^
ТЛР
|
Лиганды
|
TLR-2
|
Липотейхоевая кислота
Пептидогликан
Липоарабидоманнан
Липопептиды микоплазм
Клеточная стенка дрожжей (зимозан)
|
TLR3
|
Двуцепочечная РНК, Поли I:C
|
TLR-4
|
ЛПС
Липотейхоевая кислота
Белки теплового шока
|
TLR-5
|
Флагеллин
|
TLR-6
|
Полипептиды микоплазм, дрожжей (зимозан)
|
TLR-7
|
РНК вирусов
|
TLR-8
|
РНК вирусов
|
TLR-9
|
Бактериальные CpG олигонуклеотиды
|
Структура и функция ТЛР (ТЛР2)
Рисунок 4. Структура ТЛР2
ТIR
|
Внутриклеточная часть ТЛР содержит домен TIR, общий рецептором ИЛ1 (рис.4). При стимуляции ТЛР изменяет конформацию TIR домена, что приводит к каскадному фосфорелированию адапторных белков и, далее, IkB - специфического ингибитора транскрипционного фактора NFkB. Фосфорелированный IκB расщепляется, а освобожденный NFκB транспортируется в ядро и активирует транскрипцию ряда генов. В результате работы этих генов иммунная клетка активируется и вырабатывает сигнал «опасности», т.е. обнаружения микроорганизма/повреждения.
ТЛР при распознавании лиганда активируют клетку (изменение морфологии, спектра рецепторов и поверхностных структур, синтеза и секреции белков и биоактивных молекул, изменение времени жизни клетки).
|
Нейтрофилы и макрофаги экспрессируют практически все известные ТЛР (1-10). Исследования с помощью моноклональных антител и количественной РТ-ПЦР выявляют значительную экспрессию ТЛР1, умеренную - 2, 4, 9, 5, 6, 7.
Рисунок 5. Строение рецептора маннозы (CD206)
|
^
РМ – мембранный белок I типа, экспрессированный преимуществено на макрофагах и эндотелии оболочек (рис.5);
•РМ является полностью рециркулирующим рецептором для эндоцитоза;
•РМ является лектином С-типа с 8 CRD которые распознают терминальные остатки маннозы/фукозы (N-ацетил-глюкозамин);
•Богатый цистеином домен также является лектином, распознающим сульфатированный N-ацетилгалактозамин;
•РМ участвует в распознавании многочисленных микроорганизмов (^ , Pneumocystis carinii, Leishmania, HIV).
Углевод-распознающий домен
|
|
^
• βгР специфичен к β-(1,3/1,6)-глюканам, которые весьма характерны для клеточной стенки грибов (рис.6);
• βгР широко экспрессирован на фагоцитах: моноцитах, Мф, Нф и ДК;
• βгР является мембранным белком II типа с одним лектиновым доменом С-типа;
• βгР обладает собственной уникальной последовательностью ITAM (тирозиновый активационный мотив рецепторов иммунных клеток);
• βгР обеспечивает распознавание грибов с их последующим фагоцитозом;
• стимуляция βгР вызывает продукцию ФНОа;
Таким образом, βгР является одновременно сигнальным рецептором, формирующим развитие воспалительного ответа, и рецептором фагоцитоза.
|
^ )
NLR принадлежат к семейству белков NOD (nucleotide oligomerization domen), содержащих последовательности для связывания ядерных факторов и повторы, богатые лейцином.
Структура. Белки Nod состоят из трех типов доменов :
N-концевой домен активации и связывания каспаз (CARD), который отвечает за передачу активационного сигнала о распознавании бактериальных компонентов, центральный домен, содержащий участок связывания ядерных факторов, и С-концевой повтор, богатый лейцином. Цетральный и С-концевой домены обеспечивают распознавание элементов пептидогликана.
