Грамположительные кокки

ВОПРОСЫ ДЛЯ САМОПОДГОТОВКИ

1. 
   Понятие о зооантропонозах. Таксономическая характеристика микроорганизмов, вызывающих зооантропонозы.
   
2. 
   Общая характеристика возбудителей бактериальных зооантропонозных инфекций: Yersinia pestis, Bacillus anthracis, Brucella melitensis, Brucella abortus, Brucella suis, Francisella tularensis, Leptospira interrogans.
   
3. 
   Факторы патогенности возбудителей зооантропонозных инфекций. Патогенез чумы, сибирской язвы, туляремии, бруцеллеза.
   
4. 
   Реакция иммунной системы, формирование иммунного ответа при зооантропонозах.
   
5. 
   Механизмы использования факторов защиты при работе с возбудителями ООИ.
   
6. 
   Методы микробиологической диагностики зооантропонозов: экспресс-диагностика, бактериологическая и генетическая диагностика зооантропонозных инфекции, биологическая и иммунологическая диагностика зооантропонозов.
   
7. 
   Принципы лечения. Направления специфической и неспецифической профилактики зооантропонозных инфекций.
   

1. 
   Возбудители зооантропонозных заболеваний как средства биологической войны.
   
2. 
   Понятие о сапронозах.
   
3. 
   Перечислите факторы патогенности возбудителей ООИ.
   
4. 
   Какие возбудители размножаются внутриклеточно в организме человека?
   

5. 
   Какие животные являются резервуаром возбудителей и переносчиками
   инфекции?
   
6. 
   Какие возбудители зоонозных инфекций являются гидробионтами?
   Перечислите пути передачи зоонозных инфекций.
   
7. 
   Какая категория людей подвергается наибольшему риску заражения туляремией и сибирской язвой?
   
8. 
   Охарактеризуйте факторы защиты от возбудителей ООИ.
   
9. 
   Опишите вид и правила забора материала при зоонозных инфекциях.
   
10. 
    Опишите экспресс-диагностику чумы с использованием противочумного бактериофага.
    
11. 
    Какие признаки позволяют отдифференцировать J.pestis от других иерсиний?
    
12. 
    Опишите кровяно-капельную реакцию при диагностике туляремии.
    
13. 
    Чем отличается реакция Райта (диагностика бруцеллеза) от обычной
    развернутой реакции агглютинации?
    
14. 
    Как и для чего ставится реакция кольцеприцитации по Асколи?
    
15. 
    Опишите вид колоний возбудителей сибирской язвы на плотной и жидкой питательной среде.
    
16. 
    Почему для вакцинации от зоонозных инфекций используются
    преимущественно живые вакцины?
    

1. 
   Промикроскопируйте демонстрационные препараты возбудителей чумы, туляремии, сибирской язвы, бруцеллеза.
   
2. 
   Изучите демонстрационный набор для дифференцировки пастерелл чумы от возбудителей псевдотуберкулеза.
   
3. 
   Изучите набор для дифференцировки возбудителей сибирской язвы от почвенной бациллы.
   
4. 
   Изучите характер роста возбудителей на плотных и жидких питательных средах.
   
5. 
   Поставьте реакции: преципитации Асколи. кровяно-капельную агглютинацию, реакцию агглютинации Хеддльсона.
   
6. 
   Учтите демонстрационную реакцию агглютинации Райта.
   
7. 
   Отдифференцируйте типы бруцелл по чувствительности к анилиновым красителям в питательных средах с фуксином и тионином.
   
8. 
   Изучите биопрепараты, применяемые для диагностики, терапии и профилактики зооантропонозных заболеваний.
   
9. 
   Решение ситуационных задач.
   

