Диагностическое и прогностическое значение исследования полиморфизма гена интерлейкина-1β при хронической обструктивной болезни легких 14. 01. 04 внутренние болезни
|
|
Скачать 290.33 Kb.
|
|
На правах рукописи МАРТИРОСЯН Елена Феликсовна ДИАГНОСТИЧЕСКОЕ И ПРОГНОСТИЧЕСКОЕ ЗНАЧЕНИЕ ИССЛЕДОВАНИЯ ПОЛИМОРФИЗМА ГЕНА ИНТЕРЛЕЙКИНА-1β ПРИ ХРОНИЧЕСКОЙ ОБСТРУКТИВНОЙ БОЛЕЗНИ ЛЕГКИХ 14.01.04 – внутренние болезни АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук АСТРАХАНЬ – 2012 Работа выполнена в Государственном бюджетном образовательном учреждении высшего профессионального образования «Астраханская государственная медицинская академия» Минздравсоцразвития России ^ д.м.н., профессор Полунина Ольга Сергеевна Официальные оппоненты: Заслуженный деятель науки РФ, д.м.н., профессор, заведующий кафедрой поликлинической терапии лечебного факультета ГБОУ ВПО «Первый МГМУ им. И.М. Сеченова» Минздравсоцразвития России ^ д.м.н., профессор, заведующий кафедрой пропедевтики внутренних болезней с курсом ревматологии ГБОУ ВПО АГМА Минздравсоцразвития России ^ Ведущая организация: ГБОУ ВПО «Волгоградский государственный медицинский университет» Минздравсоцразвития России Защита состоится «___» ___________2012 г. в_____часов на заседании совета Д 208.005.01 по защите диссертаций на соискание учёной степени кандидата наук, на соискание учёной степени доктора наук при ГБОУ ВПО «Астраханская государственная медицинская академия» Минздравсоцразвития России (414000, г. Астрахань, ул. Бакинская, 121) С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ГБОУ ВПО АГМА Минздравсоцразвития России Автореферат разослан «______ » ________________ 2012 г. Учёный секретарь диссертационного совета, к.м.н., доцент Заклякова Л.В. ^ Актуальность проблемы. Хроническая обструктивная болезнь легких (ХОБЛ) – распространенное заболевание системы дыхания у человека, являющееся одной из основных причин нетрудоспособности, инвалидности, значительно снижающее качество жизни пациентов и занимающее четвертое место среди причин смерти в промышленно развитых странах (А.Г. Чучалин, 2009). Одной из ведущих причин летальности больных ХОБЛ является сердечно – сосудистая патология. В настоящее время ХОБЛ рассматривается как заболевание дыхательных путей и легких с системными проявлениями. При ХОБЛ в наибольшей степени проявляется тесная анатомическая и функциональная связь сердца и легких. Кардиоваскулярные нарушения, поэтому являются наиболее обсуждаемыми из экстрапульмональных эффектов ХОБЛ (Чичерина Е.Н., 2006, Авдеев С.Н., 2007; Кароли Н.А., 2007) . Среди генов-кандидатов при ХОБЛ рассматриваются и гены медиаторов воспаления – цитокинов. На сегодняшний день описан полиморфизм генов многих цитокинов, отмечено влияние различных вариантов генов на свойства и функционирование белков продуктов их экспрессии. Показано, что варианты генов цитокинов ассоциированы с восприимчивостью к аутоиммунным, аллергическим и инфекционным заболеваниям, особенностью и тяжестью течения, а также с повышенным или, наоборот, пониженным содержанием продуцируемых цитокинов (Joos L., Pare P., Sanford A., 2002, Янчина Е.Д., 2004, Ходжаянц Н.Е., 2004, Ивчик Т.В. с соавт., 2004, Сеитова Г.Н., 2005 г., Ахмадшина Л.З., 2007 г., Веселовская М.В., 2007 г.). Работ по изучению ассоциации генетических маркеров с характером течения ХОБЛ не много. В литературе отсутствуют работы по исследованию ассоциации генетических маркеров с формированием сердечно – сосудистых осложнений у больных ХОБЛ. ^ Совершенствование методов диагностики и прогнозирования особенностей течения ХОБЛ на основе изучения полиморфизма С+3953Т гена интерлейкина-1β у лиц русской национальности, проживающих на территории Астраханской области. Задачи исследования 1. Определить уровень провоспалительного цитокина интерлейкина-1β в сыворотке и характер распределения аллельных вариантов гена интерлейкина-1β у практически здоровых и больных ХОБЛ в зависимости от пола, фактора курения, степени тяжести заболевания, частоты рецидивов. 2. Определить уровень провоспалительного цитокина интерлейкина-1β в сыворотке и характер распределения аллельных вариантов гена интерлейкина-1β у больных ХОБЛ в зависимости от наличия осложнений (ЛГ, хроническое легочное сердце, хроническая дыхательная недостаточность). 3. Определить уровень провоспалительного цитокина интерлейкина-1β в сыворотке и характер распределения аллельных вариантов гена интерлейкина-1β у больных ХОБЛ в зависимости от наличия сочетанной сердечно – сосудистой патологии (артериальная гипертония, ИБС) и состояния внутрисердечной и периферической гемодинамики. 