Функция: участвуют в распознавании бактерий-внутриклеточных паразитов и их продуктов и синтезируют цитокины через собственные сигнальные механизмы (не связанные с ТЛР).
Nod1 распознает в основном грамотрицательные бактерии за счет связывания мономера пептидогликана N-ацетилглюкозамин-N-ацетилмурамовая кислота + трипептид с диаминопимелиновой кислотой.
Nod2 способен распознавать пептидогликан из грамотрицательных (^ flexneri) и грамположительных (B. subtilis and S. aureus) микробов. Этот белок связывает минимальный фрагмент пептидогликана: N-ацетилмурамовая кислота-L-аланил-D-изоглутамин.
^
Белки RLP принадлежат к семейству ретиноид индуцибельных белков. По структуре подобны белкам NOD: содержат два CARD домена и РНК-хеликазный домен. Распознают двуцепочечную РНК и вызывают секрецию ИФН-бета посредством активации интерферон регуляторного фактора 3 (IRF3).
ФНОР1 (CD120a)
ФНО-рецептор1 распознает ФНОа и экспрессируется на дыхательном эпителии, макрофагах и гранулоцитах. Стафилококковый белок А непосредственно взаимодействует с ФНОР1 и симулирует его эффекты: активирует иммунные клетки, а также клетки эпителия, что приводит к усилению экспрессии молекул адгезии и секреции ИЛ8. Таким образом создаются условия для мобилизации в очаг нейтрофильных гранулоцитов и их активации.
^
Рисунок 7. DC-SIGN (СD209)
|
•DC-SIGN (ДК-специфический ICAM3 связывающий не-интегрин) и родственные молекулы на фагоцитах являются мембранными белками II типа (рис.7);
•DC-SIGN(R) формируют тетрамеры на поверхности клетки;
•DC-SIGN экспрессированы на ДК, отдельных популяциях фагоцитов и макрофагах печени;
•DC-SIGN(R) распознают остатки маннозы (за счет лектинового домена С-типа);
•Несмотря на схожесть структуры, рецептор имеет отличный механизм связывания и иную специфичность, нежели РМ.
|
Функции DC-SIGN:
•Рецепторы распознают: вирусы Ebola, Hepatitis C, Cytomegalovirus, ^
DC-SIGN распознает и связывает на поверхности ДК HIV-1 (за счет gp120), создавая возможность для массового инфицирования Т-лимфоцитов в ходе иммунного ответа (в т.ч. на антигены ВИЧ).
^
Большинство бактерий синтезируют белки, начиная с N-формил метионина. Такие белки и пептиды являются мощным хемотактическим фактором для фагоцитов. Формил-метиониновый рецептор в настоящее время хорошо изучен (рис.8). Нормальная экспрессия ФМР на нейтрофилах составляет 50 000 ФМР/клетку.
 
Рисунок 8. Строение формил-метионинового рецептора.
|
ФМР является трансмембранным гликопротеидом. Цитоплазматический хвост обладает способностью связывать G-белки.
Стимуляция ФМР обычно непродолжительна (минуты) за счет быстрого разрушения пептидов металлопротеазами и миелопероксидазой.
ФМР структурно и функционально схож с рецепторами для хемокинов и факторов комплемента С5а, С3а.
|
^
Стимуляция сигнальных рецепторов (например,ТЛР) фагоцитов приводит к их активации:
а) к изменению формы клеток. Изначально округлые, выпуклые клетки при стимуляции агонистами ТЛР приобретают неправильную, вытянутую, асимметричную форму;
б) к значительному синтезу цитокинов и хемокинов ИЛ8, ИЛ12, ИЛ1, ФНО и др.;
в) к расщеплению и потере активности поверхностных селектинов на фагоцитах (угнетению миграции клеток из очага микробного воспаления);
г) к усилению фагоцитоза и продукции перекисных радикалов кислорода и галогенов, других факторов внутриклеточной бактерицидности;
д) к усилению антигенпрезентации.
|