• 
  Записать отличительные признаки возбудителей чумы от возбудителей псевдотуберкулеза:
  
• 
  Записать отличительные признаки сибиреязвенных бацилл от антракоида:
  
• 
  Зарисовать рост возбудителей зооантропонозов на средах:
  
• 
  а)
  
• 
  б)
  
• 
  Записать результат реакции Асколи:
  
• 
  Записать результат кровяно-капельной реакции:
  
• 
  Записать результат реакции Хеддльсона:
  
• 
  Учесть реакцию Райта:
  
• 
  Зарисуйте результаты дифференциального посева бруцелл на среде с фуксином и тионином:
  
• 
  Записать правила применения аллергенов при биологической диагностике чумы, сибирской язвы, туляремии и бруцеллеза:
  
• 
  Зарисовать схемы диагностики чумы, туляремии, сибирской язвы, бруцеллеза, лептоспироза
  

1. 
   Охарактеризуйте патогенез чумы.
   
2. 
   Охарактеризуйте патогенез бруцеллеза.
   
3. 
   З. Охарактеризуйте патогенез туляремии.
   
4. 
   Охарактеризуйте патогенез сибирской язвы.
   
5. 
   Охарактеризуйте патогенез лептоспироза
   

• 
  Пунктат из бубона
  
• 
  Кровь
  
• 
  Мокрота
  
• 
  Отделяемое кожных поражений (везикул, карбункул, свищей, язв)
  

• 
  содержимое бубона
  
• 
  кровь
  
• 
  регионарный лимфатический узел
  
• 
  кусочки печени, селезенки, легкого
  

1. 
   Микроскопия. Мазки фиксируют в смеси Никифорова или в этиловом спирте (20 минут)
   

• 
  Окраска щелочной синькой Леффлера (выявляется биполярность окраски беспорядочно расположенных палочек)
  
• 
  Окраска по Граму (J.pestis относятся к грамотрицательным бактериям)
  

• 
  ИФМ
  
• 
  ИФА
  
• 
  РНГА
  
• 
  Реакция нейтрализации антителами
  

• 
  Фагодиагностика
  
• 
  Биопробы на животных с ослабленной резистентностью
  

• 
  Оптимальная температура культивирования 28-30°С,
  
• 
  Оптимальный рН - 6,9-7,2.
  
• 
  Использование для культивирования агара Хоттингера с добавлением стимуляторов роста (сульфит натрия, цельная кровь, экстракт культуры сарцин /стимулятор Карпузиди/) и ингибиторов роста других микроорганизмов (генцианвиолет в концентрации 1:50000 – 1:100000).
  
• 
  Время инкубации - 18-20 часов.
  

1. 
   Накопление суммарной культуры на жидких средах (МПБ, бульон Хоттингера). В жидких питательных средах J.pestis образуют пленку на поверхности, от которой ко дну тянутся слизистые нити, похожие на сталактиты, в последующем образуется хлопьевидный осадок.
   
2. 
   Выделение чистой культуры на пластинчатых средах (МПА, агap Хоттингера, при работе с загрязненным материалом в среды добавляют генцианвиолет в концентрации 1:50000 -1: 100000). Хорошо растут в желатине, не вызывая разжижения, а также
   

• 
  через 8-12 часов под малым увеличением микроскопа обнаруживаются микроколонии (блестящие полиморфные образования, похожие на осколки истолченного «битого стекла»)
  
• 
  Через 18-24 часа становятся светлыми с неровными краями;
  
• 
  Через 48 часов начинает формироваться выпуклый центр колоний окруженный тонкой полупрозрачной зоной с неровным зазубренным краем в виде «кружевного платочка».
  
• 
  Зрелые колонии крупные с бурым зернистым центром и неровными
  

• 
  для ретроспективной диагностики
  
• 
  для определения напряженности постпрививочного иммунитета
  

• 
  содержание карбункула и пузырьков при кожной форме
  
• 
  мокрота и испражнения при легочной или кишечной форме
  
• 
  кровь и моча при септических явлениях (от трупов людей рекомендуется брать на исследование кровь из поверхностных кровеносных сосудов, от трупов животных рекомендуется брать ухо, помещая его в банку)
  
• 
  образцы кож, шерсти, щетины
  
• 
  пробы из объектов внешней среды (пробы воздуха, вода, почва, смывы с поверхностей).
  