4. Провести анализ ассоциации уровня интерлейкина-1β и полиморфных вариантов С+3953Т гена интерлейкина-1β с показателями липидного спектра крови. ^ Впервые с привлечением современных методов исследования изучена связь полиморфных вариантов гена ИЛ-1β у больных ХОБЛ русской национальности, проживающих на территории Астраханской области, с формированием заболевания и характером его течения. У больных ХОБЛ выявлены ассоциации характера распределения полиморфизма С+3953Т гена ИЛ-1β и уровня ИЛ-1β в крови с показателями, характеризующими состояние сердечно – сосудистой системы и периферической гемодинамики. Разработан алгоритм прогнозирования формирования артериальной гипертонии у больных ХОБЛ с учетом полиморфизма гена ИЛ-1β. ^ Проведенное комплексное исследование по изучению уровня провоспалительного цитокина ИЛ-1, полиморфизма гена ИЛ-1, состояния сердечно – сосудистой системы с оценкой внутрисердечной и периферической гемодинамики у больных ХОБЛ позволяет формировать группы риска по развитию сердечно – сосудистой патологии у больных ХОБЛ, что в свою очередь обеспечивает своевременное проведение адекватных профилактических мероприятий и, тем самым, уменьшает количество госпитализаций (частота госпитализаций по поводу сердечно – сосудистых заболеваний у пациентов ХОБЛ выше, чем при обострении самой ХОБЛ). ^ 1. Аллельные варианты гена интерейкина-1β ассоциированы с уровнем интрелейкина-1β в крови у больных хронической обструктивной болезнью легких. 2. Полиморфные варианты гена интерлейкина-1β (+3953С/Т) определяют риск формирования тяжелой и крайне тяжелой степени тяжести и брохитической формы хронической обструктивной болезни легких. 3. Носительство генотипа +3953СТ гена интерлейкина-1β является важным фактором предрасположенности к развитию легочной гипертензии и артериальной гипертонии у больных ХОБЛ русской национальности, проживающих на территории Астраханской области. 4. Низкий показатель микроциркуляции у больных ХОБЛ ассоциируется с носительством генотипов +3953СТ и ТТ гена интерлейкина-1β. ^ Основные положения диссертации опубликованы в Астраханском медицинском журнале (2012); Кубанском научном медицинском вестнике (2011). Материалы диссертации представлены на 92 и 93 межвузовских конференциях (Астрахань, 2010-2011); на Национальных Конгрессах по болезням органов дыхания (Москва, 2010; Уфа, 2011); Национальном конгрессе кардиологов (Москва, 2011); Национальном конгрессе терапевтов (Москва, 2011). Ведущие аспекты диссертации обсуждались на заседаниях кафедры внутренних болезней педиатрического факультета, кафедры госпитальной терапии с курсом функциональной диагностики, кафедры восстановительной медицины и лечебной физкультуры, кафедры нормальной физиологии и анатомии при ГБОУ ВПО АГМА Минздравсоцразвития России. ^ Диссертация выполнена в соответствии с планом НИР ГБОУ ВПО «Астраханская государственная медицинская академия» Минздравсоцразвития России в рамках комплексно-целевой программы «Хроническая обструктивная болезнь легких: генетические, иммунологические и функциональные критерии прогнозирования течения заболевания и эффективности проводимой терапии». Номер государственной регистрации №01201174980 – ЦМТИС г. Москва. Публикации По теме диссертации опубликовано 14 работ, две из которых представлены в журналах, рекомендуемых ВАК РФ. ^ Диссертационная работа изложена на 146 страницах машинописного текста и состоит из введения, обзора литературы, характеристики групп наблюдения и методов исследования, четырех глав собственных исследований и заключения, выводов и практических рекомендаций. Текст иллюстрирован 24 таблицами и 14 рисунками, дополнен двумя клиническими примерами. Указатель литературы содержит 270 источников, из них 154 – отечественных и 116 – зарубежных. ^ В практику работы ГБУЗ АО «ГКБ № 4 имени В.И. Ленина» г. Астрахани внедрено проведение комплексного клинико-лабораторно-функционального обследования больных ХОБЛ с целью раннего прогнозирования формирования сердечно – сосудистой патологии. Теоретические положения диссертации используются в учебном процессе на кафедре восстановительной медицины и лечебной физкультуры ГБОУ ВПО АГМА. ^ МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ В исследование было включено 90 больных, находящихся на лечении в пульмонологическом отделении ГБУЗ АО «ГКБ № 4 имени В.