Комплексные Исследования с целью создания лекарственных форм для лечения раневых и воспалительных процессов на основе местноанестезирующего средства 15. 00. 01 Технология лекарств и организация фармацевтического дела
|
|
Скачать 1.07 Mb.
|
|
Критерием оценки изучаемых составов явились следующие показатели: структурно-механические, биофармацевтическая доступность, осмотическая активность. Структурно-механические свойства мягких ЛФ являются эффективным и объективным показателем их качества при производстве и хранении. Основными реологическими параметрами являются: намазываемость, текучесть, удобство применения и способность выдавливаться из туб. Предварительно проведена визуальная оценка консистенции мазевых композиций, в результате которой были отбракованы образцы, представляющие собой жидкие основы со слабо выраженными адгезивными свойствами (3% Blanose 7MF, 3% Na КМЦ, 3% МЦ и 4% Na альгинат) и плотные носители (6% Blanose 7MF, 6% Na КМЦ, 6% МЦ). Структурно-механические характеристики основ оказывают заметное влияние на процессы высвобождения ЛВ из мазей, а также на их потребительские свойства: намазываемость, адгезию, способность выдавливаться из туб. Исследование реологических свойств модельных систем проводились на ротационном вискозиметре «Реотест-2» (Германия). Используя показания прибора рассчитывали касательное напряжение сдвига и строили графики зависимости от скорости сдвига. В реологический оптимум не вошел состав № 10 (4% МЦ). Все остальные исследуемые составы обладают удовлетворительными консистентными свойствами. Для изучения тиксотропных свойств для выбранных составов строили кривые кинетики деформации в координатах: скорость сдвига - напряжение сдвига в области изменения градиентов скорости течения от малых к большим и от больших к малым (рис. 2). Наличие восходящих и нисходящих кривых указывает на то, что исследуемые композиции обладают тиксотропными свойствами, характеризующие хорошую намазываемость и способность выдавливаться из туб.  ^ Результаты проведенных реологических исследований позволяют сделать вывод о том, что указанные мази являются дисперсными системами с коагуляционным типом структуры, для которых характерны упруго-вязко-пластичные свойства. Биофармацевтическую оценку композиций определяли по тесту высвобождения анилокаина через полупроницаемую мембрану. Динамика высвобождения представлена на рис. 3.  Примечание: * - различие достоверно при р<0,05 ** - различие достоверно при р<0,01 Рис. 3. Зависимость высвобождения анилокаина от времени из мазевых композиций С целью изучения кинетики высвобождения анилокаина из мазей на гидрофильных основах использовали кондуктометрический метод анализа. По экспериментальным данным построены кинетические кривые высвобождения анилокаина из композиций на различных основах, что показано на рис. 4 и 5. Установлено, при равных условиях проведения эксперимента с увеличением времени значение удельной электропроводимости возрастает для всех четырех основ, т. е. количество высвобождаемых ионов в воде увеличивается. 
