|
|
Скачать 0.76 Mb.
|
На правах рукописиНИКОНОВА ЭЛЕОНОРА БОРИСОВНАФИЗИОЛОГИЧЕСКАЯ РЕАКТИВНОСТЬ НОРОК В ПОСТНАТАЛЬНОМ ОНТОГЕНЕЗЕ И ПУТИ ЕЕ КОРРЕКЦИИ 06.02.03 – звероводство и охотоведение 03.00.13 - физиология Автореферат диссертации на соискание ученой степени доктора биологических наук п. Родники Московской обл. - 2007 Работа выполнена в ГНУ Научно-исследовательский институт пушного звероводства и кролиководства имени В.А. Афанасьева и ФГОУ ВПО «Московская государственная академия ветеринарной медицины и биотехнологии им. К.И. Скрябина» Научные консультанты: доктор сельскохозяйственных наук, академик РАСХН, заслуженный деятель науки РФ ^ доктор биологических наук, профессор МАКСИМОВ ВЛАДИМИР ИЛЬИЧ Официальные оппоненты: доктор биологических наук ^ доктор биологических наук, профессор КИСЕЛЕВ АНДРЕЙ ЛЕОНИДОВИЧ доктор биологических наук, профессор ^ Ведущая организация: ГНУ Всероссийский научно-исследовательский институт охотоведения и звероводства Защита диссертации состоится « 4 » марта 2007 г. в 11 часов на заседании диссертационного совета Д 006.047.01 в ГНУ НИИПЗК им. В.А. Афанасьева по адресу: 140143, Московская область, Раменский район, пос. Родники, ул. Трудовая, 6 С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ГНУ НИИПЗК им. В.А. Афанасьева Автореферат разослан «____»______________ 2008 года Ученый секретарь диссертационного совета Н.Н. Лоенко ^ Актуальность проблемы. Все более очевидной становится важная и многообразная роль среди различных факторов, участвующих в регуляции и интеграции процессов роста и развития животного, иммунологических факторов, биологически активных веществ (витаминов и минеральных веществ в кормах) и их сбалансированности в рационе. С участием названных факторов реализуется наследственная информация, регуляция роста и развития, гомеостаз и продуктивность животных, в т.ч. пушных зверей (К.Б. Свечин, И.А. Аршавский, А.В. Квасницкий и др., 1967; В.Ф. Лысов, 1977, 1982, 1996; Ю.Н. Шамберев, 1978; А.И. Кузнецов, 1996; Р.В. Петров, 1989; В.И. Максимов, 1999, 2002, 2004; Н.А. Балакирев, 2001; В.А. Матвеев, 2001; Г.Г. Ефремов, 2004; В.А. Гудин, 2005; В.С. Григорьев, 2006; D. M. Donaldson et al, 1974; I. Thalnammer, 1978; T. Yang, 1981; R. Smith, 1988; L. Hope, 1989). Под многофакторным воздействием у пушных зверей, в частности у норок, за последние годы участились случаи возникновения и развития вторичных иммунодефицитов, снижения их иммунологической реактивности, на фоне которых резко снижаются товарные свойства шкурок норок. Одним из наиболее ощутимых неблагоприятных факторов является несбалансированное кормление. В последние годы существенно изменилась кормовая база звероводства: сократились доступность, ассортимент, питательная ценность и качество традиционных кормов, увеличилось количество нетрадиционных кормов, которые не могут равнозначно заменить полноценный животный белок, являющийся наиболее дорогостоящей и дефицитной частью рациона зверей. Поэтому зверохозяйства оказались поставлены в рамки кормления зверей несбалансированными рационами, которые приводят к развитию у них минеральной недостаточности. В этих условиях повсеместно ощущается все увеличивающаяся зависимость организма норок от искусственно созданной среды обитания (несбалансированное кормление и пр.). Вот почему необходимо совершенствовать ветеринарно-санитарное, технологическое обеспечение промышленного звероводства (норководства), а также физиолого-биохимический контроль над их ростом и развитием (Е.Д. Ильина, Г.А. Кузнецов, 1983; П.А. Емельяненко, 1985, 1987; К.А. Лебедев, 1986; Д.В. Стефании, 1987; М.З. Саидов, 1990; Н.А. Балакирев, 1995, 1997, 2001; Е.