И. Ленина» г. Астрахани в связи с обострением хронической обструктивной болезни легких в течение 2009-2011 гг., и 30 практически здоровых лиц. Протокол исследования был одобрен Региональным Независимым Этическим комитетом при ГБОУ ВПО «Астраханская государственная медицинская академия», протокол №3 заседания РНЭК от 15.03.2010 года. От всех больных и лиц контрольной группы было получено информированное согласие на участие в данном исследовании. Диагноз ХОБЛ и стадии заболевания устанавливался с использованием материалов «Глобальной стратегии диагностики, лечения и профилактики хронической обструктивной болезни лёгких». Критерии включения: больные ХОБЛ, как при наличии, так и при отсутствии сопутствующей ишемической болезни сердца (ИБС) и артериальной гипертензии. Средний возраст обследованных больных составил 62,91,1 года. Средняя длительность заболевания – 17,50,9 лет. Средний индекс курения составил 32,62 пачка/лет. Бактериальные агенты были выделены из мокроты в 61,1% случаев (у 55 больных). Микст-инфекция выявлена в 20% случаев (11 больных). По типам обострения ХОБЛ, согласно классификации N.R. Anthonisen, больные распределились: I тип имел место у 46,7% больных (42 человека), II тип – у 42,2% больных (38 человек) и III тип – у 11,1% больных (10 человек). Согласно данным спирографии, 25 больных ХОБЛ имели II стадию, 37 больных - III стадию и 28 больных – IV стадию заболевания. У 19 больных ХОБЛ сочеталась со стабильной стенокардией II функционального класса, у 17 – со стабильной стенокардией III функционального класса. 12 больных в прошлом перенесли инфаркт миокарда. Средняя длительность ИБС составила 7,60,5 года. У 18 больных при наличии ИБС имела место и АГ. Для оценки тяжести ХСН использовали классификацию Нью-Йоркской ассоциации кардиологов. Все пациенты с ХОБЛ получали стандартные схемы лечения, предусмотренные GOLD (пересмотра 2008 года). Программа обследования включала общеклинические клинико-лабораторные и инструментальные исследования и специальные методики. С – реактивный белок плазмы крови определяли методом твердофазного иммунометрического анализа в исследуемом образце с использованием оборудования: NycoCard READER II (Норвегия), набора для определения СРБ in vitro. Изучение параметров, отражающих структурно – функциональное состояние сердца проводили методом эхокардиографии на ультразвуковом сканере «Vivid 7» (GE Vingmed Ultrasound AS, Норвегия) в одномерном (М), двумерном (В) режимах и в режиме допплер – эхокардиоскопии (частота датчика 3,5 МГц) по стандартной методике. Состояние микроциркуляции оценивалось с помощью метода лазерной допплеровской флоуметрии (ЛДФ) на аппарате ЛАКК-02, производства «Лазма» (г. Москва). Определение ИЛ-1β в сыворотке крови проводили иммуноферментным методом с использованием коммерческих наборов реагентов ProCon IL-1β (производства ООО «Протеиновый контур», Санкт-Петербург, Россия) в соответствии с прилагаемой инструкцией. Генетическое исследование для определения полиморфизма гена ИЛ-1 выполнялись в лаборатории пренатальной диагностики наследственных болезней Института Акушерства и гинекологии имени Д.О. Отта (г. Санкт-Петербург). Статистическая обработка данных проводилась при помощи программы STATISTICA 7.0, Stat Soft, Inc. ^ На первом этапе исследования была определена частота встречаемости полиморфизма С+3953T гена ИЛ-1β в группе больных ХОБЛ и у практически здоровых лиц. Частоты генотипов в группе больных ХОБЛ составили: сс – 63 (70%), сt - 24 (26,7%), tt - 3 (3,3%), в группе практически здоровых лиц: сс – 18 (60%), ct – 11 (36,7%), tt - 1 (3,3%). Частоты аллелей в группе больных ХОБЛ составили: c – 150 (83,3%), t – 30 (16,7%), в группе практически здоровых: с – 47 (78,3%), t – 13 (21,7%). Наблюдаемое распределение частот генотипов не отличалось от теоретически ожидаемого по уравнению Харди-Вайнберга. У больных ХОБЛ и практически здоровых лиц жителей г. Астрахани преобладал гомозиготный генотип С/СС. Различия между больными ХОБЛ и практически здоровыми по частоте генотипов и аллелей были статистически не значимы (χ2=1,03, df=2, р=0,311 и χ2=0,76, df=1, р=0,382 соответственно). Таким образом, данные проведенного исследования свидетельствуют об отсутствии ассоциации полиморфного локуса С+3953Т гена интерлейкина-1β с риском развития ХОБЛ у жителей г. Астрахани. Нами определена частота встречаемости полиморфизма С+3953Т гена ИЛ-1β в группах добровольцев и больных ХОБЛ в зависимости от пола, возраста и статуса курения. Различия между мужчинами и женщинами в группе больных ХОБЛ по частоте генотипов и аллелей были статистически не значимы (χ2=0,25, df=2, р=0,880 и χ2=0,01, df=1, р=0,941 соответственно). Статистически значимых отличий по частоте генотипов в зависимости от возраста и статуса курения не выявлено. При изучении связи уровня ИЛ-1β с генотипами и аллелями изучаемого полиморфизма выявлены достоверные (р<0,001) различия в уровне ИЛ-1β в крови у обследованных практически здоровых лиц и больных ХОБЛ с различными генотипами по полиморфизму С+3953Т гена ИЛ-1β (табл. 1). Таким образом, на основании полученных данных можно предположить, что полиморфизм С+3953Т гена ИЛ-1β не вносит существенного вклада в общую подверженность к ХОБЛ у населения г. Астрахани. Лица, имеющие аллель t в гетерозиготном или гомозиготном состоянии, имеют более высокий уровень ИЛ-1β в крови. Таблица 1 Уровень интерлейкина-1β (пг/мл) (M±SD) в крови у практически здоровых лиц и больных ХОБЛ с различным генотипом по полиморфизму С+3953Т гена интерлейкина-1β