На основании данных зависимости удельной электропроводимости от времени построены графики скорости растворения мазей (рис. 6). Как следует из рисунка, их значения проходят через максимумы. Резкое увеличение скорости наблюдается в начальный момент времени, снижение со временем может быть объяснено уменьшением количества ЛВ в поверхностных слоях матриц-носителей. С большей скоростью в начальный момент времени высвобождение анилокаина происходит из мази на основе 5% Na КМЦ  ** ** ** ** * * * * * * * * * * * * ^ ** - различие достоверно при р<0,01 Рис. 6. Зависимости скорости растворения от времени для различных основ Таким образом, в результате определения скорости высвобождения анилокаина химическим и физико-химическим методами, изучения кинетических закономерностей высвобождения выбрана мазевая композиция на основе 5% Na КМЦ. Известно, что при лечении раневых и воспалительных процессов одного обезболивающего компонента недостаточно. Поэтому для обеспечения необходимого терапевтического эффекта целесообразно введение антимикробного средства. Согласно литературным данным и мнениям специалистов оптимальными и доступными для этих целей являются диоксидин и хлоргексидина биглюконат. Выбор концентрации антимикробного компонента в мазевой композиции осуществляли методом диффузии в агар с учетом МИК антисептика и разновидностью возбудителей в ране (золотистый стафилококк, кишечная палочка). Анализ полученных данных показал, что высокую антимикробную активность в отношении бактерий золотистого стафилококка и кишечной палочки проявили ХГБ в концентрациях от 0,7% до 2% и диоксидин в концентрациях от 0,2% до 2%. Окончательный выбор антисептика осуществляли вышеназванным методом по отношению к 4 видам микроорганизмов на мазях изучаемого состава, содержащих анилокаин (рис. 7).  ^ При выборе антисептика ориентировались на концентрацию, при которой проявляется высокая антимикробная активность. Такому условию отвечает диоксидин в концентрации 2%, обладающий широким спектром антибактериального действия и эффективный в отношении основных возбудителей раневой инфекции. Существенное значение при лечении раневых и воспалительных процессов имеет осмотическая активность мазей. Результаты исследований, представленные в табл. 2, показывают, что изучаемый состав обладает значительным и продолжительным дегидратирующим действием и превосходит гипертонический раствор (контроль) по силе и продолжительности действия в 7 раз. Таблица 2 ^
^ Таким образом, в результате проведенных структурно-механических, биофармацевтических, технологических и микробиологических исследований по разработке оптимального состава мази для лечения раневых и воспалительных процессов предложен следующий состав, названный условно:
Технологический процесс изготовления мази осуществляли в соответствии с общепринятыми правилами приготовления мазей с учетом природы и физико-химических свойств лекарственных и вспомогательных веществ. Стандартизацию мази «Анилкам» проводили в соответствии с требованиями ГФ ХI изд. По внешнему виду мазь представляет собой однородную, вязко-пластично-упругую массу желтого цвета гелеобразной консистенции со слабым характерным запахом аминов. При разработке методик качественного и количественного анализа анилокаина и диоксидина в мази за основу были взяты методики, используемые для субстанций и модифицированные применительно к разработанной лекарственной форме. Количественное определение анилокаина в мази проводили методом экстракционного титрования 0,015 М раствором натрия лаурилсульфата, обеспечивающим унификацию способа оценки качества от субстанции до лекарственной формы. Первоначально исследовано влияние условий: рН водной фазы, природы экстрагента и его соотношения с водной фазой на количественную экстракцию продукта, образующегося в результате взаимодействия анилокаина с натрия лаурилсульфатом. Метрологические характеристики методики количественного определения анилокаина в мази «Анилкам» отражены в таблице 3. Таблица 3 ^
Количественное определение диоксидина в мази «Анилкам» проводили спектрофотометрическим методом в УФ-области спектра. Метрологические характеристики методики количественного определения диоксидина в мази «Анилкам» отражены в таблице 4. Таблица 4 ^
