Официальные оппоненты: доктор сельскохозяйственных наук icon

Официальные оппоненты: доктор сельскохозяйственных наук





Скачать 0.86 Mb.
Название Официальные оппоненты: доктор сельскохозяйственных наук
страница 1/4
Дата 04.04.2013
Размер 0.86 Mb.
Тип Автореферат
  1   2   3   4
Работа выполнена в филиале "Научно-исследовательский институт овцеводства" ТОО "Казахский научно-исследовательский институт животноводства и кормопроизводства"


Официальные оппоненты: доктор сельскохозяйственных наук,

профессор Крючков В.Д.

доктор сельскохозяйственных наук

Кикебаев Н.А.

доктор сельскохозяйственных наук

Бекетауов О


Ведущая организация: Казахский национальный аграрный университет


Защита диссертации состоится 10 сентября 2010 г. в 14.00 часов на заседании диссертационного совета Д.55.11.01 ТОО "Казахский научно-исследовательский институт животноводства и кормопроизводства" по адресу 050035, г. Алматы, ул. Жандосова, 51.


С диссертацией можно ознакомится в библиотеке ТОО "Казахский научно-исследовательский институт животноводства и кормопроизводства" по адресу 050035, г. Алматы, ул. Жандосова, 51.


Автореферат разослан «___»____________2010 г.


Ученый секретарь

диссертационного совета,

доктор сельскохозяйственных наук К. Жумадилла


^ ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ


Актуальность темы. Биотехнология все шире и глубже охватывает самые различные сферы деятельности человека. Базируясь на достижениях молекулярной генетики, биохимии и физиологии эта наука быстро приобретает большую народнохозяйственную значимость. Основой биотехнологии является молекулярная биология, важнейшими звеньями – генная инженерия, промышленная микробиология, микробиологические синтезы. В настоящее время биотехнология охватывает всю совокупность передовых направлений биологии и сопредельных наук. Основными потребителями продуктов биотехнологии являются медицина и сельское хозяйство.

Биотехнология в воспроизводстве и селекции овец имеет особое значение. Овцы относятся к малоплодным видам млекопитающих, в то время как в яичнике содержатся сотни тысяч половых клеток-ооцитов, а в семенниках – миллиарды сперматозоидов, представляющих огромный генетический резерв. Решение проблемы ускоренного воспроизводства в овцеводстве состоит в том, чтобы перейти к нетрадиционным способам увеличения плодовитости. С этой целью применяется целый ряд биотехнологических методов, разработанных на основе изучения репродуктивной функции, ее регуляции, а также совершенствования приемов манипуляции с эмбрионами и половыми клетками.

К методам биотехнологии, применяемым в практике воспроизводства стада овец, относят: искусственное осеменение, глубокое замораживание и длительное хранение спермы баранов-производителей, вызывание половой охоты и ее синхронизация, получение монозиготных двоен, экстракорпоральное оплодотворение, получение химер, клонирование, пересадка генов и получение трансгенных животных.

Разработка методов искусственного осеменения сельскохозяйственных животных и широкое их применение обеспечили большой успех в генетическом улучшении овец. Использование этих методов и особенно технологии длительного хранения спермы в замороженном состоянии, открытой еще в 1947 году и занесенной в реестр открытий СССР за № 103 (В.К.Милованов, И.И.Соколовская, И.В.Смирнов), дают возможность получения десятков тысяч потомков от одного производителя в год. Этот прием по существу решает проблему рационального использования производителей.

Что касается овцематок, то традиционные методы разведения животных позволяют получать в лучшем случае 10 – 12 потомков за всю их жизнь. Низкий уровень воспроизводства у самок и длительный интервал времени между поколениями ограничивает генетический прогресс в овцеводстве.

