Исследования по разработке и стандартизации лекарственных растительных средств для профилактики и комплексного лечения заболеваний органов пищеварения 15. 00. 02 фармацевтическая химия, фармакогнозия
|
|
Скачать 0.88 Mb.
|
|
^ интродуцированных растений Для внедрения в медицинскую практику новых лекарственных средств, в том числе сборов, необходимо проведение исследований по разработке критериев подлинности сборов, гарантирующих эффективность, безопасность, воспроизводимость действия, и на основе полученных результатов, проектов ФС. ^ проводили при осмотре составных компонентов аналитической пробы сборов визуально и с помощью лупы (10х), обращая внимание на структуру растительной смеси, цвет, запах, и вкус водного извлечения. В результате были выделены характерные внешние признаки сборов. В связи с тем, что разработанные сборы являются многокомпонентными, мы дифференцировали компоненты сборов по принадлежности к определенной морфологической группе. Затем из каждой морфологической группы выделяли отдельные растительные компоненты и их характерные диагностические признаки, необходимые для установления подлинности, на основе которых были разработаны «Определители» для морфологических групп: плоды, коры, подземные органы, листья и травы, цветки, входящие в состав сборов, и цветки, составляющие элементы трав. При проведении микроскопического анализа изучали диагностически значимые признаки отдельных растительных компонентов и сборов. Микроскопия всех изученных сборов проиллюстрирована фотографиями. Исследуемые сборы включают сырье различных морфологических групп и при их описании важно определение диагностичности компонентов при совместном присутствии. Это связано с тем, что сборы могут выпускаться не только в измельченном виде, фасованные в пачки, но и в порошкованном в фильтр-пакетах, что изменяет характер микродиагностических признаков. Поэтому следующим этапом работы являлась количественная оценка проявления диагностически значимых признаков для определения стандартности лекарственного растительного сырья и сборов. Результаты определения проявляемости диагностически значимых частиц отдельных растительных компонентов и сборов №№ 1 - 4 представлены в таблице 1. Таблица 1 ^ отдельных растительных компонентов и сборов
Таким образом, из результатов исследования видно, что процент проявления диагностически значимых частиц компонентов в сборах снижается, по сравнению с проявлением этих признаков для отдельных компонентов сборов, что объясняется снижением частоты встречаемости значимых частиц при анализе многокомпонентных смесей. ^ проводили в аналитических пробах образцов пяти серий сборов, изготовленных в лабораторных условиях. В сборах определяли показатели влажности, золы общей, золы, нерастворимой в 10% растворе хлористоводородной кислоты, измельченность сырья, содержание примесей (органических и минеральных). При определении примесей одновременно обращали внимание на наличие амбарных вредителей, которых в лекарственном растительном сырье обнаружено не было. Также в сборах было определено содержание экстрактивных веществ и установлено, что максимальное извлечение экстрактивных веществ из сборов наблюдается при использовании в качестве экстрагента: в сборах №1 и №4 - спирта 40%, в сборе №2 - спирта 50%, сборе №3 – спирта 70%. Извлечение водой, также показало достаточно высокие результаты, что имеет значение при использовании сборов в качестве водных извлечений для приема внутрь. ^ По данным литературы БАВ в изучаемых сборах представлены веществами разнообразной природы, которые обеспечивают совокупное профилактическое и лечебное действие. Этим обоснована необходимость их фитохимических исследований в целях установления параметров доброкачественности. Для обнаружения отдельных групп БАВ были проведены качественные реакции с 10% водным извлечением из сборов. В результате в сборах были обнаружены следующие группы веществ: во всех 4 сборах - полисахариды, дубильные вещества, флавоноиды, сапонины, аминокислоты, кумарины; в сборе №4 - антраценпроизводные. Обнаружение и идентификацию БАВ осуществляли с