Приказ Министерства Здравоохранения Кыргызской Республики "О профилактике вич-инфекции в Кыргызской Республике в условиях второго поколения эпидемиологического

Иммунный блоттинг

Неспецифические лабораторные признаки ВИЧ-инфекции

1. 
   Лаборатории первого уровня – лаборатории диагностики СПИД, организованные в районных лечебно-профилактических учреждениях. Эти лаборатории проводят первичные скрининговые исследования сывороток крови методом ИФА и простыми/быстрыми тестами. Первый тест (скрининг) должен быть высокочувствительным, чтобы обеспечить надежное выявление антител в пробе.
   
2. 
   Лаборатории вторичного уровня - лаборатории диагностики СПИД, организованные в областных центрах по борьбе со СПИД, Республиканском центре крови, ГУИН МВД, которые осуществляют первичные скрининговые исследования сывороток крови методом ИФА и простыми/быстрыми тестами. Последующую подтверждающую диагностику проводят различными методами с использованием максимально возможного набора тест-систем.
   
3. 
   Республиканская референс-лаборатория – лаборатория Республиканского объединения «СПИД» является специализированным подразделением, основной деятельностью которой является:
   

• 
  методическое и практическое руководство в системе эпидемиологического надзора за ВИЧ-инфекцией на территории республики;
  
• 
  осуществление первичных скрининговых и подтверждающих исследований ВИЧ-инфекции/заболевания СПИД различными методами;
  
• 
  проведение всех видов исследований по обнаружению маркеров различных инфекционных заболеваний;
  
• 
  организация и внедрение в практику работы лабораторий «дозорного слежения» в системе эпидемиологического надзора за ВИЧ-инфекцией в республике;
  
• 
  организация и внедрение в практику работы систем внешней и внутренней оценки качества проводимых лабораторных исследований ВИЧ- инфекции в Кыргызской Республике;
  
• 
  осуществление контроля качества импортируемых или производимых в Кыргызской Республике диагностических тест-систем ВИЧ.
  

Противоэпидемический режим лаборатории диагностики СПИД

1. 
   1. Устройство и содержание помещений диагностических лабораторий
   

1. 
   Для лабораторий диагностики СПИД необходим набор помещений, обеспечивающий ее профиль работы и соблюдение правил противоэпидемического режима. Помещения лаборатории могут располагаться либо в отдельном здании, либо в изолированной части здания, в составе отделов или лабораторий другого профиля. Размеры комнат диагностической лаборатории не регламентируются, но должны обеспечивать требования режима работы.
   

1. 
   комнату для приема, регистрации поступающего на исследование материала и выдачи результатов;
   
2. 
   комнату для разборки и подготовки сывороток к серологическим исследованиям;
   
3. 
   комнату для серологической работы;
   
4. 
   комнату для проведения реакции иммуноблота и других подтверждающих тестов (если постановка этих тестов входит в функции лаборатории);
   
5. 
   в наборе помещений лаборатории необходимо предусмотреть автоклавную для стерилизации чистой и обеззараживания инфицированной посуды, препараторскую и моечную.
   
6. 
   помещение для сотрудников лаборатории.
   

2. 
   Размещение лабораторных комнат должно быть организовано так, чтобы максимально обеспечивать поточность поступающего на исследование материала с последующей его инактивацией.
   

2. 
   Лаборатория должна быть обеспечена водопроводом, канализацией, электричеством, центральным отоплением.
   
3. 
   В случае отсутствия в населенном пункте водопровода и канализации работа возможно только при условии постоянного снабжения водой и своевременного обеззараживания инфицированного материала.
   

6. 
   Для соблюдения требуемых условий постановки серологических реакций и получения адекватных результатов температура воздуха в лабораторных помещениях не должна превышать 25*С. Для районов с жарким климатом в летний период устанавливают кондиционеры с охлаждением. Желательно в лабораторных комнатах иметь приточно-вытяжную вентиляцию.
   
7. 
   Полы в лабораторных помещениях должны быть покрыты линолеумом либо керамической плиткой.
   
8. 
   Рабочие поверхности столов, на которых проводятся прием, разборка сывороток, постановка серологических реакций, следует покрывать водонепроницаемым, несгораемым и не портящимся при дезинфекции материалом.
   
9. 
   Лабораторная мебель должна быть легко моющейся.
   
10. 
    В случае формирования лаборатории диагностики СПИД в составе других лабораторий (отделов) не допускается пользование общей термальной комнатой (термостатами) и общими холодильниками. Лаборатория СПИД должна пользоваться только своими термостатами и холодильниками, установленными в разборочной и серологической комнатах.
    

• 
  лабораторный стол, покрытый не портящимся при дезинфекции материалом;
  
• 
  шкаф для посуды;
  
• 
  холодильник на 4 С;
  
• 
  центрифугу на 1,5-2 тыс. об/мин (в предбокснике);
  
• 
  бактерицидные лампы.
  