В настоящее время эта проблема решается в значительной степени за счет внедрения новых, более прогрессивных методов размножения животных, в частности трансплантации эмбрионов. При этом проводятся стимуляции генетически выдающихся самок с целью увеличения выхода яйцеклеток, оплодотворение их, извлечение зародышей, пересадка маткам реципиентам. Таким образом, высококлассные самки становятся эффективными донорами эмбрионов. Разработанные в последние годы длительного хранения и транспортировки эмбрионов еще более повышают потенциальные возможности этой технологии.

Поэтому, вопросы совершенствования методов длительного хранения спермы баранов-производителей и трансплантации эмбрионов у овец являются актуальными.

Работа выполнена в рамках отраслевой государственной программы в соответствии с тематическим планом научно-исследовательских работ Филиала "Научно-исследовательский институт овцеводства": "Усовершенствовать и внедрить в практику овцеводства метод глубокого замораживания семени баранов", 1981-1985, № гос. регистрации 81061385; "Разработать систему племенной работы, обеспечивающую ускорение темпов воспроизводства стада, увеличение высококачественной продукции при снижении затрат труда и средств на 5-10% в зонах Северного Кавказа, Казахстана, Забайкалья и Украины", 1986-1989, № гос. регистрации 0.137.0.099381; "Разработать биотехнологию создания высокопродуктивных стад на основе размножения животных методом трансплантации эмбрионов",1985-1990, № гос. регистрации 591.158; "Разработать биотехнологию хранения спермы баранов-производителей, позволяющую повысить степень их использования в 1,5 раза", 1991-1995, № гос. регистрации 0194РК00521; "Разработать биотехнологию размножения ценных генотипов овец путем трансплантации эмбрионов и микроманипуляции с зародышевыми клетками",1991-1995, № гос. регистрации 0194РК00532; "Разработать биотехнологические методы хранения спермы и размножения ценных генотипов овец путем трансплантации эмбрионов"1996 -2000, № гос. регистрации 0198РК00097; "Разработать современные биотехнологические методы воспроизводства, размножения ценных генотипов овец, коз и крупного рогатого скота"2000-2005, № гос. регистрации 0101РК00471; "Биотехнология получения, культивирования и криоконсервации гамет и эмбрионов тонкорунных, полутонкорунных и мясосальных овец и коз", 2006-2008, № гос. регистрации 0106 РК 00921.

^ Цель и задачи исследований. Целью исследований является дальнейшее повышение эффективности искусственного осеменения овец с применением замороженной и разбавленной спермы, совершенствование научных основ трансплантации эмбрионов, повышение выхода полноценных эмбрионов, позволяющие наиболее полно реализовать генетические ресурсы овцеводства.

Для достижения намеченной цели поставлены следующие задачи:

  • изучить гаметогенез у овец, качество спермы, биологическую полноценность яйцеклеток и раннее развитие эмбрионов;

  • разработать синтетическую среду для кратковременного хранения спермы при варьирующих температурах (7 -27ºС);

  • разработать синтетическую среду для криоконсервации спермы баранов;

  • повысить суягность овец, осемененных замороженной спермой баранов отечественных и импортных пород;

  • изучить оплодотворяющую способность спермы баранов-производителей, сохраненной в жидком азоте в течение 7 – 9 лет;




  • испытать методы индуцирования множественной овуляции у высокопродуктивных овец-доноров;

  • провести работы по микроманипуляции с зародышевыми клетками (деление, получение химерных эмбрионов, микроинъекции гена) и замораживанию эмбрионов.

^ Научная новизна исследований. Доказана возможность дальнейшего совершенствования основного зоотехнического метода искусственного осеменения в Республике Казахстан посредством использования сохраненной и замороженно-оттаяной спермы генетически ценных баранов-производителей. Изучена биологическая полноценность яйцеклеток овец, закономерность их развития. Выяснена этапность раннего развития эмбрионов и их приживляемость при пересадке реципиентам. При разработке приемов краткосрочного хранения и криоконсервации спермы баранов-производителей, предусматривающих длительное сохранение ее биологической полноценности, в составе синтетических сред испытан ряд компонентов и технологических приемов. Доказана возможность сохранения и использования замороженной спермы в течение 7 – 9 лет не зависимо от места нахождения баранов. Испытан метод кратковременного хранения спермы при варьирующих температурах (7 - 27ºС).