использованием хроматографических и спектральных методов исследований в сравнении со стандартными образцами. ^ в сборах обнаруживали в водном извлечении методом ТСХ, подвижная фаза (система «этилацетат - уксусная кислота (80:20)»), хроматографирование (~20 минут), детектирование осуществляли в УФ-свете до и после обработки 0,04% водным раствором 2,6-дихлорфенолиндофенолята натрия. Присутствие аскорбиновой кислоты в сборах №№ 1 - 4 устанавливали по появлению белого пятна на розовом фоне со значением Rf~0,89 – зона аскорбиновой кислоты и неидентифицированная зона со значением Rf~0,95. Разделение каротиноидов проводили методом ТСХ, подвижная фаза (система «гексан - диэтиловый эфир (80:20)»), детектирование вели в УФ-свет до и после обработки 10% спиртовым раствором фосфорномолибденовой кислоты. Обнаружение каротиноидов в сборах №№ 1 - 4 устанавливали по появлению пятен синего цвета на желто-зеленом фоне со следующими значениями Rf~0,16; Rf~0,25; Rf~0,61; Rf~0,82, два из которых предположительно отнесены к каротиноидам, а два – не идентифицированы. Для подтверждения полученных данных, пятна элюировали с хроматограммы и снимали спектральные характеристики в интервале длин волн 350 – 500 нм и 470 – 700 нм. Результаты значений Rf и спектральные характеристики сопоставляли друг с другом и установили присутствие в сборах α и β – каротина. Для обнаружения витамина К1 также использовали ТСХ при температуре 40-70ºС, подвижная фаза (система «бензол - петролейный эфир (1:1)»). Хроматограмму высушивали и выдерживали в УФ-свете при длине волны 360 нм (2 минуты). В сборах №2, №3, №4 наблюдали появление пятна с желто-зеленой флюоресценцией со значением Rf~0,68 – зона витамина К1 и не идентифицированная зона со значением Rf~0,34. С целью разделения фенольных соединений проводили избирательную экстракцию последовательно хлороформом, этилацетатом и бутанолом. Извлечения подвергали анализу на присутствие веществ гидрофильной природы: флавоноидов, оксикоричных и фенолкарбоновых кислот и кумаринов. Для анализа агликонов флавоноидов спиртовые извлечения сборов подвергали гидролизу и экстрагировали диэтиловым эфиром. Флавоноиды обнаруживали в этилацетатной фракции сборов. Наилучшее их разделение методом одномерной БХ наблюдалось в системах I - н-бутанол - уксусная кислота – вода (4:1:2), II-15% уксусная кислота, III - муравьиная кислота - уксусная кислота - вода (4:1:3), методом двумерной – в системах I и II. Детектирование зон флавоноидов проводили как по собственной флюоресценции веществ в УФ-свете (при λ = 254 и 366 нм), так и с помощью следующих проявителей: пары аммиака, 5% водный раствор натрия карбоната, 5% спиртовый раствор алюминия хлорида. Для сравнения использовали достоверные образцы свидетелей флавоноидов. Результаты хроматографического анализа флавоноидов сборов №1 - №4 свидетельствовали, что зоны адсорбции соединений данной группы в видимом свете имели бледно-желтую окраску, в УФ-свете обладали собственной флюоресценцией - от желтой, желто-зеленой до коричневой, которая усиливалась после проявления хромогенными реактивами. В системах растворителей I и II обнаружено 12 зон адсорбции в сборе №1; 9 зон адсорбции в сборе №2; 14 зон адсорбции в сборе №3 и 11 зон адсорбции в сборе №4, из которых к веществам флавоноидной природы можно отнести 9 зон в сборе №1, 6 зон в сборе №2, 11 зон в сборе №3 и 9 зон в сборе №4. Обнаружение флавоноидов с помощью ТСХ проводили в системах «н-бутанол - уксусная кислота - вода (4:1:5)» и «этилацетат - уксусная кислота - вода (5:1:1)», при этом наилучшее разделение наблюдалось в системе «этилацетат - уксусная кислота - вода». В этилацетатной фракции установлено присутствие рутина в сборах №1 - №4 (Rf~0,28), гиперозида в сборах №1 и №3 (Rf~0,42), лютеолин-7-глюкозида в сборах №1 - №4 (Rf~0,57), авикулярина в сборах №1 и №3 (Rf~0,70), ликуразида в сборах №1 и №3 (Rf~0,43). Обнаружение агликонов флавоноидов проводили после кислотного гидролиза. В эфирной фракции обнаружили кверцетин в сборах №1 - №4 (Rf~0,98), мирицетин в сборе №4 (Rf~0,87), апигенин в сборах №1 - №4 (Rf~0,46), кемпферол