Приказ Первого заместителя председателя Агентства Республики Казахстан по делам здравоохранения от 12 июня 2001 года №566 Омерах по улучшению эпидемиологического надзора, профилактики и диагностики менингококковой инфекции
|
|
Скачать 0.58 Mb.
|
|
Примечание: * В каплю 3% КОН вносят петлю (колонию) культуры, эмульгируют. Образование в капле студенистой массы, тянущейся за петлей указывает на наличие грамотрицательной флоры (-), крошащуюся консистенцию образует грамположительная флора (+). ** Постановка реакции на оксидазу, каталазу, уреаэу (См НД «Об унификации микробиологических методов исследования к КДП ЛПУ» № 10.05.031.97 Заболевания, где этиологическим агентом являются гемофилы, характеризуются воздушно-капельным механизмом передачи, что обеспечивает им широкое распространение. Из всех представителей этого рода наибольшей патогенностью обладают H.influenzae, впервые описанные Пфейффером в 1892г. Этот возбудитель имеет несколько специфических серотипов (a,b,c.d,e,f), из которых тип "b" (Hib) является наиболее частым агентом тяжелых генерализованных форм заболеваний, особенно у детей до 5 лет. ГБМ у взрослых могут быть обусловлены другими серологическими типами. Пневмококки и гемофилы, как и менингококки, являются высоко требовательными к культивированию микроорганизмами. В качестве фактора, способствующего их росту, используют кровь различного происхождения. Поэтому универсальной средой для всех возбудителей может служить "шоколадный" агар. Для проведения бактериологической диагностики гнойных бактериальных менингитов необходимо обеспечить забор материала от больных в полном объеме с соблюдением сроков забора, доставки патологического материала и условий транспортировки. В бактериологическую лабораторию доставляется материал в следующем объеме: 1.Ликвор для первичного посева, бактериоскопии и серологических исследований в количестве не менее 1,0 мл. 2 Ликвор в 0,1% полужидком агаре (среда «обогащения») для бактериологического накопления культуры. 0,5 мл ликвора засевается в 5,0 мл полужидкого агара немедленно у постели больного. 3. «Толстая капля» крови для бактериоскопии. 4.Кровь в жидкой питательной среде (10.4) или в 0,1% полужидком агаре (среда обогащения) для бактериологического накопления культуры. 5,0 мл крови засевают в 50,0 мл среды обогащения. 5 .Кровь в количестве не менее 2-х мл для серологических исследований (РИГА, ВИЭФ и др.) Материал для бактериологических и серологических исследований доставляется в бактериологическую лабораторию немедленно после забора в теплом виде (t-37°C) в специально оборудованных контейнерах. При невозможности немедленной доставки допускается хранение патологического материала в условиях термостата при 37°С в течение 18 часов. ^ 1) 1-й день исследования. Спинномозговую жидкость (СМЖ) в количестве 2-5 мл берут у больного сразу же при поступлении в стационар (желательно до начала антибактериальной терапии) с соблюдением всех правил асептики. Взятие ликвора проводится персоналом в масках. Первую порцию СМЖ (около 1,0 мл) берут в отдельную пробирку для проведения общего исследования ликвора. Вторую порцию, предназначенную для бактериологического исследования, наливают в стерильную пробирку (не менее 1,0 мл) и частично засевают в 0,1% полужидкий агар (0,5 мл СМЖ добавляют в 5мл 0,1% полужидкого агара). Касаться руками краев канюли, иглы и краев пробирок нельзя. Ватно-марлевую пробку полагается держать на весу за ее наружную часть. СМЖ исследуют немедленно при доставке в лабораторию. Стерильной пастеровской пипеткой со дна пробирки берут 0,3-0,5 мл материала и по 2-3 капли засевают на поверхность 2-х чашек Петри с подогретой питательной средой, растирая шпателем. Одна чашка содержит «шоколадный» агар, вторая - сывороточный. Посевы ставят в термостат при 37°С и создают условия повышенного содержания С02 в атмосфере термостата. Пробирка с ликвором в полужидком агаре инкубируется в термостате. Нативная спинномозговая жидкость, оставшаяся в пробирке, исследуется в серологических реакциях и используется для приготовления мазков (Группоспецифические сыворотки производит Санкт-Петербургский НИИ вакцин и сывороток). Отношение к окраске по Граму у нейссерий выражено недостаточно четко, поэтому они окрашиваются метиленовым синим или по Граму в модификации