Минерально-растительный комплекс «Долфин» 19 1 Состав и эффекты средства «Долфин» 19 2 Клинические испытания средства «Долфин» 20

3.Минерально-растительный комплекс «Долфин»

3.1 Состав и эффекты средства «Долфин»

3.2 Клинические испытания средства «Долфин»

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ

1. 
   ^ Субъективная оценка врачом состояния слизистой оболочки полости носа с помощью передней риноскопии, эндоскопического осмотра (цвет и степень увлажненности слизистой оболочки полости носа, выраженность отека носовых раковин, характер отделяемого) по специально разработанной визуально-аналоговой шкале. В статистической обработке учитывались следующие признаки:
   

2. 
   ^ Определение времени мукоцилиарного клиренса при помощи «сахаринового теста». С этой целью применяли пищевой сахарин фирмы Hergestellt (GMBH, Германия). Таблетку сахарина разделяли на 5 равных весовых частей и придавали этим частям округлую форму не более 1—1,5 мм в диаметре. Одну крупинку сахарина помещали на поверхность нижней носовой раковины отступя 1 см от ее переднего конца. Следует отметить, что крупинка сахарина хорошо контактировала со слизистой оболочкой и ни в одном случае не соскальзывала с нее и не проникала в носоглотку при дыхании. Пациенту выдавали секундомер и предлагали выполнять одно глотательное движение в минуту. При появлении вкусового ощущения сладкого в полости рта пациенту предлагали остановить секундомер. Время от нанесения крупинки на слизистую оболочку нижней носовой раковины до момента появления ощущения сладкого в полости рта принимали за время мукоцилиарного транспорта. По мнению R. Waguespack (1995), «сахариновый тест» является идеальным, так как не предусматривает значительных денежных затрат, прост в применении, что позволило автору назвать его "золотым стандартом" для сравнения клинических результатов различных методов определения мукоцилиарной активности [82].
   
3. 
   ^ Определение частоты биения ресничек мерцательного эпителия полости носа. Для этого у пациента при передней риноскопии специальной ложечкой собственной конструкции для забора эпителия длиной 17 см с нижней носовой раковины брали соскоб мерцательного эпителия. Взятый материал переносили на специальные предметные стекла с полостью для исследования, глубиной в центре до 1,7 мм. Полость предварительно заполняли физиологическим раствором NaCl. Затем биоптаты накрывали тонким покровным стеклом. Сразу проводили микро- и видеоскопию на исследовательском комплексе с использованием компьютерных технологий, оригинального программного обеспечения, позволяющего фиксировать видеоизображение и рассчитывать частоту колебания ресничек. Для этого готовые препараты последовательно помещали под объектив светового микроскопа ЛОМО Микмед-2 со 100-кратным увеличением и исследовали при температуре 24°C. В препарате находили зоны с хорошей видимостью движущихся ресничек мерцательного эпителия. После идентификации одной из зон на поверхность покровного стекла наносили каплю иммерсионного масла и увеличивали разрешение микроскопа до ×900, что позволяло четко видеть движения эпителиальных ресничек. Полученное изображение поступало через видеокамеру на плату видеозахвата в компьютер в режиме реального времени. В препарате выбирались 8—9 участков с наибольшей ЧБР, эти кадры архивировались, затем производился подсчет ЧБР при помощи специально разработанной компьютерной программы «ВидеоТест-морфология 5,0». Программа позволяет просматривать всю запись, проводить покадровый просмотр, а также произвести подсчет частоты колебаний любой из ресничек, которые представлены в видеофрагменте. Методика измерения основана на спектральном анализе изменения яркости точек в рабочей области. Для выполнения подсчета колебаний ресничек на монитор выводили изображение изучаемого участка эпителия. Видеокадр «замораживали». При этом на мониторе четко визуализировались реснички эпителия. На реснички при помощи компьютерной мыши наносились идентификационные точки, по которым в дальнейшем программа производила подсчет их движения. Затем запускалась программа подсчета.
   