в сборе №1 (Rf~0,88). Обнаружение оксикоричных и фенолкарбоновых кислот проводили методом БХ в этилацетатной фракции. При этом наилучшее разделение наблюдалось в системе I и IV- 2% раствор уксусной кислоты. Методом ТСХ хорошее разделение наблюдалось в системе «хлороформ – метанол - вода (62:32:7)». Детектирование зон оксикоричных и фенолкарбоновых кислот проводили также по собственной флюоресценции в УФ-свете и после обработки хромогенными реактивами (пары аммиака, 3% спиртовый раствор треххлористого железа, раствор диазотированной сульфаниловой кислоты), сравнивая с аутентичными образцами свидетелей. Оксикоричные и фенолкарбоновые кислоты обнаруживали по ярко-голубой, зеленовато-голубой, фиолетовой флюоресценции, которая становилась интенсивнее после обработки проявляющими реактивами. В системе I обнаружено 4 зоны в сборе №1 и сборе №2, 5 зон в сборе №3 и 3 зоны в сборе №4 и установлено присутствие кофейной (Rf~0,73) и хлорогеновой кислот (Rf~0,36) в сборах №1 - №4; галловой кислоты (Rf~0,64) в сборе №1 и №4. Обнаружение кумаринов проводили в хлороформной фракции методом ТСХ в системах «этилацетат - бензол (1:2)» и «хлороформ - петролейный эфир (1:2)». Наилучшее разделение наблюдалось в системе «этилацетат - бензол». Детектирование осуществляли в УФ-свете до и после обработки обрабатывали 10% спиртовым раствором калия гидроксида, хроматограммы высушивали и прогревали при температуре 110-1200С (2-3 мин), после чего опрыскивали свежеприготовленным диазореактивом. Кумарины обнаруживали по ярко-голубой флюоресценции в УФ-свете до обработки хромогенными реактивами, а после обработки пятна приобретали флюоресценцию от кирпично-красного до сине-фиолетового цвета. Наблюдали появление 7 зон адсорбции в сборе №1, 6 зон адсорбции в сборе №2, 8 зон адсорбции в сборе №3 и 5 зон адсорбции в сборе №4, из которых 5 зон в сборе №1 идентифицированы с умбеллифероном, дигидрокумарином, скополетином, герниарином, кумарином; 4 зоны в сборе №2 и №3 идентифицированы с эскулетином, умбеллифероном, скополетином, кумарином; 3 зоны в сборе №4 идентифицированы с эскулетином, умбеллифероном и скополетином. Для получения более объективной информации наиболее интенсивные зоны флавоноидов и оксикоричных кислот счищали с пластинки и элюировали 96% этиловым спиртом при нагревании на водяной бане с обратным холодильником. Контроль за составом элюированных фракций осуществляли хроматографически. Операцию повторяли до получения достаточного количества исследуемых веществ. Для идентификации выделенных веществ использовали спектральные методы: УФ- и ИК-спектроскопию, которые в комплексе позволяют установить наличие, положение и характер заместителей. Спиртовые растворы выделенных веществ анализировали при аналитически значимых интервалах оптической плотности и вещества идентифицировали по спектрам их поглощения в ультрафиолетовой области, характерным сдвигам максимумов поглощения при использовании соответствующих диагностических добавок (этилата или метилата натрия, алюминия хлорида). Данные ТСХ анализа (значения Rf) и спектральных исследований сопоставляли друг с другом. Дифференциальные спектры выделенных веществ характеризовались наличием двух максимумов поглощения: для флавоноидов - рутин (при 361 и 258 нм), кверцетин (при 374 и 258 нм), кемпферол (при 368 и 258 нм), лютеолин-7-глюкозид (при 352 и 266 нм), апигенин (при 338 и 270 нм), гиперозид (при 359 и 254 нм); для оксикоричных кислот - галловой (при 276 и 222 нм), хлорогеновой (при 324 и 300 нм) и кофейной (при 324 и 292 нм). Для идентификации выделенных препаративно индивидуальных веществ в инфракрасной области готовили гомогенизированные суспензии в вазелиновом масле. Отмечали наличие интенсивной широкой полосы с максимумом при 3370 см-1 для рутина, который обусловлен валентными колебаниями спиртовых и фенольных групп; полоса 1654 см-1 принадлежит карбонильной группе -пирона; ароматические С=С связи дают ряд полос 1610, 1584, 1510, 1456 см-1. У кверцетина в ИК-спектре были обнаружены полосы валентных колебаний при 3300-3500 см-1, соответствующие гидроксильным