Разработаны и предложены приемы индуцирования множественной овуляции у овец доноров, приживляемость целых, разделенных, химерных, микроинъецированных и замороженно-оттаяных эмбрионов.

Научная новизна исследований подтверждена 2 патентами и 9 рационализаторскими предложениями.

^ Теоретическая ценность работы. Высказано теоретическое положение о том, что определенным вкладом в теорию породообразовательного процесса является экспериментально доказанная возможность хранение спермы барана в замороженном и жидком состоянии в усовершенствованных синтетических средах, получение жизнеспособных плодовитых ягнят трансплантацией эмбрионов в воспроизводстве овец и увеличения на этой основе генетического разнообразия при импорте зарубежной и хранении отечественной гермоплазмы.

^ Практическая ценность и реализация результатов работы. Ценность работы заключается в повышении эффективности искусственного осеменения овец и рационального использования генетических ресурсов высокопродуктивных баранов-производителей и овцематок.

Изучение биологической полноценности яйцеклеток и эмбрионов решает вопросы оплодотворяемости, эмбриональной смертности и плодовитости овец.

Совершенствование среды и технологии кратковременного хранения и замораживания спермы баранов дает возможность интенсивно и долгосрочно использовать имеющиеся генетические ресурсы для повышения продуктивности овцеводства.

Разработка методов трансплантации эмбрионов способствует решению ряда вопросов изучения развития яйцеклеток, оплодотворения, раннего развития эмбрионов.

Решением научно-технического совета Министерства сельского хозяйства Республики Казахстан методы замораживания спермы баранов-производителей и трансплантации эмбрионов рекомендованы в практику овцеводства.

Полученные результаты отражены в «Рекомендациях по замораживанию, длительному хранению, размораживанию семени австралийских баранов и оказанию практической помощи по их эффективному использованию» [Алма-Ата, 1985]; «Практическом руководстве по применению технологии глубокого замораживания и использования семени высокоценных баранов-производителей», [Алма-Ата, 1988]; «Методических рекомендациях по технологии кормления, содержания, подготовке высокоценных баранов-производителей к взятию семени, его глубокому замораживанию и максимальному использованию выдающегося отечественного и зарубежного генофонда», [ВДНХ, СССР, 1989]; методических указаниях «Трансплантация эмбрионов в овцеводстве», [Мынбаево, 1992]; «Практическом руководстве по технологии трансплантации эмбрионов у овец» [Алма-Ата, 1993], в рекомендациях «Кой береке Бастауы» [Мынбаево, 2001], в рекомендациях «Биопролангация выживаемости спермиев баранов, хранение и использование» [Алматы, 2001].

^ Основные положения, выносимые на защиту:

– метод замораживания спермы баранов-производителей, разработанный на основе изучения оплодотворяющей способности спермы и совершенствования состава криозащитных синтетических сред при искусственном осеменении овец, приемлемый для интенсивного и долгосрочного использования генетических ресурсов баранов-производителей;

– метод размножения высокопродуктивных овец на основе совершенствования множественной овуляции, проведения микроманипуляций с зародышами, изучение их приживляемости.

