Протоколы лабораторной диагностики инфекции вызванной chlamydia trachomatis, (урогенитальной хламидийной инфекции) в российской федерации icon

Протоколы лабораторной диагностики инфекции вызванной chlamydia trachomatis, (урогенитальной хламидийной инфекции) в российской федерации





Скачать 0.65 Mb.
Название Протоколы лабораторной диагностики инфекции вызванной chlamydia trachomatis, (урогенитальной хламидийной инфекции) в российской федерации
страница 1/4
Дата 06.03.2013
Размер 0.65 Mb.
Тип Реферат
  1   2   3   4
ПРОТОКОЛЫ ЛАБОРАТОРНОЙ ДИАГНОСТИКИ

ИНФЕКЦИИ ВЫЗВАННОЙ CHLAMYDIA TRACHOMATIS, (УРОГЕНИТАЛЬНОЙ ХЛАМИДИЙНОЙ ИНФЕКЦИИ)

В РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ

(проект)


СОДЕРЖАНИЕ




ВВЕДЕНИЕ…………………………………………………………………………………….3

  1. Этиопатогенез и классификация урогенитальной хламидийной инфекции…………...4

  2. Клиническая картина урогенитальной хламидийной инфекции……………………….6

  3. Лабораторная диагностика урогенитальной хламидийной инфекции…………………8

    1. Общие положения……………………………………………………………………..8

    2. Взятие образцов, хранение и транспортировка материала

для исследования………………………………………………………………………9

    1. Методы лабораторной диагностики ……………………………………….15

      1. Культуральная диагностика УГХИ……………………………………………15

      2. Иммунологические методы диагностики урогенитальной хламидийной инфекции…………………………………………………………………………..17

        1. Методы выявления антигенов………………………………………….17

        2. Методы выявления антител…………………………………………….19

        3. Быстрые иммухроматографические методы у постели

больного…………………………………………………………………20

      1. Молекулярные методы диагностики урогенитальной хламидийной инфекции………………………………………………………………………….21

        1. Методы, не связанные с амплификацией……………………………..21

        2. Методы, основанные на амплификации………………………………21

        3. Источники ошибок при молекулярной диагностике

урогенитальной хламидийной инфекции………………………………….25

      1. Валидация диагностических тестов…………………………………………...27

ЗАКЛЮЧЕНИЕ…………………………………………………………………………………29

ВЫВОДЫ……………………………………………………………………………………….34

ЛИТЕРАТУРА………………………………………………………………………………….35РЕЗЮМЕ………………………………………………………………………………………………….35




ВЕДЕНИЕ


Целью создания данного Протокола является стандартизация в Российской Федерации.лабораторной диагностики урогенитальной хламидийной инфекции, вызванной Chlamydia trachomatis

Настоящий протокол создан на основе согласительного (консенсус) документа, разработанного Восточно-Европейской Ассоциацией по охране сексуального и репродуктивного здоровья (1). Это один из серии протоколов, создание которых направлено на стандартизацию лабораторной диагностики инфекций репродуктивной системы (2, 3) в странах Восточной Европы. Настоящий документ содержит информацию для врачей и сотрудников лабораторий, осуществляющих лабораторную диагностику урогенитальной хламидийной инфекции.

Урогенитальная хламидийная инфекция передается половым путем при непосредственном контакте слизистых оболочек половых партнеров и поражает в основном сексуально активных подростков и людей молодого возраста (4). При прохождении через родовые пути матери, больной урогенитальной хламидийной инфекцией, могут заражаться новорожденные.

К факторам риска, увеличивающим возможность заражения урогенитальной хламидийной инфекцией, относятся: высокая сексуальная активность, в том числе с наличием большого числа и частой сменой половых партнеров (промискуитет); возраст моложе 25 лет; занятие коммерческим сексом, наличие в анамнезе перенесенных ИППП, незащищенные половые контакты с новым половым партнером; половой контакт с больным урогенитальной хламидийной инфекцией и/или с уретритом/цервицитом; сексуальное насилие.

