|
|
Скачать 0.73 Mb.
|
|
^
характерные для фенольных соединений реакции:
^ - на арбутин (сырье толокнянки и брусники) используют цветные качественные реакции:
Реакция основана на получении комплекса, изменяющего окраску от сиреневого до темного с дальнейшим образованием темно-фиолетового осадка.
Реакция основана на образовании комплексного соединения синего цвета.
![]() салидрозид азокраситель ^ Используется ТСХ для обнаружения простых фенольных соединений в сырье родиолы розовой (ГФ Х1, вып. 2, ст. 75, с. 364-366). Проба основана на разделении веществ в тонком слое силикагеля (пластинка «Силуфол») метанольного извлечения из сырья в системе растворителей хлороформ-метанол-вода (26:14:3) с последующим проявлением хроматограммы диазотированным сульфацилом натрия. Пятно салидрозида с Rf = 0,42 окрашивается в красноватый цвет. ![]() ^ Для количественного определения простых фенологликозидов в лекарственном растительном сырье используют различные методы: гравиметрические, титриметрические и физико-химические. 1. Гравиметрическим методом определяют содержание флороглюцидов в корневищах папоротника мужского. Метод основан на извлечении флороглюцидов из сырья диэтиловым эфиром в аппарате Сокслета. Извлечение очищают, отгоняют эфир, полученный сухой остаток высушивают и доводят до постоянной массы. В пересчете на абсолютно сухое сырье содержание флороглюцидов не менее 1,8%. ^ используется для определения содержания арбутина в сырье брусники и толокнянки. Метод основан на окислении агликона гидрохинона до хинона 0,1 М раствором йода в кислой среде и в присутствии натрия гидрокарбоната. Выделяют стадии определения:
![]() 3. Спектрофотометрический метод используется для определения содержания салидрозида в сырье родиолы розовой. Метод основан на способности окрашенного азокрасителя поглощать монохроматический свет при длине волны 486 нм. Стадии определения:
Содержание салидрозида не менее 0,8 %. 9. Качественное определение. Специфических реакций для всех групп флавоноидов не существует. Часто используют следующие качественные реакции и хроматографическое исследование: 1. Характерной реакцией на флавоноиды - Цианидиновая проба или проба Синода (проба Chinoda)(основана на восстановление их атомарным водородом в кислой среде в присутствии магния или цинка). Флавоноиды при восстановлении магнием или цинком в присутствии концентрированной хлористоводородной кислоты образуют красное окрашивание, обусловливаемое образованием антоцианидинов: ![]() хроменол ![]() цианидин хлорид Реакция очень чувствительна, основана на восстановлении карбонильной группы и образовании антоцианида. Халконы и ауроны при помощи цианидиновой реакции не обнаруживаются, но при добавлении конц. HCl (без магния) образуют красное окрашивание за счет образования оксониевых солей.
Реакция отличия флавоноидов от фуранохромонов. Флавоноиды дают комплексы с борной кислотой желтой окраски с желто-зеленой флюоресценцией, которые не разрушаются лимонной кислотой (образование батохромного комплекса): ![]() ^ 5-оксифлавоны и 5-оксифлавонолы, взаимодействуя с треххлористой сурьмой, образуют комплексные соединения, окрашенные в желтый или красный цвет: ![]()
Эта реакция приведена в ГФ Х1 изд. для подтверждения подлинности сырья зверобоя, горца перечного и птичьего. Аналогично образуются комплексы с солями циркония.
Антоцианидины дают синий аморфный осадок. Флавоны, халконы и ауроны – осадки ярко-желтого цвета.