Г. Квартникова, 1999; S. Selle, 1972; A. Popesen, 1974, M. Pinder, 1981). В условиях целостного организма практически всегда неспецифические и иммунологические защитные реакции протекают сочетано, они взаимосвязаны не только во времени, но и по существу, например, температурная, воспалительная, фагоцитарная реакция и иммунный ответ. Причем, антигенный стимул вызывает в организме комплекс перестроек, включающих неспецифические компоненты: макрофагальную реакцию, пролиферацию клеток лимфоидного ряда, их дифференцировку, миграцию, нарушая обменные процессы (Р.Т. Маннапова, 1999; Е.В. Зинченко, А.Н., Панин, 2000; А.Н. Панин, Н.И. Малик, 2005; В.С. Григорьев, В.И. Максимов, 2006 и др.) Отсутствие подробного анализа процесса развития витаминно-минеральной недостаточности на фоне иммунологических сдвигов не позволяет дать основную информацию специалистам ветеринарного и зоотехнического профиля по использованию пробиотиков, микроэлементов и других биологически активных продуктов для профилактики вторичных иммунодефицитов животных и привлечь внимание к основным процессам, влияющим на эффективность комплексной иммунно - и пробиотикотерапии (Б.А. Шендеров, 1987; Г.И. Гончарова, 1989; Б.Ф. Бессарабов, А. Крыканов, И. Джозеф, 1996; Н.В. Гребенькова, 2001; З.З. Ильясова, 2002; Н.В. Данилевская, 2006; D. S. Clark, I. Takacs, 1980; I. F. Guillot, 1997; и другие). В настоящее время разработана «Концепция развития пушного звероводства России до 2010 года», в свете которой успешное разведение норок в клеточных условиях при резко изменившейся кормовой базе и получение от них пушнины хорошего качества возможно только при условии знания биологических особенностей и иммунобиологической реактивности зверей (Н.А.Балакирев и др., 2001). Вместе с тем, нет сведений об особенностях иммунологической реактивности норок, связанных с ростом и развитием зверей, на фоне нарушенного кормления и содержания. Нет данных по такому важному вопросу, как оптимальные концентрации витаминов для норок при их несбалансированном кормлении. Не определены своеобразия ферментного профиля, энзиматической активности у норок, естественного микробиоценоза кишечника при несбалансированном кормлении. Не обоснованы целесообразность применения некоторых биологически активных веществ в норководстве и влияние их на качество шкурок. В связи с этим вполне очевидна актуальность исследования физиологической реактивности норок и пути ее коррекции в разные сроки постнатального онтогенеза. ^ Цель работы – изучить в сравнительном аспекте и динамике состояние физиологического статуса норок в технологических условиях и в зависимости от возраста на фоне несбалансированного кормления, разработать и научно обосновать систему лечебно-реабилитационных и профилактических мероприятий с целью улучшения качества шкурок норок. Для достижения цели были поставлены следующие задачи: 1. Изучить естественную резистентность, иммунный статус, а также провести анализ структурных и функциональных изменений центральных и периферических органов иммуногенеза норок в разные сроки постнатального онтогенеза. 2. Изучить оптимальные концентрации витаминов при несбалансированном кормлении и установить возможность их регуляции у норок с возрастом. 3. Изучить минеральный обмен и энзиматическую активность организма норок в разные сроки постнатального онтогенеза на фоне несбалансированного кормления с коррекцией ферментов, участвующих в углеводном и белковом обмене. 4. Оценить естественный микробиоценоз кишечника при несбалансированном кормлении норок с возрастом и установить оптимальные способы его коррекции. 