Распространенность урогенитальной хламидийной инфекции среди населения разных стран мира является высокой. По оценке ВОЗ, по частоте заболеваемости среди ИППП урогенитальный хламидиоз занимает второе место после трихомонадной инфекции. В мире ежегодно наблюдается более 90 млн. новых случаев инфицирования C. trachomatis, а экономический ущерб составляет десятки миллионов долларов. В странах Восточной Европы определение уровня заболеваемости этой инфекцией связано с определенными трудностями из-за имеющихся дефектов диагностики (Домейка, Галлен. 2002; Наабер; Вагорас; Домейка, 2008). Основными направлениями деятельности по предупреждению распространения халамидийной инфекции является создание скрининговых программ, в особенности среди лиц моложе 25 лет. В ряде стран Европы (Швеция, Нидерланды, и др.) приняты национальные программы по скринингу хламидийной инфекции. По полученным данным, распространенность заболевания в популяционной группе 18 -25 лет по сравнению с другими возрастными группами составляет до 60% (Kohl KS,, 2003 г.). В США значительный подъем заболеваемости урогенитальным хламидиозом отмечался с 1987 по 2001 гг. (более чем в 5 раз), что побудило начать внедрять скрининговые Программы для обнаружения C.trachomatis.

На территории России урогенитальная хламидийная инфекция подлежит обязательной регистрации, начиная с 1994 года. В течение последних лет в Российской Федерации заболеваемость урогенитальной хламидийной инфекцией вышла на первое место среди всех бактериальных инфекций, передаваемых половым путем, и составила в 2007 году 91,1 на 100 000 населения. На сегодняшний день в России урогенитальный хламидиоз – вторая по распространенности регистрируемая ИППП после трихомоноза.

Расходы национальных систем здравоохранения на лечение последствий, вызываемых урогенитальной хламидийной инфекцией, являются весьма существенными. Исследования экономической эффективности мероприятий по обследованию и лечению больных урогенитальной хламидийной инфекцией в развитых странах показали, что наилучшей стратегией в данном случае является ранняя диагностика и лечение неосложненной инфекции (5). Бессимптомное течение урогенитальной хламидийной инфекции, наиболее часто наблюдаемое у женщин, вызывает необходимость применения качественной лабораторной диагностики, т.к. в данном случае диагноз нельзя установить только на основании жалоб и результатов клинического обследования пациенток. Кроме этого, в связи с тем, что больные с бессимптомным течением урогенитальной хламидийной инфекции не обращаются за медицинской помощью, в настоящее время представляется необходимым обследование пациентов, относящихся к группам высокого риска (6).

^ 1.ЭТИОПАТОГЕНЕЗ И КЛАССИФИКАЦИЯ УРОГЕНИТАЛЬНОЙ ХЛАМИДИЙНОЙ ИНФЕКЦИИ

Возбудителем урогенитальной хламидийной инфекции является Chlamydia trachomatis - грамотрицательная внутриклеточная бактерия, относящаяся к порядку Chlamydiales. Современная номенклатура хламидий была предложена в 1999 г [реф]. К порядку Chlamydiales были отнесены облигатные внутриклеточные бактерии с уникальным двухфазным циклом развития и сходством 16S и 23S рРНК более чем 80%. Порядок был разделен на четыре семейства: Simkaniaceae, Waddliaceae, Chlamydiaceae и Parachlamydiaceae. Реальное значение в патологии человека в настоящее время признается только за представителями семейства Chlamydiaceae.

Было предложено также разделить семейство Chlamydiaceae на два рода: Chlamydia и Chlamydophila. К роду Chlamydophila были отнесены C. pneumoniae, C. psittaci и C. pecorum, а к роду Chlamydia - С. trachomatis, C. abortus и C. felis. У всех представителей Chlamydiaceae нуклеотидные последовательности генов 16S и 23S рРНК различаются менее чем на 10%.

ДНК C. trachomatis представлена кольцевой хромосомой и криптической плазмидой (7 – 10 копий). На основании вариабельности антигенных участков основного протеина внешней мембраны (major over membrane protein MOMP) в составе вида C. trachomatis выделяют 18 сероваров. В настоящее время установлено, что серовары C. trachomatis от A до С вызывают классическое заболевание глаз – трахому, тогда как серовары от D до K вызывают урогенитальную инфекцию и поражение глаз, а серовары L1, L2 и L3 – более инвазивные формы инфекции, передающейся половым путем, - венерическую лимфогранулему с характерным поражением лимфатических узлов. Эталоном серотипирования является использование моноклональных антител, однако из-за значительной трудоемкости этот метод вытесняется молекулярными, основанными на секвенировании гена omp1, кодирующего указанный белок.