Полученные результаты использованы для составления проекта ФСП “Мазь «Анилкам»“. Изучение стабильности разработанной мази проводили методом естественного (на 5-ти сериях мази) хранения при комнатной температуре в защищенном от света месте. Результаты изменения параметров определяли через промежутки времени, равные 6 месяцам хранения. Критериями качества служили следующие показатели: внешний вид, подлинность, наличие посторонних примесей, количественное содержание действующих веществ, значения рН водных растворов, микробиологическая чистота. Оценивая стабильность физико-химических показателей и количественного содержания действующих веществ в мази «Анилкам» в течение 2 лет 3 мес. позволило установить срок хранения для данной мази 2 года. Доклиническое изучение мази проводилось путем оценки ее специфической местноанестезирующей, противовоспалительной, ранозаживляющей и антимикробной активности. В опытах на животных установлено наличие выраженной анестезирующей, ранозаживляющей, противоожоговой и противовоспалительной эффективности разработанной мази, а также отсутствие местно-раздражающего действия. Данные фармакологических исследований свидетельствуют, что разработанная мазь не уступает препаратам, выпускаемым промышленностью, а по некоторым параметрам превышает эффективность официнальной мази «Левосин». При проведении гистологического исследования участков кожи и подкожной клетчатки экспериментальных животных (белых крыс) с целью изучения ранозаживляющего действия мази «Анилкам» установлено, что при лечении линейных ран у животных мазь способствует: - более раннему появлению грануляций и началу эпителизации раневого дефекта; - полному закрытию раневого дефекта эпителием, лишенным признаков воспалительной гиперплазии; - ускорению заживления ожоговых ран у животных, выражающееся в более раннем формировании зрелой грануляционной ткани и полной эпителизации раневого дефекта, раньше исчезает воспалительная инфильтрация, закрытие дефекта происходит эпителиальным пластом равномерной толщины без признаков воспалительной гиперплазии, сформировавшаяся зрелая волокнистая соединительная ткань имеет типичное гистологическое строение. Таким образом, по эффективности мазь «Анилкам» не уступает мази «Левосин» и имеет более выраженное ранозаживляющее действие, что выражается в сокращении сроков заживления, эпителизации и формирования зрелой волокнистой соединительной ткани типичного гистологического строения в зоне раневого дефекта. На разработанную мазь составлена нормативная документация: проект ФСП, проект инструкции по применению, отчет по доклиническим исследованиям, которые представлены на рассмотрение в ФГУ НЦ ЭСМП Росздравнадзора. Мазь «Анилкам» прошла этап экспертизы возможности безопасного ее применения. В настоящее время решается вопрос о разрешении на проведение клинических исследований. обезболивающий гель «Анилогель» для применения при диагностических и лечебных манипуляциях в урологии Инструментальные исследования являются одними из самых важных в урологии и служат для диагностики заболеваний уретры, мочевого пузыря и почек. Однако, при проведении урологических исследований существенным недостатком является болезненность процедуры, а также возможность возникновения осложнений в виде инфекционно-воспалительных явлений. Этот факт послужил основанием для разработки отечественного препарата, сочетающего в себе местноанестезирующие, противовоспалительные и антимикробные свойства при малом компонентом составе. С целью выбора рациональной концентрации анилокаина проведены исследования поверхностноанестезирующей активности его водных растворов по методу Ренье-Валетта, которые показали, что для обеспечения анестезирующего эффекта при инструментальных вмешательствах достаточной является концентрация 2%. Для предотвращения возникновения инфекционно-воспалительных осложнений после эндоурологических манипуляций в состав геля необходимо ввести антимикробный и дезинфицирующий компонент. Этими свойствами обладает бактерицидное и антисептическое средство - хлоргексидина биглюконат - эффективный в отношении многих грамположительных и грамотрицательных бактерий. Для профилактических целей раствор хлоргексидина биглюконат применяется в концентрациях 0,05%, 0,1% и 0,2%. Эти концентрации и были выбраны для углубленных исследований в отношении тест - культур микроорганизмов: Staphylococcus aureus (штамм АТСС 2592), Escherichia coli (штамм АТСС 6538-Р) и Pseudomonas aeruginosa (штамм АТСС 27857). Исследования осуществляли методом диффузии в агар. Результаты представлены на рис. 8.  ^ различных концентраций в гелевом носителе Анализируя полученные результаты можно сделать вывод, что оптимальной концентрацией хлоргексидина биглюконата, при которой проявляется наибольший антимикробный эффект, является 0,1%. С целью выбора оптимального носителя изучено 11 композиций гидрофильного характера на основе доступных и широко применяющихся полимеров. Во все композиции для предотвращения высыхания и пластификации основ вводили глицерин в концентрации 10% (табл. 5). Кроме того, глицерин обладает антисептическими свойствами, поэтому его применяют для предотвращения заражения ран. Таблица 5 ^