^ Апробация работы. Основные результаты экспериментальных исследований доложены и получили одобрение на: Научно-техническом совете Министерства сельского хозяйства Республики Казахстан, [Алма-Ата, 1982- 1992]; Всесоюзном семинаре «Достижения науки и передового опыта по искусственному осеменению овец», [Москва: ВДНХ, 1987, 1988, 1990]; Всесоюзном совещании «Состояние и перспективы использования австралийских баранов и козлов в отечественном овцеводстве и козоводстве», [Мынбаево, 1988]; Республиканском семинаре-совещании «Использование высокоценных баранов-производителей при внедрении метода замораживания семени», [Талды-Курган, 1988]; Республиканском координационном совете по овцеводству и козоводству, [Алма-Ата, 1988]; Первом съезде физиологов Казахстана, [Алма-Ата, 1988]; Республиканском совещании-семинаре «Трансплантация эмбрионов сельскохозяйственных животных», [Алма-Ата, 1988]; Всесоюзной научно-производственной конференции «Трансплантация эмбрионов сельскохозяйственных животных», [Алма-Ата, 1989]; Республиканском совещании-семинаре «Достижения науки и передового опыта в области воспроизводства сельскохозяйственных животных», [Алма-Ата, 1990]; Международной научной конференции, посвященной 1000-летию эпоса «Манас», [Бишкек, 1995]; Международной научно-практической конференции «Аграрная наука на рубеже веков», [Акмола 1997]; в Материалах научно-теоритической конференции «Казахстан 2030, стратегия развития науки, образования и культуры», [Акмола, 1998]; Международной научно-практической конференции «Проблемы стабилизации и развития сельского хозяйства Казахстана, Сибири и Монголии», [Алматы, 2000]; в Материалах научно-теоритической конференции, посвященной 100-летнему юбилею В.А. Бальмонта «Овцеводство на рубеже веков», [Алматы, 2001]; Международной научной конференции, [Алматы, 2002]; Международной научно-производственной конференции, посвященной 70-летию института овцеводства «Достижения НИИ овцеводства за 70 лет», [Алматы, 2003].

Публикации. По теме диссертации опубликовано 47 работ, в том числе 6 рекомендаций и 1 методическое указание.

^ Объем и структура диссертации. Диссертация изложена на 159 страницах компьютерного текста, содержит введение, материалы и методы исследований, результаты исследований, выводы, практические предложения производству, приложения. Список использованных источников включает 334 источника, в том числе 108 на иностранном языке. Работа содержит 50 таблиц и 27 рисунков.


^ МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

Экспериментальные работы выполнены на тонкорунных, полутонкорунных полугрубошерстных и грубошерстных породах овец, разводимых в Республике Казахстан с 1980 по 2005 годы. Объектом исследований являлась сперма баранов казахской тонкорунной, эдильбаевской, дегересской, казахской полугрубошерстной, таджикской пород, а также импортных – австралийских мериносов, корриделей, полварсов и линкольнов.

Сперму баранов-производителей исследовали по периодам опытов по общепринятым методикам.

Замораживание спермы в 1981-1983 гг. проводили по методу КазНИТИ овцеводства (авторское свидетельство № 698617), дважды апробированной Государственными испытаниями по линии МСХ СССР и рекомендованной для широкого производственного внедрения решением НТС МСХ СССР от 4 мая 1979 года.

В дальнейшем с 1983 по 1990 годы испытывалась усовершенствованная среда, прошедшая государственное испытание в соответствии с решением НТС МСХ СССР от 25 января 1985 года.

С 1990 по 2005 годы криоконсервацию спермы проводили новой синтетической средой, разработанной с учетом положительного эффекта испытанных за предыдущие годы разбавителей, патент № 5182 от 1997 года.

После оценки, пригодные для замораживания эякуляты, с подвижностью и концентрацией не ниже 80% и 2,5 млрд/мл, разбавляли одномоментно в соотношении 1:2, а при концентрации более 3 млрд/мл – 1:3, с таким расчетом, чтобы одна доза содержала 60 - 80 млн. спермиев с прямолинейно-поступательным движением.

Разбавляли сперму непосредственно в спермоприемнике при температуре 30-35º С. Затем сперма предварительно охлаждалась в два этапа: на первом – до комнатной температуры ( 18 - 20º С) в течение 15 –20 минут, на втором –до 2 – 4ºС в течение 1 – 2 часов в бытовом электрохолодильнике и собственно замораживание.

Хранилось замороженное семя в стационарном хранилище. Для использования в хозяйствах сперма перевозилась в сосудах «Харьков-30», «СД-20» и «СД-5», где и находилась в период осеменения.

