Н. Н. Володин “ ” 2003 г icon

Н. Н. Володин “ ” 2003 г





Скачать 1.4 Mb.
Название Н. Н. Володин “ ” 2003 г
страница 5/6
Полотнянко Л.И
Дата 22.03.2013
Размер 1.4 Mb.
Тип Документы
1   2   3   4   5   6

Задания:


  1. Перечислите методы определения чувствительности микроорганизмов к антибиотикам.

2. Опишите технику постановки определения чувствительности микроорганизмов к антибиотикам методом дисков.

3. Как провести учет результатов?

^ ЗАДАЧА № 36.

При поступлении больного ребенка Н., 9 лет, в приемный покой, дежурный врач заподозрил менингит.

Задания:

1. Какой материал следует отправить на исследование?

2. Как его получить? Условия доставки.

3. Если при микробиологическом исследовании не выделяется возбудитель, какое допол-

нительное исследование следует использовать?

^ ЗАДАЧА № 37.

В туберкулезный диспансер поступил пациент К., 55 лет, астенического телосложения, с явлениями иммунодефицита, кашлем и обильным отделением вязкой мокроты. Ему поставлен диагноз: кавернозный туберкулез легких; у пациента отобрана мокрота для исследования.

Задания:

1. Каким методом окрашивают мазок мокроты?

2. Каковы морфологические особенности микобактерий туберкулеза?

3. Как ставится метод микрокультур по Прайсу для экспресс-диагностики туберкулеза?

^ ЗАДАЧА № 38.

В инфекционное отделение поступил ребенок А., 5 лет, в тяжелом состоянии, температура 39° С, выраженная интоксикация, при глотании умеренные боли, на миндалинах имеется грязно-белый налет, подчелюстные лимфатические узлы увеличены, ребенку поставлен предварительный диагноз: дифтерия зева.

Задания:

1. Как изготовить тампон для забора материала и простерилизовать его?

2. Как отобрать материал для исследования на дифтерию?

3. На какие питательные среды делается посев материала?

^ ЗАДАЧА № 39.

Мать ребенка Д., 13 лет, жалуется, что у него частые задержки стула, вздутие живота, периодические боли в животе. В последние 6 месяцев появились аллергические реакции на коже в виде периодически появляющейся и исчезающей сыпи, частые головные боли, недомогания, бледные кожные покровы. Ребенку поставлен предварительный диагноз: дисбактериоз; отобран материал для исследования: испражнения в количестве 2,0.

Задания:

1. Как подготовить испражнения к исследованию?

2. Перечислите среды для первичного посева.

3. На какие питательные среды необходимо сделать посев?


^ ЗАДАЧА № 40.


В больницу поступил пациент Г., 32 лет, с симптомами: судороги жевательных мышц, спазмы лицевой и затылочной мускулатуры. В анамнезе глубокие раны, загрязненные землей.

Задания:

1. Какова морфология возбудителя столбняка?

2. Перечислите методы культивирования анаэробов.
^

3. На чем основаны профилактика и лечение столбняка?




ЭТАЛОНЫ ОТВЕТОВ ПРОФЕССИОНАЛЬНЫХ ЗАДАЧ ПО МИКРОБИОЛОГИИ

^ С ОСНОВАМИ ЭПИДЕМИОЛОГИИ И

МЕТОДАМИ МИКРОБИОЛОГИЧЕСКИХ ИССЛЕДОВАНИЙ

ЗАДАЧА № 1.

  1. Микроорганизм относится к роду Proteus.

  2. Пo совокупности морфологических, культуральных, биохимических, антигенных свойств.

Морфологические: грамотрицательные подвижные палочки без спор, капсул.

Культуральные: вуалеобразный рост.

Биохимические: расщепление глюкозы до кислоты и газа, мочевины, фенилаланина, образование индола, сероводорода, отсутствие ферментации лактозы, маннита.

Антигенные: постановка ориентировочные реакции агглютинации с поливалентными О-сыворотками, типовыми О- сыворотками, Н-сыворотками.

  1. По Шукевичу: на свежеприготовленный скошенный мясо-пептонный агар, в конденсационную воду, не касаясь скоса.

^ ЗАДАЧА № 2.

  1. На среде Эндо - рост характерен для лактозоположительной кишечной палочки. Лактоза ферментируется до кислоты. На среде Ресселя - глюкоза ферментируется до кислоты и газа.

  2. Бактериальной петлей по скосу, затем уколом в столбик.

  3. Колиэнтерит, вызванный ЭПКП.

  4. Культуру проверяют в реакции агглютинации с поливалентными эшерихозными сыворотками, типовыми сыворотками, ставят развернутую реакцию aгглютинации с живой и гретой культурой.

Делают посев культуры на биохимический ряд: лактоза, маннит, мальтоза, сахароза,

мочевина, цитрат Симмонса, индол, сероводород, определяют подвижность.

^ ЗАДАЧА № 3.

  1. У детей берут 5-10 мл крови из локтевой вены, засевают на среду Раппопорт в соотношении 1:10 (в 50-100 мл среды).

  2. По характеру роста на средах Эндо, Раппопорт, Плоскирева можно предположить наличие Sal. typhi.

  3. Со среды Эндо из выросших колоний сделать мазки, окрасить но Граму. Сделать пересев на ПУС (Ресселя, Клигера, Олькеницкого).

