Ученый секретарь
|
|
Скачать 0.7 Mb.
|
|
Примечание: * - различия с контрольной группой достоверны, p< 0,05; ** - то же, p < 0,01, Т-тест Стьюдента. # - различия с данными «до начала лечения» достоверны, p< 0,05; ## - то же, p < 0,01, парный Т-тест Стьюдента. Количество пациентов в группах: лечение мазевой формой с IL-1 (50 нг/мл) n = 36, контроль n= 15.  Рисунок 10. Влияние применения мазевой формы IL-1 (50 нг/мл) на фагоцитоз нейтрофилов в раневом очаге, приведено фагоцитарное число. Примечание: * p< 0,05 – различия с контрольной группой достоверны, ** p < 0,01, Т-тест Стьюдента. # p< 0,05 ## p < 0,01 – различия с данными «до начала лечения» достоверны, парный Т-тест Стьюдента. Количество пациентов в группах: мазевая форма IL-1 - n = 22, контроль - n = 17. На 3-и сутки применения мазевой формы IL-1 происходило увеличение показателей спонтанной продукции супероксидных радикалов по сравнению с исходными значениями и контрольной группой (p<0,05). Особенно выраженным являлось усиление фагоцитарной функции нейтрофилов, которое наблюдалось на 3-и и 7-е сутки лечения (рис. 10). Усиление процессов фагоцитоза после применения IL-1 обеспечивало очищение раны от некротических тканей и микроорганизмов, что в дальнейшем, предохраняло рану от развития вторичной инфекции. Известно, что IL-1 обладает способностью опосредованно стимулировать функции нейтрофилов. Показано, что преинкубация нейтрофилов человека с IL-1 усиливает способность лейкоцитов отвечать на другие стимулы, повышая продукцию супероксидных радикалов и вызывая усиление фагоцитоза (Ogle J.D., et al., 1990; Yagisawa M., 1995). Клиническое изучение действия мазевой формы IL-1 во 2 и 3 фазах раневого процесса было проведено у 70 пациентов. Мазевая форма, содержащая 50 нг/мл IL-1 (применение изучено у 43 пациентов) была признана оптимальной для клинического применения, так как в ранах синхронно протекали процессы образования грануляционной ткани и эпителизации. При использовании данной концентрации цитокина, в среднем в 1,4 раза увеличивалась скорость заживления ран, эпителизация ран начиналась раньше на сутки по сравнению с контролем. Уменьшение размеров раны в 2 раза отмечено у 12 пациентов (27,9%) в течение от 7 до 14 суток. Полное заживление ран в течение 2 – 4 недель наблюдали у 6 пациентов (14%). В контрольной группе (21 пациент) полной эпителизации ран в течение 14 суток не наблюдали, а уменьшение размеров раны в 2 раза было только у 2 пациентов (9,5%). Как следует из полученных данных, при применении мазевой формы IL-1 усиливались как репаративные процессы в ранах, так и происходило повышение функций фагоцитов, что способствовало успешному заживлению ран. Поэтому, использование мазевой формы IL-1, цитокина с широким спектром биологического действия, с нашей точки зрения, является перспективным направлением для лечения хронических ран у человека. ^ IL-1 был успешно применен для локальной терапии пациентов с бактериальными гнойными абсцессами легких, ХГРС, а также с флегмонами ЧЛЛ, у которых проведенная стандартная терапия была неэффективной. Рекомбинантный IL-1b человека в концентрациях 10-20 нг/мл вводили в верхнечелюстные пазухи носа 93 пациентам с ХГРС. Группу сравнения составили 30 пациентов с ХГРС, получавших обычное лечение с применением антибиотиков (контрольная группа). Иммунологические исследования проводили до начала лечения (на 1 сутки), на 2 сутки проведения терапии и после курса лечения (на 7 сутки) у 57 случайным образом отобранных пациентов. Исследование цитологического состава и функций нейтрофилов в содержимом верхнечелюстных пазух носа проведено при терапии IL-1β (41 человек) и у 16 человек, которым проводили стандартную терапию, на 1, 2 и 7 сутки лечения. После окончания курса IL-1β на 7 сутки происходило увеличение доли эпителиальных клеток по сравнению с группой пациентов, получавших стандартную терапию (28,54 ± 5,63% и 13,73 ± 4,55%, соответственно, p<0,05), что свидетельствует о стихании воспалительного процесса в пазухах носа. После первого введения IL-1b (2 сутки) и