Выбор полимерной основы осуществляли по внешнему виду, консистенции и биофармацевтической доступности. Предварительно проведена визуальная оценка консистенции растворов полимеров, в результате которой были отбракованы образцы, представляющие собой слишком жидкие носители: 2% МЦ, 2,5% МЦ, 3% Na альгинат. Неудовлетворительными по внешнему виду (неоднородны) оказались гели на основе МЦ 3% и 3,5%. Биофармацевтические исследования с целью выбора оптимального состава гелевой основы осуществляли по результатам кинетического исследования высвобождения действующих веществ, которое проводили кондуктометрическим методом (рис. 9).  ^ ** - различие достоверно при р<0,01 Рис. 9. Кинетические кривые высвобождения анилокаина и ХГБ из гидрофильных носителей При равных условиях проведения эксперимента более быстрое высвобождение действующих веществ происходит из геля на основе Na КМЦ 2%. Вязкость геля составила 2,96 Пас. Таким образом, на основе изучения органолептических свойств, биофармацевтических исследований и определения вязкости предложен следующий состав геля, условно названный «Анилогель»: Анилокаина 2,0 Раствора хлоргексидина биглюконата 1% - 10 мл Na КМЦ 2,0 Глицерина 10,0 Воды очищенной до 100,0 Гель готовили в асептических условиях по общим правилам, исходя из свойств входящих в состав ингредиентов. В связи с тем, что гель «Анилогель» предназначен для введения в уретральную полость, то необходимо обеспечить его стерильность. Так как раствор анилокаина не выдерживает термическую стерилизацию паровым методом при повышенной температуре, то в качестве щадящего метода предложено использовать стерилизацию текучим паром при 1000 – 30 мин. Контроль качества геля «Анилогель» проводили в соответствии с требованиями ГФ ХI изд. по органолептическим, физико-химическим показателям (рН), подлинности, количественному содержанию действующих веществ, микробиологической чистоте (стерильность) По внешнему виду гель «Анилогель» представляет собой однородную массу гелеобразной консистенции со слабым запахом аминов. рН водного раствора геля «Анилогель» составляет от 5,0 до 7,0, что определяет ее благоприятное действие на слизистые оболочки. При разработке методик качественного анализа, предложенные для субстанций анилокаина и хлоргексидина биглюконата методики идентификации, модифицировали и апробировали при оценке качества геля «Анилогель». С целью выбора условий разделения компонентов геля для дальнейшего использования их при разработке методик количественного анализа анилокаина и хлоргексидина биглюконата, а также для определения продуктов разложения после стерилизации геля предложен метод высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ). Методику разделения методом ВЭЖХ проводили на стандартных водных растворах веществ с концентрацией 0,5 мг/мл. В работе использовали обращенно-фазный вариант ВЭЖХ на основе приборного комплекса «Милихром А-02». Исследования проводили с использованием градиентного режима. Полученные хроматограммы раствора геля представлены на рис. 10 и 11. По результатам проведенных исследований предложены следующие условия анализа анилокаина и хлоргексидина биглюконата в геле методом высокоэффективной жидкостной хроматографии на приборе «Милихром А – 02»: хроматографическая колонка диаметром 2 мм, длиной 75 мм; неподвижная фаза Нуклеосил 100 С 18 (диаметр зерен сорбента – 5 мкм); температура колонки – 40°С; подвижная фаза: ацетонитрил – фосфатный буфер (рН 3) (с добавлением ион-парного реагента октилсульфоната натрия: 50 мг на 100 мл фосфатного буфера); режим элюирования – градиентный; скорость потока элюента – 100 мкл/мин.; детектирование на 2 аналитических длинах волн (210 нм для анилокаина и 260 нм – для хлоргексидина биглюконата.