группам; 1660 см-1 (С=О); 1612, 1558, 1522, 1462 см-1 (С=С). ИК-спектр кемпферола характеризуется полосами валентных колебаний при 3274-3520 см-1 (гидроксильные группы); 1654-1665 см-1 (карбонильная группа - пирона); 1610, 1510, 1462 см-1 (С=С). В ИК-спектре апигенина наблюдались полосы при 3286-3410 см-1 (фенольные ОН-группы); 1648-1660 см-1 (карбонильная группа - пирона); 1580, 1492 и 1450 см-1 (С=С). Для ИК-спектров изолированных оксикоричных кислот характерны валентные колебания при 1252-1300 см-1 (С=С); 1640-1705 см-1 (коричный фрагмент); 3280-3430 см-1 (наличие гидроксильных групп). Для достоверного подтверждения качественного и количественного анализа фенольного комплекса сборов применяли метод ВЭЖХ. Анализ проводили на хроматографе с УФ-детектором при длине волны 360 нм. Для анализа получали спиртовое извлечение с экспериментально подобранными условиями. Параллельно готовили серию 0,05% растворов сравнения флавоноидных соединений и оксикоричных кислот в метиловом спирте. Идентификацию проводили путем сопоставления времен удерживания компонентов смеси и растворов сравнения. Результаты исследований представлены на рис. 2 - 5. В сборе №1 (рис.2) установлено присутствие 34 веществ фенольной природы, из которых 9 идентифицированы как флавоноиды (рутин (10), авикулярин (14), лютеолин-7-глюкозид (11), кверцетин (18), изокверцетин (12), гиперозид (21), геспередин (16), ликуразид (24), апигенин (25)) и 3, как оксикоричные кислоты (галловая (5), хлорогеновая (8) и кофейная (9)).  26 27 28 29 30 32 31 34 33 Рис. 2. Хроматограмма спиртового извлечения сбора №1 В сборе №2 (рис.3) установлено присутствие 24 веществ фенольной природы, из которых 5 идентифицированы как флавоноиды (рутин (10), кверцетин (17), изокверцетин (12), лютеолин-7-глюкозид (11), апигенин (24)) и 3, как оксикоричные кислоты (галловая (4), хлорогеновая (8) и кофейная (9)).  ^ В сборе №3 (рис.4) - 25 веществ фенольной природы, из которых 8 идентифицированы как флавоноиды (рутин (9), кверцетин (18), изокверцетин (11), авикулярин (14), гиперозид (20), лютеолин-7-глюкозид (10), ликуразид (23), апигенин (25)) и 3, как оксикоричные кислоты (галловая (4), хлорогеновая (6), кофейная (8)) .  ^ В сборе №4 (рис.5) - 29 веществ фенольной природы, из которых 7 идентифицированы как флавоноиды (рутин (9), кверцетин (19), изокверцетин (11), гесперидин (17), лютеолин-7-глюкозид (11), гиперозид (21), апигенин (23)) и 3, как оксикоричные кислоты (галловая (5), хлорогеновая (7) и кофейная (8)).  ^ Количественное содержание идентифицированных компонентов рассчитывали по площади пиков. По рутину и кверцетину строили дополнительно градуировочные графики и также определяли их процентное содержание в сборах, чтобы выявить флавоноиды, доминирующие в сумме, на которые в дальнейшем будем вести пересчет при стандартизации сборов. Анализируя полученные результаты, было установлено, что доминирующим в количественном отношении в сумме флавоноидов сборов №1 - №4 является рутин. ^ Согласно литературным данным, химический состав растений, входящих в состав сборов, изучен достаточно подробно, но поскольку мы предлагаем новые композиции из этих растений, для нас представляло интерес определить количественное содержание основных групп БАВ, чтобы среди них выбрать приоритетные маркеры, по которым в дальнейшем проводить стандартизацию. Нами проведено количественное определение содержания различных групп БАВ по модифицированным методикам (табл.2). Таблица 2 Содержание БАВ в сборах
Установлен качественный и количественный аминокислотный состав сборов на аминокислотном анализаторе ААА-339 (ЧССР) (табл. 3). Полученные данные позволили установить присутствие 14 аминокислот, из которых восемь незаменимых, шесть заменимых и среди них преобладают аминокислоты – пролин, глицин, валин, цистеин и аргинин. Таблица 3 ^
Методом атомно-абсорбционной спектрометрии проведено определение макро- и микроэлементов в растительных сборах, поскольку они играют важную роль в формировании тканей организма, пластических процессах, проявляют фармакологическую активность, влияют на обмен веществ, активизируют ферментные системы, потенцируют действие витаминов (табл.4). Таблица 4 ^
