Пособие для врачей Иркутск, 2011 удк
|
|
Скачать 498.11 Kb.
|
|
Капиллярный электрофорез Эффективность и разрешение метода Референсные значения Paragon cze 2000 |
|
^
В последнее время появился уникальный современный метод разделения белков сыворотки крови и мочи - метод капиллярного электрофореза. Метод не требует окраски пленок, менее трудоемкий, позволяющий проводить разделение белков в течение 15-30 минут. Капиллярный электрофорез, известный также как капиллярный зональный электрофорез (CZE), используется для разделения ионов по заряду. В случае обычного электрофореза заряженные молекулы перемещаются в проводящей жидкости под действием электрического поля. В 1960х годах была предложена методика капиллярного электрофореза для разделения молекул по заряду и размеру в тонком капилляре, заполненном электролитом. На рисунке 4 представлена схема внутренней организации капилляра. ^ Эффективность разделения в случае капиллярного электрофореза определяется уравнением:   Рис.4. Схема внутренней организации капилляра, заполненного силикагелем в присутствии буферного раствора где N это количество теоретических тарелок, μ это кажущаяся подвижность в среде разделения и Dm это коэффициент диффузии разделяемого вещества. В соответствии с этим уравнением эффективность разделения ограничивается только диффузией и является величиной, пропорциональной силе электрического поля. Эффективность разделения путем капиллярного электрофореза, как правило, значительно выше, чем эффективность других методов разделения, например, жидкостная хроматоргафия высокого давления (ЖХВД). В отличие от ЖХВД, в случае капиллярного электрофореза не происходит перенос масс между фазами. Профиль потока в случае систем электроосмотического потока является плоским, в отличие от ламинарного профиля хроматографических колонок, в которых разделение происходит под давлением. В результате этого при электроосмотическом разделении не происходит расширения полос, как при хроматографии. На рисунке 5 представлена общая схема проведения капиллярного электрофореза. В настоящее время на рынке России представлены как импортные, так и отечественные образцы анализаторов по типу капиллярного электрофореза. Но стоит отметить, что отечественный анализатор «Капель» достаточно редко встречается как аналитический прибор в отчетах медицинского плана (статьи, монографии). Спектр анализаторов капиллярного электрофореза, работающих в России на сегодняшний день пока не очень велик, но и их появление – это уже определенный прорыв в лабораторной диагностике (см. рисунок 6).  Рис.5. Система проведения капиллярного электрофореза  Рис.6. Доступные разновидности систем капиллярного электрофореза Система капиллярного электрофореза PARAGON CZE 2000 разработана специально для клинических лабораторий с большим объемом исследований и позволяет полностью автоматизировать проведение электрофореза белков сыворотки крови и идентификацию моноклональных фракций иммуноглобулинов (методом иммунофиксации по вычитанию). Именно такой анализатор используется для фракционирования и иммунофиксации белков в Иркутском областном диагностическом центре. Капиллярный электрофорез имеет целый ряд достоинств: - Высокая разрешающая способность; -Высокая производительность; -Автоматическая пробоподготовка; -Возможность работы с первичными пробирками; -Компьютерная обработка результатов; -Удобная форма представления результатов; -Набор реактивов для разделения белков сыворотки крови; -Набор реактивов для иммунофиксации; -Одновременно анализируется семь образцов сыворотки крови; -Загрузка образцов (в том числе в первичных пробирках) осуществляется с помощью 7-позиционных секторов; -Автоматическое разведение проб; -Для анализа используется всего несколько нанолитров образца; -Результаты анализа автоматически распечатываются после завершения очередного цикла работы; -Работа системы полностью контролируется компьютером; -Одновременно на борт прибора можно загрузить 70 образцов, которые будут разделяться на фракции со скоростью 42 анализа в час (SPE), и 10 образцов для иммунофиксации (IFE). Иммунофиксация проводится со скоростью 5 анализов в час. Использование такого прибора особенно эффективно при централизованных исследованиях. Экономия средств на контрольных пробах, высокое качество, скорость – это те основные компоненты, которые должны быть оценены клиницистами и руководителями ЛПУ. Для примера, можно сказать, что с такой скоростью проведения исследований даже один прибор полностью бы мог закрыть потребности всех ЛПУ Иркутской области. Система клинического капиллярного электрофореза PARAGON CZE-2000 — новое поколение оборудования, предназначенного для проведения клинического электрофореза белков крови. PARAGON CZE 2000 создан на основе новейшей технологии высокоэффективного разделения макромолекул в полом капилляре под воздействием высокого напряжения. Регистрация результатов разделения осуществляется через прозрачную область капилляра, расположенную непосредственно перед катодом. Современное программное обеспечение позволяет вносить в отчет данные о пациенте, просматривать и редактировать результаты, а также выполнять некоторые специальные функции, в том числе передавать данные в больничную компьютерную сеть. Система капиллярного электрофореза PARAGON CZE 2000 не требует калибровки. Контроль качества исследований с помощью контрольной сыворотки (нормальных и патологических значений) необходимо проводить ежедневно. ^ В таблице 1 представлены средние референсные значения для взрослого населения компанией разработчиком Системы капиллярного электрофореза "Beckman-Coulter", (США), в сравнение с электрофорезом в агарозном геле и с данными Независимой лаборатории «Инвитро» и ИДЦ. Разные данные, в ряде случаев, говорят о том, что результаты исследований методзависимы и для каждой КДЛ должны быть свои референсные значения. Таблица 1 Референсные значения белковых фракций крови для разных лабораторий и методов исследования
|
||||||||||||||||||||||||||||||||||||
Ваша оценка этого документа будет первой.
Ваша оценка:
Похожие:
База данных защищена авторским правом ©MedZnate 2000-2016
allo, dekanat, ansya, kenam
обратиться к администрации | правообладателям | пользователям
allo, dekanat, ansya, kenam
обратиться к администрации | правообладателям | пользователям