Методические рекомендации по выполнению санитарно-гигиенических требований и проведения микробиологического контроля в производстве нестерильных лекарственных средсв форт

,

1. 
   Оборудование и методы контроля.
   

2. 
   Подготовка к проведению испытаний.
   

3. 
   Проведение испытаний
   

• 
  изокинетичности отбора-равности скоростей воздуха в пробоотборнике и в потоке, который отслеживается;
  
• 
  изоаксиальности отбора – пробоотборник должен быть ориентирован так, чтобы направление движения воздушного потока, который входит в пробоотборник, совпадал с направлением движения однонаправленного воздушного потока, с которого отбирается проба. Если направление потока не выразительное, пробоотборник ориентируют вертикально вверх.
  

,

4. 
   Учет и интерпретация результатов
   

1. 
   Общие положения
   

1. 
   Эти методические рекомендации предлагают порядок проведения контроля микробиологической чистоты поверхностей производственных помещений в производстве нестерильных лекарственных средств, а именно определение общего количества бактерий и грибов в смывах взятых с площади 100 см².
   
2. 
   Задание контроля – проверка эффективности обработки дезинфекционными растворами поверхностей производственных помещений (стен, полов, дверей), рабочих столов и т.д. и определение их микробиологической чистоты во время производственного процесса.
   
3. 
   В случае контаминации лекарственного средства бактериями семейства Enterobacteriaceae, Staphylococcus aureus и Pseudomonas aeruginosa проводят контроль микробной контаминации поверхностей производственных помещений этими микроорганизмами.
   
4. 
   Контроль микробиологической чистоты поверхностей производственных помещений проводят не реже одного раза в неделю во время производственного процесса и не реже одного раза в месяц после обработки дезинфекционными растворами.
   
5. 
   Для контроля микробиологической чистоты производственных помещений используют метод смывов тампонами или метод отпечатков. Допускается использование других методов при условии их валидации и обоснования предельно допустимого количества микроорганизмов.
   
6. 
   Проверку пригодности методики и ростовых способностей питательных сред проводят согласно с рекомендациями ГФУ (разделы 2.6.12; 2.6.13).
   
7. 
   Посуда, питательные среды и растворы, которые используются для контроля, должны быть стерильными.
   
8. 
   Персонал, который осуществляет контроль, должен работать в комплекте специальной одежды, предусмотренной для помещений такого класса чистоты, где проводится контроль. Персонал должен быть ознакомлен со стандартной рабочей процедурой по контролю микробиологической чистоты поверхностей производственных помещений.
   
9. 
   В производственных помещениях, где осуществляют измельчение и расфасовку лекарственного растительного сырья, которое подлежит термической обработке, контроль микробиологической чистоты поверхностей во время производственного процесса не обязательный.
   

2. 
   Подготовка к проведению испытаний
   

1. 
   Испытания методом смывов.
   
   1. 
      Перед началом испытания готовят стерильные ватные тампоны на стеклянных или металлических держателях, пипетки на 1или 2 мл, чашки Петри, пробирки с 10 мл стерильного буферного раствора с натрия хлоридом и пептоном pH 7.0, описанного в ГФУ (раздел 2.6.13) и стерильные трафареты размером 1010 см. Тампоны могут быть вмонтированы в ватно-марлевые пробки пробирок, которые содержат по 2 мл стерильного буферного раствора с натрия хлоридом и пептоном pH 7.0.
      
   2. 
      В буферный раствор с натрия хлоридом и пептоном pH 7.0, при необходимости, добавляют соответствующий инактиватор, который дает возможность эффективно нейтрализовать средства, которые использовались для дезобработки. Необходимое количество инактиватора определяют при проверке пригодности методики.
      
   3. 
      Тампоны и, при необходимости, пробирки с 10 мл стерильного буферного раствора с натрия хлоридом и пептоном pH 7.0 помещают в бикс.
      
2. 
   Испытания методом отпечатков.
   
   1. 
      Готовят агаровые пластины одним из приведенных ниже способов:
      

• 
  в чашки Петри диаметром 100 мм по радиусам закладывают 4 куска марли, стерилизуют, потом заливают питательной средой. После застывания среды ее разрезают на 4 сектора, придерживаясь правил асептики;
  
• 
  заливают питательную среду в углубление крышечки бакпечати и дают застыть;
  
• 
  готовят контактные чашки соответственно МВГ 07.003.98, п. 8.4.1, с. 26.
  

1. 
   Используют готовые агаровые пластины.
   
2. 
   Подготовленные материалы помещают в бикс.
   