Для осеменения использовали размороженную сперму с подвижностью более 40%. Осеменяли овец двукратно в одну охоту с интервалом 6 – 8 часов дозой 0,2 мл. Весной, по результатам ягнения, была установлена оплодотворяемость глубокозамороженного семени.

Объектом исследований по трансплантации эмбрионов служили высокопродуктивные овцы опытных хозяйств «Аксенгерское» и им. Мынбаева, Сарыбулакского Государственного племенного завода и эдильбаевские овцы «Брликского» Государственного племенного завода Уральской области.

Основные исследования проведены в лаборатории биотехнологии воспроизводства и трансплантации эмбрионов Казахского НИИ овцеводства. Для изучения развития ооцитов их получали из яичников овец, забитых в ЛСП опытного хозяйства им. Мынбаева и Алма-Атинском мясокомбинате. Культивирование яйцеклеток для изучения морфологических изменений проводили в течение 72 часов в полиэтиленовых пробирках и чашках Петри под вазелиновым маслом.

При испытании различных вариантов схем обработки овцематок-доноров испытывались следующие гормональные препараты: нативный сывороточный гонадотропин (СЖК, Чимкентская биофабрика, РК), ГСЖК (Покровская биофабрика, РФ), фоллигон (Чехословакия), гравогормон (Голландия), ФСГ-Р (США), фоллитропин (Литва), графоллон (Пушкин, РФ), простагландин Ф-два- альфа (эстрофан, Чехословакия).

Введение ГСЖК проводится однократно в дозе 1000 – 1200 И.Е. на 11 – 13 день полового цикла и через 48 часов инъецируют 125 – 165 мкг эстрофана. Введение гипофизарных гормонов осуществляли путем дробных инъекций с интервалом 12 часов в течение 2 дней в дозе 11 – 12 мг, эквивалентной 250 – 300 единицам действия, в зависимости от схемы обработки и живой массы доноров. В первый день по 100 ед., во второй по 50. Эстрофан вводился через 48 часов от начала обработки доноров.

В целях повышения оплодотворяемости и выхода полноценных эмбрионов у овец-доноров использованы препараты витаминов А, Д, Е в дозе 25 – 30 тыс. И.Е., 40 тыс.И.Е. и 20 мг соответственно. Обработку доноров проводили трехкратно: за 7 – 10 дней до проявления охоты, в день охоты и спустя 7 дней после ее проявления.

Проявление половых циклов у овец-доноров и реципиентов определялось двукратно утром и вечером с интервалом 11 – 12 часов с последующим формированием подопытных групп.

Пришедших в охоту овец-доноров, после проведения гормональной обработки, осеменяли искусственно свежевзятой спермой баранов-производителей или же ручным способом, согласно существующим инструкциям [М., 1986; Алма-Ата, 1988].

В качестве реципиентов использовали маток 1 – 2 класса казахской тонкорунной, эдильбаевской, казахской курдючной пород овец со спонтанной охотой. Проявление половых циклов реципиентов и доноров было синхронным, с отклонениями максимум 12 – 16 часов.

Извлечение эмбрионов осуществляли хирургическим методом. В качестве промывной жидкости применяли ФБС – фосфорно-солевой буфер Дюльбекко (изготовитель ВНИЯИ), обогащенный 20% инактивированной овечьей сыворотки. Наряду с ФБС использовали питательную среду ТС-199.

Вымывание зигот и ранних эмбрионов проводили с использованием катетеров, металлической канюли или же полихлорвиниловой трубки с наружным диаметром 2,3 – 2,5 мм и внутренним 0,8 – 1,0. Катетер, канюлю или трубку помещали в яйцевод на глубину 2 – 4 см через яичниковый конец, плотно фиксировали пальцами или гемостатическим пинцетом со специальной выемкой. Промывная жидкость, объемом 5 – 10 мл, вводилась инъекционным шприцом со стороны рога матки и собиралась в пробирки или спермоприемники.

