|
Скачать 0.65 Mb.
|
ПРОТОКОЛЫ ЛАБОРАТОРНОЙ ДИАГНОСТИКИ ИНФЕКЦИИ ВЫЗВАННОЙ CHLAMYDIA TRACHOMATIS, (УРОГЕНИТАЛЬНОЙ ХЛАМИДИЙНОЙ ИНФЕКЦИИ) В РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ (проект) СОДЕРЖАНИЕВВЕДЕНИЕ…………………………………………………………………………………….3
для исследования………………………………………………………………………9
больного…………………………………………………………………20
урогенитальной хламидийной инфекции………………………………….25
ЗАКЛЮЧЕНИЕ…………………………………………………………………………………29 ВЫВОДЫ……………………………………………………………………………………….34 ЛИТЕРАТУРА………………………………………………………………………………….35РЕЗЮМЕ………………………………………………………………………………………………….35 ВЕДЕНИЕЦелью создания данного Протокола является стандартизация в Российской Федерации.лабораторной диагностики урогенитальной хламидийной инфекции, вызванной Chlamydia trachomatis Настоящий протокол создан на основе согласительного (консенсус) документа, разработанного Восточно-Европейской Ассоциацией по охране сексуального и репродуктивного здоровья (1). Это один из серии протоколов, создание которых направлено на стандартизацию лабораторной диагностики инфекций репродуктивной системы (2, 3) в странах Восточной Европы. Настоящий документ содержит информацию для врачей и сотрудников лабораторий, осуществляющих лабораторную диагностику урогенитальной хламидийной инфекции. Урогенитальная хламидийная инфекция передается половым путем при непосредственном контакте слизистых оболочек половых партнеров и поражает в основном сексуально активных подростков и людей молодого возраста (4). При прохождении через родовые пути матери, больной урогенитальной хламидийной инфекцией, могут заражаться новорожденные. К факторам риска, увеличивающим возможность заражения урогенитальной хламидийной инфекцией, относятся: высокая сексуальная активность, в том числе с наличием большого числа и частой сменой половых партнеров (промискуитет); возраст моложе 25 лет; занятие коммерческим сексом, наличие в анамнезе перенесенных ИППП, незащищенные половые контакты с новым половым партнером; половой контакт с больным урогенитальной хламидийной инфекцией и/или с уретритом/цервицитом; сексуальное насилие. Распространенность урогенитальной хламидийной инфекции среди населения разных стран мира является высокой. По оценке ВОЗ, по частоте заболеваемости среди ИППП урогенитальный хламидиоз занимает второе место после трихомонадной инфекции. В мире ежегодно наблюдается более 90 млн. новых случаев инфицирования C. trachomatis, а экономический ущерб составляет десятки миллионов долларов. В странах Восточной Европы определение уровня заболеваемости этой инфекцией связано с определенными трудностями из-за имеющихся дефектов диагностики (Домейка, Галлен. 2002; Наабер; Вагорас; Домейка, 2008). Основными направлениями деятельности по предупреждению распространения халамидийной инфекции является создание скрининговых программ, в особенности среди лиц моложе 25 лет. В ряде стран Европы (Швеция, Нидерланды, и др.) приняты национальные программы по скринингу хламидийной инфекции. По полученным данным, распространенность заболевания в популяционной группе 18 -25 лет по сравнению с другими возрастными группами составляет до 60% (Kohl KS,, 2003 г.). В США значительный подъем заболеваемости урогенитальным хламидиозом отмечался с 1987 по 2001 гг. (более чем в 5 раз), что побудило начать внедрять скрининговые Программы для обнаружения C.trachomatis. На территории России урогенитальная хламидийная инфекция подлежит обязательной регистрации, начиная с 1994 года. В течение последних лет в Российской Федерации заболеваемость урогенитальной хламидийной инфекцией вышла на первое место среди всех бактериальных инфекций, передаваемых половым путем, и составила в 2007 году 91,1 на 100 000 населения. На сегодняшний день в России урогенитальный хламидиоз – вторая по распространенности регистрируемая ИППП после трихомоноза. Расходы национальных систем здравоохранения на лечение последствий, вызываемых урогенитальной хламидийной инфекцией, являются весьма существенными. Исследования экономической эффективности мероприятий по обследованию и лечению больных урогенитальной хламидийной инфекцией в развитых странах показали, что наилучшей стратегией в данном случае является ранняя диагностика и лечение неосложненной инфекции (5). Бессимптомное течение урогенитальной хламидийной инфекции, наиболее часто наблюдаемое у женщин, вызывает необходимость применения качественной лабораторной диагностики, т.