5. Обосновать целесообразность применения витаминно-минеральной подкормки в комплексе с пробиотиком и иммуномодулятором и определить качество шкурок норок на этом фоне. ^ Впервые на основе комплексной оценки естественной резистентности и иммунного статуса, иммуноморфологи-ческих и гистохимических реакций в центральных и периферических органах иммуногенеза, состояния витаминного, энзиматического, минерального обмена и микробиоценоза кишечника в организме норок с возрастом на фоне нарушения минерального баланса разработаны эффективные методы их коррекции и определены пути улучшения качества шкурок норок. Показана эффективность разных комбинаций применения исследованных препаратов и доказана целесообразность их использования для восстановительного процесса волосяного покрова и качества шкурок норок. Новизна этих исследований подтверждена патентом «Способ повышения естественной резистентности молодняка норок» № 2272405. Приоритет изобретения от 24 мая 2004 года. На основе системного исследования, разработанных теоретических положений и экспериментальных данных, проведен сравнительный анализ эффективности применения витаминно-минеральной подкормки с пробиотиком и иммунокорректором и установлено повышение качества шкурок норок, подтвержденное товарными свойствами, иммунологическими и иммунохимическими исследованиями. Разработана и внедрена в практику научно-обоснованная система наблюдения за здоровьем норок и качеством сырья. Установлен оптимальный вариант коррекции иммуногенеза, естественного микробиоценоза, витаминно-энзимно-минерального баланса при минеральной недостаточности у норок с возрастом. ^ На основе разработанных теоретических положений и экспериментальных исследова-ний, подтвержденных иммунологическими, иммуноморфологическими, гистологическими, микробиологическими исследованиями, разработана система коррекции минеральной недостаточности у норок в постнатальном онтогенезе. Для осуществления контроля над процессом восстановления качества волосяного покрова и качества шкурок норок в целом, отработана и предложена методика оценки иммунобиологической реактивности норок, которая вошла в Методические рекомендации «Определение иммунного статуса и естественной резистентности норок в процессе их роста и развития», утвержденные отделением ветеринарной медицины РАСХН, 2006 г. Результаты исследований по использованию препарата Витан (иммуномакс) вошли во "Временное наставление по использованию препарата Витан в ветеринарии". Утверждено Департаментом ветеринарии МСХ РФ от 01.08.1995 г. № 13-4-21366 и в "Инструкцию по применению иммуномакса собакам, кошкам и пушным зверям при иммунодефицитных состояниях". Утверждена Россельхознадзором 17 июля 2007 г., регистрационный номер ПВР-1-3.7/01994. Материалы исследований вошли в учебно-методическое пособие "Ветеринарная онкология (отбор и подготовка специалистов для цитологических исследований"), утвержденного Департаментом кадровой политики и образования МСХ РФ, 2006 г.; в учебное пособие "Организация и проведение ветеринарно-санитарной экспертизы туш и органов крупного рогатого скота и промысловых животных в условиях промышленных комплексов и частных хозяйств" (утверждено Департаментом кадровой политики и образования, 2006 г.); в курс лекций по организации и экономике ветеринарного дела (учебно-методическое пособие), 2006 г. Внедрение лактобифадола и иммуномакса в ветеринарную практику позволило, не нарушая биологических законов, существенно сократить сроки восстановления иммунного статуса норок. Основные положения теоретического обоснования иммунокоррекции используются при комплексном изучении вторичных иммунодефицитов, при чтении лекций в Башкирском ГАУ, Нижегородской ГСХА, Московской ГАВМиБ им К.И. Скрябина. ^ Тема, направление, методические подходы и результаты исследований доложены, обсуждены и одобрены на заседании ученого совета ГНУ НИИПЗК им. В.