные ( 2,2%), базофильные (0,05%) и тромбоцитарные (1,6%). В этой группе обследованных статистически значимая ассоциация обнаружена между числом ауторозеток и частотой перенесенных острых заболеваний и обострения хронических (рχ2=0,001), приемом лекарственных препаратов (рχ2=0,001) и поливитаминов (рχ2=0,001), аллергических реакций (рχ2=0,041), курения (рχ2=0,008) и наличия у родственников АГ (рχ2=0,014), сахарного диабета (рχ2 =0,013), злокачественных новообразований (рχ2=0,04). Статистически значимая отрицательная корреляционная связь обнаружена между числом ауторозеток и количеством эритроцитов (r=-0,28; р=0,03).

У обследованных маляров (3-я группа) количество ауторозеток было 38,4 (на 100 лейкоцитов). Экзоцитарный лизис наблюдался в 57% ауторозетках. Преобладали нейтрофильные ауторозетки (69,0%), реже отмечались моноцитарные (14,6%), эозинофильные (1%), базофильные (0,62%) и тромбоцитарные (0,62%). Число ауторозеток повышалось со стажем работы (r=0,32; р=0,016). При этом отмечалось уменьшение количества эритроцитов (r=-0,26; р=0,04), концентрации гемоглобина (r=-0,30; р=0,017) и числа лимфоцитов (r=-0,28; р=0,033). Обследованные 3-й группы были разделены на 2 подгруппы по уровню гемоглобина (соответственно 115 г/л и выше и ниже 115 г/л). Оказалось, что со снижением уровня гемоглобина уменьшалось количество эритроцитов и увеличивалось число ауторозеток (до 47,0, р=0,001) и ауторозеток с лизисом (до 22,0; р=0,001).

Из большого числа лиц, поступающих на работу, была отобрана 4-я группа. Они не подвергались воздействию экзогенных и эндогенных факторов, не имели острых и обострения хронических заболеваний на момент обследования и не принимали лекарственных препаратов, поливитаминов, биологических добавок. В периферической крови у них отмечались единичные ауторозетки (0,75 на 100 лейкоцитов). Экзоцитарный лизис эритроцитов наблюдался в 53% ауторозеток. Выявлялись лишь нейтрофильные (81%) и моноцитарные (19%) ауторозетки. У 10 (10%) обследованных ауторозетки в периферической крови не регистрировались. Показатели АРО в этой группе были приняты за эталон (контрольная группа; КГ).

Следует отметить, что во всех группах обследованных лимфоциты в процессе АРО не участвовали и наибольшей розеткообразующей способностью обладали моноциты.

Таким образом, установлено, что у практически здоровых лиц, не подвергавшихся воздействию эндогенных и экзогенных факторов, в периферической крови выявляются единичные нейтрофильные и моноцитарные ауторозетки. Под влиянием острых заболеваний и обострения хронических, при возникновении аллергических реакций, приеме лекарственных препаратов и витаминов, воздействии токсических веществ интенсивность АРО в крови отчетливо увеличивается, появляются эозинофильные, базофильные и тромбоцитарные ауторозетки, а при повышении активности эритродиереза отмечается уменьшение количества эритроцитов и концентрации гемоглобина в крови.

  1   2   3

Ваша оценка этого документа будет первой.
Ваша оценка:

Похожие:

Эндогенное ауторозеткообразование в периферической крови и его клиническое значение при заболеваниях сердечно-сосудистой системы 14. 01. 05 кардиология icon «Сестринский процесс при заболеваниях сердечно-сосудистой системы»
Цель лекции: Знать основные проявления при заболеваниях сердечно-сосудистой системы; особенности...
Эндогенное ауторозеткообразование в периферической крови и его клиническое значение при заболеваниях сердечно-сосудистой системы 14. 01. 05 кардиология icon Проблемы гипоксии при заболеваниях сердечно-сосудистой системы. Применение препарата Гипоксен при

Эндогенное ауторозеткообразование в периферической крови и его клиническое значение при заболеваниях сердечно-сосудистой системы 14. 01. 05 кардиология icon Исследование сердечно-сосудистой системы
Важнейшие клинические синдромы при заболеваниях сердечно-сосудистой и дыхательной систем
Эндогенное ауторозеткообразование в периферической крови и его клиническое значение при заболеваниях сердечно-сосудистой системы 14. 01. 05 кардиология icon 6. Болезни сердечно-сосудистой системы, иммунной системы и системы крови Заболевания сердечно-сосудистой

Эндогенное ауторозеткообразование в периферической крови и его клиническое значение при заболеваниях сердечно-сосудистой системы 14. 01. 05 кардиология icon Козлова Елена Александровна клиническое значение состояния интралейкоцитарной микробицидной системы

Эндогенное ауторозеткообразование в периферической крови и его клиническое значение при заболеваниях сердечно-сосудистой системы 14. 01. 05 кардиология icon Неотложные состояния при заболеваниях сердечно-сосудистой системы

Эндогенное ауторозеткообразование в периферической крови и его клиническое значение при заболеваниях сердечно-сосудистой системы 14. 01. 05 кардиология icon Ремоделирование миокарда и функциональные резервы сердечно-сосудистой системы при ревматических заболеваниях

Эндогенное ауторозеткообразование в периферической крови и его клиническое значение при заболеваниях сердечно-сосудистой системы 14. 01. 05 кардиология icon Клинико-электрофизиологические и психологические параллели при заболеваниях сердечно-сосудистой системы

Эндогенное ауторозеткообразование в периферической крови и его клиническое значение при заболеваниях сердечно-сосудистой системы 14. 01. 05 кардиология icon Клиническое значение показателей микробицидной системы лейкоцитов и фибронектина плазмы крови при

Эндогенное ауторозеткообразование в периферической крови и его клиническое значение при заболеваниях сердечно-сосудистой системы 14. 01. 05 кардиология icon Примерный перечень медицинских услуг по данной нозологии с учетом индивидуального подбора Заболевания

Разместите кнопку на своём сайте:
Медицина


База данных защищена авторским правом ©MedZnate 2000-2016
allo, dekanat, ansya, kenam
обратиться к администрации | правообладателям | пользователям
Документы