1. 
   Перед передачей биксов с материалами в производственные помещения их внешние поверхности обрабатывают спиртом этиловым (объемная часть 76%).
   
2. 
   Передачу материалов в помещения с более высоким классом чистоты следует осуществлять через переходные помещения или воздушные шлюзы.
   
3. 
   Для выявления роста бактерий используют питательную среду № 1, для выявления роста грибов – питательную среду № 2 для контроля микробиологической чистоты лекарственных средств, которые описаны в ДФУ (раздел 2.6.13). Допускается использование других питательных сред, равнозначных по чувствительности и ростовым свойствам.
   

3. 
   Правила отбора проб
   

1. 
   Для каждого помещения составляют план отбора проб, который должен включать:
   

• 
  указание точек отбора проб (контрольных точек);
  
• 
  указание частоты (периодичности) контроля для каждой точки;
  
• 
  указание количества проб в каждой точке;
  
• 
  указание времени (моментов времени) рабочего дня (смены), когда проводится отбор проб;
  
• 
  указание критических точек контроля.
  

2. 
   Отбор проб должен быть организован таким образом, чтобы его влияние на производственный процесс было минимальным.
   
3. 
   Количество и местонахождение контрольных точек устанавливают в зависимости от площади производственного помещения и характера операций, которые выполняются в нем.
   
4. 
   Контроль микробиологической чистоты поверхностей производственных помещений рабочей зоны проводят преимущественно в тех местах, где находятся более вероятные источники микробной контаминации.
   
5. 
   Для получения достоверных результатов на одной поверхности отбирают пробы в нескольких контрольных точках, размещенных в произвольном порядке.
   
6. 
   Отбор проб методом смывов.
   
   1. 
      На месте взятия смыва тампон увлажняют фосфатным буферным раствором, который находится в пробирке, и тщательно протирают увлажненным тампоном участок площадью 100 см², используя трафарет. Один трафарет используют для взятия одного смыва. Допускается взятие смывов с площади 25 см² на четырех участках.
      
7. 
   Отбор проб методом отпечатков.
   

1. 
   Метод применяют преимущественно для контроля микробиологической чистоты гладких и ровных поверхностей.
   
2. 
   Агаровые пластины прикладывают к поверхности, которая исследуется.
   
3. 
   В одной контрольной точке делают отпечаток на две пластины с питательной средой для выращивания бактерий на две пластины с питательной средой для выращивания бактерий и на две пластины для выращивания грибов.
   
4. 
   При проведении испытания на наличие бактерий семейства Enterobacteriaceae, Staphylococcus aureus и Pseudomonas aeruginosa дополнительно делают отпечатки на пластины с соответствующей питательной средой.
   
5. 
   Пластины изолируют от внешней среды (отпечатки, полученные на секторах агара, помещают назад в чашки Петри, закрывают крышкой бакпечать и т.д.).
   
1. 
   Проведение испытаний
   

1. 
   Испытания проводят в лаборатории, придерживаясь правил асептики.
   

2. 
   Испытания методом смывов.
   
   1. 
      Каждый тампон тщательно ополаскивают в пробирке, которая содержит 10 мл буферного раствора с натрия хлоридом и пептоном pH 7.0.
      

2. 
   грибов, используя один из приведенных ниже методов, описанных в ГФУ (раздел 2.6.12) для испытания микробиологической чистоты нестерильных лекарственных средств:
   

• 
  методом глубинного посева;
  
• 
  методом двухслойного посева.
  

3. 
   Чашки Петри с питательной средой для выращивания бактерий инкубируют при температуре 32,5±2,5 ºС, с питательной средой для выращивания грибов при температуре 22,5±2,5 ºС не менее 5 суток.
   
4. 
   При проведении испытания на наличие бактерий семейства Enterobacteriaceae, S.aureus и P. aeruginosa 5 мл смывной жидкости вносят в 50 мл соответственных питательных средств и инкубируют при температуре 32,5±2,5 ºС на протяжении 48 часов.
   
2. 
   Испытания методом отпечатков.
   

1. 
   Агаровые пластины с питательной средой для выращивания бактерий инкубируют при температуре 32,5±2,5 ºС, с питательной средой для выращивания грибов при температуре 22,5±2,5 ºС не менее 5 суток.
   
