Пособие для врачей Иркутск, 2011 удк
|
|
Скачать 498.11 Kb.
|
|
^
• Белки обычно не встречаются в больших количествах в моче. Белки мочи условно разделяют на альбумины (менее 50 мг / дл) и глобулины. Электрофорез белков мочи может быть назначен, для определения причины появления белка в моче или в качестве скрининг - теста для измерения различных видов белков в моче. ^ • Почечная недостаточность • Снижение функции почек • Диабетическая нефропатия • Острое воспаление • Нефротический синдром • Острая инфекция мочевыводящих путей • Множественная миелома • Амилоидоз ^ В 1975 году была описана методика, позволяющая получать клеточные линии (гибридомы), секретирующие отдельные разновидности антител (моноклональные антитела) с желаемой антигенной специфичностью. Это открытие определило бурный прогресс в использовании антител как для исследовательских, так и для практических целей, и в настоящее время "гибридомная технология" является одним из основных направлений в биотехнологии. Гибридомы являются бессмертными клеточными клонами, продуцирующими антитела одной специфичности. Гибридомы получают при слиянии нормальных лимфоцитов, продуцирующих антитела, с подходящей опухолевой линией B- клеток. Затем гибридомы отбирают в культуральной среде, неспособной поддерживать рост родительских клеток. Путем последовательных разведений и пересевов получают одиночные клоны, которые можно выращивать в роллерных культурах или в форме асцита в брюшной полости мышей. В последнем случае удается получать особенно высокие титры моноклональных антител. При этом, естественно, все молекулы иммуноглобулинов, продуцируемые определенной гибридомой, идентичны: они относятся к одному классу и одному аллотипу, имеют одинаковые вариабельные области, структуру, идиотип, аффинность и специфичность к данному эпитопу. Парапротеины являются первыми описанными опухолевыми маркерами, т.е. отражают объем опухоли. Как и другие онкомаркеры парапротеины встречаются как при онкологических, так и патологических процессах, отражая нарушенное функционирование иммунной системы. Наблюдается увеличение встречаемости с возрастом; в бессимптомной популяции большинство случаев представлено гаммапатии неясного значения. Значение обнаружения парапротеинемии (ПП) в популяции приведено в таблице 3. Таблица 3 Встречаемость парапротеинемий в популяции
Парапротеин может быть выявлен в сыворотке крови с помощью электорофореза белков сыворотки, количественного определения основных классов иммуноглобулинов сыворотки, а также с помощью метода иммунофиксации. Несомненным преимуществом выполняемого метода является проведение одновременного анализа сыворотки и мочи. Особую важность в дифференциальной диагностике злокачественных и доброкачественных состояний является обнаружение фрагментов иммуноглобулинов, которые секретируются злокачественными клетками. Фрагменты иммуноглобулинов (легкие цепи) могут быть обнаружены в моче благодаря концентрирующему эффекту, но обычно не определяются при электрофорезе белков сыворотки. Таким фрагментом иммуноглобулина является белок Бенс-Джонса (ББД), представляющий агрегаты легких цепей иммуноглобулинов. При доброкачественных парапротеинемиях ББД в моче не обнаруживается, что позволяет использовать его выявление в качестве основного метода скрининга миеломы. В таблице 4 представлены данные о верификации ПП в зависимости от концентрации Ig сыворотки и их место среди всех ПП. Таблица 4 Спектр ПП в зависимости от концентрации Ig сыворотки крови
В Приложении представлены примеры интерпретации данных исследования сыворотки крови нескольких пациентов, проведенного на приборе “ PARAGON CZE 2000” фирмы “ Beckman Coulter ” методом капиллярного электрофореза. Заключение Электрофоретические методы в клинической лабораторной диагностике имеют хорошую перспективу. В целом использование современных электрофоретических анализаторов позволяет с высокой точностью и минимальными затратами исследовать широчайший спектр биохимических параметров с целью уточнения диагноза, мониторинга патологического процесса и обоснования методов терапии заболеваний. На сегодняшний день капиллярный электрофорез является одним из наиболее перспективных методов анализа, он динамично развивается и получает всё более широкое применение в различных областях аналитической химии. Простота и доступность этого метода, а также неоспоримые преимущества, которые он даёт при выполнении измерений, позволяют надеяться на динамичное развитие методического обеспечения и скорейшее включение капиллярного электрофореза в перечень физико-химических методов анализа, наиболее часто применяемых в повседневной лабораторной практике. ПРИЛОЖЕНИЕ^  Рис. 10. Электрофорез белков сыворотки крови в пределах нормы  Рис. 11. Гипоальбуминемия. Гиперальфа-2- глобулинемия. Ds: Гломерулонефрит.  Рис. 12. Выраженная диспротеинемия, сопровождающаяся поликлональной гаммапатией и снижением фракций альбумина, альфа и бета глобулинов. Ds: Цирроз печени.  Рис.13. Гипоальбуминемия. Гиперальфа-2-глобулинемия. Ds: ХПН  Рис.14. Резко выраженная гипоальбуминемия. Гиперальфа-2- глобулинемия. Гипо-бета и гамма-глобулинемия. Ds: Гломерулонефрит. Иммунодефицитное состояние.  Рис.15. Гипоальбуминемия. Гиперальфа-1 и альфа-2 глобулинемия. Ds: Острая крупозная пневмония.  