Представляет интерес изучение вклада провоспалительных цитокинов наряду с генами-модификаторами иммунного ответа в формирование характера течения ХОБЛ. Обнаружены статистически значимые различия в распределении генотипов у больных ХОБЛ 2 и 3-ей стадиями (χ2=7,1, df=2, p=0,029) и 2 и 4 стадиями (χ2=7,1, df=2, p=0,029). Только у больных с 3 и 4 стадией ХОБЛ выявлялся генотип tt. Частота генотипа ct у больных с 3 и 4 стадией ХОБЛ была выше, чем у больных со 2 стадией. Показатель отношения шансов, определяющий риск развития тяжелой и крайне тяжелой стадии ХОБЛ, у носителей генотипов сt и tt составил 7,19 (χ2=6,59, df=1, p=0,01). Распределение частот аллелей полиморфного локуса С+3953Т гена ИЛ-1β у больных с разной стадией ХОБЛ представлено в таблице 2. Выявлены статистически значимые различия в распределении аллелей у больных ХОБЛ 2 и 3-ей стадиями (χ2=6,11, df=1, p=0,013) и 2 и 4 стадиями (χ2=5,56, df=1, p=0,018). Показатель отношения шансов, определяющий риск развития тяжелой и крайне тяжелой стадии ХОБЛ, у носителей аллеля t составил 6,0, 95% доверительный интервал 1,44-25,09 (χ2=5,94, df=1, p=0,015). Таблица 2 Распределение частот аллелей полиморфного локуса С+3953Т гена интерлейкина-1β у больных ХОБЛ с разной стадией заболевания (абс/частота)
Проведенный анализ показателей спирографии у больных с различным генотипом полиморфного локуса С+3953Т гена ИЛ-1β свидетельствует о достоверно более низких значениях ОФВ1, индекса Тиффно и мгновенных объемных скоростях выдоха (МОС) в группе пациентов с генотипами сt и tt. Уровень ИЛ-1β в крови у больных ХОБЛ составил 96,2±51,5 пг/мл, что статистически значимо (р<0,001) выше, чем у практически здоровых лиц - 15,2±4,2 пг/мл. В качестве верхней границы нормы уровня ИЛ-1β в крови нами рассматривался показатель М+2s доноров, который составил 23,6 пг/мл. Разница в уровне ИЛ-1β в крови между группами была статистически значимой: критерий Краскела-Уоллиса Н-55,4 р<0,001, разница между II и III стадией, между II и IV стадией, между III и IV стадией также была значимой (р<0,001). Содержание ИЛ-1β отрицательно коррелировало с показателем ОФВ1 и индексом Тиффно (r=-0,74 р=0,0001 и r=-0,61, р=0,0001). Был проведен сравнительный анализ частот генотипов и аллелей полиморфизма С+3953Т гена ИЛ-1β у больных с бронхитической и эмфизематозной формой ХОБЛ (рисунок 1). Обнаружено статистически значимое увеличение лиц носителей генотипов сt и tt и аллеля t у больных ХОБЛ с бронхитической формой заболевания по сравнению с эмфизематозной. Показатель отношения шансов, определяющий риск развития бронхитической формы ХОБЛ у носителей генотипов сt и tt, составил 8,77 (χ2=4,09, df=1, p=0,043), а у носителей аллеля t – 8,14 (χ2=4,26, df=1, p=0,039).  ^ Отмечена тенденция к увеличению лиц носителей генотипов ct и tt среди больных ХОБЛ с часто рецидивирующим течением заболевания. Согласно полученным данным полиморфизм С+3953Т гена ИЛ-1β оказывает определенное влияние на особенности клинического течения ХОБЛ. Пациенты-носители генотипов сt и tt склонны к тяжелой и крайне тяжелой степени тяжести заболевания и формированию бронхитического типа ХОБЛ. Нами проведен анализ распределения полиморфизма С+3953Т гена ИЛ-1β у больных ХОБЛ в зависимости от наличия ЛГ, ХЛС и сопоставлены результаты молекулярно – генетического исследования с показателями структурно – функционального состояния правых отделов сердца. Имели место статистически значимые различия в распределении генотипов по полиморфизму С+3953Т гена ИЛ-1β у больных ХОБЛ без ЛГ и с присоединившейся ЛГ (c2=6,74, df=2, р=0,034). В распределении аллелей по полиморфизму С+3953Т гена ИЛ-1β у больных ХОБЛ в зависимости от наличия ЛГ статистически значимые различия не выявлены (c2=2,74, df=1, р=0,098). Показатель отношения шансов, определяющий риск развития легочной гипертензии при ХОБЛ, у носителей генотипов сt и tt составил 5,4, 95% доверительный интервал 1,22-24,01 (χ2=4,27, df=1, p=0,039). Больные ХОБЛ с наличием и отсутствием ХЛС не отличались по распределению генотипов и аллелей изучаемого полиморфизма гена ИЛ-1β. При исключении на данном этапе из исследования пациентов с ассоциированной сердечно – сосудистой патологией