Инфицирование человека хламидиями начинается с эндоцитоза инфекционных, метаболически неактивных элементарных телец (ЭТ) диаметром 0,2 - 0,3 мкм, окруженных ригидной малопроницаемой клеточной стенкой, резистентных к факторам внешней среды. ЭТ прикрепляются к чувствительным клеткам - мишеням (эпителию урогенитального тракта) и поглощаются ими с формированием внутриклеточной вакуоли. Они реорганизуются в метаболически активные неинфекционные внутриклеточные формы - ретикулярные тельца (РТ), пластичные сферические клетки с диффузной укладкой ДНК нуклеоида и обводненным протопластом, содержащим рибосомы. Диаметр РТ 0.6-1.5 мкм. РТ используют субстраты клетки - хозяина для синтеза РНК, белка, протеинов, но не способны синтезировать энергетические субстраты - АТФ, ГТФ, являясь "энергетическими паразитами". Внутри образующейся эндосомы РТ размножаются путем бинарного деления, что, в конечном счете, приводит к увеличению количества инфекционных элементарных телец и гибели клетки хозяина (рисунок 1). Цикл развития C. trachomatis считается завершенным после выхода из клетки инфекционных ЭТ, что позволяет им вступать в новый жизненный цикл, распространяя инфекцию в еще не инфицированных клетках. Полный цикл развития хламидий при изучении in vitro на культуре чувствительных клеток длится 48-72 час, в зависимости от штамма хламидий, природы клеток-хозяев и условий среды. Цитоплазматические включения, содержащие хламидий, выявляются при световой, люминесцентной и фазово-контрастной микроскопии.




^ Рисунок 1. Цикл развития C. trachomatis в организме человека



    Классификация урогенитальной хламидийной инфекции в соответствии с международной классификацией болезней (МКБ) 10, переработанной и исправленной в издании 2007 года (7)представлена в таблице 1.



^ Таблица 1.

Классификация урогенитальной хламидийной инфекции, вызываемой Chlamydia trachomatis



A55

Хламидийная лимфогранулема (венерическая)

A56

Другие хламидийные болезни, передающиеся половым путем

A56.0

Хламидийные инфекции нижних отделов мочеполового тракта

A56.1

Хламидийные инфекции органов малого таза и других мочеполовых органов

A56.2

Хламидийная инфекция мочеполового тракта неуточненная

A56.3

Хламидийная инфекция аноректальной области

A56.4

Хламидийный фарингит

A56.8

Хламидийные инфекции, передающиеся половым путем, другой локализации


С клинической точки зрения, урогенитальная хламидийная инфекция подразделяется на неосложненную (в случае развития уретрита у мужчин и уретрита и/или цервицита у женщин), и осложненную (когда диагностируют воспалительные заболевания органов малого таза у женщин и эпидидимоорхит у мужчин).

Задачей настоящего Протокола является изложение вопросов, касающихся лабораторной диагностики урогенитальной хламидийной инфекции, вызываемой C. trachomatis сероваров от D до K и относящейся к разделу А56 классификации МКБ10, поэтому вопросы, касающиеся лабораторной диагностики хламидийной (венерической) лимфогранулемы, здесь не рассматриваются.


^ 2. КЛИНИЧЕСКАЯ КАРТИНА УРОГЕНИТАЛЬНОЙ ХЛАМИДИЙНОЙ ИНФЕКЦИИ

У мужчин заболевание, как правило, проявляется острым уретритом, у женщин - уретритом и/или цервицитом. При урогенитальной хламидийной инфекции могут наблюдаться также клинические проявления в виде проктита и фарингита, что наиболее часто отмечается у мужчин, имеющих секс с мужчинами. Нередко отмечается бессимптомное течение заболевания (у мужчин – в 40-50% случаев, у женщин – в 70-80%), что может приводить к позднему обращению пациентов к врачу и развитию серьезных осложнений со стороны репродуктивной системы: у женщин – к воспалительным заболеваниям органов малого таза, эктопической беременности, трубному бесплодию, у мужчин – к эпидидимитам. Роль C.trachomatis в развитии хронического простатита не доказана. Вне зависимости от пола пациента урогенитальная хламидийная инфекция может приводить к развитию реактивных артритов, в случаях оро-генитального контакта - к развитию фарингита, а при проникающем анальном контакте - проктита. Случайное попадание выделений из полового тракта в глаза может приводить к возникновению конъюнктивита у взрослых. Урогенитальная хламидийная инфекция, развивающаяся во время беременности и не пролеченная, может приводить к развитию конъюнктивита или пневмонии у новорожденного. В части случаев наблюдают спонтанную элиминацию хламидий, что необходимо учитывать при интерпретации результатов диагностических исследований. Жалобы пациентов, а также клинические проявления неосложненной урогенитальной хламидийной инфекции и осложнений урогенитальной хламидийной инфекции представлены в таблице 2.

