Drg® ca-242 (Панкрео-коло-ректальный) ифа (eia-4581)
|
|
Скачать 113.11 Kb.
|
|
DRG® CA-242 (Панкрео-коло-ректальный) ИФА (EIA-4581) Пересмотрено 23.11.2009 Пожалуйста, используйте только действительную версию инструкции, вложенную в набор 1 НАИМЕНОВАНИЕ И НАЗНАЧЕНИЕ ИФА СА-242 – это твердофазный, иммуносорбентный тест с ферментной меткой (ELISA). Он позоляет измерять количественно антиген СА-242 для помощи в диагностике пациентов, подозреваемых в наличии рака поджелудочной железы, коло-ректального рака, а также связанных с ними заболеваний. (Только для профессионального использования) ^ СА-242 - сиалатированный углеводный антиген присутствующий на типе слизобразующих гликопротеинов в карциномах многих органов. СА-242 антиген выделяется из опухоли, поэтому СА-242 может быть обнаружен в сыворотке у пациентов с карциномами. У нормальных здоровых людей и людей с доброкачественными болезнями уровень СА-242 низкий, в то время как поднятые уровни обычно обнаруживаются у пациентов с желудочно-кишечным раком. Опознавая пациентов рака ободочной и прямой кишки на ранней стадии болезни, первичная диагностика часто полагается на тест скрытой крови и на радиологическую эндоскопическую экспертизу большой кишки. РЭА широко используется для контроля и предварительной оценки пациентов с коло-ректальным раком, в то время как клиническая полезность РЭА ограничена из-за низкой чувствительности на ранних стадиях рака. РЭА показал более высокую чувствительность для ректального рака чем для толстокишечного рака, в то время как СА-242, напротив, подтверждал рак толстой кишки. Поэтому комбинация СА-242 с РЭА даст более высокую чувствительность как для рака прямой, так и для рака толстой кишки. СА-242 лучше, чем СА-199 при диагностике рака поджелудочной железы из-за его более высокой специфики, а также при скрининге локализованных или соответствующих опухолей. ^ Количественный тест на рак СА-242 – это твердофазная иммуносорбентная система с ферментной меткой, использующая лунки со стрептавидином. Образец, стандарты и контроли биотинилированные антитела против СА-242 инкубируются влунках. Во время инкубации специфический раковый антиген (СА-242) связывается с антителами к СА-242 на лунке. Несвязавшийся антиген СА-242 удаляется промывкой лунок с помощью буфера. Ферментный конъюгат добавляется в каждую лунку. После инкубации несвязавшийся конъюгат вымывается. Количество связанной пероксидазы пропорционально концентрации антигена СА-242 в образце. После добавления хромогенного субстрата интенсивность образовавшегося окрашивания пропорциональна концентрации антигена СА-242 в образце пациента. Она может быть посчитана с использованием планшетного ридера при длине волны 450 нм. ^ СА-242 количественный тест для диагностики in-vitro. Компоненты набора предназначены для использования в качестве единого набора. Компоненты разных серий не должны перемешиваться и использоваться Этот набор содержит материал человеческого происхождения. Стандарты и образцы надо рассматривать как потенциально заразные. Стандарты показали отрицательный результат на HBsAg, HIV 1/2 и HCV. Однако, не существует методов, гарантирующих полное отсутствие этих веществ. Поэтому, все продукты человеческой крови, включая образцы сыворотки, должны считаться потенциально опасными. Рекомендуется работать с реагентами и образцами пациентов по подходящим правилам по безопасности работы с биологически опасными веществами. Избегать контакта с 1н HCl. Может вызвать раздражения и ожоги кожи. В случае попадания кислоты на кожу, обильно промыть водой. Не использовать реагенты с истекшим сроком годности и не смешивать реагенты с разными номерами лотов. Сразу закрывать флаконы с реагентами. Не путать колпачки. Не пипетировать ртом. ^
Лунки покрыты стрептавидином. 8 × 12 стрипов.
Анти-СА-242 антитела конъюгированное с пероксидазой хрена
Содержит 5, 25, 50, 100 и 200 Е/мл
Содержит пероксид и тетраметилбензидин.