Рис. 16. Выраженная диспротеинемия. Гипоальбуминемия. Гаммапатия. Увеличение фракции бета-глобулинов за счет зоны компонента- комплемента. Ds: Вирусный гепатит «C», цирроз печени, асцит.  Рис. 17. На электрофореграмме белков сыворотки крови отмечается увеличение зоны компонента-комплемента во фракции бета- глобулинов. Характерно формирование мостика между бета и гамма зонами. Гипергамма-глобулинемия. Ds: Хр. Панкреатит.  Рис.18. На электрофореграмме белков сыворотки крови отмечается увеличение зоны трансферрина во фракции бета-глобулинов. Характерно для железодефицитных состояний.  9Рис. 19. На электрофореграмме белков сыворотки крови отмечается увеличение зоны компонента-комплемента во фракции бета-глобулинов, сопровождающее состояние реактивности организма при острых и хронических заболеваниях.  Рис. 20. На электрофореграмме белков сыворотки крови в зоне гамма- глобулинов выявляется маловыраженная моноклональная фракция, составляющая 3,4%( 2,86 г/л) от всех белков сыворотки крови. Для ее идентификации рекомендуется проведение иммунофиксации. Ds: Синдром ускоренного СОЭ.  Рис.21. На электрофореграмме белков сыворотки крови в зоне гамма- глобулинов выявляется моноклональная фракция (М-градиент), составляющая 9,1%( 7,47 г/л) от суммы всех белков сыворотки крови. Необходимо идентифицировать состав М-градиента, для чего предлагается иммунофиксация (см. рисунок 22). В случае сомнений в идентификации белковых фракций в областях бета и гамма можно провести дополнительные исследования по выявлению этих белков другими методами, например, с помощью иммунонефелометрии или иммунохемилюминесценции. В этом случае исследования будут оправданы, так как будут проводиться уже прицельно.  Kappa Ig М    Рис.22. Иммунофиксация: Выявленная в зоне гамма глобулинов моноклональная фракция, идентифицирована как Ig М тип kappa. Предварительный Ds (без иммунофиксации): Ревматоидный артрит. Остеопороз. Заключительный Ds: Миеломная болезнь  Рис.23. На электрофореграмме белков сыворотки крови в зоне гамма- глобулинов выявляется выраженная моноклональная фракция (М- градиент), составляющая 45,7%(53,1г/л) от суммы всех белков сыворотки крови. На рисунке 24 представлена идентификация М-градиента для постановки более точного диагноза.  ^ Рис.24. Иммунофиксация: Выявленная в зоне гамма глобулинов моноклональная фракция, идентифицирована как IgG kappa тип. Ds: Множественная миелома  Рис.25. На электрофореграмме белков сыворотки крови в зоне гамма- глобулинов выявляется выраженная моноклональная фракция (М- градиент), составляющая 57,3%(63,04 г/л) от суммы всех белков сыворотки крови. Методом иммунофиксации на рисунке 26 выявлен тип моноклональной фракции.  Lambda IgG Рис.26. Иммунофиксация : Выявленная в зоне гамма глобулинов моноклональная фракция, идентифицирована как Ig G lambda тип. Ds: Множественная миелома  Рис.27. На электрофореграмме белков сыворотки крови в зоне гамма- глобулинов выявляется выраженная моноклональная фракция (М- градиент), составляющая 74,2%(124,г/л)от всех белков сыворотки крови. Рекомендуется проведение иммунофиксации сыворотки крови (см. риунок 28).  ^ Рис.28. Иммунофиксация крови: Выявленная в зоне гамма глобулинов моноклональная фракция, идентифицирована как Ig G lambda тип. На электрофореграмме белков мочи этого же пациента в зоне гамма-глобулинов выявляется моноклональная фракция (BJ), составляющая 24,6%(0,07г/л) от суммы всех белков мочи.  Рис.29. Общий белок мочи-0.29 г/л. Неселективная протеинурия. Для идентификации моноклональной фракции рекомендуется проведение иммунофиксации мочи. Электрофорез мочи  Рис.30. Электрофорез мочи: Общий белок-0,02г/л. Белок мочи в пределах физиологической нормы.  Рис.31. Общий белок мочи-0,79г/л. На электрофореграмме белков мочи неселективная протеинурия. В зоне гамма-глобулинов выявляется моноклональная фракция (белок BJ), составляющая 47,1% (0,37г/л) от суммы всех белков мочи. Коментарий: Рекомендуется проведение иммунофиксации мочи для идентификации моноклональной фракции.  Рис.32. Общий белок мочи - 2,36 г/л. Неселективная протеинурия. Выраженная альбуминурия. В зоне гамма-глобулинов выявляется моноклональная фракция (BJ), составляющая 5,6%(0,13г/л) от суммы всех белков мочи. Рекомендуется проведение иммунофиксации мочи.  ^ Рис.33. Иммунофиксация мочи: Выявляется парапротеинурия IgG lambda тип. Ds: Множественная миелома  ^ Рис. 34. Иммунофиксация мочи: Выявленная моноклональная фракция в зоне гамма-глобулинов идентифицирована как IgA lambda тип. Ds: Множественная миелома. ^ 1.Принцип электрофоретического разделения белков; 2. Фракционный состав типичной протеинограммы; 3. Основная цель электрофореза с иммунофиксацией; 4. Характеристика протеинограмм при парапротеинемиях различного типа; (по Приложению) 5. Современные направления технологий электрофореза. Литература
|
||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
Ваша оценка этого документа будет первой.
Ваша оценка:
Похожие:
База данных защищена авторским правом ©MedZnate 2000-2016
allo, dekanat, ansya, kenam
обратиться к администрации | правообладателям | пользователям
allo, dekanat, ansya, kenam
обратиться к администрации | правообладателям | пользователям