С ПУС пересеять на биохимический ряд: глюкоза, сахароза, мальтоза, маннит, лактоза, индол, сероводород, мочевину, определение подвижности в 0,2% ПА. Для определения антигенной структуры проводят реакцию агглютинации на стекле с поливлептной

О-сывороткой, групповыми О-сыворотками, Н-сыворотками первой, второй фазы.

^ ЗАДАЧА № 4.


  1. Возбудителем заболевания являются сальмонеллы паратифа А, т.к. с этим диагностикумом произошла реакция в большем разведении сыворотки (1:400).

  2. Для подтверждения диагноза ставят повторно реакцию через 5-7 дней. Реакция должна быть положительная с этим же диагностикумом в большем разведении сыворотки, т.е. тигр антител должен нарастать.

3. Кровь в период лихорадки. Испражнения, моча, с конца второй недели заболевания. Дуоденальное содержимое в период реконвалесценции.

^ ЗАДАЧА № 5.

  1. Холерный вибрион.

  2. А) Из колоний на щелочном агаре сделать мазки, окрасить но Граму – мазок фиксируют

химическим способом - смесью Никифорова 15 минут.

Б) Поставить реакцию агглютинации с О-сывороткой, с сыворотками Огава, Инаба.

В) Из колоний материал пересевают на полиуглеводную среду лактозо - сахарозная

среда.

Г) Идентификация чистой культуры по биохимическим тестам.

3. Методы экспресс-диагностики:

А) Реакция иммобилизации с О-сывороткой.

Б) РИФ с люминесцентными холерными сыворотками.


^ ЗАДАЧА № 6.


  1. Иерсинии.

  2. Со среды БТС провести пересев части колонии на полиуглеводные среды (Ресселя, Олькеницкого, Клиглера); из другой части колонии сделать мазки, окрасить по Граму.

С полиуглеводных сред сделать посев на биохимический ряд и на 0,2% полужидкий агар

при 20 0С и 37 0С для определения подвижности.

  1. Серологический - метод парных сывороток в РНГА с эритроцитарным иерсиниозным диагностикумом.

^ ЗАДАЧА № 7.

  1. Материал нейтрализуют до рН 7,0-7,2 10% раствором бикарбоната натрия. Делают - основное разведение 1:10. Затем делают ряд последовательных десятикратных разведений с 10 до 10-11.

  2. Эндо, Плоскирева, Левина, ЖСА, МПА, Китта-Тароцци, Вильсон-Блера, скошенный МПА. Среды накопления: селенитовый бульон, 6,5% солевой бульон.

3. Определение вида возбудителя, вызвавшего ПТИ. В каком количестве содержится в 1 грамме (миллилитре) исследуемого материала.

^ ЗАДАЧА № 8.

  1. Отделяемое слизистой оболочки зева, носа собирают отдельными тампонами. Из зева материал собирают с миндалин: сначала с непораженной, затем с пораженной. Шпателем прижимают корень языка. Материал собирают на границе пораженной и здоровой ткани. Из носа - одним тампоном из обоих носовых ходов. Сначала - из здорового, затем из пораженного.

  2. На кровяно - теллуритовый агар. Чашку делят пополам. На одну половину засевают тампоном материал из зева: делают площадку на краю чашки, затем штрихами засевают половину чашки; на вторую половину точно гак же засевают материал из носа.

3. Изучение культуральных свойств на КТА, изучение морфологических свойств в мазках, окрашенных метиленовым синим. Определение токсигенности, проба Пизу, определение расщепления мочевины, крахмала, глюкозы, сахарозы.

^ ЗАДАЧА № 9.

  1. Corynebacterium diphleriae - биовар gravis.

  2. Проба на токсигенность, определение цистиназы, расщепление мочевины, глюкозы, сахарозы, крахмала.

  3. Метиленовым синим Лёффлера.

4. Коринебакгерии дифтерии располагаются под острым или тупым углом, в виде

растопыренных пальцев. На концах палочек имеются утолщения. Дифтероиды

располагаются в виде частокола, зерна волютина отсутствуют или располагаются на

одном конце.

^ ЗАДАЧА № 10.

  1. Neisseria meningitidis.

  2. Отделяемое задней стенки носоглотки собирают стерильным тампоном, изогнутым под углом 120° при помощи стерильного шпателя. Шпателем прижимают корень языка, тампон вводят под мягкое небо в носоглотку, легким движением собирают слизь. Извлекают, не касаясь зубов, языка, щек.

  3. 10%, 20% сывороточный агар с добавлением ристомицина, линкомицина для подавления грамположителыюй флоры, 5% кровяной агар.

4. По совокупности морфологических, культуральных, биохимических, антигенных

свойств.


^ ЗАДАЧА № 11.

  1. Neisseria meningitidis.

  2. По Граму в модификации Калины.

  3. Грамотрицательные (красные) кокки, в виде кофейных зерен, расположены попарно, вогнутыми сторонами друг к другу.

4. Но совокупности морфологических, культуральных, биохимических, антигенных свойств.

^ ЗАДАЧА № 12.

Ответ дан согласно приказу № 375 МЗ РФ от 23.12.98.