В сборах не были обнаружены свинец, ртуть, алюминий, кадмий, что характеризует экологическую чистоту лекарственного растительного сырья, входящего в состав сборов. В тоже время, наличие и относительно высокое содержание некоторых макро- (K, Na, Ca, P) и микроэлементов (Zn, Fe, Mn, Cu, J), расширяет диапазон применения сборов и область рекомендуемых заболеваний для их профилактического и лечебного использования. Эфирные масла из сборов были получены методом перегонки с водяным паром с подбором оптимальных условий количественного определения. Установлено, что максимальный выход эфирных масел наблюдался при использовании: навески 30,0 г для сборов №1 и №3; 25,0 г – для сборов №2 №4; измельченности сырья 2 мм для сбора №2 и 3 мм для сборов №1, № 3 и №4; время перегонки 2 часа для всех сборов. Полученные эфирные масла были подвергнуты качественному анализу хромато-масс-спектрометрическим методом.Идентификацию компонентов проводили по масс-спектрам электронного удара, фиксируя следующие показатели: названия соединений; времена удерживания; величины количественного вклада в смесь; индекс сходства (Match qulity) библиотечного и полученного спектров, а также учитывая аналитические параметры компонентов эфирных масел (И.Г.Зенкевич,1997) для идентификации моно- и сесквитерпеновых углеводородов. При этом, индекс сходства с величиной более 90% свидетельствовал об очень хорошем совпадении. В остальных случаях обращали внимание на такие показатели, как коэффициент тождественности, различие «идеального совпадения» и коэффициента тождественности, меру чистоты спектра, коэффициент загрязненности, величину надежности, взаимную корреляцию. Опираясь на наилучшие значения вышеперечисленных показателей и, учитывая результаты масс-спектрометрического изучения процессов диссоциации сесквитерпенов, нам удалось однозначно идентифицировать компонентный состав эфирных масел, выделенных из сборов №1 - №4. Хроматограммы могут служить дополнительной характеристикой подлинности сборов. Анализируя результаты изучения компонентного состава эфирного масла сбора №1 (рис.6) можно отметить, что среди 28 веществ, относящихся к монотерпеновым и сесквитерпеновым углеводородам, в максимальном количестве накапливаются α-мууролен (17,99%), 6,10,14-триметил-2-пентадеканон (10,96%), α-кадинол (8,99%), производные азулена (4,42%), эудесма-5,11(13)-диен-8,12-олид (3,59%), п-Мент-1(7)-ен-9-ол (3,23%), ледол (2,33%), и в меньшем количестве: кариофиллен оксид (1,61%), 9,10-дегидро-изолонгифолен (1,09%), спатуленол и α-бисаболол.  ^ В результате исследования эфирного масла из сбора №2 (рис.7) обнаружено 14 веществ, относящихся к монотерпеновым и сесквитерпеновым углеводородам, среди которых преобладают эудесма-5,11(13)-диен-8,12-олид (27,27%), α-мууролен (17,04%), производные нафтофурана (17,9%), α-кадинол (7,51%), производные пентанола (4,73% и 5,25%), изоборнилацетат (1,96%).  ^ Анализируя полученные результаты представленные на рисунке 8 можно отметить, что в эфирном масле сбора №3 обнаружено 36 веществ монотерпеновой и сесквитерпеновой природы. В максимальном количестве накапливаются п-аллил-анизол (29,53%), эудесма-5,11(13)-диен-8,12-олид (18,54%), производные нафтофурана (15,46%), α-мууролен (7,08%), циклогексена (5,31%), санталол (2,42%), α-кадинол (1,86%), спатуленол (1,41%), в меньшем количестве: эвкалиптол, α-калакорен, кариофиллен оксид, ледол, α-бисаболол, изолонгифолен, D-лимонен, ментол.  ^ Компонентный состав эфирного масла из сбора №4 также представлен как монотерпеновыми, так и сесквитерпеновыми углеводородами (рис.9). В максимальном количестве содержатся п-аллил-анизол (30,68%), цис-5-метил-2-(1-метилэтил)-циклогексанон (7,33%), ментол (3,41%), азулен (4,71%), эудесма-5,11(13)-диен-8,12-олид (8,36%), производные нафтофурана (5,56%), α-1-нафталенпропанол (4,66%), пулегон (2,78%), камфора (2,74%), туйон (2,04%), эвкалиптол (1,73%), в меньшем количестве: кариофиллен, спатуленол, ледол, копаен, кадинол, α-бисаболен, α-лимонен.  ^ В сборах №1 и №3 проводили также количественное определение глицирризиновой кислоты, в связи с наличием ее в корнях солодки, входящей в их состав, методом ВЭЖХ. Для анализа получали спиртовое извлечение с экспериментально подобранными условиями экстракции. Глицирризиновая кислота идентифицировалась по времени удерживания стандартного образца. Расчет количественного содержания глицирризиновой кислоты производили методом абсолютной калибровки с помощью компьютерной программы МультиХром для «Windows» и по формуле. Анализируя полученные результаты можно отметить, что содержание глицирризиновой кислоты составило в сборе №1 - 1,75±0,03%, в сборе №3 - 1,24±0,02%. Учитывая значение отдельных групп БАВ в оказании конечного лечебного эффекта для стандартизации сборов были выбраны: - флавоноиды и дубильные вещества - в сборах №1 и №4, поскольку дубильные вещества при взаимодействии с раздраженной и воспаленной слизистой поверхностью желудка, кишечника образуют защитную пленку, предохраняющую от воздействия раздражающих агентов и микроорганизмов, а флавоноиды оказывают разностороннее действие на желудочно-кишечный тракт - спазмолитическое действие на гладкие мышцы кишечника, желчных путей, желчного пузыря, кровеносных сосудов, противовоспалительное, антисекреторное, гастропротекторное, иммуномодулирующее и др., что имеет значение при лечении хронического панкреатита, гепатита в стадии обострения и дисбактериоза; - флавоноиды и полисахариды - в сборах №2 и №3, так как флавоноиды оказывают противоязвенное, капилляроукрепляющее действие, а в сочетании с полисахаридами оказывают потенциирующее влияние на иммуностимулирующее действие. Кроме того, сами полисахариды оказывают иммуномодулирующее, гипогликемическое действие и также принимают участие в общем противоязвенном эффекте, что имеет значение при лечении язвенной болезни желудка и хронического панкреатита, гепатита в стадии ремиссии. Для разработки методик количественного определения выбранных групп БАВ в сборах нами были подобраны оптимальные условия проведения анализа: выбор экстрагента, соотношение сырья и экстрагента, измельченность сырья, время, кратность экстракции, аналитическая длина волны. В ходе эксперимента при разработке методики количественного определения флавоноидов в сборах был использован метод дифференциальной спектрофотометрии с подбором оптимальных условий проведения. При этом, чтобы исключить влияние сопутствующих веществ, к спиртовым растворам извлечений из сборов и растворов-стандартов флавоноидов добавляли комплексообразующую добавку - спиртовый раствор алюминия хлорида (III), с которым флавоноиды образуют комплексы, устойчивые в кислой среде и наблюдается батохромный сдвиг УФ-спектра.  ^ При сравнении дифференциальных УФ-спектров сборов и стандартных образцов ГСО рутина и кверцетина, присутствующих в большем числе компонентов сборов, установили, что максимум поглощения комплекса флавоноидов наблюдается для сбора №1 и №3 при длине волны 405 нм, сбора №2 – 395 нм, сбора №4 – 400 нм, а для стандартных образцов ГСО рутина – 410 нм, кверцетина – 430 нм (рис.10). Спектры поглощения сборов имеют более близкие максимумы к спектру рутина, поэтому этот флавоноид был выбран в качестве доминирующего в сумме, на который в дальнейшем вели пересчет. Изучение влияния различных факторов на выход флавоноидов из сборов позволило выбрать оптимальные условия, при которых необходимо проводить их количественное определение (табл.5). Таблица 5 ^
Метрологические характеристики методики количественного определения флавоноидов в сборах отражены в таблице 6. Таблица 6 ^
Отсутствие систематической ошибки методики подтверждено «опытами с добавками» ГСО рутина. Результаты определения представлены в таблице 7. Таблица 7 ^
|
||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
Ваша оценка этого документа будет первой.
Ваша оценка:
Похожие:
База данных защищена авторским правом ©MedZnate 2000-2016
allo, dekanat, ansya, kenam
обратиться к администрации | правообладателям | пользователям
allo, dekanat, ansya, kenam
обратиться к администрации | правообладателям | пользователям