к. в данном случае диагноз нельзя установить только на основании жалоб и результатов клинического обследования пациенток. Кроме этого, в связи с тем, что больные с бессимптомным течением урогенитальной хламидийной инфекции не обращаются за медицинской помощью, в настоящее время представляется необходимым обследование пациентов, относящихся к группам высокого риска (6). ^ Возбудителем урогенитальной хламидийной инфекции является Chlamydia trachomatis - грамотрицательная внутриклеточная бактерия, относящаяся к порядку Chlamydiales. Современная номенклатура хламидий была предложена в 1999 г [реф]. К порядку Chlamydiales были отнесены облигатные внутриклеточные бактерии с уникальным двухфазным циклом развития и сходством 16S и 23S рРНК более чем 80%. Порядок был разделен на четыре семейства: Simkaniaceae, Waddliaceae, Chlamydiaceae и Parachlamydiaceae. Реальное значение в патологии человека в настоящее время признается только за представителями семейства Chlamydiaceae. Было предложено также разделить семейство Chlamydiaceae на два рода: Chlamydia и Chlamydophila. К роду Chlamydophila были отнесены C. pneumoniae, C. psittaci и C. pecorum, а к роду Chlamydia - С. trachomatis, C. abortus и C. felis. У всех представителей Chlamydiaceae нуклеотидные последовательности генов 16S и 23S рРНК различаются менее чем на 10%. ДНК C. trachomatis представлена кольцевой хромосомой и криптической плазмидой (7 – 10 копий). На основании вариабельности антигенных участков основного протеина внешней мембраны (major over membrane protein – MOMP) в составе вида C. trachomatis выделяют 18 сероваров. В настоящее время установлено, что серовары C. trachomatis от A до С вызывают классическое заболевание глаз – трахому, тогда как серовары от D до K вызывают урогенитальную инфекцию и поражение глаз, а серовары L1, L2 и L3 – более инвазивные формы инфекции, передающейся половым путем, - венерическую лимфогранулему с характерным поражением лимфатических узлов. Эталоном серотипирования является использование моноклональных антител, однако из-за значительной трудоемкости этот метод вытесняется молекулярными, основанными на секвенировании гена omp1, кодирующего указанный белок. Инфицирование человека хламидиями начинается с эндоцитоза инфекционных, метаболически неактивных элементарных телец (ЭТ) диаметром 0,2 - 0,3 мкм, окруженных ригидной малопроницаемой клеточной стенкой, резистентных к факторам внешней среды. ЭТ прикрепляются к чувствительным клеткам - мишеням (эпителию урогенитального тракта) и поглощаются ими с формированием внутриклеточной вакуоли. Они реорганизуются в метаболически активные неинфекционные внутриклеточные формы - ретикулярные тельца (РТ), пластичные сферические клетки с диффузной укладкой ДНК нуклеоида и обводненным протопластом, содержащим рибосомы. Диаметр РТ 0.6-1.5 мкм. РТ используют субстраты клетки - хозяина для синтеза РНК, белка, протеинов, но не способны синтезировать энергетические субстраты - АТФ, ГТФ, являясь "энергетическими паразитами". Внутри образующейся эндосомы РТ размножаются путем бинарного деления, что, в конечном счете, приводит к увеличению количества инфекционных элементарных телец и гибели клетки хозяина (рисунок 1). Цикл развития C. trachomatis считается завершенным после выхода из клетки инфекционных ЭТ, что позволяет им вступать в новый жизненный цикл, распространяя инфекцию в еще не инфицированных клетках. Полный цикл развития хламидий при изучении in vitro на культуре чувствительных клеток длится 48-72 час, в зависимости от штамма хламидий, природы клеток-хозяев и условий среды. Цитоплазматические включения, содержащие хламидий, выявляются при световой, люминесцентной и фазово-контрастной микроскопии. ![]() ^ Классификация урогенитальной хламидийной инфекции в соответствии с международной классификацией болезней (МКБ) 10, переработанной и исправленной в издании 2007 года (7)представлена в таблице 1. ^