А. Афанасьева, на факультете ветеринарной медицины ФГОУ ВПО "Московская государственная академия ветеринарной медицины и биотехнологии им. К.И.Скрябина" и на научно-практических конференциях: Всероссийской конференции «Возрастная и экологическая морфология животных в условиях интенсивного животноводства» (Ульяновск, 1994); Научно-практической конференции "Актуальные проблемы ветеринарного образования" (Барнаул, 1998); Международной межвузовской конференции "Предпосылки и эксперименты в науке" (Санкт-Петербург, 2000); Международной научно-практической конференции, посвященной 100-летию со дня рождения профессора С.Н.Никольского (Ставрополь, 2003); 110 научно-практической конференции «Достижения аграрной науки производству» (Уфа, 2004); Республиканской научно-практической конференции «Достижения молодых ученых аграрному производству» (Уфа, 2004); Международной научно-практической конференции, посвященной 90-летию заслуженного деятеля науки, профессора Х.В.Аюпова; «Современные проблемы иммуногенеза, теории и практики борьбы с паразитарными и инфекционными болезнями животных» (Москва-Уфа, 2004); Третьей международной межвузовской научно-практической конференции «Предпосылки и эксперимент в науке» (Санкт-Петербург, 2005); XVII Международной межвузовской научно-практической конференции «Новые фармакологические средства в ветеринарии» (Санкт-Петербург, 2005); «Современные проблемы интенсификации производства в АПК» (Москва, 2005); Всероссийской научно-практической конференции «Повышение эффективности и устойчивости развития агропромышленного комплекса» (Уфа, 2005); Международной научно-практической конференции «Актуальные проблемы технических, естественных и гуманитарных наук» (Уфа, 2005); Третьей конференции по учебно-методической, воспитательной и научно-практической работе академии (Москва, 2006). ^
^ По материалам диссертации опубликовано 47 научных работы, в том числе 16 в рецензируемых изданиях, рекомендованных ВАК РФ. ^ Диссертация изложена на 303 страницах машинописного текста, включает 53 таблицы, 40 рисунков, состоит из введения, обзора литературы, собственных исследований, включающих 3 раздела, обсуждения полученных результатов, выводов, практических предложений. Список литературы включает 452 источника, из них 321 отечественных и 131 иностранных. ^ Материалы и методы исследований Исследования проведены в 1994 − 2006 гг. на базе научно-исследовательского института пушного звероводства и кролиководства им. В.А. Афанасьева, в условиях лаборатории микробиологии и иммунологии Башкирского государственного аграрного университета, зверохозяйств Улу - Телякское Иглинского района республики Башкортостан и «Родники» Московской области, ФГОУ ВПО «Московская государственная академия ветеринарной медицины и биотехнологии им. К.И.Скрябина». В работе использовано 1500 норок в возрасте 3-9 месяцев. Научно-хозяйственные опыты проводили в соответствии с методическими указаниями по методу сбалансированных групп-аналогов (Н.А.Балакирев, Юдин В.К., 2001). Зверей содержали в клетках типового двухрядного шеда. Зверей 1 контрольной группы кормили на основе существующих норм (Н.Ш.Перельдик, Л.В. Милованов, А.Т. Ерин,1987). Изучали показатели норок в разные сроки постнатального онтогенеза от рождения до промышленного убоя. Взятие крови и фекалий для исследований проводили до начала опытов, а затем через 10, 20, 30, 60 и 150 суток, что соответствует возрасту норок: 90 сут. (фоновые показатели), 100 сут., 110 сут., 120 сут., 150 сут. и 240 сут. (период промышленного убоя). Взятие материала для иммуноморфологических, гистохимических исследований иммунных органов (костный мозг, тимус, селезенка, лимфатические узлы), определение концентрации витаминов в печени проводилось до начала