было получено, что у больных ХОБЛ с генотипом сс имели место достоверно более низкие показатели среднего давления в легочной артерии и общего легочного сопротивления, чем у носителей других генотипов (сt+tt): 25,0 мм рт. ст. против 31,1 мм рт. ст., р=0,036 и 361,5 против 500,3, р=0,044, соответственно. Известно, что у пациентов ХОБЛ ранним признаком функционального ремоделирования правого желудочка является наличие его диастолической дисфункции. Среди обследованных в целом больных ХОБЛ диастолическая дисфункция правого желудочка выявлена у 40 пациентов (44,4%). При этом у 19 человек была III стадия заболевания, а у 21 – IV. Не выявлено статистически значимых различий в распределении характера диастолической функции правого желудочка у больных ХОБЛ в зависимости от наличия сердечно – сосудистых заболеваний (c2=3,8, df=3, р=0,283). При анализе распределения частот генотипов по полиморфизму С+3953Т гена ИЛ-1β в целом в группе больных ХОБЛ в зависимости на наличия или отсутствия диастолической дисфункции правого желудочка выявлены статистически значимые различия (c2=5,4, df=1, р=0,021). Среди больных ХОБЛ с диастолической дисфункцией правого желудочка преобладала лица с генотипом ct или tt. Среди больных ХОБЛ без ЛГ повышенные уровни ИЛ-1β определены у 16 человек, что составило 76,2%, а при наличии ЛГ в 98,6% случаев (68 человек). Среди больных ХОБЛ без ХЛС повышенные уровни ИЛ-1β выявлены у 47 человек, что составило 88,7%, а при наличии ХЛС в 100% случаев. Средние значение ИЛ-1β в крови у больных ХОБЛ с ЛГ достоверно превышали показатели у больных без ЛГ (42,4 пг/мл против 110,6, р<0,0001). Средний уровень ИЛ-1β в крови у больных ХОБЛ с ХЛС составил 142,5±36,7 пг/мл, что статистически значимо (р<0,001) выше, чем у пациентов без ХЛС (65,4±33,9 пг/мл). Обнаружена прямая корреляционная зависимость между значениями ТПСПЖ, размерами правого предсердия, правого желудочка и уровнем ИЛ-1β в крови (r=0,64 р=0,0001, r=0,51, 0,63 р=0,00001, r=0,66 р=0,0001 соответственно). Установлена положительная корреляционная связь между уровнем ИЛ-1β в крови и значениями СрДЛА и ОЛС (r=0,74, р=0,0001, r=0,39, р=0,0001 соответственно).  ^ На основании клинических данных и показателя насыщения крови кислородом (SaO2) у 65 (72,2%) больных ХОБЛ диагностирована первая степень хронической дыхательной недостаточности (ХДН), у 25 (27,8%) - вторая. Был проведен сравнительный анализ частот генотипов полиморфизма С+3953Т гена ИЛ-1β у больных с различной степенью хронической дыхательной недостаточности (рис. 2). Не выявлено статистически значимых различий в распределении генотипов у больных ХОБЛ с различной степенью ХДН (р=0,292, c2=2,46, df=2). Не выявлено достоверных различий и в среднем уровне показателя насыщения крови кислородом у больных ХОБЛ с различными генотипами полиморфного локуса С+3953Т гена ИЛ-1β. Выявлены статистически значимые различия (критерий Манн-Уитни Z=5,2 р=0,001) в среднем уровне ИЛ-1β в крови в зависимости от степени ХДН. У больных с ХДН I степени уровень ИЛ-1β в крови составил 51,7±32,2 пг/мл, а при II степени – 112,4±47,7 пг/мл. Уровень ИЛ-1β отрицательно коррелировал с показателем SaО2 (r=-0,55 р=0,0001). Таким образом, на фоне ХОБЛ формирование легочной гипертензии ассоциировано с носительством генотипов сt или tt гена провоспалительного цитокина ИЛ-1β (С+3953Т). Не выявлено ассоциации полиморфизма С+3953Т гена ИЛ-1β с показателями структурно-функционального ремоделирования миокарда правого желудочка у больных ХОБЛ. Таблица 3 Распределение частот аллелей полиморфного локуса С+3953Т гена интерлейкина-1β у больных ХОБЛ в зависимости от наличия артериальной гипертонии (абс/частота)
Одной из задач данной работы являлось изучение особенностей распределения генотипов при сочетанной патологии: ХОБЛ и сердечно – сосудистые заболевания. Выявлены статистически значимые различия в распределении частот генотипов по полиморфизму С+3953Т гена ИЛ-1β между группой больных ХОБЛ с ассоциированной АГ и без АГ. Обнаружено статистически значимое увеличение лиц носителей аллеля t среди больных ХОБЛ при наличии АГ (таблица 3). Показатель отношения шансов, определяющий риск развития АГ при ХОБЛ у носителей генотипа сt составил 4,28, 95% доверительный интервал 1,6-11,3 (c2=7,45, df=1, р=0,001), а у носителей аллеля t – 2,52, 95% доверительный интервал 1,16-5,48 (c2=4,41, df=1, р=0,036). Не выявлено статистически значимых различий в распределении генотипов по полиморфизму С+3953Т гена ИЛ-1β межу больными ХОБЛ с ассоциированной АГ и группой практически здоровых лиц. У больных ХОБЛ с АГ частота генотипов составила: сс – 20 (54,1%), сt – 16 (43,2%), tt -1 (2,7%), у