3. 
   Проводят контроль стерильности питательных сред. Для этого от каждой партии питательных сред отбирают 2 чашки Петри , 2 агаровые пластины или 2 емкости с жидкой питательной средой и инкубируют при соответствующей температуре на протяжении 48 часов. После окончания периода инкубации на питательных средах не должен наблюдаться рост микроорганизмов. Контроль стерильности питательных сред проводят до начала испытания или одновременно с ним
   
4. 
   В случае наличия роста микроорганизмов на контрольных питательных средах, партию питательной среды считают непригодной, а испытание, проведенное с использованием этой партии среды – недействительным. Испытание повторяют на пригодной партии питательной среды.
   

4. 
   Учет результатов
   

1. 
   После окончания инкубации проводят подсчет количества колоний микроорганизмов, которые образовались в каждой чашке или на пластине.
   
2. 
   При испытании методом смывов для каждой контрольной точки подсчитывают количество колоний во всех чашках Петри с каждой питательной средой, находят среднее арифметическое значение и, умножая его на 10, вычисляют количество бактерий и грибов в смывах со 100 см² площади поверхности.
   
3. 
   При испытании методом отпечатков для каждой контрольной точки подсчитывают число колоний на всех агаровых пластинах с каждой питательной средой, находят среднее арифметическое значение и вычисляют число бактерий и грибов на 100 см² площади поверхности по формуле:
   

4. 
   При проведении испытания на наличие бактерий семейства Enterobacteriaceae, S.aureus и P. aeruginosa идентификацию микроорганизмов проводят используя методы, которые описаны в ГФУ (раздел 2.6.13) или другой специальной литературе.
   
5. 
   На поверхностях производственных помещений непосредственно после обработки дезинфицирующими растворами не должны находиться жизнеспособные микроорганизмы.
   
6. 
   Предельно допустимое количество микроорганизмов (бактерий и грибов суммарно) в смывах или отпечатках с площади поверхности производственных помещений 100 см² во время производственного процесса устанавливает производитель для каждой технологической операции в зависимости от требований к микробиологической чистоте готовых лекарственных средств. Предельно допустимое количество микроорганизмов должно быть обосновано при валидации производства.
   
7. 
   На поверхностях производственных помещений в процессе производства не допускается наличие бактерий семейства Enterobacteriaceae, S.aureus и P. aeruginosa.
   
8. 
   Результаты испытаний регистрируют.
   

1. 
   Общие положения
   

1. 
   Эти методические рекомендации предлагают порядок проведения контроля микробиологической чистоты технологического оборудования и инвентаря, который используется в производстве нестерильных лекарственных средств, а именно определение общего количества бактерий и грибов в смывах взятых с поверхности площадью 100 см².
   
2. 
   Заданием контроля есть проверка эффективности обработки оборудования и инвентаря дезинфекционными растворами.
   
3. 
   В случае контаминации лекарственного средства бактериями семейства Enterobacteriaceae, Staphylococcus aureus и Pseudomonas aeruginosa поводят контроль микробиологической чистоты технологического оборудования и инвентаря этими микроорганизмами.
   
4. 
   Контроль микробиологической чистоты технологического оборудования и инвентаря поводят не реже одного раза в месяц после обработки дезинфицирующими средствами и соответствующей экспозиции.
   
5. 
   Для контроля микробиологической чистоты технологического оборудования и инвентаря используют метод смывов тампонами. Допускается использование других методов при условии их валидации и обоснования максимально допустимого количества микроорганизмов.
   
6. 
   Проверку ростовых свойств питательных сред проводят согласно с рекомендациями ГФУ (разделы 2.6.12; 2.6.13).
   
7. 
   Посуда, питательные среды и растворы, которые используются для контроля, должны быть стерильными.
   
8. 
   Персонал, который осуществляет контроль, должен работать в комплекте специальной одежды, предусмотренной для помещений того класса чистоты, где размещены оборудование и инвентарь, которые контролируются. Персонал должен быть ознакомлен со стандартной рабочей процедурой по микробиологическому контролю технологического оборудования и инвентаря.
   

2. 
   ^ Подготовка к проведению испытаний
   

1. 
   Перед началом испытания готовят стерильные ватные тампоны на стеклянных или металлических держателях, пипетки на 1, 2,5 и 10 мл, чашки Петри, пробирки с 10 мл стерильного буферного раствора с натрия хлоридом и пептоном pH 7.0, описанного в ГФУ (раздел 2.6.13) и стерильные трафареты размером 1010 см. Тампоны могут быть вмонтированы в ватно-марлевые пробки пробирок, которые содержат по 2 мл стерильного буферного раствора.
   
2. 
   Тампоны и, при необходимости, пробирки с 10 мл стерильного буферного раствора с натрия хлоридом и пептоном pH 7.0 помещают в бикс.
   