С клинической точки зрения, урогенитальная хламидийная инфекция подразделяется на неосложненную (в случае развития уретрита у мужчин и уретрита и/или цервицита у женщин), и осложненную (когда диагностируют воспалительные заболевания органов малого таза у женщин и эпидидимоорхит у мужчин). Задачей настоящего Протокола является изложение вопросов, касающихся лабораторной диагностики урогенитальной хламидийной инфекции, вызываемой C. trachomatis сероваров от D до K и относящейся к разделу А56 классификации МКБ10, поэтому вопросы, касающиеся лабораторной диагностики хламидийной (венерической) лимфогранулемы, здесь не рассматриваются. ^ У мужчин заболевание, как правило, проявляется острым уретритом, у женщин - уретритом и/или цервицитом. При урогенитальной хламидийной инфекции могут наблюдаться также клинические проявления в виде проктита и фарингита, что наиболее часто отмечается у мужчин, имеющих секс с мужчинами. Нередко отмечается бессимптомное течение заболевания (у мужчин – в 40-50% случаев, у женщин – в 70-80%), что может приводить к позднему обращению пациентов к врачу и развитию серьезных осложнений со стороны репродуктивной системы: у женщин – к воспалительным заболеваниям органов малого таза, эктопической беременности, трубному бесплодию, у мужчин – к эпидидимитам. Роль C.trachomatis в развитии хронического простатита не доказана. Вне зависимости от пола пациента урогенитальная хламидийная инфекция может приводить к развитию реактивных артритов, в случаях оро-генитального контакта - к развитию фарингита, а при проникающем анальном контакте - проктита. Случайное попадание выделений из полового тракта в глаза может приводить к возникновению конъюнктивита у взрослых. Урогенитальная хламидийная инфекция, развивающаяся во время беременности и не пролеченная, может приводить к развитию конъюнктивита или пневмонии у новорожденного. В части случаев наблюдают спонтанную элиминацию хламидий, что необходимо учитывать при интерпретации результатов диагностических исследований. Жалобы пациентов, а также клинические проявления неосложненной урогенитальной хламидийной инфекции и осложнений урогенитальной хламидийной инфекции представлены в таблице 2. Таблица 2. ^
^ 3.1. ОБЩИЕ ПОЛОЖЕНИЯ Лабораторная диагностика урогенитальной хламидийной инфекции является ключевым моментом при установлении диагноза урогенитальной хламидийной инфекции, что обусловлено отсутствием при этом заболевании патогномоничной симптоматики и частым сочетанием инфекции с другими ИППП. Большое значение для осуществления качественной лабораторной диагностики имеет правильность проведения всех этапов лабораторного обследования: преаналитического, аналитического и постаналитического. Это касается методов получения, транспортировки и хранения биологического материала, подлежащего исследованию, выбора адекватного метода диагностики, а также интерпретации полученных результатов. ^ урогенитальной хламидийной инфекции в России до настоящего времени используют следующие методы, направленные на выявление возбудителя - C. trachomatis:
Широко применяются также серологические методы выявления антител к C. trachomatis. Однако многие из перечисленных методов, направленных на выявление возбудителя, являются устаревшими и по своим параметрам в настоящее время не могут быть рекомендованы для установления диагноза урогенитальной хламидийной инфекции ввиду низкой чувствительности и высокой вероятности получения ложноотрицательного и ложноположительного результата. Выявление антител к хламидиям может свидетельствовать о ранее перенесенном заболевании и не всегда адекватно отражает активность и динамику воспалительного процесса. Основные клинические показания для обследования на урогенитальную хламидийную инфекцию представлены в таблице 3. ^
Показания для обследования на урогенитальную хламидийную инфекцию при отсутствии клинических проявлений:
В направлении пациента с подозрением на урогенитальную хламидийную инфекцию на лабораторное исследование обязательно указываются:
* Примечание: в условиях Российской Федерации включения данных о национальности пациента нецелесообразно Безопасность персонала. Безопасность лабораторных работников при осуществлении лабораторной диагностики урогенитальной хламидийной инфекции обеспечивается соблюдением правил работы с потенциально инфекционным клиническим материалом (использование перчаток, ламинарного бокса, дезинфицирующих средств, УФ облучения и т.д.). Сбор и обработку клинического материала для выявления или выделения Chlamydia trachomatis проводят, соблюдая режим работы для бактериологических лабораторий. Необходимо исключать возможность загрязнения исследуемым материалом рук лабораторных работников, его попадания в глаза, нос, рот. |