практически здоровых: cc – 18 (60%), ct – 11 (36,4%), tt – 1 (3,3%) (c2= 0,3, df=2, р=0,859). В настоящей работе не обнаружено ассоциации полиморфизма С+3953Т гена ИЛ-1β со степенью АГ с ХОБЛ. Вместе с тем, у больных ХОБЛ, имеющих генотип сt, отмечены достоверно более высокие средние показатели диастолического артериального давления 93,8±8,9 мм рт. ст., чем у носителей других генотипов 87,6±7,7 мм рт. ст. (р=0,031). Различий в распределении генотипов по полиморфизму С+3953Т гена ИЛ-1β у больных ХОБЛ в зависимости от наличия или отсутствия ИБС не было. Средний уровень ИЛ-1β в группах больных ХОБЛ с АГ, ИБС и при наличии сочетанной патологии был достоверно выше, чем у больных без ассоциированной сердечно – сосудистой патологии (р=0,037, р=0,025, р=0,003 соответственно). Отмечено достоверное преобладание носителей генотипа сс среди пациентов с нормальной диастолической функцией левого желудочка (р=0,016). Не выявлено статистически значимых различий в распределении генотипов по изучаемому полиморфному локусу у больных ХОБЛ в зависимости от наличия систолической дисфункции левого желудочка (c2=2,44, df=2, р=0,295). При сравнении основных параметров структурно-функционального состояния левых отделов сердца по данным эхокардиоскопии в группе больных ХОБЛ с ассоциированной сердечно – сосудистой патологией с различными генотипами полиморфного локуса С+3953Т гена интерлейкина-1β достоверных различий не выявлено. По результатам ЛДФ-тестирования у больных отмечено снижение показателей ПМ, СКО и ALF по мере нарастания тяжести заболевания. По данным корреляционного анализа у больных ХОБЛ выявлено наличие положительной достоверной связи умеренной силы между ПМ и ОФВ1 (r=0,49, р=0,0001), индексом Тиффно (r=0,29, р=0,005), SaO2 (r=0,35, р=0,001). Был проведен анализ показателей ЛДФ-тестирования у больных ХОБЛ в зависимости от наличия ХЛС и ассоциированной сердечно – сосудистой патологии. У больных с ассоциированной сердечно – сосудистой патологией имели место достоверно более низкие показатель микроциркуляции (р=0,04) и СКО (р=0,02). Выявлены статистически значимые различия в распределении гемодинамических типов микроциркуляции у больных ХОБЛ в зависимости от стадии заболевания (c2=31,1, df=8, р=0,0001). С увеличением стадии заболевания возрастало количество лиц, имеющих патологические гемодинамические типы микроциркуляции. Стазический гемодинамический тип встречался только у лиц с III и IV степенью тяжести ХОБЛ. При наличии у больных ХОБЛ АГ и ИБС выявлялись более выраженные нарушения микроциркуляции, характерные для таких неблагоприятных гемодинамических типов, как застойный и стазический. Среди больных ХОБЛ, как без сердечно – сосудистой патологии, так и при ее наличии, выявлены статистически значимые различия в распределении гемодинамических типов микроциркуляции в зависимости от наличия легочного сердца (c2=19,2, df=4, р=0,0007 и c2=26,3, df=4, р=0,00003 соответственно). Преобладающим гемодинамическим типом микроциркуляции у больных с легочным сердцем без сердечно – сосудистой патологии был застойный (выявлен в 68,8% случаев), а при сочетании с АГ и/или ИБС – застойный и стазический (выявлены в 45% случаев каждый). При одинаковой степени тяжести заболевания больных ХОБЛ со стазическим гемодинамическим типом микроциркуляции имели достоверно (р<0,05) более высокий уровень ИЛ-1β в сыворотке крови. Полученные данные свидетельствуют о нарастании нарушений в системе периферической гемодинамики по мере прогрессирования ХОБЛ, а также о взаимосвязи показателей периферической гемодинамики и неспецифического воспаления. У лиц-носителей генотипа ct и tt полиморфного локуса С+3953Т гена ИЛ-1β больных ХОБЛ отмечено достоверно более высокие показатели СОЭ. Выявлены достоверные различие в частоте положительного теста на СРБ в крови у больных ХОБЛ без ИБС и при ее наличии (c2=4,37, df=1, р=0,031). Статистически значимых различий в показателях липидного обмена у больных ХОБЛ с различными генотипами по полиморфизму С+3953Т гена ИЛ-1β не выявлено. Для прогнозирования формирования осложнений и сердечно – сосудистой патологии у больных ХОБЛ использовалась логистическая регрессия – метод максимального правдоподобия. Вероятность события (Р) для конкретного пациента рассчитывается по формуле: Р = 1/1+е-z, где е – математическая константа равная 2,72; Z= а+b1X1+b2X2+b3X3+bnXn; а – константа; b1 – коэффициент переменной; Х1 – значение переменной. Таблица 4 Значение константы и коэффициентов переменных для расчета вероятности формирования артериальной гипертонии у больных ХОБЛ