после курса (на 7 сутки) увеличивался фагоцитарный индекс по сравнению с данными до начала лечения (рис. 11). После окончания курса применения IL-1β (на 7 сутки) показатели фагоцитарного числа были значительно выше, чем после курса стандартной терапии. Проводили измерение уровней провоспалительных цитокинов IL-1a, IL-1b, IL-6 и IL-8 в содержимом пазух носа до и после лечения. Исследование проведено в группе пациентов, которым вводили 10 нг/мл IL-1b (n=17). Контрольная группа состояла из 19 человек, получавших обычное лечение. IL-1a не был выявлен ни в одном случае. Концентрации эндогенного IL-1b снижались практически у всех пациентов с ХГРС на 7 сутки после проведенного лечения. После одного введения IL-1b (на 2 сутки)  Рисунок 11. Влияние IL-1b на фагоцитоз нейтрофилов в содержимом верхне-челюстных пазух у пациентов с ХГРС, фагоцитарное число. ** - p<0,01, различия достоверны по сравнению с контролем. IL-1β n=41, контроль (обычное лечение), n=16.  Рисунок 12. Уровни IL-6 в содержимом верхнечелюстных пазух у пациентов с ХГРС в ходе терапии IL-1b (10 нг/мл). Примечание: * - различия достоверны по сравнению с данными до лечения 1 сутки, p<0,05, парный Т-тест Стьюдента. Контроль – обычное лечение. Таблица 5. Функции нейтрофилов периферической крови пациентов ХГРС до и после курса местной терапии IL-1β
Таблица 6. Продукция цитокинов клетками периферической крови пациентов ХГРС до и после терапии IL-1β
происходило повышение уровней IL-6 в содержимом пазух по сравнению с данными до лечения (рис. 12). В контрольной группе пациентов такого повышения не наблюдалось. Уровни IL-8 также повышались на 2 сутки терапии IL-1b в среднем в 2,3 раза по сравнению с группой контроля. Однако эти различия не были статистически значимыми из-за больших индивидуальных колебаний уровней IL-8 у разных пациентов. Источником провоспалительных цитокинов в респираторном тракте могут являться клетки эпителия, продуцирующие цитокины в ответ на инфекцию (Bedard M., et al., 1993 ; Inoue H., 1994 ; Khair O.A., et al., 1996). У пациентов с ХГРС было выполнено сравнительное исследование функциональной активности нейтрофилов (табл. 5) и продукции цитокинов (табл. 6) в периферической крови до и после местной терапии IL-1b, а также в контроле. Не было выявлено значительных различий между группами по данным показателям. Таким образом, действие IL-1b ограничивалось воспалительным очагом и не проявлялось в периферической крови. Положительная динамика иммунологических показателей проявлялась в клинических улучшениях показателей у пациентов с ХГРС. После применения IL-1b количество гноя в верхнечелюстных пазухах быстро снижалось, а клинические симптомы заболевания исчезали на более ранних сроках. Изучение местного действия L-1b было проведено при еще одной локализации бактериального гнойно-воспалительного процесса в респираторном тракте – при абсцессах легкого. Для того чтобы оценить влияние терапии IL-1β, на цитологическую картину в полости абсцесса было проведено исследование мазков содержимого полостей до и после проведенного лечения (табл. 10). До начала применения IL-1β нейтрофилы составляли около 90% всех клеток в полости абсцесса, макрофаги – около 6-7 %, количество лимфоцитов было незначительным. Результаты подтверждаются тем, что, как показано ранее, нейтрофилы представляют собой основной тип клеток в смывах из носовой полости, а также БАЛ у пациентов с острыми и хроническими заболеваниями различных отделов респираторного тракта (Ермаков Е.