4. 
   ^ Цитологическое исследование – мазки-отпечатки со слизистой оболочки носа. Взятие носового секрета осуществлялось с носовой перегородки или нижней носовой раковины ватным тампоном, который вводился как можно глубже в полость носа. Затем секрет размазывался по предварительно обезжиренному предметному стеклу, высушивался на воздухе, окрашивался по способу Романовского-Гимза и по Граму [83]. Окраска по Грамму подтверждала отсутствие бактериального процесса. В мазках оценивали эпителиальный состав и наличие воспаления. Эпителиальные клетки оценивались по количеству («+++» - много, «++» - умеренно, «+» - мало). Клетки цилиндрического эпителия были с ресничками (функционально активные) и без ресничек (потерявшие функциональную активность). Также оценивали количество метаплазированного эпителия – проявление реакции на воспаление («+++» – много, «++» – умеренно, «+» – мало). Элементы воспаления оценивали по количеству («+++» – много, «++» – умеренно, «+» – мало) и по составу: нейтрофильные лейкоциты (проявление острого воспаления) и лимфоидно-гистиоцитарные элементы – моноциты, лимфоциты, гистиоциты (проявление продуктивного воспаления), соотношение которых определяли в процентах.
   
5. 
   ^ Передняя активная риноманометрия. Носовое сопротивление – один из важнейших компонентов носового дыхания. Для его изучения применяется метод ПАРМ, признанный классическим для определения функции носа [84]. Сущность метода заключается в количественном измерении градиента давления и воздушного потока, которые создаются в условиях физиологического носового дыхания. В ходе исследования одна часть носа пациента (правая или левая) закрывается мягким адаптером. Измерение потока на свободной стороне носа пациента выполняется через плотно прилегающую носовую маску (закрытый метод). Для измерения и оценки потока и назального сопротивления с обеих сторон пациенту необходимо выполнить несколько вдохов и выдохов (рекомендуется выполнить 5 полных циклов) носом через специальные носовые оливы, подобранные по размеру ноздрей пациента. Затем закрывается другая сторона носа, и измерения повторяются с другой стороны. Как правило, сначала измеряются поток и назальное сопротивление на правой стороне, затем - на левой. Результаты риноманометрии выдаются прибором в виде графика в системе координат, который представляет собой параболическую кривую, отражающую инспираторную и экспираторную фазы (рисунки 1,2 приложения). Параметры и кривые каждого теста подсчитываются и отображаются на экране по ходу исследования. Представленный на распечатке результатов измерений анализ дает информацию о проходимости носовых ходов и возможной асимметрии потока и сопротивления. Форма полученной кривой определяет степень нарушения носового дыхания. Для оценки носового дыхания использовался риноманометр РС 300 фирмы «Atmos» (Германия). У всех пациентов исследовался суммарный объемный поток (СОП) – Flow L+R – и суммарное сопротивление (СС) – Res L+R – в точке фиксированного давления 150 Паскаль (Пa) [85].
   
6. 
   ^ Субъективная оценка пациентом качества жизни (количественная оценка жалоб). Выраженность симптомов заболевания оценивалась самим пациентом при помощи визуальной шкалы по модифицированной схеме D.W.Kennedy, V.J.Lund [10]. В опроснике предлагалось оценить следующие симптомы: затруднение носового дыхания, выделения из носа, головная боль, неврологические лицевые боли и снижение обоняния. Каждому симптому больной присваивал от 0 до 2 баллов: отсутствие жалоб определялось как 0 баллов, периодические проявления признака – 1 балл, постоянно выраженный симптом – 2 балла). В дальнейшем при обработке данных учитывалась как сумма баллов (отражение общего состояния пациента), так и оценка каждого симптома в отдельности.
   

1. 
   Оценка критериев включения/исключения.
   
2. 
   Рандомизация.
   
3. 
   Субъективная оценка врачом состояния слизистой оболочки полости носа с помощью передней риноскопии, эндоскопического осмотра (цвет и степень увлажненности слизистой оболочки полости носа, выраженность отека носовых раковин, характер отделяемого).
   
4. 
   Определение времени МЦК при помощи «сахаринового теста».
   
5. 
   Определение ЧБР мерцательного эпителия полости носа.
   
6. 
   Цитологическое исследование — мазки-перепечатки со слизистой оболочки носа.
   
7. 
   ПАРМ.
   
8. 
   Субъективная оценка пациентом качества жизни (количественная оценка жалоб).
   

1. 
   Субъективная оценка врачом состояния слизистой оболочки полости носа с помощью передней риноскопии, эндоскопического осмотра (цвет и степень увлажненности слизистой оболочки полости носа, выраженность отека носовых раковин, характер отделяемого).
   
2. 
   Определение времени МЦК при помощи «сахаринового теста».
   
3. 
   Определение ЧБР мерцательного эпителия полости носа.
   
4. 
   Цитологическое исследование – мазки-перепечатки со слизистой оболочки носа.
   
5. 
   ПАРМ.
   
6. 
   Субъективная оценка пациентом качества жизни (количественная оценка жалоб).