Калины. Прямая микроскопия окрашенных мазков спинномозговой жидкости в известной части случаев позволяет установить наличие бактерий, вызывающих гнойный менингит. Морфология менингококков описана выше. H.influenzae видна в виде мелких полиморфных грамотрицательных палочек и нитей, окруженных еле заметной нежной капсулой. Пневмококки имеют вид ланцетовидных диплококков и коротких цепочек, образуют капсулу. Они грамположительны, хорошо красятся всеми анилиновыми красителями, при этом капсула остается неокрашенной и заметна только на окрашенном фоне. (Описание морфологии колоний и морфологии культуры других бактерий см. в соответствующих методических рекомендациях). Результаты бактериоскопии немедленно сообщают лечащему врачу в виде предварительного ответа. При достаточном количестве исследуемого материала рекомендуется 2-3 капли засеять в чашку с питательной средой для определения чувствительности к антибиотикам. ^ Независимо от результатов бактериоскопии ликвора просматривают засеянные чашки. Просмотр чашек ведут визуально и с помощью бинокулярного стереоскопического микроскопа, лупы. Во внимание принимают все колонии. Чашки с отсутствием роста инкубируют одни сутки. Готовят препараты-мазки, окрашивают, ставят реакцию с 3% раствором КОН и биохимические тесты - на оксидазу, каталазу, уреазу. Гемофилам присущ резкий специфический запах, исходящий от посевов. Морфология менингококковых колоний на сывороточном агаре описана во всех руководствах по микробиологии. На «шоколадном» агаре колонии нежные, сероватого цвета, с блестящей поверхностью и ровными краями, имеют маслянистую консистенцию, размерами от 0,1 до 3,0 мм. Менингококки не меняют цвета среды. На основании микроскопии мазков из колоний и результатов первичных биологических тестов возможна выдача предварительного ответа. Если в мазках обнаружены грамотрицателъные кокки, это дает право отнести их к роду нейссерий и провести дифференциацию видов. Гемофилы на «шоколадном» агаре дают довольно обильный рост. Колонии серого цвета, плоские диаметром 0,2-2,0 мм, легко снимаются со среды. В мазках, окрашенных по Граму, видны мелкие короткие грамотрицательньте палочки с капсулой разной степени выраженности, а также нити разной длины и короткие цепочки. На сывороточном агаре H.influenzae не растет. Крупные (3-5 мм) колонии, содержащие грамотрицательные палочки, подозрительны на энтеробактерии. Candida и P.aeruginosa растут обильно на всех средах, не изменяя цвета «шоколадного» агара. Колонии пневмококков на обеих средах - мелкие (диаметром 0,1-1,0 мм), иногда плоские, с вдавлением в центре. На «шоколадном» агаре они окружены зоной желто-зеленого гемолиза (тип альфагемолиза). По внешнему виду колонии пневмококков на обеих средах трудно отличить от колоний стрептококков группы В, зеленящих стрептококков, энтерококков (S.faecalis), которые в редких случаях могут вызвать менингит, особенно у детей 1 года. В мазках из колоний пневмококки имеют овальную или шаровидную форму, располагаются парами или в виде коротких цепочек из 2-3 пар. Если имеется обильный рост одинаковых колоний, то допустим одномоментный отсев на дифференциально-диагностические среды, изучение культуры по ряду признаков и антибиотикочувствительности (табл. 1,2). Определение чувствительности энтеробактерий и стафилококков проводят на среде АГВ. Эта среда служит основой для определения чувствительности к антибиотикам менингококков при добавлении 20% сыворотки, H.influenzae и пневмококков - при добавлении соответствующего количества крови. Приготовление питательных сред и постановка теста на антибиотикочувствительность производится в соответствии с действующими указаниями (Методические указания по определению чувствительности микроорганизмов к антибиотикам методом диффузии в агар с использованием дисков, № 10.05.013.97). В таблице № 2 суммировано минимальное число признаков, достаточное для того, чтобы выделенные из СМЖ бактерии предположительно отнести к тому или иному таксону (от семейства до вида) и избрать дальнейший путь идентификации. На этом этапе возможна выдача окончательного ответа, при положительной реакции со специфическими антисыворотками для H.influenzae, N.meningitidis и Str.pneumoniae. Колонии, подозрительные на менингококки, отсевают на скошенный сывороточный