опытов (фоновый уровень) от 6 голов норок из каждой группы и в конце опытов (на 240 сутки) – в период промышленного убоя зверей. Всего было проведено 864 анализа сыворотки крови на лизоцимную, бактерицидную, комплементарную и фагоцитарную активности, 972 анализа на содержание Т - лимфоцитов, Т- хелперов, Т- супрессоров, В -лимфоцитов в крови и лимфоидных органах, 1512 бактериологических анализов, 496 анализов на биохимические и гистохимические исследования, изучено 144 препарата по иммуноморфологическим реакциям и миелограммы костного мозга. Кровь брали из пальца или кончика хвоста по утрам до кормления. Сыворотку приготавливали обычным способом (В.А.Берестов, 1974; А.А.Покровский, 1964). Естественную резистентность организма норок изучали по лизоцимной, комплементарной, бактерицидной и фагоцитарной активности сыворотки крови. Фагоцитарную активность лейкоцитов определяли по методу A.Segal (1974) в модификации В.Я.Шатрова (1985), бактерицидную активность – по О.В.Смирновой и Т.А.Кузьминой (1966), лизоцимную – по В.Г.Дорофейчук (1976), комплементарную – по методу Г.Ф. Вагнера (1963). Оценку Т-системы иммунитета проводили методом спонтанного розеткообразования по Jondal (1972). Выделение лимфоцитов по методу A.Boyum (1968), В-лимфоциты определяли по методу E.Mendes (1973), определение теофиллинрезистентных и теофиллинчувствительных Т-лимфоцитов проводили, используя метод S.Limatibul et.al. (1978). Индекс иммунорегуляции вычисляли по отношению Т-хелперов к Т-супрессорам. Морфологический анализ костного мозга, тимуса, лимфатических узлов и селезенки норок проводили по общепринятой методике (Г. А. Меркулов, 1962). Изучение морфометрических показателей иммунологических органов, структур органов иммуногенеза проводили измерением площадей, занимаемых отдельными структурными компонентами и подсчетом клеточных элементов. Для этой цели применяли морфометрическую сетку А. А. Глаголева, усовершенствованную С. Б. Стефановым (1974). Схема 1 Физиологическая реактивность норок с возрастом и товарные свойства их шкурок Исследуемые факторы Введение в рацион селенита Na, кальфостоника, цеолитов, лактобифадола и иммуномакса И ![]() зучаемые показатели
![]() ![]()
![]() ![]() Р ![]() ![]() езультаты:
Рис. 1 В сыворотке крови определяли ферменты: аспартатаминотрансферазу (АСАТ) и аланинаминотрансферазу (АЛАТ) по А.А.Покровскому с соавт. (1964), лактатдегидрогеназу (ЛДГ) по Б.Ф. Коровкину (1965), активность амилазы методом А.А. Покровского и А.И. Щербаковой (1964) в модификации В. А. Берестова с соавт. (1971, 1974). Витамины А, Е, С, В1, В2 в печени определяли сразу после убоя по Предтеченскому (1969). Для исследования микрофлоры кишечника взятие фекалий норок производили в стерильную посуду с 9 – 10 мл изотонического раствора натрия хлорида с глицерином. Идентификацию выделенных микроорганизмов проводили в лаборатории микробиологии ФГОУ Баш ГАУ в соответствии с методическими указаниями по лабораторной диагностике болезней животных (1982). Товарные свойства и качество шкурок норок определяли визуальной оценкой качества шкурок норки в соответствии с ГОСТ 7908-69 «Шкурки норки невыделанные», ГОСТ 27769-88 «Шкурки норки клеточного разведения невыделанные» и ГОСТ 10322-71 «Шкурки норки выделанные». Длину и ширину шкурок измеряли от середины междуглазья до корня хвоста, ширина посередине линии длины. Расчетным путем установлены площадь шкурок и соотношение их длины и ширины. Масса шкурки определялась на весах ВНЦ-2 с ценой деления 2 г. Толщина кожевой ткани измерена с помощью толщиномера индикаторного типа ТР25-100 с ценой деления 0,1 мм. Густоту волосяного покрова на единице площади у невыделанных шкурок определяли в контрольной точке огузка, при этом