Зародыши более поздних стадий вымывали из рога матки через яйцевод с использованием тех же инструментов.

Качественные эмбрионы, пригодные для пересадки, имеют компактную сферическую форму и бластомеры с хорошо различимыми клеточными мембранами. Зародыши с расплывчатыми бластомерами, сморщенной прозрачной оболочкой, крупной зернистостью и другими признаками дегенерации браковались.

До пересадки реципиентам и в процессе микроманипуляций (прокалывание гена, деление, создание химер) эмбрионы хранились при температуре 37ºС.. Оставшиеся от трансплантации эмбрионы замораживались для длительного хранения.

В качестве реципиентов использовали клинически здоровых высокомолочных маток по 2 – 3 на одного донора. Пересадка эмбрионов реципиентам осуществлялась хирургическим способом, аналогично донорам. Место введения определялось в зависимости от стадии развития зародышей. Зиготы, извлеченные на первый – второй дни от начала охоты, трансплантировали в яйцеводы, а эмбрионы старшего возраста вводятся в просвет рога матки. Для пересадки использовали пипетки и полистироловые насадки, в полость которых засасывали жидкость с зародышами.

Доноров из числа племенного поголовья после однократного вымывания переводили в стадо для дальнейшего воспроизводства. Выбракованные высокоценные доноры использовались многократно.

Контроль приживляемости эмбрионов у реципиентов устанавливался по дате ягнения, количеству ягнят, полу, живой массе, возрасту в днях после лапаротомии, возрасту пересаженного зародыша.


^ РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ


Совершенствование метода кратковременного хранения спермы баранов-производителей, разработка среды

В результате проведенных исследований, нами разработана синтетическая среда, которая обеспечивает длительную выживаемость спермы вне организма и сохранение ее высокой оплодотворяющей способности. Эта среда названа ФСК – фосфатно-суьфатно-комплексонатная и предназначена для разбавления и хранения спермы при варьирующих температурах (7-27 С) с подвижностью не менее 70%, в течение 2-4 суток, без использования углекислого газа и охлаждения до 0-4 С.

Солевой основой среды является натрий лимоннокислый трех замещенный пяти-водный (цитрат натрия), который защищает спермии от самоотравления кислыми продуктами распада, создает буферность среды и является энергетическим источником. В качестве электролитов в среде использованы комплексонаты кальция и магния, которые не могут извлекать содержащиеся в сперме ионы кальция и магния, но способны связывать ионы двухвалентных металлов с более высокими константами устойчивости комплексов, резко снижающих выживаемость спермиев.

Для уменьшения вредного воздействия холодового удара (осмотических явлений на мембране спермиев) в состав среды введен сульфат аммония. С целью предотвращения вредного действия кислорода и развития перекисного окисления липидов жирных ненасыщенных кислот в составе среды использован тиосульфат натрия. Присутствие в составе синтетической среды глицерофосфата кальция восстанавливает фосфорно-кальциевый обмен, который активизирует минеральный обмен, нормализует процессы возбуждения в жгутиках.

Свежевзятую сперму оценивают по объему, густоте и подвижности и разбавляют средой при температуре 33-35 в соотношении 1:1 при концентрации менее 2 млрд в 1 мл, 1:2 при концентрации от 2 до 3,5 и 1:3 при концентрации более 3,5 млрд в 1 мл.

Разбавленную сперму используют в течение 2 суток, в исключительных случаях в течение 3 и более суток. Доза для осеменения овец разбавленной спермой обычная и составляет 0,1 мл. Хранение спермы осуществляется при температуре 7-27С, нижний предел более благоприятен для продолжительного хранения.

Существующие методы хранения спермы требуют хладагентов (лед, сухой лед, жидкий азот и др.), термосов и холодильников, стоимость которых постоянно возрастает. Дорожает и стоимость пищевых продуктов (сахарозы, глюкозы, куриных яиц), которые входят в состав ранее рекомендованных сред. При составлении новой среды эти факторы учтены.

