|
Скачать 0.8 Mb.
|
Тема 5. Процесс ферментации: основные характеристики (4 часа). ^ базисные понятия промышленной микробиологии, необходимые для осмысления биотехнологического производства; Студент должен уметь: учитывать влияние биотехнологических факторов на эффективность технологического процесса и качество конечного продукта, поддерживать оптимальные условия для биосинтеза целевого продукта и решать ситуационные задачи при отклонениях от условий ферментации. Содержание темы: Основные параметры периодической ферментации. Фазы периодической ферментации, особенности роста микроорганизмов. Кинетические характеристики процесса: показатели роста биомассы, потребления субстрата, продуктов метаболизма. Макростехиометрические характеристики процесса. Вывод «формулы» биомассы микроорганизмов. Расчет выхода биомассы на углеродный субстрат. Определение стехиометрических соотношений в реальных процессах ферментации. Оценка продуктивности по биомассе для периодического и непрерывного процессов. Определение продуктивности по целевому продукту. Расчет удельной скорости роста, удельной скорости образования целевого продукта и скорости потребления субстрата. Расчет величин экономического коэффициента и выхода целевого продукта. ^ Провести расчет выхода биомассы на углеродный субстрат, определить стехиометрические соотношения на основе данных задачи по реальному процессу ферментации. Рекомендуемая литература по теме: Основная: 1. Егорова Т.А., Клунова С.М., Живухина Е.А. Основы биотехнологии. Учебн. пособие. М.: Издательский центр «Академия», 2005. 208 с. 2. Егоров Н.Е. Введение в биотехнологию. М.: МГУ. 2002. с. Дополнительная:
Самостоятельная работа (1 час): провести оценку продуктивности периодического и непрерывного процессов по биомассе и целевому продукту. Провести расчеты удельной скорости роста, образования целевого продукта и скорости потребления субстрата для периодического и непрерывного процессов. Провести расчет величин экономического коэффициента и выхода целевого продукта для периодического и непрерывного процессов. Рекомендуемая литература для самостоятельной работы:
8. Хигинс И., Бест Д., Джонс Дж. Биотехнология: принципы и применение. М.: Мир. 1988. Тема 6. Непрерывное культивирование (4 часа) Студент должен знать: базисные понятия промышленной микробиологии, необходимые для осмысления биотехнологического производства; типы процессов непрерывного культивирования, используемые в различных отраслях промышленности. ^ учитывать влияние биотехнологических факторов на эффективность процесса непрерывного культивирования и качество конечного продукта, поддерживать оптимальные условия для биосинтеза целевого продукта и решать ситуационные задачи при отклонениях от этих условий Содержание темы: Разновидности непрерывных процессов: тубулярные и хемостатные. Тубулярный процесс. Хемостатный процесс. Сравнение производительности периодического и непрерывного процессов. Отклонения от теории хемостата при лимитировании процесса различными субстратами, кислородом. Автоселекция. Хемостат с рециркуляцией биомассы клеток. Двухстадийный хемостат, его особенности. Непрервыное культивирование с внешинм регулированием параметров: репиростат, оксистат, рН-стат, нутристат, теплостат. Преимущества и недостатки непрерывного способа культивирования микроорганизмов. Рекомендуемая литература по теме: Основная: 1. Егорова Т.А., Клунова С.М., Живухина Е.А. Основы биотехнологии. Учебн. пособие. М.: Издательский центр «Академия», 2005. 208 с. 2. Егоров Н.Е. Введение в биотехнологию. М.: МГУ. 2002. с. Дополнительная:
Самостоятельная работа (1 час): на основе дополнительной литературы и Интернета составить таблицу соответствия различных процессов промышленной микробиологии по типам непрерывного культивирования. Выделить основные особенности производств и дать их полную характеристику. Рекомендуемая литература для самостоятельной работы:
8. Елинов Н. П. Основы биотехнологии. – СПб.: Издательская фирма «Наука», 1995. – 600 с. Тема 7. Сырье для процессов ферментации (2 часа) Студент должен знать: ресурсы природных биоценозов как источника субстратов для биотехнологии, потребности микроорганизмов в питательных веществах, типы и компонентный состав сред. ^ составить питательную среду для культивирования, рассчитать потребности штамма-продуцента при различных видах культивирования, давать экономическую оценку используемого сырья. Содержание темы: Макроэлементы, микроэлементы, витамины. Потребности микроорганизмов в питательных веществах. Типы сред. Источники углеродного, азотного питания. Выбор сырья для конкретных процессов ферментации. Компонентный состав сред. Виды недорогого, доступного и возобновляемого сырья, растительная масса. Дробное дозирование субстрата. Понятие о непродуктивных затратах субстратов и энергии в процессах биотехнологического синтеза. Экономическая оценка используемого сырья. Структура себестоимости продуктов микробного синтеза. Экономические аспекты биотехнологической переработки отходов. Рекомендуемая литература по теме: Основная: 1. Егорова Т.А., Клунова С.М., Живухина Е.А. Основы биотехнологии. Учебн. пособие. М.: Издательский центр «Академия», 2005. 208 с. 2. Егоров Н.Е. Введение в биотехнологию. М.: МГУ. 2002. с. Дополнительная:
3. Бекер М.Е., Лиепинш Г.К., Райпулис Е.П. Биотехнология. М.: Агропромиздат. 1990 Тема 8. Контроль и управление биотехнологическими процессами: моделирование и оптимизация (6 часов) ^ методы и условия проведения основных биотехнологических производств; факторы, влияющие на проведение процесса, методы проведения оптимизации питательных сред, основные методы и критерии масштабирования процессов ферментации. ^ моделировать биотехнологический процесс, основываясь на знании теории моделирования и оптимизации биотехнологического процесса и оборудования, учитывать влияние биотехнологических факторов на эффективность технологического процесса и качество конечного продукта; поддерживать оптимальные условия для биосинтеза целевого продукта и решать ситуационные задачи при отклонениях от этих условий. ^ Методы определения концентрации микроорганизмов. Методы и приборы для контроля технологических параметров процесса культивирования – температуры, рН, содержания растворенных газов. Применение методов планирования эксперимента при исследовании биотехнологических процессов. Выбор критерия оптимизации. Выбор исходных компонентов среды. Традиционные методы изучения многофакторных зависимостей. Метод Гаусса-Зайделя. Метод Бокса-Уилсона. Статистическая оценка результатов. Заключительные этапы оптимизации среды. Многоуровневые планы эксперимента. ^ Провести оптимизацию питательной среды по данным задачи по методу Бокса-Уилсона. Рекомендуемая литература по теме: Основная: 1. Егорова Т.А., Клунова С.М., Живухина Е.А. Основы биотехнологии. Учебн. пособие. М.: Издательский центр «Академия», 2005. 208 с. 2. Егоров Н.Е. Введение в биотехнологию. М.: МГУ. 2002. с. Дополнительная:
Самостоятельная работа (2 часа): Познакомиться на основе дополнительной литературы и Интернета с постановкой задач масштабирования. Выявить основные подходы к масштабированию на основе концентрации растворенного кислорода и другие критерии масштабного перехода: концентрация углекислого газа, воздействие мешалки на клетки, масштабирование «снизу вверх» и «сверху вниз». Выяснить основные методы использования компьютерной техники для управления биотехнологическими процессами. Рекомендуемая литература для самостоятельной работы:
Раздел 3. Биологические агенты в биотехнологии Тема 9. Штаммы-продуценты: природа, свойства, особенности, требования, получение, применение (2 часа) Студент должен знать: типы, применяемых в биотехнологии биологических агентов – штаммов-продуцентов; виды их биохимической деятельности, особенности биологии и методов культивирования в биотехнологических процессов, методы получения штаммов-продуцентов, принципы подбора и критерии, предъявляемые к ним. ^ подбирать и характеризовать основные методы выращивания штаммов-продуцентов на основе их биологических особенностей. Содержание темы: Основные биологические объекты, используемые в биотехнологии. Особенности вирусов, бактерий, грибов, водорослей, клеток высших растений, клеток животных. Культура тканей и клеток высших растений и животных. Ферменты как объекты биотехнологии. Микроорганизмы – продуценты первичных и вторичных метаболитов. Получение чистых культур клеток и тканей. Принципы подбора биотехнологических объектов для осуществления различных процессов и целевых продуктов. Требования, предъявляемые к промышленным штаммам микроорганизмов и др. биотехнологическим объектам. Современные методы создания и усовершенствования промышленных штаммов микроорганизмов. Основные стадии выращивания организмов-продуцентов и получение биотехнологической микробной продукции. Технология культивирования продуцентов ферментов. Способы получения посевного материала для поверхностного и глубинного культивирования. Влияние условий культивирования на рост микроорганизмов. Получение посевного материала. Требования, предъявляемые к посевному материалу. Предферментация. Рекомендуемая литература по теме: Основная: 1. Егорова Т.