8. С 1 %-м раствором ванилина в конц. HCl образуют красно-малиновое окрашивание катехины (производные флороглюцина и резорцина). 4. С раствором аммиака, щелочи флавоны, флаваноны, флавонолы, флаванонолы дают желтое окрашивание, при нагревании переходящее в оранжевое или красное; халконы и ауроны тотчас же дают красное или пурпурное окрашивание. Чистые катехины окрашивания не дают, однако присутствие даже в небольшом количестве примесей (продуктов окисления) вызывает появление желтой окраски. Антоцианы в присутствии аммиака или карбоната натрия дают синее или фиолетовое окрашивание. 5. С 1 %-м раствором ванилина в конц. HCl образуют красно-малиновое окрашивание катехины (производные флороглюцина и резорцина). 6. Флавоны, халконы, ауроны, содержащие свободные орто-гидроксильные группировки в кольце В, при обработке спиртовых растворов средним ук- суснокислым свинцом образуют осадки, окрашенные в ярко-желтый и красный цвета. Антоцианы образуют осадки, окрашенные как в красный, так и в синий цвета. 7. С 1-2 %-ным спиртовым раствором AlCl3 желто-зеленое окрашивание говорит о наличии флавоноидов. ^ используется хроматография на бумаге и в тонком слое сорбента, колоночная хроматография.Используют различные системы растворителей:
Обнаружение компонентов на хроматограмме осуществляется просматриванием их в УФ свете. Идентифицируют флавоноиды по характерному свечению на хроматограммах в УФ-свете и после проявления хромогенными реактивами. Катехины и лейкоантоцианиды не флюоресцируют. Гликозиды флавонов и изофлавонов флюоресцируют голубым или синим светом, флавонолов – темно-коричневым или черным, агликоны флавонов – коричневым, флавонолов – желтым, халконы и ауроны имеют желтую или оранжевую флюоресценцию. После просматривания в УФ свете хроматограммы можно обработать одним из реактивов: 1) 5 %-ным спиртовым раствором AlCl3 c последующим нагреванием при 105 0С в течение 3-5 минут; (ярко-желтая окраска пятна в видимом свете и яркую желто-зеленую флуоресценцию в УФ –свете); 2) с 5 %-ной SbCl3 в четыреххлористом углероде (реактив Мартини-Беттоло); Желтая или желто-оранжевая окраска указывает на наличие флавонов, флавонолов, флаванонов и изофлавонов;красная или красно-фиолетовая – халконов. 3) с 2 %-ным спиртовым раствором щелочи 4) при обработке пятна парами аммиака усиливается голубая флуоресценция (изофлавоноиды) что позволяет получить зоны с более яркой флуоресценцией в УФ свете. 5) Реактив Вильсона (раствор борной и б\в лимонной кислоты в б\в метаноле) 6) Реакция азосочетания – на наличие 7-оксифлаванолов, 7-оксиизофлаванолов. ^ С целью обнаружения флавоноидов в растительном материале широко используется хроматография на бумаге и в тонком слое сорбента. Обнаружение компонентов на хроматограмме осуществляется просматриванием их в УФ свете. При этом флавоны, флавонол-3-гликозиды, флаваноны, халконы и их 7-гликозиды – в виде желтых или желто-зеленых пятен; флавонолы и их 7-гликозиды – в виде желтых или желто-зеленых пятен; ксантоны в виде оранжевых пятен. Изофлавоны при этом не проявляются. После просматривания в УФ свете хроматограммы можно обработать одним из реактивов: 1) 5 %-ным спиртовым раствором AlCl3 c последующим нагреванием при 105 0С в течение 3-5 минут; (ярко-желтая окраска пятна в видимом свете и яркую желто-зеленую флуоресценцию в УФ –свете); 2) с 5 %-ной SbCl3 в четыреххлористом углероде (реактив Мартини-Беттоло); Желтая или желто-оранжевая окраска указывает на наличие флавонов, флавонолов, флаванонов и изофлавонов;красная или красно-фиолетовая – халконов. 3) с 2 %-ным спиртовым раствором щелочи 4) при обработке пятна парами аммиака усиливается голубая флуоресценция (изофлавоноиды) что позволяет получить зоны с более яркой флуоресценцией в УФ свете. Реактив Вильсона (раствор борной и б\в лимонной кислоты в б\в метаноле) 5) Реакция азосочетания – на наличие 7-оксифлаванолов, 7-оксиизофлаванолов. ^ В последние годы все большее распространение получают различные: 1. физико-химические методы анализа, которые имеют ряд существенных преимуществ в сравнении, например, с гравиметрическими и титрометрическими методами, а именно, быстрота и точность определения, обнаружение даже незначительных количеств и, что особенно важно, возможность выделения отдельных флавоноидов из растительного сырья. К таким методам относятся фотоэлектроколориметрия, спектрофотометрия, денситометрия с использованием хроматографии на бумаге и в тонком слое сорбента. ^ метода заключается в выделении и разделении флавоноидов с непосредственной количественной денситометрической оценкой окрашенной зоны на хроматограмме. Метод имеет преимущества в быстроте проведения анализа и точности определения, так как в данном случае исключается стадия элюирования. 2. фотоэлектроколориметрический метод, основанный на измерении оптической плотности окрашенных растворов, полученных в цветных реакциях флавоноидов с солями различных металлов (алюминия, циркония, титана, хрома, сурьмы), с лимонно-борным реактивом и на реакции восстановления цинком или магнием в кислой среде, в реакции азосочетания с солями диазония. ГФ Х1 издания дает ФЭК-метод для определения содержания суммы флавоноидов в листьях вахты трехлистной. Предварительно сырье очищают от хлорофилла хлороформом, получают спиртовое извлечение флавоноидов, затем измеряют оптическую плотность окрашенного раствора с помощью фотоэлектроколориметра. Содержание суммы флавоноидов рассчитывают по калибровочному графику, построенному по стандартному образцу рутина. Известна цветная реакция флавоноидов с азотнокислым и уксуснокислым уранилом, позволяющая количественно определять рутин в смеси с кверцитином. В настоящее время широко используется метод спектрофотометричекий. 3. Спектрофотометрический метод (СФМ) СФМ основан на способности флавоноидов или их окрашенных комплексов поглощать монохроматический свет при определенной длине волны.