При разработке среды ФСК использовалась сперма баранов казахской тонкорунной породы. В течение опытов получено и исследовано 497 эякулятов. Из них непригодными признано 147 или 29,6%.

Установлено, что у баранов наблюдаются сезонные колебания качества спермы и уровня спермопродукции. При этом объем эякулята колеблется от 0,8 до 49%, подвижность от 1,7 до 9,8%, уровень спермопродукции от 26,8 до 84,5%.

Пригодные эякуляты использовались при разработке среды для хранения спермы при варьирующих температурах. В результате проведения 179 опытов и 716 анализов разработана среда, названная ФСК (фосфатно-сульфат-комплексонатная). В 134 опытах определялась выживаемость спермиев. Выявлено, что выживаемость спермиев, с подвижностью более 7 баллов, составляет 655 условных единиц, 136 часов, в пределах 5 суток. Во второй серии, когда проведено 45 опытов, выживаемость составила 504 условные единицы, или 66 часов, в пределах 3 суток. В отдельных опытах выживаемость составила 742 условные единицы, или 198 часов, в пределах 8 суток. Минимальная выживаемость составила 276 условных единиц, или 41 час, около 2 суток. В среднем выживаемость составила 600 условных единиц, или 90 часов, около 4 суток.

Осенью 1993 года проведен первый опыт по испытанию данной среды в производственных условиях опытного хозяйства им. Мынбаева. От 4 основных баранов казахской тонкорунной породы класса элита получено и исследовано 80 эякулятов, которые разбавлялись средой «ФСК». Определение выживаемости показало, что через судки подвижность спермы снизилась на 11,2%, через 2 – 22,3%, через 3 – 28,8%, через 4-61,2% и через 6 суток на 66,7%

Тем не менее, через 3 суток подвижность разбавленного семени составляла 65%, а через сутки 80%. Это показывает на возможность использования разбавленного и сохраненного семени для осеменения овцематок и ярок цервикальным и парацервикальным методами в течение 2 суток, а внутриматочным – в течение более 3 суток.

В отаре старшего чабана Шыныбаева Ш. осеменено 178 овец, в том числе 128 маток и 50 ярок.

При осеменении овцематок цервикальным способом по принятой технологии суягность составила 67,8. При осеменении ярок парацервикальным способом суягность составила – 61,2%. Хорошие показатели суягности получены при осеменении ярок внутриматочным методом. При этом доза спермы уменьшена в 3 раза. Несмотря на это суягность составила – 62,9%.

Следовательно, использование среды «ФСК» обеспечила суягность после первичного осеменения, в первом опыте у овцематок – 66,4% и у ярок – 62,0%.

В 1994 году в опытном хозяйстве им. Мынбаева проведен второй опыт по использованию среды «ФСК» при осеменении овец. Осеменение проведено в отаре старшего чабана Шыныбаева Т.. При ручной случке получено 69,6% ягнения овец, а при парацервикальном методе от свежевзятой спермы – 70,0%. При использовании разбавленной спермы средой «ФСК» получено – 61,4% ягнения овец. Это на 8,6 % ниже по сравнению с результатами со свежевзятой спермой. Из осемененных парацервикальным методом с использованием электроподогрева канюли объягнилось 66,6% овец. При цервикальном осеменении разбавленной спермой получено 68,8% ягнения. Наибольший процент ягнения овец – 75,0, получен в группе при осеменении овец внутриматочным методом. При этом способе осеменения, но замороженной спермой, получено 61,1% ягнения овец, что говорит о преимуществах внутриматочного осеменения. Но данный метод трудоемок и может применяться при размножении особо ценных животных, значительно повышая степень их использования в связи с уменьшением дозы осеменения овец.


Таблица 1- результаты ягнения овец


Опыт

Срок хранения спермы, час.