А., Клунова С.М., Живухина Е.А. Основы биотехнологии. Учебн. пособие. М.: Издательский центр «Академия», 2005. 208 с. 2. Егоров Н.Е. Введение в биотехнологию. М.: МГУ. 2002. с. Дополнительная:
Тема 10. Основы генетической инженерии (6 часов) Студент должен знать: базисные понятия генетической инженерии, необходимые для осмысления биотехнологического производства; ^ излагать основные этапы генно-инженерных работ. Содержание темы: История развития генетической инженерии. Основные характеристики генетического аппарата у прокариот и эукариот. Понятия о генной, геномной и хромосомной инженерии. Плазмиды и коньюгация. Трансформация. Бактериофаги и трансдукция (генерализованная и специализированная). Применение транспозонов. Получение и слияние протопластов. Генная инженерия in vitro (технология рекомбинантных ДНК). Ферменты генной инженерии. Основные этапы генно-инженерных работ (выделение генов, включение генов в состав вектора, перенос генов в клетки-реципиенты, амплификация и экспрессия клонируемых гомологичных и гетерологичных генов. Методы идентификации и изоляции клонов с рекомбинантной ДНК. Локализованный и сайт-специфический мутагенез. Суперпродуценты и проблема стабильности векторов. Секреция чужеродных белков. Конструирование штаммов – продуцентов первичных метаболитов. Конструирование штаммов – продуцентов инсулина и интерферонов человека. Рекомендуемая литература по теме: Основная: 1. Егорова Т.А., Клунова С.М., Живухина Е.А. Основы биотехнологии. Учебн. пособие. М.: Издательский центр «Академия», 2005. 208 с. 2. Егоров Н.Е. Введение в биотехнологию. М.: МГУ. 2002. с. Дополнительная:
2. Глик Б., Пастернак Дж. Молекулярная биотехнология. Принципы и применение. – М.: Мир, 2002. – 589 с.
Самостоятельная работа (6 часов): Познакомиться с методами создания с помощью методов генетической инженерии продуцентов новых лекарственных веществ. Дать физико-химическую характеристику внехромосомным генетическим элементам – плазмидам с точки зрения их функций у микроорганизмов, используемых в биотехнологических процессах. Выявить механизмы взаимодействия плазмид с геномом хозяина, роль плазмидной и фаговой ДНК в генетическом конструировании продуцентов биологически активных веществ. Выяснить роль транспозонов и их использование в конструировании продуцентов. Познакомиться с химическим синтезом фрагментов ДНК, гена, методами секвенирования (определения последовательности нуклеотидов). Выявить последовательность операций при включении чужеродного гена в векторную молекулу. Дать понятие компетентные клетки, генетические маркеры. Познакомиться с проблемами экспрессии чужеродных генов в микроорганизмах. Гены животной клетки; экзоны, нитроны. Обеспечение возможности экспрессии генов млекопитающих в микробной клетке. Способы преодоления барьеров на пути экспрессии чужеродных генов. Стабилизация чужеродных белков (целевых продуктов) в клетке. Генетические методы, обеспечивающие выделение чужеродных белков в среду. Микроорганизмы различных систематических групп: дрожжи, эубактерии, актиномицеты и др. как хозяева при экспрессии чужеродных генов. Специфические проблемы генетической инженерии при создании новых продуцентов белковых веществ, первичных и вторичных метаболитов как целевых биотехнологических продуктов. Рекомендуемая литература для самостоятельной работы:
Тема 11. Основы клеточной инженерии (6 часов) Студент должен знать: базисные понятия клеточной инженерии, необходимые для осмысления биотехнологического производства; ^ излагать основные этапы работ в области клеточной инженерии растительных и животных клеток и тканей. Содержание темы: Культура клеток и тканей: краткая история предмета. Методы и условия культивирования тканей и клеток растений и животных. Использование культуры клеток и тканей в создании современных технологий. Клеточные культуры - возможность сохранения редких видов в коллекциях. Клональное микроразмножение. Клеточная селекция и индуцированный мутагенез. Дедифференцировка и каллусогенез как основа создания пересадочных клеточных культур. Вегетативное размножение растений методом культуры тканей. Культивирование клеток растений в глубинных условиях. Микроклональное размножение растений. Использование культуры тканей для получения безвирусного посевного материала и оздоровления растений. Использование протопластов в селекции растений. Цитопласты. Гибридизация. Возможности и перспективы использования культур тканей животных в биотехнологии. Использование эмбриональных тканей для репродукции вирусов и получения вирусных вакцин. Трансплантация эмбрионов животных. Получение трансгенных животных. Гибридомы. Диагностические препараты и моноклональные антитела. Генная терапия. Биотехнологическое выращивание тканей и органов для имплантации. Проведение экскурсий в лаборатории биотехнологии института биологии и физиологии КНЦ УрО РАН для ознакомления с методами клеточной инженерии для выращивания культур клеток и тканей высших растений. Рекомендуемая литература по теме: Основная: 1. Егорова Т.А., Клунова С.М., Живухина Е.А. Основы биотехнологии. Учебн. пособие. М.: Издательский центр «Академия», 2005. 208 с. 2. Егоров Н.Е. Введение в биотехнологию. М.: МГУ. 2002. с. Дополнительная:
Самостоятельная работа (6 часов): Дать характеристику макробиообъектам животного происхождения, особенностям культивирования клеток и тканей животных: человек как донор и объект иммунизации; млекопитающие, птицы, рептилии, рыбы, насекомые, паукообразные, морские беспозвоночные. Основные группы получаемых биологически активных веществ. Дать характеристику биообъектам растительного происхождения, особенностям культивирования клеток и тканей растений: дикорастущих, плантационных, водорослей. Культуры растительных тканей. Основные группы получаемых биологически активных веществ. Написание отчета по экскурсии в лаборатории биотехнологии института биологии и физиологии КНЦ УрО РАН по методам клеточной инженерии, используемых при выращивания культур клеток и тканей высших растений. Рекомендуемая литература для самостоятельной работы:
Раздел 4. Аппараты и методы, применяемые в биотехнологии. Тема 12. Аппараты и методы, используемые для культивирования микроорганизмов (2 часа) Студент должен знать: основное биотехнологическое оборудование, основы эксплуатации биореакторов и корректирования технологических параметров ферментации. ^ характеризовать различные виды ферментеров, особенности устройства и функционирования ферментёров по принципам организации материальных потоков. Содержание темы: Виды ферментеров: по структуре потоков, по способу ввода энергии, аэрации, а также особенности культивирования клеток растений и животных. Критерии подбора ферментаторов при реализации конкретных целей. Классификация биосинтеза по технологическим параметрам. Принципы организации материальных потоков: периодический, полупериодический, отьемно-доливной, непрерывный. Массообмен. Основные типы ферментационной аппаратуры для поверхностного и глубинного культивирования. Устройство и функционирование типичного ферментёра. Хемостат и турбидистат. Основы асептики в биотехнологических производствах. Системы подготовки стерильного сжатого воздуха и очистки отработанного воздуха. Пенообразование и пеногашение. Системы контроля и управления процессом ферментации. Рекомендуемая литература по теме: Основная: 1. Егорова Т.А., Клунова С.М., Живухина Е.А. Основы биотехнологии. Учебн. пособие. М.: Издательский центр «Академия», 2005. 208 с. 2. Егоров Н.Е. Введение в биотехнологию. М.: МГУ. 2002. с. Дополнительная:
Тема 13. Аппараты и методы, используемые в процессах биокатализа и биотрансформации (2 часа) Студент должен знать: основные группы технически важных биотрансформаций реакций биокатализа; преимущества и недостатки биокаталитических процессов, технологические схемы реализации процессов биотрансформации, типы ферментеров. Студент должен уметь: давать характеристику процессам биотрансформации и биокатализа и ферментерам, используемых в данных процессах. Содержание темы: Основные группы технически важных биотрансформаций. Основные виды реакций биокатализа. Преимущества и недостатки биокаталитических процессов. Методы иммобилизации ферментов и оценка их качества и метода иммобилизации. Технологические схемы реализации процессов биотрансформации, типы ферментеров. Преимущества и недостатки процессов биотрансформации. Примеры использования ферментов. Создание биокатализаторов второго поколения на основе одновременной иммобилизации продуцентов и ферментов трансформации продукта биосинтеза. Объединение в одном реакторе процесса биосинтеза и реакции трансформации. "Открытые системы для усложнения". Биореакторы различных типов. Рекомендуемая литература по теме: Основная: 1. Егорова Т.А., Клунова С.М., Живухина Е.А. Основы биотехнологии. Учебн. пособие. М.: Издательский центр «Академия», 2005. 208 с. 2. Егоров Н.Е. Введение в биотехнологию. М.: МГУ. 2002. с. Дополнительная:
Тема 14. Аппараты и методы, применяемые для выделения и очистки продуктов биотехнологии (2 часа) Студент должен знать: основные методы выделения, очистки и концентрирования экзо- и эндометаболитов. ^ давать характеристику аппаратуре, используемой для выделения, очистки и концентрирования целевых продуктов. Содержание темы: Экзо- и эндометаболиты как целевые продукты биотехнологии. Дезинтеграция. Сепарация. Осаждение. Флотация. Упаривание. Современные методы выделения метаболитов из растворов: мембранные процессы (ультрафильтрация и обратный осмос), ионный обмен, гельпроникающая и аффинная хроматография, экстракция, кристаллизация, вымораживание, сорбция и т.д. Физико-химические основы и аппаратурное оформление процессов выделения и очистки продуктов ферментации. Рекомендуемая литература по теме: Основная: 1. Егорова Т.А., Клунова С.М., Живухина Е.А. Основы биотехнологии. Учебн. пособие. М.: Издательский центр «Академия», 2005. 208 с. 2. Егоров Н.Е. Введение в биотехнологию. М.: МГУ. 2002. с. Дополнительная:
Раздел 5. Применение биотехнологических процессов в народном хозяйстве Тема 15. Процессы производства полезных веществ (2 часа) Студент должен знать: основы биотехнологических процессов, используемых в многотоннажных производствах пищевых продуктов, ферментов, в сельском хозяйстве, медицине и других отраслях народного хозяйства ^ : характеризовать биотехнологические процессы, используемые в многотоннажных производствах пищевых продуктов, ферментов. Содержание темы: Характеристика процессов получения этилового спирта, пива, вина. Биотехнологические процессы получения органических кислот. Бродильные процессы получения молочной и пропионовой кислот. Использование молочнокислых бактерий в процессах силосования кормов, квашения овощей, сыроварении, приготовлении профилактических и лечебных препаратов. Получение уксуса. Получение лимонной кислоты. Получение микробных препаратов – удобрений почв, стимуляторов и регуляторов роста растений. Технология получения препаратов для биологического метода борьбы с вредителями и болезнями растений. Научные основы применения таких препаратов. Выведение сортов растений, обладающих новым спектром свойств; повышение урожайности сельскохозяйственных культур методами биотехнологии; клонирование растений; трансгенные растения. Создание новых пород сельскохозяйственных животных; создание антибиотиков, вакцин и других ветеринарных препаратов; производство кормов и кормовых добавок; перспективы клонирования животных. Проведение экскурсий на производства г. Сыктывкара: ОАО «Сыктывкарпиво», ОАО «Сыктывкарский хлебокомбинат», ОАО Молокозавод «Сыктывкарский» для ознакомления с многотоннажными производствами пищевых продуктов. Рекомендуемая литература по теме: Основная: 1. Егорова Т.А., Клунова С.М., Живухина Е.А. Основы биотехнологии. Учебн. пособие. М.: Издательский центр «Академия», 2005. 208 с. 2. Егоров Н.Е. Введение в биотехнологию. М.: МГУ. 2002. с. Дополнительная:
3. Бекер М.Е., Лиепинш Г.К., Райпулис Е.П. Биотехнология. М.: Агропромиздат. 1990 Самостоятельная работа (1 час): написать отчет по экскурсиям на производствах г. Сыктывкара: ОАО «Сыктывкарпиво», ОАО «Сыктывкарский хлебокомбинат», ОАО Молокозавод «Сыктывкарский» по выбору с анализом биотехнологического производства по изученным ранее этапам производства. Рекомендуемая литература для самостоятельной работы:
|