1. Для выделения и идентификации возбудителя при менингите исследуют:

ликвор - 2-2,5 мл до начала антибиотикотераиии;

кровь - при подозрении на сепсис;

слизь с задней стенки глотки - тампоном на изогнутой проволоке.

Доставка материала:

При транспортировке материала на короткие расстояния применение транспортных сред не рекомендуется. При транспортировке в течение трех часов и более тампоны перевозят погруженными в транспортную среду. Материал доставляют в лабораторию, тщательно защищая от охлаждения, в зимнее время применяют грелки 34-40°С и немедленно засевают и помещают в термостат.

2. Условия культивирования менингококков.

Менингококки требовательны к условиям культивирования. При росте требуют повышенной влажности 5-10%, повышенного содержания СО2, в воздухе, чувствительны к малейшим отклонениям температуры. Питательные среды должны содержать нативный белок - кровь, сыворотку. Питательные среды должны быть проверены на пригодность для культивирования менингококка с эталонным штаммом менингококка.

3. Основные диагностические тесты па менингококк.

Идентификация N. meningitidis - по комплексу морфологических, культуральных и биохимических признаков.

Морфологические признаки: грамотрицательные диплококки.

Культуральные свойства: нежные, прозрачные колонии, голубоватые, «маслянистые», растут на средах с линкомицином и ристомицином.

Биохимические признаки:

    • имеют ферменты оксидазу и каталазу;

    • не восстанавливают нитраты;

    • не образуют полисахарид на среде с 5% сахарозой;

    • проба с 5% КОН положительна;

    • ферментируют глюкозу, мальтозу с образованием кислоты.

^ ЗАДАЧА № 13.

  1. Подготовка материала:

    • рвотные массы, промывные воды желудка нейтрализуют 10% раствором

двууглекислого натрия до рН 7,0-7,2,

    • из продукта готовят 10% взвесь (1г продукта - 9мл 0,1% пептонной воды) и готовят

последовательные разведения от 1:10 до 1:1000000.

Возможно, интоксикацию вызвал стафилококк.

  1. Для первичного посева необходимы следующие питательные среды:

- 6,5% солевой бульон;

- МПА - для определения общего микробного числа. Эндо, Левина, Плоскирева

для выделения микроорганизмов кишечной

группы;

- ЖСА - для выделения стафилококков.

3. Рост стафилококка:

А) на солевом бульоне - помутнение

Б) на ЖСА колонии золотистого цвета, гладкие, выпуклые, с «радужным венчиком».


^ ЗАДАЧА № 14.


  1. Сбор материала для анализа.

Для сбора кала используют чисто вымытые флаконы, не содержащие следов химических реактивов, дезинфицирующих средств, антибиотиков. Посуду закрывают пробкой. Флакон с палочкой для сбора заворачивают в бумагу и стерилизуют в автоклаве при температуре 120"С в течение 30 минут или сухожаровом шкафу при температуре 1 80° С 45-60 минут.

Кал собирают; после естественной дефекации больного в стерильное судно или со стерильной бумаги, помещенной в чистое судно, из разных мест в количестве не менее 2-5г. Материал доставляют в лабораторию не позднее двух часов с момента взятия (лучше в охлажденном виде).

2. Подготовка материала для исследования:

1г кала эмульгируют в 9 мл физиологического раствора. Полученное разведение 1:10 является базовым, и из него готовят ряд последовательных разведений: 10-2, 10-3,10-4,10-5, 10-6, 10-7, 10-8, 10-9, 10-10, 10-11. Полученные разведения засевают на питательные среды.

3. Для первичного посева на дисбактериоз необходимы среды:

- Эндо, Левина, Плоскирева - на кишечную группу;

- желточно - солевой агар -- на стафилококк:

- кровяной агар - на определение гемолитической активности кишечной полочки и

кокков;

- Сабуро - на грибы рода Candida;

- Блаурока на бифидобакгерии;

- скошенный мясо-пептонный агар на протей (посев по Шукевичу);

- молоко на лактобактерии.

^ ЗАДАЧА №15.

  1. Для исследования забирают отделяемое слизистой оболочки уретры у мужчин, отделяемое слизистой оболочки шейки матки у женщин. Для серологической диагностики забирают кровь в количестве 5-6 мл.

2. Методы диагностики гонореи:

- микроскопический - основной при острых формах гонореи;

- микробиологический;

- серологический.

  1. Морфологические свойства:

грамотрицательные диплококки бобовидной формы, полиморфны, встречаются крупные и мелкие формы, неподвижны, спор не имеют. В патологическом материале располагаются внутриклеточно в лейкоцитах или внеклеточно в виде скоплений.

Культуральные свойства:

на средах с добавлением нативного белка при температуре 37°С, рН 7,2-7,4 (среды должны быть свежеприготовленными и влажными) гонококки образуют мелкие колонии, прозрачные, блестящие с ровным краем, напоминающие капельки росы. На кровяном агаре гемолиза не дают.

^ ЗАДАЧА №16.

  1. После вскрытия эмбриона ставят реакции гемагглютинации с пробами амниотической и аллантоисной жидкостей.

  2. При положительной реакции гемагглютинации для определения вида вируса ставят реакцию торможения гемагглютинации (РТГ'А).