пробником были отобраны кусочки кожевой ткани в опыте и контроле, площадью 0,1 мм. Длину волос, разложенных на предметном стекле, измеряли штангенциркулем в миллиметрах с точностью до 0,1 мм. Толщину направляющих, остевых и пуховых волос определяли под микроскопом в микрометрах с помощью окуляр- и объективмикрометра с увеличением в 160 раз. Изнашиваемость и степень спелости кончиков и прикорневых участков волос различных категорий изучали под микроскопом. Предел прочности волоса при разрыве определяли на приборе FM-27 в соответствии с ГОСТ 20269-74. Измерения проводили в нормальных условиях при температуре 25оС, относительной влажности 65%. Прочность связи волоса с кожевой тканью определяли на приборе ПШМ-1. Размер, массу шкурок норки в полуфабрикате исследовали также, как и в сырье. Густоту волос на шкурках определяли на радиогустомере (РГ-4) при высоте прохождения лучей не более 15 мм. Прочность и предел прочности кожевой ткани при растяжении, удлинение при разрыве и при заданном напряжении (полного, остаточного и упругого) определяли по общепринятой методике. Теплозащитные свойства меха определяли по методу, разработанному С.А. Каспарьянцем с соавт. (1986). Для разработки методов иммунокоррекции использовали следующие препараты: селенит натрия, цеолиты, кальфостоник, лактобифадол, иммуномакс. Схема 2 Схема применения препаратов норкам, находящимся на несбалансированном кормлении
Полученные данные были подвергнуты статистической обработке методами вариационной статистики с проверкой достоверности результатов с помощью критерия Стьюдента (В.Ю. Урбах, 1975). ^ Состояния естественной резистентности и иммунного статуса исследуемых норок в динамике их роста и развития с 3 - месячного возраста до промышленного убоя на фоне нарушенного рациона кормления. ^ Под опытом находилось 216 голов молодняка норок породы пастель. Норки 1 группы (контрольные) получали типовой общехозяйственный рацион, в 100 – килокалорийной порции которого содержалось переваримых питательных веществ, г: протеина -8,0; жира -4,9; углеводов (БЭВ) -4,5. Кроме того, звери контрольной группы получали ежедневно витаминный премикс пушновит -2 из расчета 1 г на голову в сутки, полностью удовлетворяющий потребность молодняка норок в основных витаминах. Норки 2-6 групп находились на несбалансированном рационе, в 100 –килокалорийной порции рациона подопытных групп содержалось переваримых питательных веществ, г: протеина -7,0; жира -4,1; БЭВ -5,8. Животный протеин рациона опытных групп был представлен только рыбой путассу, т. е. в нем отсутствовали мясная, молочная группы, костные субпродукты, за счет которых поддерживается кальций – фосфорное соотношение (схема 3). Данный рацион не сбалансирован по соотношению питательных веществ (по калорийности): отношение протеин : жир : БЭВ = 47,0 : 37,3 : 15,7; в норме должно быть – 50,0 : 25,0 : 25,0. Содержание кальция в данном рационе составляло - 0,19 г; фосфора – 0,28 г на 100 ккал обменной энергии (ОЭ), т.е. Са : Р = 1 : 1,5 ( в норме соотношение должно быть – Са : Р = 1,7 : 1. Кроме того, в рацион 2 группы не включали пушновит -2, он был дефицитен по основным витаминам. Схема 3 Рацион подопытных групп норок (г на 100 ккал ОЭ)