агар или сектор чашки и инкубируют при 37°С. Колонии, подозрительные на пневмококки, стрептококки и др., отсевают на 2 сектора кровяного агара (с 5% крови) для последующего определения чувствительности к желчи и постановки тестов на лекарственную чувствительность. Если число выросших колоний мало (1-2), то их отсевают на чашку с сывороточным или «шоколадным» агаром для накопления микробной массы, а идентификацию микроба проводят еще через одни сутки. При менингитах новорожденных и детей раннего возраста, а также изредка и в других возрастных группах, помимо трех перечисленных видов микроорганизмов этиологическими факторами могут быть энтеробактерии (E.coli, S.marcescens, K.pneumoniae, Salmonella, Citrobacter. Enterobacter), P.aeraginosa, Acinetobacter calcoaceticum, Listeria monocytogenes, различные стрептококки - гемолитические группы В, «зеленящие» и энтерококки, а также стафилококки (золотистый и эпидермальный) и грибы рода Candida. При подозрении на энтеробактерии (Методические указания по микробиологической диагностике заболеваний, вызванных энтеробактериями (№ 10.05.017.97), синегнойную палочку (Методические рекомендации «Обнаружение и идентификация синегнойной палочки в объектах окружающей среды, пищевых продуктах, воде, сточных жидкостях» (№ 10.04.001.97), стафилококк ( «Об унификации микробиологических методов исследования в КДЛ ЛПУ» № 10.05.031.97) и Ac.calcoaceticum проводят исследования в соответствии с имеющимися методическими материалами (НД). При подозрении на листерии в этот день, если число колоний позволяет, ставят ряд проб, а также тест на чувствительность к антибиотикам. Для L.monocytogenes помимо признаков, указанных в табл.2 характерно: подвижность при комнатной температуре, разложение мальтозы, глюкозы, инактивность по отношению к дульциту, манниту, сорбиту и арабинозе. Сахароза и глицерин разлагаются медленно. L. monocytogenes образует краевую зону гемолиза на агаре с 5% бараньей разлитом слоем 3 мм. ^ ,белых выпуклых колоний, состоящих из дрожжевых клеток, на среду Сабуро или мясо-лептонный агар, содержащий по 100 МЕ/мл пенициллина и стрептомицина. Если прямой посев на чашки с питательной средой не дал роста колоний, то делается высев на чашки с сывороточным, «шоколадным» агаром из инкубированной в термостате смеси ликвора с полужидким агаром (среда «обогащения»). При отрицательных результатах высев со среды «обогащения» повторяют через 1-2 дня в течение - 5 дней инкубации в термостате. При получении роста колоний исследование их проводят тем же путем, что и при прямом посеве спинномозговой жидкости. ^ . Культуры, отсеянные из отдельных колоний, просматривают под МБС и ставят пробу с 3% раствором КОН. Для оценки чистоты выросшей культуры готовят мазки и просматривают. При обнаружении морфологически типичных грамотрицательных кокков, проводят идентификацию (см.табл.1), серогруппирование идентифицированной культуры, а также используют эту культуру для определения лекарственной устойчивости (если эти тесты не были сделаны на 2-й день). Учитывают результаты посевов, сделанных на 2-й день исследования. На этом этапе возможна выдача окончательного положительного ответа для менингококков и др. микроорганизмов (кроме пневмококков и стрептококков). Для дифференциации пневмококков, зеленящих и фекальных стрептококков (энтерококков) по микроскопии чистых культур на секторах кровяного агара учитывают характер гемолиза вокруг выросших I колоний и ставят дополнительные пробы (см.табл.3). Таблица 3 ^
Примечание: В группу «зеленящих» стрептококков относятся 9 видов малоизученных стрептококков (Об унификации микробиологических методов исследования в КДЛ ЛПУ). На один из двух секторов кровяного агара с ростом колоний накладывают диск из фильтровальной бумаги, пропитанной 20% раствором желчи (на физиологическом растворе), после чего чашку помещают при 37°С на 1-2 часа. По истечении этого времени вокруг диска колонии пневмококков лизируются, образуя зону отсутствия роста шириной 1-2 мм, в то время как рост прочих стрептококков остается интактным. При положительной пробе чувствительности к желчи, при условии типичной морфологии клеток и колоний, можно дать положительный ответ о выделении пневмококков. Рост культуры на 2-м секторе кровяного агара используют для постановки пробы на чувствительность к лекарственным препаратам (если это не было сделано ранее). При отрицательных результатах пробы на чувствительность к желчи, рост на 2~м секторе используют не только для испытания чувствительности к химиопрепаратам, но и для постановки ряда тестов, дифференцирующих стрептококки (см.