3. РТГА - это серологическая реакция, в которой специфические противовирусные антитела, взаимодействуя с вирусом (антигеном), нейтрализуют его и мешают способности агглютинировать эритроциты, то есть тормозят реакцию гемагглютинации. Высокая специфичность реакции торможения гемагглютинации позволяет с ее помощью определить вид и даже тип вирусов, обнаруженных при постановке реакции гемагглютинации.


^ ЗАДАЧА № 17.

1. Подобное заболевание могут вызвать возбудители сибирской язвы Bacillus anthracis.

2. Работа с возбудителем сибирской язвы проводится в строго режимных условиях. Для исследования берут содержимое карбункула.

Из полученного материала делают мазки, окрашивают по Граму и микроскопируют, Наличие крупных, грамположительных палочек, располагающихся единично, попарно или в виде коротких цепочек, заключенных в капсулу, дает право дать предварительный ответ - микроскопическим метод. Для выделения чистой культуры возбудителя и для его идентификации применяют бактериологический метод исследования - делают посев на питательные среды.

3. Для выявления источника инфекции ставят реакцию Асколи для обнаружения специфического антигена бацилл сибирской язвы в шкурах животных, так как больной по профессии скорняк и заражение предположительно произошло при контакте с животным сырьем от больного животного.

^ ЗАДАЧА № 18.


  1. Морфологические свойства: пневмококк - диплококк ланцетовидной формы, располагаются парами, грамположительные, в жидких средах образуют короткие цепочки. Неподвижны, спор не образуют, образуют капсулу, которая окружает оба кокка.

Культуральные свойства - факультативные анаэробы, требовательны к питательным

средам, растут на средах с нативным белком. На средах с сывороткой растут мелкие, нежные, прозрачные колонии. На кровяном агаре - колонии зеленовато-серого цвета, окруженные зеленой зоной.

  1. Дифференциальные тесты для отличия пневмококка от зеленого стрептококка: инулин, 40% желчь, среда с оптохином.

Пневмококк расщепляет инулин, лизируется в 40% желчи и не растет на средах с

оптохином.

  1. Среды: 5% КА, 0,2% сахарный бульон.


^ ЗАДАЧА № 19.

1. 1. Бактериологическая диагностика бруцеллеза.

2. Серологическая диагностика бруцеллеза.

3. Аллергическая диагностика бруцеллеза.

  1. 1. Сделать посев исследуемою материала (кровь) на питательные среды для выделения

чистой культуры возбудителя и провести идентификацию выделенной культуры для

определения вида бруцелл.

2. Для серологической диагностики заболевания поставить серологические реакции:

Райта, Хеддельсона, РНГА, PCК для определения у заболевшего противобруцел-

лезных антител.

3. Поставить аллергическую пробу Бюрне.

  1. Вакцинация живой вакциной.


^ ЗАДАЧА № 20.


  1. Подобное заболевание могли вызвать возбудители туляремии Francicella Tularensis.

2. Для диагностики заболевания должны быть проведены следующие исследования:

А) Серологическая диагностика: реакция агглютинации, реакция непрямой гемагглюти-

нации, кровянопанельная реакция.

Б) Аллергическая проба с тулярином.

В) Биологическая проба на морских свинках или белых мышах (проводится в лаборато-

рии особо опасных инфекций).

3. Туляремия является типичной зоонозной инфекцией. Человек, хотя и поражается этим

заболеванием, но сам никогда не является источником инфекции.


^ ЗАДАЧА № 21.

  1. Подобное заболевание может вызвать Corynebacterium diphteriae.

  2. Для первичного посева необходимы среды: КТА, Бучина, Клауберга.

Три типа колоний на КТА:

- биовар gravius - колонии в виде розетки, крупные с радиальной исчерченностью,

серо-черного цвета;

- биовар mitis образует колонии мелкие, черные с ровными краями;

- биовар intermedius - мелкие, черные, плоские колонии.

  1. Для подтверждения диагноза необходимо выделить чистую культуру возбудителя и провести его идентификацию. Идентификация Corynebacterium diphteriae основывается на определении токсигенных свойств, биохимических свойств (расщепление глюкозы, крахмала, наличие фермента цистиназы, отсутствие фермента уреазы) с учетом морфологии клетки и колоний.



^ ЗАДАЧА № 22.


  1. Для определения чувствительности к антибиотикам применяются два метода:

А) Метод серийных разведений, когда определяется минимальная ингибирующая

концентрация антибиотика.

Б) Метод дисков, когда определяется максимальная зона задержки роста выделенной

культуры.

  1. Взвесь изучаемой культуры (суточная бульонная культура или микробная взвесь, приготовленная по оптическому стандарту 3 10) засевают «газоном» на среду АГВ. Лишнее отсасывают пипеткой в дезинфицирующий раствор. Подсушивают 30-40 минут при комнатной температуре. Затем на поверхность засеянного агара пинцетом (предварительно прожигается в пламени спиртовки) накладывают бумажные диски, пропитанные раствором антибиотиков. Диски накладывают на равном расстоянии друг от друга, и на расстоянии 2 см от края чашки. Засеянные чашки с нанесенными дисками помещают в термостат при 37"С на 18-24 часа. По окончании работы стол обрабатывают 3% раствором хлорамина, а затем ветошью, смоченной моющим раствором.

  2. Измеряют диаметр зоны задержки роста при помощи линейки и определяют чувствительность по таблице.