3. 
   Перед подачей биксов с материалами в производственное помещение их внешние поверхности обрабатывают спиртом этиловым (объемная часть 76%).
   
4. 
   Передачу материалов в помещения с более высоким классом чистоты следует осуществлять через переходные помещения или воздушные шлюзы.
   
5. 
   Для выявления роста бактерий используют питательную среду № 1, для выявления роста грибов – питательную среду № 2 для контроля микробиологической чистоты лекарственных средств, которые описаны в ДФУ (раздел 2.6.13). Допускается использование других питательных сред, равнозначных по чувствительности и ростовым свойствам.
   
6. 
   Для выявления и идентификации бактерий семейства Enterobacteriaceae, Staphylococcus aureus и Pseudomonas aeruginosa используют питательные среды и реактивы, которые описаны в ГФУ (раздел 2.6.13), или другие питательные среды, равнозначные по чувствительности и ростовым свойствам.
   

3. 
   Правила отбора проб
   
   1. 
      Для каждого помещения составляют план отбора проб:
      

• 
  указание точек отбора проб (контрольных точек);
  
• 
  указание частоты (периодичности) контроля для каждой точки;
  
• 
  указание количества проб в каждой точке;
  
• 
  указание времени (моментов времени) рабочего дня (смены), когда проводится отбор проб;
  
• 
  указание критических точек контроля.
  

2. 
   Количество и местонахождение контрольных точек устанавливают в зависимости от размеров технологического оборудования, инвентаря и характера технологических операций, которые выполняются на нем.
   
3. 
   Проводят контроль тех поверхностей оборудования и инвентаря, которые во время производственного процесса контактируют с субстанциями, вспомогательными веществами, готовым продуктом и первичной упаковкой.
   
4. 
   Для получения достоверных результатов отбирают пробы на одной поверхности в нескольких контрольных точках, размещенных в произвольном порядке.
   
5. 
   На месте взятия проб смыва тампон увлажняют буферным раствором, который находится в пробирке, и тщательно протирают увлажненным тампоном участок площадью 100 см², используя трафарет. Один трафарет используют для взятия одного смыва.
   
6. 
   В том случае когда нет возможности взять смывы с площади 100 см², допускается взятие смывов с меньшей площади (не менее 25 см²). Смывы с мелких предметов берут со всей поверхности.
   

4. 
   Проведение испытаний
   

1. 
   Испытания проводят в лаборатории, придерживаясь правил асептики.
   
2. 
   Каждый тампон тщательно ополаскивают в пробирке, которая содержит 10 мл буферного раствора с натрия хлоридом и пептоном pH 7.0.
   
3. 
   С каждой пробирки, которая вмещает смывную жидкость, делают посев по 1 мл в две чашки Петри с питательной средой для выращивания бактерий и в две - с питательной средой для выращивания грибов, используя один из приведенных ниже методов, описанных в ГФУ (раздел 2.6.12) для испытания микробиологической чистоты нестерильных лекарственных средств:
   

• 
  методом глубинного посева;
  
• 
  методом двухслойного посева.
  

4. 
   Чашки Петри с питательной средой для выращивания бактерий инкубируют при температуре 32,5±2,5 ºС, с питательной средой для выращивания грибов при температуре 22,5±2,5 ºС не менее 5 суток.
   
5. 
   При проведении испытания на наличие бактерий семейства Enterobacteriaceae, S.aureus и P. aeruginosa 5 мл смывной жидкости вносят в 50 мл соответственных питательных средств и инкубируют при температуре 32,5±2,5 ºС на протяжении 48 часов.
   

3. 
   Проводят контроль стерильности питательных сред. Для этого по 2 чашки Петри и по две емкости с жидкой питательной средой от каждой партии питательных сред помещают в термостат, и инкубируют при соответствующей температуре на протяжении 48 часов. После окончания периода инкубации на питательных средах не должен наблюдаться рост микроорганизмов. Контроль стерильности питательных сред проводят до начала испытания или одновременно с ним
   
4. 
   В случае наличия роста микроорганизмов на контрольных питательных средах, партию питательной среды считают непригодной, а испытание, проведенное с использованием этой партии среды – недействительным. Испытание повторяют на пригодной партии питательной среды.
   

5. 
   Учет результатов
   

1. 
   После окончания срока инкубации проводят пересмотр чашек на наличие роста микроорганизмов.
   
2. 
   При проведении испытания на наличие бактерий семейства Enterobacteriaceae, S.aureus и P. aeruginosa идентификацию микроорганизмов проводят используя методы, которые описаны в ГФУ (раздел 2.6.13) или другой специальной литературе.
   