табл.3). В этот же день ставят пробы для идентификации других возможных возбудителей, а также тест на лекарственную чувствительность (если это не было сделано на 2-й день). ^ . Учитывают результаты посевов с целью дифференциации менингококков от непатогенных нейссерий и Br.catarrhalis и чувствительности к химиопрепаратам (если это не было сделано на 3-й сутки). Возможна выдача положительного ответа. Культуру менингококков, выросшую на сывороточном агаре при температуре 37°С, можно использовать для серологической идентификации менингококков в реакции агглютинации или в реакции преципитации в агаре, а также для определения лекарственной устойчивости. Учитывают результаты проб на лекарственную чувствительность и прочие свойства у других возбудителей, выдают окончательный положительный ответ. ^ При подозрении на менингококцемию или сепсис проводят бактериологическое исследование крови. В качестве экспресс-метода диагностики рекомендуется приготовление мазка «толстой капли» из крови, взятой из вены или пальца. В препарате «толстой капли» менингококки имеют преимущественно такую же морфологию, как в спинномозговой жидкости, но чаще располагаются поодиночке, имеют более круглую форму. В мазке, имеющем голубой фон, хорошо видны окрашенные в темно-синий цвет лейкоциты и между ними множество мелких, темно-синих, располагающихся кучками, парно и по одному, кокков. Результаты бактериоскопии немедленно сообщают лечащему врачу в виде предварительного ответа. Кровь, взятую стерильно из вены, засевают на 0,1% полужидкий агар или жидкую питательную среду в отношении 1:10, т.е. 1-2 мл крови можно посеять в пробирку с 7-10 мл полужидкого агара или 5-10 мл крови засеять во флакон с 50 мл среды. После суточной инкубации материал высевают на сывороточный агар и «шоколадный» в чашки Петри. При наличии роста готовят препараты для микроскопии. При отрицательном результате рекомендуется инкубация в течение недели с высевами через день. Выделение и идентификацию гемокультур проводят также, как при исследовании спинномозговой жидкости. ^ При менингококцемии иногда удается обнаружить менингококки непосредственно в экссудате кожных петехий. Для этого вначале обтирают кожу вокруг петехий 70% спиртом. В случае образования некроза в центре петехий экссудат можно взять прокаленной и остуженной бактериологической петлей из некротизированных участков. При неповрежденной коже экссудат берут стерильной тонкой иглой, соединенной со шприцем, в котором имеется 0,1-0,2 мл физиологического раствора. Физиологический раствор вводят в толщу петехий и отсасывают обратно. Посев экссудата производят в чашки Петри с сывороточным агаром, содержащим антибиотики ристомицин или линкомицин (п.п.10.2, 10.3) для подавления кожной флоры. Из остатка экссудата готовят препараты-мазки. Мазки из содержимого петехий можно приготовить в виде отпечатков. Для этого стерильной петлей осторожно скарифицируют поверхность петехий, затем прикладывают несколькими местами предметное стекло (стерильное), фиксируют пламенем горелки, окрашивают. На основании данных микроскопии возможна выдача предварительного ответа. Засеянные чашки инкубируют при 37°С 24 часа (в случае отсутствия роста - 48 часов); подозрительные на менингококки колонии отсевают и изучают по описанной схеме (п.3). ^ Исследуемый материал - слизь с задней глотки - берут натощак или через 3-4 часа после еды стерильным ватным тампоном, укрепленным на изогнутой проволоке. Материал берут с обязательным надавливанием шпателем на корень языка. Тампон вводят концом кверху за мягкое небо в носоглотку и проводят 2-3 раза по задней стенке. При извлечении тампон не должен касаться зубов, слизистой щек, языка и язычка. Материал может быть засеян на месте его взятия на чашку Петри с питательной средой, или средой обогащения ( для чего тампон погружают в среду Игла или среду 199, без антибиотиков.), или берут смоченным тампоном, который затем доставляют в лабораторию (п.10.6). При посеве на чашку материал втирают на поверхности небольшого участка (1x2 см) среды всеми сторонами тампона, затем этим же тампоном засевают штрихами (с отрывом) по всей площади, отведенной для посева. Используют сывороточный агар с добавлением в него антибиотиков, подавляющих рост грамположительных кокков. Для этой цели применяется рпстомицин или линкомицин в оптимальной концентрации (п.