^ ЗАДАЧА № 23.

  1. Язву очищают ватным тампоном, смоченном в физиологическом растворе хлорида натрия, при плохом выделении тканевой жидкости, края язвы сдавливают пинцетом, содержимое язвы отбирают стерильной пипеткой, собранную жидкость наносят на предметное стекло для микроскопии.

  2. В серонегативный период сифилиса применяют микроскопические методы исследова-ния:

  1. Микроскопия в темном поле зрения. Берутся 2-3 капли тканевой жидкости из язвы,

готовится препарат «раздавленная капля», микроскопируют в темном поле зрения

(объектив х40, окуляр х10).

Б) Из тканевой жидкости готовится мазок, окрашивается по Романовскому - Гимзе. При

микроскопии видны спирохеты бледно-розового цвета.

  1. Метод Левадити - импрегнация мазка серебром. В препарате при микроскопии

трепонема имеет вид черной спирали на светлом фоне.

Г) Реакция ммунофлюоресценции: приготовленный мазок обрабатывается флюоресци-

рующими диагностическими сыворотками. При люминесцентной микроскопии

видны извитые трепонемы

Д) Метод фазово-контрастной микроскопии.

3. Treponema pallidum имеет спиралевидную форму с одинаковыми по высоте завитками, до 12-14 штук. Движения разнообразные: сгибагельные, поступательные, маятникообразные, винтообразные.


^ ЗАДАЧА № 24.

  1. Испражнения. Материал собирают с первых дней заболевания. Брать следует первые порции кала, так как шигеллы локализуются в слизистой оболочке толстого кишечника. 3-5 г испражнений, взятых из подкладного судна или горшка, предварительно продезинфицированных и хорошо промытых, помещают в глицериновую смесь. Материалом для исследования могут также служить промывные воды кишечника, которые получают при помощи клизм.

  1. При наличии в испражнениях гноя, слизи, крови, эти примеси захватывают петлей, промывают изотоническим раствором хлорида натрия и наносят на чашку Петри с дифференциальной средой. Испражнения в глицериновой смеси эмульгируют (размешивают), каплю эмульсии наносят на среду и шпателем втирают ее и поверхность среды. Дифференциальными средами для шигелл являются среды Плоскирева, Эндо и ЭМС (эозин-метиленовый синий).

  2. Для серологической идентификации шигелл необходимы исследуемая культура и диагностические сыворотки.

Вид, серовар, подсеровар выделенной культуры устанавливют при помощи адсорбированных сывороток. Анализ антигенной структуры начинают с реакции агглютинации на стекле со смесью № 1. В эту смесь входят сыворотки с антителами к шигеллам Зонне, Ньюкасл и поливалентная сыворотка к шигеллам Флекснера. При положительной реакции агглютинации со смесью выделенную культуру агглютинируют отдельно с каждой сывороткой, входящей в смесь.

^ ЗАДАЧА № 25.

Работа с возбудителем сибирской язвы проводится в строго режимных условиях.

  1. Материал для исследования от больного: содержимое везикул, карбункула; отторгнутый струп; для реакции преципитации Асколи - кусочки шкур животного.

  2. Принцип реакции Асколи: в реакции преципитации происходит выпадение в осадок специфического иммунного комплекса, который состоит из растворимого антигена (фильтрат- термоэкстракт) и специфического антитела (преципитирующая сибиреязвенная сыворотка) в присутствии электролитов. В результате реакции образуется кольцо преципитата.

3. Учет результатов:

А) Контроли: К1 (преципитирующая сибиреязвенная сыворотка и стандартный

антиген) - кольцо; К2; К3; К4- признаков преципитации нет.

Б) Опыт: при положительном результате - кольцо на границе двух жидкостей, при

отрицательном - кольца нет.


^ ЗАДАЧА №26.


  1. Подготовка пробы к исследованию: поверхность батона протирают тампоном, смоченным спиртом и обжигают. Батон разрезают стерильным ножом и отбирают пробу из разных мест, массой 20 грамм. Навеску помещают в стерильную фарфоровую ступку и растирают' со стерильным кварцевым песком, добавляя небольшими дозами 0,1% пептонную воду (80 мл). Основное разведение 1:5. Далее делают ряд последовательных десятикратных разведении.

  2. Среды: МПА, Кода, Кесслера, Вильсон-Блера, ЖСА, 7,5% солевой бульон, забуференная пептонная вода.

3. Цель посева на питательные среды:

A) МПА - для определения ОМЧ.

Б) Кода, Кесслера - для определения БГКП.

B) Для определения сальмонелл посев делают в забуференную пептонную воду(25 грамм

в 225 мл среды), потом в магниевую среду.

Г) Для определения протея посев делают на свежеприготовленный скошенный МПА

в конденсат по Шукевичу.

Д) Для выделения клостридий на среду Вильсон - Блера.

Е) Для обнаружения стафилококков посев делают на ЖСА и в 7.5% солевой бульон.


^ ЗАДАЧА №27.

  1. Воздух отбирают с помощью аппарата Кротова - 250 л на среду ЖСА.

  2. Для определения вида стафилококка проводят тесты: реакция плазмокоагуляции, определение лецитиназной активности, проба па расщепление маннита.

3. А) Реакция плазмокоагуляции.