Результаты исследований позволили установить, что несбалансированное кормление норок сопровождается снижением их естественной резистентности. Уровень бактерицидной активности был понижен. С возрастом у животных этот процесс прогрессировал и с 41,20 ± 0,73%, к концу исследований этот показатель составил 30,30 ±0,91%**, а у контрольных животных находился в пределах 60,40 ± 0,81-59,40 ± 1,21%. Фоновый показатель лизоцимной активности сыворотки крови этой группы норок составил 21,20 ± 0,90%**. К 150 сут уровень лизоцимной активности у норок этой группы составил 14,20± 0,64%**, т.е. в 2,05 раза уступал показателям контрольных зверей. Аналогичные изменения наблюдали и в динамике В-лизинов и комплементарной активности. В процессе опытов В-лизины понижались по сравнению с фоновым уровнем и к 150 суткам составили 19,50 ± 0,67% против 33,60 ± 1,03% в контроле. Активность комплемента в сыворотке крови в процессе опыта, имела тенденцию к дальнейшему понижению. Она уступала фоновому показателю через 10 сут опыта в 1,05 раза, а через 150 сут - в 1,23 раза. Фагоцитарная активность лейкоцитов крови уменьшилась и к 150 сут составила 30,40 ± 0,75%* против 44,20 ± 0,86% в контроле. Показатели иммунного статуса норок, с нарушенным минеральным балансом, интенсивно падали в процессе эксперимента и уступали контролю. В период промышленного убоя бактерицидная активность сыворотки крови зверей подопытной группы была ниже, чем в контроле в 1,96 раза (на 29,1%), лизоцимная активность – в 2,05 раза (на 15,0%), бета – лизины – в 1,72 раза (на 14,1 %), комплементарная активность в 1,54 раза (на 8,9%). На затормаживание активности перечисленных естественных (врожденных) гуморальных факторов, определяющих естественную резистентность организма, указывала и фагоцитарная активность. Фагоцитарная активность лейкоцитов крови уступала контролю в 1,95 раза и составляла 30,40+0,75 против 44,20+0,86%** в контроле, изменчивость фагоцитарного числа в 2,93 раза (на 1,93%), показатель завершенности фагоцитоза в 1,89 раза (на 18,2%), что свидетельствует о серьезном нарушении в звене клеточного иммунитета и значительном подавлении защитных барьеров, при изменении минерального баланса в организме норок. Установлено изменение клеточных факторов иммунитета: угнетение Т-клеточного звена, сопровождающееся снижением рецепторной активности Т-лимфоцитов до 31,50+0,55 против 40,90+1,27%** в контроле, снижением Т-хелперов – в 1,5 раза, повышением уровня Т-супрессоров до 22,2 ± 1,28%* против 18,7± 0,62% в контроле. ^ Мы изучали течение иммуногенеза при минеральной недостаточности норок на динамику T- и В - лимфоцитов и их популяции в крови, в лимфатических узлах, селезенке, тимусе, структуру зон этих органов, имеющих отношение в организме к продукции Т - и В- лимфоцитов. Уровень Т-Е-РОК- лимфоцитов к периоду промышленного убоя в крови был ниже, чем в контроле в 1,29 раза (на 9,4%), в брыжеечном лимфатическом узле - в 1,93 раза и составил 16,0+0,70% против 22,20+0,60%* в контроле, в селезенке - в 1,64 раза (на 10,5%) и 1,28 раза (на 26, 8 млн.), в тимусе - в 1,86 раза (на 256,6 млн.). Содержание Т- хелперов в крови уступало контрольным цифрам в 3,03 раза (7,80+0,41 против 23,70+0,83%** в контроле). Уровень В- лимфоцитов был ниже, чем в контроле в крови в 1,48 раза (на 3,8%), в брыжеечном лимфатическом узле в 1,38 раза (на 6,2%) и 1,6 раза (на 21,7 млн.) в селезенке - в 1,69 раза (на 18,1%) и 1,65 раза (на 76,2 млн). Параллельно с этим у подопытных зверей наблюдалась активизация супрессорных реакций в организме. Уровень Т-супрессоров в крови был выше, чем у контрольных норок в 1,23 раза (23,90+1,50 против 19,40+0,58%*). Таким образом, минеральная недостаточность для организма сопровождается последовательным включением в иммунный ответ как клеточных, так и гуморальных факторов защиты (Р.М. Хаитов, 1977; F. Ninkpälsing, 1985; H. Nütsuda, 1985), а всю систему лимфоидных органов и составляющих их лимфоцитов рассматривают как единую морфофункциональную систему, защищающую организм (Ф.М. Бернет, 1981; А.А. Новых, 1988; С.