Осеменено, овец

Учтено, овец

Объягнилось, овец

Суягность,%

1

0-8

178

163

104

63,9

0-8

61

61

38

62,3

2

24-32

8

8

4

50,0

48-54

11

11

5

41,4

3

2-3

32

29

21

72,4

26-27

40

36

27

75,0


Разработанная среда «ФСК» обеспечивает высокую биологическую активность сперматозоидов при хранении в варьирующих температурах в течение нескольких суток. Данные результатов ягнения овец, осемененных разбавленной и сохраненной спермой в течение 0-8, 24-32,48-54 часов, приведены в таблице 1. Снижение процента ягнения овец составила в первые сутки – 7,7%, во вторые – 20,0% и в третьи –28,6%.

В 1995 году в опытном хозяйстве им. Мынбаева было осеменено 72 овцематки.

Сперму брали от барана 1073/А11091 породы австралийский меринос. Овец первой группы осеменяли разбавленным «ФСК» семенем со сроком хранения 2,3 часа, а второй 26-27 часов. Оплодотворяемость овец первой группы по перегулу составила 81,3%, а по ягнению 72,4%. Во второй группе эти показатели соответственно равны 80,0 и 75,0%. В целом по двум группам оплодотворяемость составила 80,5%, а суягность 73,8%.

Следовательно, среда «ФСК» при хранении спермы в течение 26-27 часов, во втором опыте, обеспечила получение 72,4-75,0% суягности овец.

Таким образом, разработанная, среда «ФСК» (фосфатно-сульфат-комплексонатная), для кратковременного хранения спермы баранов-производителей при варьирующих температурах (7 - 27 С) обеспечивает выживаемость спермиев до 8 суток или 198 часов. Суягность в пределах 61,1-75,0%. Снижение суягности на 3 сутки составляет – 28,6%, что говорит о возможности использования данной среды для разбавления и хранения спермы от 1 до 3 суток при искусственном осеменении овец. На основании проведенных исследований получен патент № 9056.


^ Замораживание спермы баранов-производителей в жидком азоте

В лаборатории биотехнологии воспроизводства овец Казахского НИТИ овцеводства проведены опыты по испытанию замораживания спермы баранов-производителей, как ранее применяемым способом (а.с. № 698617, К.Т.Касымов и др.), так и усовершенствованными методами показанных на рисунке 1.


Получение и оценка качества спермы





Разбавление спермы средами
  1   2   3   4

Ваша оценка этого документа будет первой.
Ваша оценка:

Похожие:

Официальные оппоненты: доктор сельскохозяйственных наук icon Научный доктор медицинских наук Щудло Михаил Моисеевич, Официальные оппоненты: доктор медицинских

Официальные оппоненты: доктор сельскохозяйственных наук icon А. Г. Волков Официальные оппоненты: доктор медицинских наук

Официальные оппоненты: доктор сельскохозяйственных наук icon Доктор медицинских наук,профессор Трубилин Владимир Николаевич Официальные оппоненты

Официальные оппоненты: доктор сельскохозяйственных наук icon Доктор медицинских наук, профессор Мотавкин Павел Александрович Официальные оппоненты

Официальные оппоненты: доктор сельскохозяйственных наук icon Общеобразовательная программа дошкольного образования Авторский коллектив
Н., канд пед наук, Дякина А. А., доктор филол наук, Евтушенко И. Н., канд пед наук, Каменская В....
Официальные оппоненты: доктор сельскохозяйственных наук icon В. Ф. Учайкин Официальные оппоненты

Официальные оппоненты: доктор сельскохозяйственных наук icon М. И. Михайлов Официальные оппоненты

Официальные оппоненты: доктор сельскохозяйственных наук icon Г. Т. Сухих Официальные оппоненты

Официальные оппоненты: доктор сельскохозяйственных наук icon Л. А. Бокерия официальные оппоненты

Официальные оппоненты: доктор сельскохозяйственных наук icon Ю. С. Сидоренко Официальные оппоненты

Разместите кнопку на своём сайте:
Медицина


База данных защищена авторским правом ©MedZnate 2000-2016
allo, dekanat, ansya, kenam
обратиться к администрации | правообладателям | пользователям
Документы