Если значение р получается меньше 0,5 то можно предположить, что событие не наступит, в противном случае предполагается наступление события. Число объектов исследования для прогнозирования формирования артериальной гипертонии у больных ХОБЛ составило 72. В качестве независимых признаков использовали: пол, холестерин, генотип по полиморфизму С+3953Т гена ИЛ-1β (наличие генотипа сс или сt+tt). Значение р для модели в целом составило 0,0001, c2=38,2. Было показано, что данный набор переменных делает прогноз наиболее тонным (точность предсказания 79,2%). В таблице 4 представлены рассчитанные значения коэффициентов b и константы а для расчета вероятности формирования артериальной гипертонии. Подставив в формулу логистической регрессии полученные константу, коэффициенты переменных и значения переменной, мы получаем возможность прогнозировать вероятность формирования артериальной гипертонии у больных ХОБЛ. ВЫВОДЫ 1. Встречаемость полиморфных С+3953Т вариантов гена интерлейкина-1β у больных ХОБЛ русской национальности жителей Астраханской области существенно не отличается от группы здоровых. Преобладающим является гомозиготный генотип С/СС. 2. Содержание интерлейкина-1β в крови у больных ХОБЛ отрицательно коррелируют с показателем ОФВ1 и индексом Тиффно (r=-0,74 и r=-0,61). Вариант тяжелого, крайне тяжелого течения и брохитического типа ХОБЛ ассоциируется с наличием в геноме пациента аллеля Т и генотипов СТ и ТТ в промоторной зоне гена интерлейкина-1β +3953, сцепленного с высоким уровнем продукции этого провоспалительного цитокина. 3. Уровень интерлейкина-1β в крови достоверно коррелирует с значениями среднего давления в легочной артерии, общего легочного сопротивления, толщины передней стенки правого желудочка, размерами правого предсердия, правого желудочка (r=0,74; r=0,39; r=0,64; r=0,51, 0,63; r=0,66 соответственно). Пациенты ХОБЛ с признаками легочной гипертензии достоверно чаще (р=0,034) имели генотип +3953С/T гена интерлейкина-1β. 4. Выявлено достоверное (р=0,003) нарастание уровня интерлейкина-1β в крови у больных ХОБЛ с ассоциированной сердечной патологией. Риск развития артериальной гипертензии среди больных ХОБЛ повышен у носителей генотипа С/Т (отношение шансов 4,28). Не обнаружено ассоциации полиморфизма С+3953Т гена интерлейкина-1β со степенью артериальной гипертонии, выраженностью гипертрофии миокарда левого желудочка и наличием ишемической болезни сердца. 5. Характер и степень выраженности нарушений микроциркуляции зависят от стадии ХОБЛ, наличия легочного сердца и ассоциированной сердечно – сосудистой патологии. У больных ХОБЛ, имеющих сt и tt генотип полиморфного С+3953Т локуса гена интерлейкина-1β, определяется достоверно более низкий показатель микроциркуляции. 6. Установлены достоверные корреляционные связи между уровнем интерлейкина-1β, холестерином и липопротеидами низкой плотности в крови у больных ХОБЛ (r=0,33 и r=0,30). Статистически значимых различий в показателях липидного обмена у больных ХОБЛ с различными генотипами по полиморфизму С+3953Т гена интерлейкина-1β не выявлено. ^ 1. В обследование больных ХОБЛ целесообразно включать динамическое исследование уровня интерлейкина-1β в крови, состояния внутрисердечной и периферической гемодинамики по данным эхокардиоскопии и лазерной допплеровской флоуметрии для объективизации тяжести состояния пациентов. 2. Типирование полиморфных маркеров С+3953Т гена интерлейкина-1β позволяет выявить среди пациентов с ХОБЛ группы больных с предрасположенностью к более тяжелому течению заболевания. 3. Используя разработанный алгоритм прогнозирования течения ХОБЛ, на любой стадии заболевания возможно предсказание вероятности развития артериальной гипертензии, что важно для своевременной коррекции протоколов ведения больных. ^ в научных изданиях, рекомендованных ВАК РФ 1. Полиморфизм генов провоспалительных цитокинов при хронической обструктивной болезни легких, ассоциированных с сердечно – сосудистой патологией / Т.А. Уклистая, О.С. Полунина, Х.М. Галимзянов, Е.Ф. Мартиросян // Кубанский научный медицинский вестник. – 2011. – № 6 (129). – С. 169-173. 2. Полиморфизм генов провоспалительных цитокинов и особенности течения хронической обструктивной болезни легких/ Т.А. Уклистая, О.С. Полунина, Х.М. Галимзянов, Е.Ф. Мартиросян, Н.В. Никифорова // Астраханский медицинский журнал. – 2011. – Т. 6, № 3. – С. 132-135. Список остальных работ по теме диссертации 3. Структура госпитализированных больных хронической обструктивной болезнью легких / Т.А. Уклистая, О.С. Полунина, Е.Ф. Мартиросян, Х.Ш. Адыкова, А.Н. Никешина // Труды АГМА. Актуальные вопросы современной медицины. – Том 41 (LXV). – Астрахань, 2010. – С. 129-130. 4. Полиморфизм гена интерлейкин-1β при хронической обструктивной болезни легких / Е.