п.10.2, 10.3). На одну чашку можно засеять две пробы. Однако встречаются отдельные штаммы менингококков, более чувствительные к линкомицину, поэтому те же пробы одновременно засевают на половину чашки с сывороточным агаром без линкомицина. При отсутствии линкомицина или ристомицина можно использовать диски с этими антибиотиками. Диски (не более 2-х) накладывают непосредственно на поверхность засеянного сывороточного агара. В этом случае на 1 чашку сеют только одну пробу. Через одни сутки вокруг диска, в зоне 1 см, рост грамположительной флоры будет подавлен, что увеличивает возможность выделения колоний нейссерий. Засеянные чашки доставляют в лабораторию, тщательно защищая их от охлаждения, в зимнее время применяя грелки (35-40°С) и немедленно помещают в термостат при температуре 37°С. Тампоны с исследуемым материалом, погруженные в полужидкую или транспортную среду, доставляют в лабораторию, также тщательно защищенными от охлаждения. Тампоны в 0,1% полужидком агаре (обогащения) помещают в термостат для подращивания флоры. Смоченные тампоны или тампоны в транспортной бульонной среде засевают на чашку с сывороточным агаром, лишенным ингибитора, без предварительного подращивания. Посев делают отжатым тампоном, как описано выше. Засеянные чашки помещают в термостат. При транспортировке материала на короткие расстояния (1-2 часа езды до лаборатории) применение транспортных сред не рекомендуется. При трансдортировке в течение 2-4 часов уместно применение тампонов, смоченных питательной средой. При транспортировке в течение 3-х часов и более тампоны перевозят погруженными в транспортную среду. Полужидкая среда обогащения может использоваться независимо т сроков транспортировки. ^ . Просматривают чашки, засеянные накануне, визуально и под лупой - микроскопом МБС, подозрительные колонии отсевают на секторы чашки с сывороточным агаром (не менее 3-5 колоний). Внешний вид колоний менингококков описан выше. На средах с ингибиторами вырастают только грамотрицательные бактерии, существенно представители нейссерий. При отсутствии роста в чашках с антибиотиками проводят повторный просмотр их через 40-48 часов после посева. В эти же сутки делают высев из полужидкой (0,1%) среды обогащения на чашку с сывороточным агаром без ингибитора. ^ . Изучают рост чистых культур отсеянных из отдельных колоний в предыдущий день. Культуры, колонии которых имеют желтый пигмент различной интенсивности, а также характеризующиеся «сухим» ростом, отбрасывают. Следует иметь в виду, что на сывороточном агаре колонии менингококков могут выглядеть желтоватыми из-за оттенка среды. Поэтому для обнаружения пигмента их необходимо просматривать, при дневном освещении. Для дальнейшего исследования на менингококки оставляют только непигментированные культуры, дающие нежный влажный рост. Из них готовят мазки, проводят микроскопию чистой культуры. В первых генерациях для менингококков характерны полиморфизм и вариабельность окраски, что не наблюдается у непатогенных нейссерий. После микроскопии дальнейшую идентификацию культур проводят по выше описанным тестам (п.3.1, 3.2) Если рост культуры из отсеянных колоний достаточно обильный, то в эти сутки ставят реакцию агглютинации с группоспецифическими сыворотками (п.2) ^ Просматривают посевы, сделанные в предыдущий день. Учитывают результаты роста на бессывороточном и желчном агаре (при температуре 37°С), сахаролитическую активность, ставят реакцию с водным раствором Люголя на продукцию полисахарида, проводят окончательную серологическую идентификацию менингококков по реакции агглютинации. В этот же день выдают окончательный положительный или отрицательный ответ. Результаты бактериологического исследования с полужидкой среды, соответственно, будут получены на сутки позднее. ^ Патологоанатомическое вскрытие желательно проводить в наиболее ранние сроки после смерти. Для бактериологического исследования направляют кровь, ликвор, кусочки головного мозга (или гной, взятый тампоном с мягкой мозговой оболочки, в случаях менингококцемии - из печени, селезенки, легкого, надпочечников и т.