Таблица 2.

^ Жалобы пациентов, клинические проявления неосложненной урогенитальной хламидийной инфекции и осложнения урогенитальной хламидийной инфекции



Пациенты

Жалобы

^ Клинические проявления неосложненной урогенитальной хламидийной инфекции

Осложнения

Женщины

  • - цервикальные и /или вагинальные слизисто-гнойные выделения;

  • - дизурия;

  • боли внизу живота;

  • - нерегулярные вагинальные и/или цервикальные кровянистые выделения;

  • - диспареуния.



  • - цервицит;

  • - уретрит;

  • - проктит;

  • - фарингит;

  • - бессимптомная инфекция



- воспалительные заболевания органов малого таза;

- перигепатит;

- бесплодие;

- эктопическая беременность;

- конъюнктивит;

- реактивный артрит.

Мужчины


  • - слизисто-гнойные выделения из уретры;

  • - дизурия;

  • - боль при мочеиспускании;

  • - боли в мошонке.





  • уретрит;

  • проктит;

  • - проктоколит;

  • - фарингит;

  • - паховые бубоны при венерической лимфогранулеме;

  • -бессмптомная инфекция.




эпидидимо-орхит;

конъюнктивит;

реактивный артрит.


Ново

рожден

ные

и

младенцы

  • -поражение глаз (наличие обильно-гнойного отделяемого в углах пораженного глаза; слезотечение; отечность век; светобоязнь)

  • - кашель, затруднение носового дыхания; одышка.

  • - конъюнктивит;

  • - пневмония с атипичным течением в первые шесть месяцев жизни.

  • - вульвовагинит;

  • - фарингит.





Дети:

Мальчики-


Девочки





  • - слизисто-гнойные выделения из уретры;

  • - дизурия;

  • - боль при мочеиспускании;

  • - боли в мошонке.

  • - боли и выделения из прямой кишки.



  • - вагинальные слизисто-гнойные выделения;

  • - дизурия;

  • боли внизу живота;

  • - боли и выделения из прямой кишки.



- уретрит;

- вульвовагинит;

- проктит;

конъюнктивит;

- фарингит.







^ 3. ЛАБОРАТОРНАЯ ДИАГНОСТИКА УРОГЕНИТАЛЬНОЙ ХЛАМИДИЙНОЙ ИНФЕКЦИИ

3.1. ОБЩИЕ ПОЛОЖЕНИЯ

Лабораторная диагностика урогенитальной хламидийной инфекции является ключевым моментом при установлении диагноза урогенитальной хламидийной инфекции, что обусловлено отсутствием при этом заболевании патогномоничной симптоматики и частым сочетанием инфекции с другими ИППП.

Большое значение для осуществления качественной лабораторной диагностики имеет правильность проведения всех этапов лабораторного обследования: преаналитического, аналитического и постаналитического. Это касается методов получения, транспортировки и хранения биологического материала, подлежащего исследованию, выбора адекватного метода диагностики, а также интерпретации полученных результатов.

^ Для лабораторной диагностики урогенитальной хламидийной инфекции в России до настоящего времени используют следующие методы, направленные на выявление возбудителя - C. trachomatis:

  • бактериоскопический метод с окраской мазка по Гименезу или Романовскому–Гимзе;

  • иммунологические методы: выявление антигенов C. trachomatis (прямая иммунофлюоресценция - ПИФ; реже - иммуноферментный анализ - ИФА);

  • культуральный метод (выделение хламидий на клеточных линиях L-929, Mc Coy, Hela и др.).

  • молекулярно-биологические методы, направленные на выявление нуклеиновых кислот ^ C. trachomatis.

Широко применяются также серологические методы выявления антител к C. trachomatis.

Однако многие из перечисленных методов, направленных на выявление возбудителя, являются устаревшими и по своим параметрам в настоящее время не могут быть рекомендованы для установления диагноза урогенитальной хламидийной инфекции ввиду низкой чувствительности и высокой вероятности получения ложноотрицательного и ложноположительного результата.

Выявление антител к хламидиям может свидетельствовать о ранее перенесенном заболевании и не всегда адекватно отражает активность и динамику воспалительного процесса.


Основные клинические показания для обследования на урогенитальную хламидийную инфекцию представлены в таблице 3.

^ Таблица 3.

Основные клинические показания для обследования на хламидийную инфекцию


Пациенты

Показания

Мужчины

  • - слизистые или слизисто-гнойные выделения из уретры;

  • - симптомы дизурии;

  • - симптомы проктита и/или проктоколита;

  • - симптомы эпидидимита.