Ф. Мартиросян, Т.А. Уклистая, О.С. Полунина, Л.П. Воронина, Л.Н. Хилова // Труды АГМА. Актуальные вопросы современной медицины. – Том 41 (LXV). – Астрахань, 2010. – С. 130-131. 5. Ассоциация полиморфизма генов провоспалительных цитокинов с формой хронической обструктивной болезни легких / Е.Ф. Мартиросян, Т.А. Уклистая, О.С. Полунина, Е.А. Галиуллина, В.А. Хапугина // Материалы XX Национального конгресса по болезням органов дыхания. – Москва, 2010. – С. 463. 6. Вклад полиморфизма генов провоспалительных цитокинов в формирование ИБС у больных хронической обструктивной болезнью легких / Т.А. Уклистая, О.С. Полунина, Е.А. Галиуллина, Е.Ф. Мартиросян, Л.Н. Хилова // Материалы XX Национального конгресса по болезням органов дыхания. – Москва, 2010. – С. 464. 7. Генетические детерминанты тяжелого течения хронической обструктивной болезни легких / Т.А. Уклистая, Е.Ф. Мартиросян, Г.Т. Гусейнов, Е.А. Галиуллина, А.Ю. Гуськова // Труды АГМА. Актуальные вопросы современной медицины. – Том 42 (LXV1). – Астрахань, 2011. – С. 125-126. 8. Кардиоваскулярная патология при хронической обструктивной болезни легких / Т.А. Уклистая, Г.Т. Гусейнов, О.С. Полунина, Е.А. Галиуллина, Е.Ф. Мартиросян, А.Ю. Гуськова // Российский национальный конгресс кардиологов. Приложение 1 к журналу "Кардиоваскулярная терапия и профилактика". – № 10 (6). – Москва, 2011. – С. 733. 9. Влияние генетических полиморфизмов на развитие сердечной недостаточности при хронической обструктивной болезни легких / Т.А. Уклистая, Е.Ф. Мартиросян, А.Ю. Гуськова, О.С. Полунина, Г.Т. Гусейнов, Е.А. Галиуллина // Российский национальный конгресс кардиологов. Приложение 1 к журналу "Кардиоваскулярная терапия и профилактика". – № 10 (6). – Москва, 2011. – С. 734. 10. Цитокиновый и антиоксидантный статус при хронической обструктивной болезни легких / Г.Т. Гусейнов, Т.А. Уклистая, Е.Ф. Мартиросян, Е.А. Галиуллина, О.С. Полунина // Материалы XXI Национального конгресса по болезням органов дыхания. – Уфа, 2011. – С. 409. 11. Генетические детерминанты артериальной гипертонии при хронической обструктивной болезни легких / Е.Ф. Мартиросян, А.Ю. Гуськова, О.С. Полунина, Т.А. Уклистая, Е.А. Галиуллина // Материалы X съезда кардиологов и кардиохирургов южно – федерального округа. – Краснодар, 2011. – С. 143-145. 12. Комплексный анализ полиморфизма генов провоспалительных цитокинов и антиоксидантной защиты при хронической обструктивной болезни легких / Г.Т. Гусейнов, Е.Ф. Мартиросян, Т.А. Уклистая, Е.А. Галиуллина, О.С. Полунина // Материалы VI Национального конгресса терапевтов. – Москва, 2011. – С. 225. 13. Полиморфизм гена интерлейкина 1 С3953Т и состояние сердечно - сосудистой системы у больных хронической обструктивной болезнью легких / Е.Ф. Мартиросян, Т.А. Уклистая, Е.А. Полунина // Актуальные проблемы кардиологии детей и взрослых-2011 (материалы межрегиональной НПК с международным участием). – Астрахань, 2011. – С. 144-147. 14. Взаимосвязь между микроциркуляторными нарушениями, активностью воспаления и оксидативным стрессом при хронической обструктивной болезни легких / Е.Ф. Мартиросян, Г.Т. Гусейнов, Т.А. Уклистая, Н.В. Никифорова, О.С. Полунина // Материалы Всероссийского научно – образовательного форума «Кардиология 2012». – Москва, 2012. – С. 101. ^ ALF – амплитуда низкочастотных колебаний капиллярного кровотока АГ – артериальная гипертензия ИБС – ишемическая болезнь сердца ИЛ-1β – интерлейкин-1β ЛГ – легочная гипертензия ЛДФ – лазерная допплеровская флоуметрия ЛЖ – левый желудочек ОЛС – общее легочное сопротивление ПМ – показатель микроциркуляции СКО – среднее квадратическое отклонение амплитуды колебаний кровотока от среднего арифметического значения СрДЛА – среднее давление в легочной артерии ТПСПЖ – толщина передней стенки правого желудочка ХДН – хроническая дыхательная недостаточность ХЛС – хроническое легочное сердце ХОБЛ – хроническая обструктивная болезнь легких МАРТИРОСЯН Елена Феликсовна ДИАГНОСТИЧЕСКОЕ И ПРОГНОСТИЧЕСКОЕ ЗНАЧЕНИЕ ИССЛЕДОВАНИЯ ПОЛИМОРФИЗМА ГЕНА ИНТЕРЛЕЙКИНА-1β ПРИ ХРОНИЧЕСКОЙ ОБСТРУКТИВНОЙ БОЛЕЗНИ ЛЕГКИХ 14.01.04 – внутренние болезни АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук Подписано в печать. Тираж 100 экз. Заказ № Издательство ГБОУ ВПО «Астраханская государственная медицинская академия» Минздравсоцразвития России 414000 г. Астрахань, ул. Бакинская, 121 |
Ваша оценка этого документа будет первой.
Ваша оценка:
Похожие:
База данных защищена авторским правом ©MedZnate 2000-2016
allo, dekanat, ansya, kenam
обратиться к администрации | правообладателям | пользователям
allo, dekanat, ansya, kenam
обратиться к администрации | правообладателям | пользователям