3. 
   В смывах с технологического оборудования и инвентаря непосредственно после их обработки не должны находиться жизнеспособные микроорганизмы.
   
4. 
   Результаты испытаний регистрируют.
   

1. 
   Общие положения.
   

1. 
   Эти методологические рекомендации предлагают порядок проведения контроля микробиологической чистоты одежды персонала, который работает в производственных помещениях нестерильных лекарственных препаратов, а именно определение количества жизнеспособных бактерий и грибов и наличие бактерий семейства Enterobacteriaсeae в смывах, взятых с поверхности одежды площадью 100 см².
   
2. 
   Задачей контроля является проверка эффективности термической обработки одежды и перчаток, и определение микробиологической чистоты одежды во время производственного процесса.
   
3. 
   В случае контаминации лекарственного препарата бактериями S. aureus и P. aeruginosa проводят контроль микробиологической чистоты одежды этими микроорганизмами.
   
4. 
   Контроль эффективности термической обработки одежды и перчаток проводят выборочно не реже одного раза на месяц непосредственно перед использованием (во время раскрытия упаковок).
   
5. 
   Контроль микробиологической чистоты одежды во время производственного процесса проводят выборочно у некоторых работников не реже одного раза в неделю.
   
6. 
   Контроль перчаток во время производственного процесса осуществляют в соответствии с требованиями Методологических рекомендации по контролю микробиологической чистоты одежды персонала, который работает в производственных помещениях, утвержденный приказом МОЗ Украины 14.12.2001 г. № 502.
   
7. 
   Для контроля эффективности термической обработки одежды и перчаток и микробиологической чистоты одежды во время производственного процесса используют метод смыва тампонами. Допускается применение других методов при условии их валидации и обоснования максимально допустимого количества микроорганизмов.
   
8. 
   Проверка возможностей роста питательной среды производиться в соответствии с рекомендациями ДФУ (разделы 2.6.1; 2.6.12; 2.6.13).
   
9. 
   Посуда, питательная среда и растворы, которые используются для контроля, должны быть стерильными.
   
10. 
    Персонал, который осуществляет контроль, должен работать в комплекте одежды, предусмотренной для помещений того класса чистоты, где производиться контроль. Персонал должен быть ознакомлен со стандартной рабочей процедурой по микробиологическому контролю одежды и перчаток.
    
11. 
    В производственных помещениях, где осуществляется измельчение и расфасовка лекарственного растительного сырья, которое подлежит термической обработке, контроль микробиологической чистоты одежды во время производственного процесса не обязателен.
    

1. 
   Перед началом испытания приготавливают стерильные ватные тампоны на стеклянных или металлических держателях, пипетки на 1, 2, 5 и 10 мл, чашки Петри, пинцеты, ножницы, пробирки с 10 мл буферного раствора с натрием хлоридом и пептоном рН 7.0, описанного в ДФУ(2.6.13), и стерильные трафареты размером 100 см² и 25 см². Тампоны могут быть встроены в ватно-марлевые пробки пробирок, которые содержат по 2 мл буферного раствора с натрием хлоридом и пептоном рН 7.0.
   
2. 
   Тампоны и, по надобности, пробирки с 10 мл буферного раствора с натрием хлоридом и пептоном рН 7.0 помещают в бокс.
   
3. 
   Перед передачей боксов с материалами в производственные помещения их внешние поверхности обрабатывают 76 % этиловым спиртом.
   
4. 
   Передачу материалов в помещения с более высоким классом чистоты следует осуществлять через проходные помещения или воздушные шлюзы.
   
5. 
   Для определения роста бактерий используют питательную среду № 1, для определения роста грибов – среду № 2, для определения бактерий семейства Enterobacteriaceae – среду № 3, которые описаны в ДФУ (раздел 2.6.13). Допускается применение других питательных сред, одинаковых по чувствительности и способностям роста.
   
6. 
   Для определения и идентификации S. aureus и P. aeruginosa используются питательные среды и реактивы, которые описаны в ДФУ (раздел 2.6.13), или другие питаельные среды, одинаковые по чувствительности и способностям роста.
   

• 
  указание точек отбора проб (контрольных точек);
  
• 
  указание частоты (периодичности) контроля для каждой точки;
  
• 
  указание количества проб в каждой точке;
  
• 
  указание времени (моментов времени) рабочего дня (смены), когда производиться отбор проб;
  
• 
  указание критических точек контроля.
  

• 
  методом глубинного посева;
  
• 
  методом двухслойного посева;