Цитратную плазму, полученную из крови кролика, разводят изотоническим раствором в соотношении 1:5 и наливают в четыре преципитационные пробирки по -0,5 мл. В первую пробирку вносят петлей исследуемую культуру; во вторую - плазмокоагулирующий стафилококк; в третью - неплазмокоагулирующий стафилококк; четвертая пробирка контроль плазмы; ставят в термостат при 37 °С. Учет через 2-3 часа, окончательный через 24 часа.

При наличии фермента плазмокоагулазы плазма в опытной пробирке свертывается, при отсутствии плазмокоагулазы - консистенция жидкости в пробирке не меняется.

Контроль с плазмокоагулирующим стафилококком положительный, плазма свертывается.

Контроль с неплазмокоагулрирующим стафилококком – отрицательный, плазма не свертывается.

Контроль плазмы – отрицательный, плазма не свертывается.

Б) Лецитиназная активность определяется на ЖСА и проявляется - появлением радужного венчика вокруг колоний.

В) Проба на расщепление маннита.

Культуру засевают бляшками на среду с маннитом, инкубируют 18-24 часа при 37 ° С. При положительном результате - цвет среды меняется.

^ ЗАДАЧА № 28.

  1. Выделенная бактерия может быть отнесена к семейству Enterobacteriaceae.

2. Идентификация до вида проводится по следующей схеме:

A) посев на ПУС (Ресселя, Клиглера, Олькеницкого);

Б) учет роста на ПУС, приготовление мазка, окраска его по Граму, микроскопирование;

В) высев культуры на скошенный агар, накопление культуры, подбор биохимического

ряда и высев на него; при необходимости проба с бактериофагом;

Г) учет биохимического ряда, пробы с фагом, серологическая идентификация.

3. Среды: Эндо, Плоскирева, ВСА, Левина.

^ ЗАДАЧА № 29.

  1. Для лабораторного исследования отбирается кровь больного.

  2. Специфические методы лабораторной диагностики основаны на определении маркеров-антигенов вируса гепатита В и соответствующих им антител в сыворотке крови больных. Вирус гепатита В содержит 3 основных антигена - поверхностный HBS. внутренний НВС и связанный с ним НВЕ-антиген. Ко всем этим антигенам в ходе инфекционного процесса образуются антитела. Основным маркером гепатита В является НBS-антиген. Для диагностики гепатита В применяется ИФА (иммуноферментный анализ).

3. Пути передачи вирусных гепатитов B,C,D парентеральный, вертикальный, половой.

Гепатитов А, Е - пищевой, водный, контактно-бытовой.


^ ЗАДАЧА № 30.

  1. Ведущий метод лабораторной диагностики - серологический.

  2. Для лабораторного обследования больного необходимо взять кровь для выявления антител к возбудителю и дифференциации сыпного тифа от эндемического (и других риккетсиозов). Кровь берут стерильным шприцем 5-7 мл из локтевой вены и помещают в стерильную пробирку. Из крови получают сыворотку.

3. Для серологической диагностики сыпного тифа ставят:

A) Реакцию связывания комплемента (РСК), полученную сыворотку больного испыты-

тывают параллельно двумя антигенами: из риккетсий Провацека и риккетсий Музера-

для дифференциации эпидемического сыпного тифа от эндемического.

Б) Для дифференциации сыпного тифа от болезни Брилла ставят реакцию агглюти-

нации с антигеном из риккетсий Провацека и культуры 0Х19.

B) Реакцию непрямой гемагглютинации ставят для дифференциации межгрупповых

риккетсиозов. Для дифференциальной диагностики эпидемического и эндемичес-

кого сыпного тифа заражают морских свинок (самцов). Возбудители эпидеми-

ческого сыпного тифа вызывают у них лихорадку. При введении возбудителей

эндемического сыпного тифа у морских свинок развивается периорхит.

^ ЗАДАЧА № 31.

  1. Clostridium botulinum продуцирует экзотоксин самый сильный из всех биологических токсинов. Патологический процесс при ботулизме обуславливается действием экзотоксина. Экзотоксины, состоят из двух компонентов: нейротоксин и гемагглютинин Нейротоксин поражает клетки продолговатого мозга, сердечно-сосудистую систему. По антигенным свойствам нейротоксины возбудителей ботулизма делят на 7 сероваров: A, B.C,D,H,F,G. Каждый серовар характеризуется специфической иммунногенмостью. Серовары А, В, С чаще всего вызывают ботулизм.

2. Основные методы исследования при ботулизме:

1. Биологический метод: постановка реакции нейтрализации ботулинистического ток-

сина на мышах.

2. Бактериологический метод. Выделение чистой культуры возбудителя на среде

Китта-Тароцци и идентификация по морфологическим, ферментативным свойствам,

по реакции нейтрализации токсина.

3. В качестве профилактики и лечения вводят противоботулинистическую поливалентную антитоксическую сыворотку типов А, В, С. После установления типа токсина вводят противоботулинистическую сыворотку того типа, который соответствует выделенному штамму.

^ ЗАДАЧА № 32.

  1. Во вторичном периоде сифилиса на исследование следует взять кровь.

  2. Для подтверждения диагноза необходимо поставить реакцию Вассермана для выявления специфических иммуноглобулинов и вассермановских аутоантител.