Хроматограмма раствора геля до и после стерилизации идентична, что свидетельствует об отсутствии продуктов разложения компонентов геля. Таким образом, для стерилизации можно рекомендовать термический метод текучим паром при температуре 1000С в течение 30 минут. При определении показателя «Стерильность» после стерилизации геля установлено, что после 14 суток инкубации в образцах признаков роста микроорганизмов нет, они оставались бесцветными и прозрачными. Таким образом, препарат «Анилогель» соответствует требованию стерильности. суппозиториИ с анилокаином экстемпорального изготовления и промышленного производства ^ экстемпорального изготовления Вопросы, связанные с изготовлением лекарственных средств в условиях аптеки, являются предметом обсуждения специалистов-практиков и организаторов фармацевтической и медицинской деятельности. Эта группа ЛС будет востребована всегда, т.к. экстемпоральные прописи обладают целым рядом положительных моментов по сравнению с ГЛС. Разработка состава и технологии суппозиториев с анилокаином включала выбор оптимального состава суппозиторных основ, разработку рациональной технологии и оценку качества полученных суппозиториев. При разработке состава суппозиториев экстемпорального изготовления учитывали опыт использования доступных для аптечной практики различных вспомогательных веществ, состав которых представлен в табл. 6. Лекарственное вещество в расплавленную основу вводили в виде водного раствора. Полученные суппозитории имели правильную овально-торпедовидную форму белого или желтоватого цвета в зависимости от вида носителя. Таблица 6 ^
Физико-химические и структурно-механические свойства суппозиториев представлены в табл. 7. Таблица 7 ^
Сравнительный анализ по внешнему виду и основным технологическим показателям (время полной деформации, температура плавления, температура затвердевания) суппозиториев показал, что состав № 8 не удовлетворяет по внешнему виду, а составы № 2, 6, 7 – по времени полной деформации. С целью окончательного выбора основы изучена биологическая доступность методом равновесного диализа через полупроницаемую мембрану. Анализ полученных результатов показал, что наилучшей основой для суппозиториев экстемпорального изготовления является композиция: твердый жир – 88%, парафин –10% и эмульгатор Т-2 - 2%. ^ промышленного производства С целью установления потенциальных носителей для суппозиториев промышленного производства на первом этапе исследования изучено 57 композиций, представляющих собой различные сочетания гидрофобных, гидрофильных и дифильных основ в сочетании с поверхностно-активными веществами. После проведенной первоначальной оценки основ и определения физико-химических и структурно-механических характеристик: внешнего вида (отсутствие вкраплений, отсутствие расслоений, однородность на срезе), времени полной деформации (для гидрофобных основ) или времени растворения (для гидрофильных основ), температуры плавления, температуры затвердевания удовлетворяющим всем этим показателям осталось 35 композиций. С использованием основ, приведенных в табл. 8, готовили суппозитории методом выливания. Концентрация анилокаина, определенная как оптимальная в предыдущих исследованиях, составила 5%. Лекарственное вещество в расплавленную основу вводили в виде водного раствора. Таблица 8 ^
При разработке состава суппозиториев исследовали влияние основ и ПАВ на высвобождение анилокаина по схеме двухфакторного дисперсионного анализа с повторными опытами. Параметром оптимизации избрали концентрацию высвободившегося анилокаина в течение 60 минут. Высвобождение вещества изучали методом равновесного диализа через полупроницаемую мембрану. Диализной средой являлся фосфатно-боратный буферный раствор с рН=7,8, что соответствует значению рН слизистой оболочки прямой кишки. Концентрацию анилокаина в пробах диализата определяли экстракционным титрованием 0,005 М раствором натрия лаурилсульфата. При постановке эксперимента рассчитанное количество основы расплавляли на водяной бане, вносили 3% ПАВ от общей массы, вводили раствор анилокаина, перемешивали смесь до образования однородной массы. Полученную массу разливали в охлажденные суппозиторные формы. Изучаемые факторов обозначали: А – суппозиторные основы: а1 – твердый жир, а2 – витепсол W-35, а3 – полиэтиленоксидная основа, состоящая из 80% ПЭО-1500 и 20% ПЭО-400, а4 - полиэтиленоксидная основа, состоящая из 20% ПЭО-4000, 70% ПЭО-1500 и 10% ПЭО-400; В – ПАВ: b1 – эмульгатор № 1, b2 – эмульгатор Т-2, b3 – моноглицериды дистиллированные, b4 – без ПАВ. При дисперсионном анализе полученных данных выявлено, что все изучаемые факторы существенно влияют на высвобождаемость анилокаина (Fэксп> Fтабл). Выявленные с помощью множественного критерия Дункана различия средних величин показали, что лучшими суппозиторными композициями являются: Витепсол W-35 без ПАВ и полиэтиленгликолевая основа, состоящая из 20% ПЭО-4000, 70% ПЭО-1500 и 10% ПЭО-400. Поскольку Витепсол W-35 является импортируемой основой, то для дальнейших исследований выбраны композиции, имеющие отечественную сырьевую базу и широко используемые на фармацевтических производствах:
Параллельно выбор суппозиторной основы проводили кондуктометрическим методом анализа. Опыты проводили при температуре 310 К до полного растворения суппозиториев, измеряя удельную электропроводимость через определенные промежутки времени. По полученным данным строили кривые растворения суппозиториев, которые показали, что при равных условиях проведения эксперимента значение удельной электропроводимости возрастает для обеих основ, т.е. увеличивается количество высвобождаемых ионов ЛВ в воду (рис. 12).     140 160      120  80 100    композ. 1 60   композ. 2 20 40  0 3,6 6 8,4 10,8 13,2 15,6 Время, t*10-3, с. Рис. 12. Зависимость удельной электропроводимости от времени для различных основ На первоначальном этапе изучали скорость растворения суппозиториев как с анилокаином, так и без него. Процесс растворения суппозиториев протекает в две стадии: первая – это взаимодействие суппозиториев с растворителем, которая завершается образованием вокруг них насыщенного раствора; вторая - завершается растворение и отвод растворенного вещества. Как следует из рис. 12, высвобождение анилокаина происходит несколько быстрее из композиции 10% ПЭО-400+70% ПЭО-1500+20% ПЭО-4000. Следует также отметить, что суппозитории на основе 20% ПЭО-400+80% ПЭО-1500 под воздействием комнатной температуры становятся пластичными, что создает определенные неудобства при введении суппозиториев в патологические полости. Для суппозиториев на выбранных основах разработаны технологические схема производства с учетом общих закономерностей, установленных при разработке ректальных суппозиториев. Оценку качества суппозиториев проводили согласно основным положениям статьи ГФ XI изд. Внешний вид: суппозитории правильной и одинаковой торпедообразной формы, достаточной твердости, обеспечивающей удобство введения, белого цвета, со слабым характерным запахом анилокаина. Отсутствие вкраплений, определяемых визуально на срезе, свидетельствует об однородности суппозиториев. Средняя масса суппозиториев на гидрофильной основе (состав № 1) составила 2,25±0,11 г, суппозиториев на гидрофобной основе (состав № 2) составила 1,99±0,34 г, отклонения в массе находятся в пределах ±5%. Время растворения для суппозиториев на гидрофильной основе составило 23,76±0,47 мин., а время полной деформации для суппозиториев на гидрофобной основе соответствует 3,15±0,07 мин., что удовлетворяет требованиям ГФ ХI (не более 1 часа и 15 мин. соответственно). В задачи следующего этапа входило изучение возможности использования разработанных для субстанции реакций подлинности и количественного определения анилокаина в суппозиториях. При разработке методики количественного анализа анилокаина в суппозиториях проведен выбор оптимальных условий анализа: рН водной фазы и соотношение экстрагента с водной фазой. Метрологические характеристики методики количественного определения анилокаина в суппозиториях отражены в таблице 9. Таблица 9 ^
|
||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
Ваша оценка этого документа будет первой.
Ваша оценка:
Похожие:
База данных защищена авторским правом ©MedZnate 2000-2016
allo, dekanat, ansya, kenam
обратиться к администрации | правообладателям | пользователям
allo, dekanat, ansya, kenam
обратиться к администрации | правообладателям | пользователям