д.). Кровь берут стерильно из правого сердца, после вскрытия скальпелем, с помощью стерильной пипетки с грушей в количестве 7-10 мл. Из них 2-3 мл засевают в 25 мл 0,1% полужидкого агара, а оставшиеся- 5-7 мл используют для других исследований (серологических, в ВИЭФ и т.д.). Для посевов можно использовать, также сгустки крови из крупных сосудов. Ликвор берут стерильной пипеткой из околооболочечного пространства (во время извлечения головного мозга из полости черепа), в стерильную пробирку в количестве 3-5 мл и немедленно высевают на чашки с питательными средами. В количестве 0,1 мл исследуемый материал наносят в центр чашки и распределяют по ее поверхности покачиванием, растирать шпателем не рекомендуется. Бактериологическое исследование ликвора и крови проводят в соответствии с п.п.3.1 и 3.2. Надо иметь в виду, что рост на чашках может быть смешанным из-за попадания непатогенной микрофлоры, поэтому к общепринятому набору питательных сред следует добавить чашку сывороточного агара с антибиотиком (ристомиции, линкомицин) (п.п.10.2, 10.3.). Гной с мозговых оболочек берут стерильным ватным тампоном и засевают газоном или штрихами на чашки с шоколадным сывороточным агаром и в пробирку со средой обогащения, делают 2 мазка на предметных стеклах, один из которых красят метиленовым синим, другой - по Граму. Для взятия материала из мозга и других органов к месту разреза прикасаются раскаленным шпателем, материал берут из глубины разреза стерильным ватным тампоном. Посев производят обычным способом на те же плотные и жидкие питательные среды. Выросшие культуры дифференцируют в соответствии с п.п. 3.1 и 3.4. Помимо посевов из мозга, целесообразно проводить изучение мазков отпечатков с поверхности мягких мозговых оболочек. После подсушивания и фиксации над пламенем горелки (при длительном хранении - в ацетоне) мазки окрашивают и просматривают. ^ Идентифицированные культуры уничтожают или передают по требованию в специализированные НИИ или опорные базы. N.meningitidis. Str.pneumonie быстро гибнут во внешней среде. Их можно сохранить в течение 5-6 недель методом посева на столбики из оптимальных для каждого микроорганизма питательных сред: для N. meningitidis - сывороточный агар, для Str.pneumonien - кровяной агар. Культуру засевают уколом в столбики и ставят в термостат при температуре 37°С. Через 24 часа при появлении роста культуры по ходу укола и в вида бляшки на поверхности среды в пробирку наливают 1.5-2 мл стерильного вазелинового масла и в таком виде хранят, транспортируют, не допуская охлаждения. Засеянный материал из одной пробирки можно использовать многократно для пересева. Для сохранения культуры пневмококков ее засевают на скошенный кровяной агар, без инкубации при 37°С, и держат в течение 4-6 дней при температуре от +4°С до +22°С. Для получения свежей культуры с поверхности засеянного агара делают соскоб и пересевают на свежую среду такого же состава, ставят в термостат на сутки при температуре 37°С. Группоспецифическая активность менингококков сохраняется в течение 2-х недель, а пневмококков - 1 неделю. H.influenzae также быстро гибнет. Жизнеспособность гемофилов можно продлить до 1 месяца, для чего делают обильный посев на скошенный «шоколадный» агар и после суточной инкубации создают полную герметизацию. Такую культуру для пересева используют только однократно. Дегерметизация приводит к гибели субкультуры. ^ 1) При бактериологическом обследовании ликвора и крови сроки выдачи и формулировка ответов таковы: на 1-й день на основании прямой бактериоскопии ликвора и толстой капли крови дают предварительный ответ, который в зависимости от результата формируется в трех вариантах: а) при наличии в мазках большого числа морфологически типичных бактерий пишут: «В спинномозговой жидкости (крови) при прямой бактериоскопии обнаружены грамотрицательные кокки (или грамположительные палочки), сходные по морфологии с менингококками, или пневмококками, или H.influenzae. Исследование продолжается.» б) при наличии в мазках единичных бактерий пишут: «В спинномозговой жидкости (крови) при прямой бактериоскопии обнаружены единичные (или парные) клетки кокков (или палочек и т.