Подготовить рабочий раствор путем добавления 10 мл промывочного буфера в 990 мл дистиллированной воды
^
^ Подготовьте рабочий промывочный буфер добавлением всего содержимого флакона с концентратом промывочного буфера до 1000 мл дистиллированной водой в чистую пластиковую бутыль. Аккуратно перемешайте для растворения. Хранить при комнатной температуре. ^ Хранить наборы при 2 – 8°С. Микролунки хранить в сухом мешочке с диссикантом. Неоткрытые реагенты стабильны в течение всего срока годности. ТМБ должен быть бесцветным. Если раствор стал синеть, его необходимо заменить. Не подвергать реагенты воздействию сильного освещения во время хранения и использования. ^ Отберите кровь венипункцией и дайте ей свернуться. Отделите сыворотку центрифугированием при комнатной температуре. Если сыворотки сразу не исследуются, их можно хранить при – 20°С до 6 месяцев. Избегайте повторного замораживания и размораживания образцов. Пробы, очевидно контаминированные бактериями, не должны использоваться. Образцы мутные, с высоким содержанием жиров, должны быть очищены перед тестом. ^ Доведите все реагенты и образцы до комнатной температуры (24±3°С) и аккуратно перемешайте перед началом теста. Необходимо иметь все реагенты и образцы подготовленными до начала анализа. После начала процедуры все её этапы должны проходить без прерываний для получения наиболее надежных и последовательных результатов. Используйте новый одноразовый наконечник для каждой пробы. ^
^ Промывайте лунки и удаляйте воду тщательно для достижения наилучших результатов. Пипетируйте реагенты на дно лунки. Перемешивание в вортексе или встряхивание лунок после пипетирования образцов и реагентов не требуется. Перед анализом необходимо закрепить в держателе необходимое число лунок и снять крышки со всех реагентов и образцов. Это необходимо для соблюдения равных интервалов времени при пипетированиию. Для того, чтобы снизить вероятность ошибки из-за временного разрыва между пробами при раскапывании, рекомендуется исследовать максимум 30 пациентов за один раз. Абсорбция – это функция температуры и времени инкубации. Рекомендуется заранее подготовить реагенты, образцы и необходимые лунки для уверенного пипетирования с равным интервалом без прирываний. ^ Нанесите концентрацию (Х) каждого стандарта напротив абсорбции (Y) на логарифмической бумаге. Получите значение антигена СА-242 по стандартной кривой как показано ниже (нижеприведенные данные предназначены только для демонстрационных целей и не в коем случае не могут быть использованы вместо данных, полученных во время реального анализа)
  СА-242 (Е/мл) ^ Каждой лаборатории рекомендуется разработать собственные нормы и патологические интервалы, принимая во внимание факторы окружающей среды. Клиническое изучение СА-242 показало следующие результаты: были проанализированы образцы сывороток у 236 нормальных людей; было выявлено 96% случаев с СА-242 ниже 15 Е/мл и 4% с 15 до 25 Ед/мл ^ Тест на СА-242 не должен использоваться в скрининге рака и не должен заменять полного клинического осмотра. Для диагностических целей значение антигена СА-242должно использоваться как дополнительная информация для врача. Образцы с уровнем антигена СА-242 выше 200 Е/мл должны быть разведены и проанализированы заново. ^ Каждая лаборатория должна использовать внутренние контроли нескольких уровней для мониторинга качества анализа. Контроли должны позиционироваться как образцы с неизвестной концентрацией. Полученные результаты должны соответствовать заявленным контрольным значениям ^ 17.1 Коэффициент вариации (КВ) Анализ внутри постановки Три сыворотки из пула поставлены 8 раз за одну постановку.
Межпостановочный тест: три сыворотки из пула были проанализированы дважды через четыре дня.
17.2 Точность Сыворотка, содержащая 333 Е/мл, была разведена серией сыворотки без СА-242. Разведения были проанализированы. Открытия СА-242 были сравнены с ожидаемыми значениями.
Известные образцы СА-242 были усилены различными концентрациями СА-242. Затем образцы были протестированы. Полученные концентрации СА-242 были сравнены с ожидаемыми значениями:
17.3 Специфичность СА-242 ИФА распознает только СА-242 антиген. Следующие соединения были протестированы на перекрестную реактивность анализа. Перекрестная реактивность к другим соединениям, возможно присутствующим в образцах пациента, не обнаружена. Перекрестная реакция не обнаружена со следующими соединениями с концентрациями ПСА (120 нг/мл) ПАП (60 нг/мл) РЭА (18248 нг/мл) АФП (10000 нг/мл) СА-125 (1000 Е/мл) Тем не менее, сырые антигены СА 15-3 и СА 19-9 будут реагировать с СА-242 в данном тесте. ^ Предел обнаружения ИФА СА-242 составляет 1 Е/мл. Минимальная определяемая концентрация СА-242 определяется тем СА-242, который соответствует абсорбции, составляющей два стандартных отклонения от средней абсорбции 10 репликатов разбавителя образцов (0 Е/мл). 19 ЛИТЕРАТУРА
|
|||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
Ваша оценка этого документа будет первой.
Ваша оценка:
Похожие:
База данных защищена авторским правом ©MedZnate 2000-2016
allo, dekanat, ansya, kenam
обратиться к администрации | правообладателям | пользователям
allo, dekanat, ansya, kenam
обратиться к администрации | правообладателям | пользователям