Женщины


  • - цервикальные и/или вагинальные выделения;

  • - ВЗОМТ.



Новорожденные

  • - атипичная пневмония;

  • - конъюнктивит.



Другие показания

  • - половой контакт с больным хламидийной инфекцией;

  • - экстрагенитальные образцы (фарингеальные, ректальные) должны быть исследованы, если в анамнезе имеется указание на соответствующий тип сексуального контакта;

  • - обследование на другие ИППП.



Показания для обследования на урогенитальную хламидийную инфекцию при отсутствии клинических проявлений:


  • прерывание беременности;

  • внутриматочные манипуляции;

  • обследование доноров спермы.


В направлении пациента с подозрением на урогенитальную хламидийную инфекцию на лабораторное исследование обязательно указываются:

  • идентификационные данные пациента (национальные особенности)*;

  • пол и возраст пациента;

  • анатомическая область взятия материала;

  • дата взятия материала;

  • клинические проявления;

  • предварительный диагноз;

  • выбранный метод лабораторной диагностики.


* Примечание: в условиях Российской Федерации включения данных о национальности пациента нецелесообразно

Безопасность персонала. Безопасность лабораторных работников при осуществлении лабораторной диагностики урогенитальной хламидийной инфекции обеспечивается соблюдением правил работы с потенциально инфекционным клиническим материалом (использование перчаток, ламинарного бокса, дезинфицирующих средств, УФ облучения и т.д.). Сбор и обработку клинического материала для выявления или выделения Chlamydia trachomatis проводят, соблюдая режим работы для бактериологических лабораторий.

Необходимо исключать возможность загрязнения исследуемым материалом рук лабораторных работников, его попадания в глаза, нос, рот.


  1   2   3   4

Ваша оценка этого документа будет первой.
Ваша оценка:

Похожие:

Протоколы лабораторной диагностики инфекции вызванной chlamydia trachomatis, (урогенитальной хламидийной инфекции) в российской федерации icon Протоколы лабораторной диагностики инфекции, вызванной Chlamidia trachomatis (урогенитальной хламидийной

Протоколы лабораторной диагностики инфекции вызванной chlamydia trachomatis, (урогенитальной хламидийной инфекции) в российской федерации icon Современные методы амплификации нуклеиновых кислот пцр и реакция транскрипционной амплификации насба

Протоколы лабораторной диагностики инфекции вызванной chlamydia trachomatis, (урогенитальной хламидийной инфекции) в российской федерации icon Клинико-иммунологическая характеристика и совершенствование терапии урогенитальной микоплазменной

Протоколы лабораторной диагностики инфекции вызванной chlamydia trachomatis, (урогенитальной хламидийной инфекции) в российской федерации icon Оптимизация диагностики и лечения урогенитальной папилломавирусной инфекции у несовершеннолетних

Протоколы лабораторной диагностики инфекции вызванной chlamydia trachomatis, (урогенитальной хламидийной инфекции) в российской федерации icon Совершенствование лабораторной диагностики гонококковой инфекции 14. 00. 36 аллергология и иммунология

Протоколы лабораторной диагностики инфекции вызванной chlamydia trachomatis, (урогенитальной хламидийной инфекции) в российской федерации icon Этиопатогенетическая роль урогенитальной инфекции в развитии бесплодия 14. 00. 16 патологическая

Протоколы лабораторной диагностики инфекции вызванной chlamydia trachomatis, (урогенитальной хламидийной инфекции) в российской федерации icon Клинико иммунологические особенности аллергодерматозов на фоне урогенитальной инфекции 14. 00. 36

Протоколы лабораторной диагностики инфекции вызванной chlamydia trachomatis, (урогенитальной хламидийной инфекции) в российской федерации icon [I-072] влияние хламидийной и микоплазменной инфекции на развитие неблагоприятных исходов беременности

Протоколы лабораторной диагностики инфекции вызванной chlamydia trachomatis, (урогенитальной хламидийной инфекции) в российской федерации icon Применение Системных Продуктов Здоровья компании витамакс в комплексном лечении хламидийной инфекции

Протоколы лабораторной диагностики инфекции вызванной chlamydia trachomatis, (урогенитальной хламидийной инфекции) в российской федерации icon Российской Федерации «Профилактика вич-инфекции в России: проблемы и перспективы»

Разместите кнопку на своём сайте:
Медицина


База данных защищена авторским правом ©MedZnate 2000-2016
allo, dekanat, ansya, kenam
обратиться к администрации | правообладателям | пользователям
Документы