3) Получают извлечение антоцианов 1 %-ным раствором хлористоводородной кислоты из цветков василька синего, при этом образуются окрашенные оксониевые соли, у которых измеряют оптическую плотность и пересчитывают на 3,5 дигликозид цианидина (цианин) с учетом удельного показателя поглощения цианина в 1 %-ном растворе хлористоводородной кислоты.
1. Предварительное разделение флавоноидов в тонком слое сорбента (цветки боярышника). Стадии определения: - получение спиртового извлечения;
- идентификация гиперозида и свидетеля на пластинках в УФ-свете; - элюирование гиперозида и ГСО смесью диоксана и воды 1:1; - измерение оптической плотности испытуемого раствора и ГСО при длине 565 им;
Стадии определения: - получают спиртовое извлечение;
- элюируют флавоноиды с колонки 95%-ным этанолом, собирают окрашенный в желтый цвет элюат в мерную колбу на 25 мл; - измеряют оптическую плотность элюата при длине волны 365 нм; - параллельно измеряют оптическую плотность элюата ГСО гиперозида, полученного аналогично элюату флавоноидов; - пересчитывают на гиперозид с учетом оптической плотности элюата ГСО гиперозида. 3. В траве сушеницы топяной выделяют следующие стадии количественного определения: - получают спиртовое извлечение;
- элюируют флавоноиды с колонки 95%-ным этанолом и собирают окрашенный в темно-желтый цвет элюат в мерную колбу на 50 мл; - измеряют оптическую плотность элюата при длине волны 338 нм; - параллельно определяют оптическую плотность раствора стандартного вещества сравнения (СОВС) калия бихромата; - пересчитывают на гнафалозид А с учетом оптической плотности СОВС и коэффициента пересчета калия бихромата на гнафалозид А и поправочного коэффициента на неполное элюирование гнафалозида А с полиамидного сорбента. 4. Количественное содержание ксантонов в траве золототысячника: - получают извлечение подкисленным 60%-ным этанолом;
- элюируют ксантоны 95%-м этанолом и собирают окрашенный в желтый цвет элюат в мерную колбу на 50 мл; - получают окрашенный комплекс с алюминия хлоридом; - измеряют оптическую плотность окрашенного комплекса; - параллельно измеряют оптическую плотность окрашенного комплекса ГСО алпизарина с алюминия хлоридом; - пересчитывают на алпизарин с учетом оптической плотности комплекса ГСО алпизарина с алюминия хлоридом. ^ В последние годы все большее распространение получают различные: 1. физико-химические методы анализа, которые имеют ряд существенных преимуществ в сравнении, например, с гравиметрическими и титрометрическими методами, а именно, быстрота и точность определения, обнаружение даже незначительных количеств и, что особенно важно, возможность выделения отдельных флавоноидов из растительного сырья. К таким методам относятся фотоэлектроколориметрия, спектрофотометрия, денситометрия с использованием хроматографии на бумаге и в тонком слое сорбента. ^ метода заключается в выделении и разделении флавоноидов с непосредственной количественной денситометрической оценкой окрашенной зоны на хроматограмме. Метод имеет преимущества в быстроте проведения анализа и точности определения, так как в данном случае исключается стадия элюирования. Используется фотоколориметрический метод, основанный на измерении оптической плотности окрашенных растворов, полученных в цветных реакциях флавоноидов с солями различных металлов (алюминия, циркония, титана, хрома, сурьмы), с лимонно-борным реактивом и на реакции восстановления цинком или магнием в кислой среде. Известна цветная реакция флавоноидов с азотнокислым и уксуснокислым уранилом, позволяющая количественно определять рутин в смеси с кверцитином. В настоящее время широко используется метод спектрофотометричекий. ^ Для обнаружения кумаринов в растительном сырье проводят качественные реакции и хроматографическое исследование, используя лактонные свойства кумаринов: - вступать в реакцию разрыва лактонного кольца (лактонная проба); - давать окрашенные растворы с диазосоединениями; - флуоресцировать в УФ-свете. |
![]() |
Семинара: основные принципы воздействия лазерного излучения на мягкие ткани свойства лазеров. Физические |
![]() |
Тема: Введение в предмет. Физико-химические свойства белков |
![]() |
Общий план строения интерфазного ядра. Нуклеоплазма. Физико-химические свойства. Значение |
![]() |
Плеоморфные саркомы: морфология, молекулярно-биологические и клинические свойства (14. 01. 12 онкология) |
![]() |
Задачи (для теоретической части) : Изучить биологические свойства стафилококка |
![]() |
Задачи (для теоретической части) : Изучить биологические свойства стафилококка |
![]() |
Тема: «Физические и биологические основы лучевой терапии. Основы дозиметрии. Физико-технические основы |
![]() |
1 Общие сведения 2 История 3 Физико-химические свойства 4 Биосинтез убихинона 5 Биохимическая роль |
![]() |
1. потребительские свойства товаров К ним относятся пищевая, биологическая, энергетическая, физиологическая ценность пищевых продуктов,... |
![]() |
Значительную роль в возникновении При кариесе отсутствуют самопроизвольные боли, а зуб реагирует на физические (холод, тепло), химические... |