Е. Ремизова, 2002; D. Pariot, 1971; N. Melchers et al., 1974; D. Penit et al.,1986). При этом нами отмечается далеко неоднозначная реактивность "феномена" Т - и В- систем иммунитета, участвующих в защитных реакциях организма. Об этом свидетельствует морфометрический анализ площадей структурных компонентов лимфоидных органов, в которых выявлены соответствующие отклонения в показателях, при сопоставлении цифровых данных от здоровых и с нарушенным минеральным обменом норок. Они касаются структур, имеющих в организме отношение к продукции Т - и В - лимфоцитов. В лимфатическом узле эти изменения проявляются в виде уменьшения площадей лимфатических фолликул со светлыми центрами - в 4,44 раза (на 3,1%), без светлых центров - в 1,39 раза (на 2,2%), мякотных тяжей - в 2,32 раза (на 9,8%) и паракортикальной зоны - в 2,98 раза (на 10,7%); в селезенке - в виде уменьшения площади лимфатических фолликул, без учета площади периваскулярных лимфоидных муфт: со светлыми центрами - в 4,18 раза (на 3,5%); без светлых центров – в 1,68 раза (на 7,9 %); самих периваскулярных лимфоидных муфт - в 2,32 раза (на 6,5%); в тимусе - в виде уменьшения площади коркового вещества органа - в 1,95 раза (на 30,4%). Работы, касающиеся реакций иммунокомпетентных Т - и В - лимфоцитов и их популяций в крови и лимфоидных органах, при нарушении минерального обмена в организме норок, в литературе не освещались. Изменения в содержании Т - и В - клеток и их субпопуляций в крови, в центральных и периферических лимфоидных органах иммунной системы не обошлись без структурных перестроек в самих лимфоидных органах. Следовательно, минеральная недостаточность вызывает глубокие иммунодефициты, о чем свидетельствуют нарушения параметров естественной резистентности организма, содержания Т - Е - РОК - лимфоцитов, T - хелперов, В - ЕАС - лимфоцитов в крови, лимфатических узлах, селезенке, тимусе. Иммунные патологии осложняются активизацией супрессорных реакций в организме. Иммунносупрессия в организме животных при нарушении минерального обмена у лощадей отмечается А.Д. Шагивалеевым (2000); у лошадей - Р.Г. Канбековым (2003); у свиней, цыплят - бройлеров - Р.Р. Шайхуловым (2002) и др. Исследование миелограммы костного мозга норок 2 группы показало значительное угнетение клеток зернистого ростка (палочко - и сегментоядерных нейтрофилов) - в 1,93 раза (на 24,5%), эритроидного ростка - в 1,84 раза (на 19,5%), лимфоидных клеток - в 1,73 раза (на 3,02%). Полученные данные указывают на глубокие иммунодефицитные перестройки, затрагивающие механизмы формирования иммунного ответа. Гистохимический анализ лимфоидных органов норок 2 группы показал в лимфатических узлах прогрессирующее ослабление реакции на щелочную фосфатазу вокруг лимфатических фолликул (единичные клетки со слабой реакцией на ЩФ) и слабовыраженную реакцию на неспецифическую энтеразу в паракортикальной зоне. В селезенке регистрировались лишь единичные ЩФ - содержащие клетки со стертой картиной и НЭ - содержащие в зоне периваскулярных лимфоидных муфт органа. В тимусе - единичные НЭ - содержащие клетки, со стертой картиной в корковом плато органа. Итак, у норок на фоне несбалансированного кормления произошли глубокие деструктивные изменения в органах иммуногенеза, указывающие на негативную иммунную реактивность органов, и проявились расширением площади коркового плато органа в 2,15 раза и изменением площади структур, имеющим отношение к Т- и В- системам иммунитета. Изучение миэлограммы костного мозга норок на фоне нарушения минерального обмена характеризовалось снижением клеток зернистого и эритроцитарного (4,5 раза) ростка и лимфоидных клеток (в 2,08 раза), что ведет к нарушению пролиферативных процессов в костном мозге. Все это дает основание считать, что у норок, находящихся на несбалансированном кормлении, развивается вторичный иммунодефицит. |
||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||