• 
  пищевые продукты
  

• 
  Окраска по Граму (грамположительные стрептобактерии)
  
• 
  Окраска по Романовскому-Гимзе (бактерии окрашиваются в темно-синий цвет, капсулы - в розовый)
  
• 
  Окраска раствором Ребигера (бациллы окрашиваются в фиолетовый цвет, капсулы - в красно-фиолетовый). Bacillus anthracis образует капсулы in vivo, in vitro капсулы образуются только на специальных средах.
  
• 
  Окраска по Ожешко (споры окрашиваются в рубиново-красный цвет, вегетативные формы – в голубой)
  

• 
  Оптимальная температура - 37°С.
  
• 
  Оптимальный рН 7,0.
  
• 
  Время инкубации - 18-20 часов
  

• 
  На МПА растут в виде R-колоний крупных (2-3 мм в диаметре) шероховатых с матовой поверхностью и неровными локонообразными краями. Их сравнивают с головой медузы, гривой льва, клубком спутанных нитей. R-колонии представлены чаще вирулентными микробами
  
• 
  S- колонии округлые в проходящем свете имеют вид «стеклянного среза», авирулентны
  
• 
  На кровяном агаре колонии серые, без признаков гемолиза в отличие от сапрофитных бактерий, которые, обычно проявляют гемолитическую активность
  
• 
  На жидкой питательной среде растут в виде комочка ваты на дне (непатогенные микробы дают диффузное помутнение)
  
• 
  В столбике желатина (10-15%) рост в виде «перевернутой елочки»
  

• 
  Непрямой вариант ИФМ
  
• 
  ^ Кровяно-капельная реакция агглютинации: в каплю крови больного из пальца добавляем каплю дистиллированной воды (для гемолиза эритроцитов, что исключает псевдоагглютинацию) и каплю туляремийного диагностикума. Если титр антител у больного соответствует 1/100,то РА должна произойти за 2 минуты, если она происходит более чем через 2 минуты, то реакция считается сомнительной.
  

• 
  Микробы инкубируют в атмосфере 10%-го СО₂
  
• 
  Оптимальный рН 6,8-7,4
  
• 
  Оптимальная температура 37-37°С
  
• 
  Растут только на специальных средах с добавками цистеина как стимулятора роста, нативного белка (кровь), экстрактов тканей печени. В среды добавляют антибиотики, подавляющие рост других бактерий. Для выделения чистой культуры используют плотные среды: мозговой, печеночный и селезеночный агары, кровяно-цистеиновую среду.
  

• 
  Люминесцентная микроскопия (ИФМ –иммунофлюоресцентный метод)
  
• 
  Световая микроскопия
  

1. 
   Ферментацию D-глюкозы, L-аланина, D-рибозы, D-ксилозы
   
2. 
   Чувствительность к фагу Т 6
   
3. 
   Образование H₂S
   
4. 
   Рост на средах, содержащих анилиновые красители (фуксин, тионин, пиронин)
   

• 
  осадка мочи (исследование на подвижность методом раздавленной капли) в темном поле микроскопа
  
• 
  толстых мазков (крови, мочи), окрашенных по методу Гимзы
  
• 
  негативное контрастирование с конго красным
  
• 
  исследования мазков ИФМ
  

• 
  Температурный оптимум 28-30°С
  
• 
  Оптимальная концентрация хлорида натрия - 0,5%
  
• 
  Оптимальный рН 7,2-7,6
  

• 
  ИФА
  
• 
  РСК
  
• 
  Реакция микроагглютинации и лизиса (РМАЛ) живой эталонной культуры
  лептоспир различных серогрупп. При использовании живых лептоспир
  вслед за их агглютинацией может произойти лизис.
  

• 
  Реакция иммунослипчивой гемагглютинации
  

• 
  морфологические и культуральные свойства возбудителей ИППП;
  
• 
  антигенные особенности данных возбудителей;
  
• 
  патогенез заболеваний группы ИППП с основными элементами эпидемиологии возбудителей;
  
• 
  методы лабораторной диагностики;
  
• 
  основные средства лечения и профилактики.
  

• 
  выбрать метод исследования в конкретной ситуации;
  
• 
  провести микроскопию патологического материала;
  
• 
  оценить результаты исследования парных сывороток.