д.). Исследование продолжается.» в) при отсутствии каких-либо бактериальных клеток пишут: «В спинномозговой жидкости (крови) при прямой бактериоскопии бактерий не обнаружено.» На основании результатов серологических реакций (ВИЭФ и др.) ликвора дают ответ, который в зависимости от результатов формулируют следующим образом: а) при выявлении специфического антигена пишут: «В спинномозговой жидкости выявлен специфический антиген (менингококковый. пневмококковый и H.influenzae тип «В» и др.)». б) при отрицательном результате пишут: «В спинномозговой жидкости специфические антигены не выявлены». на 2-й день выдают ответ также предварительного характера, который в зависимости от результатов бактериологического исследования формулируют следующим образом: а) при росте бактерий, типичных по морфологическим, культуральным свойствам для нейссерий и других родов, пишут: «При прямом посеве спинномозговой жидкости (крови) получен рост нейссерий (или стафилококков, стрептококков, грамотрицательных палочек и др.). Изучение культуры продолжается», б) при наличии четко выраженной реакции агглютинации выросшей культуры с одной из специфических сывороток (табл.2) и положительной бактериоскопии мазка может быть дан окончательный положительный ответ: «При исследовании спинномозговой жидкости (кровь) получен рост (H.influenzae, N.meningitidis, Str.pneumoniae и др.)». в) при отсутствии роста пишут: «При прямом посеве спинномозговой жидкости (крови) роста бактерий не обнаружено. Исследование продолжается.» на 3-й день на основании культурально-биохимических свойств бактерий, отсеянных с чашки на 2-й день, выдают окончательный ответ: «Из спинномозговой жидкости (крови) выделена культура менингококков серогруппы А, В и т.п. (или негруппируемая)». В редчайших случаях «M.catarrhalis или непатогенные нейссерий». В этот же день может быть дан предварительный ответ о росте (или его отсутствии) бактерий в результате высева из среды обогащения. Формулировка та же, что и при оценке результатов прямого посева с чашки. В этот же день выдают окончательный положительный ответ на пневмококки, который формулируют: «Из спинномозговой жидкости (крови) выделена культура Str.pneumoniae." на 4-й день может быть выдан окончательный положительный ответ о видовой принадлежности нейссерий, выросших при прямом посеве, а также других бактерий. На этом же этапе, как и в следующие дни (вплоть до 5-го дня), может быть выдан окончательный положительный ответ, полученный в результате высева из среды обогащения. Формулировка та же (см. 3-й день). Окончательный отрицательный ответ выдают не ранее 5-го дня, когда при последнем высеве из среды обогащения (на 5-й день ее инкубации) не обнаруживают роста бактерий. Его формулировка: «При инкубации спинномозговой жидкости (крови) на среде обогащения в течение 5 дней бактерий выделить не удалось.» 2) При бактериологическом исследовании отпечатков-мазков из петехий больного или кусочков ткани трупного материала дают предварительный ответ, который в зависимости от результатов формулируется в трех вариантах (п.9.1). При бактериологическом исследовании трупного материала, кусочков тканей, крови, жидкости из полостей и т.д. в зависимости от результатов, формулировку ответа см. п.9.1. Окончательный отрицательный ответ выдается не ранее 5-го дня с момента посева исследуемого материала. 3) При бактериологическом исследовании слизи из носоглотки выдают только окончательные ответы. Сроки выдачи и формулировки следующие: на 4-й день при выделении культуры менингококка выдают положительный ответ: «В носоглоточной слизи обнаружены менингококки определенной серогруппы или негруппируемые.» В случаях добавочного отсева колоний с чашек, а также при использовании полужидкой среды обогащения сроки выдачи ответа соответственно отодвигаются на сутки. При отсутствии роста менингококков в посевах выдают отрицательный ответ: «В носоглоточной слизи менингококк не обнаружен.» |
Ваша оценка этого документа будет первой.
Ваша оценка:
Похожие:
База данных защищена авторским правом ©MedZnate 2000-2016
allo, dekanat, ansya, kenam
обратиться к администрации | правообладателям | пользователям
allo, dekanat, ansya, kenam
обратиться к администрации | правообладателям | пользователям