3. Реакцию Вассермана ставят по принципу реакции связывания комплемента. Отличается она тем, что при реакции Вассермана может быть использован неспецифический антиген. Например, липоидный экстракт из бычьего сердца, кардиоантиген. Реакция с неспецифическим антигеном объясняется тем, что в сыворотке крови больного повышается содержание глобулинов и изменяется степень их дисперсности. Глобулины, вступая в соединение с липидными экстрактами, образуют комплекс, который связывает комплемент и поэтому гемолиз в гемолитической системе не наступает. Отсутствие гемолиза - положительная реакция - серологически подтверждает диагноз: «Сифилис».

^ ЗАДАЧА № 33.

  1. Исследуемый материал - содержимое бубона.

2. Для подтверждения диагноза следует провести микробиологическое исследование.

A) Микроскопический метод.

Из полученного материала готовят мазки, окрашивают по Граму, метиленовым

синим для выявления биполярности. Наличие в мазках грамотрицательных палочек

овоидной формы, а при окраске метиленовым синим - наличие биполярности дает

право поставить предварительный диагноз.

Б) Бактериологический метод.

Делают посев исследуемою материала на питательные среды для выделения и

идентификации возбудителя заболевания.

B) Биологическая проба.

Биологическую пробу ставят на морских свинках и белых мышах.

3. Исследования на чуму проводят в лаборатории особо опасных инфекций.


^ ЗАДАЧ А № 34.

  1. Заболевание вызвали возбудители туберкулеза Mycobacterium tuberculosis.

2. Для подтверждения диагноза следует применить следующие методы:

A) Бактериологический метод.

Делают посев исследуемого материала на среду Левенштейна - Йенсена для выделения

возбудителя.

Б) Биологический метод.

Морских свинок заражают для выделения чистых культур микобактерий

туберкулеза и изучения патогенеза заболевания.

B) Аллергический метод.

Внутрикожно вводят в предплечье 0,1 мл альттуберкулина. В положительных случаях

на месте введения туберкулина появляется инфильтрат с венчиком гиперемии

диаметром 10 мм.

3. Специфическая профилактика – живая вакцина БЦЖ.

^ ЗАДАЧА № 35.

  1. Чувствительность, микроорганизмов к антибиотикам определяют: методом диффузии в агар с применением стандартных дисков, методом серийных разведении в жидких и плотных питательных средах.

  2. Суточную бульонную культуру засевают «газоном» на чашки со средой МПА или АГВ. После подсушивания в течение 30-40 минут при комнатной температуре на поверхность засеянного агара пинцетом накладывают бумажные диски, пропитанные растворами различных антибиотиков. Диски накладывают на равном расстоянии друг о друга и на расстоянии 2 см о края чашки (4-5 дисков на 1 чашку). Чашки помещают в термостат на 18-24 часа при 37°С.

  3. Учет результатов. Действие антибиотика оценивают по феномену задержки роста вокруг диска. Диаметр зон задержки роста вокруг дисков определяется с помощью линейки, включая диаметр самого диска. Степень чувствительности определяют по таблице, в зависимости от диаметра зоны задержки роста и вида антибиотика.

В ответе указывают, какой чувствительностью обладает исследуемый микроорганизм к различным антибиотикам - чувствительные, устойчивые, умеренно устойчивые.


^ ЗАДАЧА № 36.

  1. Материал: отделяемое слизистой задней стенки носоглотки.

  2. Отделяемое задней стенки носоглотки собирают стерильным тампоном, изогнутым под углом 120° стерильным тампоном при помощи шпателя. Шпателем прижимают язык. Не касаясь зубов, языка, щек вводят тампон загнутым концом вверх, подводят под мягкое небо касательными движениями слева направо собирают материал.

Делают посев сразу на 10% сывороточный агар с линкомицином или ристомицином,

5% кровяной агар или доставляют при температуре не ниже 2 0С, предохраняя от

высыхания в течение 2-3 часов.

Ликвор, соблюдая правила асептики, стерильной иглой из спинно – мозгового

канала в центрифужную пробирку. Кровь засевают у постели больного в жидкую

жидкую среду с 0,1% глюкозой в соотношении 1:10 до начала лечения.

  1. Используют серологический метод: сыворотку обследуемых лиц исследуют в РНГА, PТГA с менингококковым эритроцитарным диагностикумом А.С. Титр антител определяют в динамике.



^ ЗАДАЧА № 37.

  1. Мазок из мокроты окрашиваю по методу Циля-Нильсена. Возбудитель туберкулеза окрашивается в красный цвет, фон препарата остается голубым.

  2. Морфологические особенности микобактерий туберкулеза: полиморфные тонкие палочки, могут иметь вид пунктира, на концах имеют небольшое утолщение.

  3. Метод микрокультур Прайса: на предметных стеклах делают толстые мазки мокроты. Мазки высушивают, обрабатывают несколько минут 2-6% серной кислотой, промывают перильным изотоническим раствором хлорида натрия. Затем стекла опускают во флакон с гемолизированной нитратной кровью в разведении 1:4-1:8, ставят в термостат. Через 3-7-14 дней стекла извлекают, фиксируют препарат, окрашивают по Цилю-Нильсену, микроскопируют. Вирулентные штаммы микобактерий образуют на стекле микрокультуры, имеющие вид кос, жгутов.