• 
  лабораторный стол для размещения посуды, необходимой в работе (мерные цилиндры, колбы, бутыль с дистиллированной водой и т. д.);
  
• 
  лабораторный стол для размещения аппаратуры (спектрофотометр, промыватель и т.д.);
  
• 
  стол для серологической работы;
  
• 
  холодильник на 4 С;
  
• 
  термостат.
  

10. 
    Для защиты от возможного попадания вируссодержащего материала во время роботы рекомендуется использовать защитные очки, экраны или другие защитные средства, подвергающейся дезинфекции.
    

10. 
    После окончание работы исследуемый материал (пробирки с сывороткой) переносят в холодильник, а использованную инфицированную посуду помещают в бак для грязной посуды. Туда же кладут для контроля режима работы парового стерилизатора стеклянные герметично запаянные трубки (ампулы) с никотинамидом или D (+) – маннозой и 0,1 % фуксина основного или фуксина кислого, генцианвиолета, фенолового красного (температура плавления 132 С). Баки плотно закрывают крышкой, завязывают шпагатом, пломбируют и сдают в автоклавную под расписку автоклаверу (приложение 7).
    
11. 
    Хранение бака до автоклавирования не допускается более рабочей смены. Обеззараживание в паровом стерилизаторе (автоклаве) проводится при температуре 132+2 С под избыточным давлением 2,0 кг-с/см (0,20 МПа) в течение 20 мин. После обеззараживания лаборант проверяет ампулу с химическим контролем. Расплавление химического теста и его окрашивание красителем свидетельствуют о достижении необходимой температуры. Только после этого бак с посудой передается в моечную.
    
12. 
    Пробирки с кровью помещают в специальную маркированную емкость (кастрюля, ведро, бак), закрывающуюся крышкой, с дезинфицирующим раствором (3 % раствор хлорамина, осветленный раствор хлорной извести; 0,6 % осветленные растворы нейтрального гипохлорита кальция (НГК), гипохлорита кальция технического (ГКТ); 0,5 % р-ры ДП-2, сульфохлорантина не менее чем на 2 часа). Приготовление растворов осуществляется в соответствии с СанПиН 3.5.1.4.001.98. Другой способ обеззараживания – в паровом стерилизаторе при режиме – 2 кг-с/см (0,2 МПа) при температуре 132+2 С в течение 20 мин.
    

10. 
    Поверхность рабочих столов и все предметы, соприкасавшиеся с исследуемым материалом (пипетки, пробирки, ампулы), должны быть обеззаражены. С этой целью можно использовать следующие дезинфицирующие средства: 6 % раствор перекиси водорода без моющего или с моющим средством, 4 % раствор формальдегида, 0,6 % раствор НГК, 0,4 % раствор ГКТ, 0,5 % раствор ДП-2, сульфохлорантина в течение 60 мин методом погружения или двукратного протирания (для поверхностей).
    

15. 
    Растворы перекиси водорода готовят ежедневно. Растворы хлорамина можно готовить 1 раз на две недели, хлорной извести, ГКТ, НГК – на 6 дней, однако готовые растворы используют только в течение рабочего дня.
    
16. 
    Насасывание сывороток и другого исследуемого материала производят только с помощью груши или автоматической пипетки с последующим обеззараживанием наконечников в емкости (эксикатор и др.) с дезинфицирующим раствором. Дезинфекцию наконечников к автоматическим пипеткам можно проводить 70* спиртом или 6% перекисью водорода в течение 60 минут, или автоклавированием при 1,1 кгс/см (0,1 МПа) при температуре 120+2*С в течение 45 мин.
    

17. 
    После дезинфекции и влажной уборки помещения проводят обеззараживание воздуха с помощью бактерицидных ламп типа ДБ-30 в течение 60 мин. При определении количества ламп исходят из расчета: 2,5 Вт на 1 м куб. для неэкранированных ламп и 1,0 Вт на 1 куб. м – для экранированных. Неэкранированные лампы включают только в отсутствие людей.
    

19. 
    Для обеззараживания поверхности пола (текущая дезинфекция) в конце рабочего дня используют 1% раствор хлорамина, 1% осветленный раствор хлорной извести с последующим проветриванием помещения. Пролитая на пол кровь, сыворотка и др. заливаются раствором одного из дезинфицирующих средств, указанных для обеззараживания поверхности рабочего стола.
    

20. 
    При работе с дезинфицирующими средствами необходимо соблюдать меры предосторожности, изложенные в «Гигиенических требованиях к учреждениям организациям, предприятиям и лицам, занимающимся дезинфекционной деятельностью» СанПиН 3.5.675-97 Министерства здравоохранения Россия 1998 г.
    
21. 
    Приготовление растворов дезинфицирующих средств проводят в хорошо проветриваемых помещениях с использованием мер индивидуальной защиты – резиновых перчаток, герметичных очков (тип ПО-2, ПО-3 или моноблок), респираторов с противогазовым патроном марки А или В (тип РУ-60М, РПГ-67 и др.), халата, шапочки, резинового фартука.
    

2. 
   ^ Центрифугирование исследуемого материала
   

4. 
   Передача информации при выявлении сывороток
   

4. 
   Меры в случае аварии
   

Приложение № 2