В. и др., 1990; Castella X., Artigos A., 1990; Munc G. et al., 1995). После курса лечения IL-1β происходило значительное увеличение количества макрофагов в очаге деструкции, что является признаком разрешения воспалительного процесса. В то же время, после обычного лечения доля макрофагальных клеток, наоборот, была даже ниже по отношению к исходным данным, что свидетельствует о продолжающемся гнойном воспалении. Сравнительный анализ функциональной активности нейтрофилов, полученных из периферической крови и полости деструкции у пациентов с абсцессами легких, включал оценку показателей на всех этапах фагоцитарной реакции (табл. 7). Исследованные функциональные показатели нейтрофилов, полученных из полости абсцесса, были значительно ниже, чем соответствующие показатели нейтрофилов крови. Эти результаты свидетельствуют о том, что нарушения функций нейтрофилов происходят, главным образом, локально в гнойно-деструктивном очаге. Эти результаты согласуются с ранее полученными результатами о том, что гнойно-деструктивные заболевания легких, такие как абсцессы легких, сопровождаются значительными нарушениями функций нейтрофилов БАЛ (Абишева А.Б. и др., 1991; Абишева А.Б., Козаченко Н.В., 1991; Шойхет Я.Н. и др., 1991). Таблица 7. Сравнительная оценка функций нейтрофилов, полученных из полости деструкции и периферической крови у пациентов с абсцессами легких
Примечание: различия между данными в строках «полость абсцесса» и «кровь» достоверны, * - р < 0,05, ** p < 0,01 (n=22). Изучение влияния терапии IL-1β на функциональную активность нейтрофилов в очаге воспаления показало, что IL-1β оказывает наиболее выраженное действие на направленную миграцию и фагоцитоз. В течение курса применения IL-1β усиливалась направленная миграция к ФМЛП или к IL-8 нейтрофилов очага воспаления (табл. 8). Появление направленной миграции нейтрофилов к ИЛ-8 может быть связано с увеличением количества активных рецепторов к ИЛ-8 на поверхности нейтрофилов после начала применения ИЛ-1. В литературе имеются сообщения о том, что воспалительные медиаторы могут стимулировать экспрессию рецепторов к ИЛ-8 на поверхности нейтрофилов (Manna Sunil K. et al., 1995). После курса лечения IL-1β показатели миграции к ФМЛП превышали соответствующие показатели после обычного лечения. Как следует из данных, приведенных в таблице 9, локальное применение IL-1β оказывало значительное стимулирующее действие на фагоцитарную функцию нейтрофилов, полученных из очага деструкции. После проведенного курса терапии IL-1β значительно возрастали фагоцитарные индексы, и повышались значения фагоцитарного числа нейтрофилов. Таблица 8. Влияние применения IL-1β на показатели направленной миграции нейтрофилов у пациентов с абсцессами легких
Примечание: * - различия с группой «обычное лечение» достоверны, р< 0,05. + - -различия с показателями до лечения достоверны, р< 0,05. Количество пациентов в группах: IL-1β n=22, обычное лечение n=11. Таблица 9. Влияние применения IL-1β на показатели фагоцитарной функции нейтрофилов у пациентов с абсцессами легких
Примечание: различия с группой «обычное лечение» достоверны * - р< 0,05, ** - p < 0,01. –различия с показателями до лечения достоверны, + - р< 0,05, ++ - p < 0,01. Количество пациентов в группах: IL-1β n=22, обычное лечение n=11. Известно, что IL-1β не оказывает прямого активирующего действия на функции нейтрофилов в системе in vitro. Действие IL-1β может быть опосредованным за счет индукции других провоспалительных цитокинов, таких как, IL-8 и TNF-α. В связи с этим, было проведено исследование синтеза цитокинов лейкоцитами, полученными из полости абсцесса, у 12 случайным образом отобранных пациентов в динамике проводимой терапии IL-1β. Исследовали мазки, приготовленные из содержимого полостей абсцессов. Результаты приведены в таблице 11. IL-1β обнаруживался в цитоплазме Таблица 10. Динамика показателей цитологического состава в полости абсцесса до и после местной терапии рекомбинантным IL-1β человека
Примечание: * - различия с контролем достоверны, p < 0,05. Количество пациентов в исследуемых группах: IL-1β n = 22, обычное лечение n = 11. Таблица 11. Иммуноцитохимическое исследование продукции цитокинов клетками, полученными из полости абсцесса, в динамике терапии IL-1β
|
||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
Ваша оценка этого документа будет первой.
Ваша оценка:
Похожие:
База данных защищена авторским правом ©MedZnate 2000-2016
allo, dekanat, ansya, kenam
обратиться к администрации | правообладателям | пользователям
allo, dekanat, ansya, kenam
обратиться к администрации | правообладателям | пользователям