^ ЗАДАЧА № 38.

  1. Тампон изготовляется так: на конец алюминиевой (деревянной) палочки накручивается вата (желательно синтетическая). Стерилизуется тампон при температуре 1400С 60 минут или в автоклаве при 0,5 атм.- 30 минут.

  2. Материал отбирается стерильным тампоном. Отбор материала проводят двумя тампонами: один для забора из ротоглотки (отбирается материал на границе пораженной и здоровой слизистой). Второй тампон - для забора материала из носовых ходов.

3. Посев материала осуществляется на кровяно-теллуритовый агар (КТА). Посев делается следующим образом: чашку со средой делят на две половины, подписывают «зев» - на одной, «нос» - на другой половине, ставят - №, дату исследования. Посев производят в чашку параллельными штрихами. Основной тест при идентификации коринебактерий - проба на токсигенность.


^ ЗАДАЧА № 39.


  1. Подготовка к исследованию материала: взвешивают 1 грамм испражнений (без консерванта), помещают в стерильную пробирку с 9 мл стерильного изотонического раствора натрия хлорида, эмульгируют и получают основное разведение 1:10.

Далее получают разведения: 10-3, 10 -5, 10-7, 10-9, 10-11.

  1. Питательные среды: Ленина, Плоскирева, ЖСА, Сабуро, Эндо, КА, МПА, молоко обезжиренное.

  2. Из основного разведения 1:10 делают посев на среды: Левина, Плоскирева, ЖСА, Сабуро. Из разведения 10­3 делают посев на: Эндо, КА, ЖСА, Сабуро. Из разведении: 10ˉ5- на Эндо, КА; Сабуро; 10ˉ7- на Эндо, КА; с 10ˉ7 по 10ˉ11 - на Блаурока; 10-3; 10-5 - на МПА (по Шукевичу);10ˉ6, 10ˉ7 - в молоко обезжиренное (на лактобактерии). Питательные среды: Левина, Плоскирева, ЖСА, Сабуро, Блаурока, Эндо, КА, МПА, молоко обезжиренное.

^ ЗАДАЧА № 40.

  1. Clostridium tetani — грамположительные палочки с закругленными концами, образуют споры, расположенные терминально. Капсул не образуют. Подвижны, жгутики располагаются перитрихиально.

  2. Clostridium tetani строгий анаэроб. Культивирование анаэробов:

1. В глубине высокого столбика агара.

2. Перед посевом из среды удаляют кислород путем кипячения в водяной бане и

быстрого охлаждения до температуры 40-50 0С.

3. Использование редуцирующих веществ: глюкозы, кусочков мяса. .

4. Жидкие среды залипают слоем вазелинового масла.

5. Посевы на чашках ставят в анаэростат.

6. Биологический метод: совместное культивирование анаэробов и аэробов в одной

чашке.

  1. Специфическая профилактика основана на иммунизации анатоксином, являющимся компонентом АКДС. Прививки вакциной АКДС проводят всем детям в возрасте от 5-6 месяцев до 12 лет с последующей вакцинацией. Вакцинацию также проводят в случае травм, а также работникам сельского хозяйства, строителям. Специфическое лечение - противостолбнячная сыворотка, противостолбнячный иммуноглобулин.



1   2   3   4   5   6

Ваша оценка этого документа будет первой.
Ваша оценка:

Похожие:

Н. Н. Володин “ ” 2003 г icon Н. Н. Володин “ ” 2000 г

Н. Н. Володин “ ” 2003 г icon Н. Н. Володин тестовые задания по клиническим

Н. Н. Володин “ ” 2003 г icon Методические рекомендации Москва, 2005 Вразработке методических рекомендаций принимал участие коллектив

Н. Н. Володин “ ” 2003 г icon ­ 2003 г. «13» мая 2003 г. Протокол ведения больных с острой аллергической реакцией на догоспитальном

Н. Н. Володин “ ” 2003 г icon Приказ от 9 июня 2003 г. №231 «об утверждении отраслевого стандарта «протокол ведения больных. Дисбактериоз

Н. Н. Володин “ ” 2003 г icon Приказ Минэнерго РФ от 19 июня 2003 г. №229 Зарегистрировано в Минюсте РФ 20 июня 2003 г

Н. Н. Володин “ ” 2003 г icon 16-17-18 апреля 2003 года в Москве, в Центре международной торговли, в рамках intercharm professional-2003

Н. Н. Володин “ ” 2003 г icon История настоящего заболевания (Anamnesis morbi)
В 2003 – биопсия – подтверждён диагноз идиопатический фиброзирующий альвеолит. В 2003 – кт. Настоящее...
Н. Н. Володин “ ” 2003 г icon Лению Главы города от 10. 07. 2003 №651
Тарифы на зубопротезные и ортопедические работы по муниципальному учреждению "Городская стоматологическая...
Н. Н. Володин “ ” 2003 г icon Приказ фсб РФ от 29 июня 2004 г. N 457 "Об организации военно-врачебной экспертизы в органах федеральной
В соответствии с постановлением Правительства Российской Федерации от 25 февраля 2003 г n 123 "Об...
Разместите кнопку на своём сайте:
Медицина


База данных защищена авторским правом ©MedZnate 2000-2019
обратиться к администрации | правообладателям | пользователям
Документы